Диагностика хламидийной инфекции ифа

Заболевания, передающиеся половым путем, не только неприятные, но еще и довольно опасные. Одно из самых распространенное из них — хламидиоз. Он может протекать бессимптомно, но при этом нанести большой вред всему организму. Как не пропустить появление совершенно незаметных признаков инфекции и что делать, чтобы избавиться от деликатной проблемы раз и навсегда?

Хламидиоз: что это и когда назначают анализы на выявление инфекции

Инфекционное заболевание, вызываемое бактериями хламидиями (Chlamydia trachomatis) в медицине известно как хламидиоз. Это одно из самых часто встречающихся заболеваний, которые передаются половым путем (ЗППП). Отметим, что Chlamidia trachomatis имеет некоторые свойства, присущие вирусам, поэтому хламидиоз порой трудно диагностировать и лечить.

Когда хламидии попадают в организм человека, они начинают активно размножаться в слизистой и уже через 10 часов внедряются в клетки и разрушают их.

У мужчин хламидии в первую очередь поражают мочеполовую систему — сначала уретру и мочеточники, затем предстательную железу, семенные пузырьки. Далее сценарий развития болезни тот же, что у женщин.

Следует знать, что хламидиоз передается не только половым путем, но и через внешнюю среду, однако такой способ инфицирования крайне редок. Зато ребенок, прошедший через зараженные родовые пути матери, заболевает в более чем половине случаев, также высок риск внутриутробного заражения. Поэтому при планировании беременности врач обязательно назначает анализ на хламидиоз.

Чаще всего на первом этапе хламидиоз протекает бессимптомно. Лишь спустя годы (латентный период может длиться до нескольких лет) возникают первые признаки инфекции — небольшое повышение температуры, интоксикация или слабость. Через десять дней эти симптомы могут исчезнуть и далее появляться редко и в слабовыраженной форме. Бывает так, что хламидиоз дает о себе знать так же, как и многие другие ЗППП: неприятными или даже болезненными ощущениями при мочеиспускании, зудом половых органов. Возможны так называемые стекловидные выделения (у женщин). Если не выявить хламидиоз и не начать его лечить, он вызовет другие заболевания мочеполовой системы, которые легко диагностировать по ярко выраженным симптомам: нетипичные выделения, резкая боль при мочеиспускании, постоянные боли в области половых органов, зуд и жжение.

Если человек обнаружил у себя какой-либо из вышеперечисленных симптомов, необходимо сдать анализ на хламидии. Существует несколько типов анализов, которые отличаются стоимостью и точностью результатов. Диагностировать хламидиоз можно с помощью анализа крови, мочи, слюны, конъюнктивной жидкости, мазка или соскоба из влагалища и шейки матки — у женщин или соскоба из уретры и эякулята — у мужчин. Биоматериал можно исследовать различными методами.

Самый дешевый, быстрый (10–15 минут), но при этом и ненадежный метод выявления инфекции (точность 20–25%) — так называемый экспресс-тест (метод иммунохроматографии). Для его проведения требуется специальная тест-система, которая позволяет визуально оценивать результаты. Приобрести ее можно в аптеке. Метод редко назначается врачом, обычно его выбирает сам пациент, желающий по собственной инициативе выяснить факт инфицирования.

Цитоскопические методы обнаружения хламидий, являясь качественными, назначаются при острой фазе болезни, в случае хронической формы хламидиоза они неэффективны. Анализ заключается в помещении в ацетон или метанол биоматериала (у мужчин это соскоб из уретры, секрет простаты, у женщин — соскобы из влагалища, шейки матки, уретры), хламидия под воздействием реагентов меняет окраску и легко выявляется под микроскопом. Точность метода в части выявления хламидийной инфекции очень невысока — 10–15%. Часто проводится бесплатно в рамках ОМС в виду дешевизны.

Иммуноморфологические методы анализа соскоба с уретры или цервикального канала (прямая и непрямая иммунофлюоресценция) представляют собой обнаружение антигенов хламидий. Показания к назначению: острая или хроническая фаза хламидиоза, бесплодие непонятного происхождения, беременность с ОАА (отягощенный акушерский анамнез — наличие осложнений в предыдущей беременности). Точность анализа невелика — 50%.

Методы иммуноферментного анализа крови применяют для того, чтобы определить фазу заболевания, оценить эффективность проводимой терапии, установить хламидийное происхождение поражений негенитальных органов. Точность исследования — 60%. Показателен лишь через 5–20 дней после инфицирования, когда начнется выработка специфичных антител к хламидии.

Наиболее чувствительным в диагностики хламидиоза на сегодня признан метод полимеразной цепной реакции (ПЦР) . В ходе исследования выявляется ДНК хламидий, что позволяет со 100%-ной уверенностью судить о наличии или отсутствии инфекции. Для анализа требуется соскоб из уретры или цервикального канала (для женщин), секрет предстательной железы и эякулят (для мужчин), осадок мочи, соскоб с конъюнктивы глаз, кровь, слюна. Результаты готовы уже через один-три дня.

Врач (венеролог, уролог, гинеколог) также может назначить микробиологическое исследование , или так называемый посев на хламидии. Особенность анализа в том, что он позволяет не только диагностировать хламидиоз с высокой точностью (до 90%), но и выявить наиболее эффективный антибиотик для лечения инфекции. Так как в ряду перечисленных этот метод наиболее дорогостоящий и трудоемкий (исследование требует не менее 7 дней), его назначают в случае яркой симптоматики хламидиоза или иных факторов, позволяющих врачу оценить риск заражения как высокий, а также для подбора оптимальной терапии.

Для того чтобы результаты были точны и диагноз однозначен, к сдаче биоматериала для анализа нужно подготовиться.

Если вы сдаете на анализ кровь (из вены), то важно это делать натощак, иначе результат может быть искажен. Для большей точности стоит ограничить употребление жирной и жареной пищи за двое суток до пробы, алкоголь лучше исключить вообще. Также в день анализа лучше не курить.

При сдаче мочи требуется отказаться от половых контактов. Лучше собирать первую утреннюю мочу (через пару секунд после начала мочеиспускания).

Если же предполагается взятие на анализ мазка или соскоба, то за два дня до процедуры нужно воздерживаться от половых контактов. За два часа до анализа врачи рекомендуют не ходить в туалет. Женщинам лучше сдавать биоматериал в первый же день после окончания менструации. У женщин берут мазок или соскоб из шейки матки, влагалища и уретры, у мужчин — из мочеиспускательного канала. Иногда на анализ может быть взята семенная жидкость.

Редко для определения хламидиоза врачи назначают анализ синовиальной жидкости — материала в полости сустава, выделяемого синовиальной оболочкой. Чтобы взять эту пробу, делают пункцию локтевых, коленных или иных суставов. Единственная мера подготовки — стерильность сустава.

Однозначно расшифровать результаты сможет только врач (микробиолог, уролог, гинеколог, венеролог). Однако саму методику интерпретации не помешает знать и пациенту.

Как мы уже отмечали наиболее специфичными, точными и часто назначаемыми анализами на сегодня являются методы ИФА и ПЦР. О расшифровке их результатов мы и поговорим далее.

В случае ИФА определяется концентрация антител к хламидии:

сначала — IgM (появляются через 5 дней после инфицирования, пик концентрации достигается к 10-му дню);
после — IgA (обнаруживаются через 10 дней после инфицирования);
далее — IgG (появляются через 15–20 дней после заражения).

Хламидиоз: причины, симптомы и диагностика заболевания.

Что такое хламидиоз и как им можно заразиться?

Хламидиоз - одна из самых распространённых инфекций, передающихся половым путём. Ежегодно в мире регистрируют около 90 миллионов новых случаев хламидийной инфекции.

На сегодняшний день хламидиоз занимает первое место в числе наиболее распространённых бактериальных венерических заболеваний в Российской Федерации (учёт ведется с 1993 года). За период 1993 - 2003 гг. распространённость данной инфекции возросла более чем в 3 раза, и с каждым годом этот показатель становится ещё больше. В России ежегодно урогенитальным хламидиозом болеют свыше 1,5 миллиона человек.

Причиной высокой распространённости хламидиоза является то, что многие больные часто не зная, что они могут быть инфицированы, становятся активными распространителями инфекции. И, конечно, не последнюю роль в быстром распространении хламидий играет ведение беспорядочной половой жизни: частая смена половых партнёров без предохранения. При случайных половых связях заболевание обнаруживается у 60% женщин и у 70% мужчин, хотя однократный контакт с больным не всегда приводит к заражению партнёра.

Следует помнить, что половой путь – это не единственный способ заражения. Передаются хламидии и через инфицированные руки, бельё.

Дети могут заразиться хламидиозом во время родов при прохождении через инфицированные родовые пути, а также внутриутробно. В связи с этим очень важно, пройти обследование на хламидии перед запланированной беременностью, и при выявлении – своевременно пройти курс лечения во избежание неприятных последствий для будущего ребенка.

Существует много разновидностей хламидий, но для человека патогенными являются три вида:

Chlamydophila pneumoniae – инфекция, передающаяся воздушно-капельным путём от инфицированного человека и вызывающая респираторные заболевания;
Chlamydia pneumonia вызывает пневмонию, которая без специальной терапии может долго персистировать в крови и быть причиной длительного кашля;
Chlamydophila psittaci (зооантропонозная инфекция) передается от птиц (часто от домашних попугаев и голубей), вызывает заболевание орнитоз - поражение легких. Chlamydia trachomatis - инфекция, передающаяся от человека к человеку и вызывающая трахому (поражение глаз), конъюнктивит и урогенитальные инфекции, венерическую лимфогранулему. Chlamidia trachomatis - в своем роде уникальный микроорганизм, который обитает внутри живой клетки, подобно вирусу, но по своему строению скорее похож на бактерию. Эта двойная природа, а также способность паразитировать внутри клеток и являются причиной того, что выявить и лечить хламидиоз крайне трудно.

Распространённым сопутствующим заболеванием является урогенитальный хламидиоз.

Восприимчивость к урогенитальному хламидиозу приближается к 100%, и особенно высока она у лиц, страдающих иммунодефицитом любого генеза. Наиболее часто урогенитальным хламидиозом болеют мужчины и женщины в сексуально - активном возрасте – 20-40 лет. Также в связи изменением сексуального поведения отмечен рост заболеваемости хламидиозом среди подростков.

Общепринятой клинической классификации урогенитального хламидиоза не существует. Различают свежий и хронический урогенитальный хламидиоз, наблюдают носительство вируса. Свежий - это неосложненный хламидиоз нижних отделов мочеполового тракта. Хронический – это длительно текущий, персистирующий, рецидивирующий хламидиоз верхних отделов мочеполового тракта, включая органы малого таза.

Выделяют ещё восходящую хламидийную инфекцию, т.е. инфекция распространяется по восходящим путям - от нижнего отдела до верхнего отдела мочеполового тракта.

Путей распространения восходящей хламидийной инфекции несколько:

каналикулярный (через цервикальный канал, полость матки, маточные трубы, на брюшину и органы брюшной полости);
лимфогенный (по лимфотическим сосудам);
гематогенный - о нем свидетельствуют экстрагенитальные очаги поражения: (глотка, суставы).

Особенность течения урогенитальной хламидийной инфекции - в отсутствии каких- либо специфических симптомов и выраженной клинической картины с момента инфицирования. Инкубационный период составляет примерно - 2-3 недели.

Несмотря, на то, что патогенез заболевания до конца не изучен, в нем выделяют следующие стадии:

инфицирование;
формирование первичного очага инфекции;
внутриклеточное размножение, ведущее к развитию воспалительного процесса в пораженных клетках и распространению инфекции (эта стадия характеризуется развернутой клинической картиной заболевания);
органические и функциональные изменения различных органов и систем на фоне развившихся иммунных реакций.

К каким сопутствующим заболеваниям приводит хламидиоз?

Увы, у трети больных хламидийная инфекция протекает совершенно бессимптомно! И за это время человек не только может стать источником заражения, но в его организме ещё и происходят различные осложнения, о которых он порой и не подозревает.

У женщин хламидии могут вызвать уретрит, вестибулит, вагинит, бартоллинит, эндометрит и даже пельвиоперитонит. Кроме того, есть риск развития хламидийного сальпингита (воспаление придатков), вызывающего непрохождение маточных труб и, соответственно, бесплодие.

Хламидиоз может выявляться и у беременных женщин, причем заражение возможно до беременности или во время неё. Наличие данной инфекции у беременных женщин повышает риск угрозы невынашивания, самопроизвольного выкидыша, неразвивающейся беременности, мертворождения, преждевременных родов, несвоевременного излития околоплодных вод, осложнений в родах и послеродовом периоде, а также заражения плода при прохождении через родовые пути.

У мужчин инфицирование хламидиями может привести к уретриту с его непереносимыми частыми позывами к мочеиспусканию, зудом, болью в уретре и гнойными выделениями, простатиту, воспалению яичек (везикулит), эпидидимиту.

Помимо многочисленных осложнений касающихся половых органов, хламидиоз может вызывать поражение других органов и систем: глаз, суставов с развитием реактивных артритов, уретрита.

Какие симптомы возникают при хламидиозе?

Клинические проявления данной инфекции определяют вирулентность (болезнетворность) возбудителя, длительность персистенции хламидий, локализации поражения, выраженность местных и общих реакций организма.

Симптомами острой хламидиозной инфекции являются стекловидные выделения, чаще по утрам, из мочеиспускательного канала, а также возможны боли, рези при мочеиспускании или зуд.

Такие симптомы интоксикации, как слабость и повышение температуры, проявляется в редких случаях. Но чаще всего, хламидиоз протекает бессимптомно. Имеющиеся симптомы могут исчезнуть или периодически проявляться на фоне подавления иммунитета. Таким образом, заболевание приобретает хроническое течение, при этом, возрастает риск поражения все новых систем и органов. Опасность заключается в том, что осложнения, развившиеся вследствие длительного существования инфекции в организме, чаще всего и приводят пациента к врачу.

Как диагностируется хламидиоз?

Очень важное значение при постановке диагноза имеет лабораторная диагностика хламидийной инфекции, поскольку, учитывая чаще всего бессимптомное его течение, только лабораторные методы исследования могут дать верный ответ о наличии хламидиоза в организме.

К самым распространённым и эффективным методом лабораторной диагностики является ПЦР - метод, определяющий специфический участок ДНК хламидий.

Высокая чувствительность ПЦР - метода позволяет выявлять вирус при манифестных, бессимптомных и атипичных клинических формах инфекции, а также и у серонегативных пациентов (когда антитела ещё не определяются) на самых ранних стадиях инфекционного процесса, когда лечение хламидиоза наиболее эффективно.

ПЦР - исследование можно проводить, исследуя и кровь, и выделения из половых путей. Для первичной диагностики, более информативным будет выявление данной инфекции в местах первоначальной локализации, т.е. материалом должны быть выделения из половых путей. У мужчин это может быть как соскоб из уретры, так и исследование эякулята.

Серологический метод исследования - это обнаружение антихламидийных антител в крови. При остром процессе диагностически значимо или обнаружение антител Ig M , или 4-х кратное нарастание титра Ig G в динамике через 2 недели, т.к. иммуноглобулины Ig M образуются в крови сразу после попадания антигенов в организм. Изолированное обнаружение антихламидийных антител не обязательно свидетельствует об инфицированности хламидиозом.

Только одновременное использование двух различных методов, один из которых - ПЦР, дает необходимую точность диагностики хламидиоза и последующего контроля эффективности лечения.

При обнаружении хламидиоза у одного из партнёров (риск заражения партнёра -75-80%) необходимо сдать анализы другим партнёрам, даже в том случае, если у них нет никаких жалоб и симптомов, ведь бессимптомное течение не снижает риска осложнений.

Независимая лаборатория ИНВИТРО предлагает широкий спектр лабораторных исследований, позволяющих выявить хламидиоз на разных стадиях его проявления.

— группа облигатных внутриклеточных паразитов, занимающих промежуточное положение между бактериями и вирусами.

Семейство Chlamydiaceae разделено на два рода: Chlamydia и Chlamydophila:

Род Chlamydia включает виды C. trachomatis, C. muridarum и C. suis, из которых Chlamydia trachomatis является исключительно паразитом человека, а другие два вида вызывают заболевания грызунов и жвачных животных. Различные штаммы C. trachomatis способны вызывать трахому, урогенитальные заболевания, некоторые формы артрита, конъюнктивит и пневмонию у новорожденных.
Род Chlamydophila составляют виды C. psittaci, C. pneumoniae и C. pecorum, Chlamydophila abortus, Chlamydophila caviae и Chlamydophila felis.

Chlamydophila pneumoniae (прежнее название — Chlamydia pneumoniae) является возбудителем заболеваний респираторного тракта у человека, вызывая преимущественно острые и хронические бронхиты и пневмонии.

Chlamydia trachomatis — основной возбудитель одного из самых распространненых заболеваний, передающихся половым путем — хламидиоза. Эта инфекция поражает в основном мочеполовую систему и наиболее часто проявляется у мужчин и женщин после инкубационного периода продолжительностью от 5 до 30 дней, при этом вызывая широкий спектр патологий. Широкое распространение хламидийной инфекции в первую очередь связано с бессимптомным течением заболевания.

Заражение происходит половым путем. Вне половой путь передачи хламидийной инфекции через загрязненные инфицированным отделяемым руки, белье и др. существенного эпидемиологического значения не имеет, хотя его также необходимо учитывать. Четко установлена высокая частота инфицирования хламидиями (более 50%) — новорожденных во время родов при прохождении их через инфицированные родовые пути, а также внутриутробная передача инфекции.

Течение мочеполового хламидиоза вызванного Chlamydia trachomatis очень разнообразно и может принимать абсолютно разные формы. Наиболее коварным является бессимптомное течение инфекции.

У мужчин первично поражается мочеиспускательный канал, а затем и другие органы (предстательная железа, семенные пузырьки, придатки яичек). Среди возможных и опасных осложнений хламидиоза у мужчин — уретриты, хронический хламидийный простатит, кисты предстательной железы.

У женщин поражается канал шейки матки, после чего может возникнуть и восходящая инфекция, захватывающая матку, маточные трубы, яичники и брюшину. Хламидийная инфекция часто поражает шейку матки и мочеиспускательный канал одновременно. Хламидии из мочеиспускательного канала способны проникать в мочевой пузырь, вызывая цистоуретрит. Хламидии, локализующиеся в женских мочеполовых органах, предрасполагают к возникновению патологии беременности.

Хламидии могут явиться причиной поражения:

половых органов (уретрит, простатит, цистит, аднексит, эпидидимит и др.);
внутреннего уха (поражение вестибулярного аппарата и др.);
глаз (хламидийный конъюнктивит);
суставов (болезнь Рейтера);
прямой кишки (хламидийный проктит) и др.

При обостренных формах заболевания наблюдается изменение слизистых оболочек мочеполовых органов, слизисто-гнойные неприятно пахнущи выделения из уретры, влагалища, частые позывы на мочеиспускание, неприятные ощущения в области таза, чувство распирания в промежности, зуд и сильные боли в мочеиспускательном канале.

Так же часто встречаются лица, у которых полностью отсутствуют клинические симптомы выделений из мочеполовых органов. Они не отмечают и не предъявляют жалоб на остальные симптомы. Хламидии у них выявляются только при клинических исследованиях, то есть имеют место случаи носительства хламидийной инфекции.

Совокупность всех современных диагностических методов дает возможность получить полную и наиболее достоверную картину заболевания. Диагноз хламидиза ставится на основании истории болезни, оценки клинических признаков заболевания ианализов на хламидиоз. В связи с тем, что для генитального хламидиоза часто характерно малосимптомное течение, основное значение имеет лабораторная диагностика этой инфекции.

молекулярная диагностика методом ПЦР (ДНК Chlamydia trachomatis (сокоб));
иммуноферментный анализ (антитела IgG к Chlamydia trachomatis, антитела IgМ к Chlamydia trachomatis, антитела IgА к Chlamydia trachomatis).

Лечение хламидиоза проводится по назначению и под контролем врача. Общим обязательным условием является одновременность лечения для обоих супругов или половых партнеров. Прогноз при современном и адекватном лечении благоприятный.

Заключается главным образом в исключении случайных половых связей, соблюдении правил личной гигиены, своевременном выявлении и лечении больных хламидиозом и носителей.

Подробную информацию по ценам и срокам выполнения анализов Вы можете получить по телефонам 7766 (для звонков с мобильных) и +375 (17) 338-88-88

Эти методы основаны на обнаружении растворимого антигена хламидий в исследуемых пробах. Чаще используются наборы реактивов Imx Select Хламидия (Abbott Laboratories) и Chlamydia-antigen Elisa (Medac Diagnostica).

Методика:

Тест Imx Select Хламидия основан на технологии ИФА-анализа на микрочастицах (МИФА) и предназначен для качественного определения липолисахаридного антигена C. trachomatis в эндоцервикальных и уретральных мазках на анализаторе Imx. Данный набор содержит компоненты, полученные из человеческого материала, что обуславливает соблюдение при работе правил биологической безопасности.

Узел проотборник/электрод добавляет микрочастицы в лунку, содержащую образец. Предварительно экстрагированный липолисахаридный антиген (ЛПС) образца связывается с микрочастицами. Аликвота реакционной смеси, содержащей комплексы микрочастиц с ЛПС антигеном, переносится на стекловолокнистый матрикс реакционной ячейки.

Микрочастицы необратимо связываются с матриксом. К матриксу добавляются кроличьи антитела против хламидии. Они связываются с ЛПС антигеном. Биотинилированные козьи анти-кроличьи антитела добавляются к матриксу и связываются с комплексом анти-хламидия/ЛПС антиген. К матриксу добавляется конъюгат щелочной фосфатазы и антител против биотина. Происходит связывание конъюгата с комплексом антиген/ антитело. После удаления не связавшегося материала промыванием к матриксу добавляется субстрат 4-метилумбеллиферилфосфат. Образование флуоресцирующего продукта измеряется в оптическом узле МИФА.

Тест-система Сhlamydia-Antigen-ELISA medac (регистрационное удостоверение Минздрава РФ № 97/128 от 07.02.97 г.) является экономным и в то же время достаточно специфичным и чувствительным методом в рутинной диагностике хламидийной инфекции. Этот тест представляет собой метод твердофазного ИФА-анализа для определения антигенов хламидий. Твердая фаза покрыта хламидийными моноклональными антителами установленной специфичности. Амплификация достигается с использованием технологии полимерной конъюгации, в результате чего происходит фиксация, при которой на каждый связанный участок антигена приходится полимерный комплекс с высокомолекулярным фрагментом.

Кроме того, амплификация выполняется на стадии обозначенного воспроизведения с использованием запатентованной технологии фермент-амплификации. Визуально положительные пробы окрашиваются в желто-оранжевый цвет. Интенсивность окраски пропорциональна количеству антигена хламидии. Точный результат исследования определяют с помощью микроЭВМ, спектрофотометра “Мультискан” или другого аппарата для ИФА при длине волны 492 нм. Образцы дающие значения поглощения выше или равные значению отсекающего поглощения (cut-off), считаются положительными для хламидии. Чувствительность и специфичность ИФ методов соответственно составляет 65-70% и 90-100% . Показания к применению такие же , как и для метода прямой иммунофлюресценции.

Выявление в сыворотке крови антител к липополисахаридному антигену хламидий класов Ig G, Ig A, Ig M с определением их титра позволяет определить стадию заболевания, обосновать необходимость антибактериального лечения и оценить его эффективность.

Показания к выявлению антихламидийных антител классов Ig G, Ig A, Ig M в сыворотке крови методом ИФА:

Определение стадии заболевания:
- острая, первичная;
- хроническая;
- реактивация или реинфекция;
- состояние после реконвалесценции (остаточная серология).
Оценка эффективности проводимого лечения (наряду с исследованием методами ПЦР, культурального посева).
Установление хламидийной этиологии экстрагенитальных поражений (артриты, пневмонии, заболевания глаз).

Тест-системы:

Cравнивая различные диагностические наборы мы рекомендуем использовать тест-систему r-Elisa фирмы MEDAC DIAGNOSTICA (Германия). Регистрационное удостоверение Минздрава РФ №97 от 7.02.97 г. Это иммуноферментные наборы для выявления антихламидийных антител классов Ig G, Ig A, Ig M с определением их количественного титра в сыворотке крови по одной точке. Антиген получен методами генной инженерии. В качестве антигена твердой фазы используется специфические рекомбинантные липополисахаридные фрагменты хламидий, отсутствующие в липополисахаридах других бактерий. Выбирая тест-систему, где в качестве антигена используются липополисахаридные фракции, мы исходили из предположения, что обследуемое лицо может в течении жизни подвергаться инфицированию не только C.trachomatis , но и C.pneumonia , и C.psitacci с выработкой к ним соответствующих антител. Выявление их количественного титра и его динамики является важнейшим показателем эффективности проводимого лечения.

Интерпретация результатов:

В промежутке между пятым и двадцатым днями после появления клинических симптомов заболевания последовательно возникают антитела этих трех классов к специфическому хламидийному липополисахариду. Ig M является маркером острой стадии, он определяется уже через пять дней после начала заболевания. Изменения продуцирования Ig M на определяемое продуцирование Ig A может происходить в течение 10 дней после появления симптомов заболевания. В течение короткого периода могут одновременно присутствовать Ig M и Ig A. В это же время или с небольшой задержкой -- 2-3 недели могут быть определены IgG. Прогрессирование заболевания, переход в хроническую стадию характеризуется появлением Ig A, Ig G- антител.

УВЕДОМЛЕНИЕ

Данная работа написана врачами-профессионалами для врачей-профессионалов.
Она не предназначена для широкой аудитории и не является руководством
для диагностики и тем более лечения каких-либо заболеваний без участия врача.

Клинико-метаболические особенности течения хламидийной инфекции у новорожденных детей: (1)

Современные проблемы диагностики и лечения гонорейной и трихомонадной инфекции: Cовременные проблемы диагностики и лечения гонорейной и трихомонадной инфекции

Серодиагностика хламидиозов. Хлами-IgG-ДС-Tr первая отечественная иммуноферментная рекомбинантная тест-система для выявления антител класса G к Chlamydia trachomatis: Серодиагностика хламидиозов.

Эпидемиологические аспекты хламидийной инфекции: хламидийная инфекция, эпидемиология, обзор.

Диагностика урогенитальной хламидийной инфекции методом полимеразной цепной реакции: хламидиоз, полимеразная цепная реакция.

Состояние иммунной системы у беременных и новорожденных группы высокого риска по внутриутробному инфицированию: Литература

Состояние фетоплацентарной системы при высоком риске внутриутробного инфицирования плода: Литература

Особенности клинического состояния и персистенция Chlamydia trachomatis у детей, перенесших внутриутробную хламидийную инфекцию: Литература

Клинико-микробиологическая характеристика вульвовагинитов у девочек: Литература

Состояние факторов неспецифической защиты организма женщин при хламидиозе: Литература

Структурные характеристики жидкокристаллических фаз секрета предстательной железы при простатите хламидийной этиологии: секрет предстательной железы, простатит, хламидии.

Эндолимфатическая антибиотикотерапия хламидийного уретропростатита : Клиническая характеристика больных.

Актуальные вопросы диагностики урогенитального трихомониаза

Клинико-микробиологическая характеристика вульвовагинитов у девочек: вульвовагинит, хламидиоз, неспецифическая бактериальная инфекция, трихомониаз, бактериальный вагиноз, кандидоз.

Бактериальный вагиноз в детском возрасте: особенности течения и основные принципы лечения: бактериальный вагиноз, анаэробный вульвовагинит, метронидазол, орнидазол, далацин, лечение.

Клинические особенности течения и принципы лечения урогенитального хламидиоза у девочек: детский урогенитальный хламидиоз, вульвовагинт, макролиды.

Азитромицин (сумамед) основные свойства и особенности применения в терапии внебольничной пневмонии: tabfive

Диагностика урогенитальной хламидийной инфекции методом полимеразной цепной реакции: Литература

Внебольничная пневмония: стандарты эмпирической антибактериальной терапии: (1)

Инфекционные болезни (общее учение)

Лабораторная диагностика хламидийной инфекции

Институт аллергологии и клинической иммунологии, Москва Представлены современные данные по микроскопии, иммунофлюоресценции , иммуноферментному методу, полимеразной цепной реакции ( ПЦР ) и культуральному методу, применяющимся в диагностике инфицирования Chlamydia trachomatis. Методы генодиагностики (ПЦР) являются более эффективными по сравнению с традицинными (изоляция хламидии трахоматис в культуре, иммунофлюоресценция, микроскопия, иммуноферментные методы). Недостатком ПЦР могут являться ложноположительные результаты вследствие контаминации ДНК. К ложноотрицательным результатам могут приводить наличие ингибиторов ПЦР в клинических образцах.

Для достоверной диагностики хламидиоза необходим комплекс лабораторных методов, позволяющих выявить возбудителя и стадию заболевания.

Ключевые слова: хламидийная инфекция, диагностика.

Многочисленные клинико-эпидемиологические иссследования свидетельствуют о широком распространении хламидий как возбудителя, передающегося преимущественно половым путем. Chlamydia trachomatis является грамотрицательным паразитирующим микроорганизмом, инфицирующим эпителий слизистых поверхностей урогенитального тракта, носоглотки и конъюктивы глаз и вызывающим их воспалительные заболевания. Эти заболевания имеют тенденцию к хронизации с развитием многочисленных осложнений [2,3,11].

Принято считать, что в 50-80% случаев нарушения репродуктивной сферы у женщин вызваны смешанными инфекциями, среди которых, кроме хламидий, наиболее часто встречаются микоплазмы и уреаплазмы [5,6,7,9].

Длительное бессимптомное течение и множественные неспецифические клинические проявления затрудняют симптоматическую диагностику хламидиоза, в связи с чем основное значение приобретают лабораторные методы исследования[1,13].

Проблема диагностики хламидийной инфекции становится актуальной задачей в связи с изданием Министерством здравоохранения РФ 7 декабря 1993 г. Приказа N 286 "О совершенствовании контроля за заболеваниями, передающимися половым путем (ЗППП)" и 21 февраля 2000 г. Приказа N 64 "Об утверждении номенклатуры клинических лабораторных исследований". Значительное место в Приказе N 286 отведено проблеме хламидийной инфекции, которая, наряду с сифилисом и гонореей , стала приоритетной при проведении комплекса противоэпидемических, организационных и лечебных мероприятий.

Целью настоящей работы является описание наиболее адекватных методов лабораторной диагностики хламидиоза, включенных согласно Приказу N 64 в номенклатуру клинических лабораторных исследований, определение показаний к их применению, интерпретации полученных результатов с клинической точки зрения.

Техника взятия материала

Одним из самых ответственных этапов диагностики хламидиоза является забор материала. Именно этот этап должен проводиться в лечебных учреждениях широкого профиля, в то время как дальнейшая обработка материала должна осуществляться в специализированных лабораториях. При исследовании на хламидии методом заражения культуры клеток перед взятием материала больные не должны принимать в течение месяца антибиотики тетрациклинового ряда; при цитологической методике, в том числе и при использовании моноклональных флюоресцирующих антител, антибиотики не следует применять за две недели до исследования. Перед взятием материала из уретры больные не должны мочиться в течение 1-1,5 часа.

При взятии материала на хламидии следует помнить, что оптимальным для присутствия и размножения хламидий являются определенные участки цилиндрического эпителия мочеполовых путей (передняя уретра на глубине 2,5-4 cм у мужчин, слизистая оболочка цервикального канала матки на глубине 1,5 см у женщин). При взятии материала из шейки матки ключевым моментом является удаление слизистой пробки. От тщательности проведения этой подготовительной процедуры во многом зависит правильность соскоба клеток цервикального канала. Слизистую пробку удаляют ватным тампоном и пинцетом, а затем берут материал специальной щеточкой cervex brush или voba-brush, имеющей ряд преимуществ, так как для получения репрезентативного результата важно присутствие в образце клеток со всей поверхности цервикального канала, зоны трансформации [8].

Достаточно информативным является исследование у мужчин осадка первой порции утренней мочи методом полимеразной цепной реакции (ПЦР).

Забор материала у девочек производится со слизистой оболочки преддверия влагалища, в отдельных случаях - из заднего свода влагалища через гименальные кольца. Объектом исследования на наличие хламидий могут быть смывы со слизистой оболочки глаз, носоглотки, мокрота, бронхоальвеолярный смыв.

Лабораторные методы диагностики хламидийной инфекции

Цитоскопические методы обнаружения хламидий. При цитоскопическом методе одновременно с поиском цитоплазматических клеток-включений Гальбершедтера-Провачека учитывается количество лейкоцитов как показателя воспаления, а также дополнительная информация о наличии сопутствующей бактериальной микрофлоры, дрожжеподобных грибов, трихомонад и т.п.

1. Острая фаза заболевания. Материалом для исследования служат соскобы из уретры у мужчин и уретры и / или цервикального канала у женщин. Материал берут специальными щеточками или ложечками Фолькмана. Выделения из цервикального канала удаляются ватным тампоном. Щеточка вводится в канал на 1-2 см, вращается 15 секунд . Соскобный материал распределяется на предметном стекле, высушивается на воздухе и фиксируется в метаноле или холодном ацетоне. Наиболее популярна окраска по Романовскому-Гимзе. После окраски препараты просматриваются в световом микроскопе, используя иммерсионный объектив (х90). При этом цитоплазма клеток окрашивается в голубой цвет, ядра - в фиолетово-синий, цитоплазматические включения определяются в виде темно-синих или розовых микроколоний на фоне голубой цитоплазмы. На стадии элементарных включений хламидии окрашиваются в розовый цвет, на стадии элементарных телец - в синий.

Цитоскопический метод широко доступен, но эффективен лишь при острых формах инфекции, значительно менее эффективен и информативен при хронических формах заболевания. При урогенитальном хламидиозе частота обнаружения телец Провачека в соскобах уретры и цервикального канала не превышает 10-12 %. Наличие этих телец подтверждает диагноз хламидиоза, однако их отсутствие не исключает наличие инфекции [5].

Иммуноморфологические методы. Эти методы основаны на обнаружении антигенных субстанций хламидий в эпителии и других тканях путем обработки препаратов антителами . Антитела диагностической антихламидийной сыворотки соединены с какой-либо меткой - люминесцирующей (ФИТЦ-антитела) или ферментной (энзим-меченые антитела) [10].

Прямая иммунофлюоресценция (ПИФ). Этот метод предусматривает прямое выявление антигенов хламидий. При люминесцентной микроскопии хламидийные включения определяются в виде образований в клетке эпителия с зеленой или желто-зеленой флюоресценцией на коричнево-оранжевом фоне цитоплазмы клеток. Включения могут иметь зернистую, гомогенную или смешанную структуру.

Показаниями для диагностики хламидийной инфекции этим методом являются:

1. Острая фаза заболевания.

2. Хроническая фаза заболевания.

3. Установление этиологии хронического инфекционного процесса урогенитального тракта.

4. Беременность при отягощенном акушерском анамнезе.

5. Бесплодие неясного генеза.

Диагностическая информативность ПИФ связана с тем, что с ее помощью выявляются не только корпускулярные, но и растворимые антигены хламидий. Этот метод не зависит от возможного изменения тинкториальных свойств микроорганизма в процессе заболевания и лечения. ПИФ-метод является важнейшим скрининговым методом диагностики урогенитального хламидиоза. Его чувствительность и специфичность при использовании моноклональных антител составляет 65-90% и 85-90% соответственно. При оценке результатов следует учитывать, что только показатели флюоресценции внутриклеточных включений могут оцениваться в качестве положительного результата этого теста при использовании поликлональных антихламидийных антител. При использовании моноклональных - результат считают положительным при наличии 10 элементарных телец (ЭТ) в поле зрения или хотя бы одного внутриклеточного включения. Соскобные препараты готовят также, как и для цитоскопических исследований.

Моноклональные антитела отличаются друг от друга по яркости флюоресценции, постоянству выявляемых форм ЭТ и степени специфичности. Для диагностики хламидий этим методом необходим люминесцентный микроскоп.

В целом, метод ПИФ отвечает критериям высокой чувствительности и специфичности, но требует исполнения опытным, компетентным лабораторным работником.

Высококвалифицированная экспертная оценка методом ПИФ редко бывает доступной, поэтому средняя чувствительность его недостаточно высока. Метод недостаточно чувствителен для определения малых количеств ЭТ, то есть может дать ложноотрицательные результаты [5,12].

Непрямой метод иммунофлюоресценции. Непрямой метод иммунофлюоресценции применяют в тех случаях, когда нет в наличии ФИТЦ-конъюгата антихламидийных антител. В этих случаях приготовленный тем же методом, что и для ПИФ препарат из клинических проб обрабатывают вначале антихламидийными антителами, полученными путем иммунизации хламидиями овец, кроликов, мышей или других животных, а затем второй сывороткой, специфичной для вида животного, которое было иммунизировано хламидиями. Антитела второй сыворотки конъюгированы с ФИТЦ. Показания к применению и специфичность данного метода совпадают с ПИФ.

Методы иммуноферментного анализа. Эти методы основаны на обнаружении растворимого антигена хламидий в исследуемых пробах.

Чаще всего в клинической практике применяются наборы реагентов, основанные на методе твердофазного ИФА-анализа для определения антигенов хламидий. Твердая фаза покрыта хламидийными моноклональными антителами установленной специфичности. Амплификация достигается с использованием технологии полимерной конъюгации, в результате чего происходит фиксация, при которой на каждый связанный участок антигена приходится полимерный комплекс с высокомолекулярным фрагментом. Кроме того, амплификация выполняется на стадии обозначенного воспроизведения с использованием запатентованной технологии фермент-амплификации. Визуально положительные пробы окрашиваются в желто-оранжевый цвет. Интенсивность окраски пропорциональна количеству антигена хламидии. Точный результат исследования определяют с помощью микроЭВМ, спектрофотометра "Мультискан" или другого аппарата для ИФА при длине волны 492 нм. Образцы, дающие значения поглощения выше или равные значению отсекающего поглощения (cut-off), считаются положительными для хламидии. Чувствительность и специфичность ИФА методов соответственно составляет 65-70% и 90-100% . Показания к применению такие же , как и для метода прямой иммунофлюоресценции.

Выявление в сыворотке крови антител к липополисахаридному антигену хламидий класов IgG, IgA, IgM с определением их титра позволяет определить стадию заболевания, обосновать необходимость антибактериального лечения и оценить его эффективность.

Читайте также: