Санация при стафилококке что это


В условиях постоянно усиливающейся антропогенной нагрузки актуально проведение мероприятий, направленных на профилактику экологически обусловленных заболеваний органов дыхания, к которым относятся аллергический ринит и бронхиальная астма. Проведенный нами анализ заболеваемости детей болезнями органов дыхания позволил выявить преобладание аллергической патологии в ряде городов Оренбургской области, в которых зарегистрирован наибольший уровень загрязнения воздушной среды.

Ранее, рядом авторов было установлено, что среди детей с астматическим бронхитом и бронхиальной астмой высок уровень резидентных стафилококковых бактерионосителей [5].

Таким образом, актуальной является санация резидентных стафилококковых бактерионосителей как превентивная мера в возникновении экологически обусловленных заболеваний верхних дыхательных путей. Для санации целесообразно использование лекарственного препарата, который, с одной стороны, стимулировал бы местный иммунитет и естественную колонизационную резистентность слизистых оболочек макроорганизма, а с другой - снижал персистентные свойства патогена, в частности, его антикарнозиновую активность (АКрА), являющуюся маркером персистенции [6], поскольку подавление персистирующих свойств возбудителя затрудняет его паразитирование внутри клеток и тем самым повышает эффективность лекарственных воздействий [2]. В качестве такого препарата нами был выбран иммуномодулятор циклоферон, который, как было показано ранее, снижает АКрА микроорганизмов [4].

Кроме того, известно, что микроорганизмы образуют в организме хозяина высокоорганизованные сообщества, которые позволяют им выживать в любых неблагоприятных условиях, - биопленки [5], поэтому представляло интерес определить влияние циклоферона на способность стафилококков к биопленкобразованию.

Цель работы

Определение длительности эффективной санации резидентных стафилококковых бактерионосителей с помощью циклоферона по его способности модулировать антикарнозиновую активность и биопленкообразование золотистых стафилококков.

Материалы и методы

Результаты и обсуждение

Популяционная структура исходной культуры S. aureus по АКрА была представлена клонами с разной выраженностью признака: 67 % обладали высокой АКрА (2,0-3,0 мг/мл), по 16,5 % - средней активностью (1,0-2,0 мг/мл) и нулевой. Среднепопуляционный уровень АКрА составлял 2,03±0,26 мг/мл (рис. 1).

Изменение популяционной структуры S. aureus по АКрА под влиянием циклоферона

Под действием циклоферона после первого соинкубирования доля клонов S.aureus с высокой АКрА составила 100 %, после второго - 50 % с высокой и 50 % со средней АКрА. Среднепопуляционный уровень признака был равен 2,62±0,16 мг/мл и 2,05±0,94 мг/мл соответственно. На третий день выделялось 50 % клонов с высокой АКрА, появились клоны с низкой (1,1-1,8 мг/мл) и нулевой активностью (8 % и 42 % соответственно), а средний уровень продукции ингибиторов карнозина снизился до 1,44±0,26 мг/мл. Далее возросло число клонов с высокой (67 %) и низкой (17 %) АКрА, а также до 8 % уменьшилось количество клонов с нулевой активностью и появилось 8 % со средней, что сопровождалось повышением среднепопуляционного значения антикарнозивой активности до 2,2±0,26 мг/мл. После пятого соинкубирования, наряду с клонами, обладающими высокой АКрА (59 %), появилась доля клонов со средней способностью к инактивации карнозина (8 %), а уровень клонов, не обладающих признаком, увеличился до 33 %; далее было зарегистрировано такое же количество клонов с высокой АКрА (58 %) и 42 % клонов без признака. Средний уровень АКрА в популяции составил 1,75±0,26 мг/мл и 1,7±0,26 мг/мл соответственно. На седьмой день эксперимента отмечено нарастание доли клонов без АКрА (76 %), 8 % составляли клоны со средним и 16 % с низким уровнем активности, а среднее значение антикарнозиновой активности в популяции снизилось до 0,195±0,12 мг/мл.

Таким образом, установлено, что в течение семи дней эксперимента наблюдалась перестройка популяционной структуры в сторону клонов, не обладающих антикарнозиновой активностью. Кроме того, наименьшая среднепопуляционная способность золотистых стафилококков к инактивации карнозина была отмечена также на седьмой день соинкубирования с циклофероном.

Одновременно нами проведено изучение влияния циклоферона на способность золотистых стафилококков образовывать биопленки (рис. 2). Исходную популяцию штамма стафилококка составляли 80 % клонов со средней способностью биопленкообразования (от 1,9 до 2,5) и 20 % - с высокой (2,6 и более), среднее значение способности популяции образовывать биопленки было равно 2,44±0,04.

Изменение популяционной структуры S. aureus по способности формировать биопленки под влиянием циклоферона

Соинкубация стафилококков с циклофероном приводила как к снижению доли клонов со средним показателем до 40 % и появлению 60 % клонов с низкой способностью (1,1-1,8) формировать биопленки, так и к снижению среднепопуляционного показателя биопленкообразования (1,69±0,07). При дальнейшей соинкубации доля клонов со средними значениями увеличилась до 53 % и появились клоны с высокими значениями (47 %), средняя способность популяции формировать биопленки составила 2,26±0,12. После третьего дня выделялись клоны с низким (73 %) и нулевым (7 %) биопленкообразованием, до 20 % уменьшилось число клонов со средними значениями, и до 1,5±0,09 снизился средний уровень биопленкообразования. После четвертого дня 93 % клонов характеризовались низкими значениями признака, 7 % - средними (средняя способность биопленкообразования популяции - 1,4±0,05), затем вновь появились клоны с нулевой способностью (7 %), наряду с клонами со средними (7 %) и низкими (86 %) значениями (средняя способность - 1,48±0,06).

На шестой и седьмой дни эксперимента соотношение клонов было примерно одинаковым - около 80 % клонов обладали низкой способностью биопленкообразования и около 20 % клонов - нулевой, а средний уровень биопленкообразования в популяции составил 1,31±0,07 и 1,26±0,05 соответственно.

Полученные результаты показали, что в течение семи дней эксперимента наблюдалась перестройка популяционной структуры в сторону клонов с низкой и нулевой способностью к биопленкообразованию. Кроме того, на шестой и седьмой дни соинкубации стафилококков с циклофероном были отмечены наименьшие среднепопуляционные значения биопленкообразования.

Таким образом, при изучении влияния циклоферона на биологические свойства клонов золотистого стафилококка установлена перестройка популяционной структуры носительского штамма по биопленкообразованию и способности к инактивации карнозина. В ходе эксперимента изменялось соотношение клонов с низкими, средними и высокими значениями и появлялись клоны с нулевыми. Наибольшее число клонов, не обладающих способностью к инактивации карнозина, отмечено на седьмой день соинкубирования, а наименьший уровень биопленкообразования (80 % клонов с низкой способностью и 20 % - с нулевой) зарегистрирован на шестой и седьмой дни эксперимента. Аналогичная тенденция наблюдалась при сравнении средних показателей в популяции. Таким образом, полученные результаты позволили установить оптимальную продолжительность санации стафилококковых бактерионосителей циклофероном, которая составляет семь дней.

На следующем этапе работы нами по трехкратному бактериологическому обследованию была сформирована группа из 40 резидентных стафилококковых бактерионосителей в возрасте 9-12 лет. Они были просанированы циклофероном в течение 7 дней. После первой санации были получены следующие результаты: S.aureus выделялся в 80 % случаев, КОС - в 20 % случаев. После второй отмечено появление у бактерионосителей золотистых стафилококков, наряду с S.aureus, коагулазоотрицательных штаммов в 9,5 % случаев, золотистый стафилококк продолжал высеваться в 76,2 % случаев, только КОС высевали у 14,3 % детей. Третья санация способствовала снижению выделения золотистых стафилококков, стафилококковые бактерионосители составили 66,6 %, коагулазоотрицательные стафилококки высевали в 14,3 % случаев, совместное выделение золотистых и коагулазоотрицательных стафилококков отмечено в 23,8 % случаев. Четвертая, пятая и шестая санации способствовали уменьшению числа бактерионосителей золотистых стафилококков до 47,1 %, 43,5 %, 40,1 % соответственно и одновременно увеличению числа коагулазоотрицательных стафилококков до 23,5 %, 26,1 %, 27,3 %. Увеличилось также число бактерионосителей, у которых, наряду с золотистыми, стали выделяться и коагулазоотрицательные стафилококки (29,4 %, 30,4 %, 31,8 %). Далее мы изучили динамику антикарнозиновой активности золотистых стафилококков в процессе санации циклофероном. Было установлено, что после первой санации циклоферон оказывал разнонаправленное действие на S.aureus: повышал признак у 50 % выделенных штаммов, снижал - у 33,3 % и не оказывал влияния на 16,6 % выделенных от бактерионосителей микроорганизмов. После второй санации способность к инактивации карнозина также повышалась у 50 % выделенных штаммов, снижалась у 43,8 %, не изменялась у 6,3 % выделенных стафилококков; после третьей - у 42,8 %, 50 % и 7,1 % соответственно. После четвертой санации уменьшилось число штаммов, повышающих АКрА, до 14,3 % и до 71,4 % увеличилось число золотистых стафилококков, не способных инактивировать карнозин, АКрА не изменялась у 14,3 % выделенных культур. После пятой и шестой санаций снижение признака зарегистрировано у 80,0 % и 77,7 % штаммов; повышение и индифферентное действие у - 10 % и 11,1 % штаммов золотистых стафилококков соответственно. После седьмой и восьмой санаций выявлены штаммы, в основном ингибирующие АКрА (в 90,9 % случаев) и в 9,1 % повышающие данный признак. Далее мы провели изучение видового состава и антикарнозиновой активности у выделенных штаммов микроорганизмов через месяц после санации. Были получены следующие данные: в 38,1 % случаев выделялся золотистый стафилококк, в 38,1 % - эпидермальный и в 23,1 % - одновременно золотистый и эпидермальный стафилококк или микрококк. Вместе с тем отмечено снижение антикарнозиновой активности у 80 % выделенных штаммов S.aureus по сравнению с исходным уровнем признака (до санации) и у 20 % культур способность к инактивации карнозина не изменилась. Среднее значение признака составило 0,4 мг/мл.

Таким образом, проведенные in vitro и in vivo исследования показали возможность санации резидентных бактерионосителей циклофероном. Установленные режимы санации способствуют не только элиминации золотистых стафилококков со слизистой оболочки переднего отдела носа, но и ингибируют его способность к инактивации карнозина. Циклоферон в качестве препарата для санации стафилококковых бактерионосителей может применяться для профилактики экологически обусловленных заболеваний, в частности, аллергических ринитов и бронхиальной астмы.

Рецензенты:

Гриценко Виктор Александрович, д.м.н., профессор, зав. лабораторией клеточного симбиоза Федерального государственного бюджетного учреждения науки Института клеточного и внутриклеточного симбиоза Уральского отделения Российской Академии наук (ИКВС УрО РАН), г. Оренбург.


Проблема профилактики стафилококковых инфекций, вызываемых Staphylococcus aureus, по-прежнему остается актуальной в современной медицине и практическом здравоохранении. Коагулазоположительные стафилококки являются обитателями кожи и слизистых оболочек. С одной стороны, они встречаются у здоровых лиц - бактерионосителей, с другой - являются опасными микроорганизмами, способными вызывать тяжелейшие инфекции [6]. Известно, что при бактерионосительстве имеет место перестройка механизмов защиты макроорганизма, т.е. создаются условия для выживания (персистирования) возбудителя и дальнейшего развития резидентного типа бактерионосительства.

Санация организма от бактерионосительства - одна из труднейших проблем современной медицины. В качестве показаний для проведения санационных мероприятий на первый план выдвигается не столько этиологические особенности данного состояния, связанного с переживанием на слизистой оболочке верхних дыхательных путей Staphylococcus aureus, сколько более принципиальные критерии, определяющие опасность данного состояния для самого носителя или его окружения [5].

В связи с этим важное практическое значение приобретает разработка эффективных и безопасных методов санации стафилококкового бактерионосительства и, соответственно, профилактики стафилококковых инфекций, при этом важно, чтобы способ санации был не только эффективен, но и обладал длительным пролонгированным действием.

Материалы и методы исследования

В рамках настоящего исследования первичное обследование (бактериологический посев) проводили не ранее, чем за одну неделю до начала санации, второе обследование в течение одной недели после окончания санации, третье - через месяц, а четвертое обследование (катамнестическое) в срок шесть месяцев после санации. В качестве носителей патогенных стафилококков определены лица, у которых из носовой полости выделяли штаммы Staphylococcus aureus резидентного типа. Диагностику типа носительства стафилококков проводили с помощью разработанных диагностических моделей, построенных на информативных тестах, дифференцирующих резидентную и транзиторную стафилококковую микрофлору [7].

Результаты исследования и обсуждение

В ходе первичного бактериологического обследования 59 человек на назальное носительство Staphylococcus aureus было выявлено 16 (27,1 %) бактерионосителей резидентного типа. Все обследуемые лица являлись бессимптомными носителями золотистого стафилококка. Для исключения развития дисбиотических состояний санировать необходимо лишь резидентных бактерионосителей, т.е. лиц, длительно и упорно выделяющих патогенные стафилококки в окружающую среду, тогда как микрофлора транзиторного типа элиминирует из организма в результате гибели или бактериовыделения, и проведение в отношении нее санирующих мероприятий не требуется [5]. В ходе первичного бактериологического обследования от постоянных бактерионосителей были изолированы резидентные варианты S. aureus, обладающие показателем микробной обсемененности, в диапазоне от 4,5 до 5,6 lg КОЕ.

Первое обследование, проведенное через неделю после санации, показало, что S. аureus был изолирован только у шести из 16 санируемых лиц (в 37,5 % случаев), при этом у 4-х обследуемых выделяли смешанную культуру золотистого и коагулазонегативных стафилококков (S.epidermidis, S.hominis), причем штаммы S. аureus обладали достаточно низкими показателем микробной обсемененности (1,0-1,5 lg КОЕ), и тип носительства золотистых стафилококков, согласно использованной методике определения характера носительства, изменился с резидентного на транзиторный, а у 10 человек произошла полная элиминация S. аureus и замена патогенного стафилококка на Staphylococcus epidermidis - представителя нормофлоры данного биотопа. Эффективность проведенной санации резидентного носительства S. aureus составила 62,5 %.

При изучении пролонгированного действия препарата оказалось, что санирующий эффект у лиц свободных от носительства патогенных стафилококков через месяц сохранился, а процент обнаружения S. аureus в исследуемой популяции снизился до 25,0 % (4 человека, из которых у 2 был диагностирован транзиторный тип носительства). Микробиологический пейзаж слизистых оболочек лиц свободных от носительства S. аureus был представлен коагулазонегативными стафилококками (S.epidermidis, S.capitis, S.hominis, S.warneri) и другими представителями нормофлоры.

Рецензенты:

6.1. Для санаций персонала (ежедневной) необходимо использовать следующие санирующие средства (фурацилин 1:5000, риванол 1:5000, 1% борная кислота, марганцевокислый калий (розовокрасный раствор), раствор Люголя (водный или на глицерине), настой листьев эвкалипта, лизоцим, стафилококковый бактериофаг (Приложение 1).

6.2. Для санации персонала в период эпидемиологического неблагополучия необходимо использовать гексахлорофен (1%), трибаск (3%), хлорофиллинт (Приложение 1).

6.3. Для получения наиболее эффективных результатов санации бактерионосителей следует проводить смену санирующих средств через каждые 7 дней.

6.4. В период эпидемиологического неблагополучия (вспышка ОРЗ, подъем заболеваемости внутрибольничными инфекциями, значительная обсемененность стафилококками предметов окружающей среды и т.п.) в лечебно-профилактических учреждениях следует санировать весь персонал учреждения одномоментно.

6.5. В тех случаях, когда невозможно добиться санацией снижения или полного избавления от носительства стафилококка, необходимо настаивать на правильном ношении маски, закрывающей рот, нос и волосы. При этом необходимо иметь график ношения масок и проводить смену масок каждые три часа.

6.6. При отсутствии положительных результатов при лечении хронических воспалительных заболеваний верхних дыхательных путей и полости рта медицинских работников переводят на другую работу.

Схема видовой идентификации стафилококков

Признаки патоген- ности

Определение других признаков патогенности

Выдается ответ: выделен

АСМ или ДНК если + если -

S. aureus S. epidermides

АСМ или ДНК если + если АСМ и ДНК-

S. aureus S. epidermides

РКП - реакция плазмы; ВЛА - лецитовителлазная активность;

АСМ - анаэробное сбраживание маннита; ДНК-дезоксирибонуклеазная активность;

++ положительный результат; - отрицательный результат.

СРЕДСТВА И МЕТОДЫ САНАЦИИ

Очищенный гексахлорофен 2,2- диокси 3, 5, 6, 3, 56 гекса- хлордифенил метанбифенольное соединение. Гексахлорофен - белый, мел- кокристаллический порошок, с температурой плавления 163- 164 град., молекулярный вес- 406,9. Препарат хорошо раст- ворим в органических раство- рителях,70град.спирте,в воде не растворим, нейтрализуется растворами, имеющими щелоч- ное значение рН выше 8,0. Гексахлорофен (гх) обладает высоким бактерицидным дейст- вием в отношении вегетатив- ных форм микроорганизмов и грибов. Гексахлорофен стой- кий при хранении препарат. Его хранят в сухом и прох- ладном месте. Гх относится к высокотоксичным веществам, при введении в желудок 50% животных погибает от дозы 150 мг/кг веса. Он хорошо всасывается через неповреж- денную и поврежденную кожу. Раздражающие свойства чисто- го гх выражены умеренно и в рекомендуемых концентрациях практически не проявляются. Гх является слабым аллерге- ном, при длительном постоян- ном применении без соответс- твующих мер предосторожности он может накапливаться в ор- ганизме, поэтому его исполь- зуют строго по назначению врача. Для санации слизистой носа применяют 1% мазь гх на вазелиновой основе.

Для приготовления 100 г 1%-ной мази требуется вазелина медицинского 99 г, очищенного гексахло- рофена 1г.Отвешенное количество гх не- большими порциями добавляют в вазелин при постоянном поме- шивании (20-30 ми- нут) до получения однородной массы. Готовую мазь фасуют в соответствующую тару. Хранят мазь в банках из темного стекла или в защи- щенном от света мес- те.

При локализации носи- тельства в носу 1% гексахлорофеновой мазью с помощью ватного тампо- на смазывают передние отделы носовой полости в течение 1 минуты произ- водят мягкий массаж кры- льев носа для равномер- ного распределения мази (количество мази на одну обработку около 1 г). Такую обработку проводят 1 раз в сутки в течение 5-6 дней (при ежедневной работе персонала). У де- журящих в течение суток- 3 раза в сутки в течение трех очередных дежурств с перерывом между ними не более 3-х дней (всего проводят 9 обработок). Персонал, работающий 12 часов в смену санируют двухкратно: в начале и конце работы смены. Об- работку проводят в тече- ние четырех дежурств с промежутками не более двух дней (всего прово- дят 8 обработок). Кратность обработок 1 цикл в квартал

Трибромсалициланилид (Три- баск). Зарубежные названия: диафан, бромсалан, темасепт. Трибаск обладает широким спектром антимикробного дей- ствия в отношении золотисто- го стафилококка;бактериоста- тическая концентрация 0,32 мкг/мл, бактерицидная - 1,6 мкг/мл, в отношении кишечной палочки - бактерицидная и бактериостатическая концент- рация - 40 мкг/мл. Препарат устойчив при длительном хра- нении и автоклавировании. Трибаск (3, 41, 5 - трибром- салициланилид) обладает вы- сокой активностью в отноше- нии стафилококков, устойчи- вых к широко применяемым ан- тибиотикам, а также значи- тельным фунгицидным эффек- том. Санацию стафилококковых носителей среди медперсонала и больных проводят 3% мазью. Трибаска на вазелиновой ос- нове. Не отмечено побочных явлений. Мазь не вызывает неприятных ощущений и разд- ражений слизистой носа.

Для приготовления 100 г 3%-ной мази требуется вазелина медицинского 97 г, трибаска - 3 г. От- вешенное количество трибаска тщательно растирают в вазели- не.

Мазь закладывают в нос дважды в день в течение 5-6 дней.

Хлорофиллипт (ХФ). Представляет собой сложное органическое соединение, в состав которого входит хло- рофилл "а" и хлорофилл "в". Это порошок ярко-зеленого цвета, горьковатого вкуса, не растворим в воде, раство- рим в органических раствори- телях. В медицинской практи- ке препарат используется в виде спиртового и масляного растворов. Спиртовой раствор представляет собой прозрач- ную жидкость ярко-зеленого цвета, образующего с водой флуоресцирующий раствор, масляный раствор - густую жидкость ярко-зеленого цвета. ХФ обладает антибак- териальной (бактериостати- ческой и бактерицидной) ак- тивностью в отношении анти- биотикоустойчивых стафило- кокков. ХФ применяют при ле- чении заболеваний, вызванных антибиотикоустойчивыми ста- филококками и при санации стафилококковых носителей. При применении препарата возможно появление аллерги- ческих реакций. Препарат вы- пускается в виде 1% и 0,25% спиртового раствора и 2% масляного раствора. Препарат хранится в стеклянной герме- тически закрытой посуде, в сухом, прохладном и защищен- ном от света месте.

Готовят 2%-ный мас- ляный раствор

При локализации носи- тельства в носу, закапы- вают 2%-ный масляный раствор хлорфиллипта трижды в день в течение 6-7 дней. Для санации зева используют 1% спир- товой раствор хлорфилли- пта (20-30 мл препарата на 100 мл воды). Полос- кание зева проводят 3 раза в день в течение 6-7 дней.

Лизоцим. Антибиотическое вещество ферментного характера нахо- дится в слезах, мокроте, слюне, сыворотке, лейкоци- тах, костном мозгу, хрящах, сердце, печени, легких, поч- ках и т.д. Лизоцим обладает бактериостатическим действи- ем не только в отношении сапрофитов, но и ряда пато- генных микробов (стафилокок- ки, стрептококк, гонококк, менингококк, палочки сибирс- кой язвы, холерных вибрион, брюшнотифозная палочка и т.д.).

Готовят следующим образом: предвари- тельно целые яйца протирают спиртом (скорлупа). Затем яичные белки отделя- ют от желтков и по- мещают в мерный ста- кан. Белки разводят 0,5%-ным стерильным физиологическим ра- створом и 2 раза взбалтывают, а затем разводят в 15 раз. Полученную смесь подкисляют 1% (или 5%) лимонной кисло- той до рН 4,4-4,6, доводят до кипения и кипятят 5 минут (обязательно бесп- рерывно помешивая). Горячей смеси дают остыть. Охлажденную смесь нейтрализуют СаСО3 (мелом) до рН 7,0-7,2. Дают мелу осесть. Лизоцим со- держится в надоса- дочной жидкости. На- досадочную жидкость отфильтровывают дважды до получения прозрачной жидкости, разливают в стериль- ные флаконы и закры- вают. Лизоцим хра- нится при Т +4 град. С неболее 5 дней.

При локализации носи- тельства в носу прово- дят обработку передних отделов носа 1% лизоци- мной мазью или закапы- вают 0,1% лизоцима по 2-4 капли в каждую ноз- дрю. Санацию проводят ежедневно в течение 6 суток по 3 раза в день. Полоскание зева 0,1% раствором кристалличес- кого или жидкого лизо- цима.

Стафилококковый бактериофаг (выпускается Горьковским н-и ин-том эпидемиологии)

Для санации носа дважды в день на 15-20 минут закладывают ватные там- поны, обильно смоченные стафилококковым бакте- риофагом. Для санации зева проводят полоскание 3 раза в день в течение 6-7 дней.

Фурацилин. Желтый или зеленовато-желтый мелкокристаллический порошок без запаха, горького вкуса, очень мало растворим в воде (1:4200), мало - в спирте, растворим в щелочах. Предс- тавляет антибактериальное средство, действующее на ряд грамположительных и грамот- рицательных микробов: стафи- лококки, стрептококки, де- зинтерийную и кишечную па- лочку, палочку паратифа, возбудителя газовой гангре- ны и др. В концентрации 1:9000-15:4200 оказывает ба- ктерицидное действие. Резис- тентность микроорганизмов к препарату развивается мед- ленно. Не раздражает тканей.

Для приготовления водного раствора: 1 часть фурацилина растворяют в 5000 частях изотоническо- го раствора хлорида натрия или дистилли- рованной воды. Для ускорения растворе- ния рекомендуют при- менение кипящей воды или горячей. При хранении растворы фурацилина могут приобретать бурую окраску. Изменение цвета препарата и растворов не изменя- ет их активности.

Ежедневно 1 раз в сутки полоскание зева и проти- рание тампоном слизистых переднего отдела носа в течение 6-7 дней.

Риванол. Желтый кристаллический поро- шок горького вкуса без запа- ха. Малорастворим в холодной воде (1:50), легче в горя- чей, мало растворим в спирте (1:110). Водные растворы настойки, особенно на свету становятся бурыми. Пользо- ваться следует свежеприго- товленными растворами. Ока- зывает противомикробное действие, главным образом при инфекциях, вызванных кокками особенно стрептокок- ками. Препарат мало токси- чен, не вызывает раздражения тканей. Применяют как наруж- ное профилактическое и ле- чебное антисептическое средство в отоларингологии. При воспалении слизистой оболочки рта, зева, носа назначают полоскание 0,1% раствором.

Готовят 1:5000 рас- творы.

Ежедневно 1 раз в сутки полоскание зева и проти- рание тампоном слизистых передних отделов носа в течение 6-7 дней.

Борная кислота. Бесцветные блестящие слегка жирные на ощупь чешуйки или белый мелкокристаллический порошок без запаха. Раство- рима в холодной воде (1:25) и легко (1:4) в кипящей во- де, растворима (1:25) в спирте. Водные растворы име- ют слабокислую реакцию. При- меняют наружно как асепти- ческое средство в виде вод- ных растворов (2-4%) для по- лоскания полости рта, зева и для промывания глаз.

Готовят 1% водные растворы

Ежедневно 1 раз в сут- ки полоскание зева и протирание тампоном пе- редних отделов носа в течение 6 - 7 дней.

Раствор Люголя. Раствор йода в водном раст- воре йодида калия. Состав: йода 1 часть, калия йодида 2 части, воды 17 частей.

Готовят из расчета: 1 чайная ложка на 200 мл воды

Ежедневно 1 раз в сутки полоскание.

Люголь в глицерине. Применяют раствор Люголя на- ружно, главным образом, для смазывания слизистой оболоч- ки глотки, гортани.

Готовят из расче- та: йода - 1 часть, калия йодида - 2 части, глицерина - 94 части, воды - 3 части.

Смазывать зев 1 раз в сутки в течение 6-7 дней

Калий марганцевокислый. Темно- или красно-фиолетовые кристаллы или мелкий порошок с металлическим блеском. Растворим в воде (1:18 в хо- лодной и 1:3,5 в кипящей). Образует раствор темно-пур- пурного цвета. При взаимо- действии с органическими (уголь, сахар, танин) и лег- ко окисляющимися веществами может произойти взрыв. Явля- ется сильным окислителем. Применяют как антисептичес- кое средство наружно в вод- ных растворах для промывания ран (0,1-0,5%), для полоска- ния рта и горла (0,01-0,1%).

Готовят 0,01% раст- воры на воде (раст- вор розовокрасного цвета).

Ежедневно 1 раз в сутки полоскание в течение 6-7 дней

Настой листьев эвкалипта. Высушенные листья культиви- руемых деревьев эвкалипта содержат эфирное масло (не менее 2,5% в цельных листьях и 1,5% в резаных листьях), сложные эфиры, органические кислоты, дубильные и др. ве- щества. Отвар и настой эвка- липта применяют в качестве асептических средств для по- лоскания верхних дыхательных путей. Является слабым ал- лергеном.

Отвар готовят сле- дующим образом: 10 г листьев заливают стаканом холодной воды и кипятят на слабом огне в тече- ние 15 минут, осту- жают и процеживают. Для полосканий и ингаляций берут 1 столовую ложку на стакан воды.

Ежедневно 1 раз в сутки полоскание

МЕТОДИКИ ПОСТАНОВКИ РЕАКЦИЙ, ХАРАКТЕРИЗУЮЩИХ

ПРИНАДЛЕЖНОСТЬ ВЫДЕЛЕННОГО ШТАММА СТАФИЛОКОККА

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для санации стафилококковых бактерионосителей, с целью профилактики возникновения у них болезней органов дыхания и распространения стафилококковой инфекции.

Проблема профилактики стафилококковой инфекции по-прежнему остается актуальной в современной медицине и практическом здравоохранении. Основными источниками данной инфекции являются бактерионосители, а биотопом стафилококка - слизистая оболочка переднего отдела носа [Акатов А.К. и др. Стафилококки и стафилококковые инфекции. Саратов, 1980. - С.189, 230].

По данным ряда авторов [Дерябин Д.Г. Стафилококки. Экология и патогенность. - Екатеринбург, 2000. - С.148-149; Пискунов С.З., Пискунов З.Г., Ельков И.В. Проблема общего и местного консервативного лечения острого и хронического гайморита. // Российская ринология. - 1994. - № 1. - С.7] очень часто микробным агентом, способствующим развитию гнойно-воспалительного процесса в полости носа и околоносовых пазух являются именно микроорганизмы, составляющие микрофлору тела человека.

Выявлена видовая идентичность стафилококков - возбудителей гнойного гайморита и стафилококков, вегетирующих на слизистой оболочке переднего отдела носа больных, что подтверждается анализом фагоантибиотикотипов изученных культур и свидетельствует об их этиологической роли в данной патологии [Бухарин О.В., Чернова О.Л., Матюшина С.Б. и др. Связь биологических свойств стафилококков с течением гнойных синуситов. // Вестник оториноларингологии. - 1998. - № 5. - С.35].

Известно, что при бактерионосительстве имеет место перестройка механизмов защиты макроорганизма, т.е. создаются условия для выживания (персистирования) возбудителя и дальнейшего развития бактерионосительства [Бухарин О.В. Персистенция патогенных бактерий. М.: Медицина, Екатеринбург, Изд. УрО РАН, 1999. - С.122].

Таким образом, санация организма от бактерионосительства - одна из труднейших проблем современной медицины [Бухарин О.В., Усвяцов Б.Я. Бактерионосительство (медико-экологический аспект). Екатеринбург, УрО РАН, 1996. - С.122]. В связи с этим важное практическое значение приобретает разработка эффективных и безопасных методов санации стафилококкового бактерионосительства и соответственно профилактики стафилококковых инфекций, в том числе посредством снижения персистентных свойств патогенов. Важно, чтобы способ санации сочетал высокую эффективность с отсутствием побочных явлений.

Недостатком указанных способов является то, что их действие направлено на уничтожение микроорганизмов, находящихся вне клетки. Золотистые стафилококки способны при длительном персистировании на эпителиальных клетках проникать в них и становиться внутриклеточными паразитами. При вышеуказанных способах санации, стафилококки внутри клетки сохраняются, разрушают клетки, выходят из них и, не встречая конкуренции со стороны нормальной микрофлоры, погибшей под действием санирующих средств, размножаются, и вскоре популяция достигает еще большей численности [Терновская Л.Н. Стафилококковое носительство. Методические рекомендации МЗ РСФСР. - Свердловск, 1983. - С.5-7].

Известны способы санации стафилококковых бактерионосителей путем снижения персистентных характеристик стафилококка [Диагностика и санация стафилококковых бактерионосителей. Методические рекомендации. - М., 2001. - С.12-15].

Наиболее близким из аналогов к заявляемому способу является способ санации стафилококкового бактерионосительства путем обработки передних отделов слизистой носа гексахлорановой или трибасковой мазью [Инструкция по бактериологическому обследованию на выявление носителей патогенного стафилококка и проведению санации. Приложение № 3 к приказу Минздрава РСФСР № 215 от 14.04.79].

Недостатком данного способа является то, что в ряде случаев использование антибиотиков и гексахлорофена может сопровождаться аллергическими и токсическими реакциями, селекцией антибиотикорезистентных штаммов.

Технический результат, на достижение которого направлено изобретение, заключается в создании эффективного способа санации стафилококковых бактерионосителей за счет снижения антикарнозиновой активности (АКрА) S.aureus и вследствие этого элиминации патогенной микрофлоры со слизистой оболочки носовой полости.

Достигаемый при осуществлении изобретения технический результат заключается в том, что заявляемый способ позволяет проводить эффективную санацию стафилококковых бактерионосителей за счет уточнения характера бактерионосительства (резидентного или транзиторного) и снижения антикарнозиновой активности S.aureus, что приводит к элиминации патогенной микрофлоры со слизистой оболочки носовой полости, позволяет снизить уровень заболеваемости органов дыхания и предотвратить экзогенное распространение стафилококковой инфекции.

Известно, что природный дипептид карнозин (карнозин) обладает антимикробным [Antibacterial actions of carnosine and homocarnosine. French Patent № 71.07856 of march 1, 1971] и противоаллергическим действием [Шарпань Ю.В. Влияние карнозина на иммуносупрессивный эффект гистамина / Бюлл. экспер. биологии и медицины. - 1984. - № 11. - С.603].

Наибольшее количество карнозина содержится в обонятельном эпителии слизистой оболочки передних отделов носовых ходов [Margolis F.L. Carnosine in the primary of olfactory pathway. // Science. - 1974. - V.184. - P.909-911]. Известно, что микроорганизмы, длительно удерживающиеся в эпителиальных клетках слизистой оболочки носа, могут инактивировать карнозин [Бухарин О.В., Стадников А.А., Чернова О.Л. и др. Биологическое значение антикарнозиновой активности бактерий. // ЖМЭИ. - 2000. - № 4. - С.57-58].

Установлено, что ведущим свойством стафилококков, определяющим формирование бактерионосительства, является их антикарнозиновая активность. Это связано с высоким содержанием карнозина в биотопе, инактивация которого позволяет бактериям адаптироваться и длительно находиться на слизистой оболочке переднего отдела носа [Бухарин О.В., Карташова О.Л., Киргизова С.Б., Потехина Л.П. Диагностическое значение персистентных характеристик стафилококков при бактерионосительстве // ЖМЭИ. - 2007. - № 5. - С.13-16].

Известен способ определения антикарнозиновой активности микроорганизмов [патент РФ № 2132879, МПК 6 C12Q 1/04, 1999].

Известно определение способности микроорганизмов к инактивации карнозина (антикарнозиновой активности) в клинике при лечении отграниченных гнойно-воспалительных заболеваний легких и плевры стафилококковой этиологии [патент РФ № 2192880, МПК 7 A61K 38/11, А61Р 31/04, 2002] и для дифференциации стафилококковой микрофлоры слизистой оболочки носа человека на нормальную стафилококковую микрофлору и стафилококковую микрофлору, способную вызвать развитие местных гнойно-воспалительных заболеваний [патент РФ № 2318021, МПК 8 C12Q 1/04, 2008].

Авторами экспериментально установлена информативность определения наличия и уровня выраженности антикарнозиновой активности S.aureus, выделенных со слизистой оболочки носа человека, для определения характера стафилококкового бактерионосительства (резидентный или транзиторный).

У всех выделенных стафилококков определяли антикарнозиновую активность известным способом [патент РФ № 2132879, МПК 6 C12Q 1/04, 1999].

Результаты представлены в таблице 1.

Классы МПК: A61K31/435 содержащие шестичленные кольца только с одним атомом азота в качестве гетероатома
A61P11/02 назальные агенты, например противозастойные или противоотечные
Автор(ы): Бухарин Олег Валерьевич (RU) , Карташова Ольга Львовна (RU) , Киргизова Светлана Борисовна (RU) , Потехина Лидия Петровна (RU) , Зверев Александр Федорович (RU)
Патентообладатель(и): Учреждение Российской академии наук Институт клеточного и внутриклеточного симбиоза Уральского отделения РАН (ИКВС УрО РАН) (RU)
Приоритеты:
Таблица 1
Информативность уровня выраженности антикарнозиновой активности S.aureus в определении типа стафилококкового бактерионосительства
Штаммы Кол. штаммов Уровень АКрА (мг/мл) Среднее значение АКрА (мг/мл)
Резидентный тип бактерионосительства S.aureus
n=97 штаммов
10 от 1,8 до 2,0 1,85±0,02
30 от 2,0 до 2,5 2,34±0,06
32 от 2,5 до 3,0 2,81±0,02
25 от 3,0 до 4,0 3,6±0,04
Транзиторный тип бактерионосительства S.aureus
n=75 штаммов
7 от 0,01 до 0,1 0,07±0,01
15 от 0,1 до 1,0 0,47±0,06
20 от 1,0 до 1,5 1,31±0,03
8 от 1,5 до 1,7 1,65±0,02
25 0 (нет АКрА) 0 (нет АКрА)

Как видно из таблицы 1, у штаммов S.aureus резидентного типа уровень выраженности АКрА колеблется от 1,8 до 4,0 мг/мл, а у транзиторного типа - от 0,01 до 1,7 мг/мл.

Таким образом, была обнаружена следующая закономерность в способности к инактивации карнозина S.aureus: штаммы, выделенные от бактерионосителей резидентного типа, имеют уровень выраженности АКрА равным или более 1,8 мг/мл, тогда как штаммы S.aureus, выделенные от бактерионосителей транзиторного типа, имеют уровень выраженности АКрА менее 1,8 мг/мл либо не обладают антикарнозиновой активностью.

Проведенные авторами исследования показали информативность определения наличия и уровня выраженности АКрА у S.aureus, выделенных со слизистой оболочки носа человека, для определения типа стафилококкового бактерионосительства - резидентный или транзиторный.

Основная часть микрофлоры транзиторного типа элиминирует из организма в результате гибели или бактериовыделения, и проведение в отношении нее санирующих мероприятий не требуется [Бухарин О.В., Усвяцов Б.Я. Бактерионосительство (медико-экологический аспект). Екатеринбург, УрО РАН, 1996. - С.66].

Чтобы исключить развитие дисбиотических состояний, санировать необходимо лишь резидентных бактерионосителей, т.е. лиц, длительно и упорно выделяющих микроорганизмы с персистентным потенциалом [Бухарин О.В., Усвяцов Б.Я., Карташова О.Л. Биология патогенных кокков. М.: Медицина, Екатеринбург, Изд. УрО РАН, 2002. - С.67].

Известно, что подавление персистентных свойств стафилококков затрудняет их паразитирование и, тем самым, повышает эффективность лекарственных воздействий [Бухарин О.В., Усвяцов Б.Я. Бактерионосительство (медико-экологический аспект). Екатеринбург, УрО РАН, 1996. - С.149].

Препарат в виде линимента как лекарственная форма отличается следующими преимуществами по сравнению с другими формами выпуска препарата [Линимент циклоферона (меглумина акридонацетат) в клинической практике. Клинические рекомендации для врачей. - СПб., 2007. - С.14]:

- местное использование - непосредственное воздействие на локализованный патологический очаг;

- высокая биодоступность активных веществ;

- отсутствие аллергических реакций и побочных явлений системного характера.

У выделенных штаммов S.aureus определяли антикарнозиновую активность известным способом [патент РФ № 2132879, МПК 6 C12Q 1/04, 1999].

Среднее значение антикарнозиновой активности в опытной и контрольной группе штаммов в первый день эксперимента составило 2,94±0,04 мг/мл.

Результаты эксперимента представлены в таблице 2.

Как видно из таблицы 2, на протяжении 7 дней происходило снижение среднего значения антикарнозиновой активности S.aureus в опытной группе штаммов с 2,95±0,04 мг/мл до 0,67±0,01 мг/мл.

Предложенный способ санации стафилококковых бактерионосителей был успешно апробирован на базе Центральной районной больницы с.Шарлык, Шарлыкского района, Оренбургской области.

По уровню выраженности АКрА определяли характер бактерионосительства - резидентный или транзиторный. К резидентному типу бактерионосительства относили детей, у которых выделялся S.aureus, с уровнем выраженности антикарнозиновой активности, равным или более 1,8 мг/мл, а к транзиторному типу бактерионосительства относили детей, у которых выделялся S.aureus с уровнем выраженности антикарнозиновой активности менее 1,8 мг/мл.

После каждого дня санации проводили контрольное бактериологическое исследование на наличие S.aureus и определение у него уровня АКрА.

Результаты исследований представлены в таблице 3.

Как видно из таблицы, через 4 дня у 2 детей S.aureus не выделялся вообще, у 4 санируемых выделялись штаммы с уровнем выраженности АКрА менее 1,8 мг/мл. После 5 дней санации S.aureus не высеялся еще у двух детей, а динамика в сторону снижения уровня выраженности АКрА (ниже 1,8 мг/мл) произошла у стафилококков, выделенных еще от 6 человек; после 6 дней рост S.aureus не отмечен еще у 7 обследуемых, а ниже порогового значения (1,8 мг/мл) уровень АКрА опустился еще у 5 штаммов стафилококка.

Бактериологическое обследование санированных детей через 30 дней показало, что свободными от носительства S.aureus были 17 детей, а у троих детей выделялся S.aureus со средним уровнем выраженности антикарнозиновой активности 0,9 мг/мл.

С целью определения эффективности проведенной санации стафилококковых бактерионосителей через 6 месяцев провели еще одно бактериологическое обследование, которое подтвердило положительные результаты проведенного санирования - в группе из 20 санируемых детей не были обнаружены бактерионосители S.aureus резидентного типа.

Способ осуществляется следующим образом.

1. Исследуемый материал (мазок со слизистой оболочки носовой полости) засевают на чашки Петри с желточно-солевым агаром.

2. Посевы инкубируют в термостате при температуре 37°С в течение 24-48 часов.

3. Выросшие колонии пересевают на скошенный агар и изучают морфологию при окраске мазков по Граму.

5. У выделенных штаммов S.aureus определяют антикарнозиновую активность известным способом [патент РФ № 2132879, МПК 6 C12Q 1/04, 1999].

6. По уровню выраженности антикарнозиновой активности определяют характер бактерионосительства - резидентный или транзиторный. К резидентному типу бактерионосительства относят лиц, у которых выделяются S.aureus, с уровнем выраженности антикарнозиновой активности, равным или более 1,8 мг/мл, а к транзиторному типу бактерионосительства относят лиц, у которых выделяются S.aureus с уровнем выраженности антикарнозиновой активности менее 1,8 мг/мл.

8. Через 6 дней проводят контрольное бактериологическое обследование санируемых на наличие или отсутствие S.aureus, при наличии S.aureus определяют у них уровень выраженности антикарнозиновой активности.

9. При отсутствии S.aureus или уровне выраженности у них антикарнозиновой активности менее 1,8 мг/мл санацию считают положительной.

Примеры конкретного выполнения

При бактериологическом обследовании на стафилококковое бактерионосительство пациента К., часто и длительно болеющего респираторными инфекциями, обнаружен S.aureus, обладающий АКрА, равной 3,2 мг/мл. Так как S.aureus имеет уровень выраженности антикарнозиновой активности АКрА более 1,8 мг/мл, тип носительства определен как резидентный.

Через 6 дней проводили контрольное бактериологическое обследование санируемого на наличие или отсутствие S.aureus. Обследование пациента показало, что S.aureus отсутствует. Обследование, сделанное через 3 месяца, подтвердило положительный результат санации.

При проведении бактериологического обследования группы студентов на стафилококковое бактерионосительство, у 12 студентов были выделены штаммы S.aureus, обладающие уровнем антикарнозиновой активности выше 1,8 мг/мл, что позволило определить тип носительства как резидентный.

С целью профилактики развития у них болезней органов дыхания всем студентам ежедневно в течение 6 дней проводили обработку передних отделов носа аналогично примеру 1.

Через 6 дней при повторном бактериологическом обследовании у 10 человек патогенный стафилококк не обнаруживался, а у штаммов S.aureus, выделенных от 2 человек, антикарнозиновая активность снизилась, и ее уровень выраженности стал менее 1,8 мг/мл, что свидетельствовало об изменении типа носительства с резидентного на транзиторный и позволяло считать санацию положительной.

Повторное обследование данных лиц через 1 месяц, а затем и через 3 месяца подтвердило полученные положительные результаты санации.

При обследовании на стафилококковое бактерионосительство медицинского персонала хирургического отделения ЛПУ были выявлены 5 человек, являющиеся носителями S.aureus резидентного типа. С целью профилактики экзогенного распространения стафилококковых инфекций среди пациентов хирургического отделения, резидентным бактерионосителям ежедневно в течение 6 дней проводили обработку передних отделов носа аналогично примеру 1.

После проведенного курса санации при контрольном бактериологическом обследовании санированных сотрудников хирургического отделения оказалось, что у 3 человек произошла элиминация S.aureus и замена патогенного стафилококка на S.epidermidis, являющийся представителем нормальной микрофлоры. У двух бактерионосителей выделялся S.aureus с уровнем АКрА - 0,9 мг/мл и 1,3 мг/мл соответственно, что позволило считать санацию положительной.

Проведенное через 3 месяца повторное бактериологическое обследование 5 сотрудников хирургического отделения подтвердило эффективность санации, ни у одного из обследуемых не выделили S.aureus резидентного типа.

Таким образом, предлагаемый способ позволяет проводить эффективную санацию стафилококковых бактерионосителей за счет уточнения характера бактерионосительства (резидентного или транзиторного) и снижения антикарнозиновой активности стафилококков, а вследствие этого элиминации патогенной микрофлоры со слизистой оболочки носовой полости, что способствует снижению заболеваемости органов дыхания и предотвращению экзогенного распространения стафилококковой инфекции.

Читайте также:

Пожалуйста, не занимайтесь самолечением!
При симпотмах заболевания - обратитесь к врачу.

Copyright © Иммунитет и инфекции