Наставление по диагностике бруцеллеза животных от 29 09 2003 г

М-386/2017 М-386/2017 от 12 октября 2017 г. по делу № 2-382/2017

Именем Российской Федерации

при секретаре Архиповой И.А.,

рассмотрев в открытом судебном заседании в городе Никольске в помещении районного суда гражданское дело по иску Управления ветеринарии Пензенской области в защиту неопределенного круга лиц к главе крестьянского (фермерского) хозяйства Алексеенко З.В. о признании незаконным бездействия, и понуждении к исполнению требований ветеринарного законодательства,

Управление ветеринарии Пензенской области обратилось в суд с указанным заявлением к главе КФХ Алексеенко З.В., мотивируя свои требования тем, что ответчик занимается разведением крупного рогатого скота на территории своего хозяйства, расположенного по адресу: Пензенская область, Никольский район, с. Соколовка. В связи с выявлением в марте 2015 года животных, принадлежащих главе КФХ Алексеенко З.В., больных бруцеллезом на территории ее хозяйства по вышеназванному адресу, Управлением ветеринарии Пензенской области 30.03.2015 года были установлены ограничительные мероприятия (карантин) по бруцеллезу животных и утвержден план мероприятий по оздоровлению неблагополучного очага по бруцеллезу животных (далее - План) на основании приказа от 30.03.2015 года №49-п (с последующими изменениями).

В связи с этим Управление ветеринарии Пензенской области 03.08.2017 года обратилось к главе КФХ Алексеенко З.В. с письменным требованием о сдаче лошади на специализированный убойный пункт при строгом соблюдении ветеринарно-санитарных правил и под контролем ветеринарного специалиста. Однако до настоящего времени глава КФХ Алексеенко З.В. не сдала на убой больную лошадь.

В судебное заседание 12.10.2017 года ответчик Алексеенко З.В. и ее представитель Федоров А.И. не явились, о времени и месте судебного заседания извещены надлежаще и своевременно, не сообщили об уважительных причинах неявки и не просили о рассмотрении дела в их отсутствие.

В силу ч.4 ст. Раздел II. Производство в суде первой инстанции > Подраздел II. Исковое производство > Глава 15. Судебное разбирательство > Статья 167. Последствия неявки в судебное заседание лиц, участвующих в деле, их представителей' target='_blank'>167 ГПК РФ суд вправе рассмотреть дело в отсутствии ответчика, извещенного о времени и месте судебного заседания, если он не сообщил суду об уважительных причинах неявки и не просил рассмотреть дело в его отсутствие.

В соответствии с ч.1 ст. Раздел II. Производство в суде первой инстанции > Подраздел II. Исковое производство > Глава 22. Заочное производство > Статья 233. Основания для заочного производства' target='_blank'>233 ГПК РФ в случае неявки в судебное заседание ответчика, извещенного о времени и месте судебного заседания, не сообщившего об уважительных причинах неявки и не просившего о рассмотрении дела в его отсутствие, дело может быть рассмотрено в порядке заочного производства.

С учетом согласия представителей истца на рассмотрение дела в порядке заочного производства, считает возможным рассмотреть дело в отсутствии ответчика и его представителя, представителя третьего лица в порядке заочного судопроизводства в соответствии с ч.1 ст. Раздел II. Производство в суде первой инстанции > Подраздел II. Исковое производство > Глава 22. Заочное производство > Статья 233. Основания для заочного производства' target='_blank'>233 ГПК РФ.

Выслушав участвующих в деле лиц, исследовав материалы дела, суд приходит к следующим выводам.

Постановлением Правительства Пензенской области от 26.03.2012 года №204-пП (с последующими изменениями) утверждено Положение об Управлении ветеринарии Пензенской области, разделом 1 которого предусмотрено, что Управление ветеринарии Пензенской области является составной частью системы государственной ветеринарной службы Пензенской области, организует проведение на территории Пензенской области мероприятий по предупреждению и ликвидации болезней животных и их лечению, организует и осуществляет государственный ветеринарный надзор, обеспечивает охрану территории Пензенской области от заноса заразных болезней животных из-за пределов Пензенской области.

Приказом Министерства сельского хозяйства РФ от 19.12.2011 года №476 бруцеллез включен в перечень заразных, в том числе, особо опасных болезней животных, по которым устанавливаются ограничительные мероприятия (карантин).

Статьей 18 Закона Российской Федерации от 14.05.1993 №4979-1 "О ветеринарии" ответственность за здоровье, содержание и использование животных несут их владельцы, а за выпуск безопасных в ветеринарно-санитарном отношении продуктов животноводства - производители этих продуктов.

Согласно п.3.2.4 Правил, при установлении диагноза бруцеллез, Главный государственный ветеринарный инспектор совместно с Главным государственным санитарным врачом представляют местной администрации проект решения о наложении ограничений и план оздоровления хозяйства от бруцеллеза. По условиям ограничения запрещается содержание больных бруцеллезом животных в стадах и в общих животноводческих помещениях, а также организация любого рода временных и постоянных пунктов концентрации и ферм-изоляторов для содержания таких животных в хозяйствах. Животных (всех видов), положительно реагирующих при исследовании на бруцеллез, абортировавших или имеющих другие клинические признаки болезни, немедленно изолируют от другого поголовья и в течение 15 дней сдают на убой без откорма и нагула, независимо от их племенной и производственной ценности, весовых кондиций, возраста, состояния беременности. Запрещен совместный выпас, водопой и иной контакт больных животных и поголовья неблагополучных стад со здоровыми животными.

Приказом Управления ветеринарии Пензенской области от 30.03.2015 года №49-п (с последующими изменениями) установлены ограничительные мероприятия (карантин) по бруцеллезу крупного рогатого скота на территории с. Соколовка Никольского района Пензенской области до получения двукратного (подряд) отрицательного результата исследования крови серологическим методом по всему стаду КФХ Алексеенко З.В., всех других видов животных, имевших контакт с животными неблагополучного стада, включая скот, принадлежащий гражданам, проживающим в данном населенном пункте, утвержден план мероприятий по ликвидации бруцеллеза.

Согласно данному плану все неблагополучное поголовье КРС КФХ Алексеенко З.В. с приплодом подлежит убою в течение 15 дней. Поголовье КРС, бывшее в контакте с неблагополучным стадом, в том числе и собак, имевших контакт с животными неблагополучного стада (фермы) включая скот, принадлежащий гражданам, проживающим в данном населенном пункте, подвергнуть двукратному серологическому исследованию с интервалом в 30 дней. Проводить повторное исследование на бруцеллез животных со 100% охватом поголовья до получения 2-х кратного (подряд) отрицательного результата, в случае выделения больного поголовья сдать положительно реагирующих животных на специализированный убойный пункт. Исполнителями данных мероприятий являются Управление ветеринарии Пензенской области, Никольская СББЖ, глава КФХ Алексеенко З.В.

Установлено, что были проведены мероприятия по сдаче КРС на убой, оставшиеся 11 телят также подлежали сдаче на убой по решению Никольского районного суда Пензенской области от 11.05.2016 года.

Согласно п.3.2.2.9 Правил, заболевание бруцеллезом считается установленным: при выявлении среди не иммунизированного противобруцеллезными вакцинами крупного рогатого скота (буйволов, яков, зебу), верблюдов и лошадей реагирующих только в РА с содержанием антител 50 - 100 МЕ/мл, а среди овец, коз, оленей (маралов) - 25 - 50 МЕ/мл, их обследуют повторно через 15 - 30 дней. При повышении титров заболевание считается установленным, при сохранении реакций проводят дополнительные исследования по дифференциации их согласно утвержденным методам.

В соответствии с Наставлением по диагностике бруцеллеза животных, утвержденного Минсельхозом РФ от 29.09.2003 года №13-5-02/0850, при выявлении в неблагополучных по бруцеллезу стадах крупного рогатого скота, ранее не иммунизированных или иммунизированных противобруцеллезными вакцинами, животных, положительно реагирующих в РА с содержанием 100 МЕ антител и выше, признают больными. Реакцию считают сомнительной при содержании 50 МЕ антител. Сыворотки крови от таких животных через 15 - 30 сут. исследуют повторно. При получении вновь сомнительного результата, животных признают больными бруцеллезом (п.4.2.5). В неблагополучных по бруцеллезу хозяйствах при получении положительных результатов исследования в РБП сывороток крови овец, коз и северных оленей (маралов) животных признают больными бруцеллезом; сыворотки крови крупного рогатого скота, верблюдов и лошадей в тот же или на следующий день исследуют в РА и РСК (РДСК) или РА и РИД. Животных, давших положительные результаты исследований, признают больными бруцеллезом. При получении сомнительных результатов таких животных повторно исследуют в РА, РСК (РДСК) или РА и РИД через 15 - 30 сут. При получении положительных или сомнительных результатов в одной или двух реакциях их считают больными бруцеллезом (п.4.5.5.).

03.08.2017 года №3447 начальником Управления ветеринарии Пензенской области главе КФХ Алексеенко З.В. было направлено требование о сдаче лошади на специализированный убойный пункт при строгом соблюдении ветеринарно-санитарных правил и под контролем ветеринарного специалиста.

По указанным основаниям, исковые требования Управления ветеринарии Пензенской области подлежат удовлетворению.

Исковые требования Управления ветеринарии Пензенской области в защиту неопределенного круга лиц к главе крестьянского (фермерского) хозяйства Алексеенко З.В. удовлетворить.

Обязать главу КФХ Алексеенко З.В.:

- убой лошади осуществлять на мясоперерабатывающем предприятии, получившем разрешение от органов государственного ветеринарного надзора и органов, осуществляющих государственный санитарно - эпидемиологический надзор;

- после сдачи лошади провести механическую чистку и санитарный ремонт в помещениях, скотных дворах;

- сбуртовать навоз, подстилку и остатки корма от животных неблагополучного пункта.

Ответчик может подать в суд заявление об отмене заочного решения в течение 7 дней со дня вручения ему копии этого решения. Стороны могут обжаловать заочное решение в апелляционном порядке в течение одного месяца по истечении срока подачи ответчиком заявления об отмене этого решения суда, а в случае, если такое заявление подано - в течение одного месяца со дня вынесения определения суда об отказе в удовлетворении этого заявления в Пензенский областной суд через Никольский районный суд Пензенской области.

Заочное решение в окончательной форме изготовлено 16.10.2017 года.

Изобретение относится к ветеринарии, эпизоотологии, а именно к способам дифференциальной экспресс-диагностики бруцеллеза крупного рогатого скота.

Принципиально важной является возможность не только выявить максимальное число бруцеллоносителей, спровоцированных вакцинацией, но и оценить степень их эпизоотической опасности, не допустив сдачу на убой животных с реакциями вакцинного происхождения (Косилов И.А., Аракелян П.К., Димов С.К., Хлыстунов А.Г. Бруцеллез сельскохозяйственных животных / под ред. И.А. Косилова. - Новосибирск, 1999. - 344 с.).

В настоящее время имеется ряд способов, направленных на дифференциальную диагностику бруцеллеза. Так, в нашей стране до настоящего времени реакция агглютинации (РА) и реакция связывания комплемента (РСК) с единым бруцеллезным диагностикумом, изготовленным из типичных бруцелл в S-форме, являются обязательным диагностическим комплексом при бруцеллезе животных (Наставление по диагностике бруцеллеза животных/ утверждено Минсельхозом РФ 29.09.2003 №13-5-02/0850), вполне приемлемым при условии использования в сроки, когда нет препятствий в виде поствакцинальных реакций (Косилов И.А., Аракелян П.К., Димов С.К., Хлыстунов А.Г. Бруцеллез сельскохозяйственных животных / под ред. И.А. Косилова. - Новосибирск, 1999. - 344 с.).

Однако, комплекс РА+РСК в ранние сроки после вакцинации, когда провоцирующие свойства вакцин, как аггллютиногенных, так и слабоагглютиногенных, проявляются наиболее ярко, оказались не способными объективно выявлять бруцеллоносителей, оценивать и прогнозировать степень эпизоотической опасности животных по бруцеллезу и уровень активности бруцеллезной инфекции в целом по стаду

Такой дифференциально-диагностической способностью даже в ранние сроки после вакцинации обладают О-ПС антигены (О-цепь полисохаридов) при исследовании сывороток крови животных в реакции иммунодиффузии(РИД) в агаровом геле. В частности, из бруцелл вида abortus был получен высокоочищенный О-ПС антиген. Принципиальный механизм его дифференцирующих возможностей заключается в том что у животных при их заражении вирулентными штаммами бруцелл синтез специфических преципитирующих антител (выявляемых в РИД) происходит, а при сенсибилизации слабовирулентными штаммами (включая вакцинные) - нет (Чекишев В.М., Колганова О.А. Средства и методы дифференциальной поствакцинальной серологической диагностики бруцеллеза животных / монография - Новосибирск, 2010. - 130 с.). Указанный антиген был внедрен в широкую ветеринарную практику в составе тест - системы (Наставление по диагностике бруцеллеза животных/ утверждено Минсельхозом РФ 29.09.2003 №13-5-02/0850).

Однако РИД с О-ПС антигеном не обладает свойствами способа экспресс-диагностики, так как на ее постановку и учет уходит 2 суток. Кроме того, она имеет такие существенные недостатки, как большая трудоемкость, субъективная оценка результатов диагностики, невозможность стандартизации проведения диагностики.

Наиболее близким к заявляемому способом (прототипом), является способ, основанный на использовании ИФА.

ИФА является наиболее современным и эффективным из известных способов экспресс-диагностики бруцеллеза у крупного рогатого скота. В частности, была разработана новая скрининговая тест-система ИФА. Ее использование возможно даже у животных, иммунизированных против бруцеллеза В случае выявления животных с положительными и сомнительными результатами ИФА необходимо прибегать к РА и РСК, а также дополнительным дифференциальным методам (Димова А.С., Димов С.К., Сизов А.А., Сизов Д.А., Аракелян П.К. Эффективность диагностики бруцеллеза крупного рогатого скота в новой тест-системе ИФА. - ж. Ветеринария, 2015. №8. С. 18-20).

Недостатком данного способа является то, что он в известных вариантах не может быть использован в дифференциальной поствакцинальной диагностике бруцеллеза крупного рогатого скота, иммунизированного живыми противобруцеллезными вакцинами.

Задачей заявляемого решения является расширение арсенала экспресс-методов диагностики бруцеллеза крупного рогатого скота, способных осуществлять дифференциацию реакций вакцинного и инфекционного происхождения и оценивать степень эпизоотической опасности реагирующих животных.

Поставленная техническая задача решается тем, что в способе дифференциальной экспресс-диагностики бруцеллеза крупного рогатого скота, включающем исследование сывороток животных в иммуноферментном анализе с использованием специфического антигена из типичных бруцелл вида abortus, ОПС-антигена и конъюгата на основе рекомбинантного белка G, согласно изобретению, исследование сывороток проводят параллельно непрямым и конкурентным методами иммуноферментного анализа с использованием ОПС-антигена в качестве конкурирующего агента, а интерпретацию результатов проводят по формуле

где

D1 - оптическая плотность, измеряемая в лунке, содержащей ОП-С антиген (конкурентный иммуноферментный анализ);

D2 - оптическая плотность, измеряемая в лунке, не содержащей ОП-С антиген (непрямой иммуноферментный анализ);

Кэо - коэффициент, определяющий степень эпизоотической опасности по бруцеллезу животного, от которого получен исследованный образец сыворотки крови, и имеющий две градации:

0≤К≤60 - отсутствие у животного эпизоотической опасности по бруцеллезу;

61≤К≤100 и выше - наличие у животного высокой эпизоотической опасности по бруцеллезу.

Способ осуществляют следующим образом:

1.1. Получение и использование антигенов

В качестве антигена, сорбированного на поверхность полистирольных планшет, применяется препарат, изготовленный только из типичных бруцелл (суточная культура штамма В. abortus 19, находящегося в стабильной S-форме), полученный следующим образом.

2. Использование конъюгата

Для обеспечения возможности универсального использования при исследовании сывороток крови различных видов животных применяется конъюгат на основе существующего рекомбинантного белка G, позволяющий без потери чувствительности и специфичности тестировать сыворотки крови крупного и мелкого рогатого скота, лошадей, свиней, верблюдов, кроликов, в отличие от используемого в ближайшем прототипе конъюгата на основе моноклональных антител против иммуноглобулинов конкретно одного вида животных.

Для этого при приготовлении такого конъюгата используют метод периодатного окисления.

Коммерческий препарат пероксидазы хрена (POD) смешивают с раствором периодата натрия, инкубируют в течение 20 минут, после чего белок осаждают насыщенным раствором сульфата аммония. Осадок отделяют центрифугированием, растворяют в карбонатно-бикарбонатном буфере. К образовавшемуся раствору активированной пероксидазы добавляют коммерческий препарат рекомбинантного белка G, инкубируют при температуре 37 градусов С.

Синтезированный конъюгат осаждают насыщенным раствором сульфата аммония, отделяют центрифугированием, растворяют в буфере, определяют рабочий титр, после чего используют в иммуноферментной диагностике бруцеллеза.

3. Постановка ИФА:

в способе дифференциальной экспресс-диагностики бруцеллеза животных используется метод парного исследования сывороток, при котором каждая сыворотка исследуется параллельно двумя методами иммуноферментного анализа -

1. Классическим иммуноферментным методом, при котором находящиеся в сыворотке крови животного специфические иммуноглобулины класса G (жидкая фаза) связываются со специфическим антигеном из типичных бруцелл вида abortus, сорбированном на поверхность лунки полистиролового планшета (твердая фаза);

2. Методом конкурентного иммуноферментного анализа, при котором в жидкую фазу добавляется ОПС-антиген, обладающий дифференциально-диагностическими возможностями (дифференциация реакций вакцинного и инфекционного происхождения и оценка степени эпизоотической опасности реагирующих животных) в качестве агента, конкурирующего со специфическими иммуноглобулинами класса G сыворотки крови животного за связывание со специфическим антигеном из типичных бруцелл вида abortus, сорбированном на поверхность лунки полистиролового планшета (твердая фаза);

Связавшиеся с твердой фазой специфические иммуноглобулины класса G в обоих методах регистрируют с использованием конъюгата на основе рекомбинантного белка G - пероксидаза хрена с последующей ферментативной реакцией разложения перекиси водорода и окисления хромогена с переходом из бесцветной в окрашенную фазу.

Для постановки реакции в две лунки полистиролового планшета для ИФА добавляют буферный раствор: в первую лунку - стандартный буферный раствор для разведения сыворотки, обеспечивающий соответствующую рН и ионную силу, необходимую для проведения стадии специфического связывания антител сыворотки крови с бруцеллезным антигеном.

Во вторую лунку так же добавляют стандартный буферный раствор для разведения сыворотки, в который вносят ОП-С антиген в количестве, эквимолярном количеству бруцеллезного антигена, сорбированного на поверхность лунок планшета.

В обе лунки вносят одинаковое количество сыворотки крови от обследуемого животного, и инкубируют при 37°С в течение 30-60 мин при регулярном встряхивании.

После инкубации содержимое лунок удаляют, тщательно отмывают от следов сыворотки, и добавляют конъюгат на основе рекомбинантного белка G, после чего инкубируют при 37°С в течение 30-60 мин при регулярном встряхивании.

После инкубации содержимое лунок удаляют, тщательно отмывают от следов конъюгата. Для проявления результатов реакции в лунки добавляют хромоген (тетраметилбензидин, либо аналогичный) и инкубируют в темноте при 37°С в течение 10-15 мин. По окончании инкубации реакцию останавливают добавлением серной кислоты до конечной концентрации 0,2 М/Л.

Результаты реакции регистрируют на спектрофотометре. Оптическую плотность (ОП) измеряют при длине волны 450 нм.

Интерпретацию результатов осуществляют по формуле

где

D1 - оптическая плотность, измеряемая в лунке, содержащей ОП-С антиген (конкурентный иммуноферментный анализ);

D2 - оптическая плотность, измеряемая в лунке, не содержащей ОП-С антиген (классический иммуноферментный анализ);

К.эо - коэффициент, отражающий процентное отношение показателя D1 к показателю D2. Этот коэффициент определяет степень эпизоотической опасности по бруцеллезу животного, от которого получен исследованный образец сыворотки крови, и сопоставим с результатами, получаемыми при исследовании сывороток крови животных на бруцеллез в РИД с О-ПС антигеном

При этом установили следующую градацию:

0≤К≤60 - коэффициент, определяющий отсутствие у животного высокой эпизоотической опасности по бруцеллезу (РИД с О-ПС антигеном - отрицательная);

61≤К≤100 и выше - коэффициент, определяющий наличие у животного высокой эпизоотической опасности по бруцеллезу (РИД с О-ПС антигеном - положительная).

Для иллюстрации способа приведены примеры:

Изучали специфичность показаний ИФА с обычным антигеном, изготовленным из бруцелл вида abortus, с параллельным использованием О-ПС-антигена в конкурентном анализе, при исследовании сывороток крови крупного рогатого скота с отрицательными результатами РА+РСК и РИД с О-ПС антигеном из благополучных по бруцеллезу стад без вакцинации и с вакцинацией и против бруцеллеза (таблица 1).

Результаты исследования в ИФА сывороток крови крупного рогатого скота с отрицательными результатами РА+РСК и РИД с О-ПС антигеном из благополучных по бруцеллезу стад без вакцинации и с вакцинацией против бруцеллеза

При исследовании на бруцеллез сывороток крови от крупного рогатого скота благополучных стад, не подвергавшегося вакцинации, по комплексу серологических реакций (РА+РСК, РИД) все пробы (5 проб) показали отрицательный результат. В ИФА при отрицательном и положительном контролях с учетом результатов классического и конкурентного вариантов во всех пробах (5 пробах) К.эо составил 0≤К≤60.

При исследовании на бруцеллез сывороток крови от крупного рогатого скота благополучных стад, не подвергавшегося вакцинации, по комплексу серологических реакций (РА+РСК, РИД) все пробы (13 проб) показали отрицательный результат. В ИФА при отрицательном и положительном контролях с учетом результатов классического и конкурентного вариантов во всех пробах (13 проб) К.эо составил 0≤К≤60.

Изучали дифференциально-диагностическую эффективность ИФА с антигеном, изготовленным из бруцелл вида abortus, и дополнительным использованием О-ПС антигена в конкурентном анализе, при исследовании сывороток крови крупного рогатого скота с положительными и сомнительными результатами РА+РСК и отрицательной РИД с О-ПС антигеном из благополучных по бруцеллезу хозяйств с вакцинацией против бруцеллеза (таблица 2).

При исследовании на бруцеллез 55 проб сывороток крови от крупного рогатого скота благополучных стад из 5 хозяйств, подвергавшегося вакцинации, по комплексу серологических реакций (РА+РСК) все пробы (55 проб) показали положительный или сомнительный результат(в разном сочетании). РИД с О-ПС антигеном во всех 55 пробах была отрицательной. В ИФА при отрицательном и положительном контролях с учетом результатов классического и конкурентного вариантов во всех пробах (55 проб) К.эо составил 0≤К≤60.

Результаты исследования в ИФА сывороток крови крупного рогатого скота с положительными и сомнительными результатами РА+РСК и отрицательной РИД с О-ПС антигеном из благополучных по бруцеллезу стад с вакцинацией против бруцеллеза

Изучали дифференциально-диагностическую эффективность ИФА с антигеном, изготовленным из бруцелл вида abortus, и дополнительным использованием О-ПС антигена в конкурентном анализе, при исследовании сывороток крови крупного рогатого скота с различными показаниями РА+РСК и РИД с О-ПС антигеном из неблагополучных по бруцеллезу хозяйств без вакцинации и с вакцинацией против бруцеллеза (таблица 3).

При исследовании на бруцеллез 10 проб сывороток крови от крупного рогатого скота неблагополучных по бруцеллезу стад, не подвергавшегося вакцинации, с различными показателями у серологических реакций (РА+РСК) в ИФА при отрицательном и положительном контролях с учетом результатов классического и конкурентного вариантов К.эо составил во всех 5 пробах с отрицательной РИД 0≤К≤60, а, а во всех 5 пробах с положительной РИД - 61≤К≤100 и выше.

При исследовании на бруцеллез 10 проб сывороток крови от крупного рогатого скота неблагополучных по бруцеллезу стад, подвергавшегося вакцинации, с различными показателями у серологических реакций (РА+РСК) в ИФА при отрицательном и положительном контролях с учетом результатов классического и конкурентного вариантов К.эо составил во всех 5 пробах с отрицательной РИД 0≤К≤60, а, а во всех 5 пробах с положительной РИД - 61≤К≤100 и выше.

Результаты исследования в ИФА сывороток крови крупного рогатого скота с различными показаниями РА+РСК и и РИД с О-ПС антигеном из неблагополучных по бруцеллезу стад без вакцинации и с вакцинацией против бруцеллеза

Таким образом, основываясь на результатах, приведенных во всех трех примерах, установлена закономерность: в сыворотках крови крупного рогатого скота с различными эпизоотическими и иммунологическими характеристиками(независимо от результатов РА и РСК), исследованных на бруцеллез в ИФА с параллельным использованием классического и конкурентного(с добавлением О-ПС антигена) вариантов К.эо составлял во всех случаях при отрицательной РИД с О-ПС атигеном 0≤К≤60, а при положительной РИД с О-ПС антигеном - 61≤К≤100 и выше.

Установленная закономерность позволяет предлагать вместо официально принятой в дифференциальной поствакцинальной дигностике бруцеллеза крупного рогатого скота РИД с О-ПС антигеном, на постановку и учет которой уходит до 48 часов, применять иммуноферментный анализ в двух параллельных вариантах постановки - классическом с использованием специфического антигена из типичных бруцелл вида abortus и конкурентном - с дополнительным использовании О-ПС антиген при конъюгате на основе рекомбинантного белка G (учет реакций через 2 часа).

Преимущества данного способа:

- высокая дифференциально-диагностическая активность;

- значительная экономия времени, затрачиваемого на проведение исследований, учет и интерпретацию полученных результатов, простота и объективность этих процессов за счет их инструментального обеспечения;

- высокая безопасность (за счет исключения прямого контакта с антигеном, автоматического пипетирования проб и др.).