Лейкемия вирусная днк вируса felv обнаружено уровень сигнала 4 78

Лейкемия кошачьих представляет собой широко распространенное вирусное заболевание кошек (FeLV). FeLV был открыт в 1964 г. (Jarret et al., 1964), он является природным ретровирусом. В некоторых странах этот вирус является основной причиной смерти кошек, связанной с инфекционными заболеваниями.

В клинических исследованиях не удалось выявить взаимосвязи между лейкемией человека и FeLV (Sordillo and Markovich, 1982), однако in vitro клетки костного мозга человека могут быть инфицированы этим вирусом (Morgan et al., 1993). Инфицирование FeLV может привести к персистентной инфекции и носительству. (Hoover et al., 1975; Lutz et al., 1980; Hoover and Mullins, 1991). Большинство кошек с персистентной инфекцией погибают в течение 4 лет после инфицирования (McClelland et al., 1980). В этом случае кошки приобретают иммунитет к вирусу после первой вирусемии и считаются иммунными к реинфекции (Charreyere and Pedersen, 1991). Другая же группа кошек становится иммунной после первого воздействия FeLV, клинические признаки инфекции у них отсутствуют (Rojko and Kociba, 1991).

FeLV распространяется горизонтально и вертикально. Вирус передаётся со слюной, кровью, слезной жидкостью, молоком и другими жидкостями организма. Для распространения инфекции требуется непосредственный контакт между кошками (Hardy 1981). Имеются также данные о трансплацентарной передаче (Hoover and Mullins, 1991). Возможен и альтернативный путь передачи инфекции с участием кровососущих паразитов, которые могут переносить вирус при отсутствии непосредственного контакта между кошками.

Известно, что блохи являются переносчиками бактерий, риккетсий и даже ленточных червей (Hinaidy, 1991; Mehlhorn, 2001). Однако о том, способны ли блохи быть переносчиками вирусов, почти ничего не известно. В данном исследовании была изучена потенциальная способность кошачьей блохи C. felis переносить вирус лейкоза кошек.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Блохи были выращены в искусственных условиях, близких к естественным условиям обитания блох на теле собаки. (Фривилл, США). Температуру воздуха внутри искусственной среды поддерживали на уровне 39 С, что приводило к тому, что температура питательной среды (аналога крови собаки) составляла 37 С.

Вирусную РНК выделяли из образцов крови с помощью набора вирусных РНК QiAamp Ò в соответствии с рекомендациями фирмы-изготовителя (Qiagen, Hilden, Германия). Для получения вирусной РНК блох замораживали в жидком азоте и измельчали в стальной ступке. Измельченный материал смешивали с буферным раствором и выделяли вирусную РНК.

Для выделения вирусной РНК из экскрементов блох, экскременты перемешивали с буферным раствором и продолжали выделение. Для того чтобы не допустить загрязнения ДНК, все препараты затем обрабатывали ДНК-азой I из не содержащего ДНК Набора (Ambion, Остин, США). Обратную транскрипцию вирусной РНК осуществляли с помощью Набора для обратной транскрипции – полимеразной цепной реакции, предназначенного для синтеза 1-нитевой к ДНК (Roche, Индианаполис, США). Амплификацию ДНК выполняли в пробирках вместимостью 100 мкл в объеме 50 мкл, с использованием набора Taq PCR Core Kit (Qiagen, Hilden, Германия).

Первоначально популяцию блох кормили в течение 24 часов кровью, инфицированной FeLV. Блохи и экскременты были протестированы на наличие вирусной РНК. Затем одну популяцию блох кормили в течение 24 часов (этап 1), а вторую популяцию – в течение 5 часов (этап 2) неинфицированной кровью. После этого были протестированы на наличие вирусной РНК блохи и их экскременты (тест на поглощение вируса) и два полученных в результате образца крови (тест на передачу вируса). Во время третьего кормления блох вновь перенесли на свежую неинфицированную кровь и кормили в течение 24 часов (этап 3) и 5 часов (этап 4), соответственно. Блох, экскременты и полученные в результате образцы крови тестировали на наличие РНК FeLV, аналогично тестированию после 2-го кормления.

Во время первого кормления группу, состоявшую из 110 блох, инфицировали FeLV путём 24-часового кормления 2 мл крови инфицированной кошки. Для подтверждения успешной передачи вируса 10 блох и все экскременты данной группы были протестированы на наличие РНК FeLV.

Вирусная РНК была обнаружена в обоих образцах (блохах и их экскрементах). Произошло выделение с экскрементами FeLV, который попал в организм блохи с питательной средой. Далее оставшиеся 100 инфицированных блох были разделены на 2 группы, и группу 1, состоявшую из 50 блох, кормили в течение 24 часов, а группу 2 – в течение 5 часов 300 миллилитрами неинфицированной крови здоровой кошки. Через определенное время 10 блох и экскременты каждой группы тестировали на FeLV.

Вирусная РНК была обнаружена в блохах из обеих групп и их экскрементах. РНК FeLV можно было обнаружить в течение 5 и 24 часов, соответственно, после проникновения ее в блох и кормления их неинфицированной кровью. Чтобы узнать, произошла ли передача FeLV, была изучена кровь, оставшаяся после 1-го и 2-го кормления. Вирусная РНК была обнаружена в обоих образцах ранее неинфицированной крови, полученной от клинически здоровой кошки. Это доказывает, что кошачья блоха С. felis может выполнять роль переносчика РНК вируса лейкемии кошачьих in vitro.

Вирусную РНК можно было обнаружить в блохах и их экскрементах в период до 24 часов. Кроме того, блохи успешно переносили РНК FeLV непосредственно из инфицированного образца крови в неинфицированный образец.

Во время третьего кормления блох вновь кормили свежей неинфицированной кровью. После 5 и 24 часов, соответственно, блох, экскременты и образцы крови исследовали на наличие FeLV. После этого третьего кормления вирусная РНК не обнаруживалась ни в блохах, ни в экскрементах, ни в образцах крови. РНК FeLV можно было обнаружить в блохах в период до 24 часов после кормления. В течение этого времени вирусная РНК также выделялась с экскрементами блох. Кроме того, блохи могли передавать РНК FeLV непосредственно из одного образца крови в другой, являясь, таким образом, переносчиком вируса. При проведении всех экспериментов в качестве контроля была использована неинфицированная кровь. Ни в одном эксперименте РНК FeLV не обнаружена.

Известно, что вирус лейкемии кошачьих передается от больной кошки к здоровой со слюной (при облизывании), с кровью (при царапании или драке) и другими жидкостями организма (Hardy et al., 1975). Для распространения вируса в группе животных достаточно близкого контакта между здоровыми и инфицированными кошками (Essex et al., 1977). Результаты нашей работы показывают возможность другого, не связанного с тесным контактом кошек, способа передачи вируса лейкоза кошек посредством кошачьей блохи C. felis. Некоторые виды блох могут жить на разных животных, а также питаться кровью человека. Таким образом, некоторые инфекции могут передаваться между видами, например, от крысы к человеку (чума). Недавно обсуждалась даже возможное участие блох в инфицировании человека рикетсиями (Rickettsia felis) (Richter et al., 2002).

Однако, пока достаточно немногое известно о блохах как переносчиках вирусов. Имеются сообщения о том, что некоторые вирусы могут оставаться активными в организме блохи в течение, по крайней мере, 24 часов (Smetana 1965). Один из выводов данного исследования заключается в подтверждении возможности выделения с экскрементами блох вирусной РНК после 24-часового питания их FeLV – вирусоположительной кровью. Этот факт может приобрести большое значение при рассмотрении различных возможностей инфицирования FeLV. Вполне возможно, что для здоровой кошки существует риск заражения через поврежденную кожу, на которой находятся экскременты блох, после укусов блохами или во время драки с другими кошками. Другим результатом нашего исследования является обнаружение возможности прямой передачи FeLV блохами во время укусов. Вирус лейкемии кошек может проникнуть в пищеварительный тракт блох и выделиться с экскрементами; возможна также прямая передача вируса, когда блоха питается кровью кошки.

Остается неясным, имеет ли такой путь инфицирования клиническое значение in vivo, и для ответа на этот вопрос необходимы дальнейшие исследования. В силу того, что давно известна опасность передачи различных заболеваний при укусах блох человеку и домашним животным, следует говорить о важности профилактических мер против заражения домашних животных блохами.






Ссылки сообщества
Социальные группы
Поиск по форуму
Поиск по метке
Расширенный поиск
К странице.

Здравствуйте!
Нужна помощь в определении тактики лечения кошки, у которой по результатам анализа крови методом ПЦР обнаружен вирус FELV (лаборатория НУКЛЕОМ), 22 ноября. Выписка из анализа (на случай, если не смогу приложить файл):
Тест Результат Референсные значения
ПЦР-диагностика инфекций
Обнаружение ДНК/РНК возбудителя
Гемобартонеллез(ДНК Haemobartonella spp.)не обнаружено
Калицивироз(РНК Fel. calicivirus) не обнаружено
Лейкемия вирусная(ДНК вируса FELV) ОБНАРУЖЕНО уровень сигнала 3, 69
Микоплазмоз(ДНК Mycoplasma pneumonia) не обнаружено
Панлейкопения(ДНК Virus panleukopenia feline) не обнаружено
Перитонит инфекционный(РНК Fel.coronovirus) не обнаружено
Ринотрахеит вирусный(ДНК Fel. herpesvirus-1) не обнаружено
Токсоплазмоз(ДНК Toxoplasma gondii) не обнаружено
Хламидиоз(ДНК Chlamydia pneumonia) не обнаружено

Местный ветеринар назначил полиоксидоний в/м уколы 3мг через два дня, 4 укола. Комбивир (человеческий препарат против ВИЧ) в дозе 1/2 таблетки два раза в день в течение трех недель.

Кошка была подобрана на улице в октябре, обработана от блох и глистов стронгхолдом и мильбемаксом, стерилизована, ей около года. Перед прививками сдали анализы и получили положительный на FELV, прививки делать не рекомендовали. Кошка не проявляет никаких признаков болезни (стул в норме, питание Hills для стерилизованных кошек сухой и паучи),весит 3600гр.

Вопрос: целесообразно ли такое лечение (особенно комбивиром)? возможен ли ложноположительный результат на FELV? какие анализы и обследования еще пройти, чтобы подтвердить либо опровергнуть диагноз?

02.12.2015, 11:14 #1
09.12.2015, 01:40 #2
09.12.2015, 11:18 #3

Повторили тесты на ВЛК методом ПЦР и ИХ. К сожалению, тесты положительны. Тест на ВИК отрицателен. По результатам ОКА и биохимии повышены СОЭ, АЛТ, ЩФ, панкреатическая амилаза, лимфоциты. Понижены тромбоциты.
Прикладываю результаты анализов

Кошка чувствует себя достаточно хорошо, активна, ест и пьет много, ищет общения с людьми.
Из настораживающих признаков на данный момент - сильно лезет шерсть (хотя может из-за отопления), периодически, несколько раз в неделю, мочится стоя - заходит в лоток, не присаживается, а стоит и мочится (местный ветеринар сказал, что, возможно, это последствия стерилизации и вариант нормы), также местный ветеринар отметил бледноватые слизистые оболочки рта, предложил пока никакие препараты не принимать и контролировать ежеквартально показатели крови.

Подскажите, пожалуйста, нужны ли какие-либо дополнительные обследования кошки и нужно ли сейчас какое-либо лечение с такими результатами анализов?

Спасибо заранее за консультацию!

28.12.2015, 10:29 #4

Вот общие рекомендации для кошек с ВЛК:
- Домашнее содержание
- Прием врача + ОКА крови каждые 6 мес, БХА, ОАМ, посев мочи, анализ кала каждые 12 мес.
- Рекомендована кастрация (↓ стресса)
- Обязательная антибиотикопрофилактика перед операциями и стоматологическими процедурами
- Вакцинация против бешенства – если животное гуляет, против остальных инфекций – обязательно, проводится каждые 6 мес только инактивированными вакцинами.

Для улучшения качества жизни животного можно пробовать использовать:

1) Интерферон человека (IFN-α) - 50 МЕ/кг перорально каждые 24 часа неделя через неделю в течение месяца (например, Реаферон)
2) Кошачий интерферон (IFN-ω) - 1млн МЕ/кг каждые 24 часа п/к в течение 5 дней на 0,14 и 60 день лечения (Вирбаген Омега)

Эффективность препаратов сомнительна, лит. данные по исследованиям разнятся. Считается, что применение человеческого интерферона через рот может сгладить течение болезни за счет некоторой профилактики возникновения сопутствующих инфекций.

По аналиаз значимых отклонений нет. Стоит уделить внимание снижению тромбоцитов (мониторинг в дальнейшем), которое может быть связано с развитием тромбоцитопении, как частым сопутствующим заболеванием красного костного мозга при ВЛК. Но снижение в анализах может быть и погрешностью, так как часто происходит ложная аггрегация тромбоцитов.
Также стоит провести рентген груди и УЗИ брюшной полости для исключения признаков сопутствующих заболеванием при ВЛК.



Еще фото

на правах рекламы

В статье приведен ретроспективный анализ клинического случая применения Фелиферона ® кошке, инфицированной вирусной лейкемией кошек. Эффективность оценивалась по данным определения количественной РНК ВЛК методом ПЦР, динамики ОАК, БАК. Отмечено снижение количества РНК вируса лейкемии кошек до неопределяемого уровня. Негативных последствий применения Фелиферона ® не выявлено.

The article presents a retrospective analysis of the clinical case of Feliferon® application to a cat infected with viral leukemia of cats. Efficacy was assessed according to the determination of quantitative RNA FeLV by PCR, the dynamics of venous blood. A decrease in the amount of RNA of the leukemia virus of cats to undetectable values was noted. No adverse effects of Feliferone ® have been identified.

С развитием возможностей лабораторной диагностики все больше возникает интерес к ретровирусным инфекциям кошек, наиболее распространенными из которых являются вирусная лейкемия (ВЛК) и вирусный иммунодефицит (ВИК). Возбудители относятся к разным родам: ВИК – к роду лентивирусов, ВЛК принадлежит к роду гаммаретровирусов [1].

Распространенность ВЛК в популяции домашних кошек Москвы и МО в 2011 г. составляла 11,9%. По состоянию на 2015 г. процент распространения возрос до 20,7%. Данные относятся к кошкам, по какой-либо причине поступавшим на прием в ветеринарные клиники Москвы и МО [2].

Смертность инфицированных ВЛК кошек в домашних хозяйствах с несколькими кошками в первые два года с момента инфицирования оценивается примерно в 50%, за первые три года с момента инфицирования – в 80% [3, 4]. При улучшении условий содержания (в том числе исключении стресса), с переводом на одиночное содержание, продолжительность жизни кошек увеличивается и напрямую зависит от сохранения благоприятной обстановки внешней среды [8].

Мониторинг нуклеиновых кислот кошачьих ретровирусов в периферической крови кошек в настоящее время все больше используется с прогностической целью. Считается, что обнаружение провирусной ДНК ВЛК на протяжении длительного времени у кошки позволяет судить о прогрессировании инфекции [1, 3–5]. Все больший интерес вызывает определение вирусной РНК в периферической крови кошек как более объективного показателя течения ВЛК-инфекции [6].

В данной статье рассмотрен клинический случай применения Фелиферона ® у кошки, инфицированной ВЛК. В качестве основного критерия эффективности использована ПРЦ РТ с определением количества РНК ВЛК до и после применения препарата.

Кошка, 10 месяцев, мейнкун, попала под наблюдение 1 июля 2017 г. с симптомами акне, изменением слизистой оболочки десны. Внешних паразитов не обнаружено, дегельминтизация проведена в течение полугода до обращения. Вес 4,3 кг, упитанность средняя. Препаратов этиотропной терапии вирусных заболеваний животному не применялось.

Из анамнеза заболевания: медленно прогрессирующее акне, медленно прогрессирующий гингивостоматит неуточненный, коричневый налет на поверхности ушных раковин, коричневые корочки в углах глаз. Т, П, ЧДД в норме, л/у не выражены, слизистые оболочки в норме, СНК 1 с. Грудная, брюшная полость без признаков патологий. Угнетения, дегидратации не выявлено. Аппетит сохранен. Естественные отправления в норме.

Из анамнеза жизни: квартирное, одиночное содержание. Кошка приобретена у заводчика, не стерилизована. Профилактические антипаразитарные обработки проводились по срокам, согласно общепринятым нормам, вакцинация от бешенства согласно нормативам, поливалентная вакцина – март 2016 г. Кормление сухим кормом.

Первичное обследование включало осмотр, общий и биохимический анализ крови, диагностику инфекционных болезней. По окончании курса Фелиферона ® – общий и биохимический анализ крови, количественное определение РНК ВЛК в периферической крови.

Срок исполнения

2 рабочих дня (плюс 1-2 дня для регионов)

Исследуемый материал

биоптат ткани (лимфоузел)

Метод определения

Вирус лейкоза кошачьих (Feline leukemia virus, FeLV) – это Y-ретровирус (семейство Retroviridae) с сложной трехслойной структурой, непосредственно влияющей на формирование иммунного ответа хозяина.

Инфекция носит хронический характер с длительной бессимптомной фазой, при которой у кошек отсутствуют клинические признаки. Смертность от вируса животных, ведущих скученный образ жизни, оценивается в 50% на протяжении 2 лет, еще через год эта цифра может увеличиться до 80%.

Клинические проявления заболевания включают в себя изменения формулы крови, такие как анемия (нерегенеративная или регенеративная), персистирующая, преходящая или циклическая нейтропения, аномалии тромбоцитов (аномалии тромбоцитопении и функции тромбоцитов), апластическая анемия (панцитопения) и панлейкопение-подобный синдром.

Вирус FeLV основной онкоген, вызывающий различные опухоли у кошек, чаще всего лимфому и лейкоз, реже встречаются гематопоэтические опухоли и другие злокачественные новообразования (включая нейробластому, остеохондрому). При заражении вирусом лейкоза у животных развивается миелосупрессия и другие гематопоэтические нарушения. Лимфомы и лимфоцитарная инфильтрация в головном или спинном мозге приводят к компрессии. Наиболее клинически важным последствием инфекции считается иммуносупрессия, которая может приводить к вторичным инфекционным заболеваниям, определяющим большинство клинических признаков и к снижению механизмов влияния на опухоль. Вторичные заболевания у кошек, инфицированных FeLV, поддаются лечению.

После заражения вирус размножается в лимфоидной ткани ротоглотки. Репликация вируса может быть прекращена у иммунокомпетентных кошек, в крови которых присутствует высокий уровень нейтрализующих антител. В крови таких животных вирус не обнаруживается. Однако даже в случае эффективного иммунного ответа возможно развитие болезни, при котором после начального инфицирования реплицирующийся вирус посредством мононуклеарных клеток (лимфоциты и моноциты) распространяется в организме. Такие кошки дают положительный ответ в ИФА (ELISA) и ПЦР, так как в плазме крови содержится вирус. На этой стадии заболевания животные выделяют вирус со слюной, однако у таких животных, благодаря адекватному иммунному ответу, инфекция спустя несколько недель или месяцев прекращается. Важно понимать, что результатом этого сценария будет инфицирование клеток костного мозга провирусной ДНК (срок 3 недели), что в последствии приведет к выработке инфицированных гранулоцитов и тромбоцитов, циркулирующих в организме. Массированная виремия может быть остановлена организмом, но полного выведения вируса из организма произойти не может, так как провирусная ДНК находится в стволовых клетках костного мозга (регрессирующая форма). В этом состоянии вирус активно не размножается, все исследования, направленные на выявление антигена вируса, будут давать отрицательный результат. Такие кошки не заразны, так как вирус не выделяют. Выявить таких животных возможно при проведении анализа крови с использованием ПЦР, направленной на детекцию провирусной ДНК. Эта форма инфекции может быть реактивирована, например, после иммуносупрессии.

В организме животных с ослабленным иммунитетом происходит размножение вируса (прогрессирующая форма). В первую очередь вирус заселяет лимфоидные ткани, затем костный мозг и эпителиальные ткани слизистой оболочки и желез. Зараженные кошки постоянно представляют опасность для своих сородичей всю оставшуюся жизнь. У кошек с этой формой инфекции развиваются болезни, связанные с FeLV. Подавляющее большинство из них умрет в течение нескольких лет.

Выявить больных животных можно с использованием повторных тестирований после начальной стадии заболевания на наличие вирусного антигена в крови. При регрессирующей форме заболевания антигены в крови и, соответственно, сам вирус будут выявляться в течение 16 недель с момента заражения. Кошки с прогрессирующей формой останутся всегда положительными. Первоначально и регрессивная и прогрессивная формы инфекции сопровождаются персистирующей провирусной ДНК вируса в крови, обнаруживаемой с помощью ПЦР. Более позднее протекание заболевания в случае регрессивной формы будет сопровождаться низкой вирусной нагрузкой, прогрессирующая форма будет характеризоваться высоким содержанием вируса в организме кошки. Это возможно выявить с использованием рт-ПЦР.

Сроки исполнения: 2 дня (плюс 1-2 дня для регионов).

Исследуемый аналит: биоптат ткани (лимфоузел).

Метод исследования: ПЦР- Real-time.

    перед проведением процедуры животное должно быть выдержано на 10-12 часовой диете;

перед проведением вмешательства необходимо выбрить шерсть и обработать кожу соответствующей области раствором антисептика.

Показания: лимфаденопатия неясной этиологии у кошки.

риск кровотечений при биопсии образований с полостью;

риск значительных кровотечений возрастает при наличии у животного выраженной тромбоцитопении или других коагулопатий;

противопоказания перед проведением общей анестезии, согласно степени оценки группы риска животного.

Метод отбора биоматериала: ·

  • перед биопсией поверхностных лимфоузлов показана местная анестезия (например, лидокаином), возможно, в комбинации с седацией;
  • интенсивная седация или легкий наркоз показаны при выполнении игольной биопсии лимфоузлов в брюшной полости под контролем ультразвукового исследования.
  • Для выполнения биопсиси обычно требуется участие двух специалистов: один удерживает животное, обеспечивает мониторинг седации или анестезии , и предоставляет помощь в обработке образца, другой-получение последнего.
Преаналитика: Важно! Размер ткани, помещенной в микропробирку с транспортной средой, не должен превышать размеры: 0,5х0,5х0,5 см.
  1. Провести операционную/аутопсийную вырезку фрагмента ткани.
  2. Поместить биоптат в микропробирку с транспортной средой и плотно закрыть ее крышкой до щелчка.
  3. Заморозить микропробирку в вертикальном положении при -17°С…-23°С.
  4. Заполнить все графы направительного бланка.
  5. Сохранность образца 1 месяц при -17°С…-23°С. Температурный режим транспортировки в лабораторию -17°С. -23°С (красный пакет).

Интерпретация: результаты исследования содержат информацию исключительно для врачей. Диагноз ставится на основании комплексной оценки различных показателей, дополнительных сведений и зависит от методов диагностики.

Форма выдачи результата: качественный метод.

Результат исследования: обнаружение или не обнаружение в исследуемой пробе провирусной ДНК Feline leukemia virus, FeLV.

1. O'Connor, T.P. Jr.; Tonelli, Q.J.; Scarlett, J.M. Report of the national felv/fiv awareness project. J. Am. Vet. Med. Assoc. 1991, 199, 1348-1353.

2. Levy, J.K.; Scott, H.M.; Lachtara, J.L.; Crawford, P.C. Seroprevalence of feline leukemia virus and feline immunodeficiency virus infection among cats in north america and risk factors for seropositivity. J Am Vet Med Assoc 2006, 228, 371-376.

3. Hoover, E.A.; Mullins, J.I. Feline leukemia-virus infection and diseases. Journal of the American Veterinary Medical Association 1991, 199, 1287-1297.

4. Gleich, S.; Hartmann, K. Hematology and serum biochemistry of feline immunodeficiency virus-infected and feline leukemia virus-infected cats. J Vet Intern Med 2009, 23, 552-558.


Лейкемия кошек – вирусное заболевание, вызываемое ретровирусом, который часто называют его английской аббревиатурой FeLV (Feline Leukemia Virus, вирус лейкемии кошек). Как и все ретровирусы, он обладает специфическими ферментами, позволяющими ему выполнять транскрипцию и интеграцию провирусной РНК и ДНК в геном инфицированной клетки.

Эта особенность позволяет ему находиться в организме в течение очень длительного времени. По окончании латентного периода у животного могут наблюдаться разнообразные клинические признаки (анемия, гипертермия, опухоли). Часто возникают вторичные инфекции, так как этот вирус является иммунодепрессивным. Применяется симптоматическое лечение, при необходимости могут использоваться иммуномодуляторы, но в настоящее время мер, способных уничтожить вирус, не существует. Лучшим средством для защиты, как популяций кошек, так и отдельных особей, являются вакцинация и раннее выявление заболевания.

Вирус лейкемии кошек (иногда его называют вирусом лейкоза) впервые выявлен в 1964 году. Он распространен по миру повсеместно и вызывает у кошек различные заболевания, в том числе тяжелые иммунодефициты, злокачественные опухоли и лейкозы. Несмотря на использование вакцин, он остается одной из серьезных причин заболеваемости и смертности животных, в частности, в условиях высокой скученности (питомники и гостиницы для кошек). Лейкемия кошек не является зоонозным заболеванием.

Вирус лейкемии кошек, обычно называемый ВЛК (по-английски FeLV), относится к семейству Retroviridae, представители которого отличаются характерной структурой, и, главное, способом размножения. Этот РНК-содержащий вирус с помощью переносимого им фермента (обратная транскриптаза) выполняет транскрипцию своего генома в провирусную ДНК и способен таким образом встраиваться в хромосомы инфицированных клеток.

ВЛК, способный вызывать возникновение опухолей и лейкоза, относится к роду Gammavirus. Как и все ретровирусы, он состоит из оболочки, окружающей матрицу, и капсида, содержащего две одинаковые молекулы РНК и вирусные ферменты: это обратная транскриптаза, интеграза и протеаза.

РНК вируса содержит 4 гена, которые определяют действие вируса. Ген gag кодирует внутренние белки вируса (матрица, капсид), ген env — белки внешние (оболочка), ген pol — обратную транскриптазу и интегразу, а ген pro — протеазу вируса. Из составляющих вирус белков и гликопротеинов особенно важное значение для диагностики и лечения заболевания имеют два:
- белок р27, входящий в состав капсида (если он обнаруживается в сыворотке или клетках, это свидетельствует об инфицировании вирусом лейкемии кошек);
- гликопротеин оболочки gp70, отвечающий за проникновение вируса в клетку. По этой причине gp70 является главной мишенью при разработке вакцин, тем более, что он обладает высокой антигенной стабильностью.

В оптимальных условиях (умеренная температура и довольно высокая влажность) вирус может просуществовать до 48 часов. Он инактивируется традиционными дезинфицирующими средствами.

Способы передачи вируса лейкемии кошек могут быть различными. Он может проникнуть в организм при укусе или спаривании, но чаще всего он передается орально-назальным путем. Действительно, ВЛК присутствует в слюне, слезах, сперме, моче и испражнениях. Возможна вертикальная передача от матери к котятам либо через молоко, либо вследствие продолжительных контактов или даже трансплацентарным путем.

Наиболее часто в литературе упоминаются случаи инфицирования вирусом ВЛК питомников и гостиниц для кошек, и существует предположение, что особенно восприимчивы к нему породистые кошки. В результате проведенных информационных кампаний, ликвидаций очагов инфекции и вакцинаций частота заболеваний в ряде популяций кошек значительно уменьшилась. В настоящее время лейкемия в основном встречается у кошек, живущих в домах с садами, где между кошками часто происходят неконтролируемые контакты.

Представляется, что распространенность инфекции составляет от 3 до 4% для любой популяции кошек. Но когда исследования проводят среди больных кошек, то, в зависимости от метода изучения, она может достигать от 7 до 21%. Большинство инфицированных кошек моложе 2 лет. Это объясняется большей восприимчивостью молодых особей. Тем не менее, котята младше 6-8 недель, родившиеся от иммунизированных матерей, обычно защищены материнскими антителами и в этом случае период максимальной чувствительности находится между возрастом от 1,5 до 4 лет.

Традиционно предполагают, что сопротивляемость значительно увеличивается с возрастом. Тем не менее, анализ случаев заражения среди кошек старше 6 лет показывает, что взрослые особи сохраняют чувствительность к инфекции, в особенности когда они подвергаются значительному и повторяющемуся воздействию вируса.

Инфекция характеризуется существенно различающимися между собой стадиями, которые определяют клинический аспект болезни и возможную контагиозность пораженных кошек. В зависимости от состояния иммунитета кошки в момент инфицирования, заболевание может пройти весь цикл патогенетического развития или же, напротив, на одном из этапов вирус будет блокирован.

Попав в организм оральным или назальным путем, вирус активно размножается в местных лимфоидных тканях (миндалевидных железах и заднеглоточных лимфатических узлах). Инфицированные лимфоцитарные и моноцитарные клетки попадают в кровеносную систему и через несколько дней после инфицирования наступает этап виремии, которую сложно обнаружить с помощью сывороточных тестов.

Вирус, таким образом, разносится к различным тканям и, в том числе, к костному мозгу, где может поразить стволовые клетки крови любой линии. Встраивание ДНК провируса в хромосомы инфицированных клеток, характерное для ретровирусов, может происходить только в клетках, находящихся в состоянии активного деления. Эта фаза наступает через 2-4 недели после первичного инфицирования и может продолжаться до 4 месяцев.

Поскольку виремия слабо выражена, экскреция также незначительна, и поэтому кошки заразны лишь в слабой степени. Инфицированные стволовые клетки производят также инфицированные кровяные клетки, которые при циркуляции создают стойкую виремию. Вирус при этом распространяется к эпителиальным тканям самых разных систем и органов, таких как пищеварительный тракт, почки, мочевой пузырь, верхние дыхательные пути, носоглотка и слюнные железы, откуда в большом количестве и экскретируется. Кошка, у которой виремия выражена в течение длительного времени, постоянно выделяет вирус в окружающую среду.

В зависимости от статуса иммунной системы кошки инфекция может быть пресечена на том или ином этапе. В имеющихся публикациях приведены очень неоднородные данные, что связано, в частности, с различиями лабораторных методов, использованных авторами для определения уровня стойкой виремии. Примерно в трети случаев иммунная система действует очень эффективно и нейтрализует вирус сразу после его проникновения в организм или на этапе первой фазы виремии. Кошки, следовательно, выздоравливают, а вырабатываемые организмом антитела, судя по всему, защищают их очень эффективно.

Примерно в трети случаев иммунная система не может помешать вирусу попасть во вторичные центры активного размножения. Такие кошки становятся латентными носителями вируса. Примерно половина из них сумеют уничтожить вирус окончательно, тогда как у другой половины может произойти реактивация вируса, которая переведет их в состояние стойкой виремии.

Принято считать, что если реактивация не произошла в течение года после инфицирования, она становится крайне маловероятной. В последней трети случаев иммунная система кошек оказывается неспособной контролировать вирус. У этих кошек возникает стойкая виремия после первого проникновения вируса в кровоток. 85% таких кошек умирают в течение трех с половиной лет, и средняя продолжительность жизни составляет 21 месяц.

Дегенеративные болезни
Данные заболевания являются следствием инфицирования стволовых кроветворных клеток. Поражению подвергаются красные и белые тельца, а также тромбоциты. В результате развиваются анемии, формы псевдопанлейкопении и нарушения коагуляции.

Иммунодепрессия
Иммунная система подавлена. Ослаблены синтез антител, функции макрофагов и цитотоксические способности. В связи с этим наблюдается появление вторичных инфекций. Не обнаружено связи между инфекцией ВЛК и вирусом иммунодефицита кошек, но клинические проявления усиливаются. Признано, что большинство кошек умирает скорее именно от вторичных инфекций, чем от опухолевых форм. Таким образом, симптоматическое лечение от вторичных инфекций жизненно важно для кошек с таким типом поражения.

Опухолевые формы
Наиболее частыми новообразованиями являются лимфосаркомы. Существует несколько форм таких опухолей: опухоли пищеварительного тракта (у пожилых кошек), тимусные (у кошек моложе 4 лет), многоочаговые или другие. Лейкозы более редки, но они могут затронуть все стволовые клетки.

Нарушения репродуктивной функции
Кошки, находящиеся в состоянии виремии, транспланцентарным путем заражают эмбрионы, вызывая их гибель и становясь бесплодными. Если котята не умирают в матке, то рождаются с виремией и быстро погибают.

Другие формы
Наблюдаются невропатии с анизокарией или парезами.
Наконец, иммунные расстройства могут проявляться в форме выработки иммунных комплексов, что приводит к разнообразным последствиям (гломерулонефрит, гемолитическая анемия…)

Характер поражений напрямую связан с рассмотренными выше формами. Картина часто осложняется вследствие вторичных инфекций. В литературе имеются данные о том, что увеличение среднего объема эритроцитов при анемии вне зависимости от того, является она регенеративной или нет, очень напоминает инфекцию ВЛК. Вместе с тем, количество лимфоцитов у кошек в состоянии виремии зачастую снижается.

Клиника
Вирус ВЛК провоцирует развитие самых разнообразных заболеваний (различных инфекций, нарушений функции воспроизводства, лимфосарком, анемии, нефрита…), ни одно из которых не является специфичным. Поэтому лейкемию кошек необходимо подозревать при наличии любой хронической или рецидивирующей болезни.

Дополнительные исследования
Вследствие того, что у кошек, сумевших справиться с ВЛК, антитела в крови могут присутствовать в течение длительного времени, тогда как у инфицированных кошек иммунная реакция нарушена, использование серологических анализов в качестве средства диагностики или выявления заболевания исключается.

Дополнительные исследования основаны на обнаружении капсидного белка р27, который в избытке вырабатывается во время фазы размножения ВЛК и вследствие этого выделяется в кровь. Антиген р27 легко обнаруживается в сыворотке, плазме или цельной крови с использованием наборов для экспресс-диагностики, основанных на методе ИФА (иммуноферментный анализ) или иммуномиграции.

Это превосходные инструменты с очень хорошей чувствительностью и избирательностью при условии точного соблюдения указаний изготовителя (температура реактивов, фазы промывки) во время их использования. Наиболее достоверные результаты получают при исследовании сыворотки. Тем не менее, при оценке результатов нужно принимать во внимание патофизиологические данные (преходящая виремия…), а также возможные ограничения используемых тестов (опасность ложноположительного результата, когда тесты проводят без подозрения на эпизоотию или клинику по причине слишком низкого уровня распространения заболевания).

Поэтому следует без колебаний повторить показавшийся сомнительным тест с использованием вновь взятого образца и запросить дополнительный лабораторный анализ (иммунофлуоресцентный, ПЦР) для подтверждения положительного теста, в частности, если по его результатам принимается решение о судьбе животного (возможность эвтаназии). К дополнительным анализам требуется прибегать также в случае отрицательного результата при наличии у кошки подозрительных клинических признаков.

В любом случае, кошку можно считать не зараженной только при наличии двух отрицательных результатов обследований, выполненных с 16-недельным интервалом. Признать кошку находящейся в состоянии стойкой виремии можно только в том случае, если два теста, выполненные с промежутком в 16 недель, дадут положительный результат.

Лабораторная диагностика
Иммунофлуоресцентный анализ является лабораторным методом, позволяющим обнаружить белок р27 внутри гранулоцитов и тромбоцитов, если для исследования используют свежие образцы цельной крови. Метод способен выявить слабую виремию (когда антигены присутствуют в основном внутри клеток), не поддающуюся обнаружению методиками ИФА. Он также может быть выполнен на образце костного мозга.

ПЦР позволяет обнаружить часть генетического материала ВЛК. При латентной форме инфекции возможен ложноотрицательный результат при анализе крови и положительный – при тестировании образцов костного мозга. Вне зависимости от применяемых методов диагностики признать у кошки наличие стойкой виремии следует только в случае получения двух положительных результатов. Первый положительный результат предполагает изоляцию животного в ожидании окончательных результатов.

При отсутствии тяжелых симптомов усыплять кошку с подтвержденным диагнозом нет необходимости. Как альтернативу следует рассмотреть возможность ее окончательной изоляции от других кошек группы или передачу новому владельцу, у которого кошек нет.

Более 80% кошек, зараженных вирусом лейкемии, погибают от последствий иммунодепрессии. Это обстоятельство свидетельствует в пользу симптоматического лечения животных, которое позволит в большинстве случаев продлить больным лейкемией кошкам жизнь с обеспечением ее хорошего качества. Лечение включает главным образом антибиотикотерапию, направленную на борьбу с вторичными микробными инфекциями, и, при необходимости, переливания крови для лечения анемии.

К продаже разрешен омега-интерферон для кошек, который также можно применять при данном заболевании. Его применение может снизить интенсивность проявления симптомов и продлить жизнь животных. С разной степенью успеха применялись антивирусные препараты (аналоги нуклеозидов), предназначенные для человека, такие, как AZT.

Борьба с аспространением инфекции
Изоляция котят в возрасте до 16 недель (особенно чувствительных к первичным инфекциям) является одним из эффективных методов профилактики. Физически изолировать кошек, что могло бы снизить риск заражения в доме, где содержится несколько животных (некоторые - со стойкой виремией), все-таки задача трудновыполнимая. Такой план борьбы с вирусом может быть реализован в питомниках и других местах массового содержания кошек.

Они основаны на повторении (каждые 12-14 недель) тестов по выявлению заболевания в сочетании с немедленной изоляцией кошек, для которых получены положительные результаты. Вместе содержат только тех кошек, чьи результаты в 2 последовательных тестах признаны отрицательными. Недостатком такого плана ликвидации инфекции является то, что при этом будут изолированы и кошки с преходящей виремией. При поступлении нового животного необходимо также выполнить два теста с интервалом в 16 недель и в течение этого времени содержать животное в карантине.

Санитарные мероприятия
Вирус чувствителен к высокой температуре, мылу и прочим обычным дезинфицирующим средствам, поэтому необходимо регулярно стирать подстилки и чистить миски животных.

Вакцинация
Особенности биологического цикла ретровирусов и опасность возврата к вирулентности делают трудноосуществимым использование вакцин на основе живого ослабленного штамма. Существует три вида вакцин: цельноклеточные на основе инактивированного вируса, субъединичные и на основе живого возбудителя, неспособного к размножению [рекомбинантные]. Вакцины на основе инактивированного вируса состоят из цельных вирусов, выращенных в клеточной культуре.


Субъединичные вакцины готовят либо из инактивированного фильтрата (содержащего, в частности, белок gp70) инфицированных клеток, либо из иммуногенного белка (р45 негликозированная фракция белка gp70), создаваемого с применением генной инженерии. Эти две группы вакцин применяют совместно с каким-либо стимулятором иммунитета.

В вакцине на основе живого носителя использован ослабленный штамм оспы канареек (canarypoxvirus), в геном которого встроены гены gag (кодирующий белки капсида) и env (кодирующий гликопротеин оболочки gp70) вируса ВЛК. После инъекции вирус инфицирует клетки кошки, но он не способен в них размножаться. Тем не менее, он вызывает выработку антител против ВЛК, которые эндогенным путем попадают на поверхность клеток вследствие гистонесовместимости, обеспечивающей иммунизацию клетки-хозяина.

Эту вакцину применяют без адъювантов. Основанная на живой культуре, она позволяет одновременно инициировать выработку гуморального и клеточного иммунитета. Вне зависимости от типа вакцины в программу вакцинации для котят в возрасте 8-9 недель включены две инъекции, с интервалом 3-4 недели, с последующим ежегодным повторением. Вакцинация является эффективной мерой и позволяет защитить большинство животных от стойкой виремии.

Вакцинация кошек с латентной инфекцией или со стойкой виремией не приводит к каким-либо нежелательным последствиям. Тем не менее, рекомендовано (особенно, если вакцинацию впервые делают взрослым кошкам) убедиться в том, что животные не заражены, поскольку вакцинация кошек со стойкой виремией будет бесполезной и создаст ложное впечатление защищенности. Напротив, вакцинацию от других заболеваний следует продолжать с тем, чтобы возместить иммунный дефицит у кошек со стойкой виремией.

Вакцинация может помочь искоренить ВЛК в популяции кошек, но при этом не следует забывать об элементарных правилах санитарной профилактики.

Жан-Пьер ГАНЬЕР *, Марианна ФОНТЕН **

Читайте также:

Пожалуйста, не занимайтесь самолечением!
При симпотмах заболевания - обратитесь к врачу.

Copyright © Иммунитет и инфекции

09.01.2016, 23:39 #5