Схема вирусологического исследования при вирусных болезнях

Инфекционные болезни — это заболевания, вызванные проникновением в организм бактерий, грибков или вирусов. Самая важная часть диагностики инфекций — это определение возбудителя и его концентрации. Для этих целей используются разнообразные лабораторные методы, которые позволяют выяснить, чем именно и как давно атакован организм, а в некоторых случаях — спрогнозировать эффективность лечения тем или иным препаратом.

Особенности диагностики инфекционных заболеваний

В клинической практике данный тип заболеваний встречается очень часто. Именно они, по данным Всемирной организации здравоохранения, становятся причиной 26% всех смертей. В список самых распространенных инфекционных заболеваний входят инфекционная пневмония и другие воспалительные заболевания дыхательных путей, гепатит, ВИЧ, туберкулез, малярия, воспаления органов половой системы и мочевыводящих путей, гистоплазмоз, ротавирусные инфекционные заболевания, ветряная оспа, герпес, вирус папилломы человека и еще несколько десятков болезней. Хотя бы раз в жизни каждый из нас сталкивается с инфекционными заболеваниями и необходимостью быстрой постановки диагноза.

Все инфекционные болезни делятся на пять типов — прионные, вирусные, бактериальные, протозойные и грибковые поражения. Далее будут рассмотрены последние четыре типа как наиболее распространенные. Разные возбудители иногда могут вызывать одно и то же заболевание. В частности, пневмония может быть результатом как вирусной, так и бактериальной инфекции. Лечение зависит не от проявлений, а от возбудителя болезни. Противовирусные препараты бесполезны в борьбе с бактериями и грибками, антибиотики не действуют на вирусы. Поэтому основная задача лабораторной диагностики инфекционных заболеваний — выявление типа возбудителя.

Способы лабораторной диагностики инфекционных болезней можно разделить на два типа: неспецифические и специфические методы.

К неспецифическим относятся общий анализ крови и исследование соотношения ее белковых фракций, печеночные пробы, общий анализ мочи и кала. Эти методы не дают информации о виде возбудителя, но позволяют узнать, в какой мере болезнь затронула органы и системы организма, что именно в их работе нарушено и насколько далеко зашел процесс.

Специфические — вирусологический и бактериологический методы, микроскопическое исследование возбудителей, анализы на антигены и антитела — направлены непосредственно на обнаружение возбудителя.

Современная медицина располагает множеством методов выделения возбудителей бактериальной инфекции:

Бактериоскопический . Исследуется окрашенный специальным образом мазок.

Бактериологический . Биоматериал высеивается в питательную среду, и через некоторое время специалист исследует колонию бактерий, выросшую в ней.

Биологический . Направлен на определение патогенности микроорганизмов.

Серологический . Выявляет антитела и антигены в сыворотке крови — особые вещества, которые вырабатываются организмом при контакте с возбудителем определенной болезни.

Чаще всего для исследований используют кровь или сыворотку крови, реже — слюну, мочу, кал, клетки эпителия (мазок и соскоб) и другой биоматериал.

В лабораторной диагностике вирусных заболеваний используются:

Вирусологическое исследование . Световая и электронная микроскопия дает возможность выявить наличие вирусных включений и сами вирусы и идентифицировать их.

Серологическое исследование для обнаружения антител и антигенов. Этот метод дает возможность быстро выявить агрессора, как и в случае с бактериальными инфекциями. Для диагностики используются разнообразные способы исследования материала — реакции гемадсорбции, гемагглютинации или метод непрямой иммунофлюоресценции. Имунноблоттинг, в частности, позволяет выявлять антитела сразу к нескольким инфекциям и считается современным и точным диагностическим методом.

Молекулярно-генетические методы . Последнее слово в лабораторной диагностике. Позволяют обнаружить вирус даже тогда, когда его концентрация ничтожно мала — то есть на самых ранних стадиях. Самым известным из этих методов является ПЦР, при которой фрагмент вируса многократно копируется до тех пор, пока специалист не получит достаточно материала для определения типа вируса и его изначальной концентрации.

Для выявления вирусов обычно требуется сделать анализ крови.

Так называют инфекции, вызванные простейшими паразитами, например, амебами. Малярия, амёбиаз, токсоплазмоз, лямблиоз, трихомониаз, сонная болезнь — вот неполный список самых распространенных протозойных инфекций. Лабораторная диагностика таких заболеваний включает в себя следующие методы:

Микроскопический . Простейшие паразиты выявляются путем исследования под микроскопом окрашенных образцов биоматериала. Самый простой и надежный метод для многих возбудителей.

Культуральный . Посев биоматериала в питательную следу для дальнейшего исследования размножившихся простейших. У этого метода есть существенный недостаток: результатов нужно ждать долго, сам процесс может занять не менее 5-6-ти дней.

Серологический . Используют редко ввиду малой информативности.

Аллергический . Также не является распространенным. Кожные аллергопробы делают для того, чтобы подтвердить лейшманиоз и токсоплазмоз. Это вспомогательный диагностический метод.

В качестве биоматериала для исследований в основном используется кровь, иногда — – кал или моча.

Микроскопическое исследование . Препарат окрашивается и рассматривается под мощным микроскопом. Посредством иммунофлюоресцентной микроскопии исследуется проба, помеченная флюоресцеинами — специальным красителем. Наиболее быстрый способ выявления грибка по сравнению с другими методами.

Культуральный . Происходит посев пробы на питательную среду и дальнейшее исследование полученной в результате колонии грибков.

Серологический . Используется для выявления грибковых поражений, однако для микозов он считается не особенно точным.

Гибридизация нуклеиновых кислот . Самый современный способ выявления грибковых инфекций, его применяют для идентификации основных возбудителей системных микозов. Из культуры извлекается РНК и вносится особым способом помеченная молекула ДНК. Если в пробе наличествует один из основных патогенных грибков, ДНК объединится с его РНК, создав легко различимую структуру. Несомненным преимуществом метода является возможность определить инфекцию на самых ранних стадиях.

Биоматериалом для исследований являются клетки кожи, волос и ногтей, клетки слизистых оболочек (мазок или соскоб), мокрота, моча, секрет простаты, сперма, грудное молоко.

Современные методики диагностики инфекций позволяет выявить их на начальном этапе, Чем раньше болезнь будет обнаружена, тем проще ее вылечить. Поэтому сдавать анализы на инфекции желательно регулярно, даже если вы ни на что не жалуетесь и не замечаете никаких перемен в самочувствии.

Пе­ред сда­чей био­ма­те­ри­а­ла для ис­сле­до­ва­ний иног­да тре­бу­ет­ся опре­де­лен­ная под­го­тов­ка. Так, кровь обыч­но сда­ют с ут­ра, на­то­щак, а пе­ред за­бо­ром маз­ка не ре­ко­мен­ду­ет­ся при­ни­мать душ. Эти тре­бо­ва­ния очень важ­ны: они обес­пе­чи­ва­ют точ­ность ре­зуль­та­та, по­это­му узнай­те у вра­ча за­ра­нее о под­го­то­ви­тель­ных ме­рах и точ­но сле­дуй­те всем его ре­ко­мен­да­ци­ям.

ОРВИ и грипп имеют респираторные симптомы и общие. Их можно распознать по катаральным признакам со стороны дыхательных путей и общей симптоматике, характерной для большинства заболеваний.

Современные методы диагностики данной группы заболеваний

Различают несколько видов диагностики, которые различаются по особенностям проведения и методу выявления возбудителя. Это:

• экспресс-методы;
• серологическая диагностика;
• вирусологическая диагностика.

Первая группа - экспресс-методики. Это быстрый способ подтвердить или исключить наличие болезни. Используется метод флюоресценции и ПЦР. Рассмотрим их подробнее.

Изучение флюоресцирующих антител - МФА. Способ основан на определении антигенов к вирусу в эпителиальных клетках носовой слизистой, на конъюнктиве (если есть глазные поражения). Антитела при действии антигена реагируют специфическим свечением, которое легко заметить при микроскопическом исследовании. Этот параметр считается маркером диагностики и является основой для подтверждения результата. Способ имеет диагностическую ценность начиная с 3 и заканчивая 5 днем заболевания. Чувствителен к таким антигенам: вирус гриппа типа А, В, вирус парагриппа, аденовирусы и возбудитель РС-инфекции. Это удобный и быстрый метод, не требующий особых ресурсов, который часто применяется в ходе диагностики.

Метод полимеразно-цепной реакции базируется на основе обнаружения участков нуклеиновых кислот генетического материала вируса и определении их групповой принадлежности по этому критерию. Методика имеет высокую диагностическую ценность, является современным и качественным способом подтверждения заболевания. Считается “золотым стандартом” диагностики, так как не дает ложных результатов и является специфическим для определения конкретных патогенов, широко применяется в стационарных и амбулаторных условиях.

Вирусологические методики основаны на чистом выделении вирусных микроорганизмов и их конкретных штаммов, за чем следует их прикрепление к клеточным культурам в лабораторных условиях. Далее следует определение вида вируса с помощью ПЦР или других реакций. Метод требует значительных ресурсов, довольно длительный и трудоемкий. Его ценность заключается в получении эпидемиологических данных и основе для научных работ. То есть, детальное изучение вируса, частоты его распространения позволяет прогнозировать эпидемическую картину, создавать вакцины. Для исследования берется мазок из носа и носоглотки. Материал пригоден в течении 3-5 дня заболевания. С помощью вирусологических методов можно определить такие возбудители:

Серологические методы диагностики - это ретроспективное исследование, которое дает точные данные относительно стадии процесса, степени активности и типа возбудителя. Используется для эпидемиологических целей.

Для анализа используется сыворотка крови, в которой необходимо определить количество и виды антител. Используется известный антиген вируса. При возникновении реакции с материалом пациента формируются иммунные комплексы антиген-антитело, что подтверждает диагноз. Для диагностики также важен прирост титра антител, для чего используются парные сыворотки.

Результат имеет высокую точность и может определиться даже если все другие методы не дали результата, так как имеет высокую чувствительность. особенно важно использование метода для стертых форм с минимальными клиническими проявлениями. Сыворотки для анализа берутся в начале болезни, а также через 10-14 дней после её завершения. Используется метод для подтверждения наличия в организме таких возбудителей: вирусы гриппа А, В, возбудители парагриппа, аденовирусы и РС-вирусы.

Наличие вируса гриппа можно подтвердить с помощью РТГА - реакции торможения геммааглютинации. Метод основан на свойстве снижения гемагглютинирующих способностях вируса, если в крови есть антитела к нему. Для этого используется кровь с эритроцитами, антиген. Препараты крови берутся парными, в начале болезни, и в период выздоровления. Метод имеет высокую диагностическую ценность, точный и чувствительный.

Виды исследуемого материала и особенности сдачи

Для диагностики используются смывы из носа, мазки из носовых ходов, носоглотки, а также препараты крови.

Забор мазка и смыва проводит медицинский персонал. Он следит за тем, чтобы препараты строго соответствовали должной локализации. Забор проходит в чистых условиях, стерильными инструментами и в стерильную тару. До того, как взять мазки пациента просят высморкаться, чтобы очистить носовые ходы от слизи. Зонд вводится легко, на глубину 2-3 см. Проводится стандартное движение по нижней части носового хода и под раковиной носа. Необходимо, чтобы забор происходит в современной клинике, где есть возможность правильно хранить и транспортировать собранный материал в короткий срок до лаборатории.

Мазок из глотки берется по похожей методике, чтобы затронуть те участки слизистой, на которой скапливается возбудитель. Перед забором необходимо легко прополоскать рот, чтобы взятый материал был чистым. Желательно забирать материал на 3-й день после начал болезни.

Нормы и отклонения от них, расшифровка результатов

Экспресс-тест дает результаты сразу после диагностики, его расшифровка не вызывает трудностей, так как определяет наличие вируса или его отсутствие в организме.

Серологические реакции более сложные и могут расшифровываться по разному: наличие антител класса М говорит об острой стадии процесса, антитела G формируются при хроническом течении.

Сроки готовности результатов

Результаты исследования готовы на 1-2 день после сдачи. Экспресс-тест дает результат сразу. Серологические методы требуют больше затрат времени для сравнения титров антител. Более быстрые методы важны для диагностического процесса, а те, что более затратны - для эпидемиологического и научного исследования.

Скорость диагностики зависит от правильности сдачи препаратов, условий лаборатории, качества реактивов.

Вовремя сданный анализ позволяет точно и быстро определить диагноз. Это - залог правильного и эффективного лечения. Если болезнь запустить, она грозит осложнениями, которые особенно опасны, если у человека грипп. Это актуально для детей, пожилых людей, беременных женщин и лиц с дефицитом иммунной системы, ведь осложнения чаще всего проявляются у них.

Лаборатория АО "СЗЦДМ" предлагает услуги, обеспечивающие комплексное и преемственное лабораторное обследование пациента

Диагностика В медицинских центрах АО "СЗЦДМ" проводят качественные диагностические исследования всего организма

Лечение Наши медицинские центры ориентированы на обслуживание пациентов в амбулаторном режиме и объединены единым подходом к обследованию и лечению пациентов.

Реабилитация Реабилитация - это действия, направленные на всестороннюю помощь больному человеку или инвалиду для достижения им максимально возможной полноценности, в том числе и социальной или экономической.

Выезд на дом Внимание! Действует акция "Выезд на дом - 0 рублей"

Профосмотры АО "СЗЦДМ" проводит профилактические осмотры работников, которые включают в себя - комплексы лечебных и профилактических мероприятий, проводимых для выявления отклонений в состоянии здоровья, профилактики развития и распространения заболеваний.

Взятие и вид материала

1 . Время взятия: взятие материала следует проводить в остром периоде инфекции, а в случае серологических исследований также после 2–4 нед. (с целью выявления динамики изменений концентрации антител).

2 . Вид, способ взятия и транспортировка материала: зависит от клинической формы инфекции и этиологического фактора, а также от используемого диагностического метода →табл. 28.2-1 и ниже.

Таблица 28.2-1. Вид, правила взятия и транспортировки клинического материала для вирусологических исследований

Локализация инфекции a

Материал, инструкция взятия

Наиболее частый этиологический фактор

смывы из носа (раствор Хенкса) или мазок из горла (сделайте взятие тампоном на транспортную систему с раствором Хенкса), сыворотка

аденовирусы, энтеровирусы, вирус гриппа и парагриппа, корь

культивирование, IFA, определение антител

нижние дыхательные пути

мазок из горла — как указано выше

вирус гриппа и парагриппа, риновирусы, RSV

смывы — больной неоднократно полощет горло раствором Хенкса, сыворотка

кожа, слизистые оболочки

содержание пузырей (в закрытом капилляре), соскобы (в пробирке), мазок из шейки матки, выделения из влагалища, кал, сыворотка

HSV, VZV, энтеровирусы

препарат из соскобов, полученный методом Tzanck, IFA, культивирование, PCR, определение антител

высыпания другой морфологии

соскоб с экзантем

энтеровирусы, вирус кори, вирус краснухи, аденовирус, парвовирус В19

культивирование, определение антител, PCR

мазок из горла (сделайте взятие на среду Хенкса), кал, моча

менингит, энцефалит, миелит

мазок из горла (следует сделать взятие тампоном на среду Хенкса)

энтеровирусы, вирус кори

культивирование, PCR, IFA, определение антител в сыворотке и PMR

кал, мазок из ануса (следует сделать взятие тампоном на среду Хенкса)

PMR (1–3 мл в сухую, стерильную пробирку)

HSV, VZV, вирус клещевого энцефалита, арбовирусы, аденовирусы, вирус эпидемического паротита, вирус кори, энтеровирусы

биоптат головного мозга — на практике выполняется исследование PMR

арбовирусы, вирус бешенства, герпесвирусы, JC вирус

микроскопическое исследование, PCR, IFA

мазок из горла (1–3 мл в сухую стерильную пробирку)

электронная микроскопия, EIA, ELISA, LAT

кал (набранный в стерильную сухую пробирку), может быть мазок из ануса (помещен в 2 мл 0,9 % NaCl)

аденовирус 40/41, норовирусы, ротавирусы

сыворотка (5–10 мл крови, взятой натощак в сухую стерильную пробирку с антикоагулянтом, не используйте ватные или корковые пробки, пробки из лигнина)

HAV, HBV, HCV и другие

гистологическое исследование и IFA, PCR, RT PCR, гибридизация

HBV, HCV и другие

гистологическое исследование и IFA, PCR, RT-PCR, гибридизация

мазок из конъюнктивы (сделайте взятие тампоном на среду Хенкса), соскобы роговицы

аденовирусы, HSV, VZV

перикардиальная жидкость, биоптат сердечной мышцы, кал, сыворотка

культивирование, определение антител

a При некоторых системных инфекциях, сопровождающихся виремией, следует сделать взятие мочи (корь, краснуха, CMV) или цельной крови (корь, CMV) с целью культивирования вируса (корь) или выявление его антигенов в лейкоцитах (напр., CMV). С целью диагностики инфицирования HIV следует отправить сыворотку (EIA или ELISA, Western blot).

CMV — цитомегаловирус, HAV — вирус гепатита A, HBV — вирус гепатита B, HCV — вирус гепатита C, HSV — вирус простого герпеса, IFA — метод иммунофлюоресцентного исследования, LAT — латекс-агглютинация, PCR — метод полимеразной цепной реакции, PMR — спинномозговая жидкость (ликвор), RSV — респираторно-синцитиальный вирус, RT PCR — метод цепной полимеразной реакции с обратной транскрипцией, VZV — вирус ветряной оспы и опоясывающего лишая

Методы идентификации вирусов

1 . Электронная микроскопия: позволяет непосредственно выявлять частицы вируса во взятом материале (напр., кал); модификацией метода позволяющей повысить чувствительность является иммуномикроскопия. Доступна лишь в нескольких лабораториях в специализированных центрах. Взятие и транспортировка материала →см. ниже.

2 . Культивирование: позволяет увеличить количество и подтвердить присутствие вирусов во взятой пробе ( мазки берут в транспортную систему со средой для культивирования клеток [раствор Хенкса] или 0,9 % NaCl, жидкость из пузырьков на коже — в закрытом капилляре, образцы тканей, соскобы — в сухих пробирках. Спинномозговая жидкость , смывы , полученные с использованием раствора Хенкса, кал, цельная кровь с гепарином, моча ). Вирус размножают в соответствующих клеточных культурах или в куриных эмбрионах (напр., вирус гриппа), а затем идентифицируют на основе цитопатического эффекта или с использованием специфических антител (выявление антигена) или молекулярными методами. Взятие материала следует осуществлять в чистый, стерильный, плотно закрываемый контейнер без консервантов →табл. 28.2-1. Использование транспортных систем для культивирования бактерий может сделать невозможным выделение вирусов. Образцы тканей следует поместить в небольшом количестве 0,9 % NaCl или раствора Хенкса. Материал следует пересылать в лабораторию при темп. 2–4 °C. Перед культивированием образец можно хранить 3 . Серологические методы: в клинической практике играют основную роль в вирусологической диагностике. Выявляют вирусные антигены в клиническом образце, а также специфические антитела классов IgM и IgG в сыворотке или повышение их титра (обычно ≥4-кратное) в т. н. парных сыворотках (один образец, взятый в острой фазе болезни, а другой — в период восстановления после 2–4 недель).

1) выявление антител (EIA, ИФА (ELISA), вестерн-блот, иммунохроматография);

а) сыворотка (1–2 мл) — без гемолиза, следует сделать стерильный взятие в плотно закрытую пробирку; до 48 ч от взятия хранить и перевозить образцы в условиях холода (5±3 °С); если это невозможно см. переслать как можно быстрее при комнатной темп. (21±4 °С). Если образец будет храниться >48 ч его следует заморозить. Перевозить в условиях, предотвращающих размораживание.

в) спинномозговая жидкость (≈1 мл) — следует сделать стерильный взятие в плотно закрытую пробирку; правила хранения и транспортировки как в случае сыворотки (см. выше). Определение специфических антител в спинномозговой жидкости всегда нужно проводить параллельно с их определением в сыворотке, взятой в это же время.

2) выявление вирусных антигенов (иммунофлюоресценция [IFA], EIA, ELISA, латекс-агглютинация [LAT]):

а) мазок или смывы из носоглотки (с целью идентификации вирусов дыхательной системы, кори и т. п.) — следует сделать взятие стерильным тампоном, увлажнённым 0,9 % NaCl или раствором Хенкса, а затем поместить тампон в плотно закрытой стерильной пробирке с 1–1,5 мл раствора Хенкса. Кончик тампона не должен быть сухим. Материал следует доставить в лабораторию сразу после взятия. При идентификации вирусов дыхательной системы, материалом для исследования могут быть также приготовленные и переданные в лабораторию препараты для микроскопии, фиксированные ацетоном.

б) цельная кровь — следует набрать 6‑10 мл в стерильную пробирку с антикоагулянтом и немедленно отправить в лабораторию;

в) моча — наберите 10–50 мл в стерильный контейнер и отправьте в лабораторию сразу после взятия;

г) кал → табл. 28.2-1; хранение и транспортировка как при культивации;

д) биоптат ткани — сразу после взятия поместите образец ткани в стерильный стеклянный контейнер, между тампонами, увлажненными 0,9 % NaCl. Доставьте как можно быстрее в лабораторию (

4 . Молекулярные методы (выявляют геном вируса или его специфические фрагменты): взятие материала следует произвести в стерильные плотно закрытые пробирки или контейнеры. Вид материала:

1) цельная кровь (≈3 мл) — следует сделать взятие с антикоагулянтом (лучше всего с ЭДТА, не используйте гепарин , который является неспецифическим ингибитором PCR). Если образец доставляется в лабораторию в течение 24 ч, то допустимо транспортировать его при комнатной температуре (21±4 °C), но, если позже (до 5 дней), рекомендуется хранение и транспортировка в холодильнике при темп. (5±3 °С).

2) спинномозговая жидкость (1–2 мл) — после взятия образец следует доставить в лабораторию как можно быстрее, лучше всего — на холоду при темп. (5±3 °С). Если её невозможно доставить в лабораторию в течение 24 ч её следует заморозить и транспортировать в условиях, которые препятствуют размораживанию.

3) сыворотка (2–3 мл) — кровь нужно центрифугировать после взятия как можно быстрее, а сыворотку немедленно отправить в лабораторию (см. спинномозговая жидкость). Если не можете доставить сыворотку сразу после взятия см. действуйте аналогично, как со спинномозговой жидкостью.

4) моча (10–20 мл) — следует сделать взятие из первой струи через 2 ч после последнего мочеиспускания (лучше всего — утром). Образец следует доставить в лабораторию так быстро, насколько это возможно (до нескольких часов можно транспортировать при комнатной темп., если дольше, следует поместить её при темп. 5±3 °С и доставить как можно быстрее).

5) биоптаты тканей (≥0,2 г) — взятие следует выполнить в стерильную пробирку или в контейнер со стерильным 0,9 % NaCl; хранение и транспортировка аналогично моче. При необходимости длительного хранения аналогично спинномозговой жидкости.

6) бронхоальвеолярные смывы (1–2 мл жидкости с БАЛ) — хранение и транспортировка аналогично сыворотке.

Диагностика играет одну из решающих ролей в системе мероприятий по борьбе с болезнями животных вирусной этиологии.

Быстрый и правильно поставленный диагноз обеспечивает успех в ликвидации вспышки болезни, так как позволяет четко выяснить эпизоотическую ситуацию и своевременно принять целенаправленные меры по оздоровлению поголовья животных с наименьшими потерями.

Для постановки диагноза требуются сбор, изучение, анализ и сопоставление целого комплекса различных данных. Поэтому диагноз — это результат кропотливой и вдумчивой работы.

На первом этапе диагностики используют данные, которые можно быстро собрать непосредственно в хозяйстве. К таковым относятся:

эпизоотологические данные, включающие сведения об охвате болезнью данного поголовья животных, скорости и территориальном распространении болезни, видах заболевших животных, динамике выявления больных и т. д.;

клинические признаки болезни. Они включают определение (по сравнению с нормой) температуры тела, частоты и формы дыхания, частоты пульса, нарушения аппетита, поведения, состояния кожных покровов и слизистых оболочек, функционирования органов пищеварения, выделения и т. д.;

патологоанатомические изменения, которые обычно устанавливают при вскрытии павших или вынужденно убитых животных. Различают макроскопические изменения (по сравнению с нормой) формы, размера, цвета, консистенции, появление узелков, кровоизлияний, везикул и другие образования, не встречающиеся в норме, а также микроскопические изменения в клетках и тканях, обнаруживаемые гистологическими методами.

Чаще всего на основании этих данных можно поставить предварительный диагноз, так как многие вирусные болезни имеют сходные эпизоотологические данные, клинические признаки и патологоанатомические изменения (например, парагрипп-3, вирусная диарея, инфекционный ринотрахеит, респираторно-синцитиальная и аденовирусная инфекции крупного рогатого скота или болезни Ньюкасла и грипп птиц и др.).

Кроме того, часто болезнь может быть вызвана не одним, а двумя и более этиологическими агентами (например, вирусом и бактериями или двумя и более вирусами). Даже такое заболевание, как ящур крупного рогатого скота, можно довольно уверенно диагностировать по эпизоотологическим, клиническим и патологоанатомическим данным, однако требуются лабораторные исследования для определения типа и варианта возбудителя.

Несмотря на ориентировочный характер предварительного диагноза, он играет весьма важную роль, так как ориентирует ветеринарных специалистов на проведение соответствующих мероприятий.

Окончательный диагноз на вирусную болезнь в большинстве случаев может быть поставлен только с учетом результатов лабораторных исследований. В лабораторной диагностике вирусных болезней точность диагноза прежде всего зависит от правильности взятия материала (пробы) от больных и павших животных, его транспортировки, качества приготовления и техники исследования вирусного материала.

Материал для исследования следует брать как можно быстрее после проявления четких признаков болезни или не позднее 1—2 ч после клинической смерти или убоя (позже начинается бактериальное обсеменение, и по мере продолжения инфекционного процесса количество вируса может уменьшаться в результате воздействия защитных механизмов организма).

При взятии материала для выделения вируса следует исходить из патогенеза предполагаемой инфекции (входные ворота, пути распространения вируса в организме, места его размножения, клинические признаки и пути выделения). В лабораторию направляют тот материал, который с наибольшей вероятностью может содержать возбудителей болезни. При этом необходимо соблюдать следующие общие правила:

материал должен быть взят строго асептически;

материал должен быть немедленно законсервирован (помещен в термос с охлаждающей смесью или добавлением 50%-ного стерильного глицерина), чтобы предотвратить разрушение вирусов;

материал удобнее брать в стерильные пробирки с резиновой пробкой или во флакончики из под антибиотиков. Для исследования вполне достаточно 5—10 г материала;

на пробирках должна быть не смываемая этикетка; материал направляют с нарочным и сопроводительным письмом, в котором указывают хозяйство, вид больных животных, предварительный диагноз, вид и количество патологического материала, на что следует провести исследование, дату и фамилию врача.

В зависимости от симптомов болезни, а значит, и локализации возбудителя от больного животного может быть взят следующий материал:

смывы со слизистой оболочки носа, глаз, с задней стенки глотки, прямой кишки и клоаки у птиц. Берут их стерильными ватными тампонами, которые погружают в пробирки или флаконы, содержащие 3—5 мл соответствующей жидкости (раствор Хенкса, среды Игла, 199 и др.) с антибиотиками;

содержимое везикул, пустул, стенки везикул, корочки на коже; ^ фекальные массы непосредственно из прямой кишки;

кровь для выделения вируса и кровь для получения парных сывороток крови для обнаружения и определения титра антител. Для этой цели кровь берут дважды у одного и того же животного — в начале болезни и через 2—3 нед, т. е. в начале и в конце болезни.

От трупов патологический материал должен быть взят не позднее 1—2 ч после клинической смерти или убоя животного. В качестве патологического материала берут кусочки органов, которые:

имеют видимые отклонения от нормы;

могут быть поражены и содержать вирус на основании клинической картины болезни;

наиболее часто содержат вирус: селезенка, печень, легкие, почки, головной мозг, лимфатические узлы.

В лаборатории часть материала берут для исследования, оставшуюся часть хранят в холодильнике на случай дополнительных исследований. Затем составляют план исследования присланного материала, который включает следующие задачи: обнаружение (индикация) вируса в материале; выделение (изоляция) вируса из материала; идентификация выделенного вируса;

при необходимости требуется доказать этиологическую роль выделенного вируса;

Если вы нашли ошибку, пожалуйста, выделите фрагмент текста и нажмите Ctrl+Enter.

Читайте также:

• Что может быть если удалить зуб при гриппе
• Кто болел острым гепатитом в
• Мазь от вирусов для грудничков
• Вирус что такое капсомеры
• Реферат методы культивирования вирусов