Африканская чума лошадей в россии
АФРИКАНСКАЯ ЧУМА ЛОШАДЕЙ (Pestis africana equorum), чума непарнокопытных, вирусная болезнь, характеризующаяся лихорадкой, отечностью подкожной клетчатки и кровоизлияниями во внутр. органах. Болезнь регистрировалась гл. обр. в странах Африки, а в нек-рые годы и в странах Ближнего и Среднего Востока, в Испании. В СССР не зарегистрирована. В районах, где болезнь появляется впервые, летальность до 100%.
Этиология. Возбудитель болезни — РНК-содержащин вирус, относящийся к роду Orbivirus, сем. Reoviridae. Имеется 9 различных по антигенной структуре типов вируса А. ч. л. Размер вируса 70—80 нм, форма вирнона сферическая. Возбудитель инактивируется при t 70 °С в течение 5 мин, при t 50 °С в течение 10 мин. Он чувствителен к изменению рН в кислую сторону, хорошо переносит лиофилизацию. формалин в концентрации 1 : 2000 — 1 : 4000 инактивирует вирус, содержащийся в культу-ральной среде. Вирус культивируют в первичных (почка хомяка и др.) и перевиваемых культурах клеток. Из лабораторных животных к возбудителю восприимчивы белые мыши, морские свинки, хомячки.
Эпизоотология .Наиболее восприимчивы к вирусу А. ч. л. лошади; чувствительны также мулы и ослы. Заболевание наблюдается в тёплое [теплое] , дождливое время года. Возбудитель передаётся [передается] от больных животных здоровым нек-рыми видами мокрецов и комаров.
Иммунитет . У переболевших животных возникает типоспецифич. иммунитет (невосприимчивость к определ. типу вируса). Для специфич. профилактики применяют вакцины, прививка к-рых создаёт [создает] у лошадей невосприимчивость к болезни в течение неск. лет.
Течение и симптомы . Инкубационный период 5—7 сут. Различают сверхострое, острое и подострое течение болезни. При сверхостром течении наблюдаются повышение темп-ры тела до 41 °С и выше, конъюнктивит, учащённое [учащенное] дыхание и ускоренный пульс. На 5—7-е сут болезни животное погибает. Острое течение (лёгочная [легочная] форма) характеризуется резким повышением темп-ры тела, затруднённым [затрудненным] дыханием (шея у животного вытягивается), одышкой и сухим болезненным кашлем. Продолжительность болезни 10—15 сут. При подостром течении (сердечная, или отёчная [отечная] , форма) инкубационный период до 30 сут; отмечаются сильные отёки [отеки] головы, шеи, иногда области груди и живота. Больные животные, как правило, погибают.
Патологоанатомические изменения при остром течении болезни характеризуются отёков [отеков] лёгких [легких] и скоплением жидкости в плевральной полости. Из лёгочной [легочной] ткани при её [ее] разрезе выделяется пенистая жидкость. Бронхиальные и средостенные лимфатич. узды увеличены и отёчны [отечны] . При сердечной форме отмечается отёчность [отечность] головы, шеи и век, соединительной и мышечной ткани; подкожная клетчатка, лимфатич. узлы гиперемированы. Обнаруживают также дистрофич. изменения в миокарде, отёк [отек] лёгких [легких] , кровоизлияние во внутр. органах.
Диагноз ставят на основании эпизоотич. обстановки, клинич. признаков; а в странах, где болезнь ранее не регистрировалась,— гл. обр. на основании биол. пробы. К лабораторным методам диагностики А. ч. л. относятся: выделение вируса из проб патол. материала путём [путем] заражения чувствительных животных и культур клеток; РСК для обнаружения антигена вируса в мозге заражённых [зараженных] белых мышей или выявления антител в сыворотке больных, переболевших и привитых против А. ч. л.; реакция диффузионной преципитации для обнаружения антигена вируса в испытуемых материалах и антител к нему в сыворотке больных или переболевших животных. А. ч. л. необходимо отличать от сиб. язвы, пироплазмоза и трипаносомоза.
Лечение не разработано.
Профилактика и меры борьбы. Мероприятия по предотвращению заноса А. ч. л. включают установление границ угрожаемой зоны шир. не менее 15 км, дезинфекцию животноводч. помещений и мест выплода насекомых, вакцинацию всех однокопытных, запрещение пастьбы их ночью. При появлении А. ч. л. осуществляют карантинные мероприятия.
Африканская чума лошадей, или чума однокопытных - вирусная болезнь, протекающая остро или подостро, характеризуется лихорадкой, появлением отеков подкожной клетчатки и кровоизлияниями во внутренних органах.
География болезни. До 1958 г. чуму лошадей регистрировали главным образом в Африке. С 1959 г. инфекция стала быстро распространяться в странах Ближнего и Среднего Востока и приняла характер панзоотии, проникнув на остров Кипр, в Иорданию, Ливан, Сирию, Ирак, Турцию, Иран, Афганистан, Пакистан и в Индию. В 1965-1966 гг. чума лошадей появилась в Марокко, Алжире и Тунисе, т. е. в странах, имеющих связи с государствами Южной и Юго-Западной Европы, а осенью 1966 г. она была зарегистрирована в Испании.
Экономический ущерб от африканской чумы лошадей слагается из падежа восприимчивых к этой болезни животных и затрат, связанных с проведением противоэпизоотических мероприятий. При появлении болезни в районах, где ее ранее не регистрировали, погибает от 50 до 95% животных от числа заболевших, а в местах стационарного распространения--около 10%. Наибольший ущерб чума нанесла странам Ближнего и Среднего Востока. В эпизоотию 1959-1961 гг. от этой болезни пало свыше 300 тыс. лошадей, а в 1966 г. в государствах Северной Африки (Алжир, Тунис, Марокко), пало 370 тыс, лошадей, ослов и мулов (М. Kaveh, 1967) (материалы XXXV Генеральной сессии МЭБ, 1969).
Возбудитель - фильтрующийся вирус с четко выраженными антигенными различиями штаммов. В настоящее время группа вирусов африканской чумы лошадей составляет комплекс, объединяющий девять различных по антигенной структуре агентов, у которых общий комплементсвязывающий антиген.
Эпизоотология болезни. К африканской чуме наиболее восприимчивы лошади. В районах, где болезнь появляется впервые или через несколько лет после предыдущей вспышки, среди заболевших животных отмечается значительный падеж. В местах, стационарно неблагополучных по африканской чуме, гибель животных зависит от породы лошадей и вирулентности возбудителя. Кроме того, замечено, что завезенные лошади в период эпизоотии, как правило, погибают все, в то время как местные лишь переболевают. Жеребята, родившиеся от иммунных матерей, устойчивы к экспериментальному заражению до 5-6-месячного возраста. Неиммунных лошадей можно экспериментально инфицировать, вводя вируссодержащий материал подкожно, внутрикожно, внутривенно, интратрахеально и интрапульмонально. Скармливанием инфекционного материала не всегда удается заразить животных.
К африканской чуме лошадей чувствительны также мулы и ослы. На Среднем Востоке пало около 4% ослов.
Некоторым исследователям удавалось заражать собак скармливанием инфекционного материала.
У крупного рогатого скота, овец и коз после введения вирулентного материала лишь незначительно повышается температура тела.
Человек к вирусу африканской чумы лошадей невосприимчив.
Заболевание наблюдается в теплое, дождливое время года в сырых, низменных районах. При выпадении обильных осадков отмечается распространение чумы лошадей и в районах, расположенных на возвышенных местах, где в обычные годы она не наблюдается. Отмечено также, что заболевают в основном те лошади, которые остаются на ночь вне помещений. Поэтому, чтобы предупредить заболевание лошадей, их нужно выпасать днем, а на ночь загонять в помещения.
Симптоматика. Инкубационный период продолжается 5-7 дней. Различают сверхострое, острое и подострое течение болезни.
Сверхострое течение болезни. После инкубационного периода (2-3 дня) температура тела быстро повышается до 41° и выше. На этом уровне она удерживается 1-2 дня, а затем снижается до нормальной. У животных наблюдают конъюнктивит, учащенное дыхание и ускоренный пульс. На 5-7-й день больные животные погибают.
Острое течение болезни (легочная форма). В Африке эту форму болезни называют Dunkop - худая голова . Ее регистрируют у животных, высокочувствительных к вирусу африканской чумы. После инкубационного периода температура тела резко повышается, дыхание становится затрудненным, шея вытягивается, появляется одышка, сухой болезненный кашель и желтоватые истечения из носа. Продолжительность болезни 10-15 дней.
Подострое течение болезни (сердечная, или отечная, форма).-В Африке она называется Dikkop - большая голова . Болезнь характеризуется сильным отеком головы, шеи и постоянным расстройством сердечной деятельности. Иногда отек распространяется на область живота. Инкубационный период может продолжаться до 30 дней. Эта форма болезни встречается в условиях вяло протекающей эпизоотии. На 10-12-й день отеки появляются в обеих височных впадинах. Они могут или исчезать, или еще более увеличиваться и распространяться на голову, язык, иногда на шею и грудную клетку. Видимые слизистые оболочки набухшие, пульс слабый, учащенный, иногда не прощупывается. Больные животные, как правило, погибают.
При смешанной форме симптомы, характерные для обеих форм болезни, развиваются одновременно или один за другим.
Патологоанатомические изменения соответствуют клиническим признакам болезни. Если животное пало в период острого течения болезни, отмечают отечность легких и скопление жидкости (до нескольких литров) в плевральной полости, а также инфильтрацию соединительной ткани у основания сердца. При разрезе легких из ткани выделяется желтоватая пенистая жидкость. Бронхиальные и средостенные лимфатические узлы увеличены и отечны. На околосердечной сумке заметны геморрагии. При сердечной форме болезни соединительная, подкожная, мышечная ткани и лимфатические узлы отечны. Отечность охватывает голову, шею, а иногда распространяется до грудной клетки и плечевых суставов. У некоторых животных отечны веки, височные впадины, губы и межчелюстное пространство. У многих павших животных можно обнаружить в околосердечной сумке скопление жидкости. На эпикарде встречаются геморрагические пятна, на эндокарде красные диффузные зоны, мышца сердца перерождена, легкие отечны.
Диагноз. При постановке диагноза прежде всего учитывают эпизоотическую обстановку. Заболевание, как правило, появляется в теплое время года, и ему предшествует выпадение значительного количества осадков. Такие климатические условия способствуют интенсивному распространению насекомых - переносчиков вируса чумы лошадей. Присутствие большого числа однокопытных в местах появления болезни приводит к заражению новых групп восприимчивых животных и инфекция таким путем распространяется в ранее свободные от нее районы.
В государствах, где африканская чума лошадей ранее не регистрировалась, одним из основных методов постановки диагноза служит биологическая проба. Для этого испытуемый материал (кровь больной лошади, взятую в период лихорадки, или суспензию селезенки павшего животного) вводят внутривенно здоровой лошади или в мозг белым мышам. На 3-6-е сутки после заражения у лошадей повышается температура до 40-40,5°. Однако животные сохраняют аппетит. За 2-3 суток до гибели (через 7-11 суток после заражения) у лошадей отмечается затрудненное дыхание, пульс слабого наполнения и отеки различных частей тела. Затем при явлениях общего тяжелого угнетения животные погибают.
Дифференциальный диагноз. Африканскую чуму лошадей следует отличать от сибирской язвы, пироплазмоза и трипанозомоза. При указанных болезнях селезенка у павших лошадей значительно увеличена, а при чуме она нормального размера. Кроме того, при лабораторном исследовании (микроскопии) в патологических материалах, взятых от лошадей, павших от сибирской язвы и кровепаразитарных болезней, можно обнаружить соответствующих возбудителей.
Лечение. Специфических средств лечения нет. Проводят симптоматическое лечение, направленное на поддержание функций сердца и легких.
Иммунитет. Переболевшие чумой животные не чувствительны к тому типу вируса, который вызвал заболевание, и восприимчивы к вирулентному вирусу других антигенных типов.
Симультанные прививки. Каждой лошади вводят внутривенно гипериммунную сыворотку и вирулентный вирус (кровь больных животных). Однако у многих привитых лошадей отмечают осложнения, приводящие животных к гибели.
Меры борьбы. При появлении АЧЛ на хозяйство накладывают карантин. Больных и подозрительных по заболеванию лошадей убивают, трупы утилизируют, запрещают перемещение всех видов животных. Лошадей защищают от нападения насекомых, запрещают пастьбу в ночное время. В обязательном порядке определяют вокруг эпизоотического очага АЧЛ угрожаемую зону, в которой поголовно вакцинируют всех однокопытных. Привитых животных метят яркой краской и устраняют возможность заражения их через кровососущих насекомых.
Карантин с хозяйства снимают через 1 год после последнего случая гибели от чумы или убоя больной лошади, а вывоз животных из ранее неблагополучного хозяйства разрешается не ранее чем через 1 год после снятия карантина.
Африканская чума лошадей (чума однокопытных) - вирусное заболевание с острым либо подострым течением, отличающееся расстройством сердечно-сосудистой и дыхательной систем, а также лихорадкой, отёчными явлениями подкожной клетчатки.
Вначале африканскую чуму лошадей фиксировали только лишь в Африке. С 30-х годов 20-го века она закралась на Ближний Восток, в 50-е годы в Египт. С 1959 году африканская чума разнеслась в ряд сопредельных с Россией стран: Иран, Ирак, Афганистан, Пакистан, Турцию, а также Ливан, Сирию, Индию, на Кипр, в 1966 и 1987 гг.- в Испанию.
Возбудитель болезни - РНК-содержащий вирус из семейства реовирусов. Определяется множественностью антигенных и соответственно иммуногенных типов.
Африканская чума лошадей прекрасно сберегается в замороженных тканях и органах, невосприимчива к щелочной среде, однако возбудитель резко гибнет в кислой среде. Дезактивируется формалином, ультрафиолетовыми лучами.
Эпизоотология. Чувствительны лошади и меньше ослы, мулы, способны болеть зебры.
Главный источник возбудителя - нездоровые животные. Но вопрос сохранения вируса в межэпизоотический этап не выяснен. Выражение и распространение африканской чумы, которая представляет собой трансмиссивное заболевание (т. е. переходящей с помощью переносчиков), определено природными и климатическими обстоятельствами.
Заболевание начинается в весенне-летний период в сырых, влажных местах. В периоды продолжительной сухой погоды, даже в регионах ее постоянного распространения, заболеваемость уменьшается.
При подходящих условиях в годы с обилием дождей заболевание разносится в ранее благополучные районы.
Переносчиками вируса служат мокрецы и немного видов комаров. Большим значением в эпизоотологии заболевания обладает иммунологическая неоднородность вируса: лошади после инфицирования одним типом возбудителя, как правило, не получают устойчивого иммунитета к иным типам вируса.
Невосприимчивость. У перенёсших заболевание лошадей формируется невосприимчивость только лишь к тому типу вируса, который вызвал болезнь. Показателем иммунитета служат вируснейтрализующие антитела.
Признаки. Дифферинциируют четыре главных течения заболевания.
Сверхострое течение. Длительность инкубационного периода 3-4 суток. Быстро возрастает температура тела у животного до 41 С и удерживается несколько суток, потом возникают мышечная дрожь, угнетение, учащается пульса. На 5-7-е сутки заболевания животные гибнут.
Острое течение, легочная форма. Резко возрастает температура тела у животного, дыхание затрудненное, абдоминального типа, из-за данного ноздри расширены, а шея вытянута. Возникают кашель, влажные хрипы, выделения серозной жидкости из носовой и ротовой полостей. Поправляются только некоторые животные.
Подострое течение, сердечная форма. Имеет своей отличительной чертой более продолжительный инкубационный период (до недели), лихорадка длится 3-4 суток, возникают отёчные явления в районе надглазничных впадин, век, исходящие меньше - на шею, грудь. Лошадь гибнет через 10-15 суток при явлениях слабости сердечной деятельности.
При смешанном продолжении прослеживают признаки, присущие обеим формам, которые появляются в то же время либо последовательно одно за другим.
Патологоанатомические изменения. При остром продолжении заболевания обнаруживают припухлость легких, на рассечении стекает пенистая желтого цвета жидкость, сосредоточение серозной жидкости в плевральной полости, бронхиальные и средостенные лимфатические узлы с отёками. Геморрагия на перикарде.
При сердечной форме концентрируют внимание на подкожных отёчных явлениях в районе головы, грудной клетки, экссудативный перикардит, перерождение миокарда. Наблюдаются также некоторое увеличение селезенки, печени, кровоизлияния под капсулой последнего органа.
При сверхостром продолжении заболевания заметных изменений внутренних органов не находят.
Диагностика. Диагноз устанавливают на основе эппзоотологических, клинических данных, лабораторного изучения, а при нужде - постановкой биологической пробы. Придают значение сезонному характеру заболевания, присутствию переносчиков, связь с природными и климатическими обстоятельствами, высокий летальный исход для лошадей.
Лабораторная диагностика включает получение вируса и серологические изучения в РСК с сыворотками крови перенёсших заболевание лошадей и антигеном из мозга инфицированных мышей. Представляет собой группоспецифическую реакцию.
Вирус экстрагируют из крови либо селезенки лошади заражением лабораторных животных либо культур клеток. Идентификацию производят в реакции нейтрализации, РТГА.
Африканскую чуму необходимо различать от сибирской язвы, пироплазмоза и трипаносомоза.
Лечение. Используют симптоматические средства. Уменьшают выпаивание воды, делают возможным полный покой нездоровым лошадям.
Предупреждение и меры борьбы. Основа предупреждения - внимательный ветеринарный надзор за лошадьми, прибывающими из неблагополучных по болезни стран, и их обязательное помещение на карантин.
В время карантина формируются условия, делающие невозможным передачу вируса насекомыми-гематофагами. Карантин аннулируется через год после последнего случая выздоровления либо смерти животного, а вывоз лошадей позволяют не раньше чем через год после снятия карантина.
В неблагополучных регионах используют моно- и поливалентные вакцины из ослабленных штаммов вируса либо же дезактивированные культуральные вакцины.
Россия благополучна по африканской чуме лошадей, но созданы меры по предупреждению занесения заразы, включающие помещение на карантин завозимых лошадей, определение карантинной зоны шириной до 15 км, борьбу с насекомыми и вакцинацию сельскохозяйственных животных полиштаммной вакциной.
480 руб. | 150 грн. | 7,5 долл. ', MOUSEOFF, FGCOLOR, '#FFFFCC',BGCOLOR, '#393939');" onMouseOut="return nd();"> Диссертация, - 480 руб., доставка 1-3 часа, с 10-19 (Московское время), кроме воскресенья
Автореферат - бесплатно , доставка 10 минут , круглосуточно, без выходных и праздников
Титов, Илья Андреевич. Генотипирование вируса африканской чумы лошадей различных серотипов : диссертация . кандидата биологических наук : 03.02.02 / Титов Илья Андреевич; [Место защиты: Всерос. науч.-исслед. ин-т ветеринар. вирусологии и микробиологии].- Покров, 2013.- 106 с.: ил. РГБ ОД, 61 13-3/850
Введение к работе
1.1 Актуальность темы. Африканская чума лошадей (африканская чума однокопытных) (АЧЛ) - вирусная болезнь, протекающая остро и подостро, характеризуется лихорадкой, отеками подкожной клетчатки и кровоизлияниями во внутренних органах. Болезнь относится к группе трансмиссивных инфекций, передается кровососущими насекомыми, носит сезонный характер, проявляясь в теплое, влажное время года (Сюрин В.Н. и др. 1991). Экономический ущерб от этой инфекции слагается из падежа животных и затрат, связанных с проведением противоэпизоотических мероприятий (Сюрин В. Н. и др. 1991).
По современной классификации возбудитель африканской чумы лошадей принадлежит к роду (9г&шгш*семейства Reoviridae.
Наличие сегментированного генома предопределяет появление реассортантов, что, в свою очередь, может привести к возникновению вариантов вируса с новыми биологическими свойствами. На данный момент известно о 9 серотипах вируса АЧЛ.
В настоящее время в мире сохраняется неблагоприятная эпизоотическая ситуация по АЧЛ. В период с 1999г. до 2011г. в странах Африки (ЮАР, Нигерия,Намибия, Свазиленд, Лесото, Зимбабве) ежегодно регистрировались вспышки АЧЛ. Последние вспышки были зарегистрированы в Испании и Португалии в 1989 г., в Алжире и Марокко (1989-1991гг.), в Эфиопии (2003г.), в Сенегале (2007г.) и в Южной Африке (2008-2009гг.). Вспышка АЧЛ, произошедшая в Сенегале в 2007г., была вызвана 2,7и 9 серотипами вируса. Она длилась 4 месяца, нанеся ущерб в 1,4 миллиона евро (AkakpoA.J., DioufN.etal. 2007). В настоящее время в странах Африки циркулируют 2,3, 7 и 9 серотипы ВАЧЛ ().
По данным Росстата за 2012 год в нашей стране насчитывается 1378,5 тысяч лошадей, из которых сельскохозяйственным предприятиям принадлежит 358,8 тысяч голов, что составляет 26% от общей численности: фермерским хозяйствам - 289,2 тысяч (21%) и частным владельцам - 730,4 тысяч (53%). Из данных статистики видно, что наибольшее число лошадей принадлежит частным лицам, что связано с увеличением популярности конного спорта среди
населения. В последние годы возрастает импорт лошадей из неблагополучных по АЧЛ регионов, таких, как страны Аравийского полуострова и Африки.
В связи риском заноса данного заболевания в ходе торгово-экономических взаимоотношений с неблагополучными по АЧЛ странами, важным вопросом является своевременное выявление зараженных животных. Поэтому, разработка быстрых, специфичных и чувствительных методов выявления больных АЧЛ животных является актуальной проблемой.
1.2 Степень разработанности проблемы
Для диагностики АЧЛ широко применяют серологические методы:метод
флюоресцирующих антител, реакцию диффузной преципитации, реакцию
нейтрализации, реакцию связывания комплемента, реакцию задержки
гемагглютинации, метод флюоресцирующих антител (Сюрин В.Н. и др. 1979). В
90-е годы был разработан ряд тест-систем, основанных на методе ПЦР с
электрофорезнойдетекцией (S.Zientara; С. ). В последние годы
для детекции генома вируса АЧЛ испанскими и французскими учёными
(M.Aguero, C.Gomez-Tejedor,etal. 2008), (B.Rodriguez-Sanches, J.Fernandez-
Pineiro,etal. 2008) былиразработаны ОТ-ПЦР в режиме реального времени с
праймерами, комплементарными различнымсегментам генома. Для
определения серотиповой принадлежности вируса АЧЛ в 2000 году была
разработана двухраунднаясеротипоспецифическая ПЦР с
электрофорезнойдетекцией продуктов амплификации (C.Sailleau, C.Hamblin, etal. 2000). В настоящее время испанскими учёными (M.Aguero, K.Tena) разработаны 3 серотипоспецифические тест - системы на основе ПЦР режиме реального времени, позволяющие в ходе одной реакции выявлять 2,4,9; 3,5,7 и 1,6,8 серотипы.
Отечественными учеными были предложены серологические методы выявления антигена вируса АЧЛ (Сюрин В.Н. и др. 1991). В 2004 г., Д.В. Колбасовым, И.М. Калабековым были разработаны наборы препаратов на основе ПЦР с электрофорезнойдетекцией.
В настоящее время в Российской Федерации отсутствуют средства быстрогоопределениясеротиповой принадлежности изолятов и штаммоввируса АЧЛ.
1.3 Цель и задачи исследования
Основная цель исследований заключалась в разработке средств генотипированиявируса АЧЛ различных серотипов на основе амплификации и секвенирования участков различных сегментов генома.
Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:
На основе анализа нуклеотидных последовательностей различных сегментов генома вируса африканской чумы лошадей подобрать специфические праймеры и ДНК- зонд для идентификации возбудителя.
Провести экспериментальное заражение животного, восприимчивого к вирусу АЧЛ, с целью получения клинического и патологического материала, а также изучения характера течения инфекционного процесса.
Оценить возможность применения разработанной тест-системы для выявления различных серотипов вируса АЧЛ в материалах от экспериментально зараженных животных и в вируссодержащих образцахс целью последующего генотипирования.
Определить первичные нуклеотидные последовательности участков различных сегментов генома вируса АЧЛ для паспортизации штаммов, хранящихся в коллекции микроорганизмов ГНУ ВНИИВВиМРоссельхозакадемии.
5. Подтвердить молекулярно-генетическими методами серотиповую
принадлежность штаммов вируса АЧЛ, депонированных в коллекции
микроорганизмов ГНУ ВНИИВВиМРоссельхозакадемии.
1.4 Научная новизна результатов исследований
Впервые в Российской Федерации определены нуклеотидные последовательности 2, 7 и 10 сегментов генома шести штаммов вируса африканской чумы лошадей, имеющихся в коллекции микроорганизмов ГНУ ВНИИВВиМРоссельхозакадемии и проведен их филогенетический анализ.
Впервые в Российской Федерации разработанадиагностическая ОТ-ПЦР на участок пятого сегмента генома с детекцией продуктов амплификации в режиме реального времени для идентификации вируса АЧЛ девяти серотипов.
Экспериментально воспроизведена африканская чума лошадей на восприимчивом животном, зараженном вирулентным штаммом "Уттар-Прадеш".
Впервые в Российской Федерациимолекулярно-генетическими методами идентифицирован вирус АЧЛ,штамм"Уттар-Прадеш"в патологическом материале от экспериментально заражённого восприимчивого животного.
В международной базе данных NCBI были депонированы последовательности 7 и 10 сегментов вирулентного штамма "Уттар-Прадеш".
1.5 Теоретическая и практическая значимость работы
Разработаны «Методические рекомендации по выявлению РНК вируса
Полученные нуклеотидные последовательности 2, 7 и 10 сегментов
генома использованы для характеристики штаммов вируса АЧЛ,
депонированных в коллекции микроорганизмов ГНУ
1.6 Степень достоверности и апробация результатов работы
Степень достоверности результатов проведённых исследований
подтверждена статистическими исследованиями и комиссионными испытаниями. Акт комиссионных испытаний утверждён директором ГНУ ВНИИВВиМ Россельхозакадемии. Статистическая обработка включала расчёты средних арифметических значений, коэффициентов вариации, филогенетический анализ последовательностей с помощью программы BioEdit 7.0, вычисления эволюционных дистанций с помощью программы Mega 5.05. Научные положения, выводы и практические предложения диссертационной работы аргументировано отражают содержание диссертации.
Исследования по теме диссертационной работы выполнены в 2009-2013 гг. на базе лаборатории Биофизики ГНУ ВНИИВВиМРоссельхозакадемии, г. Покров.
Результаты диссертационной работы представлены и обсуждены на Международной научно-практической конференции молодых учёных "Достижения молодых учёных в ветеринарную практику" (декабрь 2010г., г. Владимир); BTV/AHSV workshop - 2010 в Испании; BTV/AHSV workshop -
2012 в Великобритании, а также на заседаниях ученого совета ГНУ ВНИИВВиМРоссельхозакадемии в период с 2009 по 2012 гг.
1.7 Публикации научных исследований
По теме диссертационной работы опубликовано 4 научные работы, в том числе 2 статьи в изданиях, рекомендованных ВАК Министерства образования и науки Российской Федерации.
1.8 Основные положения, выносимые на защиту
1. Разработанная тест-система на основе ОТ-ПЦР в режиме реального
времени пригодна для идентификации генома вируса африканской чумы
лошадей в пробах крови и патологического материала.
2. Экспериментальное заражение лошади вирусом АЧЛ (штамм 9
серотипа "Уттар-Прадеш") вызывает острое течение болезни.
3.Филогенетический анализнуклеотидных последовательностей участков 2,7,10 сегментов генома музейных штаммов вируса АЧЛ позволяетопределить серотиповую принадлежность исследованных штаммов.
1.9 Объём и структура работы
Диссертационная работа изложена на 98 страницах и содержит следующие разделы: введение, обзор литературы, материалы и методы, результаты собственных исследований и их обсуждение, заключение и выводы. Список литературы включает 122 источника, из них 7 отечественных, ПО зарубежных и 5интернет-ресурсов. Работа иллюстрирована 10 таблицами и 17 рисунками.
Исследованияпо теме диссертационной работы выполнены в
2009-2013 гг. на базе лаборатории Биофизики ГНУ
ВНИИВВиМРоссельхозакадемии, г. Покров.
1.10 Личный вклад соискателя
Основной объем исследований проведен автором самостоятельно. Автору
принадлежит ведущая роль в планировании и выполнении основных
экспериментов и обобщении полученных результатов. Консультативную и
методическую помощь при выполнении отдельных этапов работы оказывали:
к.б.н. Малоголовкин А.С., научный сотрудник Бурмакина Г.С, а также
сотрудники Научно-экспериментального отдела ГНУ
| Вирус болезни Чума лошадей | |
|---|---|
| классификация Вирус | |
| (Неоцениваемый): | Вирус |
| Тип: | incertae SEDIS |
| Учебный класс: | incertae SEDIS |
| Порядок: | incertae SEDIS |
| Семья: | Reoviridae |
| Род: | Orbivirus |
| Виды: | |
