Ротавирус погибает при заморозке

ИП Мальц Владимир Семенович
ИНН 663001869192

ЖУРНАЛ "ПРАКТИКА ПЕДИАТРА"

О.В. Тихомирова, профессор, ведущий научный сотрудник, руководитель отдела кишечных инфекций ФГУ "НИИ детских инфекций" Росздрава (г. Санкт-Петербург), д-р мед. наук

По оценкам экспертов ВОЗ, практически каждый ребенок в течение первых пяти лет жизни переносит ротавирусный гастроэнтерит, независимо от расы и социально-экономического статуса. Ежегодно ротавирусы вызывают в мире более 137 млн случаев острого гастроэнтерита, из которых до 592 000 заканчивается летально. В России в настоящее время заболеваемость ротавирусной инфекцией постоянно растет, что обусловлено как увеличением случаев инфицированности, так и улучшением диагностики данной патологии.

Возбудителем ротавирусного гастроэнтерита у человека является вирус, входящий в обширный род Rotavirus семейства Reoviridae. Род включает большое количество сходных по морфологии и антигенной структуре вирусов. На современном этапе выделяют семь серогрупп ротавирусов (А, В, С, D, E, F, G), которые объединяют большое число серотипов. Групповые и подгрупповые свойства ротавирусов определяются основным компонентом внутреннего капсида - VP 6. Белки наружного капсида VP4(P - чувствительный к протеиназе) и VP7 (G - гликопротеин) определяют процесс проникновения вируса в клетку, а также клеточный тропизм и вирулентность ротавирусов. Самой многочисленной является серогруппа А, к ней относится большинство ротавирусов человека. Повсеместно распространены только четыре серотипа группы А - P8G1, P8G3, P8G4, P4G2 - которые чаще всего вызывают развитие ротавирусной диареи. Вирусные частицы имеют диаметр от 65 до 75 нм; вирус хорошо идентифицируется при тенеконтрастной электронной микроскопии. Вирион состоит из ядра, включающего в себя геном, представленный двунитчатой РНК, состоящей из 11 сегментов, окруженный двумя слоями белковых оболочек. При проникновении контрастирующего вещества в вирион выявляется электронно-плотный центр диаметром 38-40 нм, который представляет собой так называемую сердцевину, окруженную электронно-прозрачным слоем. Внешний вид вирусных частиц напоминает колесо с широкой ступицей, короткими спицами и четко очерченным ободом, поэтому их и стали называть ротавирусами (от лат. rota - колесо). Вирус высокоустойчив во внешней среде, при замораживании вирус сохраняет многомесячную жизнеспособность, при кипячении быстро погибает.

Эпидемиология. Общепризнанно, что источником инфекции является только человек (больной манифестной формой или вирусовыделитель), в фекалиях содержится огромное количество вирусов (до 1010-1011 вирусных частиц в 1 г). Ротавирусы млекопитающих и птиц в естественных условиях для человека не патогенны. Фекально-оральный механизм передачи реализуется пищевым (молоко, молочные продукты, заменители грудного молока), водным и контактно-бытовым путями. Дискутируется возможность аэрозольного пути передачи. Ротавирусная инфекция (РВИ) может протекать в виде спорадических случаев, групповых заболеваний и массовых вспышек. Спорадические заболевания регистрируются в течение всего года, однако большинство больных выявляется в зимне-весенний период, в отличие от летне-осеннего, характерного для других кишечных инфекций. По нашим данным, 63,9% случаев ротавирусного гастроэнтерита приходилось на зимне-весенний период, 25,8% регистрировались осенью и 10,3% - летом.

Естественная восприимчивость к РВИ очень высокая. Наибольшее число заболевших отмечается среди детей в возрасте от 6 до 18 месяцев, и в первую очередь находящихся на искусственном вскармливании. По нашим наблюдениям дети младше 3 лет составляют 70-80% заболевших. Инфекция регистрируется также и у новорожденных, но не всегда сопровождается у них клиническими проявлениями. Иммунитет после перенесенной инфекции непродолжительный и сероспецифичный.

Патогенез. В последние годы большое внимание уделяется изучению патогенеза РВИ. Установлено, что после попадания ротавирусов в организм в первые сутки он обнаруживается в эпителиоцитах двенадцатиперстной и в верхнем отделе тонкой кишки. Инфицирование ротавирусом зависит от ряда причин: состояния pH желудочного сока (кислая среда губительна для ротавируса), наличия ингибитора трипсина (трипсин является активатором репродукции вируса), количества функционально незрелых энтероцитов. Ротавирусы поражают "зрелый" эпителий микроворсинок, в щеточной каемке которого находятся дисахаридазы, возможно поражение до 2/3 слизистой оболочки тонкой кишки. Проникновение внутрь клетки вызывает повреждение цитоскелета эпителиоцитов и их отторжение. Одновременно ускоряется продвижение эпителиальных клеток от основания крипты к верхушке микроворсинки, появляется пул низкодифференцированных клеток, являющихся функционально незрелыми, что приводит к нарушению выработки дисахаридаз и накоплению избыточного количества негидролизованных углеводов, преимущественно лактозы в просвете кишки. Не всосавшиеся вещества с высокой осмотической активностью, оказавшись в просвете кишки, приводят к нарушению реабсорбции воды, электролитов и развитию водянистой диареи. Поступая в толстую кишку, эти вещества становятся субстратами для ферментации кишечной микрофлорой с образованием большого количества органических кислот, водорода, углекислого газа, воды. Результатом являются повышенное газообразование в кишечнике и снижение рН кишечного содержимого.

В настоящее время большое значение в патогенезе РВИ придается открытию вирусных генов и белков. Были обнаружены гены, которые кодируют структурные (VP3, VP4, VP6, VP7) и неструктурные (NSP1, NSP2, NSP3, NSP4, NSP5) белки. Считается, что белки VP4 и VP7 необходимы для вирусной адсорбции и проникновения в эпителиальные клетки. Белки VP3 и VP7 участвуют в транскрипции вирусной РНК и в возможном исправлении поврежденной вирусной структуры. Доказано, что комбинация VP6 и NSP4 является специфической детерминантой хозяина, то есть определяет морфогенез ротавирусного ответа, а VP7 вызывает основной иммунный ответ со стороны макроорганизма (вируснейтрализация). Появились сообщения о роли NSP4 (одного из неструктурных белков) в развитии ротавирусной диареи: данный белок является специфическим для вируса энтеротоксином, способным вызывать секреторную диарею подобно бактериальным токсинам. Однако в отличие от бактериальных инфекций действие токсинов не приводит к развитию выраженного воспалительного ответа, при РВИ воспалительные изменения в слизистой оболочке кишечника не играют роли в развитии диареи, так как диарея возникает уже при низких уровнях вирусной нагрузки до развития цитопатологических изменений.

Клинические проявления. Инкубационный период РВИ колеблется от 12 часов до 5 дней (чаще 1-2 дня). Клинические проявления характеризуются острым началом, развитием интоксикационного синдрома, симптомов поражения верхних отделов ЖКТ (рвота и диарея) и умеренными катаральными явлениями со стороны верхних дыхательных путей. Температурная реакция обычно не превышает 38-39 °С, лихорадка сохраняется 2-4 дня. Отмечаются симптомы интоксикации: слабость, вялость, снижение аппетита, вплоть до развития анорексии и адинамии при тяжелых формах болезни. Одним из первых, а нередко и ведущим признаком РВИ является рвота. Она появляется одновременно с диареей или опережает ее, носит повторный или многократный характер, но сохраняется в пределах 1-2 дней. Поражение ЖКТ протекает по типу гастроэнтерита или реже - энтерита. Фекалии обильные, жидкие, водянистые, желтого цвета, без видимых патологических примесей, иногда имеется небольшое количество прозрачной слизи. В зависимости от тяжести заболевания кратность дефекации колеблется в пределах от 3 до 20 раз в сутки. Продолжительность диареи - 3-7 дней. Болевой абдоминальный синдром появляется с начала болезни. Боли различной степени выраженности, разлитые или локализующиеся в верхней половине живота, могут быть эпизоды схваткообразных болей. Практически в половине случаев отмечается вздутие живота, урчание по ходу кишечника, метеоризм. У детей младшего возраста обычно выявляют умеренные катаральные явления: заложенность носа, покашливание, зернистость задней стенки глотки, гиперемию небных дужек.

По тяжести течения РВИ подразделяется на легкую, среднетяжелую и тяжелую формы. Тяжесть течения в первую очередь обусловлена развитием синдрома дегидратации. Возможны и атипичные (стертая, бессимптомная) формы, а также носительство ротавируса. Такие случаи встречаются, как правило, у недоношенных и новорожденных детей. Вместе с тем при развитии вспышек с массивным инфицированием у них могут развиться тяжелые формы инфекции, протекающие с резким обезвоживанием, быстро приводящим к неблагоприятному исходу. РВИ в большинстве случаев характеризуется циклическим течением с выздоровлением за 5-12 дней. Вирусовыделение обычно продолжается 8-10 дней, но в отдельных случаях сохраняется до 30-60 дней.

Диагностика. Для подтверждения РВИ используются вирусологические, молекулярно-генетические, серологические методы. Материалом для исследования служат фекалии, рвотные массы, сыворотка крови. Исследования, направленные на обнаружение вируса или вирусных антигенов, желательно проводить в 14-е сутки болезни. Существуют экспресс-тесты для выявления антигенаротавируса в фекалиях на основе иммунохроматографического метода (рота-тест). Для обнаружения генетического материала ротавируса в фекалиях все более широко применяется метод диагностики с помощью ПЦР. В специализированных лабораториях хорошие результаты получены при морфологической идентификации ротавируса с помощью электронной или иммунной микроскопии, или электрофореза в полиакриламидном геле. Наиболее распространенным способом диагностики является обнаружение антигенов ротавируса в фекалиях с помощью ИФА, для этих целей также может использоваться реакция латекс-агглютинации, реакция иммунофлюоресценции, реакция твердофазной коаагглютинации, реакция преципитации. Серологическая диагностика РВИ имеет вспомогательное значение.

Терапия. Основой лечебных мероприятий при ротавирусном гастроэнтерите является патогенетическая терапия. Она включает диетотерапию, оральную регидратацию, инфузионную и дезинтоксикационную терапию. Используются энтеросорбенты (Смекта, Фильтрум-СТИ и др.), пробиотики (Энтерол, Бифиформ, Линекс, Аципол, Ацилакт, Бифидумбактерин форте, Бактисубтил и др.), пребиотики (Дюфалак, Хилак форте), ферменты (панкреатические: Креон, Панцитрат, Панкреатин, Мезим форте; Лактаза). Проводится посиндромная терапия: спазмолитическая, жаропонижающая и т.д.

В настоящее время активно изучается эффективность использования противовирусных препаратов при РВИ. По нашим данным, назначение в острый период заболевания индукторов интерферона (таких как Циклоферон или Анаферон детский) способствует сокращению сроков клинических проявлений РВИ и быстрой санации макроорганизма от вируса. Применение препарата Кипферон оказывает стимулирующее влияние на системный и местный антителогенез, приводит к повышению концентрации интерферонов. В качестве этиотропных средств могут быть использованы Арбидол, Виферон, Комплексный иммуноглобулиновый препарат, Гепон или антиротавирусный иммуноглобулин.

В очаге заболевания проводится комплекс мероприятий, направленных на предупреждение инфекционных заболеваний с фекально-оральным механизмом передачи.

Профилактика. С 1998 года в США у детей с 6-недельного возраста использовалась ротавирусная генноинженерная вакцина RRV-TV, созданная на основе ротавируса штамма макаки-резуса, реассортированного с четырьмя человеческими штаммами. Однако оказалось, что это приводит к повышению частоты инвагинации кишечника (в 1,6 раза), что послужило причиной запрета применения данной вакцины. В настоящее время за рубежом и в нашей стране проходят третью (завершающую) фазу клинические испытания живых аттенуированных вакцин из рекомбинантных штаммов ротавирусов человека и животных для вакцинации детей начиная с 3-месячного возраста.

Заморозка — это один из лучших известных нам способов хранения овощей и фруктов. Она позволяет сохранить их питательные свойства, такие как минералы и витамины, предотвращая при этом порчу продуктов под действием плесени, грибков, бактерий и вирусов.

Оказывается, однако, что не все виды микроорганизмов погибают при низких температурах, а лишь впадают в состояние анабиоза. Наличие бактериальной микрофлоры оказывает существенное влияние на качество замороженных продуктов растительного происхождения, как в технологическом плане, так и в плане безопасности пищевых продуктов. По этой причине в ходе процессов переработки в пищевой промышленности часто требуется проведение процедур, направленных на снижение количества микроорганизмов, находящихся на поверхности растительных продуктов.

Микрофлора растений и её активность

На поверхности растениях присутствует большое количество различных бактерий, которые могут на них воздействовать как в положительную, так и в отрицательную сторону, в зависимости от штамма. В процессах переработки овощей и фруктов особое значение имеют процессы, происходящие уже после сбора урожая, поскольку жизнедеятельность микробов приводит к изменению состава овощей и фруктов. В свою очередь, в следствии этого они коричневеют, становятся дряблыми, мягкими, теряют форму, в них развиваются процессы брожения.

Отличительной особенностью продуктов растительного происхождения является то, что их внутренность с точки зрения микробиологии практически стерильная или же там присутствует незначительное количество микроорганизмов. Инфицирование обычно начинается от поверхности и, как правило, именно на ней достигается наибольшая концентрация микроорганизмов.

Еще одним важным фактом является специфика автохтонной микрофлоры, которая во время роста растений обеспечивает их правильное развитие (например, Lactobacillus, покрывающая зелёные части растений). Она также выполняет другую функцию, а именно, доминируя, защищает поверхность от заселения другими типами бактерий. На фруктах и овощах она в-основном присутствует в виде спор. Это означает, что она не активна вегетативно, а её активация происходит только при контакте с соком поврежденных тканей.

Бактерии почвенного происхождения и микрофлора растений

Почвенные бактерии находятся в тесном соседстве с растением, а доказательством такого симбиоза служит состав ризосферы, то есть прикорневой зоны. Она располагается в радиусе от нескольких до десятка миллиметров от корня, и концентрация микроорганизмов этом слое почвы может быть даже в сто раз выше, чем во внекорневой зоне. Это связано с наличием корневых выделений, которые естественным образом питают микрофлору. Метаболизм этой микрофлоры приводит к повышению биодоступности питательных веществ для растения и защите корней от вредного воздействия паразитов.

С другой стороны, в результате интенсификации сельскохозяйственного производства, удобрения и орошения инфицированной водой, нередко происходят столь значительные нарушения состава почвенной микрофлоры, что в большинстве случаев её можно считать чужеродной.

Тем не менее, можно отметить некоторую систематику заражения почвенной микрофлорой продуктов растительного происхождения: чем выше по отношению к уровню почвы находится культивируемая часть растения, тем менее она заражена почвенной микрофлорой. Таким образом, сильнее всего загрязнены микрофлорой (от 10 5 вплоть до 10 8 колониеобразующих единиц/г) корнеплоды, в то время как на плодах, растущих высоко над землей, отмечается присутствие микрофлоры в пределах от 10 6 до 10 9 колониеобразующих единиц/г бактерий, а также от 10 3 до 10 4 колониеобразующих единиц/г грибов.

Итак, общее количество микроорганизмов на растениях зависит от различных факторов:

Сокращение микрофлоры — достаточно ли заморозки?

К наиболее распространенным патогенным микроорганизмам, присутствующим на растениях относятся:

• бактерии: E. coli., S. aureus, Salmonella, Listeria, Shigiella, Campylobacter jejuni, Campylobacter coli, Yersinia enterocolitica,
• энтеропатогенные вирусы, вызывающие гастроэнтерит: ротавирусы, аденовирусы, норовирусы, астровирусы, саповирусы, коронавирусы и архивирусы.

В ходе процессов переработки растительных продуктов одним из способов их сохранения в неизменном виде и увеличения срока хранения является охлаждение и замораживание. Этот метод также позволяет сохранить высокую питательную ценность овощей и фруктов, которая остаётся тем выше, чем быстрее от момента сбора урожая они будут заморожены.

Следует иметь в виду, что сам процесс заморозки, при том, что эффективно замедляет развитие микрофлоры, лишь незначительно сокращает количество микроорганизмов, присутствующих на поверхности продукта. Более того, существуют множественные данные, подтверждающие, что большинство микроорганизмов при заморозке образует споры, а при попадании в благоприятные условия снова превращается в нормальные вегетативные клетки. Кроме того, ротавирусы после замораживания характеризуются даже более высокой выживаемостью, чем в стандартных условиях, а pH в диапазоне 3—10 является для них благоприятным условиями анабиоза.

Микробиологическое сокращение количества микроорганизмов с использованием дезинфицирующих препаратов

Безопасность для здоровья продуктов растительного происхождения, которые в процессе обработки подвергаются замораживанию, обеспечивается, в частности, благодаря внедрению системы дезинфицирования. Таким образом удаляются микроорганизмы, находящиеся на внешних частях растений, которые могут нанести вред при употреблении в пищу или вызвать порчу продукта. В технологическом процессе для дезинфицирования применяются, например, дезинфицирующие средства, такие как HYSEPTA M1 FG™.

Весь процесс состоит из следующих действий:

• сбор и доставка растений и/или овощей,
• сортировка,
• мойка, чистка и очистка от кожуры,
• нарезка, измельчение,
• бланширование,
• измельчение,
• замораживание,
• фасовка и упаковка,
• транспортировка.

Применение препарата HYSEPTA M1 FG™ рекомендуется на третьем и четвёртом этапах обработки растительных продуктов, то есть при их очистке и измельчении. Дезинфицирующие препараты можно вводить также на этапе заморозки в виде дезинфицирующего покрытия, которое защищает готовые изделия от развития микроорганизмов.

Для начала: промывание

Первым шагом в обработке овощей и фруктов в пищевой промышленности является промывание. Уже на этом этапе может произойти микробиологическое загрязнение в следствие использование для промывания воды, циркулирующей в закрытом контуре. В мойку попадают всё новые и новые порции микробов, смываемые с очищаемых растительных продуктов, которые попадают в благоприятные для развития условия. По этой причине дезинфицирующие препараты добавляются в воду непрерывно, что позволяет замедлить развитие микрофлоры (при концентрации препарата 0,1%) и опустить уровень микробиологического загрязнения ниже уровня загрязнения обрабатываемого продукта (0,2%).

Дезинфекция ножей = безопасное измельчение

Один из наиболее важных этапов в переработке растительной продукции — это этап измельчения. Из данных следует, что в процессе нарезки уровень микроорганизмов в растительной ткани может увеличиваться семикратно. По этой причине необходимо позаботится том, чтобы во время процесса производства ножи дезинфицировались как можно чаще. Для этого используется, например, препарат Hysepta M1 FG™ в концентрации 0,3%, который распыляется или в который погружаются инструменты в зависимости от метода измельчения и конструкции оборудования, а также дезинфицирование перчаток работников.

Дезинфицирующее покрытие – как оно работает?

Замораживание овощей и фруктов может осуществляться по-разному, но к наиболее часто используемым методам относится замораживание в туннельных аппаратах. Сложная конструкция туннельных замораживающих аппаратов затрудняет поддержание их гигиены должным образом, поэтому во время процесса замораживания часто происходит перекрёстное заражение обрабатываемого продукта.

Однако, можно эффективно предотвращать загрязнение микроорганизмами, выполняя опрыскивание поверхности замораживаемого продукта препаратом HYSEPTA M1 FG™ в концентрации 0,2%. Это приводит к образованию на фруктах и овощах покрытия, обладающего дезинфицирующими свойствами. Активность наносимого биоцида снижается в зависимости от времени и температуры, в соответствии с данными, указанными в технической документации препарата.

Дезинфицирующие свойства наносимого покрытия обусловлены взаимодействием трёх факторов:

• модификация химического состава поверхностипродукта — доказано, что чёрный аспергилл при доступности глюкозы погибает при температуре -2 o C, тогда как тот же штамм при наличии 40% раствора глюкозы погибает только при -20 o C. По этой причине нарушение химического состава поверхности продукта снижает устойчивость микроорганизмов к заморозке,
• увеличение давления молекулярного кислорода до 0,35 бар, то есть выше пределов оптимального для микрофлоры давления, составляющего 0,12 бар,
• атака надмолочной кислоты на клеточные структуры: клеточную стенку, клеточные белки, функциональные ферменты и нуклеиновые кислоты.

Распыление дезинфицирующего препарата — способ поддержания чистоты воздуха

Законодательные нормы о надлежащей гигиенической практике для плодоовощной отрасли требуют поддержание чистоты воздуха в зоне упаковки в пределах 200 колониеобразующих единиц/10л воздуха, включая мезофильную кислородную микрофлору. В то же время необходимо соблюдать условие уровня наличия грибков. Их уровень не может превышать 15% от общего количества всех микроорганизмов.

Для обеспечения надлежащей чистоты воздуха в упаковочных цехах используется распыление в воздухе дезинфицирующего препарата, которое эффективно очищает воздух от вредных микроорганизмов. С этой целью рекомендуется осуществлять распыление 1% раствора препарата Hyspeta M1 FG™ каждый день после завершения производства.

Дезинфекция ростков

Продуктом, особенно уязвимыми к заражению микроорганизмами, являются ростки растений. Заражение ростков в основном обусловлено наличием на прорастающих семенах микрофлоры. По этой причине следует дезинфицировать сами зёрна, чтобы достичь удовлетворительной микробиологической чистоты после прорастания. Для этой цели рекомендуется использовать препарат Hysepta M1 FG™ в концентрации 0,2% на начальной фазе замачивания зерна. Такой процесс дополнительно приводит к микробиологической стабилизации воды, используемой для прорастания. После завершения процесса прорастания для большей уверенности ростки следует промыть с использованием 0,15% раствора дезинфицирующего препарата.

О чём следует помнить при проведении антибактериальной обработки?

Эффективное удаление микроорганизмов требует включения в состав дезинфицирующих препаратов ингредиентов, которые могут влиять на обрабатываемые растительные продукты. В связи с этим следует строго соблюдать рекомендованные дозы препаратов, что позволит избежать негативных последствий в результате передозировки. Например, препарат HYSEPTA M1 FG™ является окислителем, и применение слишком большого его количества может привести к деградации красителей и клеточных структур в овощах и фруктах. Кроме того, следует помнить, что использование антибактериальных препаратов нельзя рассматривать как заменитель надлежащей практики на производственном объекте. Однако оно может служить эффективным дополнением таких практик и систем обеспечения безопасности пищевых продуктов.

Читайте также:

• Гепатит с если не лечить какие последствия могут быть
• Кто сколько болел вирусным конъюнктивитом
• Какие сыры можно есть при гепатите с
• Можно ли ставить прививку от гриппа если есть температура
• Течение беременности и родов при гриппе

Пожалуйста, не занимайтесь самолечением!
При симпотмах заболевания - обратитесь к врачу.