Фсз 2009 04982 тест система на сепсис

Презентация на тему: " Значение современной иммунодиагностической тест-системы ЕАА (анализ активности эндотоксина) в оценке комплексной интенсивной терапии инфекционно-септических." — Транскрипт:

1 Значение современной иммунодиагностической тест-системы ЕАА (анализ активности эндотоксина) в оценке комплексной интенсивной терапии инфекционно-септических осложнений у кардиохирургических больных. М.Г. Плющ, М.Б. Ярустовский, М.В. Абрамян, О.О. Подщеколдина, З.В. Попок, Б.С. Мамазакирова, Д.А. Попов Научный центр сердечно-сосудистой хирургии им. А.Н. Бакулева РАМН

2 РОЛЬ ЭНДОТОКСИНА В ПАТОГЕНЕЗЕ СЕПСИСА G.Guadagni et al. Critical Care Neph. Ch.284:

3 Эндотоксин описан в 1892 Ричардом Пфайфером. Липидная часть А эндотоксина всех видов грамотрицательных бактерий является мишенью при анализе активности эндотоксина.

6 ия Определения уровня эндотоксина в плазме крови проводили при помощи гель-тромб теста ( вариант методики в Техническом Бюллетене BioWhittaker (Cambrex) 12) Принцип метода: эндотоксин Профермент Коагулаза фермент Коалулоген Коагулин В основе лежит реакция взаимодействия эндотоксина и лизата амебоцитов Limulus, полученного из амебоцитов мечехвоста рода Limulus. В ходе реакции эндотоксин вызывает помутнение лизата и образование геля. Концентрация эндотоксина измеряется в единицах эндотоксина на 1 мл (ЕДэ/мл)

7 ЕАА – определение уровня активности эндотоксина ЕАА - представляет собой экспресс-анализ цельной крови, позволяющий диагностировать наличие LPS в крови при грамотрицательной бактериальной инфекции, а также прогнозировать риск возникновения тяжелого сепсиса. ЕАА является единственным количественным лабораторным тестом утвержденным Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США (FDA). В России тест-система зарегистрирована 18 августа 2009 года (ФСЗ 2009/04982).

8 ПРИНЦИП МЕТОДА ЛЮМИНОЛЬНОЙ ХЕМОЛЮМИНИСЦЕНЦИИ Принцип метода: Присутствующий в крови эндотоксин распознается и связывается антиэндотоксиновыми антителами (иммуноглобулины М), после чего доставляется к нейтрофилам через комплементные рецепторы. В присутствии зимозана нейтрофилы подвергаются респираторному взрыву, который сопровождается излучением света. Количество испускаемого света, определяемого на хемолюминометре пропорционально количеству эндотоксина.

9 Определение активности эндотоксина (EAA) методом хемолюминисценции

10 Интерпретация результатов EAA 0,60 – характеризует высокий уровень концентрации эндотоксина в крови и предс- тавляет высокий риск развития тяжелого сепсиса 0,60 – характеризует высокий уровень концентрации эндотоксина в крови и предс- тавляет высокий риск развития тяжелого сепсиса">

11 Зависимость уровня активности эндотоксина (EAA) от концентрации LPS John Marshall et al., Journal Infect. Dis., 2004, 190, 527 Пограничная зона высокий EAA низкий EAA

12 Зависимость между уровнем активности эндотоксина и тяжестью состояния пациентов (Ya.Kakihara, анализ одноцентрового исследования, 2007) Контроль (Пациенты без SIRS и инф.) 0.18±0.09 n=12 SIRS Пациенты без инфекции 0.33±0.19 n=17 Сепсис 0.39±0.16 n=14 Тяжелый сепсис 0.65±0.25 n=32 СШСШ 0.78±0.34 n=16 P

13 Уровень активности эндотоксина- как предиктор летальности Klein D, Monti G, Bottiroli S et al. Crit Care Med dec. 2009

14 Характеристика больных Обследованы 48 взрослых пациентов с инфекционно- септическими осложнениями после операций на сердце. Средний возраст 55,5 (51-61,5) лет. 36 больным выполнена хирургическая коррекция клапанной патологии 7 больным произведено шунтирование коронарных артерий 3 пациентам выполнено хирургическое лечение гипертрофической кардиомиопатии 2 больным проведена ортотопическая трансплантация сердца

15 Определение активности эндотоксина (ЕАА) (Spectral Diagnostics Inc, Canada) LAL-тест (BioWhittakker, Сambrex, USA) Прокальцитонин ( PCT B.R.A.H.M.S., Germany) Бактериологическое исследование Количество лейкоцитов Количество тромбоцитов Лабораторные исследования

16 48 пациентов 1 группа n=3 ЕАА0,6 71%

17 Дизайн исследования Одноцентровое, проспективное исследование 34 пациентам, которые имели повышенные уровни EAA ( 0,6) и были в стабильном клиническом состоянии в комплекс интенсивной терапии включена LPS-сорбция, проводимая с использованием селективных сорбентов - применялись сорбционные колонки Toraymyxin – PMX-F (Toray, Japan). Проводились 2 стандартные процедуры LPS-сорбции для каждого пациента. Мониторинг лабораторных тестов: до первой процедуры, в течение 24 часов после нее и через 24 часа после второй процедуры

19 48 пациентов 1 группа n=3 ЕАА0,6 71% Без LPS –сорбции 17,6% n=6 ЕАА-0,79 LAL-0,72 Выживаемость 33% LPS-сорбция- 82,4% n=28 ЕАА-0,76 LAL-1,44 Выживаемость 57%

20 Динамика клинических и лабораторных показателей до и после LPS-сорбции (n=34) Показатель До LPS-сорбцииПосле 2 процедуры LPS-сорбции р ЕАА 0.73 ( )0.58 (

21 Зависимость между уровнем ЕАА и 28-дневной выживаемостью Выживаемость, %

22 ЗАКЛЮЧЕНИЕ ЕАА является ранним предиктором развития тяжелых инфекционно-септических осложнений. ЕАА быстрый (30 мин), информативный, надежный экспресс- тест количественного анализа. ЕАА позволяет на ранних сроках определить показания к проведению патогенетической интенсивной терапии. ЕАА способствует оценке эффективности терапии. ЕАА –прогностически значимый маркер при комплексной интенсивной терапии инфекционно-септических осложнений после кардиохирургических вмешательств.

Регистрационное удостоверение № ФСЗ 2009/05727.

При малейшем подозрении на инфекции быстрота, высокая чувствительность и специфичность экспресс-тестов позволяет получить быстрый ответ и принять срочные меры. Тесты основаны на иммунохроматографической идентификации антител, вырабатываемых в ответ на присутствие возбудителя или на непосредственном определении антигенов бактерий и вирусов.

VEDALAB, Франция

Регистрационное удостоверение № ФСЗ 2009/05725.

Наименование

Характеристика

Упаковка, кол-во тестов

Аденовирус тест
(Adenovirus Test
(Adeno-Check-1))29071*

Экспресс-тест для качественного определения антигена аденовируса в фекалиях. 100% корреляция результатов с MERIDIAN ИФА тестом. Время анализа 15 мин

Инструкция

Болезнь Лайма IgG-антитела тест
(Lyme IgG Test
(Lyme IgG-Check-1))71051

Экспресс-тест для качественного определения IgG антител к клещевому боррелиозу в сыворотке, плазме или цельной крови. Чувствительность 81%. Специфичность 91%. Время анализа 10–15 мин

Инструкция

Болезнь Лайма IgM-антитела тест
(Lyme IgM Test
(Lyme IgM-Check-1))70051

Экспресс-тест для качественного определения IgМ антител к клещевому боррелиозу в сыворотке, плазме или цельной крови. Чувствительность 91%. Специфичность 81%. Время анализа 10–15 мин

Инструкция

Болезнь Лайма IgG + IgM-антитела двойной тест
(Duo Lyme IgG + IgM Test
(Duo Lyme IgG + IgM-Check-1))71041

Двойной экспресс-тест для одновременного качественного определения IgG и IgМ антител к клещевому боррелиозу одновременно в сыворотке, плазме или цельной крови. Чувствительность и специфичность соответствуют индивидуальным тестам. Время анализа 10–15 мин

Инструкция

Грипп А тест
(Influenza A Test
(Influenza A-Check-1))49001

Экспресс-тест для качественного определения вируса гриппа А в носоглоточных выделениях. Чувствительность 100 нг/мл для штамма A/Taiwan/1/86/H1N1 и 25 нг/мл для штамма A/Panama/2007/99/H3N2. Специфичность 100%. Время анализа 15 мин

Инструкция

Грипп В тест
(Influenza B Test
(Influenza B-Check-1))49101

Экспресс-тест для качественного определения вируса гриппа В в носоглоточных выделениях. Чувствительность 25 нг/мл для штамма B/Hong Kong 5/72, 50 нг/мл для штамма B/Qingdao/102/91, 500 нг/мл для штамма B/Victiria/504/00 и 25 нг/мл для штамма B/Tokio/53/99. Специфичность 100%. Время анализа 15 мин

Инструкция

Грипп А + В двойной тест
(Duo Influenza A + B Test
(Duo Influenza A+B-Check-1))49041

Двойной экспресс-тест для качественного одновременного определения вирусов гриппа А и гриппа В в носоглоточных выделениях. Чувствительность и специфичность соответствуют индивидуальным тестам. Время анализа 15 мин

Инструкция

Инфекционный мононуклеоз тест
(Infectious Mononucleosis Test
(IM-Check-1))16071*

Экспресс-тест для качественного определения гетерофильных антител (IgМ) при ИМ в сыворотке, плазме и цельной крови. Чувствительность 12,5 Ед/мл, или 88,2%, и специфичность 75,7%. Время анализа 5–10 мин

Инструкция

Малярия тест
(Malaria Test
(P.F.-Check-1))35071*

Экспресс-тест для качественного определения белка HRP-II P. falciparum в лизированных эритроцитах цельной крови. Чувствительность 89,5%. Специфичность 93%. Время анализа 15 мин

Инструкция

Ротавирус тест
(Rotavirus Test
(Rota-Check-1))30071*

Экспресс-тест для качественного определения антигена ротавируса
в фекалиях. 100% чувствительность и специфичность. Время анализа 10 мин

Инструкция

Ротавирус / Аденовирус двойной тест
(Duo Rota / Adenovirus Test
(Duo Rota-Adenovirus-Check-1))30041

Двойной экспресс-тест для одновременного качественного опреде-
ления антигенов ротавируса и аденовируса в фекалиях. Чувстви-
тельность и специфичность соответствуют индивидуальным тестам. Время анализа 10 мин

Инструкция

РСВ тест
(RSV Test
(RSV-Check-1))31071*

Экспресс-тест для качественного определения антигена респираторного синцитиального вируса в назофарингиальных аспиратах или мазках. Чувствительность 85,7%, специфичность 91,6% по отношению к иммунофлюоресцентному методу. Время анализа 10 мин

Инструкция

Столбнячный тест
(Tetanus Test
(Tetanus-Check-1))92071*

Экспресс-тест для качественного определения антистолбнячных
антител в пробах сыворотки, плазмы или цельной крови. Пороговая чувствительность 0,1 МЕ/мл. Специфичность 100%. Время анализа 10–15 мин. Тест для оценки необходимости вакцинации

Инструкция

Стрептококк А тест
(Strep A Test
(Strep A-Check-1))6071*

Экспресс-тест для качественного определения антигенов стрептококка А в мазках из зева. Чувствительность 91,80%, специфичность 97,70% от культурального метода. Время анализа 5–10 мин

Инструкция

Стрептококк В тест
(Strep B Test
(Strep B-Check-1))7071*

Экспресс-тест для качественного определения антигенов стрептококка В в вагинальных мазках. Чувствительность 88,4%, специфичность 97,9% от культурального метода. Время анализа 5–10 мин

Инструкция

Токсин А тест
(Toxin A Test
(Toxin A-Check-1))32071*

Экспресс-тест для качественного определения токсина А Clostridium difficile в фекалиях. Чувствительность 4 нг/мл (86,7%), специ-
фичность 91,7% по отношению к цитотоксическому методу. Время анализа 15 мин

Инструкция

Токсин В тест
(Toxin B Test
(Toxin B-Check-1))37001

Экспресс-тест для качественного определения токсина В Clostridium difficile в фекалиях. Чувствительность 5 нг/мл. Специфичность 100%. Время анализа 15 мин

Инструкция

Токсин А + В двойной тест
(Duo Toxin A + B Test
(Duo Toxin A+B-Check-1))32041

Двойной экспресс-тест для одновременного качественного определения токсинов А и В Clostridium difficile в фекалиях. Чувствительность и специфичность соответствуют индивидуальным тестам. Время анализа 15 мин

Инструкция

Туберкулез тест
(Tuberculosis Test
(TB-Check-1))22071*

Экспресс-тест для качественного определения антител (IgG, IgA, IgM) к Mycobacterium tuberculosis в сыворотке, плазме и цельной крови. Чувствительность 350 МЕ/мл (IgG, IgA). Время анализа 10–15 мин. Тест заменяет реакцию Манту

Инструкция

Хеликобактер пилори тест
(Helicobacter Pylori Test
(H.Pylori-Check-1))17071*

Экспресс-тест для качественного определения IgG против белков H.Pylori в сыворотке, плазме и цельной крови. Чувствительность 10–
15 АЕ/мл. Специфичность 89,7% от Вестерн-блоттинга и 83% от культурального высева. Время анализа 10–15 мин

VEDALAB, Франция

Регистрационное удостоверение № ФСЗ 2009/05844.

Наименование

Характеристика

Упаковка, кол-во тестов

Сифилис тест
(Syphilis Test
(Syph-Check-1))26071*

Экспресс-тест для качественного определения антител (IgG, IgA, IgM) к Treponema pallidum в сыворотке, плазме и цельной крови. 100% чувствительность и специфичность по сравнению с RPR, TPI и FTA-ABS тестами. Время анализа 10–15 мин

Инструкция

Хламидия тест
(Chlamydia Test
(Chlamy-Check-1))1071*

Экспресс-тест для качественного определения липополисахаридного антигена Chlamidia trachomatis в мазках из цервикального канала у
женщин и мазках из уретры у мужчин. Чувствительность теста 93%
(30 IFU/мл), специфичность 99,7% от культурального высева. Чувствительность к 15 сероварам инфекции. Время анализа 10–15 мин

КОНТРОЛЬНЫЕ МАТЕРИАЛЫ

Регистрационное удостоверение № ФСЗ 2009/05844.

Наименование

Характеристика

Упаковка, кол-во тестов

Хламидия
положительный контроль (CHL Positive Control)V010B

Стабилизированный буферный раствор, содержащий неинфекционные компоненты, полученные in vitro из культур клеток L-2 штамма Chlamydiae trachomatis человеческого происхождения, 0,5 мл. Предназначен для контроля качества экспресс-тестов на хламидиоз. Соот-
ветствует средне- и высокоположительным образцам.

1 флакон

VEDALAB, Франция

Регистрационное удостоверение № ФСЗ 2009/05727.

Кат. № 72051

Экспресс-тест для качественного определения D-Димера сыворотке, плазме или цельной крови. Чувствительность 400 нг/мл ФЭЕ. Время аннализа 10–15 мин.

20 шт/уп

Регистрационное удостоверение № ФСЗ 2009/05727.

Кат. № 25001

Экспресс-тест иммунохроматографический для качественного определения ферритина в сыворотке, плазме или цельной крови. Пороговая чувствительность 20 нг/мл. Специфичность 100%. Время анализа 10–15 мин.

20 шт/уп

Регистрационное удостоверение № ФСЗ 2009/05727.

Инструкция

«Пролактин тест

Кат. № 9001

Экспресс-тест для качественного определения пролактина в сыворотке или плазме крови. Чувствительность 37 нг/мл. Специфичность 100%. Время анализа 5 мин.

20 шт/уп

Кат. № 11001

Экспресс-тест для качественного определения ФСГ в моче для диагностики менопаузы. Чувствительность 25 мМЕ/мл. Специфичность 100%. Время анализа 10 мин.

20 шт/уп

Диагностика общего IgE используется при дифференциальной диагностике астмы (аллергическая или атопическая), ринитах, экземе, паразитарных инфекциях, некоторых видах дерматитов. К другим заболеваниям, при которых обнаруживается повышенный уровень IgE в сыворотке, относятся паразитарные инфекции, бронхопульмонарный аспергиллез и некоторые дерматиты. У здоровых людей IgE регистрируется в нанограммовых количествах.

Регистрационное удостоверение № ФСЗ 2009/05727.

Кат. № 18001

Экспресс-тест иммунохроматографический для качественного определения IgE в сыворотке крови. Чувствительность 150 МЕ/мл. Специфичность 100%. Время анализа 5–10 мин.

20 шт/уп

В Российской Федерации экспресс-определение тропонинов и миоглобина в крови с помощью ИХА-тестов предусмотрено стандартом медицинской помощи больным острым инфарктом миокарда (ОИМ)*.

Совокупность данных экспресс-анализа независимо от субъективных ощущений пациента позволяет подтвердить или исключить развитие ОИМ и избежать тяжелых осложнений из-за несвоевременно начатого или неправильного лечения. Актуальность проблемы ранней и точной диагностики острой ишемической болезни, включая и ОИМ, очевидна для каждого врача. Она усугублялась тем, что до самого последнего времени ни один из известных методов не гарантировал надежной диагностики. Так, например, до 25% всех ОИМ не вызывают никаких изменений на ЭКГ, от 20% до 30% всех случаев ОИМ протекают без болевого приступа, особенно у пожилых, а также больных диабетом и гипертонической болезнью.

Регистрационное удостоверение № ФСЗ 2009/05727.

Кат. № 28051

Экспресс-тест для качественного определения тропонина I в сыворотке, плазме и цельной крови. Чувствительность 0,4 нг/мл. Специфичность 100%. Время анализа 15–20 мин.

20 шт/уп

Кат. № 28001

Экспресс-тест для качественного определения тропонина I в сыворотке и плазме крови. Чувствительность 1 нг/мл. Специфичность 100%. Время анализа 15–20 мин.

20 шт/уп

Кат. № 15001

Экспресс-тест для качественного определения миоглобина в сыворотке, плазме и цельной крови. Чувствительность 100 нг/мл. Специфичность 100%. Время анализа 5–10 мин.

20 шт/уп

Кат. № 15041B

Экспресс-тест для качественного определения тропонина I и миоглобина в сыворотке, плазме и цельной крови. Чувствительность и специфичность соответствуют тестам на один параметр. Время анализа 15–20 мин.

20 шт/уп

Кат. № 14001

Экспресс-тест для качественного определения МВ-изофермента креатинкиназы в сыворотке и плазме крови Чувствительность 7 нг/мл. Время анализа 15–20 мин.

20 шт/уп

Кат. № HS34051

Полуколичественный скрининговый экспресс-тест для определения СРБ в сыворотке, плазме или цельной крови. Чувствительность до 1, 1–3, свыше 3 мг/л. Специфичность 100%. Клиническая специфичность 95%. Время анализа 10 мин.

20 шт/уп

Результаты теста – полуколичественные. При визуально более яркой линии в тестовой зоне “В” результат отрицательный, концентрация альбумина в моче менее 10 мкг/мл.

При одинаковой окраске линий в тестовой (“В”) и контрольной (“С”) зонах – пограничный, концентрация альбумина в моче 10–20 мкг/мл.

При визуально более яркой линии в контрольной зоне “С” результат положительный, концентрация альбумина в моче более 20 мкг/мл.

Регистрационное удостоверение № ФСЗ 2009/05727.

Кат. № 27001

Экспресс-тест иммунохроматографический для полуколичественного определения низких концентраций альбумина в моче. Чувствительность: до 10, 10–20, свыше 20 мкг/мл . Время анализа 5–10 мин.

20 шт/уп

В настоящее время на первое место в развитых странах вышла смертность от сердечно-сосудистых и онкологических заболеваний, количество которых неуклонно растет, затрагивая более молодые слои населения. В период с 1991 по 1999 гг. только частота встречаемости онкологических заболеваний репродуктивных органов выросла более чем в 2 раза.

Онкомаркеры – соединения, которые практически не встречаются в здоровых тканях, но характерны для злокачественных опухолей. Их присутствие в сыворотке крови в концентрациях, превышающих пороговые значения, является одним из важных диагностических признаков развития опухоли. Хотя на сегодняшний день не выявлено ни одного онкомаркера, имеющего 100% специфичность и чувствительность, они являются основой диагностических тестов для раннего скрининга некоторых видов раковых заболеваний.

Иммунохроматографические экспресс-тесты позволяют выявлять ряд наиболее распространенных онкологических заболеваний, как при первичном обследовании, так и при массовых профилактических осмотрах.

Регистрационное удостоверение № ФСЗ 2009/05726.

Наименование

Характеристика

Упаковка, кол-во тестов

АФП тест
(AFP Test
(AFP-Check-1))23001

Экспресс-тест для качественного определения альфафетопротеина в сыворотке, плазме или цельной крови. Чувствительность 10 нг/мл. Время анализа 10 мин

Инструкция

CA-125 тест
(CA-125 Test
(CA-125-Check-1))74051

Экспресс-тест для качественного определения ракового антигена 125 (опу-
холи яичников и отличие злокачественных тазовых отухолей от доброка-
чественных) в сыворотке, плазме или цельной крови. Чувствительность 35 ед./мл (100%). Специфичность 90%. Время анализа 15 мин

Инструкция

Гемоглобин тест-1
(Hemoglobin Test-1
(HEM-Check-1))4071В

Экспресс-тест для качественного определения присутствия скрытой крови в фекалиях. Чувствительность от 40 мкг/г до 120 мг/г фекалий. Время анали-
за 10 мин

Инструкция

Гемоглобин тест-2
(Hemoglobin Test-2
(HEM-Check-2))4071

Экспресс-тест для качественного определения присутствия скрытой крови в фекалиях. Чувствительность от 40 мкг/г до 120 мг/г фекалий. Со шприцем для сбора проб. Время анализа 10 мин

Инструкция

РЭА тест
(CEA Test
(CEA-Check-1))45051

Экспресс-тест для качественного определения ракового эмбрионального антигена в сыворотке, плазме или цельной крови. Чувствительность 5 нг/мл. Специфичность 62,5%. Время анализа 10 мин

Инструкция

Ферритин низкочувствительный тест
(LS Ferritin Test
(LS-FRT-Check-1))LS25051

Экспресс-тест для полуколичественного определения высокой концентрации ферритина в сыворотке, плазме или цельной крови. Чувствительность ниже 150 нг/мл, 150–250 нг/мл, выше 250 нг/мл. Специфичность 100%. Время анализа 10–15 мин

VEDALAB, Франция

Регистрационное удостоверение № ФСЗ 2009/05843.

Наименование

Характеристика

Упаковка, кол-во тестов

ПСА тест
(PSA Test
(PSA-Check-1))8051

Экспресс-тест для качественного определения простатоспецифического антигена в сыворотке, плазме и цельной крови. Чувствительность 4 нг/мл. Время анализа 5–10 мин

VEDALAB, Франция

ИММУНОХРОМАТОГРАФИЧЕСКИЕ ЭКСПРЕСС-ТЕСТЫ ДЛЯ БЫСТРЫХ РЕШЕНИЙ В НЕОТЛОЖНЫХ СЛУЧАЯХ

Предназначение. Необходимость быстрого принятия клинических решений в неотложных случаях привела к насущной необходимости разработки экспресс-тестов. Иммунохроматографические тесты – это не альтернатива другим методам диагностики, их задача – предварять количественные анализы и указывать на необходимость их проведения, если результат экспресс-теста положительный.

Специфичность и чувствительность. Экспресс-тесты обладают высокой специфичностью, до 90–100% (в зависимости от теста), а их чувствительность очень высока – до 96–98%.

Международное качество. Фирма VEDALAB работает в области иммунологической клинической экспресс-диагностики с 1991 года. Благодаря применению самых высокотехнологичных подходов она быстро завоевала широкое международное признание и лидирующие позиции в области экспресс-диагностики. Свидетельство тому – многочисленные международные сертификаты качества продукции.

Регистрация в России. Продукция фирмы зарегистрирована в Федеральной Службе по надзору в сфере здравоохранения и социального развития РФ.

Нанесение образца

Слайды и текст этой презентации

Значение современной иммунодиагностической тест-системы ЕАА (анализ активности эндотоксина) в оценке комплексной интенсивной терапии инфекционно-септических осложнений у кардиохирургических больных.

М.Г. Плющ, М.Б. Ярустовский, М.В. Абрамян, О.О. Подщеколдина,
З.В. Попок, Б.С. Мамазакирова, Д.А. Попов

Научный центр сердечно-сосудистой хирургии им. А.Н. Бакулева РАМН

РОЛЬ ЭНДОТОКСИНА В ПАТОГЕНЕЗЕ СЕПСИСА G.Guadagni et al. Critical Care Neph. Ch.284: 1557-560

Эндотоксин описан в 1892 Ричардом Пфайфером. Липидная часть А эндотоксина всех видов грамотрицательных бактерий является мишенью при анализе активности эндотоксина.

Метод А. Качественный гель-тромб тест.

Метод В. Количественный гель-тромб тест.
Точность определения содержания эндотоксина этим методом не очень высокая. Поэтому в Европейской фармакопее метод называется полуколичественным анализом. Несмотря на это, количественный гель-тромб тест достаточно широко используется в научно-исследовательских работах.

Метод С. Кинетический турбидиметрический тест.

Метод D. Кинетический хромогенный тест.

Метод Е. Хромогенный тест по конечной точке.

Метод F. Турбидиметрический тест по конечной точке.

Модификации методов LAL-теста

Определения уровня эндотоксина в плазме крови проводили при помощи гель-тромб теста
(вариант методики в Техническом Бюллетене BioWhittaker (Cambrex) №12)
Принцип метода:
эндотоксин
Профермент Коагулаза

В основе лежит реакция взаимодействия эндотоксина и лизата амебоцитов Limulus, полученного из амебоцитов мечехвоста рода Limulus. В ходе реакции эндотоксин вызывает помутнение лизата и образование геля. Концентрация эндотоксина измеряется в единицах эндотоксина на 1 мл (ЕДэ/мл)

ЕАА – определение уровня активности эндотоксина

ЕАА - представляет собой экспресс-анализ цельной крови, позволяющий диагностировать наличие LPS в крови при грамотрицательной бактериальной инфекции, а также прогнозировать риск возникновения тяжелого сепсиса.

ЕАА является единственным количественным лабораторным тестом утвержденным Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США (FDA).

В России тест-система зарегистрирована 18 августа 2009 года
(№ФСЗ 2009/04982).

ПРИНЦИП МЕТОДА ЛЮМИНОЛЬНОЙ ХЕМОЛЮМИНИСЦЕНЦИИ

Принцип метода: Присутствующий в крови эндотоксин распознается и связывается антиэндотоксиновыми антителами (иммуноглобулины М), после чего доставляется к нейтрофилам через комплементные рецепторы. В присутствии зимозана нейтрофилы подвергаются респираторному взрыву, который сопровождается излучением света. Количество испускаемого света, определяемого на хемолюминометре пропорционально количеству эндотоксина.

Определение активности эндотоксина (EAA™) методом хемолюминисценции

EAA 0,60 – характеризует высокий уровень концентрации эндотоксина в крови и предс-тавляет высокий риск развития тяжелого сепсиса

Зависимость уровня активности эндотоксина (EAA) от концентрации LPS John Marshall et al., Journal Infect. Dis., 2004, 190, 527

Зависимость между уровнем активности эндотоксина и
тяжестью состояния пациентов
(Ya.Kakihara, анализ одноцентрового исследования, 2007)

Уровень активности эндотоксина- как предиктор летальности

Klein D, Monti G, Bottiroli S et al. Crit Care Med dec. 2009

Обследованы 48 взрослых пациентов с инфекционно-септическими осложнениями после операций на сердце. Средний возраст 55,5 (51-61,5) лет.

36 больным выполнена хирургическая коррекция клапанной патологии
7 больным произведено шунтирование коронарных артерий
3 пациентам выполнено хирургическое лечение гипертрофической кардиомиопатии
2 больным проведена ортотопическая трансплантация сердца

Определение активности эндотоксина (ЕАА) (Spectral Diagnostics Inc, Canada)
LAL-тест (BioWhittakker,Сambrex, USA)
Прокальцитонин (PCT B.R.A.H.M.S., Germany)
Бактериологическое исследование
Количество лейкоцитов
Количество тромбоцитов

Одноцентровое, проспективное исследование

34 пациентам, которые имели повышенные уровни EAA (≥ 0,6) и были в стабильном клиническом состоянии в комплекс интенсивной терапии включена LPS-сорбция, проводимая с использованием селективных сорбентов -применялись сорбционные колонки Toraymyxin – PMX-F (Toray, Japan).
Проводились 2 стандартные процедуры LPS-сорбции для каждого пациента.

Мониторинг лабораторных тестов: до первой процедуры, в течение 24 часов после нее и через 24 часа после второй процедуры

Динамика клинических и лабораторных показателей до и после LPS-сорбции (n=34)

Зависимость между уровнем ЕАА и 28-дневной выживаемостью

ЕАА является ранним предиктором развития тяжелых инфекционно-септических осложнений.

ЕАА быстрый (30 мин), информативный, надежный экспресс-тест количественного анализа.

ЕАА позволяет на ранних сроках определить показания к проведению патогенетической интенсивной терапии.

ЕАА способствует оценке эффективности терапии.

ЕАА –прогностически значимый маркер при комплексной интенсивной терапии инфекционно-септических осложнений после кардиохирургических вмешательств.

Читайте также:

Пожалуйста, не занимайтесь самолечением!
При симпотмах заболевания - обратитесь к врачу.