Менструальная кровь на микобактерии туберкулеза

Туберкулез - хроническая инфекция с длительным периодом выделения возбудителя, многообразием клинических проявлений, поражением различных органов и систем - представляет непростую задачу для лабораторной диагностики. Молекулярно-биологические методы (ПЦР) используются для выявления, видовой дифференциации и определении лекарственной устойчивости микобактерий туберкулезного комплекса.

Ввиду биологических особенностей возбудителя и иммунного ответа человека диагностика туберкулеза не может ограничиваться каким-либо одним методом и должна проводиться комплексно.

Возбудители туберкулеза могут быть обнаружены в различных биоматериалах, природа которых определяет выбор наборов реагентов для экстракции ДНК. Ключевой принцип выбора биоматериала для диагностики туберкулеза методом ПЦР: необходимо выбирать биоматериал, соответствующий клинической форме туберкулезной инфекции.

Например, для диагностики туберкулеза мочеполовой системы нужно исследовать мочу или менструальную кровь, рекомендуется также исследовать биоптаты из подозрительного очага. Для диагностики туберкулеза легких используется мокрота, бронхо-альвеолярный лаваж.

Реагенты и оборудование для предобработки биоматериалов и экстракции ДНК

Наборы реагентов для экстракции ДНК из мокроты, бронхо-альвеолярного лаважа, мочи, синовиальной жидкости и смывов с объектов окружающей среды	АмплиПрайм ДНК-сорб-В и АмплиПрайм РИБО-преп
Реагент для разжижения мокроты и синовиальной жидкости	Муколизин
Набор для экстракции ДНК, используемый при исследовании биоптатов (легкие, лимфатические узлы, почки, печень, мозг, селезенка)	ДНК-сорб-С
Оборудование для гомогенизации биоптатов	TissueLyser LT или TissueLyser II
Парафиновые блоки нарезают на микротоме или вырезают фрагмент ткани одноразовым скальпелем, а затем проводят экстракцию ДНК, например, с помощью набора реагентов QIAamp DNA FFPE Tissue Kit (50)	QIAamp DNA FFPE Tissue Kit (50)

Наборы реагентов для ПЦР-диагностики туберкулеза

Применение молекулярно-биологических методов (в частности, выявление ДНК методом ПЦР) в диагностике туберкулеза регламентировано Приказом Минздрава РФ от 21.03.2003 № 109 "О совершенствовании противотуберкулезных мероприятий в Российской Федерации" (ред. от 29.10.2009).

Выявление микобактерий туберкулезного комплекса

Микобактерии туберкулеза выявляются без видовой дифференциации; микобактерии, не относящиеся к MTC (например, M.avium и M.paratuberculosis) - не выявляются. Данный набор реагентов используется в топической диагностике туберкулеза и позволяет быстро (за несколько часов) с высокой чувствительностью и специфичностью (близким к 100%) определять наличие микобактерий туберкулеза в образце биоматериала.

Благодаря высокой скорости и информативности в диагностике туберкулеза, методы амплификации нуклеиновых кислот (в том числе ПЦР) в 2010 году были предложены CDC США для подтверждения диагноза туберкулеза наряду с культуральным методом.

Видовая дифференциация микобактерий туберкулеза методом ПЦР

С этой задачей позволяет справиться набор реагентов АмплиСенс® МТС-diff-FL, предназначенный для дифференцирования видов микобактерий туберкулеза внутри MTC: человеческого (M.tuberculosis), бычьего (M.bovis) и вакцинного штамма (M.bovis BCG) – в клиническом материале и культурах микроорганизмов.

Актуальность видовой дифференциации определяется, например, тем, что разные виды микобактерий отличаются профилем лекарственной устойчивости. Например, M.bovis и её вакцинный штамм M.bovis BCG отличаются природной резистентностью к одному из основных противотуберкулезных препаратов - пиразинамиду. Поэтому при туберкулезе, вызванной M.bovis, и БЦЖите пиразинамид не назначается.

Приказом Минздрава РФ от 21.03.2003 № 109 "О совершенствовании противотуберкулезных мероприятий в Российской Федерации" (ред. от 29.10.2009) регламентировано применение наборов реагентов, дифференцирующих M.bovis от ее вакцинного штамма M.bovis BCG, для диагностики БЦЖита.

Определение лекарственной устойчивости туберкулеза

Распространение штаммов туберкулеза с лекарственной устойчивостью, в том числе с множественной лекарственной устойчивостью (МЛУ, или MDR) составляет одну из серьезнейших проблем современного здравоохранения. Определение лекарственной устойчивости туберкулеза с помощью молекулярно-биологических методов всё шире применяется ввиду высокой скорости получения результатов (1-2 дня), что становится возможным благодаря использованию не только первичной культуры, но и непосредственно клинического материала.

Важно понимать, что наборы реагентов, основанные на разных молекулярно-биологических методах, характеризуются разными показателями диагностической чувствительности и специфичности.

Наименование набора реагентов	АмплиСенс® MTC-Rif-Seq	АмплиСенс® MTC-PZA-Seq
Исследуемый ген	rpo B	pnc A
Препараты, к которым определяется устойчивость	рифампицин	пиразинамид
Кол-во выявляемых мутаций	более 200	более 500

Наборы включают реагенты для амплификации фрагментов ДНК микобактерий туберкулеза, очистки продуктов амплификации (сорбентным методом), определения концентрации очищенного продукта амплификации и праймеры для секвенирования. Наборы для экстракции ДНК (АмплиПрайм РИБО-преп или ДНК-сорб-С ) и реагенты для проведения реакции секвенирования приобретаются отдельно.

Нормативные документы, публикации, информационные материалы >>

Добрый день! Определение ДНК микобактерии туберкулеза в крови методом ПЦР не используется в качестве диагностического метода, подтверждающего или исключающего инфицирование возбудителем туберкулеза. Данный тест, как и определение ДНК палочки Коха в другом биологическом материале методом ПЦР (мокрота, менструальная кровь, моча, биоптаты лимфатических узлов и др.), предназначен для уточнения диагноза в случае обнаружения очаговых изменений в органах дыхания и наличии соответствующих жалоб, диагностики диссеминированных форм инфекции, уточнения локализации процесса и выявления активных бактериовыделителей при уже установленном диагнозе туберкулеза. В соответствии с Клиническими рекомендациями по диагностике и лечению туберкулеза (2016 г.) для исключения\подтверждения инфицирования БК (инфицирование и заболевание – не одно и то же) в настоящее время применяются проба Манту с двумя туберкулиновыми единицами (ТЕ), проба с аллергеном туберкулезным рекомбинантным (Диаскинтест), тесты освобождения гамма-интерферона (IGRA-тесты). Данные исследования в Лаборатории ИНВИТРО не проводятся.

Хороший ответ 7

То есть данный метод ПЦР не является информативным, в качестве диагностики.

Хороший ответ 3

Вы живы. Так что, исходя из рассуждения многих философов, Вы уже 100% смертельно больны, ибо бессметрие пока наукой не доказано. Все остальное - гадание на кофейной гуще, так как практически любой симптом изначально может иметь разную этиологию.

Хороший ответ 3 4

Анализ крови на группу и резус не принципиально, в каком состоянии сдавать - натощак или после еды. Они наследственно обусловлены и неизменны в течение всей жизни.

Хороший ответ 1 8

Анализ на ВИЧ достаточно достоверен:

ИФА 3 поколения — через 12 недель от предполагаемого риска;

ИФА 4 поколения — через 6 недель от предполагаемого риска, в случае достоверного контакта с биоматериалом с ВИЧ - через 12 недель.

Подробней читать:

А можно ли узнать есть ли ВИЧ-инфекция без анализов?

Хороший ответ 2

Бесплодием называется отсутствие беременности в течение 1 года регулярной половой жизни без контрацепции. Обследование необходимо в первую очередь для того, чтобы определить причины бесплодия и устранить их. Если же Вы хотите исключить бесплодие ДО того, как начнете планирование беременности, то оптимально будет начать со спермограммы супруга. Если там все Ок, то следующий шаг - узи органов малого таза, анализ крови на лг, фсг, АМГ, тестостерон, ТТГ, пролактин. Если все в порядке - Можно планировать зачатие. По показаниям проводится гистероскопия, а также проверка проходимости маточных труб

Хороший ответ 8

Если говорить о ранней диагностике раковых заболеваний, то одного единственного анализа не существет. В настоящее время ученные нашли биохимические маркёры крови, при повышении которых можно говорить о высокой вероятности выявления рака в том или ином органе. Если говорить на обывательском - не медицинском уровне, то важно понимать, что существует различные ткани, которые состоят и собственных, не похожих на другие, клеток. Так сердце строится из клеток сердца (кадиомиоциты),печень - из клеток печени (гепатоциты), мозг -из нейронов, кости - из остеоцитов и т.д. Важно понимать то, что рак может развиться из каждой отдельной ткани и он будет иметь различное клеточное строение, а значит для его диагностики нужны различные специфические маркеры, соответствующие тому или иному типу ткани. Именно поэтому нет на свете какого-то одного лабароторного анализа, по результатам которого можно диагностировать рак.

Если у человека есть предрасположенность к возникновению того или иного онкологического заболевания (допустим раком желудка болел отец, т.е. есть какая то генетическая связь), то есть смысл целенаправленно наблюдаться у соответствующего врача, который будет сам назначать периодичность различных анализов, способных выявить какую-то онкологию.

Невозможно ответить на то, как часто нужно сдавать эти анализы. Приведу пример. Существует такая разновидность рака, как рак шейки матки. Пик этого заболевания в популяции происходит в 32-35 лет и 60-65 лет. Вот именно пациенток с вышеобозначенным возрастом и следует держать на особом контроле.

Как видите, нюансов чрезвычайно много и на сегодняшний день медицина не дошла до таких высот, чтобы однозначно ответить на Ваш вопрос.

Исследование для выявления возбудителя туберкулеза (Mycobacterium tuberculosis), в ходе которого с помощью метода полимеразной цепной реакции в реальном времени (РТ-ПЦР) определяется генетический материал (ДНК) микобактерии в образце биоматериала.

Туберкулез, микобактерии туберкулеза, палочка Коха.

Tuberculosis, Tubercle bacillus, Koch's bacillus.

Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Биоптат, венозную кровь, ликвор, мокроту, плевральную жидкость, первую порцию утренней мочи, эякулят.

Общая информация об исследовании

Туберкулез (от лат. tuberculum – "бугорок") – инфекционное заболевание человека и животных, передающееся преимущественно воздушно-капельным путем. Риск заразиться повышает подавление иммунитета, вызванное ВИЧ/СПИДом, диабетом, заболеванием почек, трансплантацией органов и применением иммуносупрессоров, беременностью, старением. Кроме того, наиболее подвержены ему те, кто контактирует с больными туберкулезом, а также дети до 5 лет после виража туберкулиновой пробы. К наиболее уязвимым группам населения относят бездомных, заключенных, мигрантов из стран с высокой заболеваемостью туберкулезом, наркопотребителей, а также пожилых людей.

Для данного исследования используется тест-система, основанная на выявлении геномной ДНК возбудителя туберкулеза с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР) в режиме реального времени (реал-тайм ПЦР). В современной диагностике это один из самых быстрых, универсальных и высокочувствительных методов.

Стандартные способы обнаружения микобактерий туберкулеза базируются на выращивании патогенных микроорганизмов в питательной среде. Сложности связаны с низкой скоростью роста колоний Mycobacterium tuberculosis – необходимо ожидать до 1,5 месяцев после взятия материала.

Высокой чувствительностью и специфичностью обладают молекулярно-биологические методы, основанные на детекции генетического материала микобактерий туберкулеза. Их важнейшим преимуществом является высокая скорость получения результата. Использование ПЦР реал-тайм позволяет выявить возбудитель туберкулеза уже в день получения клинического образца.

Бактериемия (попадание в кровь пациента микобактерий) может возникать на ранних стадиях туберкулезной инфекции, а также при развитии генерализованного или внелегочного туберкулеза. Она опасна тем, что иммунный ответ на бактерии вызовет сепсис и септический шок, чреватый смертью. Риск развития генерализованного туберкулеза наиболее высок у пациентов с ВИЧ на поздних стадиях, у тех, кто прервал противотуберкулезную терапию, а также у не обратившихся вовремя за медицинской помощью при появлении симптомов туберкулеза.

Диагностика туберкулеза у ВИЧ-инфицированных затруднена из-за иммуносупрессированного состояния организма, что зачастую проявляется в ложноотрицательных результатах туберкулиновых реакций и микробиологических тестов. В связи с этим тестирование на Mycobacterium tuberculosis методом ПЦР реал-тайм имеет большое значение.

Для чего используется исследование?

Для диагностики туберкулеза легких (в частности, его генерализованных и внелегочных, связанных с бактериемией, форм), и контроля за его лечением.

Когда назначается исследование?

При подозрении на внелегочный туберкулез.
При симптомах бактериемии на фоне туберкулезной инфекции: повышенной температуре тела, потливости и пр. (при небольшом количестве бактерий в крови бактериемия может протекать бессимптомно).
Если у пациента был длительный контакт с больным туберкулезом.
При ненормальной реакции на туберкулиновую пробу у детей.
Когда у пациента ВИЧ-инфекция.

Что означают результаты?

Референсные значения: отрицательно.

Наличие возбудителя в исследуемом биоматериале. Это обычно встречается при активной форме туберкулеза, требующей лечения. Выявление большого количества микобактерий чаще всего указывает на внелегочную форму туберкулеза либо генерализацию инфекции.

Возбудителя туберкулеза не выявлено. Бактериемия отсутствует.

Что может влиять на результат?

Эффективная противотуберкулезная терапия со временем приводит к исчезновению микобактерий в клиническом материале.

Для назначения корректной схемы лечения при выявлении у пациента туберкулеза необходимо провести тест на чувствительность микобактерий к противотуберкулезным препаратам.

Кто назначает исследование?

Врач общей практики, терапевт, фтизиатр, уролог, гинеколог, инфекционист.

Изобретение относится к области медицины, а именно к диагностике внелегочных форм туберкулеза. Цель изобретения - повьшение точности.способа за счет более полного выявления микобактерий в пробах. Полученный материал (менструальная кровь, соскоб эндометри я) помещают в химические пробирки, добавляют в качестве гемолизатора 5%-ный раствор лимоннокислого натрия и толуол из расчета 0,25 мл на 1 мл пробы соответственно, затем на полученную смесь воздействуют ультразвуком при плотности мощности 5 Вт/см при экспозиции 5-6 мин. Из осадка и флотационного кольца готовят мазки, окрапшвание люминофором проводят по Хагемону. 1 з.п. ф-лы. i (Л

Н АВТОРСКОМ,Ф СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (21) 3833482/28-14 (22) 29. 12.84 (46) 30.01.87. Бюл. № 4 (71) Казахский научно-исследовательский институт туберкулеза (72) А.P.Ãîëóáoâà, О.А.Алимбекова, М.Я.Благодарный и Л.К.Калиева (53) 616-0.88.8 (088.8) (56) Благодарный Я.А., Еремин Ю.П.

Выявление микобактерий туберкулеза при помощи ультразвука. вЂ” Тезисы докл.

1-й научной конференции "Ультразвук в физиологии и медицине", 1972,11, 172.

Ященко Т.Н., Мечева И.С. Руководство по лабораторным исследованиям при туберкулезе. M. Медицина, 1973, с. 260.

„.,su„„ и цц 4 С 01 N 1/28 А 61 В, 1О ЯО (54) СПОСОБ ВЬИВЛЕНИЯ МИКОБАКТЕРИИ

ТУБЕРКУЛЕЗА В МЕНСТРУАЛЬНОИ КРОВИ И

СОСКОБАХ ЭНДОМЕТРИЯ (57) Изобретение относится к области медицины, а именно к диагностике внелегочных форм туберкулеза. Цель изобретения вЂ” повышение точности-способа за счет более полного выявления микобактерий в пробах. Полученный материал (менструальная кровь, соскоб эндометрия) помещают в химические пробирки, добавляют в качестве гемолизатора 57-ный раствор лимоннокислого натрия и толуол из расчета 0,25мл на 1 мл пробы соответственно, затем на полученную смесь воздействуют ультразвуком при плотности мощности

5 Вт/см при экспозиции 5-6 мин. Из осадка и флотационного кольца готовят мазки, окрашивание люминофором проводят по Хагемону. 1 з.п. ф-лы.

Техред Л.Сердюкова, Корректор В.Бутяга

Заказ 7704/41 Тираж 776 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, r. Ужгород, ул. Проектная, 4

Изобретение относится к медицине, а именно к диагностике внелегочных форм туберкулеза.

Цель изобретения вЂ” повышение точности способа за счет более полного выявления микобактерий в пробах.

Способ осуществляют следующим образом.

Полученный материал (менструальная кровь, соскоб эндометрия) помещают в химические пробирки, добавляют в качестве гемодизатора 5Х-ный раствор лимоннокислого натрия из расчета

0,25 мл на 1 мл пробы и толуол из расчета 0,25 мл на 1 мл пробы, затем на полученную смесь воздействуют ультразвуком .при плотности мощности

5 Вт/см при экспозиции 5-6 мин.

Из осадка и флотационного кольца готовят мазки, окрашивание люминофором проводят по Хагеману.

Предлагаемый способ в 6 раз повышает выявляемость микобактерий туберкулеза вментруальной крови и соскобах !

33 2 эндометрия при туберкулезе женских половых органов.

1. Способ выявления микобактерий туберкулеза в менструальной крови и соскобах эндометрия путем приготовления мазков, окраски люминофором и вы-! явлении бактерий туберкулеза по люминисценции клеток, отличающийся тем, что, с целью повышения точности способа за счет более полного выявления микобактерий в пробах, до окраски люминофором в пробу добавляют 5Х-ный раствор лимоннокислого натрия и толуол из расчета 0,25 мл на 1 мл пробы соответственно, далее на пробу воздействуют ультразвуком при этом мазки готовят из осадка и флотационного кольца, а окраску люминофором проводят по Хагемону.

2. Способ по п.1, о т л и ч авЂ” ю шийся тем, что воздействие ультразвуком осуществляют при плотно. сти мощности 5 Вт/см и экспозиции

Туберкулез

Выбор, предобработка биоматериалов.

Выявление микобактерий туберкулезного комплекса

Набор реагентов АмплиСенс® МТС-FL предназначен для обнаружения ДНК микобактерий туберкулеза – Mycobacterium tuberculosis complex (MTC), включающий в себя виды микобактерий разной степени вирулентности, вызывающих туберкулез у человека (M.tuberculosis, M.bovis, M.africanum, M.microti, M.canetti, М.pinipedii). Данный набор реагентов используется в топической диагностике туберкулеза и позволяет быстро (за несколько часов) с высокой чувствительностью и специфичностью (близким к 100%) определять наличие микобактерий туберкулеза в образце биоматериала. Благодаря высокой скорости и информативности в диагностике туберкулеза, методы амплификации нуклеиновых кислот (в том числе ПЦР) в 2010 году были предложены CDC США для подтверждения диагноза туберкулеза наряду с культуральным методом.

Видовая дифференциация микобактерий туберкулеза методом ПЦР

Не менее важно дифференцирование до вида внутри группы MTC. Это связано с необходимостью определения источника заболевания, определения тактики противотуберкулезной терапии, а также для подтверждения случаев поствакцинальных осложнений. С этой задачей позволяет справиться набор реагентов АмплиСенс® МТС-diff-FL, предназначенный для дифференцирования видов микобактерий туберкулеза внутри MTC: человеческого (M.tuberculosis), бычьего (M.bovis) и вакцинного штамма (M.bovis BCG) – в клиническом материале и культурах микроорганизмов.

Взятие, транспортирование и хранение исследуемого материала.

Бронхо-альвеолярный лаваж (БАЛ) или промывные воды бронхов (ПВБ), ликвор собирают в одноразовые плотно завинчивающиеся емкости из полипропилена (во избежание адгезии клеток на внутренней поверхности емкости) объемом не менее 5 мл.
Мокроту, мочу (среднюю порцию) собирают в одноразовые градуированные завинчивающиеся емкости с широким горлом объемом не менее 50 мл.
Кровь, плевральную жидкость собирают в пробирки типа Vacuetteâ с раствором или напылением ЭДТА. Закрытую пробирку с материалом несколько раз переворачивают, чтобы перемешать консервант. Для анализа используют цельную кровь, собранную у пациента утром натощак.
Менструальную кровь собирают с помощью колпачка Кафка, собранную кровь переносят в сухую одноразовую пробирку.
Синовиальную жидкость собирают в сухую одноразовую пробирку.
Секрет предстательной железы получают одним из двух способов: а) После окончания массажа предстательной железы ее секрет собирают в одноразовую стерильную пробирку объемом 1,5 мл; б) При невозможности получить секрет – сразу после массажа собирают первую порцию мочи (в которой содержится секрет предстательной железы).
Тканевой (биопсийный и операционный) материал помещают в пробирки типа Vacuetteâ с напылением раствора ЭДТА или в одноразовую пробирку, содержащую 0,2 мл стерильного физиологического раствора.
Культуры микроорганизмов, выросшие на селективных для микобактерий туберкулеза питательных средах.
Смывы с объектов окружающей среды берут зондами с тампонами, смоченными стерильным физиологическим раствором. Площадь смыва с плоской поверхности составляет 5-10 см2. Рабочую часть зонда с тампоном помещают в пробирку объёмом 1,5 мл с 0,5 мл стерильного физиологического раствора, верхнюю часть зонда отламывают и удаляют.

Хранение материала (в случае отсроченного выполнения анализа, резервирования материала для возможной перестановки, а также хранения архивных образцов) возможно по следующей схеме: предполагаемое хранение в течение 3 суток (кроме мочи) – допускается температура от 2 до 8 °С; хранение не более 1 года - допускается температура не выше минус 16 °С; архивирование образцов на срок более 1 года – температура не должна превышать минус 68 °С. Мочу хранить при температуре от 2 до 8 °С не более 6 ч, в дальнейшем – замораживать. Кровь не замораживают! Допускается двукратное замораживание-оттаивание остального клинического материала.

Транспортирование материала осуществляют в термоконтейнере с хладагентом не более 3 суток

С целью оценки информативности методов диагностики обследованы 132 пациентки с бесплодием, ассоциированным с поражением маточных труб, являющихся группой риска по туберкулезу гениталий. По результатам исследования выделено две группы: 64 женщины с генитальным туберкулезом (1-я группа), 68 пациенток без генитального туберкулеза (2-я группа). В 1-й группе достоверно чаще встречалось повышение температуры, длительное течение воспалительных заболеваний органов малого таза и бесплодие, отсутствие эффекта от лечения воспалительных заболеваний органов малого таза, высокая частота оперативных вмешательств на придатках матки, наличие кальцинатов в миометрии и/или яичниках по УЗИ, специфические признаки поражения маточных труб и матки при гистеросальпингографии. Отмечен высокий уровень информативности таких новых в практике врача противотуберкулезной службы методов исследования, как проба с Диаскинтестом, специфические иммунологические тесты.

Ключевые слова: генитальный туберкулез, бесплодие, диагностики.

Введение. В современных условиях проблема охраны репродуктивного здоровья населения приобретает особую социальную значимость. Вопросы охраны репродуктивного здоровья населения и государственная поддержка развития программ репродуктивной медицины занимают значительное место в Концепциях социально-экономического развития и демографической политики РФ на период до 2025 года [1]. Генитальный туберкулез (ГТ) на сегодняшний день признан чрезвычайно актуальной медико-социальной проблемой по причине развития заболевания у женщин репродуктивного возраста (20–45 лет) [2, 3]. Туберкулез половых органов является причиной женского бесплодия в 10–40 % [4–6] случаев. Бесплодие является характерным и часто единственным для туберкулеза гениталий симптомом, встречается у 60–95 % пациенток [3, 7].

По данным российских авторов, специфическое поражение женских половых органов приводит к трубно-перитонеальному бесплодию (ТПФБ) в 90–97 % клинических наблюдений [8]. Туберкулез женских половых органов относится к наиболее трудно диагностируемым локализациям внелегочного туберкулеза и выявляется, зачастую, на поздних стадиях, когда, несмотря на проводимую терапию, восстановления менструальной и репродуктивной функций женского организма не происходит [9]. Раннее выявление наряду со своевременной и адекватной специфической терапией позволяют до 34 % случаев восстановить фертильность [10], но зачастую у пациенток, перенесших ГТ, методом выбора является ЭКО [7]. Актуальной проблемой в репродуктивной медицине является разработка и внедрение схем обследования пациенток с ТПФБ и подозрением на туберкулез половых органов, а также поиска высокоэффективных методов исследования, позволяющих подтвердить или опровергнуть специфическую природу на ранней стадии патологического процесса [11, 12].

Цель исследования: оценить эффективность методов диагностики ГТ у женщин с бесплодием.

Материалы и методы исследования. Проведено простое проспективное исследование на базе Клинического противотуберкулезного диспансера № 4 (КПТД № 4) г. Омска, являющегося центром оказания помощи больным туберкулезом внелегочных локализаций в Омской области. За 2010–2013 годы проведено обследование 265-ти пациенток, направленных врачами гинекологических отделений стационаров, консультаций и центров планирования семьи с целью верификации ГТ. Анализ возрастного состава свидетельствовал о преобладании среди пациенток женщин репродуктивного возраста — 81,5 %, лишь 18,5 % обследуемых пациенток были перименопаузального возраста и в постменопаузе. Среди обследуемых пациенток 65,7 % (174) проходили обследование по бесплодию, 34,3 % (91) женщин реализовали репродуктивную функцию и в будущем беременность не планировали. Среди последних наиболее часто встречалась миома матки (45 %), кисты яичников (30,8 %), генитальный эндометриоз (24,2 %).

Критерии включения в исследование — репродуктивный возраст, бесплодие, воспалительные заболевания органов малого таза в анамнезе (ВЗОМТ); критерии исключения — бесплодие, неассоциированное с поражением труб (эндокринное, мужской фактор бесплодия, аутоиммунное), туберкулез органов дыхания, генерализованный и полиорганный туберкулез, злокачественные новообразования, наркозависимость и алкоголизм.

Комплексное обследование включало оценку клинических данных и анамнеза, флюорографию или рентген органов грудной клетки, УЗИ органов малого таза, гистеросальпингографию (ГСГ), посевы менструальной крови на микобактерии туберкулеза (МБТ), полимеразную цепную реакцию (ПЦР) менструальной крови и соскобов эндометрия к ДНК МБТ, лазерную флюоресценцию плазмы крови, туберкулинодиагностику, иммунологическое обследование с оценкой модифицированной реакции бластной трансформации лимфоцитов при стимуляции туберкулином (мРБТЛ с ППД-Л) по индексу стимуляции (ИС) с определением интерферона-гамма (ИФН-γ с ППД-Л, пг/мл) в контрольных образцах крови и после индукции туберкулином в субоптимальных разведениях, а также иммуноферментный анализ (ИФА) с определением специфических IgA, IgM, IgG [13].

Диагноз ГТ верифицирован выделением культуры МБТ в менструальной крови методом посева 15,7 %, обнаружением ПЦР МБТ в соскобе эндометрия 12,5 %, гистологически 18,7 %, получением эффекта от проводимой в течение 2–3 месяцев тест-терапии противотуберкулезными химиопрепаратами (H, Z, E, Pt) 53,1 % пациенток. В соответствии с критериями, в исследование включены 132 пациентки с бесплодием, ассоциированным с поражением труб (ТПФБ), представляющих группу риска по ГТ. Основная группа (1-я) включала 64 (24 % среди всех обследованных, 36 % женщин с бесплодием) пациентки с установленным диагнозом ГТ, из них 55 (86 %) завершили основной курс терапии в 2012–2013 годах, группа сравнения (2-я) — 68 пациенток с ВЗОМТ, у которых данных за туберкулез половых органов не выявлено. Исследуемые группы были равнозначны по клинико-лабораторным и возрастным показателям (р > 0,05) (30,64 ± 0,63 года в основной, 31,25 ± 0,78 в группе сравнения). Для анализа полученных данных использовали методы описательной статистики. Достоверность различий между группами определяли с помощью критерия Стьюдента, c2. Различия считали достоверными при р 2 Р Повышение температуры 44 68,8 4 5,9 53,627 0,000 Слабость, потливость 35 54,6 — — 47,838 0,000 Болевой синдром 44 68,8 21 30,8 17,431 0,000 Нарушение менструального цикла 35 54,6 22 32,3 5,824 0,016

Комплексная оценка результатов туберкулиновых проб свидетельствовала о более высокой информативности пробы с Диаскинтестом в отличие от пробы Манту с 2 ТЕ. Средний размер инфильтрата при пробе с Диаскинтестом 5,56 ± 1,12 и 0 мм в 1-й и 2-й группах соответственно (p = 0,009). Специфичность пробы с Диаскинтестом составила 91,4 %, чувствительность — 60,5 %, а доля истинных результатов — 76 %. Средний размер инфильтрата при пробе Манту с 2 ТЕ составил 15,23 ± 0,72 мм в 1-й и 8,8 ± 0,84 мм во 2-й группе (p = 0,000). Гиперергическая проба Манту с 2 ТЕ встречалась достоверно чаще у пациенток 1-й группы (p = 0,000). Информативность пробы Манту составила 56,8 %. Результаты ЛФД не имели достоверных различий в исследуемых группах (p = 0,736). В ходе исследования была установлена специфичность 51,5 % и чувствительность ЛФД — 48,7 %, доля истинных результатов составила 50 % ПЦР на МБТ биоптатов эндометрия, полученных при гистероскопии, были позитивными в 12,5 % случаев у пациенток 1-й группы.

Нами проведена оценка специфического иммунного ответа у пациенток исследуемых групп. Установлено, что в 1-й группе средний уровень показателя ИС мРБТЛ с ППД-Л составил 11,12 ± 0,93, во 2-й — 4,76 ± 0,84 (p = 0,000). Определяя ИФН-g после индукции туберкулином, установили средний уровень показателя 1621 ± 184,3 и 214,07 ± 28,5 пг/мл в 1-й и 2-й группах соответственно (p = 0,000). Показатель ИС ИФН-g с ППД-Л также достоверно различался в исследуемых группах (p = 0,000) и составил 22,54 ± 1,87 в основной и 2,52 ± 0,31 в группе сравнения. При оценке по данным ИФА уровней IgA, IgM, IgG к M. tuberculosis у пациенток исследуемых групп выявлено повышение IgA в 29,6 %, IgM в 40,6 % в основной и IgA в 5,8 %, IgM 19,1 % в группе сравнения (p = 0,000) и (p = 0,012) соответственно. Достоверных различий показателя IgG и сочетанного повышения иммуноглобулинов у пациенток исследуемых групп не выявлено. Уровень неспецифического IgE в сыворотке крови не являлся информативным у пациенток обеих групп (p = 0,676).

Специфичность иммунологических методов в комплексной диагностике активного ГТ (мРБТЛ с ППД-Л, γИНФ с ППД-Л, ИФА к МБТ: IgM, IgA, IgG) составила 100 %, чувствительность 92,5 % (дополнительная оценка помимо клеточного иммунного ответа — гуморального — повышает чувствительность на 30 %).

Заключение. В диагностике ГТ при проведении комплексного обследования достаточную информативность сохраняют клинико-анамнестические данные, результаты ультразвукового обследования и ГСГ. В то же время, отмечен высокий уровень информативности таких новых в практике врача противотуберкулезной службы методов исследования, как проба с Диаскинтестом, специфические иммунологические тесты, внедрение которых в диагностический алгоритм фтизиатра-гинеколога позволит сократить сроки постановки диагноза и повысить эффективность лечения пациенток с туберкулезом половых органов.

Государственная лицензия ФГБОУ ВО НГМУ Минздрава России
на образовательную деятельность:
серия ААА № 001052 (регистрационный № 1029) от 29 марта 2011 года,
выдана Федеральной службой по надзору в сфере образования и науки бессрочно

Свидетельство о государственной аккредитации ФГБОУ ВО НГМУ Минздрава России:
серия 90А01 № 0000997 (регистрационный № 935) от 31 марта 2014 года
выдано Федеральной службой по надзору в сфере образования и науки
на срок по 31 марта 2020 года

Адрес редакции: 630091, г. Новосибирск, Красный проспект, д. 52
тел./факс: (383) 229-10-82, адрес электронной почты: mos@ngmu.ru

Средство массовой информации зарегистрировано Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор) —
Свидетельство о регистрации СМИ: ПИ № ФС77-72398 от 28.02.2018.

08.02.2016
Уважаемые авторы! Открыт прием статей во 2-й номер 2016 года (выход номера — середина мая 2016 г.).
Подробнее >>

11.01.2016
Уважаемые авторы! Продолжается прием статей в 1-й номер 2016 года (выход номера — конец февраля 2016 г.).
Подробнее >>

28.12.2015
Уважаемые авторы! Сетевое издание входило в Перечень ВАК до 30 ноября 2015 г. Работа по включению издания в новый Перечень ВАК продолжается.
Информация о формировании Перечня ВАК
Подробнее >>

Читайте также:

Пожалуйста, не занимайтесь самолечением!
При симпотмах заболевания - обратитесь к врачу.