Основным методом диагностики паразитарных болезней является

Основой диагностики паразитарных болезней, в частности гельминтозов, являются результаты лабораторных исследований, которые выявляют непосредственно возбудителей, их антигены или антитела к ним.

Гельминтозы развиваются в результате инвазии (заражения) организма окончательного хозяина (человека или животного), используемого как место обитания гельминтов и источника их питания. Часто болезни протекают без выраженных специфических клинических симптомов, что не всегда позволяет поставить диагноз по клинической картине.

Диагностика гельминтозов должна быть комплексной и основываться на данных эпидемиологического анамнеза, клиники заболевания и лабораторных исследований.

Специфика биологии каждого конкретного вида гельминта диктует необходимость различной тактики лабораторных исследований, которая направлена на обнаружение в одних случаях гельминтов или их фрагментов, а в других – их личинок, яиц или специфических иммуноглобулинов.

Материал для исследования берется в зависимости от подозрения на наличие у больного того или иного гельминтоза, так как пути выделения яиц, личинок или фрагментов паразитов из организма человека могут быть разными.

Для геогельминтов характерен кишечный (интестинальный) путь выделения яиц и личинок из организма больного человека. Большинство гельминтов, яйца которых выводятся через кишечник, паразитируют в пищеводе, желудке, кишечнике, а также попадают в кишечник при миграции через легкие, бронхи, трахеи, гортань, когда происходит заглатывание яиц и личинок со слизью при кашле. Этот путь присущ трематодам, цестодам и многим нематодам (в частности, геогельминтам). Материалом для исследования служат фекалии (кал). При исследовании проб фекалий обнаруживаются яйца и личинки многих гельминтов.

Паразитологические методы лабораторных исследований применяются:

с диагностической целью;
для контроля эффективности лечения;
для оценки качества проведенного комплекса лечебно-профилактических мероприятий;
для установления уровня пораженности населения (при профосмотрах)

Лабораторная диагностика является важным методом при паразитарных заболеваниях. В то же время качество лабораторной диагностики зависит от множества факторов, таких как надлежащая подготовка пациента к лабораторному обследованию, правильный забор материала для исследования и выбор оптимальной методики, квалификация и опыт специалиста-лаборанта.

Для верификации диагноза важно обеспечить следующее:

сбор данных эпидемиологического анамнеза;
определение соответствующего материала для исследования, правильно собранного и доставленного вовремя;
выбор и применение соответствующего метода идентификации паразита;
правильная идентификация паразита;
правильная интерпретация результатов исследования.

Cбор материала для гельминтологических исследований включает следующие шаги:

Для исследования собирают фекалии из любой чистой емкости немедленно после дефекации.
Не допускается сбор образцов фекалий из унитаза.
Для детей возможен сбор образца с пеленки, подгузника или горшка.
Используя ложку в крышке контейнера, собрать не менее чем из трех точек стула.
Испражнения для анализов должны доставляться в лабораторию не позднее одних суток после дефекации, а при подозрении на стронгилоидоз – немедленно.
Если по каким-либо причинам доставка в лабораторию затруднена, то необходимо хранить материал при температуре +4–8 °C. Рекомендуется использование консерванта, и тогда исследование можно проводить в течение 3–10 дней после дефекации.

Методы лабораторной диагностики гельминтозов

Методы гельминтологических исследований делятся на прямые и опосредованные (косвенные).

Прямые методы: выявление самих гельминтов, их фрагментов, яиц, личинок в фекалиях, моче, дуоденальном секрете, мокроте и др.

Опосредованные (косвенные) методы: выявление вторичных изменений, возникающих в организме человека в результате жизнедеятельности паразита, путем серологических реакций, общего исследования крови, мочи.

Основным методом лабораторной диагностики глистных инвазий является обнаружение яиц или личинок гельминтов в фекалиях. Наиболее распространенными методами исследования фекалий являются гельминтокопроскопические.

Гельминтокопроскопия – это совокупность методов взятия, обработки и исследования (макро- и микроскопического) проб фекалий человека с целью обнаружения в них яиц, личинок гельминтов, их фрагментов. Она включает следующие виды исследований:

копроовоскопия (исследование фекалий на яйца гельминтов);
копроларвоскопия (исследование фекалий на личинки гельминтов);
макроскопия фекалий (обнаружение фрагментов или зрелых гельминтов в фекалиях).

Микроскопические методы подразделяются на простые, сложные и специальные.

К простым относятся метод нативного мазка и метод толстого мазка под целлофаном по Като – Кац.

Сложные методы, или методы обогащения, основаны на феномене разных удельных весов яиц гельминтов и применяемых реагентов. При обработке фекалий этими растворами происходит концентрация яиц на поверхности раствора или в осадке, в результате чего увеличивается эффективность поиска.

Различают следующие методы обогащения:

флотационные (когда используют солевые растворы, удельный вес которых выше удельного веса яиц гельминтов, в результате чего они всплывают в поверхностную пленку, которую и исследуют);
седиментационные (когда используют растворы, удельный вес которых меньше удельного веса яиц гельминтов, в результате чего они оседают, образуя осадок).

Методом седиментации возможно определить следующие гельминтозы: описторхоз, клонорхоз, фасциолез, дикроцелиоз, метагонимоз, нанофиетоз, дифиллоботриоз, гименолепидоз, аскаридоз, трихоцефалез, анкилостомидозы, стронгилоидоз, трихостронгилез, некатороз, шистосомоз, кишечные протозоозы (лямблиоз,криптоспоридиоз, изоспороз)

Специальные методы чаще всего необходимы для обнаружения личинок гельминтов. Группа специальных методов направлена на диагностику конкретного геогельминтоза, применяемый метод специфичен только для данного гельминта.

Модификация эфир-формалинового метода седиментации
одноразовыми системами для проведения копрологического исследования

С развитием паразитологии в лечебную практику стали применяться одноразовые системы для копрологического исследования, предназначенные для эффективного концентрирования яиц и личинок гельминтов модифицированным эфир-формалиновым методом.

Системы для копрологического исследования являются одноразовыми и состоят из нескольких элементов:

пробирка для образца, в которую имеется готовая смесь для фиксации образца фекалий и последующей седиментации
пробирка с системой фильтров и шпателем для забора образца;
коническая емкость для сбора отфильтрованного материала.

Система фильтров способствует оседанию грубых частиц непереваренной пищи и клетчатки в смесительной камере, а жидкая часть с выделившимися в нее паразитами, яйцами паразитов под давлением фильтруется и центрифугируется в конической пробирке.

После получения взвеси систему помещают в центрифугу и центрифугируют при скорости 2500–3000 об/мин в течение 1–3 минут, при скорости 1500 об/мин – 5 минут. В конической части пробирки остается жидкая часть пробы с выделившимися в нее яйцами гельминтов, цистами простейших. Отсоединяют модуль с фильтром и утилизируют после обеззараживания. Коническая часть пробирки остается для микроскопирования. Для этого из нижней части пробирки с помощью пипетки переносят на предметное стекло 2 капли пробы осадка. Микроскопируют при увеличении: окуляр x10, объективы x10, x40.

Преимущества использования одноразовых систем для копрологических исследований:

повышает выявляемость возбудителей;
уменьшает расход реагентов;
снижает опасность контаминации, исключая контакт персонала с исследуемыми образцами;
улучшает стандартизацию метода, повышает достоверность анализа;
исключает подготовку и повторную обработку посуды, а также сокращает количество отходов в процессе проведения исследования

1. Вид и способ взятия материала (зависит от клинической формы инфекции, этиологического фактора и использованного диагностического метода →табл. 28.4-1):

Таблица 28.4-1. Виды, правила взятия и транспортировки клинического материала для паразитарных исследований

Локализация инфекции и материал

Вероятный этиологический фактор

мазок, чистая кровь

толстослойный или тонкослойный препарат, срочная транспортировка

Plasmodium, Babesia, Leishmania, Toxoplasma, Trypanosoma, микрофилярии

кровь с ЭДТА или гепарином

транспортировка в течение 30 мин, диагностика лучше без антикоагулянтов

аспират — стерильная пробирка

люмбальная пункция — жидкость в стерильную пробирку

немедленная транспортировка в лабораторию

Taenia solium, Echinococcus, Naegleria fowleri, Toxoplasma gondii, Trypanosoma, Acanthamoeba

аспират — стерильная пробирка

биоптат — высушенный мазок

биоптат, соскобы, контактная линза

стерильная пробирка с 0,9 % NaCl

Acanthamoeba , Naegleria , Microsporidia

немедленно; с целью культивации — транспортировка в течение 24 ч

Entamoeba, Giardia lamblia, Balantidium coli, Ascaris lumbricoides, Enterobius vermicularis, Taenia solium ( saginata ), Strongyloides stercoralis, Cryptosporidium parvum

кал, который хранился

полоска целлюлозной ленты

контейнер с 0,9 % NaCl или 70 % спиртом

доставленный в консервирующем веществе

содержимое двенадцатиперстной кишки

для культивирования — немедленная транспортировка при комнатной температуре

Echinococcus, Entamoeba histolytica, Fasciola hepatica

немедленная транспортировка при комнатной температуре

Pneumocystis jiroveci , Cryptococcus neoformans

аспират из бронхов

аспират из плевральной полости

стерильный контейнер с 0,9 % NaCl

препарат — нативный мазок

мазки, приготовленные после ферментативной обработки

цистицерк Taenia solium, Trichinella spiralis, Trypanosoma cruzi, Microsporidia

образцы — как для гистологических исследований;

стерильная пробирка с 0,9 % NaCl

выделения из влагалища

тампон, увлажненный 0,9 % NaCl

исследование осадка и культивирование

Trichomonas vaginalis , Microsporidia

выделения из уретры

секрет предстательной железы

1) удаленные паразиты (членики лентеца, аскарида, острица) — доставьте в контейнере с 0,9 % NaCl или 70 % спиртом;

2) свежий кал — 3 образца (комочки, величиной с орех, или 1–2 мл жидкого кала) каждые 3–4 дня наберите в чистый и сухой пластмассовый контейнер с плотной крышкой. Иногда взятие проводят после использования слабительных средств, в таких случаях кал следует собрать в несколько пронумерованных сосудов. Если подозреваете амёбиаз или лямблиоз исследуйте 6 образцов кала, взятых ежедневно (на время хранения зафиксируйте их соответствующим консервантом).

3) мазок из перианальной области (диагностика энтеробиоза) — нужно делать утром, сразу после подъёма с постели, используя целлюлозную или самоклеющуюся ленту, которая прикладывается к коже вокруг ануса, а затем приклеивается непосредственно на предметное стекло (или направляется в лабораторию). Мазок нужно повторять трижды каждые 2 дня (но исследования не нужно проводить в тот же день).

2 . Хранение и транспортировка образцов: диагностические материалы для выявления паразитов чаще всего исследуют микроскопически, поэтому большинство образцов направляются в виде мазков на стеклах, в специальных консервирующих веществах или в сухих контейнерах. Если нативный микроскопический препарат предназначен для обнаружения трофозоитов и цист простейших кишечника или если их культивирование проводится в лаборатории, образец необходимо передать сразу после взятия (в течение 15 мин) неохлажденным, особенно, если подозреваете инфекцию паразитами, чувствительными к изменениям окружающей среды ( Entamoeba histolytica , Giardia lamblia , Trichomonas vaginalis ). В некоторых случаях образцы кала должны быть помещены в контейнер с жидким консервантом или на соответствующую транспортную среду и хранится при температуре 4 °C (холодильник). Образцы кала нельзя замораживать и размораживать. Исследовать кал на наличие яиц паразитов можно даже через несколько дней; в таком случае материал лучше зафиксировать в 10 % растворе формалина или поливиниловом спирте.

Методы идентификации паразитов

1. Микроскопическое исследование (основной диагностический метод):

1) некрашеные препараты — используют для диагностики, напр., амебиаза, лямблиоза (свежий кал), трихомониаза (выделения из влагалища, уретры);

2) окрашенные препараты — используют для диагностики криптоспоридиоза (препарат кала, окрашенный по методу Циля-Нильсена), малярии (препарат капиллярной крови, окрашенный по методу Гимзы), пневмоцистоза (препарат из смывов, окрашенный серебром или по методу Гимзы).

2 . Культивирование (используют редко, только в специализированных лабораториях): на специальных средах (чаще всего — жидких), используется только для выявления некоторых паразитов ( Acanthamoeba , Toxoplasma , Trypanosoma , Leishmania ).

3 . Серологические методы: выявление паразитарных антигенов в клиническом материале (напр., амебиаз, криптоспоридиоз) или специфических антител в сыворотке (напр., токсоплазмоз, трихинеллез, цистицеркоз) или в спинномозговой жидкости (напр., нейроцистицеркоз).

4 . Молекулярные методы (PCR): выявление генетического материала простейших (напр., токсоплазмоз, пневмоцистоз).

Главная
Лечебные Направления
Диагностическое направление
Паразитарные заболевания

Гинекология
Дерматология
Диагностика .
Кардиология
Неврология
Офтальмология
Педиатрия

Стоматология
Терапия
Урология
Физиотерапия .
Хирургия
Медосмотры .
Косметология

Паразиты и продукты их жизнедеятельности крайне опасны для человеческого организма. Они отбирают энергию, питательные вещества, витамины. Порождают развитие тяжелых болезней: бронхита, астмы, дерматита, цистита, простатита, фиброзно-кистозной мастопатии, импотенции, онкологии. Нарушают психику, память, работу желудочно-кишечного тракта. Могут жить годами и никак себя не проявлять, но постепенно разрушать важные органы и системы.

Задачи диагностики

выявление паразитарных заболеваний;
определение вида гельминтов;
обнаружение личинок и отложенных яиц;
оценка степени интоксикации.

Основной задачей является определение место их обитания. Они могут локализоваться не только в кишечнике, но и легких, печени, сердце, мозге, мышцах, в суставах, под кожей. Некоторые виды способны мигрировать в тканевых структурах. Их размеры варьируются от нескольких миллиметров до 2-х метров. И чтобы изгнать непрошенного гостя необходимо изначально провести полное обследование и выяснить кого и откуда надо выводить.

Симптомы, подлежащие реагированию

Запор или диарея.
Вздутие живота, метеоризм.
Боль в суставах.
Поражения кожи: прыщи, сыпь, трещины.
Низкий уровень гемоглобина.
Аллергические проявления.
Слабость иммунной системы.
Быстрая утомляемость.
Снижение/повышение аппетита.
Стремительная потеря веса.
Раздражительность, нарушения сна.
Храп, скрежет зубами.
Зуд в области ануса.

Показания – подозрение на наличие червей:

Круглых (аскариды, острицы, власоглава, некатора).
Плоских (шистосомы, двуустки).
Ленточных (бычьего, свиного цепня, эхинококка).
Простейших (токсоплазмы, лямблии).

Противопоказания к обследованию

Алкогольное опьянения.
Кишечные кровотечения.
Менструация.
Геморрой, трещины заднего прохода.

Подготовительные мероприятия

Кал на яйцеглист следует собирать из разных мест испражнения в специальные аптечные контейнеры. Достаточно 25-35 г.
Если дефекация проводилось вечером, порция на анализ должна до утра храниться в холодильнике, но не более 15 часов.
Биоматериал на лямблии предоставляется в теплом виде, то есть в течении получаса с момента забора.
Биоптат не должен содержать влагалищных выделений. Помойтесь или воспользуйтесь тампоном перед испражнением.
За 2 дня исключите из рациона питания продукты, способствующие газообразованию, нарушению консистенции фекалий.
Соскоб на энтеробиоз следует проводить утром. До этого желательно с вечера не мыться.

Методы исследования

Бывают прямые – выявляют многие виды глистов, их фрагменты, ДНК, антигены, непрямые – обнаруживают антитела и аппаратные ( УЗИ , рентген , эндобиопсия, эндоскопия). К первым относят макро- и микроскопическое изучение кала, мочи, дуоденального содержимого, мокроты, соскоба прианальной области, под ногтевых фаланг.

Аннотация научной статьи по прочим медицинским наукам, автор научной работы — Асланова Мария Михайловна, Кузнецова К.Ю., Морозов Е.Н.

Проведен аналитический обзор существующих методов определения паразитарного патогена в биологическом материале и образцах из окружающей среды, применяемых в отечественной и зарубежной практике здравоохранения. Продемонстрированы все возможные методические приемы для установления диагноза паразитарного заболевания и паразитарного загрязнения внешней среды как взаимосвязанных факторов, отягчающих безопасность среды обитания .

EFFECTIVE LABORATORY TESTING IS A BASIS OF MONITORING PARASITIC DISEASES

Existing methods of determining parasitic pathogen in biological material and environmental samples used in domestic and foreign practice of public health have been reviewed. All possible methodical receptions for establishment of the diagnosis of a parasitic disease and parasitic pollution of environment as the factors interconnected and aggravating safety of habitat are shown.

ЗНиСО ЯНВАРЬ №1 (274)

ЭФФЕКТИВНАЯ ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА -ОСНОВА МОНИТОРИНГА ПАРАЗИТАРНЫХ БОЛЕЗНЕЙ

М.М. Асланова1, К.Ю. Кузнецова2, Е.Н. Морозов2

M.M. Aslanova, K.Yu. Kuznetsova, E.N. Morozov □ EFFECTIVE LABORATORY TESTING IS A BASIS OF MONITORING PARASITIC DISEASES □ FBHI FCH&E of the Inspectorate for Customers Protection of Rospotrebnadzor, Moscow, Russia; Martsinovsky Research Institute of Medical Parasitology and Tropical Medicine of Sechenov First Moscow State Medical University, Moscow, Russia.

Key words: laboratory diagnosis, parasitic diseases, habitat, research methods biological material.

Верификация и видовая идентификация патогенов паразитарной природы являются основой диагностики паразитарных болезней и показателей биологической безопасности среды обитания. Они базируются на применении специфических лабораторных методов исследования. Развитие лабораторных технологий, в том числе в области паразитологических исследований, направлено на обеспечение точности, воспроизводимости и прослеживаемости этапов исследований и их стандартизации [2, 12].

Цель исследования — определить методы установления диагноза паразитарного заболевания и паразитарного загрязнения внешней среды как взаимосвязанных факторов, отягчающих безопасность среды обитания.

Материалы и методы. В целях формирования структуры эпидемиологической значимости качественных лабораторных исследований объектов окружающей среды и клинического материала от людей при паразитозах был использован анализ данных многолетних исследований в системе паразитологического мониторинга за объектами окружающей среды и заболеваемостью.

Результаты исследования. По данным мировой научной литературы, в настоящее время известно 1415 патогенов — возбудителей инфекционных и паразитарных болезней, из них 353 являются возбудителями паразитарных болезней.

Разработаны отечественными учеными и применяются в практической службе здравоохра-

нения России более 60 методов и модификаций паразитологических исследований биологических выделений из организма человека, около 40 методов санитарно-паразитологических исследований объектов внешней среды. Сюда входят не только традиционные макро- и микроскопические методы паразитологических исследований, но и новые методические разработки, прошедшие научные и экспериментальные испытания, а также наглядное пособие всех изображений форм и стадий развития возбудителей паразитарных болезней [1, 2, 13].

Современный этап развития паразитологических лабораторных исследований позволяет проводить комплексную оценку паразитарной системы с использованием микроскопических, иммунных, иммунохимических и высокотехнологических методов анализа, в том числе метода ПЦР и применение комплекса автоматизированной микроскопии. [5, 15].

Характер течения иммунологического процесса при гельминтозах во многом определяется вирулентностью возбудителя — индивидуальной, приобретенной в процессе предшествующего онтогенетического развития, штаммовой или расовой степенью патогенности возбудителя, проявляющихся на данном хозяине в определенных конкретных условиях [3, 4].

К отличительным особенностям патогенных гельминтов и простейших за редким исключением относят: неспособность паразитов размножаться вне организма хозяина; своеобразие путей миграции; воздействие на органы и ткани

в процессе их стадийного развития, в частности |— травматического, что вызывает иммунный ответ

микроорганизма. ^э В связи с этим иммунологические методы исследования при их диагностике являются i-^ основными. В настоящее время применяют иммуноферментный анализ (ИФА), реакцию Е непрямой гемагглютинации (РНГА), реакцию непрямой иммунофлуоресценции (РНИФ), иммунохроматографический экспресс-метод для определения антигенов патогенных простейших в пробах кала [1, 4].

На территории Российской Федерации разрешены к применению наборы реагентов:

1) для иммуноферментного выявления:

— иммуноглобулинов класса A, M, G — к антигену Toxoplasmagondii в сыворотке (плазме) крови;

— иммуноглобулинов класса M, G — к антигенам Trichinellaspiralis, Opisthorchisfelineus в сыворотке (плазме) крови;

— иммуноглобулинов класса G — к антигенам Anisakisspp., Ascarislumbricoides, Clonorchissinensis, Echinococcusgranulosus, Entamoebahistolytica, Leishmaniaspp., Schistosomamansoni, Taeniaso-lium (Cysticercuscellulosae), Toxocaraspp, Stron-giloidesstercoralis, Fasciolahepatica, Trypanosomacruzi в сыворотке (плазме) крови;

— иммуноглобулинов класса A, G — к антигенам Trichomonasvaginalis в сыворотке (плазме) крови;

2) для иммуноферментного определения индекса авидности иммуноглобулинов класса G — к Toxoplasmagondii в сыворотке крови;

3) для иммуноферментного выявления специфических циркулирующих иммунокомплексов, содержащих антигены Opisthorchisfelineus в сыворотке крови;

4) для иммуноферментного определения концентрации аллергенспецифических IgE — к антигенам паразитов с биотинилированными аллергенами Ascarislumbricoides, Echinococcusgranulosus, Opisthorchisfelineus, Trichinellaspiralis, Toxocaracanis, Lamblia intestinalis, Anisakis simplex в сыворотке (плазме) крови;

5) для иммуноферментного выявления антигена Lamblia intestinalis, Cryptosporidiumparvum в суспензии фекалий;

6) наборы реагентов для экспресс-диагностики кишечных инфекций: лямблиоза, криптоспори-диоза, амебиаза в пробах кала.

Более девяти видов наборов реагентов для иммуноферментного выявления иммуноглобулинов к известным возбудителям паразитарных болезней разработаны в НИИМПиТМ им. Е.И. Марциновского и внедрены в отечественное производство [1, 5, 6].

Среди экспресс-методов диагностики инфекционных и паразитарных болезней особое место занимают иммуносорбционные методы или методы иммунофлуоресценции. Иммунологические методы эффективны при гельминтозах, возбудители которых обитают непосредственно в тканях или в ранней фазе развития мигрируют по кровеносному руслу и внутренним органам хозяина. [11]. Метод объединил микроскопию с принципом иммунологического анализа.

Иммунофлуоресценции обладает двумя основными преимуществами по сравнению с другими методами исследования: устанавливает локализацию антигенов в зараженном материале или клетке и визуализирует и проводит ускоренную их идентификацию в исследуемом материале — биологическом и санитарном. Применяют два основных варианта этой методики — прямую и непрямую иммунофлуоресценцию.

Новым этапом усовершенствования общепринятых методов лабораторных исследований стало применение сорбентов с магнитными свойствами для выделения и последующей идентификации различных микроорганизмов и их антигенов. Магнитоиммуносорбенты используют в качестве твердой фазы для селективного концентрирования на их поверхности различных антигенов и микроорганизмов. Широкий диапазон объемов исследуемых проб жидкостей и возможность исследования сильнозагрязненных объектов определяют преимущественный выбор данного метода в санитарной паразитологии [9, 10].

Становление молекулярной паразитологии и нового в ней направления — метода полимеразной цепной реакции (ПЦР) — является качественно новой областью лабораторного мониторинга паразитарной заболеваемости населения и состояния среды обитания по показателям паразитарной чистоты. Применение метода ПЦР в качестве лабораторного контроля критических уровней нахождения паразитарного патогена в исследуемых образцах основана на обеспечении принципа методологического единообразия и интерпретации результатов проводимых исследований. По сравнению с традиционными методами диагностики ПЦР обладает более высокой чувствительностью, специфичностью и позволяет проводить прямое определение микроорганизма непосредственно в клиническом материале без получения чистой культуры возбудителя, что снижает трудозатраты [10].

Метод ПЦР позволяет с высокой степенью точности проводить диагностику ВИЧ-ассоциированных паразитозов — висцерального лейшманиоза, токсоплазмоза, кишечных прото-зойных инфекций — амебиаза, криптоспоридиоза, лямблиоза и бластоцистоза. Их клиническую и лабораторную диагностику затрудняет либо по-лиморфность возбудителя, либо клиническое разнообразие симптомокомплексов и особенности эпидемиологии и эпизоотологии очагов [8]. В частности, лейшманиозы, вызванные Ъ. braziliensis, L. aethiopica и L. Donovani, могут проявиться в кожной и висцеральной форме болезни или иметь сходные клинические проявления с другими заболеваниями, при этом затрачивается многочасовой метод культивирования, их выявление и видовое определение. Метод ПЦР применяется для прямой диагностики и идентификации различных клинических проявлений лейшманиоза [5].

Актуальность этой проблемы для России определена эндемичными территориями Крыма и Северного Кавказа.

Возбудители бластоцистоза долгое время относились к условно-патогенной группе микроорганизмов. Многочисленные данные отечественной

ЗНиСО ЯНВАРЬ №1 (274)

и зарубежной науки в настоящее время указывают на этиологическое и патогенетическое значение возбудителя в развитии диарейного синдрома. По статистическим данным, зараженность бластоци-стами у лиц с диарейным синдромом составила в среднем 30 %, из них у взрослых — 38,3 %, у детей — 25,4 %. В 56 сомнительных случаях бластоцистоза затруднения диагностики были связаны с наличием морфологически измененных форм возбудителя после самолечения и при микст-инфекциях. В этих случаях применялись комбинированные методы микроскопической диагностики — метод ФЭО, нативный мазок, посев на специальные среды [10].

В других исследованиях диагностика B. hominis проводилась методом ПЦР: из 32 проб, содержащих бластоцисты микроскопически, в 94 % был отмечен положительный результат; в 36 пробах, не содержащих бластоцисты, положительный результат был получен в восьми случаях, что подтверждает высокие критерии чувствительности и специфичности метода ПЦР для полиморфной детекции возбудителя при его невысокой концентрации в исследуемых образцах [9].

Внедрение метода ПЦР в лабораторную диагностику дирофиляриоза и видовой дифференциации возбудителя в крови у больных и в организме комаров (D. repens, D. immitis) являются новейшими разработками отечественной науки [11].

Хорошо известны эпидемиологические последствия малярии для отдельно взятых стран и клиническое значение для самого больного. Первоочередные задачи национальных программ по борьбе с малярией в эндемичных странах определяют временные критерии снижения заболеваемости, сохранение и закрепление достигнутых результатов [6].

В достижении поставленных целей лабораторная диагностика малярии является ответственным звеном клинико-эпидемиологической работы по выявлению больного и паразитоносителя, видового определения паразита, особенно при микст-инфекциях, и контроля эффективности лечения [6, 9].

метода в пределах 2—4 паразитов в 1 мкл крови. Применение данного метода позволяет достоверно I— подтвердить отсутствие заболевания и результаты достижения целевых программ элиминации ^э малярии на эндемичных территориях [9, 13].

Наиболее распространенные методы лабораторной диагностики кишечных гельминтозов -^з и протозойных болезней, а также санитарно- е паразитологические методы определения возбудителей во внешней среде основаны на применении микроскопических методов исследования. Микроскопия позволяет достаточно быстро провести видовую диагностику паразита, но результаты во многом зависят от квалификации исследователя. Положительной тенденцией является общий современный тренд нарастающего применения электромеханических моторизованных элементов автоматизации рутинных операций микроскопии [7, 8, 16].

В роботизированной модели МЕКОС-Ц2 использованы оригинальные методы обнаружения и распознавания паразитологических объектов, оригинальная система сбора данных о функционировании автоматических функций с использованием особенностей архитектуры аппарата и промежуточных фиксируемых моделей препаратов каждого уровня распознавания биоматериала. Работа на данном аппарате предлагает два режима эксплуатации: ручной микроскопии и комплекса автоматизированной микроскопии (КАМ) с автоматическими функциями сканирования и анализа изображений препарата.

Применение КАМ позволяет увеличить чувствительность и воспроизводимость диагностически значимой морфологии в 2—5 раз по сравнению с применяемыми современными методиками исследований. Ошибка распознавания объектов поиска при данном режиме работы не превышает статистический показатель ошибки анализа и позволяет в 1,5—2 раза повысить точность дифференциальной диагностики широкой группы паразитарных и других патологий, увеличить выявляемость искомых патогенов. Дальнейшие технические и технологические разработки КАМ проводятся в направлении расширения функций анализа на биоматериалы разных типов и объектов окружающей среды на базе так называемых проточных технологий [1, 2].

Выводы. Результаты анализа состояния лабораторных технологий показывают, что современная номенклатура исследований биологического ма-

териала и объектов окружающей среды предлагает большой выбор унифицированных методик для практического применения и решения главной государственной задачи по формированию достоверного статистического слежения за уровнем заболеваемости населения паразитарными болезнями и состоянием среды обитания.

Следует учитывать также заболеваемость населения паразитозами на каждой конкретной администативной территории субъектов Российской Федерации и рационально планировать необходимые исследования в соответствии со структурой эпидзначимости объектов окружающей среды.

Необходимо также осуществлять: дальнейшую разработку и усовершенствование методов и средств профилактики и борьбы с социально значимыми паразитарными болезнями, включая совершенствование систем эпидемиологического надзора за паразитозами и комплекса мер по санитарной охране территории страны от завоза тропических болезней; оптимизацию методов диагностики и терапии паразитарных болезней; изучение экологии и биологии переносчиков, природных хозяев и возбудителей паразитозов; разработку новых методов и средств борьбы с переносчиками и регуляции численности природных хозяев возбудителей.

1. Асланова М.М. Диагностика криптоспоридиоза // Здоровье населения и среда обитания. 2015. № 7 (268). С. 49—50.

2. Асланова М.М. и др. Сравнительный анализ эффективности методов диагностики криптоспоридиоза / М.М. Асланова, Т.Г. Сыскова, Е.А. Черникова // Здоровье населения и среда обитания. 2012. № 10 (235). С. 36—37.

3. Бронштейн А.М. и др. Первый в России аутохтонный случай выявления длительной микрофиляриемии Dirofilaria repens и первый опыт комбинированной терапии дирофиляриоза repens / А.М. Бронштейн, Н.А. Малышев, С.Н. Жаров [и др.] // Эпидемиология и инфекционные болезни. 2013. № 3. С. 47—52.

4. Булат С.А. и др. Идентификация маркерных штаммов Leishmaniamajor, L. turanica, L. gerbilli методом полимеразной цепной реакции с универсальным праймером / С.А. Булат, М.В. Стрелкова, В.В. Сысоев // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. 1992. № 1. С. 21—22.

5. Жиренкина Е.Н. Изучение лейшманиозов методом полимеразной цепной реакции // Сеченовский вестник. 2012. № 1. С. 49—53.

6. Кондрашин А.В. и др. Тенденции в борьбе с малярией в мире. Прогресс и актуальные задачи в программах борьбы с малярией / А.В. Кондрашин, А.М. Баранова,

Л.Ф. Морозова [и др.] // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. 2011. № 4. С. 3—8.

7. Кузнецова К.Ю. Автоматизация лабораторной диагностики гельминтозов (экспериментальные исследования) // Автореф. дисс. . канд. мед. наук. М., 2005. 28 с.

8. Медовый В.С. и др. Современные возможности роботизированной микроскопии в автоматизации анализов и лабораторной телемедицине (аналитический обзор) / В.С. Медовый, А.М. Пятницкий, Б.З. Соколинский [и др.] // Клиническая лабораторная диагностика. 2012. № 10. С. 32—43.

9. Морозов Е.Н. Перспективы применения методов молекулярной паразитологии в мониторинге социально значимых паразитозов // Справочник заведующего КДЛ. 2011. № 4. С. 13—20.

10. Морозов Е.Н. и др. Молекулярная диагностика паразитарных болезней / Е.Н. Морозов, К.Ю. Кузнецова // Инфекционные болезни. 2014. № 1. С. 36—37.

11. Морозов Е.Н. и др. Дирофиляриоз человека: клинико-диагностические признаки и методы диагностики / Е.Н. Морозов, В.Г. Супряга, В.М. Ракова [и др.] // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. 2014. № 2. С. 13—17.

12. Национальный стандарт Российской Федерации. Технологии лабораторные клинические. Обеспечение качества клинических лабораторных исследований. Часть 4. Правила ведения преаналитического этапа: ГОСТ Р 53079.4—2008 (утв. и введен в действие приказом Ростехрегулирования от 18.12.2008 № 554-ст).

Читайте также:

Пожалуйста, не занимайтесь самолечением!
При симпотмах заболевания - обратитесь к врачу.