Митоз в дробящихся яйцах аскариды

ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА № 3

Тема: Хромосомный уровень организации генетического материала.

Митотический цикл, его периодизация.

Цель занятия:

ü Изучить химический состав и формы организации хромосом в митотическом цикле.

ü Рассмотреть митотический цикл и его периоды.

ü Ознакомиться с явлением политении и полиплоидии.

Задачи занятия: студенты должны знать:

ü Химический состав, морфологическую организацию и функции хромосом

ü Определение и характеристику митотического цикла

ü Эндомитоз, его характеристику, механизмы полиплоидии

ü Эндорепликацию, морфологию политенных хромосом.

Тесты контроля исходного уровня знаний (ответить на вопросы, предложенные преподавателем).

Вариант № _______

1. ______________	6. ______________
2. ______________	7. ______________
3. ______________	8. ______________
4. ______________	9. ______________
5. ______________	10. ______________

Количество баллов: _______

Деление клетки составляют основу жизнедеятельности организма. Основные проявления жизни выражаются в обмене веществ, раздражимости, росте, размножении, движении, развитии. Деление клеток, или репродукция, играет важную роль в жизни организма и представляет основу индивидуального развития, роста, регенерации, размножения, ряда патологических процессов, поддерживает преемственность наследственной информации и изменчивость в ряду поколений, обеспечивает обновление и целостность организмов. Нарушение этих процессов приводит к заболеванию или гибели структур живой системы. Знание особенностей деления клеток позволяет понять механизмы возникновения и особенности течения многих заболеваний и найти оптимальные способы их лечения.

Вопросы для самоподготовки:

1. Хромосомы и их функции.

2. Химический состав хромосом, соотношения белков и нуклеиновых кислот.

3. Фракции и функции хромосомных белков (гистоновых и негистоновых).

5. Уровни структурной организации хромосом (хроматина):

6. Морфология метафазных хромосом (метацентрики, субметацентрики,

7. Хроматин – форма существования интерфазных хромосом. Классификация хроматина: 1) строение и функции герохроматина:

а) структурного (конститутивного);

2) строение и функции эухроматина.

8. Правила хромосом.

9. Митотический цикл, определение и его периоды.

10. Определение и характеристика фаз митоза.

11. Нарушения фаз митоза. Патологические изменения в клетках.

12. Значение митоза.

13. Определение и характеристика периодов интерфазы.

14. Соотношение ДНК (с) и хромосом (п) в митотическом цикле.

15. Почему жизненный цикл некоторых клеток совпадает с митотическим циклом, а у

других клеток не совпадает?

16. Митотическая активность различных тканей. Факторы, влияющие на митотическую активность клеток.

17. Амитоз, определение, механизм деления, в каких клетках встречается?

18. Эндомитоз, определение, морфофизиологические критерии эндомитоза. В каких

клетках закономерно протекает эндомитоз? Биологическое значение.

19. Политения. Эндорепликация. В каких клетках образуются политенные хромосомы?

20. Строение политенных хромосом, образование пуфов, их функциональное значение.

Основные термины по теме:

1. Акроцентрические хромосомы____________________________________________

2. Амитоз _________________________________________________________________

3. Аутосомы _____________________________________________________________

6. Гетерохроматин __________________________________________________________

7. Гистоновые белки______________________________________________________

8. Жизненный цикл__________________________________________________________

11. Метацентрические хромосомы______________________________________________

12. Митотический цикл______________________________________________________

13. Негистоновые белки_______________________________________________________

15. Полиплоидные клетки____________________________________________________

16. Политенные хромосомы___________________________________________________

18. Структурный гетерохроматин______________________________________________

19. Субметацентрические хромосомы___________________________________________

20. Телоцентрические хромосомы______________________________________________

21. Факультативный гетерохроматин___________________________________________

Литература:

3. Биология А.А.Слюсарев, С.В.Жукова, Киев,1987г. стр.27-30,43-48

4. Руководство к лабораторным занятиям по биологии, Ю.К. Богоявленский,1988г. стр. 26-28,53-54.

4. Препаровальные иглы. Предметные стёкла. Краситель ацетоорсеин. Учебные микроскопы: МБИ-1, Биолам. 5. Цветные карандаши.

Ход работы:

Задание № 1.Обозначьте уровни структурной организации хроматина (хромосом):

1.___________________________

2.
2.________________________________

3.________________________

4.________________________

5._а_______________________

Задание №2.

По таблицам изучите фазы митоза в растительных клетках. На постоянноммикропрепарате клеток корешка лука при малом увеличении микроскопа найдите в поле зрения зону деления. Затем этот участок изучите при увеличении х 40. Найдите в клетках стадию интерфазы и различные фазы митотического деления (профазу, метафазу, анафазу, телофазу, интерфазу).

Интерфаза. Ядро в клетке округлое, с четкими границами. В нем видны 1 или 2 ядрышка. Хроматин в виде глыбок заполняет кариоплазму.

Профаза. Ядро заметно увеличивается, в нем исчезают ядрышки. В кариоплазме образование напоминает клубок из тонких нитевидных структур, которые являются хромосомами. В конце профазы оболочка ядра разрушается, и хромосомы выходят в цитоплазму.

Метафаза. Хромосомы приобретают вид сильно изогнутых палочковидных структур. Найдите клетку, где хромосомы лежат в экваториальной плоскости, образуя звезду. В некоторых клетках видно, что хромосомы состоят из двух хроматид

Анафаза. В клетке видны две звезды, так как сестринские хромосомы (хроматиды) перемещаются к полюсам. Хромосомы имеют вид шпильки: центромеры направлены к полюсам, а плечи расходятся под углом друг к другу.

Телофаза. У противоположных полюсов клетки видны рыхлые клубки из частично деспирализованных хромосом. В центре клеток начинает формироваться перегородка, которая постепенно делит материнскую клетку на две дочерние клетки.

Зарисуйте интерфазу и фазы митоза. Обозначьтепрофазу, метафазу, анафазу, телофазу и интерфазу.

Зарисуйте интерфазу и фазы митоза.Обозначьтепрофазу, метафазу, анафазу, телофазу и интерфазу.

Задание №4. Назовите периоды клеточного цикла и укажите число хромосом (п) и ДНК (с) в фазах митоза, периодах интерфазы и дифференцированных клетках.

Схема клеточного цикла

1.
___________ 2. ___________

Митотический индекс определяется числом клеток, находящийся в митозе на всех стадиях: анафазе, метафазе, телофазе и профазе, к общему числу учтенных клеток исследуемой ткани и выражается в промилях

Заполните таблицу:

Фаза митоза	Количество клеток
Профаза (П) Метафаза (М) Анафаза (А) Телофаза (Т)
Интерфаза
Сумма всех клеток

Задание №6. Изучите на постоянном микропрепарате гигантские политенные хромосомы из слюнных желез насекомого. На микропрепарате видны изолированные хромосомы в виде длинной ленты. По длине хромосомы отчетливо видны поперечные чередующиеся светлые и тёмные диски разной толщины, что создаёт впечатление поперечной исчерченности. Имеются вздутия – пуфы или кольца Бальбиани. Пуфы возникают на местах некоторых дисков за счёт разрыхления и деконденсации. Пуф является местом интенсивной транскрипции и генной активности.

Рассмотрите и зарисуйте политенные хромосомы.

Обозначьте на рисунке:

а) гетерохроматические участки (темные диски)

б) эухроматические участки (светлые диски)

ВЫВОДЫ:_________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Домашнее задание:подготовить следующую тему (написать термины, разобрать вопросы для самоподготовки).

Дата добавления: 2015-10-12 ; просмотров: 1870 . Нарушение авторских прав

Принципиальные черты строения клеток животных, растений, грибов одинаковы. Их общая черта - компартментализация. Этот термин означает подразделение клетки на ядро, содержащее хроматин и одно или несколько ядрышек, и цитоплазму, в которой различают митохондрии, пластиды (у растений) и некоторые другие самовоспроизводящиеся орга- неллы клетки. Кроме того, в цитоплазме эукариот имеются органоиды, которые постоянно присутствуют в ней, но не обладают способностью к самовоспроизведению. Это аппарат Гольджи, вакуоли, лизосомы.

Клетки бактерий (прокариот) построены по другому типу: они не имеют морфологически оформленных самовоспроизводящихся органелл, за исключением нуклеоида - аналога ядра клетки эукариот.

Всякая активно делящаяся клетка претерпевает ряд последовательных изменений, из которых складывается клеточный цикл. При оптимальных условиях длительность клеточного цикла у разных организмов неодинакова.

Клеточный цикл состоит из четырех периодов: пресинтетического (Gi), периода синтеза ДНК (5), постсинтетического (Gy и митоза (Л/). Собственно митоз захватывает не более 1/7-1/10 всего клеточного цикла, составляя лишь небольшую часть его.

Рис. 3.1. Схема клеточного цикла

В покоящейся клетке на стадии интерфазы различают сферическое ядро, окруженное двухслойной ядерной мембраной с порами диаметром около 40 мкм. Хромосомы в этой стадии находятся в ядре в расправленном, растянутом состоянии и практически невидимы в световой микроскоп до начала митоза Тем не менее, уже на первых этапах развития цитологии были получены факты, указывающие на непрерывность существования хромосом во времени. Об этом свидетельствует постоянство формы (сохранение индивидуальности) хромосом. Еще в 1888 г. Т. Бовери показал, что в первых митозах оплодотворенного яйца аскариды хромосомы в профазе появляются в том же месте, где они оказались в телофазе предыдущего митоза. В наши дни это было подтверждено супругами Байер (1957— 1958 гг.), применившими микрокиносъемку для наблюдения митозов в эндосперме лилейных.

Профаза. Хромосомы спирапизуются, укорачиваясь и утолщаясь. Благодаря этому они становятся заметными в световой микроскоп. Уже в ранней профазе видно, что каждая хромосома состоит из двух хроматид. Это результат репликации, произошедшей в интерфазе - на стадии S клеточного цикла. Хроматиды тесно ассоциированы по длине и перекручены. К концу профазы эта ассоциация ослабевает. Исчезают ядрышки, растворяется ядерная мембрана, и хромосомы оказываются в цитоплазме. Этот момент обозначает завершение профазы.

В начале профазы хромосомы равномерно распределяются по всему ядру, а к концу профазы приближаются к ядерной мембране. Перед растворением ядерной мембраны хромосомы почти полностью спирализованы. За период профазы они сокращаются до 1/25 длины по сравнению с ранней профазой.

Прометафаза. После растворения ядерной мембраны хромосомы движутся по направлению к экватору. Прометафаза завершается, когда хромосомы достигают экваториальной плоскости.

Мстафаза. Появляются неокрашивающиеся нити ахроматинового веретена. В животных клетках видны звездообразные фигуры у полюсов. Они образуются вокруг центриолей, разошедшихся к полюсам клетки. Хромосомы (каждая из двух хроматид) выстраиваются в плоскости экватора, образуя так называемую метафазную пластинку. Длинные хромосомы как правило изогнуты F-образно. При этом острие V указывает на центр метафазной пластинки, и на нем видна неокрашенная перетяжка - центромера, к которой прикрепляется нить ахроматинового веретена и таким образом обеспечивает движение хромосомы. Центромеры выстраиваются в экваториальной плоскости, а плечи достаточно длинных хромосом как бы свисают к тому или другому полюсу.

Метафазная пластинка - своеобразный паспорт организма. Число и форма хромосом, наблюдаемых в метафазе, характеризуют кариотип вида. Отчетливо выявляется парность хромосом. Парные, или гомологичные, хромосомы обычно совершенно одинаковы по длине, расположению центромеры и другим деталям строения. Одну из каждой пары гомологичных хромосом вносит в зиготу материнская, другую - отцовская гамета.

Анафаза начинается в момент деления центромер, удерживавших до этого вместе обе хроматиды каждой хромосомы. Все центромеры делятся одновременно. Хроматиды, ставшие теперь дочерними хромосомами, разъединяются и расходятся к противоположным полюсам по нитям веретена, фиксированным у полюсов митоза.

Телофаза - заключительная стадия митоза - начинается завершением движения хромосом к полюсам. Вслед за этим происходит реконструкция интерфазных ядер, которая как бы повторяет ход профазы в обратном порядке: формируется ядерная мембрана, вновь появляются ядрышки. Хромосомы, которые теперь состоят из одной нити каждая, истончаются, удлиняются и становятся невидимыми. В это же время происходит цитокинез - разделение цитоплазмы. В каждой животной клетке образуется перетяжка, постепенно разделяющая клетку на две. У растений деление клетки завершается формированием фрагмопласта - новой клеточной стенки между дочерними ядрами.

Если на митотически делящиеся клетки подействовать колхицином - алкалоидом растительного происхождения, блокирующим полимеризацию нитей веретена, то в результате хромосомы теряют способность передвигаться в плоскость веретена в прометафазе и расходиться в анафазе. Удвоенные хромосомы остаются вместе в одной клетке.

Наиболее характерный процесс, лежащий в основе циклических изменений хромосом, - цикл спирализации-деспирализации хромонем, или хромосомных нитей. На стадии ранней профазы митоза, когда различимые в световой микроскоп хромосомы максимально деспирализованы, можно видеть, что хромонема неравномерна по длине: она имеет тонкие и более утолщенные участки, которые называются хромомерами. Расположение хромомер для каждой хромосомы относительно постоянно. Хромомеры представляют собой участки более плотной спирализации хромонем.

Представлен кратко общий ход митоза, характерный для клеток животных и растений. Некоторые отличия от этого процесса встречаются, например, у грибов (почкующиеся дрожжи-сахаромицеты), у которых весь митоз проходи!' внутри ядерной мембраны, сохраняющейся на всех стадиях, а ахроматиновое веретено формируется внутри ядра.

Задание № 1. Обозначьте уровни структурной организации хроматина (хромосом):

1.___________________________

2.
2.________________________________

3.________________________

4.________________________

5._а_______________________

По таблицам изучите фазы митоза в растительных клетках. На постоянном микропрепарате клеток корешка лука при малом увеличении микроскопа найдите в поле зрения зону деления. Затем этот участок изучите при увеличении х 40. Найдите в клетках стадию интерфазы и различные фазы митотического деления (профазу, метафазу, анафазу, телофазу, интерфазу).

Профаза.Ядро заметно увеличивается, в нем исчезают ядрышки. В кариоплазме образование напоминает клубок из тонких нитевидных структур, которые являются хромосомами. В конце профазы оболочка ядра разрушается, и хромосомы выходят в цитоплазму.

Анафаза.В клетке видны две звезды, так как сестринские хромосомы (хроматиды) перемещаются к полюсам. Хромосомы имеют вид шпильки: центромеры направлены к полюсам, а плечи расходятся под углом друг к другу.

Телофаза.У противоположных полюсов клетки видны рыхлые клубки из частично деспирализованных хромосом. В центре клеток начинает формироваться перегородка, которая постепенно делит материнскую клетку на две дочерние клетки.

Зарисуйте интерфазу и фазы митоза. Обозначьте профазу, метафазу, анафазу, телофазу и интерфазу.

З
адание №4. Назовите периоды клеточного цикла и укажите число хромосом (п) и ДНК (с) в фазах митоза, периодах интерфазы и дифференцированных клетках.

Схема клеточного цикла

___________ 2. ___________

Сумма всех клеток

Задание №6. Изучите на постоянном микропрепарате гигантские политенные хромосомы из слюнных желез насекомого. На микропрепарате видны изолированные хромосомы в виде длинной ленты. По длине хромосомы отчетливо видны поперечные чередующиеся светлые и тёмные диски разной толщины, что создаёт впечатление поперечной исчерченности. Имеются вздутия – пуфы или кольца Бальбиани. Пуфы возникают на местах некоторых дисков за счёт разрыхления и деконденсации. Пуф является местом интенсивной транскрипции и генной активности.

Рассмотрите и зарисуйте политенные хромосомы.

Обозначьте на рисунке:

а) гетерохроматические участки (темные диски)

б) эухроматические участки (светлые диски)

Домашнее задание: подготовить следующую тему (написать термины, разобрать вопросы для самоподготовки).

Многие исследователи (начиная с середины XIX в.), описывая процесс деления клеток, отмечали, что в некоторых случаях на определенной стадии деления ядро клетки исчезает, а в конце деления появляется вновь.

На рисунках Ауэрбаха на месте ядра изображена пустота, так как на неокрашенных препаратах располагавшиеся там хромосомы видеть не удавалось. Объяснение этим фактам могло быть дано лишь при применении контрастирующих реактивов или окрасок, когда выяснилось, что ядра во время деления не исчезают, а лишь морфологически перестраиваются. Этим было положено начало новым представлениям о процессе клеточного деления.

Работы Моля, Негели, Ремака, Вирхова и ряда других исследователей привели к прочному закреплению представления о непрерывном развитии клеток путем деления. Но процесс деления представлялся в середине прошлого века очень простым; Ремак создал схему деления, согласно которой сначала делится ядрышко, потом ядро и, наконец, разделяется вся клетка. Теперь мы знаем, что эта схема подходит только для относительно редких случаев прямого деления. Открытие более сложного, но и более обычного, непрямого деления относится к 70-м годам истекшего века.

Характерными структурами кариокинетического деления являются хромосомы и центральное веретено. Некоторые исследователи давно видели те или другие элементы фигуры митоза, случайно описывали отдельные стадии деления, но не придавали им значения,— не видели в них особой формы деления клеток, или даже считали их за атипичные явления. Так, К. М. Бэр в статье, напечатанной в Бюллетенях Петербургской академии наук (1847), описывая опыты по искусственному оплодотворению у морских ежей, упоминает об изменениях оплодотворенного яйца, показывающих, что он, несомненно, видел силуэт кариокинетической фигуры, но значения наблюдаемых и точно описанных картин Бэр в то время, естественно, не понял.

Теперь мы подходим к кульминационному периоду в истории открытия кариокинеза, когда в течение нескольких лет появился ряд работ, показавших, что дело идет о новом, ранее не известном способе клеточного деления, имеющем широкое распространение и у растений и у животных.

Этот период начинается работами русского ботаника И. Д. Чистякова. Иван Дорофеевич Чистяков (1843—1877) окончил физико-математический факультет Московского университета в 1868 г. Еще студентом он получает золотую медаль за работу по систематике. Быстро добившись магистерской, а потом и докторской степени, И. Д. Чистяков занимает кафедру анатомии и физиологии растений.

Зарубежные исследователи часто обходят полным молчанием работы Чистякова. Так, Э. Кюстер (Е. Kuster, 1939) в очерке развития учения о растительной клетке, где, вообще говоря, он отнюдь не обходит русских авторов, о Чистякове даже не упоминает.

Новая форма деления клеток все больше привлекает внимание гистологов. К концу 70гХ годов относятся исследования киевского гистолога Петра Ивановича Перемежко (1833—1893). Первое краткое его сообщение относится к 1878 г. Автор указывает на хвост молодых тритонов, который по прозрачности очень удобен для изучения деления разных клеток. П. И. Перемежко наблюдал деление клеток эпидермиса, соединительной ткани, эндотелия и лейкоцитов. В следующем году (1879) появляется более полная статья Перемежко с таблицей рисунков; он использовал как живой, так и фиксированный материал, но он не применял окрасок. В том же году Перемежко публикует еще одно исследование, посвященное делению эритроцитов у личинок амфибий, где он дает в общем верную последовательность стадий, но по-прежнему считает, что применение красок не дает дополнительных преимуществ.

Одновременно с работами Перемежко появляются исследования немецкого гистолога Шлейхера (W. Schleicher). Предварительное сообщение его вышло в том же журнале, где и сообщение П. И. Перемежко (несколькими номерами ранее), а полная работа в том же томе Archiv fiir mikroskopische Anatomie, где напечатана статья последнего. Исследования Шлейхера посвящены делению хрящевых клеток. Новых деталей они не внесли.

Одновременно с Перемежко на личинках саламандры констатировал непрямое деление клетки Флемминг, один из крупнейших гистологов конца прошлого века.

Флемминг (Walther Flemming, 1843—1905) учился в нескольких германских университетах и по получении в 1868 г. докторской степени работал по зоологии у Ф. Э. Шульце (Franz Eilhardt Schultze, 1840—1921) в Ростоке и у Земпера (Carl Semper, 1832—1893) в Вюрцбурге. С 1871 г. Флемминг занимает прозектуру по анатомии в Ростоке, через два года получает профессуру в Праге, а с 1876 г. переходит на кафедру анатомии в Киле, где работает до 1901 г., оставив с этого времени преподавание.

Процесс созревания впервые описал и верно изобразил Н. А. Варнек. На живых яйцах брюхоногих моллюсков он показал выделение редукционных телец и образование в зиготе пронуклеусов. Хотя работа Варнека — это образец точного наблюдения, правильной оценки описанных процессов он дать не смог. Это было сделано в следующей работе Бенедена (1875), установившего понятие о пронуклеусах.

Приложение к растениям общей теории оплодотворения, созданной работами Бенедена, Бовери, О. Гертвига и др., встречало затруднение в сложности соответственных процессов у цветковых растений. В разрешении этого вопроса основное значение имели работы русских ботаников, особенно И. Н. Горожанкина и С. Г. Навашина.

Эпоху в учении об оплодотворении у растений составили классические работы Сергея Гавриловича Навашина (1857—1930). В сообщении, представленном в 1898 г. в Петербургскую академию наук, С. Г Навашин пересматривает старые данные об оплодотворении у цветковых растений и открывает процесс двойного оплодотворения. Исследования С. Г. Навашина выяснили значение и судьбу двух ядер, на которые делится генеративное ядро пыльцы. Оказалось, что в то время как одно ядро сливается с яйцеклеткой, второе ядро соединяется с ядром эндосперма. Этими работами было положено основание современному учению об оплодотворении у цветковых растений.

Выяснение цитологической стороны явлений оплодотворения привлекло особое внимание к ядру клетки. Еще в 1866 г. Геккель априорно высказал мысль о значении ядра как носителя наследственных свойств. В 1883 г. Бенеден предположил-связь редукционного деления с распределением отцовских и материнских хромосом. Годом позже (1884) О. Гертвиг и Страсбургер, независимо друг от друга, выдвинули идею, что хроматин является материальным носителем наследственности. В 1885 г. ту же гипотезу высказал Вейсман (August Weismann, 1834— 1914), подробно развивший ее в 1892 г. Предположение Генкинга (Н. Henking, 1891), что перед редукционным делением имеет место попарное соединение хромосом, которые затем расходятся при редукции, было подтверждено цитологически Рюккертом (Joh. Rueckert, 1892) у селяхий и одновременно Бовери у аскариды. Этим были заложены предпосылки развития цитогенетики, относящегося уже к нашему столетию.

Теория постоянства или индивидуальности хромосом неоднократно встречала возражения, как в начале своего зарождения (Мевес, 1911 и др.), так и в наше время (П. В. Макаров, 1946 и сл. годы). Тем не менее она прочно утвердилась и в настоящее время разделяется большинством цитологов. Еще в 1880 г. русский ботаник И. В. Баранецкий (1843—1905) показал у традесканции спиральное строение хромосом. Дарлингтон (С. D. Darlington) в 1932 г. предложил гипотезу спирализации хромосом при митозе и деспирализации их при переходе в интеркинетическое состояние — представление, нашедшее в наше время широкое признание.

Кариологическое направление цитологии, в центре внимания которого было ядро, оформилось в первой четверти нашего столетия в особый раздел цитологии — цитогенетику. Клетке в целом стали уделять меньше внимания и в 20—30-х годах цитология в какой-то мере подменялась кариологией.

Если вы нашли ошибку, пожалуйста, выделите фрагмент текста и нажмите Ctrl+Enter.

Препарат № 24. Непрямое деление. Дробящиеся яйцеклетки лошадиной аскариды (рис. 23)

Данный объект особенно хорош для изучения непрямого деления животной клетки. При делении яиц аскариды образуются только четыре хромосомы, форма которых отчетливо видна на препарате. Встречаются также аскариды этого вида, в яйцеклетках которых образуется при делении только две хромосомы. Кроме того, здесь вокруг центриолей развиваются центросферы, часть лучей которых входит в состав веретена.

Препараты приготовляются из матки лошадиной аскариды. Аскарид можно достать на бойне из кишечника только что убитого животного. Их следует доставлять в лабораторию в банке, наполненной кишечным содержимым или специально приготовленным физиологическим раствором. В этих средах в теплом месте можно сохранять аскарид живыми в течение нескольких дней. Самок легко отличить от самцов благодаря тому, что самка крупнее (длина самки около 40 см, самца 25-30 см), а тело ее на конце прямое, лишь слегка заостренное, в то время как у самца хвостовая часть очень узкая и загнута к брюшной стороне. Кроме того, у самки часто сквозь покровы просвечивают половые органы, что не наблюдается у самцов.

Самку аскариды прикрепляют иголками (втыкая их в головную и хвостовую части) к восковому дну ванночки и делают продольный разрез через все тело. При этом открываются половые органы.

Половые органы самки состоят из непарного влагалища, которое имеет отверстие в передней трети тела на брюшной стороне, и парных матки, яйцеводов и яичников. Эти органы представляют собой трубки разного диаметра. Наибольший диаметр имеет матка; она начинается сразу от короткого влагалища и переходит в более узкий яйцевод, который в свою очередь оканчивается еще более узким яичником.

Вырезают кусочки матки длиной 5-10 см. Для того чтобы яйца не вываливались из матки, можно предварительно перевязать оба конца кусочка шелковыми нитками.

Для изучения митоза необходимо иметь яйца, находящиеся на стадии дробления. Для этого надо вырезанный кусочек матки поместить в физиологическом растворе в термостат при температуре 20-25° на срок от нескольких часов до одних суток, для того чтобы яйца дозрели и достигли нужной стадии. Через несколько часов или через сутки кусочек вынимают и помещают в фиксатор. Фиксировать можно разными методами: смесью Ценкера, сулемой с ледяной уксусной кислотой, спиртом с уксусной кислотой и др. Через некоторое время после помещения в фиксатор вырезанный кусочек матки следует разрезать на несколько частей. При фиксировании водными фиксаторами материал после промывания помещают в спирты возрастающей крепости, начиная с 30-градусного. Кусочки заливают в парафин и делают поперечные срезы толщиной 7-10 μ. Окрашивают срезы железным гематоксилином, дифференцируя их так, чтобы были четко видны веретено и хромосомы.

На препарате при малом увеличении видно следующее. Стенка матки состоит из эпителия, имеющего своеобразное строение. Клетки эпителия неправильной формы с круглыми ядрами колбообразно выпячиваются в просвет матки. Эпителий располагается на соединительнотканной мембране, под которой лежат волокна гладких мышц. Полость матки заполнена яйцевыми клетками, находящимися на разных стадиях развития.

Каждая яйцевая клетка окружена гомогенной толстой оболочкой. Наружный контур оболочки очерчен более четко, чем внутренний. При правильной дифференцировке оболочка окрашена в серый цвет. Дробление яйцеклеток происходит внутри оболочки, которая только на ранних стадиях развития тесно прилегает к цитоплазме; на более поздних стадиях между оболочкой и бластомерами видна светлая щель, образующаяся в результате сжатия бластомеров. Следует рассматривать стадии яйцеклетки, двух, трех и четырех бластомеров. Стадии с большим количеством бластомеров для изучения митоза менее удобны, так как бластомеры слишком малы.

При большом увеличении микроскопа видно, что яйцеклетка до начала деления имеет вакуолизированную цитоплазму, в которой

располагаются ядро и клеточный центр. Ядро окружено тонкой оболочкой; в нем находятся зернышки и глыбки хроматина, а также круглое, хорошо заметное ядрышко. Рядом с ядром расположен клеточный центр, состоящий из темного зернышка (центриоли) и отходящих от последнего лучей в виде темных нитей, концы которых теряются в плазме. Это образование называется центросферой.

Рис. 23. Митоз. Яйцеклетка аскариды. Метафаза (увеличение - ок. 15, об. 40):

1- хромосомы, 2 - центриоли, 3- сияние вокруг центриолей, 4 - веретено, 5- оболочка яйцеклетки

В профазе сначала исчезает ядрышко, затем увеличиваются глыбки хроматина. Клеточный центр делится на два. При этом часть лучей оказывается протянутой от одной центриоли к другой, это - начало образования веретена, В более поздней профазе видно, что ядро теряет свою оболочку и из его содержимого образуются хромосомы. Центриоли при этом отодвигаются по направлению к полюсам клетки, и между ними ясно видно веретено,

Веретено состоит из очень тонких нитей, сходящихся на полюсах клетки в центриолях.

При делении яйцеклеток аскариды видны только четыре хромосомы. Они имеют форму длинных изогнутых палочек.

В метафазе хромосомы располагаются на экваторе веретена так, что на продольном сечении клетки видна экваториальная пластинка; на поперечном сечении, когда срез прошел поперек веретена, хромосомы имеют вид звездочки - материнской звезды. При этом изогнутая часть хромосом обращена к центру клетки, свободные концы - к ее периферии. В метафазе число хромосом удваивается, и образуется восемь хромосом.

В анафазе хромосомы (по четыре) передвигаются к полюсам клетки; свободные концы хромосом направлены к экватору клетки, а изогнутые части к полюсам. Когда хромосомы приближаются к полюсам, появляется бороздка, которая, постепенно углубляясь, разделяет клетку на две части.

В телофазе, благодаря значительным изменениям химических и физических свойств, хромосомы теряют правильные очертания, бледнеют и постепенно распадаются; образуются два новых ядра с глыбками хроматина, ядрышком и клеточным центром, лежащим рядом с ядром.

Читайте также: