Сепсис что это микробиология

VII РОССИЙСКАЯ ОНКОЛОГИЧЕСКАЯ КОНФЕРЕНЦИЯ

БАКТЕРИЕМИЯ: ЗНАЧЕНИЕ ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ СЕПСИСА.
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ ПО ПОСЕВУ КРОВИ

Сепсис – это системная воспалительная реакция в ответ на инфекцию. Благоприятный исход при сепсисе зависит от своевременной диагностики, а также от адекватной и во время начатой антимикробной терапии.

Микробиологическая диагностика сепсиса основана на исследовании крови, то есть на установлении бактериемии. Бактериемия – присутствие микроорганизмов в системном кровотоке – является важнейшей предпосылкой для развития сепсиса. Посев крови, при котором удается получить рост микроорганизма – это единственный способ, который позволяет получить данные о возбудителе сепсиса, о его чувствительности к антимикробным препаратам.

Таким образом, своевременная микробиологическая диагностика бактериемии способствует ранним и адекватным лечебным действиям, которые могут предотвратить развитие сепсиса и его последующих этапов, связанных с высокой летальностью.

В то же время, оценка клинической значимости полученных результатов посева крови является весьма сложным этапом микробиологической диагностики бактериемии. Причиной этих трудностей в первую очередь является возможная контаминация (загрязнение) образца исследуемой крови вследствие попадания микроорганизмов с рук медперсонала во время венопункции, с кожи пациента, из воздушной среды помещения. Нельзя исключить и внутри лабораторное загрязнение при контрольном высеве.

Объем засеваемой крови - один из наиболее важных моментов при микробиологической диагностике бактериемии. Концентрация микроорганизмов в крови взрослых обычно меньше 10 КОЕ/мл, а чаще всего даже меньше 1 КОЕ/мл, поэтому каждый дополнительный миллилитр крови увеличивает вероятность получения роста. Одномоментный посев 10-20 мл крови следует считать наиболее оптимальным объемом у взрослых пациентов. Кровь для посева необходимо брать не менее 2-х раз в течение суток с интервалом 5-10 мин. при каждом эпизоде лихорадки. При подозрении на катетер ассоциированную инфекцию кровь следует получить сначала из вены, затем из внутрисосудистого катетера с интервалом не более 5 мин. У детей концентрация микроорганизмов в крови выше, чем у взрослых, обычно более 100 КОЕ/мл, и чаще даже более 1000 КОЕ/мл, поэтому объем засеваемой крови может быть небольшой, но не менее 1 мл. Обычно берется 1-5 мл крови, хотя при посеве менее 1 мл вероятность получения роста невелика.

Соотношение крови и питательной среды во флаконе – это также немаловажный фактор. Оптимальное соотношение кровь/среда должно быть от 1:5 до 1:10. При разведении крови средой менее чем в 5 раз снижается возможный рост микробов, что вероятно можно объяснить бактерицидными свойствами крови.

Флаконы с засеянной в них кровью (гемокультура) следует доставлять в лабораторию немедленно, а до этого они могут находиться при комнатной температуре очень короткий период времени без влияния на микробную выживаемость. Гемокультура определяется как забор определенного объема крови при разовой венопункции для посева в один или несколько флаконов из одного шприца. Получение роста – положительная гемокультура, отсутствие роста в течение 5-7 суток инкубирования – отрицательная гемокультура. Хранение гемокультур в холодильнике не допускается. Несоблюдение правил транспортировки может быть причиной неудач с выявлением роста.

Ответственным этапом получения гемокультуры, безусловно, является обработка кожи и венопункция. Основная трудность в интерпретации результатов исследования образца крови – возможная его контаминация микрофлорой кожи. Одной из мер, направленных на решение этой проблемы, является тщательная обработка кожи антисептиками. Схема необходимых процедур при получении образца крови для микробиологического исследования представлена ниже.

Инструкции для процедурной медсестры по забору крови для микробиологического исследования:

Для обработки кожи пациента и флаконов с питательной средой допускается применение следующих веществ: 70% этиловый спирт, 1-2% настойка йода, 10% раствор повидон-йода.

1. Вымыть руки перед забором крови.
2. Подготовить флаконы: удалить пластиковую защитную пластинку с крышки флакона; поверхность резиновой пробки флакона протереть тампоном, смоченным 70% этиловым спиртом или раствором йода, и оставить тампон на пробке на 60 сек. (1 мин.).
3. Обработать кожу пациента в месте предполагаемой венопункции тампоном с 70% этиловым спиртом (экспозиция 30 сек.), затем тампоном нанести 1-2% настойку йода или 10% раствор повидон-йода в виде круга диаметром 1,5-2 см (экспозиция 30 сек.). При использовании только 70% этилового спирта экспозиция 60 сек.
4. Надеть на руки стерильные водонепроницаемые перчатки.
5. Убрать тампон с дезинфектантом с кожи пациента и при венопункции набрать в шприц не менее 10 мл крови для взрослых пациентов и не менее 1-5 мл – для детей.
6. Убрать тампон с дезинфектантом с поверхности пробки флакона и внести равный объем крови в каждый флакон (обычно посев крови производится в 2 флакона).
   Внимание! Объем питательной среды во флаконах может быть разный. Оптимальное соотношение кровь/среда=1:5–1:10. Пример: объем питательной среды (указан на этикетке флакона) 25 мл. При внесении во флакон 5 мл крови соотношение кровь/среда=5:25, то есть 1:5.
7. При необходимости одновременного посева крови и из вены, и из внутрисосудистого катетера кровь следует брать сначала из вены, а потом из катетера, с интервалом не более 5 мин.
8. Флаконы с кровью следует доставить в лабораторию немедленно. Транспортировка флаконов должна осуществляться только в контейнерах.
9. Флаконы с кровью следует доставлять в лабораторию с сопроводительным направлением стандартного образца, которое заполняется лечащим врачом. Процедурная медсестра дополнительно вносит следующие данные: а) время забора крови, б) температура тела пациента непосредственно перед забором крови, в) объем крови, внесенный в каждый из пронумерованных флаконов.

Несоблюдение медицинским персоналом элементарных правил гигиены влечет за собой развитие целой цепочки событий, которые могут стоить больному жизни: исследуемый образец крови контаминирован → неверно определен микроорганизм, являющийся причиной тяжелой локальной инфекции или сепсиса → неверно определены антимикробные препараты для терапии → неэффективность терапии → ухудшение состояния больного → смерть.

Установлено нормализующее влияние различных пробиотиков на функциональный статус лимфоцитов, образование иммуноглобулинов, цитокинов, транскрипционных факторов эпителиальных клеток, состояние эпителиального барьера и пр. Все это способствует восстановлению физиологических взаимоотношений с нормальной микрофлорой, в частности ведет к повышению колонизационной резистентности слизистых оболочек против типовых проявлений инфекционного процесса. Примером является воспаление, обретающее характер порочного круга, который поддерживается за счет функциональных нарушений эпителиоцитов. Принципиальная задача — разорвать порочный круг, сделав процесс обратимым. Именно на это направлено применение пробиотиков, которое сопровождается нормализацией микроэкологии кишечника и факторов местного иммунитета.

Представление о живых пробиотиках как о факторах, колонизирующих кишечник и тем самым излечивающих дисбактериоз, в лучшем случае наивно. Об этом говорит хотя бы то, что позитивные (профилактические и лечебные) эффекты могут быть воспроизведены с убитыми бактериями и их дериватами. Это допускает более широкое толкование термина, относя к пробиотикам не только живые, но также инактивированные бактерии и их субкомпоненты, позитивно влияющие на здоровье.

Сепсис

Сепсис — проблема не микробиологическая,
а макробиологическая. И.В. Давыдовский

• Септический синдром и воспаление.
• Бактериемия и интоксикация.
• Сепсис и реактивность.
• Пусковые механизмы патогенеза.
• Флогогенные цитокины.
• Терапия: иллюзии и реальность.

Представления о генерализованном (внутрисосудистом) воспалении позволили объединить на единой патогенетической основе группу патологий, у которых формально мало общего. Кроме инфекционных заболеваний к ним относятся тяжелая травма, острый панкреатит, осложнения после гемодиализа, экстракорпорального кровообращения и других вмешательств в систему внутрисосудистого гомеостаза. Хотя септический синдром может осложнять любые инфекции, он чаще связан с пиогенными бактериями. В основном это госпитальная патология. Проблема условной патогенности и механизмов ее реализации не решена до сих пор. Здесь ярко сфокусирована диалектика оппортунистических инфекций и клинической микробиологии в целом: причиной тяжелейших осложнений могут быть микробы, безвредные для здоровых людей. Среди них доминируют облигатные или факультативные представители нормальной микрофлоры — кишечная палочка, стафилококки, псевдомонады, бактероиды, энтерококки; единичные случаи могут быть связаны с любыми (особенно грамотрицательными) бактериями.

Есть злая ирония в том, что успехи медицины (в частности, широкое применение инвазивных манипуляций) повысили вероятность госпитального сепсиса, обеспечив ему одну из лидирующих позиций среди причин внутрибольничной смертности. Это связано с расширением групп риска за счет факторов, отрицательно влияющих на местную и общую резистентность организма. Основные из них можно суммировать следующим образом:

1) повреждение кожи и слизистых оболочек (раны, ожоги, пролежни, катетеризация и инструментальное обследование мочевыводящих путей, бронхоскопия, внутрисосудистые катетеры и пр.);

2) гипотрофия стенки кишечника, в частности от применения цитостатиков (подавление пролиферации быстро обновляющихся эпителиоцитов слизистой оболочки);

3) гранулоцитопения на фоне применения цитостатиков (торможение пролиферации костномозговых предшественников);

4) гипореактивность клеток-эффекторов воспаления (новорожденные, больные диабетом, циррозом печени);

5) гипогаммаглобулинемия, врожденные дефекты фагоцитов и комплемента;

6) дефекты лимфоцитов, индуцированные иммунодепрессантами и цитостатиками;

Вероятность транзиторной бактериемии после различных процедур

Процедура/манипуляция	Число позитивных гемокультур*, КЕ
Удаление зуба	18—85
Жевание конфет или парафина	17—51
Чистка зубов	0—26
Периодонтальные операции	32—88
Бронхоскопия	15
Тонзиллэктомия	28—38
Назотрахеальная интубация	16
Гастроинтестинальная эндоскопия	8—12
Сигмоидальная эндоскопия	0—9,5
Бариевая клизма	11
Перкутанная биопсия печени	3—13
Бужирование уретры	18—33
Катетеризация уретры	8
Цистоскопия	0—17
Трансуретральная резекция простаты	12—46
Нормальные роды	0—11
Биопсия шейки матки	0
Удаление/введение внутриматочных спиралей	0

*Уровень бактериемии обычно не превышает 10 колониеобразующих единиц в 1 мл. Вероятность возрастает при повышенной обсемененности слизистых оболочек, например при воспалительных заболеваниях.

Патогенетически значимая бактериемия может эволюционировать по-разному:

1. 1) бактерии разносятся по организму, инициируя новые очаги воспаления (септикопиемия);
2. 2) возбудитель выделяет септикогенные факторы после закрепления внутри сосудистого русла (участки поврежденного эндотелия, тромбы, внутрисосудистые протезы);
3. 3) бактерии размножаются в кровяном русле (септицемия), создавая опасность молниеносных осложнений.

Микробиологическое исследование крови является ведущим при лабораторной диагностике сепсиса. Кроме того, при септикопиэмиях исследуют материал из первичных и вторичных местных очагов и инфекции. Кровь берут в период подъема температуры до начала антибиотикотерапии из локтевой вены в количестве не менее 10 мл у взрослых и 5 мл у детей, так как микроорганизмы находятся в крови в сравнительно небольших количествах.

Посевы делают у постели больного в колбы с 50-100 мл питательной среды. Сравнительно большие объемы питательной среды (в 10 превышающие количество крови) необходимы для устранения бактерицидного действия сывороточных белков. В случае транспортировки крови к ней добавляют антикоогулянты: цитрат или оксалат натрия, декстран сульфат, гепарин.

Посевы производят на сахарный бульон и инкубируют их при 37 °C в течении 10 дней при ежедневном контроле. В случае отсутствия роста микроорганизмов дают отрицательный ответ. При наличии роста делают мазки, которые окрашивают по Граму. Выделенную чистую культуру микроорганизмов идентифицируют и определяют ее чувствительность к антибиотикам.

При оценке результатов необходимо исходить из того, что сепсис является тяжелым общим инфекционным заболеванием, развивающимся в условиях резкого угнетения всех основных механизмов иммунитета. Возбудителями сепсиса являются различные патогенные и условно-патогенные микроорганизмы. Однократный посев крови при сепсисе не всегда приводит к выделению культуры. Более информативным является трехкратный посев крови с суточным интервалом. На фоне антибиотикотерапии кровь у больных для посева следует брать 5-6 раз.

Самостоятельная работа

Произвести учет результатов посева гнойного отделяемого. Макроскопическая характеристика колоний. Отметить наличие или отсутствие пигмента.

Из лецитиназно-позитивных колоний на ЖСА приготовить мазок, окрасить по Граму, промикроскопировать.

Пересев на скошенный МПА для выделения чистой культуры. Произвести запись в протоколе (2-й день).

а) просмотреть чашки с посевами и отобрать подозрительные колонии;

б) из отобранных колоний приготовить мазки, окрасить по Граму;

в) материал из колоний пересеять на скошенный МПА. Произвести запись в протоколе.

Микробиологическая диагностика

Бактериоскопическое исследование. Мазки для первичной бактериоскопии готовят из патологического материала, окрашивают по Граму и микроскопируют.

При положительном результате обнаруживают цепочки грамположительных кокков.

Бактериологическое исследование. Исследуемый материал засевают на кровяной агар в чашку Петри. После инкубации при 37 °C в течении 24 ч отмечают характер колоний и наличие вокруг них зон гемолиза. Из части материала, взятого из колоний, готовят мазок, окрашивают по Граму и микроскопируют. Для получения чистой культуры 1-3 подозрительные колонии пересевают в пробирки со скошенным кровяным агаром и сахарным бульоном.

Заключительным этапом бактериологического исследования является идентификация выделенной культуры по антигенным свойствам. По данному признаку все стрептококки делятся на серологические группы (A, B, C, D и т.д.). Серогруппу стрептококков определяют в реакции преципитации с полисахаридным преципитиногеном C, выделенным из исследуемой культуры, и сыворотками (обычно 4 наиболее распространенные серогруппы – A, B, C, D). Большинство патогенных для человека β-гемолитических стрептококков относится к серологической группе A. По содержанию типоспецифических антигенов протеиновой природы β-гемолитические стрептококки подразделяются на серовары, из которых 47 относятся к группе А. Серовар стрептококков определяют в реакции агглютинации. Развернутое серологическое исследование и типирование стрептококков проводят главным образом для эпидемиологического обследования. Выделенную культуру стрептококка проверяют на чувствительность к антибиотикам методом дисков. При подозрении на сепсис делают посевы из крови больного.

Серодиагностика. При отдельных нозологических формах стрептококковой инфекции устанавливают наличие специфических антигенов в крови больного с помощью РСК или реакции преципитации. Антитела к О-стрептолизину определяют главным образом для подтверждения диагноза ревматизма. Реакция основана на подавлении способности О-стрептолизина растворять эритроциты при наличии в крови больного соответствующих антител. Реакцию ставят со стандартным сухим О-стрептолизином.

Бюджетное учреждение здравоохранения

Исследование крови на стерильность на современном этапе

Департамент здравоохранения Воронежской области

Исследование крови на стерильность

на современном этапе

Информационно-методическое письмо для врачей-бактериологов

Составители: главный внештатный специалист по микробиологической диагностике

департамента здравоохранения Воронежской области, заведующий бактериологической лабораторией

БУЗ ВО ВОКБ №1 Е.В. Бондаренко

Врач-бактериолог БУЗ ВО ВОКБ№1 Т.М. Лапа

Кровь - один из наиболее распространенных образцов биоматериала, исследуемых в бактериологической лаборатории. Исследование крови на стерильность является важнейшим методом лабораторного исследования у пациентов с определенными показаниями.

Основные показания для посева крови:

• Лихорадка (более 38°C)
• Гипотермия (менее 36°C)
• Лейкоцитоз
• Гранулоцитопения

Бактерии проникают в кровь экзогенным (например, при травме) и эндогенным (из очага инфекции) путями.

Бактериемия : Наличие бактерий в крови, подтвержденное результатами посева

• Транзиторная бактериемия, когда происходит кратковременный выброс в кровь микроорганизмов под действием таких факторов, как физическая нагрузка, перегревание, переохлаждение. Подобные явления протекают обычно бессимптомно.
• Интермиттирующая бактериемия, когда существует локальный очаг инфекции, например пневмония или внутрибрюшной абсцесс.
• Продолжающаяся бактериемия проявляется внутрисосудистой

инфекцией, например, инфекционным эндокардитом или септическим тромбофлебитом.

Сепсис – это патологический процесс, в основе которого лежит реакция организма в виде генерализованного (системного) воспаления на инфекцию различной природы (бактериальную, вирусную, грибковую).

В последнее десятилетие в мире отмечается учащение случаев бактериемии и фунгемии. Это связано с развитием инвазивных медицинских вмешательств, старением населения, увеличением количества трансплантаций органов и костного мозга, увеличением количества более вирулентных и трудно поддающихся лечению микроорганизмов, более агрессивной внутрибольничной инфекцией.

Факторы риска, способствующие проникновению бактерий в кровяное русло и развитию бактериемии:

• внутривенные катетеры
• катетер мочевого пузыря
• любые инвазивные процедуры
• операционные вмешательства
• нейтропения
• терапия антибиотиками (эмпирическая), кортикостероидами, цитотоксическая

Принципы микробиологической диагностики

Точный диагноз устанавливается только при обнаружении возбудителей в крови пациентов. Важное условие - своевременный забор пробы. Для проведения анализа используют кровь непосредственно из венозного сосуда. Сбор пробы из постоянного внутривенного или внутриартериального катетеров допускается только в случаях подозрения на наличие катетер-ассоциированной инфекции или отсутствия возможности ее получения венопункцией.

• Лихорадка и озноб начинается примерно через час после попадания микроорганизмов в кровоток
• Чаще всего кровь забирается как можно скорее после приступа лихорадки или озноба при подозрении на инфекцию
• Забор крови должен осуществляться по возможности до назначения антимикробной терапии.

Объем крови – один из наиболее значимых факторов в повышении чувствительности гемокультивирования. Считается, что риск случайной контаминации 1 отдельно взятой пробы крови составляет 3% (0,03).

Тогда вероятность случайной контаминации одновременно 2 проб составляет: 0,03*0,03=0,0009= 0,09%. Поэтому более информативно исследование 2 и более проб каждая объемом не менее 10мл.

Рекомендуемое число отбираемых проб крови в зависимости от предполагаемого заболевания по МУ 4.2.2039-05Техника сбора и транспортирования биоматериалов в микробиологические лаборатории:

1) Острый сепсис, менингит, менингококоцемия, остеомиелит, артрит, острая пневмония, пиелонефрит 2 пробы из двух сосудов или двух участков кровеносного сосуда перед началом антибактериальной терапии

2) Лихорадка неясного генеза 4 сначала 2 пробы из разных кровеносных сосудов (двух участков сосуда), затем через 24-36 ч. еще 2 пробы

3) При подозрениях на наличие эндокардита и вялотекущего сепсиса: при обострении 2 пробы из двух сосудов в течение первых 1 - 2 ч подъема температуры тела (не на пике температуры!) до начала терапии; при подостром и вялотекущем течении сначала 3 пробы с интервалом 15 мин. и более. Если все пробы отрицательны, на вторые сутки после посева собирают еще 3

4) у пациентов с эндокардитами, получающими антибиотики, собирают по 2 отдельные пробы в течение трех дней

5) У больных, в комплекс терапии которых включены антибиотики, собирают 6 проб в течение 48 ч; пробы необходимо собирать непосредственно перед введением следующей дозы препарата

6) при лихорадке неясного генеза сначала 2 пробы из разных кровеносных сосудов, затем через 24-36 часов еще 2 пробы

Минимальный набор сред для посева крови согласно положениям Приказа 535:

“Двойная среда” - скошенный во флаконе 1,7-2% питательный агар (150 мл) и 150 мл полужидкой среды, приготовленной на питательном бульоне с добавлением 15 г глюкозы и 0,15 г агара.

“Среда для контроля стерильности” - стандартная тиогликолевая среда к которой добавляют 15-20 г дрожжевого экстракта и агар 4,25-5 г на 1 литр к среде добавляют 0,001 г резазурина в качестве индикатора анаэробиоза.

Необходимое оснащение для взятия крови:

• Флаконы с питательными средами.
• 70о этиловый спирт;
• 2% или 5% настойка йода
• венозный жгут
• резиновые (латексные, виниловые) перчатки
• спиртовка (только при использовании флаконов со средами, изготовленными в лаборатории)

Техника получения пробы крови . Сбор проб крови для посева производят 2 человека у постели больного или в процедурной.

- участок кожи над выбранным для пункции сосудом продезинфицировать: обработать кожу тампоном, смоченным 70%-м этиловым спиртом, затем другим тампоном, смоченным 1 - 2%-м раствором йода или другим дезинфектантом, разрешенным к применению для этих целей в установленном порядке, круговыми движениями, начиная от центра, в течение 30 с; подождать, пока высохнет обработанный участок. Не допускается пальпировать сосуд после обработки кожи перед введением иглы;

- при работе с флаконами с двойной средой: стерильным шприцем собрать у взрослых 10 мл крови, у детей - 5 мл; над пламенем спиртовки открыть флакон; внести кровь во флакон из шприца, предварительно сняв иглу; обжечь горлышко и пробку флакона в пламени спиртовки, закрыть флакон пробкой; осторожно, чтобы не замочить пробку флакона, перемешать его содержимое круговыми движениями.

Визуальные признаки роста гемокультур при посевах крови

Макроскопические
изменения среды

Listeria spp., клостридии, Bacillus spp.

Аэробные грам(-) палочки, стафилококки, Bacteroides spp.

Аэробные грам(-) палочки, анаэробы

Pseudomonas spp., Bacillus spp.,

Причины отрицательных результатов:

- Локальная инфекция (защитные силы организма удерживают инфекцию в одном месте)

- Неактуальное время взятия материала (вероятность упустить интермиттирующую бактериемию )

- Слишком маленький объем полученного материала

- Прием антибиотиков пациентом

Идентификация выделенных бактерий при бактериемиях:

• Значимы и часто встречаются - S.aureus, S.pneumoniae, E.coli и др. энтеробактерии, P.aeruginosa, C.albicans
• Значимы - S.pyogenes, S.agalactiae, L.monocytogenes, N.meningitidis, N.gonorrhoeae, H.influenzae, B.fragilis группа, Candida spp, Cryptococcus neoformans
• Контаминанты или нет? (зависит от конкретных случаев)– КОС, зеленящие стрептококки, Propionibacterium acnes, Acinetobacter calcoaceticus, Clostridium spp., Corynebacterium spp., Bacillus spp

Дополнительные критерии в пользу клинической значимости изолята:

- Быстрое выделение культуры – в течение первых 48 часов

- Выделение одного и того же вида микроорганизма в разных пробах

- Выделение одного и того же вида микроорганизма из крови и других локусов

Помимо ручных методов существуют методы автоматизированного культивирования крови, которые являются более современными, более чувствительными. Самая известная серия бактериологических анализаторов для посева крови на стерильность,- BDBACTEC.

Прибор Bactec предназначен для ускоренного обнаружения бактерий и грибов в клинических образцах крови. Образцы крови отбираются у пациентов и вносятся напрямую в оригинальные флаконы с питательной средой, после чего – по возможности незамедлительно – помещаются в рабочие станции приборов серии BD Bactec™ 9000. Наличие микроорганизмов в крови устанавливается с помощью высокочувствительной флуоресцентной технологии, основанной на индикации СО2, выделяемого в питательную среду растущими и интенсивно делящимися микроорганизмами. С помощью системы BD BACTEC 90% положительных результатов выявляются в первые 24 часа инкубации, что позволяет своевременно начать эмпирическую антибактериальную терапию либо внести изменения в действующую схему лекарственной терапии. Своевременная бактериологическая диагностика бактериемии значительно сокращает частоту возникновения септического шока и увеличивает выживаемость больных.

Флаконы для гемокультивирования выпускаются нескольких видов. Наиболее часто используются следующие:

• Флаконы со средой для культивирования аэробов
• Флаконы со средой для культивирования анаэробов

- содержат частицы латекса, адсорбирующие антибиотики из крови, а также способствующие лизису клеток крови и освобеждению внутриклеточных бактерий.

• Флаконы со средой для культивирования детской крови

- предназначены для исследования малого объема крови до 3 мл, также содержат частицы латекса

• Флаконы с селективной средой для выявления дрожжей и грибов

- содержат хлорамфеникол и тобрамицин для подавления роста сопутствующих бактерий, лизирующие вещества, способствующие освобождать из лейкоцитов фагоцитированные грибы.

Используется вакуумное взятие крови с использованием системы для забора крови игла-бабочка. Под действием вакуума кровь втягивается через иглу BD VacutainerTM напрямую из вены в пробирки BD VacutainerTM и флаконы BD BactecTM и сразу же смешивается с питательной средой.

Традиционно отбор проб крови осуществляется одномоментно в аэробный (BD BACTEC™ PLUS+ Aerobic/F) и в анаэробный (BD BACTEC™ PLUS+ Anaerobic/F) флаконы. Альтернативный набор складывается из: а) аэробного флакона и дополнительного аэробного; б) анаэробного и/или Mycosis IC/F, и/или Myco F/Lytic флаконов (оба типа флаконов – для культивирования гемокультур грибов).

Оптимальный объем крови для гемокультивирования

• Дети:
• Новорожденные 1-2 мл крови/флакон (допустимый для посева объём крови – 0,5-5 мл)
• Дети 2-5 мл/флакон
• Подростки 10-20 мл/флакон
• Взрослые:

Одномоментно 20 -30 мл (по 10 мл во флакон) крови 2 или 3 раза в течение 24 ч

ШАГ 1	Продезинфицируйте место венепункции 70%-ным раствором этилового спирта. Круговыми движениями от центра к периферии продезинфицируйте место венепункции 1-10%-ным раствором йода или хлоргексидином Дождитесь полного высыхания антисептика
ШАГ 2	Промаркируйте подготовленные к посеву флаконы того или иного типа (с соответствующей задачам исследования питательной средой), указав на этикетке каждого флакона Ф.И.О. пациента и/или № истории болезни, время отбора пробы крови, № и/или название отделения Удалите пластиковый колпачок и протрите резиновую пробку 70%-ным раствором этилового спирта
ШАГ 3	Используйте BD Vacutainer® (367282 / 367284) – набор для отбора проб крови (игла -“бабочка” 21G / 23 /G, зелёная с защитной защелкой; 18-тисантиметровый катетер, Луер-адаптер с клапаном для отбора проб крови, 50 шт/упак.) с адаптером для флаконов (364815; 250 шт/упак.) Пропунктируйте вену Вставьте флакон в держатель Держите флакон строго вертикально
В первую очередь засевайте аэробный флакон Под действием вакуума кровь начнет набираться во флакон самостоятельно. Наполните флакон соответствующим количеством крови (в “детские” флаконы – 1-3 мл, [для новорожденных – 0,5-2 мл], во “взрослые” флаконы – 7-10 мл) Извлеките флакон из держателя Вставьте в держатель следующий флакон
ШАГ 4	Приложите сухую стерильную салфетку к месту венепункции Извлеките иглу из вены Транспортируйте флаконы в лабораторию как можно скорее

При правильном заборе крови контаминация составляет не более 2-3 % всех гемокультур. Использование наборов для забора крови BD VacutainerTM существенно снижает степень контаминированности культур.

При наличии роста микроорганизма во флаконе анализатор оповещает персонал лаборатории с помощью световой индикации на передней панели прибора, а также с помощью звуковой индикации. Таким образом, нет необходимости делать высевы из всех флаконов, высев делается целенаправленно из положительного флакона.

Объем исследований и микропейзаж при гемокультивировании в бактериологических лабораториях ЛПУ Воронежской области.

Общее количество проб крови для исследования на стерильность по Воронежской области составило 12515. В 2013г это число было гораздо меньше: 8406. Доля этих анализов по лечебно-профилактическим учреждениям показана в таблице: