Протокол испытаний по дисбактериозу

Микробиологическое исследование, которое позволяет оценить состав микрофлоры кишечника – концентрацию и соотношение "полезных", условно-патогенных и патогенных микроорганизмов в кале, определить специфическую активность основных пробиотиков в отношении выявленных микроорганизмов и их чувствительность к бактериофагам и антибиотикам. К нормальной микрофлоре кишечника ("полезные" бактерии) относятся лактобактерии, бифидобактерии, энтерококки, кишечные палочки (типичные), анаэробная флора (бактероиды). Условно-патогенная флора – это энтеробактерии, неферментирующие бактерии, стафилококки, анаэробные бактерии (клостридии), грибы. Патогенными микроорганизмами являются сальмонеллы, шигеллы, патогенные эшерихии. При выявлении патогенных и/или условно-патогенных микроорганизмов будет определена их чувствительность к антимикробным препаратам (антибиотикам и бактериофагам) и пробиотикам. При обнаружении микроорганизмов, составляющих нормальную микрофлору, чувствительность к антибиотикам и бактериофагам не определяется, т.к. не имеет диагностического значения.

Дисбиоз кишечника, определение пробиотиков-антагонистов.

Синонимы английские

Intestinal dysbiosis, antagonistic activity of probiotics and bacteriophage sensitivity test, Intestinal dysbacteriosis.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

Исследование рекомендуется проводить до начала приема антибиотиков и других антибактериальных химиотерапевтических препаратов.
Исключить прием слабительных препаратов, введение ректальных свечей, масел, ограничить (по согласованию с врачом) прием медикаментов, влияющих на перистальтику кишечника (белладонна, пилокарпин и др.), и препаратов, влияющих на окраску кала (железо, висмут, сернокислый барий), в течение 72 часов до сбора кала.

Общая информация об исследовании

Дисбактериоз (дисбиоз) кишечника – это нарушение состава и количественного соотношения бактериальных и грибковых микроорганизмов желудочно-кишечного тракта. В норме слизистая оболочка ЖКТ является средой обитания так называемых комменсальных микроорганизмов, обеспечивающих целый ряд защитных функций в обмен на микронутриенты, используемые человеком. Большинство кишечных комменсалов относятся к родам Lactobacillus, Bifidobacterium и Bacteroides (облигатные бактерии), хотя состав и количество микроорганизмов сильно варьируются в зависимости от отдела ЖКТ. Так, желудок характеризуется наименьшей плотностью бактерий, среди которых преобладают Lactobacillus, Streptococcus и Helicobacter pylori. В тонкой кишке обнаруживается до 10 3 -10 6 КОЕ/мл бактерий, преимущественно Streptococcus и Lactobacillus. Наибольшая плотность комменсальных микроорганизмов наблюдается в толстой кишке (10 8 -10 9 КОЕ/мл), где преобладают Bacteroides, Clostridium, Fusobacterium и Bifidobacterium. Комменсальные микроорганизмы находятся в динамическом взаимодействии с кишечным эпителием и, таким образом, являются механическим препятствием для инвазии патогенов. Кроме того, они секретируют ряд противомикробных соединений (например, дефензины). Бактерии-комменсалы способны регулировать иммунный ответ слизистых оболочек кишечника и в некоторых случаях подавлять воспалительные, в том числе аллергические, реакции. Нарушение баланса микробиоты возникает в результате длительного или бесконтрольного лечения антибактериальными препаратами, при нарушении моторики ЖКТ (послеоперационный период, прием слабительных препаратов), мальабсорбции (хронический алкоголизм, хронический панкреатит) и при некоторых других состояниях. Дисбактериоз может приводить к развитию заболеваний ЖКТ и других органов. Так, в настоящее время получены данные о его роли в патогенезе болезни Крона, неспецифического язвенного колита и целиакии, а также синдрома хронической усталости и атопического дерматита.

Основным способом диагностики дисбактериоза является микробиологический метод, при котором производят качественную и количественную оценку облигатных, условно-патогенных и патогенных микроорганизмов в кале. На основании результатов исследования делают вывод о дефиците облигатных микроорганизмов или об избыточном росте условно-патогенных или патогенных бактерий. Микробиологическое исследование – это один из наиболее специфических и чувствительных методов исследования, применяемых при диагностике дисбактериоза. Следует, однако, помнить, что бактериологический состав кала (он используется в качестве биоматериала) несколько отличается от бактериологического состава слизистой оболочки кишки. Кроме того, результат теста может зависеть от многих других факторов, таких как недавнее употребление антибактериальных препаратов, продуктов, богатых пробиотиками, или слабительных средств.

С учетом растущей устойчивости условно-патогенных и патогенных микроорганизмов к антибактериальным препаратам все большую роль в терапии дисбактериоза играют альтернативные методы лечения с помощью пробиотиков. Пробиотики – это группа препаратов, содержащих бактерии-комменсалы, или дрожжевые грибы. Считается, что они защищают организм от избыточной условно-патогенной и патогенной микробиоты. Совокупность защитных свойств пробиотиков в отношении какого-либо микроорганизма называется антагонистической активностью и может быть определена с помощью микробиологического исследования. В ходе анализа оценивается антагонистическая активность основных используемых в гастроэнтерологической практике пробиотиков. Определение антагонистической активности пробиотиков проводят перед назначением указанных препаратов для лечения дисбактериоза. Оно может быть дополнено анализом на чувствительность выявленных микроорганизмов к антибиотикам и бактериофагам.

Результат анализа оценивают с учетом дополнительным лабораторных и инструментальных данных.

Для чего используется исследование?

Для диагностики и лечения дисбактериоза кишечника, контроля его лечения;
чтобы установить причины кишечных расстройств;
для подбора рациональной терапии антибиотиками.

Когда назначается исследование?

При обследовании пациента после длительного курса лечения антибактериальными препаратами;
при обследовании пациента с указанием на бесконтрольный прием антибактериальных препаратов и слабительных средств в анамнезе;
при выявлении устойчивости условно-патогенных и патогенных микроорганизмов к антибактериальным препаратам;
при обследовании пациента с хроническим панкреатитом, хроническим алкоголизмом и другими состояниями, сопровождающимися мальабсорбцией;
при хронической диарее;
после долгого лечения антибиотиками, глюкокортикостероидами, иммунодепрессантами, химиотерапевтическими препаратами;
при аллергических заболеваниях, которые плохо поддаются лечению (например, атопическом дерматите);
после воздействия химических веществ или ионизирующей радиации – если есть симптомы дисфункции кишечника;
при длительном периоде выздоровления после острых кишечных инфекций.

Испытательный центр

В связи с задаваемыми вопросами сообщаем, что режим работы Санкт-Петербургской горветлаборатории – экспертно-испытательного центра в настоящее время остался прежним.

Прием проб осуществляется: с понедельника по четверг с 09.00 до 17.00, в пятницу с 09.00 до 16.00.

ИСПЫТАТЕЛЬНЫЙ ЦЕНТР САНКТ-ПЕТЕРБУРГСКОЙ ГОРОДСКОЙ ВЕТЕРИНАРНОЙ ЛАБОРАТОРИИ - ЭКСПЕРТНО-ИСПЫТАТЕЛЬНОГО ЦЕНТРА (ИЦ Санкт-Петербургской горветлаборатории – ЭИЦ).
Номер записи в РАЛ RA.RU.21ВЛ05 Дата внесения 19.08.2015
ФИО, должность руководителя ИЦ: Ситекова Наталия Александровна , заместитель директора Санкт-Петербургской горветлаборатории - Руководитель ИЦ

исследования кормов (общая бактериальная обсемененность, наличие сальмонелл, энтеропатогенной кишечной палочки, патогенного протея, пастерелл, энтерококков, иерсиний, кампилобактерий)
исследования спермы (общая бактериальная обсемененность, коли-титр, наличие синегнойной палочки, анаэробной микрофлоры, золотистого стафилококка, исследования спермы на фертильность)
исследование воды поверхностных водоемов (общие колиформные бактерии, термотолерантные колиформные бактерии, наличие сальмонелл)
исследования лекарственных средств для ветеринарного применения на стерильность.

Исследования на инфекционные заболевания:

сальмонеллез
колибактериоз
стафилококкоз
стрептококкоз
пастереллез
псевдомоноз
иерсиниоз
кампилобактериоз
листериоз
анаэробные инфекции
бактериальные болезни пчел

Исследования на дисбактериоз животных.

Исследования на условно-патогенную микрофлору с определением чувствительности к антибактериальным препаратам.

трихофития,
микроспория,
условно-патогенные грибы

гельминтозы
арахноэнтомозы
протозоозы
трихомоноз крупного рогатого скота
кровепаразитарные заболевания

Оснащение отдела отвечает всем современным требованиям эффективности и безопасности. Идентификация микроорганизмов (бактерий и грибов) осуществляется на современном приборе bioMerieux VITEK MS MALDI-TOF. Идентификация производится посредством масс-спектрометрического анализа белковой фракции микробной клетки. Это простое в использовании, но высокопроизводительное решение для идентификации большого числа клинически значимых микроорганизмов. Основные достоинства и преимущества метода MALDI-TOF MS:

позволяет отказаться от длительной, трудоемкой и ненадежной фенотипической идентификации микроорганизмов;
быстрая и простая пробоподготовка – 5 мин/образец;
высокая чувствительность - для идентификации достаточно единичной колонии;
возможность видовой идентификации любых видов культивируемых микроорганизмов: мицелиальных грибов, дрожжей, грам(+) и грам(-) бактерий;
высокая скорость идентификации – 2 мин/образец;
высокая точность видовой идентификации (превышает 98 %);
снижение себестоимости каждого исследования в несколько раз в сравнении с фенотипическими (ручными и автоматизированными) методами.

Благодаря этим качествам в настоящее время MALDI-TOF MS вытесняет традиционные методы не только в исследовательских центрах, но и в крупных клинических лабораториях.

Для решения задачи комплексного подхода идентификации и определения антибиотикочувствительности отдел располагает возможностью совмещения двух анализаторов Vitek MS (проведение идентификации образца) и Vitek 2 Compact (определение чувствительности к антимикробным препаратам). Это позволяет обеспечить полную автоматизацию процессов в лаборатории.

В работе отдела используются как классические, проверенные временем методы исследований, так и новые, современные методики, такие как ПЦР и ИФА. Отдел оснащен современным оборудованием производства мировых лидеров в области лабораторной техники и качественными реагентами. Специалистами отдела на высоком профессиональном уровне и в короткие сроки проводятся диагностические исследования, направленные на обнаружение специфических антител, образующихся при инфекционных заболеваниях или на выявление возбудителей заболеваний, в том числе общих для человека и животных. Спектр исследований включает более 30 заболеваний бактериальной, вирусной и паразитарной этиологии. Проводятся исследования сельскохозяйственных животных (КРС, МРС, лошади, свиньи и др.), птиц и мелких домашних животных (собаки, кошки и др.). Бактериальные болезни: бруцеллез, лептоспироз, листериоз, паратуберкулез, сап, кампилобактериоз, микоплазмоз, сальмонеллез, туберкулез. Вирусные болезни: инфекционная анемия лошадей, лейкоз крупного рогатого скота, хламидийные инфекции, аденовирусная инфекция, бешенство, грипп птиц, парвовирусная инфекция, африканская и классическая чума свиней, коронавирусная инфекция, калицивироз, панлейкопения, герпесвирусная инфекция. Паразитарные болезни: трипаносомозы, токсоплазмоз.

В отделе проводятся биохимические исследования методом ИФА на определение уровня гормонов в сыворотке крови животных: тироксин (Т4), трийодтиронин (Т3), кортизол, прогестерон. Эти исследования необходимы для диагностики эндокринных расстройств, для ранней диагностики беременности, для определения оптимальных сроков оплодотворения животных и т.д.

Проводятся исследования на пищевую аллергию собак — иммунотест на корма промышленного производства и моно продукты.

В структуру отдела серологии и вирусологии входит лаборатория патоморфологии. Лаборатория проводит патологоанатомические исследования с целью установления причины гибели животных и птиц.
Область аккредитации

Заслуженный врач России, д.м.н., профессор
Галина Сергеевна Солдатова

ДИСБАКТЕРИОЗ И ЭМ-КУРУНГА
(результаты клинических испытаний у больных после лучевой и полихимиотерапии)

ЦКБ СО РАН
2007 г

Актуальность

Многие хронические заболевания связаны с нарушением микробиоценоза кишечника и часто являются следствием дисбактериоза, а не его причиной.
Дисбактериоз является причиной девяти из каждых десяти тяжелых заболеваний организма и считается основной социальной болезнью 21-го века.
Выявляют у 90% взрослого населения и свыше 25% детей в возрасте до года.
Актуальность проблемы дисбактериоза требует постоянного поиска новых средств для его коррекции.

Цель настоящего доклада

ознакомление с причинами, клиническими проявлениями, тактикой лечения пациентов с дисбактериозом кишечника и месте ЭМ-курунги в коррекции микробиоценоза.

Кишечная флора – необходимый атрибут существования сложных организмов, а ее сохранение и предупреждение загрязнения – одна из важнейших проблем биологии и медицины.
А.М. Уголев

Соотношение разнообразных популяций микробов отдельных органов и систем, поддерживающее биохимическое, метаболическое и иммунологическое равновесие, необходимое для сохранения здоровья человека, называют нормофлорой.

Состав микрофлоры толстой кишки в норме
(В.М. Бондаренко и соавт., 1998 г., НИИ им. Гамалеи)

Микроорганизмы

КОЕ
г/фекалий

Пептококки и пептострептококки

Общее количество Е. Coli

Стафилококки (гемолитические, плазмокоагулирующие)

Стафилококки (негемолитические, эпидермальные, коагулоотрицательные)

Условно-патогенные и неферментирующие грамотрицательные палочки

не более 10 3 -10 4

Облигатная микрофлора

Бактероиды
Бифидумбактерии
Лактобактерии

Обязательная (индигенная, резидентная, постоянная)

Кишечная палочка
Энтерококки

Сопутствующая

Факультативная (менее 1%)

Условно-патогенные энтеробактерии (цитробактер, энтеробактер, протей, клебсиелла, клостридии, псевдомонады)
Стафилококки
Микрококки
Дрожжеподобные грибки

Временная (транзиторная, случайная)

Остаточная

М или мукозная микрофлора- микробы, тесно ассоциированные со слизистой оболочкой кишечника, расположенные в слое слизи, пространстве между ворсинами, образующие плотный бактериальный дерн.
В основном это бифидум-, лактобактерии и бактероиды
П (просветную) микрофлору составляют микробы, локализующиеся в просвете кишечника.
В качественном отношении микрофлора испражнений сходна с микрофлорой полости толстой кишки.

• Термин дисбактериоз был введен в научную литературу в 1916 году немецким врачом А.Ниссле.

Дисбактериоз кишечника (синдром хронического бактериального перероста):

появление значительного количества микробов в тонкой кишке;
изменение микробного состава толстой кишки;
изменение общего количества и свойств микроорганизмов;
усиление их агрессивности

Причины возникновения дисбактериоза кишечника

Лечение антибиотиками - угнетают рост многих видов бактерий и могут спровоцировать рост условно-патогенных бактерий и грибов.
Несбалансированное питание - дефицит в пище балластных веществ - растительной клетчатки, поступающей в организм с овощами и фруктами.
Острые кишечные инфекции и хронические заболевания желудочно-кишечного тракта.
Хронические заболевания других органов и систем в стадии декомпенсации.
Хронический стресс.
Профессиональные вредности и интоксикации, в частности алкогольная.
Нарушения экологической обстановки - воздействие физических, химических и других вредных факторов окружающей среды.
Непривычные климатические факторы.
Анатомо-физические нарушения кишечника: анатомические аномалии, осложнения во время операций на желудочно-кишечном тракте, нарушение кишечной моторики всасывания питательных веществ.
Полигиповитаминозы.
Пищевая аллергия.
Ферментопатии - непереносимость различных продуктов питания, в том числе цельного молока, злаков, грибов.
Иммунодефицитные состояния ( при онкологических заболеваниях, ВИЧ- инфекции).

Дисбактериоз у практически здоровых людей

Дисбактериоз сопровождающий заболевания желудочно-кишечного тракта.

заболевания желудка со снижением кислотности
болезни поджелудочной железы
болезни печени и желчевыводящих путей
заболевания кишечника
синдром мальабсорбции любого генеза

Дисбактериоз при различных заболеваниях и повреждениях организма.

при инфекциях
паразитах (лямблиоз, трихомоноз)
гельминтах (острицы, аскариды и другие)
аллергии
иммунодефиците
гиповитаминозе
интоксикациях
гипоксии
воздействии радионуклидов

Лекарственный дисбактериоз
развивается при длительном приеме:

антибиотиков
сульфаниламидов
гистаминоблокаторов
туберкулостатиков
иммунодепрессантов
антацидов
слабительных средств

Стрессорный дисбактериоз

Данный тип дисбактериоза выделен недавно, что лишний раз доказывает известную пословицу, что все болезни от нервов…

Причины развития дисбактериоза у детей в возрасте до 1 года

Клинические проявления дисбактериоза кишечника у взрослых

1. Симптомы со стороны желудочно-кишечного тракта.
- Снижение или отсутствие аппетита.
- Тошнота.
- Рвота.
- Металлический привкус во рту.
- Боль в животе (тупая или схваткообразная) самостоятельная и при пальпации.
- Отрыжка.
- Аэрофагия.
- Метеоризм.
- Урчание, вздутие живота.
- Чувство неполного опрожнения кишечника.
- Императивные позывы на дефекацию.
- Запор.
- Понос.
- Чередование запора и поноса.

- Каловые массы:
- в виде пробкообразного стула (кашицеобразный или жидкий кал с твердой первой порцией его, иногда с примесью слизи,
- овечий кал (при запоре) с примесью слизи, гнилостный или кислый запах каловых масс.

2. Гиповитаминоз.
- Заеды.
- Сухость кожи и слизистых.

3. Аллергический синдром.
- Зуд кожи и слизистых.
- Аллергические высыпания на коже.

4. Общие симптомы.
- Утомляемость.
- Слабость.
- Головные боли.
- Нарушение сна.

Приказ 231 от 09.06. 2003 г.

содержат современные сведения о неформальной микрофлоре человека и ее основных биотопах. Освещены вопросы этиологии, патогенеза, клиники, диагностики, лечения нарушений микробиоценоза кишечника.

Задачи исследования

общие клинические показатели крови (Er, Hb, цветовой показатель, лейкоцитарную формулу, СОЭ);
биохимические показатели крови (общий билирубин, тимоловую пробу, трансаминазы, липидный обмен, общий белок, сывороточное железо, щелочную фосфатазу);
состояние просветной микрофлоры толстой кишки в зависимости от кислотообразующей функции желудка;
морфологическое состояние толстой кишки;
копрограмму;
моторно-эвакуаторную функцию гастроинтестинального тракта;
качество жизни больных.

ЭМ-курунга - СИНБИОТИК (производства ООО "ЭМ-центр", Республика Бурятия, г. Улан-Удэ)

нескольких штаммов бифидобактерий и лактобактерий,
уксуснокислых, пропионовокислых и других бактерий, лактострептококков,
дрожжей, отобранных в результате микробиологических и технологических исследований.
В состав препарата входят также ферменты, аминокислоты, витамины.

Продукт сертифицирован органами санэпиднадзора.

Синбиотик = Пробиотики + пребиотики

Пробиотики - живые микроорганизмы: чаще бифидо - или лактобактерии, иногда дрожжи, которые относятся к нормальным обитателям кишечника здорового человека.

• не патогенны, не токсичны, сохраняют жизнеспособность при прохождении через желудочно-кишечный тракт и при хранении.

• не считаются лекарством и рассматриваются как средства, полезно влияющие на состояние здоровья людей.

• являются самыми физиологичными и эффективными при терапии и профилактике дисбактериоза кишечника,

• В среднем курс лечения пробиотиками составляет 2-4 недели под контролем показателей микрофлоры .

Пребиотики – это вещества, способные оказывать благоприятный эффект на организм хозяина через стимуляцию роста и/или активности нормальной микрофлоры кишечника /пищевые волокна, лактулоза, витамины, микроэлементы, олигосахариды, соевые продукты и др./

Дизайн исследования

Характеристика обследуемых групп

В своей предыдущей заметке я затронул тему микрофлоры кишечника. В России она звучит особенно громко, поскольку на ней продолжают спекулировать не только производители кисломолочных продуктов и пробиотических препаратов, но и практикующие врачи. Практически неистребимым остается излюбленный российский диагноз-миф "дисбактериоз" (по последней моде "дисбиоз").

Нигде в развитых странах такого заболевания просто не существует. Не желают им страдать и от него лечиться ни буржуины, ни собратья из стран победнее. Нет такой хворобы и в международной классификации болезней (МКБ-10), в соответствии с которой должны выставляться диагнозы в России. Не упоминается "дисбактериоз" и в нормативном документе МЗ РФ "Стандарты (протоколы) диагностики и лечения болезней органов пищеварения", которым должны руководствоваться все наши врачи.

Тем не менее, как дань дремучим совковым традициям, "дисбактериоз" продолжает слетать с языка многих практикующих врачей, особенно педиатров. По-прежнему стандарты медосмотров малышей включают тестирование кала на "дисбактериоз". При этом давно известно, что искать корреляцию между составом флоры в кале и реальным ее соотношением в криптах кишечника - все равно, что гадать на кофейной гуще. Во-первых, основу кишечной флоры составляют бактероиды, которые не растут на питательных средах. Во-вторых, соотношение бактерий на выходе имеет очень мало общего с тем, что живет в кишке. В-третьих, все то время, пока вы собираете и несете ваши бесценные фекалии в лабораторию, жизнь в них не прекращается, и уже через несколько часов вся флора и фауна кала радикально видоизменяется. А потому все заключения о "преобладании патогенной флоры над нормальной" в таком анализе попросту смехотворны.

В общем, всем нам надо понимать, что такого самостоятельного заболевания, как дисбактериоз, в природе нет.

Существуют лишь ряд временных состояний организма (те же вирусные диареи или длительная антибиотикотерапия), которые могут привести к временному же дисбалансу нормальной флоры. При этом дисбаланс этот, как правило, не качественный, а количественный. В пример могу привести чрезмерный рост бактерии Clostridium difficile с развитием псевдомембранозного колита на фоне длительной терапии антибиотками.

Чаще же всего дискомфорт в животе обусловлен не мифическими заболеваниями, а совершенно реальным бунтом организма против всякой колы и прочей мак-дряни. Если вашего ребенка в животе не прекращается “шум и гам”, в первую очередь посмотрите, что он у вас ест.

У взрослых под "дисбактериозом" нередко скрываются синдром раздраженного кишечника, синдром избыточного бактериального роста в тонкой кишке, лактазная недостаточность, а также другие невыявленные состояния, при которых нарушается баланс кишечной флоры. Эти расстройства надо лечить, воздействуя на причину такого дисбаланса, а не сам дисбаланс, который является лишь следствием.

На теме дисбактериоза активно паразитируют различные производители кисломолочных продуктов питания, пробиотиков (препаратов с живыми бактериальными культурами) и пребиотиков (веществ, не перевариваемых человеком, но являющихся пищей для ряда бактерий).

Как я уже объяснил в колонке о кишечной флоре, бактерии пробиотиков могут становиться лишь транзитными колонистами, тогда как цель всех лечебных мероприятий заключается в восстановлении баланса СОБСТВЕННОЙ микрофлоры.

В ряду многочисленных препаратов для коррекции дисбактериоза хочу выделить особо абсурдный класс лекарств - бактериофаги. Бактериофаги - это такие вирусы, которые поражают бактерий. Когда-то ученые предложили использовать их против стафилококков, кишечных палочек и других возбудителей диарей. Однако исследования показали, что бактериофаги полностью разрушаются в желудке, и от таких препаратов во всем мире давно уже отказались. Точнее, во всем мире, кроме России - у нас эти псевдолекарства популярны и по сей день, и особенно хорошо неэффективные препараты лечат несуществующие дисбактериозы.

Если ваш врач уверенно заявляет, что ваша микрофлора разбалансирована, и вы вовсю уже "страдаете дисбактериозом", не паникуйте! Попытайтесь отыскать грамотного специалиста, который не станет жонглировать несуществующими диагнозами и назначать фуфломицины, а займется общепринятой диагностикой, которая позволит отличить инфекционную или органическую патологию кишечного тракта от физиологических и психосоматических расстройств. И не спешите разоряться в аптеках! Лучше сэкономьте деньги на полноценное питание себе и вашим детям, "подкормите" микрофлору естественным образом - здоровой пищей. Растительные волокна овощей, фруктов и зерновых - лучшая поддержка для

Читайте также: