Приготовление растворителя для вакцины клещевого энцефалита

Вакцина клещевого энцефалита культуральная очищенная концентрированная инактивированная сухая (ФГУП ПИПВЭ им. М.П. Чумакова РАМН, Россия) – предназначена для профилактической иммунизации лиц с 3-летнего возраста и старше, подвергающихся опасности заражения клещевым энцефалитом в природных очагах или лабораторных условиях.

Вакцина стимулирует выработку иммунитета к вирусу клещевого энцефалита и отвечает самым высоким требованиям к современным лекарственным средствам. Отличительной особенностью этой вакцины является тот факт, что она защищает от всех известных в настоящее время субтипов клещевого энцефалита.

Клещевой энцефалит – природно-очаговое заболевание, поражающее центрльную и периферическую нервную систему. Заболевание может приводить к параличам и даже летальному исходу. Переносчиками являются иксодовые клещи, обитающие практически на всей территории Евразийского континента.

Показания к применению Вакцины клещевого энцефалита.

Вакцина клещевого энцефалита предназначена для активной профилактики клещевого энцефалита у взрослых и детей с 3-х летнего возраста, постоянно проживающих или временно находящихся на территориях, эндемичных по клещевому энцефалиту.

Разовая доза Вакцины клещевого энцефалита составляет 0,5 мл.

Вакцина поставляется в двух компонентах: флакон с лиофилизированной вакциной и ампула с растворителем. Вводится стерильным шприцем. Вскрытие ампул и процедуру вакцинации осуществляют при строгом соблюдении правил асептики и антисептики. Препарат во вскрытой ампуле хранению не подлежит.

Вакцина клещевого энцефалита поставляется в картонных коробках по 10 доз в комплекте с растворителем.

Непосредственно перед введением растворитель из ампулы забирается в стерильный шприц (из расчета 0.5 мл на одну дозу), сухая вакцина во флаконе растворяется жидким растворителем из шприца и вводится ребенку из того же шприца.

Вакцина клещевого энцефалита вводится внутримышечно в дельтовидную мышцу (плечо). Инъекция в ягодицу в настоящее время не практикуется. Допустимо подкожное введение. Внутривенное введение категорически противопоказано.

Курс вакцинации

Иммунизация Вакциной клещевого энцефалита состоит из двух доз и последующих ревакцинаций.

Первичный курс вакцинации:

Через 1-7 месяца

Через 12 месяцев после второй прививки

Обычно первая вакцинация для вакцины клещевого энцефалита проводится осенью, в сентябре-октябре, а вторая вакцинация проводится перед началом эпидсезона, т.е. в апреле-мае. Таким образом формируется высокий уровень антител до начала активности клеща. Это важно для людей долгое время находящихся в эндемичных районах. клещевому вирусному энцефалиту очаг в течение ближайшего времени). Но интервалы между двумя прививками могут быть сокращены до 1 месяца, что позволяет получить защитный титр антител через 14 дней после второй прививки. Что позволяет выезжать в очаг сразу через 45 дней от начала курса вакцинации.

Вакцина стимулирует выработку клеточного и гуморального иммунитета к вирусу клещевого энцефалита. После двух инъекций препарата (курс вакцинации) вируснейтрализующие антитела обнаруживаются не менее, чем у 90% привитых.

Вакцинация против клещевого вирусного энцефалита входит в календарь профилактических прививок по эпидемическим показаниям (приказ МЗ РФ от 31.01.2011 года)

Согласно календарю прививок по эпидпоказаниям вакцинации против клещевого вирусного энцефалита подлежат следующие группы граждан:

• 1. Лица, посещающие эндемичные по клещевому энцефалиту территории с целью отдыха, туризма, работы на дачных и садовых участках.
• 2. Лица, работающие с живыми культурами возбудителя клещевого энцефалита.
• 3. Население, проживающее на эндемичных по клещевому вирусному энцефалиту территориях, а также прибывшие на эти территории лица, выполняющие следующие работы:
  • - сельскохозяйственные, гидромелиоративные, строительные, по выемке и перемещению грунта, заготовительные, промысловые, геологические, изыскательские, экспедиционные, дератизационные и дезинсекционные;
  • - по лесозаготовке, расчистке и благоустройству леса, зон оздоровления и отдыха населения.

Противопоказания к применению

• - Острые инфекционные и неинфекционные заболевания – прививки проводят не ранее, чем через 1 месяц после выздоровления.
• - Хронические заболевания в стадии обострения.
• - Тяжелые аллергические реакции в анамнезе на пищу (особенно белок куриных яиц), лекарственные вещества, бронхиальная астма, системные заболевания соединительной ткани.
• - Тяжелая реакция (повышение температуры выше 40 0С, в месте введения вакцины – отек, гиперемия более 8 см в диаметре) или осложнение на предыдущую дозу вакцины.
• - Беременность.

Побочные реакции вакцины.

Побочные реакции на Вакцину клещевого энцефалита редки. После введения вакцины в отдельных случаях могут развиваться местные и общие реакции.

Местные реакции выражаются в покраснении, припухлости, болезненности в месте введения, развитии инфильтрата. Возможно небольшое увеличение регионарных лимфатических узлов. Продолжительность местных реакций не превышает 3 суток.

Общие реакции могут развиваться в первые двое суток после вакцинации и выражаются в подъеме температуры, головной боли, недомогании, их продолжительность не превышает 48 часов. Частота реакций с температурой более 37, 5 °С не должна превышать 7%.

Применение Вакцины клещевого энцефалита совместно с другими вакцинами

Вакцину клещевого энцефалита можно вводить одновременно со всеми препаратами из национального календаря профилактических прививок в один день, в разные участки тела.

Применение Вакцины клещевого энцефалита совместно с другими прививками не влияет на их иммуногенность (способность выработки иммунитета). Переносимость вакцин не ухудшается, количество побочных реакций не возрастает.

Введение нескольких вакцин в один день не является избыточной нагрузкой на иммунитет.

Все вакцины национального календаря прививок России взаимозаменяемы.

Применение Вакцины клещевого энцефалита при беременности и кормлении грудью

Клинические исследования безопасности применения Вакцины клещевого энцефалита у беременных и кормящих женщин не проводились.

Вакцинация беременных и кормящих женщин может быть осуществлена только после тщательного определения риска их возможного заражения вирусом клещевого энцефалита.

Дополнительные сведения о препарате

В том случае, если укус клеща произошел до или в течение 2 недель после первой прививки, одна инъекция Вакцины клещевого энцефалита не может предотвратить возможное развитие клещевого энцефалита.

При необходимости экстренной защиты невакцинированных или лиц, получивших одну прививку, следует назначать пассивную иммунизацию специфическим иммуноглобулином против клещевого энцефалита. Через 4 недели после введения специфического иммуноглобулина следует продолжить курс вакцинации.

Вакцина клещевого энцефалита защищает только от клещевого вирусного энцефалита и не защищает от энцефалитов другой этиологии и заболеваний, переносчиками которых являются иксодовые клещи. Имеются данные о том, что Вакцина клещевого энцефалита обладает профилактической активностью в отношении возбудителя Омской геморрагической лихорадки. Также вакцина применяется для доноров, от которых получают сыворотку для приготовления специфического иммуноглобулина.

В отличие от вакцин Энцепур ® и ФСМЕ-иммун® Вакцина клещевого энцефалита защищает от всех известных и распространенных на территории РФ вариантов вируса клещевого энцефалита.

Институт полиомиелита и вирусных энцефалитов им. М.П. Чумакова РАМН, Россия

• Форма выпуска:
  1 ампула / 1 доза / 0,5 мл №5;
  1 ампула / 2 дозы / 1 мл №5.
• Схема вакцинации: курс вакцинации состоит из 2 доз – осенью и весной – с интервалом 5-7 месяцев.
  Ревакцинация через год. Последующие ревакцинации – каждые три года.

Инструкция по применению

ПИПВЭ им. М.П. Чумакова РАМН ФГУП (Россия)

Код ATX: J07BC01 (Hepatitis B, purified antigen)

Активное вещество: вакцина против клещевого энцефалита (инактивированная) (tick-borne encephalitis vaccine (inactivated))

Ph.Eur. Европейская Фармакопея

ВАКЦИНА КЛЕЩЕВОГО ЭНЦЕФАЛИТА КУЛЬТУРАЛЬНАЯ ОЧИЩЕННАЯ КОНЦЕНТРИРОВАННАЯ ИНАКТИВИРОВАННЫЕ СУХАЯ

лиофиолизат д/приготовления сусп. д/в/м введения 0.5 мл/1 доза: 0.5 мл или 1 мл амп. или фл. 50 шт.

рег. №: Р N003793/01 от 26.05.09 - Бессрочно

Лиофилизат для приготовления суспензии для в/м введения

0.5 мл (1 доза)

антиген вируса клещевого энцефалита

Вспомогательные вещества: альбумин - 250 мкг (стабилизатор), сахароза - 37.5 мг (стабилизатор), желатин - 5 мг (формообразователь), натрия хлорид - 3.8 мг (соли буферной системы), трисгидроксиметиламинометан - 0.06 мг.

Растворитель - алюминия гидроксида гель

Препарат не содержит формальдегида, антибиотиков и консервантов.

0.5 мл (1 доза) - ампулы (1) в комплекте с растворителем - ампула (1) 0.65 мл - пачки картонные (5 комплектов).

1 мл (2 дозы) - ампулы (1) в комплекте с растворителем - ампула (1) 1.2 мл - пачки картонные (5 комплектов).

Приведенная научная информация является обобщающей и не может быть использована для принятия решения о возможности применения конкретного лекарственного препарата.

Представляет собой инактивированный формалином вирус энцефалита. Вакцина формирует иммунитет к вирусу клещевого энцефалита.

Плановая профилактическая иммунизация в очагах с высоким риском поражения, а также выборочная вакцинация лиц, посещающих очаги клещевого энцефалита. Экстренная помощь при подозрении на укус клеща в эндемичных по клещевому энцефалиту регионах.

Режим дозирования индивидуальный, в зависимости от показаний к применению и возраста прививаемого.

Очень редко: повышение температуры тела, головная боль в первые 2 сут.

Местные реакции: кратковременное ощущение жжения в месте инъекции, редко - покраснение, болезненность, развитие инфильтрата.

Лихорадочные состояния (инфекционного и неинфекционного генеза), наследственные, прогрессирующие заболевания нервной системы, эпилепсия с частыми припадками, пищевая аллергия (особенно на яйца), бронхиальная астма, коллагенозы, хронические заболевания печени и почек, хроническая сердечная недостаточность, нарушение мозгового кровообращения, сахарный диабет, тиреотоксикоз, злокачественные новообразования, болезни крови, беременность.

Противопоказано применение при беременности.

Противопоказан при хронических заболеваниях печени.

Противопоказан при хронических заболеваниях почек.

Применение у детей до 1 года рекомендуется лишь в случае наличия реальной опасности инфицирования.

После перенесенных лихорадочных состояний прививки допустимы не ранее чем через 1 мес после выздоровления, а лицам, перенесшим вирусный гепатит и менингококковую инфекцию, не ранее чем через 6 мес после выздоровления. Прививки допустимы через 2 недели после родов.

Избегать внутрисосудистого введения.

Может применяться одновременно с живыми и инактивированными вакцинами. Интервал между применением иммуноглобулина против клещевого энцефалита и вакциной должен составлять не менее 4 нед.

Всё, что вам нужно знать о китайском коронавирусе

Интервью телеканала RT с Дмитрием Львовым — легендой советской вирусологии, экспертом ВОЗ по гриппу и респираторным инфекциям с 1987 года.

Ротавирусная инфекция: что важно знать?

Существует несколько типов вируса, но патогенными для человека являются серотипы А, В, С, а наиболее распространен тип А. Этот вирус поражает не только человека, но и разные виды млекопитающих и птиц. Ротавирус группы А считается одной из наиболее частых причин возникновения инфекционных диарей у детей.

Полиомиелит – симптомы, последствия, как не заразиться

Полиомиелит – это острое инфекционное заболевание человека, которое сопровождается поражением нервной системы, развитием парезов и параличей. Полиомиелит в основном поражает детей в возрасте до 5 лет. 1 из 200 инфекций приводит к необратимому параличу. Среди тех парализованных, от 5% до 10% умирают, когда их дыхательные мышцы становятся неподвижными.

Отличие ротавирусной инфекции от кишечной инфекции.

Многие родители паникуют, путая ротавирус, дизентерию и отравление. Врачи предупреждают, что одно из главных отличий – характер стула.

Коронавирус: Молот и Танец

Эта статья была результатом невероятных усилий группы обычных людей, работающих круглосуточно, чтобы найти все соответствующие исследования, чтобы структурировать их в единое целое, если это может помочь другим обработать всю имеющуюся информацию о коронавируса.

ИНСТРУКЦИЯ

Вакцина клещевого энцефалита - пористая масса белого цвета, гигроскопична. Одна прививочная доза (0,5 мл) препарата содержит: специфический антиген вируса клещевого энцефалита - активный компонент; альбумин человека донорский - 250+50 мкг (стабилизатор); сахарозу - 37, 5+0,5 мг (стабилизатор); желатин - 5+0,5 мг (формообразователь); бычий сывороточный альбумин - не более 0,5 мкг; протамин - сульфат - не более 5 мкг. Вакцина не содержит формальдегида, антибиотиков и консервантов.

Растворитель - гель алюминия гидроксида, гомогенная суспензия белого цвета без посторонних частиц (включений), при отстаивании разделяющаяся на два слоя: бесцветную прозрачную надосадочную жидкость и рыхлый осадок белого цвета, не дающий при встряхивании неразвивающихся хлопьев и конгломератов.

Иммунологические свойства

Назначение

Контингенты, подлежащие вакцинации

Население, проживающее на эндемичных по клещевому энцефалиту территориях, а также прибывшие на эти территории лица, выполняющие следующие работы:

* Сельскохозяйственные, гидромелиоративные, строительные, по выемке и перемещению фунта, заготовительные, промысловые, геологические, изыскательские, экспедиционные, дератизационные и дезинсекционные.

* По лесозаготовке, расчистке и благоустройству леса, зон оздоровления и отдыха населения.

* Лица, работающие с живыми культурами возбудителя клещевого энцефалита.

* Лица, посещающие эндемичные по клещевому энцефалиту территории с целью отдыха, туризма, работы

на дачных и садовых участках.

Способ применения и дозировка

1. Профилактическая вакцинация.

Курс вакцинации состоит из двух внутримышечных инъекций по 1 дозе (0,5 мл) с интервалом 1-7 месяцев. Курс вакцинации (две прививки) можно проводить в течение всего года, в том числе и в летний период (эпидсезон), но не позднее, чем за 2 недели до посещения очага клещевого энцефалита.

Наиболее оптимальным является интервал между первой и второй прививками 5-7 месяцев (осень - весна). Ревакцинацию проводят однократно в дозе 0,5 мл. через 1 год после завершения курса вакцинации. Последующие отдаленные ревакцинации проводят каждые три года однократно.

Вакцинация осуществляется при строгом соблюдении правил асептики и антисептики. Вакцину растворяют в прилагаемом растворителе из расчета 0,5 мл. на дозу. Ампулу с растворителем интенсивно встряхивают, шейки ампул обрабатывают спиртом, вскрывают, набирают растворитель в шприц и вносят его в ампулу с сухой вакциной. Содержимое ампулы с вакциной интенсивно перемешивают в течение 3- х мин до полного растворения вакцины, набирая ее несколько раз в шприц без пенообразования.

Вакцина должна образовывать однородную суспензию в течение 3-х минут при внесении в ампулу растворителя для вакцины (0,5 мл. на 1 дозу и 1,0 мл. на 2 дозы). Перед каждой инъекцией содержимое ампулы перемешивают, так как при отстаивании суспензия разделяется на бесцветную прозрачную надосадочную жидкость и рыхлый осадок белого цвета, прививку проводят сразу после набора в шприц прививочной дозы. Растворенная в ампуле вакцина хранению не подлежит.

Не пригоден препарат в ампулах с нарушенной целостностью, маркировкой, при обнаружении посторонних включений, при изменении физических свойств (сильная деформация таблетки - пористая масса белого цвета становится полупрозрачной и оплывшей по форме, изменение цвета, наличие крупных неразбивающихся конгломератов в растворителе после его встряхивания), при истекшем сроке годности, при нарушении температурного режима хранения или транспортирования.

Препарат вводят внутримышечно в область дельтовидной мышцы плеча

Проведенные прививки регистрируют в установленных учетных формах с указанием наименования препарата, даты прививок, дозы, номера серии, реакции на прививку.

2. Вакцинация доноров.

Курс вакцинации - две инъекции по 0,5 мл. с интервалом 5-7 месяцев или три инъекции в дозах 0,5 мл. для первой и по 1,0 мл. для второй и третьей с интервалом 3-5 недель между прививками. Первая схема обеспечивает лучший иммунизационный эффект. Ревакцинация - дозой 0,5 мл. через 6-12 месяцев. Способ введения аналогичен способу введения при профилактической вакцинации. Первый забор крови у доноров проводят через 14-30 дней после курса вакцинации.

Реакции на введение вакцины

После введения вакцины в отдельных случаях могут развиваться местные и общие реакции. Местные реакции выражаются в покраснении, припухлости, болезненности в месте введения, развитии инфильтрата. Возможно небольшое увеличение регионарных лимфатических узлов. Продолжительность местных реакций не превышает 3 суток. Общие реакции могут развиваться в первые двое суток после вакцинации и выражаются в подъеме температуры, головной боли, недомогании, их продолжительность не превышает 48 часов. Частота реакций с температурой более 37, 5 °С не должна превышать 7%.

В исключительно редких случаях прививки могут сопровождаться развитием немедленных аллергических реакций, в связи с чем привитые должны находиться под медицинским наблюдением в течение 30 мин после вакцинации. Места проведения прививок должны быть обеспечены средствами противошоковой и противоаллер гической терапии.

Противопоказания к применению

* Острые инфекционные и неинфекционные заболевания - прививки проводят не ранее, чем через 1 месяц после выздоровления.

* Хронические заболевания в стадии обострения.

* Тяжелые аллергические реакции в анамнезе на пищу (особенно белок куриных яиц), лекарственные вещества, бронхиальная астма, системные заболевания соединительной ткани.

* Тяжелая реакция (повышение температуры выше 40 °С, в месте введения вакцины - отек, гиперемия более 8 см в диаметре) или осложнение на предыдущую дозу вакцины.

При вакцинации доноров следует учитывать противопоказания, перечисленные выше, а также противопоказания, относящиеся к отбору доноров.

В каждом случае заболевания, не содержащегося в настоящем перечне противопоказаний, вакцинация проводится по разрешению врача, исходя из состояния здоровья вакцинируемого и риска заражения клещевым энцефалитом. С целью выявления противопоказаний врач (фельдшер) проводит в день прививки опрос и осмотр прививаемого с обязательной термометрией.

Вакцинацию против клещевого энцефалита проводят не ранее чем через 1 месяц после вакцинации против другого инфекционного заболевания. Допускается проводить вакцинацию против клещевого энцефалита одновременно (в один день) с другими прививками инактивированными вакцинами (кроме антирабических) Национального календаря профилактических прививок и календаря профилактических прививок по эпидемическим показаниям.

Форма выпуска

Вакцина по 1 дозе (0,5 мл.) или 2 дозы (1,0 мл.) в ампуле. Растворитель по 0,65 мл. в ампуле для однодозовой вакцины или по 1, 2 мл. в ампуле для двухдозовой вакцины соответственно. Выпускают в комплектах.

Комплект № 1 состоит из 1 ампулы, содержащей 1 дозу (0,5 мл.) вакцины и 1 ампулы, содержащей 0,65 мл. растворителя. В пачке 5 комплектов.

Комплект № 2 состоит из 1 ампулы, содержащей 2 дозы (1,0 мл.) вакцины и 1 ампулы, содержащей 1, 2 мл. растворителя. В пачке 5 комплектов.

Условия хранения и транспортирования

Срок годности

Срок годности - 3 года.

О случаях повышенной реактогенности или развития поствакцинальных осложнений следует сообщить по телефону или телеграфу с последующим представлением медицинской документации.

Государственный стандарт качества лекарственного средства
Фармакопейная статья ФС 42-
"Вакцина клещевого энцефалита культуральная очищенная концентрированная инактивированная сорбированная, жидкая или сухая в комплекте с растворителем - алюминия гидроксида"

Данная фармакопейная статья распространяется на вакцину клещевого энцефалита инактивированную формальдегидом культуральную цельновирионную очищенную концентрированную, которая представляет собой вирусный антиген (в основном, протективный поверхностный белок вириона - белок Е), сорбированный на минеральном сорбенте - алюминия гидроксиде, жидкую или сухую с алюминием гидроксида в качестве растворителя.

Вакцина не содержит формальдегида, антибиотиков и консервантов.

Состав : Одна доза вакцины содержит специфический инактивированный антиген вируса клещевого энцефалита (КЭ) - активный компонент, может содержать вспомогательные вещества (содержание расчетное) предусмотренные частной фармакопейной статьей.

Производство вакцины клещевого энцефалита должно быть организовано при соблюдении условий GMP, а также условий работы с вирусом 2 группы биоопасности (патогенности) - вирусом клещевого энцефалита.

Технология производства вакцины состоит из нескольких этапов :

1. Подготовка и ведение производственного штамма вируса клещевого энцефалита;

2. Подготовка и ведение первично-трипсинизированной культуры клеток куриного эмбриона (взвешенной или монослойной);*

3. Заражение клеточной культуры, репродукция вируса и получение вирусного сбора;

4. Инактивация вирусного сбора формальдегидом, проведение технологии очистки и концентрации вакцинного вирусного антигена, стабилизация альбумином человеческим и сахарозой, получение готовой формы вакцины - сорбция полученного антигена на сорбенте - алюминия гидроксиде или лиофилизация вакцинного антигена.

В производстве вакцины размножение вируса осуществляется на первично-трипсинизированной культуре клеток куриных эмбрионов. Куриные эмбрионы должны поступать из проверенных и аттестованных на отсутствие заболеваний среди птицы птицеводческих хозяйств. Перед заражением вирусом получаемые клетки - фибробласты куриного эмбриона должны быть проверены на отсутствие контаминирующих агентов - вирусов, бактерий, грибов, микоплазм. Для заражения вирусом клещевого энцефалита используют монослойные или взвешенные культуры клеток куриного эмбриона.

- В качестве субстрата для приготовления вакцины КЭ могут быть использованы перевиваемые клеточные линии рекомендованные ВОЗ для этой цели, в частности, перевиваемая клеточная линия клеток VERO.

Очищенный концентрированный вакцинный антиген получают на основе вирусного сбора, который представляет собой вирус клещевого энцефалита репродуцированный в первично-трипсинизированной культуре клеток куриного эмбриона. Для получения вирусного сбора используются производственные штаммы вируса клещевого энцефалита, полученные путем пассирования вируса клещевого энцефалита, выделенного из клещей или от больных КЭ людей, через мозг беспородных белых мышей. Для ведения производственного штамма используется система посевных серий, от лиофилизированного производственного штамма, который хранится при температуре минус 60 0С, до получения вакцинного вирусного сбора допустимо проведение не более 3 пассажей вируса через мозг мышей. Полученный культуральный вирусный сбор подвергается инактивации формальдегидом. После контроля инактивированного материала на отсутствие живого вируса клещевого энцефалита, проводят процедуры очистки и концентрации вакцинного антигена - методом ультрафильтрации с гель-хроматографией, достигая очистки вакцинного антигена от субстратных балластных примесей более, чем на 98%.

Для повышения иммуногенных свойств вакцинного антигена проводится сорбция антигена на сорбенте - алюминия гидроксиде. Существует другая технология получения конечной формы вакцины - лиофилизация очищенного вакцинного антигена, который перед применением для вакцинации людей восстанавливается растворителем - сорбентом алюминия гидроксидом. При изготовлении готовой формы вакцины применяются стабилизаторы активности очищенного концентрированного вакцинного антигена - 10% или 20% растворы альбумина человека и сахароза (в концентрации предусмотренной частной фармакопейной статьей). Перед использованием в производстве альбумин человека должен тестироваться валидированными методами на отсутствие антител к ВИЧ, ВИЧ-2, к вирусу гепатита С и поверхностному антигену вируса гепатита В (HbsAg).

Испытание готового препарата .

Описание . Гомогенная суспензия белого цвета (для сорбированной жидкой вакцины). Пористая масса белого цвета, гигроскопична (для лиофилизированной вакцины). Определение проводят визуально.

Подлинность . Должна вызывать специфический иммунитет к вирусу клещевого энцефалита при иммунизации мышей линии BALB/С.

Определение проводят биологическим методом (раздел "Специфическая активность").

Время растворения . Не более 3 мин (для лиофилизированной вакцины)

Определение проводят визуально по методике, указанной в частной фармакопейной статье.

Описание восстановленного препарата . Гомогенная непрозрачная суспензия белого цвета (для лиофилизата после внесения растворителя для вакцины), при отстаивании разделяющаяся на бесцветную прозрачную жидкость и рыхлый осадок белого цвета. При встряхивании хлопья, конгломераты и посторонний частицы должны отсутствовать.

Определение проводят визуально.

Механические включения . Должны отсутствовать. Определение проводят визуально по ОФС "Видимые механические включения в парентеральных лекарственных формах и глазных лекарственных формах"

Цветность . Суспензия белого цвета (для жидкой сорбированной вакцины и для лиофилизата после внесения растворителя для вакцины). Определение проводят визуально по ОФС "Степень окраски жидкостей"

Время седиментационной устойчивости . Суспензия, образующаяся при встряхивании, не должна расслаиваться в течение 3 мин (для жидкой сорбированной вакцины и лиофилизата после внесения растворителя для вакцины). Определение проводят визуально.

Количественное определение антигена . Определение проводят методом иммуноферментного анализа (ИФА) с использованием коммерческих наборов реагентов для выявления антигенов вируса клещевого энцефалита. Подготовка образцов вакцины должна быть изложена в частной фармакопейной статье. Проведение ИФА и учет результатов проводят согласно инструкции по применению набора реагентов. Титр антигена в вакцине КЭ должен быть не менее 1:128.

Извлекаемый объём . Должен быть не менее номинального (для жидкой сорбированной вакцины). Определение проводят в соответствии с ОФС "Извлекаемый объем лекарственных форм для парентерального применения"

Потеря в массе при высушивании . Не более 2,5% (для лиофилизированной вакцины). Определение проводят весовым методом в соответствии с ОФС "Определение потери в массе при высушивании"

Алюминий . От 0,60 до 1,0 мг/мл (для жидкой сорбированной вакцины)

Определение проводят комплексонометрическим методом в соответствии с ОФС "Определение ионов алюминия в сорбированных иммунобиологических препаратах".

Сахароза . От 20 до 60 мг/мл (для жидкой сорбированной вакцины)

Определение проводят колориметрическим методом в соответствии с ОФС "Определение сахаров спектрофотометрическим методом".

Формальдегид . Должен отсутствовать (определение проводят в жидкой сорбированной вакцине колориметрическим методом в соответствии с ОФС "Определение формальдегида".

Стерильность . Должна быть стерильной. Определение проводят методом прямого посева или мембранной фильтрации в соответствии с ОФС "Стерильность".

Присутствие микоплазм . Не должна содержать микоплазм. Определение проводят микробиологическим методом по методике, изложенной в частной фармакопейной статье.

Бактериальные эндотоксины . Не более 50 ЕЭ/мл. Определение проводят методом гель-тромб тест в соответствии с ОФС: "Бактериальные эндотоксины".

Аномальная токсичность . Должна быть нетоксична. Определение проводят в соответствии с ОФС: "Аномальная токсичность". Тест-доза: морским свинкам - 1 доза вакцины подкожно, белым мышам по 1дозе вакцины внутрибрюшинно, период наблюдения за животными составляет 7 сут.

рН (восстановленного препарата для лиофилизированной вакцины).

От 7,4 до 7,8. Определение проводят потенциометрическим методом в соответствии с ОФС "Ионометрия".

Специфическая активность (иммуногенность) . Должна быть специфически активна. Минимальная иммунизирующая доза вакцины (МИД50) должна быть в пределах от 0,001 до 0,017 мл. Определение проводят биологическим методом:

Для проведения контроля используют 3-6 образцов вакцины. В качестве препарата сравнения применяется стандартный образец вакцины клещевого энцефалита, аттестованный в установленном порядке. Содержимое 3-6 ампул вакцины или стандартного образца объединяют в одной ёмкости и готовят ряд разведений: 1:10; 1:32; 1:100; 1:320 (для лиофилизированной вакцины КЭ содержимое ампул предварительно растворяют в растворителе (предложенном частной фармакопеей). Для приготовления разведений используют среду 199 с 0,1% ЧСА или другую предложенную, частной фармакопеей. Ёмкости с приготовленными разведениями испытуемой вакцины и стандартного образца вакцины сохраняют на льду на время постановки опыта.

Для иммунизации готовят используют мышей линии BALB/С массой 14 -16 г, возрастной категории 40 - 42 сут, без различия пола. Каждым разведением испытуемой вакцины или стандартного образца вакцины иммунизируют не менее 10 мышей. Иммунизацию проводят трёхкратно с интервалом между инъекциями 1 - 2 сут. Животным вводят подкожно соответствующие разведения в объеме разовой дозы вакцины. Для каждой иммунизации готовят свежие разведения испытуемой вакцины и стандартного образца вакцины.

Одновременно, в первый день иммунизации, комплектуют контрольную группу мышей той же партии для определения рабочей дозы тест-штамма вируса клещевого энцефалита. В качестве тест-штамма используют вирулентный штамм "Абсеттаров" вируса клещевого энцефалита.

Через 7 - 9 сут после 3 иммунизации, мышам внутрибрюшинно вводят по 100 - 1000 ЛД50 тест-штамма "Абсеттаров" в объёме 0,25 мл каждому животному. Параллельно, для подтверждения рабочей дозы вируса, или РЛД50 (реальной летальной дозы) для мышей, готовят десятикратные разведения рабочей дозы (РЛД50), введенной иммунизированным мышам: неразвед. раб.доза; 1 : 10; 1: 100; 1 : 1000 на том же разбавителе, который использовался для приготовления разведений вакцины, стандартного образца и рабочей дозы вируса. Указанные выше разведения РЛД50 вируса вводят мышам контрольной группы внутрибрюшинно, по 0,25 мл, используя по 6 мышей на каждое разведение вируса.

За животными ведут ежедневное наблюдение и регистрируют заболевших и павших мышей. Мышей павших в течение первых трёх сут после заражения вирусом исключают из опыта. Учёт результатов проводят на 14 сут после введения вируса.

На основании полученных результатов рассчитывают реальную летальную дозу (РЛД50) вирулентного вируса тест-штамма "Абсеттаров", введенного иммунизированным животным испытуемой вакциной или стандартным образцом мышам, а также МИД50 (минимальная иммунизирующая доза) для данных вакцин.

1. Определение РЛД50 вируса тест-штамма "Абсеттаров".

РЛД50 вируса, введенная иммунизированным мышам, должна содержать от 100 до 1000 ЛД50/ 0,25 мл. Расчёт проводят по методу Рида и Менча.

Определение реальной дозы вируса тест-штамма "Абсеттаров", использованной для испытания иммуногенности испытуемой серии вакцины или стандартного образца вакцины -