Промывные воды бронхов исследование на туберкулез

С 01.12.2019 по 10.12. 2019 г. будет проведена декада инвалидов в ГБУЗ НО "ДПТД", в это время будет осуществляться прием инвалидов руководителями подразделений, оказание инвалидам медицинской помощи на дому при наличии медицинских показаний, активный патронаж инвалидов участковой службой, не обращающихся за медицинской помощью более шести месяцев, для обследования. и другие мероприятия подробнее можно ознакомиться открыв новость целиком

Микробиологический метод

Микробиологический метод – исследование материала с целью выявления возбудителя заболевания.
Для диагностики туберкулеза используют следующие методы:

Микроскопический – мокрота, моча (при необходимости другие жидкости организма) исследуются путем приготовления мазков (нанесение тонкого слоя материала на стекло), с последующим окрашиванием специальными красителями, позволяющими сделать бактерии видимыми при помощи микроскопа. Результат микроскопического исследования носит предварительный характер, так как метод не позволяет определить вид микобактерии, а выявляет лишь ее наличие. Человеческий туберкулез вызывают определенные бактерии, относящиеся к микобактериям. Но очень редко заболевание, схожее с туберкулезом, могут вызвать другие виды микобактерий, а также в мазке могут присутствовать неопасные микобактерии. Для более точного исследования используется следующий метод.
Метод посева – возбудитель заболевания определяется путем помещения материала на твердые или жидкие питательные среды. Затем емкость помещается в теплое место, где микобактерии размножаются и вырастают в большом количестве, в результате их можно исследовать далее. Рост микобактерий происходит медленно и составляет 2-6 недель для жидких сред и 6-24 недели для твердых. Метод посева позволяет выделить возбудитель заболевания и определить, к какому типу микобактерий относится. Большое значение данного метода заключается в том, что он позволяет определить чувствительность возбудителя заболевания к антибиотикам.

При подозрении на туберкулез органов дыхания необходимо исследовать не менее трёх проб мокроты – это связано с особенностями выделения микобактерий из легких, а также чувствительностью методов исследования. Сбор мокроты осуществляют в течение 3-х дней подряд.
ПРАВИЛА СБОРА МОКРОТЫ
Сбор первого образца мокроты
Первый образец мокроты собирается под наблюдением медицинского работника во время первого приема пациента с подозрением на туберкулез. Врач предупреждает пациента о необходимости еще дважды сдать мокроту; пациент должен явиться на прием в следующий день.
Сбор второго образца мокроты
Перед уходом пациент получает контейнер, в который нужно собрать утреннюю мокроту дома, до прихода на прием во второй день. На внешней стороне контейнера должен быть написан номер образца (1, 2 или 3), который сдал пациент в рамках одного исследования. Пациент должен откашлять мокроту в контейнер и как можно скорее принести собранный образец в медицинское учреждение ответственному за сбор материала медицинскому работнику.
Сбор третьего образца мокроты
Когда пациент приходит на прием со вторым образцом мокроты, то в присутствии медицинского работника он должен сдать мокроту третий раз.
Инструкция для пациентов
Перед сдачей мокроты необходимо прополоскать рот водой, для удаления частиц пищи и бактерий, находящихся в ротовой полости (исключение составляет утренний сбор мокроты дома, перед которым нужно почистить зубы).
Сделать два глубоких вдоха, задерживая дыхание на несколько секунд после каждого вдоха и медленно выдыхая. Затем вдохнуть третий раз и с силой выдохнуть воздух. Еще раз вдохнуть и хорошо откашляться.
Поднести контейнер как можно ближе ко рту и осторожно сплюнуть в него мокроту после откашливания.
Плотно закрыть контейнер крышкой.
Вымыть руки с мылом.

Проблема лекарственной устойчивости (ЛУ) микобактерий туберкулеза (МБТ) к противотуберкулезным препаратам (ПТП) приобрела в последнее время глобальное значение [6, 9]. Клиническое излечение у впервые выявленных больных с множественной лекарственной устойчивостью (МЛУ) МБТ остается низким и составляет 34,6 %, что в три раза ниже уровня клинического излечения туберкулеза у больных с лекарственно чувствительным возбудителем туберкулеза [6].

Необходимость персонализированного подхода к выбору тактики лечения больного, основанного на получении своевременной и достоверной информации о клинически значимых биологических свойствах выделенного от него возбудителя туберкулеза, не вызывает сомнений. Однако вследствие снижения интенсивности бактериовыделения и жизнеспособности МБТ на этапах терапевтического лечения пациента или его исходной олигобактериальности традиционные методы выделения возбудителя из мокроты больного в значительной части случаев недостаточно информативны [3, 7]. Классические бактериологические методы обнаружения, идентификации и определения лекарственной чувствительности (ЛЧ) МБТ длительны и весьма ресурсоемки. В связи с этим в последние годы приоритет отдается применению современных молекулярно-генетических методов, направленных на решение этих задач [2, 4].

Свойства возбудителя непосредственно в очагах туберкулезного поражения остаются малоизученными. Бактериологическое исследование резецированного участка легкого определяется необходимостью проведения послеоперационного курса химиотерапии у больного с учетом данных о возбудителе и его ЛЧ к ПТП [5, 8]. Очевидно, что комплексное лабораторное исследование резецированного участка, пораженного туберкулезом легкого, дает более полные сведения об особенностях патологического процесса, возбудителе заболевания, его видовой принадлежности и чувствительности к ПТП.

Цель исследования: провести сравнительный анализ клинически значимых биологических свойств (массивность и скорость роста, лекарственная чувствительность, генотипические особенности) Mycobacterium tuberculosis, выделенных из резецированных участков легких и респираторного материала.

Материалы и методы исследования

Культуральными и молекулярно-генетическими методами исследовали двукратно мокроту и/или промывные воды бронхов (n = 219) (при возможности получения материала) непосредственно перед операцией и резецированные участки легких (n = 291) больных, перенесших хирургический этап лечения туберкулеза легких в УНИИ фтизиопульмонологии.

Скорость роста рассматривали как интервал времени от посева до появления роста в пробирках. Появление колоний МБТ в срок до 30 дней считали быстрым ростом, от 30 до 50 дней – замедленным, свыше 50 дней – медленным ростом. Массивность роста – число колоний, выросших в пробирке. Скудным рост считали при массивности до 20 колоний (1+), умеренным – 21–100 колоний (2+), обильным – свыше 100 колоний (3+).

Результаты проведенных исследований статистически обработаны с использованием лицензионной компьютерной программы MedCalc® V12.6.1 (MedCalc Software, Бельгия). Для всех статистических критериев ошибка первого рода устанавливалась равной 0,05.

Результаты исследования и их обсуждение

При сравнительном анализе биологических свойств МБТ, полученных из различного материала, было установлено, что скорость роста МБТ (n = 37), выделенных из респираторного материала, составила 59 (15) суток; скорость роста МБТ (n = 65), выделенных из операционного материала, составила 56 (17) суток. Максимальный срок появления роста культур – 88 суток, минимальный – 21 сутки. В скорости роста культур МБТ, выделенных из респираторного и операционного материала, статистических различий не найдено (р = 0,261).

Вместе с тем массивность роста культур МБТ, полученных из респираторного и операционного материала, статистически различалась (р = 0,01). При посеве резецированных участков легких в 40,0 % (95 % ДИ 28,0–52,9 %) (26 из 65) случаев отмечали умеренный рост, в 36,9 % (95 % ДИ 25,3–49,8 %) (24 из 65) – обильный, в 23,1 % (95 % ДИ 13,5–35,2 %) (15 из 65) – скудный. При посеве респираторного материала скудный рост отмечали в 69,4 % (95 % ДИ 51,8–83,6 %) (26 из 37) случаев, обильный – 19,5 % (95 % ДИ 8,2–36,1 %) (7 из 37), умеренный – 11,1 % (95 % ДИ 3,1–26,0 %) (4 из 37). Это, по-видимому, можно объяснить тем, что в операционном материале содержится большее количество МБТ, чем в респираторном материале.

Лекарственная чувствительность МБТ была определена методом абсолютных концентраций в 18,8 % (95 % ДИ 13,6–25,0 %) (37 из 197) образцов респираторного материала и в 22,3 % (95 % ДИ 17,6–27,5 %) (65 из 291) образцов операционного материала. С помощью метода биочипов было определено наличие или отсутствие мутаций, обуславливающих лекарственную устойчивость к ПТП, в геноме МБТ в 7,5 % (95 % ДИ 3,9–12,7 %) (12 из 161) образцов респираторного материала и в 95,9 % (95 % ДИ 92,3–97,9 %) (279 из 291) образцов операционного материала.

Сравнительный анализ ЛЧ МБТ, выделенных из операционного и респираторного материала, полученных на хирургическом этапе лечения методом абсолютных концентраций, удалось провести у 19 больных.

При сопоставлении результатов определения ЛЧ МБТ из резецированных участков легких (n = 19), с результатами ЛЧ МБТ из респираторного материала (n = 23), полученных от одних и тех же пациентов (n = 19) на хирургическом этапе лечения, методом абсолютных концентраций совпадение составило 100,0 %.

У всех 19 больных были выявлены культуры МБТ с ЛУ. У 8 (42,1 % (95 % ДИ 20,2–66,5 %)) пациентов были найдены МБТ с ЛУ к пяти ПТП (изониазиду, рифампицину, этамбутолу, стрептомицину и канамицину). У 6 (31,5 % (95 % ДИ 12,5–56,5 %)) больных были выявлены МБТ с ЛУ к изониазиду, рифампицину, этамбутолу и стрептомицину. 2 (10,5 % (95 % ДИ 1,3–33,1 %)) пациента имели МБТ с ЛУ к изониазиду, рифампицину, этамбутолу и канамицину. Культуры МБТ с ЛУ к изониазиду, рифампицину, этамбутолу и канамицину, а также культуры МБТ с ЛУ к изониазиду, рифампицину и стрептомицину были получены от 1 (5,3 % (95 % ДИ 0,13–26,1 %)) больного каждая. Таким образом, у 18 (94,7 % (95 % ДИ 73,9–99,9 %)) больных были обнаружены ЛУ МБТ к 2 основным ПТП I ряда (изониазиду и рифампицину), то есть имели МЛУ МБТ. Еще от 1 (5,3 % (95 % ДИ 0,13–26,1 %)) больного была получена культура МБТ с ЛУ к изониазиду, этамбутолу, стрептомицину и канамицину.

Сравнительный анализ результатов определения наличия или отсутствия мутаций, обуславливающих ЛУ, в геноме МБТ, выделенных из операционного и респираторного материала, полученных на хирургическом этапе лечения, методом биочипов удалось провести только у 11 больных.

При сравнении результатов определения наличия или отсутствия мутаций в геноме МБТ, выделенных из респираторного материала (n = 12), с результатами определения наличия или отсутствия мутаций в геноме МБТ, полученных из резецированных участков легких (n = 11) одних и тех же пациентов (n = 11), методом биочипов совпадение составило 100,0 %.

У 1 (9,1 % (95 % ДИ 0,2–41,3 %)) из 12 больных и в респираторном, и в операционном материале была обнаружена ДНК МБТ, не содержащая мутаций в генах rpoB, katG, inhA, промоторной области ahp-oxyR и gyrA, в материале 10 (90,9 % (95 % ДИ 58,7–99,8 %)) больных выявлялись мутации в указанных генах МБТ. В 9,1 % (95 % ДИ 0,2–41,3 %) (1 из 11) случаев были обнаружены моноустойчивые МБТ, которые имели мутации в гене inhA, отвечающие за ЛУ к изониазиду. Сочетание мутаций в генах, ответственных за МЛУ МБТ, было обнаружено в 81,8 % (95 % ДИ 48,2–97,7 %) (10 из 11) случаев, причем мутации, ответственные за ЛУ ко всем трем препаратам (рифампицину, изониазиду и фторхинолонам), были найдены в 63,6 % (95 % ДИ 30,8–89,1 %) (7 из 11) случаев, мутации, обуславливающие ЛУ к рифампицину и изониазиду, были выявлены в 18,2 % (95 % ДИ 2,3–51,8 %) (2 из 11) случаев.

Таким образом, МБТ, содержащиеся в респираторном материале, полученном на хирургическом этапе лечения, и операционном материале, по спектру ЛЧ не отличались.

Для подтверждения идентичности генотипов МБТ, выделенных из респираторного материала с генотипами МБТ, полученных из очага туберкулезного поражения, было проведено VNTR-генотипирование МБТ из респираторного и операционного материала. По результатам исследования все изученные изоляты M. tuberculosis отнесены к группе Beijing (100 %) и разделены на 5 кластеров, которые имели следующие VNTR-профили по MIRU10, MIRU26, MIRU31, Mtub21, ETRA, QUB26, QUB11b: 3755476 (2 пациента), 3755486 (2), 3455466 (1), 3755466 (1), 3555486 (1).

При сравнении генотипов МБТ из операционного материала с генотипами МБТ из респираторного материала различий обнаружено не было. У всех пациентов был выявлен один генотип микобактерий. Таким образом, генотипы МБТ, выделенных при исследовании резектатов легких, по 7 локусам были идентичны генотипам МБТ, полученных при исследовании респираторного материала.

Заключение

Проведенное исследование показало, что МБТ, полученные из респираторного материала на этапе хирургического лечения и из операционного материала больных туберкулезом легких, по изученным клинически значимым биологическим свойствам (скорость роста, ЛЧ, генотип) одинаковы.

При этом резецированные участки легких являются более информативным материалом, позволяющим получить достоверные сведения о возбудителе туберкулеза непосредственно из очага туберкулезного поражения по сравнению с респираторным материалом на момент хирургического вмешательства, так как выявляемость МБТ из респираторного материала и, соответственно, определение их ЛЧ существенно ниже, чем из резектатов.

Таким образом, для адекватного и своевременного назначения режимов химиотерапии в послеоперационном периоде лечения больных с туберкулезом легких целесообразно исследовать ЛЧ МБТ, выделенных из резецированных участков легких.

Рецензенты:

Мордовской Г.Г., д.м.н., заведующий отделом лабораторной диагностики Свердловского областного противотуберкулезного диспансера, г. Екатеринбург;

Чугаев Ю.П., д.м.н., профессор кафедры фтизиатрии и пульмонологии Уральского государственного медицинского университета, г. Екатеринбург.

VI. СБОР ДИАГНОСТИЧЕСКОГО МАТЕРИАЛА

Материал для исследования на кислотоустойчивые микобактерии собирают в стерильные флаконы с плотно завинчивающимися крышками. Применение герметизированных флаконов преследует двоякую цель:

- предотвращение просачивания содержимого и загрязнения окружающей больного среды чрезвычайно стойкими к физическим воздействиям микобактериями и предохранение сохраняющегося во флаконе исследуемого материала от загрязнения широко распространенными в окружающей среде кислотоустойчивыми микобактериями.

В связи с этим флаконы для сбора качественного диагностического материала должны отвечать ряду обязательных требований:

- должны быть изготовлены из ударостойкого материала, не допускающего просачивания жидкости; желательно использовать флаконы одноразового применения (контейнеры для сбора материала), изготовленные из горючего материала, легко поддающегося расплавлению при автоклавировании или сжигании;

- флаконы должны иметь удобные, плотно завинчивающиеся или герметически закрывающиеся крышки;

- объем флаконов должен составлять 20 - 50 мл, что вполне достаточно для проведения всех видов исследований;

- флаконы должны иметь широкое отверстие (не менее 35 мм в диаметре), чтобы пациент мог легко сплевывать мокроту внутрь флакона, не подвергая загрязнению его наружную поверхность;

- флаконы должны быть изготовлены из прозрачного материала, чтобы можно было оценить количество и качество собранной пробы, не открывая крышку;

- материал, из которого изготовлены флаконы, должен легко подвергаться маркировке и надежно сохранять ее на всем протяжении хранения, транспортировки и проведения исследования.

При отсутствии возможности использовать одноразовые флаконы можно применять толстостенные флаконы из стекла (карманные плевательницы многоразового пользования).

Перед выдачей пациенту такие плевательницы должны быть подвергнуты стерилизации, тщательно вымыты и повторно простерилизованы. При применении флаконов многоразового пользования во избежание лабораторного загрязнения диагностического материала необходимо постоянно следить за качеством мытья и стерилизации этих флаконов.

Для получения оптимальных результатов при исследовании клинических материалов необходимо соблюдать следующие условия:

- при исследовании мокроты желательно соблюдать правила сбора материала, изложенные выше;

- собранный материал необходимо как можно быстрее доставлять в лабораторию; в случае невозможности немедленной доставки материал сохраняется в холодильнике при 5 - 10 °C не более 3 дней; при более длительном хранении во избежание получения неверных результатов необходима консервация материала;

- при перевозке материала необходимо тщательно следить за сохранностью флаконов и точностью маркировки.

Для исследования на туберкулез используется разнообразный материал. Так как туберкулез легких является наиболее частой формой туберкулезного поражения, основной материал составляют мокрота и другие виды отделяемого трахеобронхиального дерева.

При легочных процессах чаще всего исследуют следующие материалы: мокроту; отделяемое верхних дыхательных путей, полученное после аэрозольной ингаляции; промывные воды бронхов; бронхоальвеолярные смывы; материал, получаемый при бронхоскопии, транстрахеальной и внутрилегочной биопсии; аспират из бронхов; мазки из гортани; экссудаты; промывные воды желудка (преимущественно у детей).

Мокрота. У пациентов, выделяющих мокроту в достаточном количестве, для исследования собирают ее утреннюю порцию. Качественным материалом можно считать мокроту, имеющую слизистый или слизисто-гнойный характер, а также содержащую плотные белесоватые включения. Желтоватый, серый или бурый цвет мокроты позволяет предположить диагностическую ценность материала. Достаточный объем исследуемой порции мокроты составляет 3 - 5 мл, однако допустимо исследование и меньших по объему порций. Некоторые больные выделяют микобактерии нерегулярно, поэтому в целях повышения информативности практикуется повторное (до 3 раз) исследование мокроты. Такая тактика позволяет повысить число положительных находок.

Сбор мокроты для исследования на кислотоустойчивые микобактерии - весьма ответственный этап диагностической процедуры, от четкости проведения которого во многом зависит результат исследования.

При сборе мокроты необходимо иметь в виду, что в момент ее откашливания создается высокий риск воздушно-капельного распространения инфекции. В связи с этим желательно, чтобы сбор мокроты производился в специально выделенном для этих целей отдельном хорошо вентилируемом помещении, оснащенном бактерицидной лампой и средствами дезинфекции, или на открытом воздухе. В промежутках между посещениями отдельных пациентов помещение должно хорошо вентилироваться, чтобы избежать или значительно снизить риск нозокомиального инфицирования.

Сбор мокроты должен производиться в присутствии и при непосредственном участии медицинского персонала.

1. Лицам, ответственным за сбор мокроты, следует объяснить пациенту причины исследования и необходимость откашливать не слюну или носоглоточную слизь, а содержимое глубоких отделов дыхательных путей, что достигается в результате продуктивного кашля, возникающего после нескольких глубоких вдохов.

2. Необходимо предупредить пациента, что он должен предварительно почистить зубы и прополоскать полость рта кипяченой водой, что позволяет механически удалить основную часть вегетирующей в ротовой полости микрофлоры и остатки пищи, загрязняющие мокроту и затрудняющие ее обработку.

3. Участвующий в сбире мокроты медицинский работник в маске, резиновых перчатках и резиновом фартуке должен находиться за спиной пациента, выбирая свое положение таким образом, чтобы направление движения воздуха было от него к пациенту. Медицинский работник должен открыть стерильный флакон для сбора мокроты, снять с него крышку и передать его пациенту.

4. Стоя позади пациента, следует рекомендовать ему держать флакон как можно ближе к губам и сразу же сплевывать в него мокроту по мере ее откашливания. Выделение мокроты усиливается после одного или нескольких глубоких вдохов.

5. По завершении сбора мокроты медицинский работник должен закрыть флакон крышкой, оценить количество и качество собранного материала, занести эти данные в направление. Флакон с собранной порцией мокроты тщательно закрывают завинчивающейся крышкой, маркируют и помещают в специальный бикс или ящик для транспортировки в лабораторию.

Если же пациент не выделяет мокроту или выделяет ее только эпизодически и в скудном количестве, то накануне вечером и рано утром в день сбора мокроты следует дать ему отхаркивающее средство или применить раздражающие ингаляции. Последние провоцируют усиление секреции бронхов, кашель и отделение мокроты. Собранный таким образом материал не подлежит консервации, поэтому приготовление мазков из такого материала необходимо производить в день его сбора.

Для аэрозольных ингаляций пользуются портативными или стационарными аэрозольными ингаляторами. Для проведения ингаляции рекомендуется использовать раствор, в 1 л которого содержится 150 г хлорида натрия (NaCl) и 30 г бикарбоната натрия (Na2CO3). В целях предотвращения загрязнения раствора кислотоустойчивыми сапрофитами, которые нередко содержатся в водопроводной воде и могут привести при микроскопическом исследовании к получению ложноположительного результата, для приготовления раствора используется стерильная дистиллированная вода. Для провокации выделения мокроты необходимо вдохнуть от 30 до 60 мл подогретого до 42 - 45 °C раствора. Продолжительность ингаляции должна составлять не менее 10 - 15 минут. Так как вдыхаемый во время процедуры ингаляции раствор вызывает усиленную саливацию еще до появления кашля и отделения мокроты, в первые минуты после завершения процедуры пациент должен сплюнуть слюну в специально приготовленный лоток с 5% раствором хлорамина или другого дезинфицирующего средства и только после этого собрать мокроту для исследования.

В связи с тем, что аэрозольная ингаляция вызывает выделение водянистого секрета, напоминающего по консистенции слюну, во избежание выбраковки материала в направлении и на флаконе с материалом должна быть обязательная маркировка, указывающая на то, что материал получен после аэрозольной ингаляции.

У большинства пациентов после аэрозольной ингаляции в течение нескольких часов наблюдается остаточная гиперсекреция бронхиального содержимого, поэтому пациенту рекомендуется в течение суток после ингаляции собрать мокроту для второго исследования.

При отсутствии мокроты, невозможности проведения аэрозольной ингаляции или ее безуспешности для исследования на микобактерии берут промывные воды бронхов или желудка.

Промывные воды бронхов. Сбор промывных вод бронхов производится врачом-отоларингологом, поэтому эта процедура доступна только в тех лечебных учреждениях, в которых имеется такой специалист. Пациенту во время вдоха вводят шприцем в трахею 5 - 7 мл стерильного изотонического раствора, который вызывает кашлевой рефлекс. При этом вместе с изотоническим раствором откашливается секрет из глубоких отделов бронхиального дерева. Промывные воды бронхов собирают в стерильный флакон и немедленно направляют в лабораторию.

Пациентам с выраженным глоточным рефлексом указанную процедуру производят после предварительной анестезии надгортанника, гортани и задней стенки глотки.

Более информативным материалом для исследования является материал, получаемый при бронхологических исследованиях: аспират из трахеи и дренирующих бронхов, бронхоальвеолярная лаважная жидкость (БАЛ), а также материалы прицельной катетер- и щеточной биопсии.

Промывные воды желудка исследуют преимущественно у детей младшего возраста, которые плохо откашливают мокроту и часто проглатывают ее. Во избежание смешивания проглоченной мокроты с пищей промывные воды желудка следует брать натощак. Последний прием пищи должен быть не менее чем за 12 часов до взятия промывных вод желудка. Перед забором материала для нейтрализации желудочного содержимого пациенту дают выпить 100 - 150 мл раствора питьевой соды (1 чайная ложка питьевой соды на 1 стакан воды). Раствор приготавливается на стерильной дистиллированной воде для исключения возможности попадания в желудок кислотоустойчивых сапрофитов, которые могут содержаться в водопроводной воде. После этого вводят желудочный зонд и собирают содержимое желудка в стерильный флакон. Материал немедленно доставляют в лабораторию и подвергают обработке, чтобы исключить повреждающее влияние на возбудителя содержащихся в материале желудочных ферментов.

Особенно результативен метод получения промывных вод желудка в сочетании с предварительной аэрозольной ингаляцией. Промывные воды желудка следует забирать через 30 мин. после аэрозольной ингаляции. Такая комбинация двух указанных методов позволяет получать значительно больший процент положительных результатов, чем каждый из них в отдельности. Этот метод получения диагностического материала может оказаться полезным также у пациентов с подавленным кашлевым рефлексом, у которых не удается получить материал даже при провоцирующих ингаляциях.

При внелегочных формах заболевания микобактерии могут поражать практически любой орган, поэтому для исследования пригоден самый разнообразный материал: различные тканевые жидкости (спинномозговая, плевральная, перикардиальная, синовиальная, асцитическая, кровь, гной), пунктаты костного мозга, резецированные ткани того или иного органа, полученные при биопсиях или оперативных вмешательствах, гнойно-некротические массы, грануляции, соскобы синовиальных оболочек, лимфатические узлы или пунктаты их содержимого.

Жидкий материал подлежит обязательному центрифугированию с последующей микроскопией осадка.

При внелегочных формах туберкулеза наряду с материалом из очага поражения желательно параллельно исследовать мокроту, так как внелегочные формы туберкулеза нередко сочетаются с поражением органов дыхания.

Моча (средняя или вся утренняя порция) собирается в стерильную посуду после тщательного туалета наружных половых органов. В лаборатории мочу центрифугируют, используя метод накопления осадка. В дальнейшем исследуют осадок.

В связи с высокой опасностью загрязнения мочи при сборе и низкой результативностью микроскопического исследования анализ мочи на микобактерии должен предусматривать обязательное троекратное исследование осадка.

Подготовка пациента к процедуре забора из вены крови на общий анализ

Явиться для сдачи анализа с 8 00 до 10 00 .

Забор крови проводится натощак. Это означает, что промежуток между последним приёмом пищи и взятием крови должен составлять 8 часов. Голодание не должно быть более 16 часов.

За 1-2 дня до любого исследования необходимо исключить из рациона питания жирное, жареное и алкоголь. За 1,5-2 часа до сдачи крови воздержитесь от курения. Сок, чай, кофе, тем более с сахаром, пить нельзя! Можно пить воду.

За сутки до любого исследования желательно исключить факторы, влияющие на результаты исследований: дополнительное физическое напряжение (бег, подъем по лестнице), эмоциональное возбуждение. Перед процедурой необходимо отдохнуть 10-15 минут, успокоиться.

Кровь на анализ сдают до начала приема лекарственных препаратов (например, антибактериальных и химиотерапевтических) или не ранее чем через 10-14 дней после их отмены. Кровь не следует сдавать в день проведения рентгенографии, ректального исследования, УЗИ, массажа и других процедур.

Забирается венозная кровь в вакуумную пробирку с ЭДТА.

Для точного соотношения кровь-реагент необходимо набрать полностью всю пробирку до отметки!

Сразу после забора кровь в пробирке необходимо перемешать плавными покачиваниями 5-7 раз для лучшего смешивания с реагентом и только потом поставить в штатив.

На пробирке подписывается фамилия и инициалы пациента в соответствии с направлением.

Кровь отправляется в лабораторию в день забора. До следующего дня хранить кровь нельзя! Транспортировка осуществляется в термоконтейнере с хладогеном (+10 — +15ºС).

Подготовка пациента к процедуре забора крови из вены
на биохимический анализ крови

Явиться для сдачи биохимического анализа крови с 8 00 до 10 0 0 .

Забор крови проводится строго натощак! Это означает, что промежуток между последним приёмом пищи и взятием крови должен составлять 8 часов. Голодание не должно быть более 16 часов.

Кровь забирается из локтевой вены в вакуумную пробирку с крышкой.

Для точного соотношения кровь-реагент необходимо набрать полностью всю пробирку до отметки!

На пробирке подписывается фамилия и инициалы пациента, в соответствии с направлением.

Правила сбора мочи для общего анализа (ОАМ)
и анализ мочи по методу Нечипоренко

Доставить мочу в лабораторию с 8 00 до 10 00 .

Материалом для исследования на ОАМ является разовая порция мочи при первом утреннем мочеиспускании, примерно 50-100 мл.

Материалом для исследования на АНАЛИЗ мочи ПО МЕТОДУ НЕЧИПОРЕНКО — строго средняя порция мочи (первая порция — в туалет, вторая — в контейнер, третья — опять в туалет), примерно 50-100 мл.

Нельзя собирать мочу во время менструации и в течение 5-7 дней после цистоскопии.

Накануне сдачи анализа мочи следует воздержаться от приема пищи (свекла,морковь) и лекарственных веществ, особенно влияющих на цвет мочи (амидопирин, фуразолидон, ибупрофен, метронидазол и т.д.).

Перед сбором мочи обязательно проводятся гигиенические процедуры половых органов.

Собрать мочу в чистый контейнер (либо баночку) с завинчивающейся крышкой, с прикрепленной этикеткой с указанием Ф.И.О. и даты сбора материала (запись должна быть сделана разборчивым почерком).

Сразу после сбора мочи контейнер плотно закрыть крышкой. Доставить мочу в лабораторию важно в течении 2 часов.

Бланк направления на анализ доставляется в лабораторию отдельно от контейнера.

Правила сбора кала для анализа

Доставить кал в лабораторию с 8 00 до 10 00 .

Перед сбором кала обязательно проводятся гигиенические процедуры.

Нельзя проводить исследование кала раньше чем через 2 дня после клизмы, рентгенологического исследования желудка и кишечника, колоноскопии. Нельзя накануне принимать лекарственные препараты, особенно слабительные, активированный уголь, препараты железа, меди, висмута, использовать ректальные свечи на жировой основе. Не допускается попадания в образец мочи или воды. Нельзя проводить исследование кала у женщин во время менструации.

Для исследования собирают свежевыделенный кал путем естественной дефекации.

Кал собирается в чистый контейнер (либо баночку) с завинчивающейся крышкой, с прикрепленной этикеткой с указанием Ф.И.О. и даты сбора материала (запись должна быть сделана разборчивым почерком).

Для качественного анализа берут пробу кала из разных мест разовой порции примерно 1-5 грамм и переносят в специальный контейнер (либо баночку) с плотно закрывающейся крышечкой.

Материал для анализа должен быть доставлен в лабораторию в день забора утром, не позднее 2-3 часов после акта дефекации. До следующего дня его хранить нельзя!

Бланк направления на анализ доставляется в лабораторию отдельно от контейнера.

Подготовка пациента к анализу мокроты

Сбор мокроты производится под наблюдением медицинского работника в помещении для сбора мокроты.

Мокроту для общеклинического исследования рекомендуется собирать с утра и натощак во время приступа кашля .

П еред откашливанием производится санация ротовой полости – почистить зубы, прополоскать рот и горло кипяченой водой (с целью механического удаления остатков пищи и слущенного эпителия ).

При плохо отделяемой мокроте, накануне принять отхаркивающие средства, теплое питье.

Для качественного анализа необходимо собрать не менее 5 мл. мокроты в специальный стерильный контейнер.

Д оставить в лабораторию в течение 1 часа .

Подготовка к сдаче биологического материала на микробиологическое исследование с целью выделения микобактерий туберкулеза

На микробиологическое исследование с целью выделения микобактерий туберкулеза принимается любая биологическая жидкость.

Для получения оптимальных результатов при исследовании диагностического материала необходимо соблюдать следующие условия:

— сбор материала необходимо производить до начала химиотерапии, либо прекратить применение антибактериальных препаратов за 7 – 10 дней до взятия материала, так как даже несколько дней применения лекарственной терапии может убить значительное количество кислотоустойчивых микобактерий или снизить их жизнеспособность и исказить результаты исследования;

— материал для исследования должен собираться рано утром сразу после подъема пациента;

— собранный материал необходимо как можно быстрее доставить в лабораторию; в случае невозможности немедленной доставки материал сохраняется в холодильнике при температуре 4-10°С

— при перевозке материала необходимо особенно тщательно следить за сохранностью флаконов и правильностью их маркировки.

Для исследования собирают утреннюю порцию мокроты. Качественным материалом можно считать мокроту, имеющую слизистый или слизисто-гнойный характер, а также содержащую плотные белесоватые включения.

Мокрота собирается в стерильный контейнер с завинчивающейся крышкой, с указанием Ф.И.О. (запись должна быть сделана разборчивым почерком).

Достаточный объем исследуемой порции мокроты составляет 3 — 5 мл.

В целях повышения информативности желательно собрать не менее 3 проб утренней мокроты в течение 3 последовательных дней т.к. выделение микобактерий происходит нерегулярно.

Сбор мокроты должен производиться в присутствии и при непосредственном участии медицинского работника.

Перед откашливанием мокроты необходимо почистить зубы и прополоскать полость рта кипяченой водой.

Если же пациент не выделяет мокроту или выделяет ее эпизодически и в скудном количестве, то следует применить раздражающие ингаляции. Собранный таким образом материал необходимо доставить в лабораторию в день сбора.

Бланк направления на анализ доставляется в лабораторию отдельно от контейнера.

Для аэрозольных ингаляций пользуются портативными или стационарными аэрозольными ингаляторами. Для ингаляций рекомендуется раствор, в 1 л которого содержится 150 г хлорида натрия (NaCl) и 10 г двууглекислого натрия (Na₂CO₃). Для приготовления раствора используется стерильная дистиллированная вода. Для провокации мокроты необходимо вдохнуть на протяжении 10-15 минут от 30 до 60 мл. подогретой до температуры 42-45°С смеси. Так как вдыхаемый во время процедуры ингаляции раствор вызывает усиленную саливацию еще до появления кашля и отделения мокроты, в первые минуты после завершения процедуры ингаляции пациент должен сплюнуть слюну в специально приготовленный лоток с 5% раствором хлорамина (или другого дезинфицирующего средства) и только после этого собрать мокроту для исследования.

Сбор промывных вод бронхов производится врачом-отоларингологом.

Промывные воды бронхов собираются в стерильный контейнер с завинчивающейся крышкой, с указанием Ф.И.О. (запись должна быть сделана разборчивым почерком).

Достаточный объем исследуемой порции составляет не менее 3-5 мл.

Собранный материал необходимо доставить в лабораторию в течение 1 часа.

Бланк направления на анализ доставляется в лабораторию отдельно от контейнера.

Промывные воды желудка исследуют преимущественно у детей младшего возраста, которые плохо откашливают мокроту и часто проглатывают ее.

Промывные воды желудка следует брать натощак. Последний прием пищи должен быть не менее чем за 12 часов до взятия промывных вод желудка.

Перед сбором материала для нейтрализации желудочного содержимого больному дают выпить 100-150 мл. раствора питьевой соды (1 чайная ложка соды на 1 стакан воды), приготовленного на стерильной дистиллированной воде для исключения возможности попадания в желудок кислотоустойчивых сапрофитов, которые могут содержаться в водопроводной воде.

Провести аэрозольную ингаляцию.

Через 30 мин после аэрозольной ингаляции следует собирать промывные воды желудка.

Собирают содержимое желудка в стерильный флакон с завинчивающейся крышкой, с указанием Ф.И.О. (запись должна быть сделана разборчивым почерком).

Материал немедленно доставляют в лабораторию.

Бланк направления на анализ доставляется в лабораторию отдельно от контейнера.

Анализ мочи на микобактерии должен предусматривать обязательное троекратное исследование в три последующих дня.

Моча собирается после тщательного туалета наружных половых органов.

Материалом для исследования является средняя часть утренней порции или вся утренняя порция мочи, примерно 50-100 мл.

Собирают мочу в стерильный контейнер с завинчивающейся крышкой, с указанием Ф.И.О. (запись должна быть сделана разборчивым почерком).

Доставить мочу в лабораторию необходимо в течение 1,5-2 часов после сбора. Допускается хранение биоматериала в холодильнике при температуре +2 +4°С не более 3-4 часов. При доставке в лабораторию позже указанных сроков результаты посева мочи могут быть недостоверны.

Бланк направления на анализ доставляется в лабораторию отдельно от контейнера.

Подготовка пациента к процедуре забора крови из вены
для диагностики туберкулезной инфекции методом теста Т-СПОТ

Забор крови проводится строго натощак! Это означает, что промежуток между последним приёмом пищи и взятием крови должен составлять 8 часов. Голодание не должно быть более 14 часов (допускается употребление негазированной воды). В течение суток до сдачи крови запрещается употребление алкоголя, за 10-12 часов необходимо исключить курение.
Рекомендуется проводить Т-СПОТ не ранее чем: — через месяц после кожных проб на туберкулез (реакции Манту и Диаскин-тест), т.к. он может дать ложноположительный результат; — через три недели после различных вакцинаций.
Не рекомендуется проводить Т-СПОТ: — в период обострения аллергических, аутоиммуных и кожных заболеваний; — в остром периоде вирусной или бактериальной инфекции; — в течение курса приема иммуностимуляторов, т.к. это может спровоцировать неопределенный результат из – за повышенной выработки собственного интерферона-Υ.
Кровь забирается из локтевой вены в вакуумную пробирку с крышкой.

Читайте также: