Трепонема в мазке из твердого шанкра

Вы можете добавить к заказу еще тесты в течение 7 дней

Сифилис — венерическое заболевание, возбудитель которого — бледная трепонема (Treponema pallidum) — может поражать различные органы и ткани и обусловливать циклическую хроническую инфекцию. Заражение от человека к человеку происходит преимущественно при половом контакте, когда пораженные участки слизистых оболочек инфицированного человека контактируют с мельчайшими дефектами эпителия у партнера, реже — при кожном контакте. В месте проникновения инфекции происходит размножение возбудителя, он быстро распространяется по всему организму, поражая клетки малых кровеносных сосудов всего организма, в результате чего в процесс постепенно вовлекаются все органы и системы.

Развитие болезни включает несколько периодов. При первичном сифилисе в зоне входных ворот образуется безболезненная язва — твердый шанкр (шанкры), сопровождающийся безболезненным увеличением регионарных лимфоузлов, самостоятельно заживающий через 3–8 недель. Вторичный период характеризуется генерализацией инфекции: появляется сыпь, симптомы общей интоксикации (небольшое повышение температуры тела, недомогание, ангина, увеличение лимфоузлов). Данные проявления протекают с периодами обострения и ремиссии. Примерно через полгода наступает стадия латентного сифилиса, когда единственными проявлениями будут алопеция, лейкодерма — особое нарушение пигментации кожи и наличие плотных лимфоузлов (склеротический лимфаденит). В данный период единственным доказательством инфекции служит наличие антител к бледной трепонеме (методы RPR, РПГА, ИФА). Поздние стадии сифилиса проявляются поражением кожи, костно-мышечной системы, внутренних органов (чаще сердечно-сосудистая и нервная система).

ДНК бледной трепонемы возможно обнаружить в соскобе с эрозивно-язвенных элементов (шанкр) и в элементах сыпи.

В каких случаях обычно назначают исследование на определение ДНК бледной трепонемы (Treponema pallidum)

• Подозрение на ранний первичный сифилис при наличии твердого шанкра.
• Обследование лиц, контактирующих с больным сифилисом.
• Наличие характерной сыпи при подозрении на сифилис.

Что означают результаты теста

Сроки выполнения теста

Подготовка к анализу

Накануне исследования нужно отменить местные лекарственные препараты. У женщин исследование не проводят в период менструации. После кольпоскопии, трансвагинального УЗИ должно пройти не менее 48 часов. Если необходимо взятие мазка из уретры у мужчин, рекомендовано воздержание от мочеиспускания не менее 2 часов до исследования. Материал берется из зоны язвенного дефекта.

Выберите требуемый вид биоматериала

Соскобы из урогенитального тракта не берутся в течение суток после местной терапии (свечи, мази, спринцевания), после полового контакта и во время менструации у женщин. После кольпоскопии, интравагинального УЗИ должно пройти 48 часов. В случае наличия признаков острого воспаления необходимость взятия мазка определяется лечащим врачом. Если необходимо получить соскоб из уретры, то перед взятием материала нужно не мочиться 1,5 - 2 часа. Если исследование назначается для контроля излеченности, то взятие материала на исследование методом ПЦР возможно не ранее, чем через 28 дней после окончания приема антибиотиков, на микробиологические исследования не ранее,чем через 14 дней.

Взятие материала на исследование возможно только врачом соответствующей квалификации.

Мокроту можно собрать только при наличии кашля! Перед сбором мокроты рекомендуется почистить зубы и прополоскать рот кипяченой водой. Избегать попадания в мокроту слюны и носовой слизи. Мокрота по мере откашливания собирается в стерильный контейнер. Кашель можно вызвать с помощью нескольких глубоких вдохов.

Первая порция утренней мочи собирается после тщательного туалета наружных половых органов. Перед исследованием не применять местно антибактериальное мыло и антисептические средства.

Взятие материала на исследование возможно только врачом соответствующей квалификации.

Взятие материала на исследование возможно только врачом соответствующей квалификации.

Накануне исследования не применять местные лекарственные препараты и процедуры, исключить половой акт. При взятии соскоба из уретры не мочиться в течение 1,5-2 часов до процедуры. Если исследование назначается для контроля излеченности, то взятие материала на исследование методом ПЦР возможно не ранее, чем через 28 дней после окончания приема антибиотиков, на микробиологические исследования не ранее,чем через 14 дней.

Взятие материала на исследование возможно только врачом соответствующей квалификации.

Материал рекомендуется собирать до местного применения антибиотиков или антисептиков, до еды, (или не менее чем через 2 часа после еды), можно утром натощак (воду пить и чистить зубы можно).

Взятие материала на исследование возможно только врачом соответствующей квалификации.

Пациент собирает материал самостоятельно путем мастурбации в стерильный контейнер.

Смешанный соскоб урогенитального тракта не берется на фоне местной терапии (свечи, мази, спринцевания) и во время менструации у женщин. После кольпоскопии, интравагинального УЗИ или полового контакта должно пройти 48 часов. Если есть необходимость взятия материала из уретры, то перед взятием материала нужно не мочиться 1,5 - 2 часа. Если исследование назначается для контроля излеченности, то взятие материала на исследование возможно через 14-21 день после окончания приема антибиотиков.

Соскобы из урогенитального тракта не берутся в течение суток после местной терапии (свечи, мази, спринцевания), после полового контакта и во время менструации у женщин. После кольпоскопии, интравагинального УЗИ должно пройти 48 часов. В случае наличия признаков острого воспаления необходимость взятия мазка определяется лечащим врачом. Если необходимо получить соскоб из уретры, то перед взятием материала нужно не мочиться 1,5 - 2 часа. Если исследование назначается для контроля излеченности, то взятие материала на исследование методом ПЦР возможно не ранее, чем через 28 дней после окончания приема антибиотиков, на микробиологические исследования не ранее,чем через 14 дней.

Взятие материала на исследование возможно только врачом соответствующей квалификации.

Накануне взятия материала не применять местные антибиотики и антисептики в виде спреев, полоскания, капель, мазей. Материал берется натощак или не ранее, чем через 2 часа после еды. Чистить зубы (пастой без антибактериальных компонентов) можно.

Материал для исследования можно взять утром натощак или в течение дня, не ранее чем через 2 часа после еды. Чистить зубы и пить воду можно. Накануне взятия материала не применять местно антибиотики или антисептики в виде полосканий, капель или спреев. Повторное исследование для контроля излеченности целесообразно не ранее, чем через 4 недели.

Материал для исследования можно взять утром натощак или в течение дня, не ранее чем через 2 часа после еды. Чистить зубы и пить воду можно. Накануне взятия материала не применять местно антибиотики или антисептики в виде полосканий, капель или спреев. Повторное исследование для контроля излеченности целесообразно не ранее, чем через 4 недели.

Материал для исследования можно взять утром натощак или в течение дня, не ранее чем через 2 часа после еды. Чистить зубы и пить воду можно. Накануне взятия материала не применять местно антибиотики или антисептики в виде полосканий, капель или спреев. Повторное исследование для контроля излеченности целесообразно не ранее, чем через 4 недели.

Материал берется до начала терапии. Накануне не использовать антисептики, в течение двух часов исключить любые местные процедуры (промывания, капли). В случае невозможности взятия материала в медицинском офисе, Вы можете получить бесплатно расходный материал и обратиться к Вашему врачу- офтальмологу.

Биологические свойства возбудителей сифилиса и мягкого шанкра, их патогенность, экология, особен­ности инфекции и эпидемиология вызываемых забо­леваний.

Диагностические, профилактические и лечебные пре­параты.

Treponema pallidum — мазок из отделяемого твердого шанкра, окраска T.pallidum методом серебрения (или микрофотография в темном поле).

Haemophilus ducreyi — мазок из отделяемого мягкого шанкра, окраска по методу Грама и метиленовым си­ним.

Диагностические и лечебные препараты.

Указать материал для исследования.

Зарисовать демонстрируемые препараты возбудителей сифилиса и мягкого шанкра.

учесть результаты реакции Вассермана. Сделать за­ключение.

учесть результаты реакции микропреципитации.

оценить результаты реакции иммобилизации трепонем (РИТ). Сделать заключение.

4. Дать краткую характеристику диагностическим и лечебным препаратам.

• Микробиологическая диагностика сифилиса

МАТЕРИАЛ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ: отделяемое шанкра (I период заболевания); аспират из высыпных элементов, пунк-тат регионарных лимфатических узлов (II период); кровь (II, III, IV период); спинномозговая жидкость (IV период заболе­вания).

следуемой инактивированной сывороткой крови или плаз­мой. В лунку на пластине из плексигласа (или на обычное стекло) наносят 3 капли сыворотки и добавляют 1 каплю кардиолипинового антигена. Смесь тщательно перемешивают и учитывают результаты. Положительная реакция характеризу­ется образованием и выпадением хлопьев разной величины; при отрицательном результате наблюдается равномерная лег­кая опалесценция. Положительная реакция микропреципита­ции позволяет поставить предварительный диагноз и направить пациента на дальнейшее обследование.

Реакцию Вассермана ставят одновременно с двумя антигенами: 1) специфическим, содержащим антиген возбуди­теля — разрушенные ультразвуком трепонемы; 2) неспецифи­ческим — кардиолипиновым. Исследуемую сыворотку разводят в соотношении 1:5 и ставят РСК по общепринятой методике. При положительной реакции наблюдается задержка гемоли­за, при отрицательной — происходит гемолиз эритроцитов, интенсивность реакции оценивается соответственно от (++++) До (-).

Первый период сифилиса является серонегативным и харак­теризуется отрицательной реакцией Вассермана. У 50 % боль­ных реакция становится положительной не ранее чем через 2—3 нед после появления твердого шанкра. Во II и III периоде сифилиса частота положительных реакций достигает 75—90 %. После успешно проведенного курса лечения реакция Вассер­мана становится отрицательной.

Для диагностики поздних и латентных форм сифилиса мож­но ставить реакцию Вассермана, используя спинномозговую жидкость, с теми же антигенами, что и в реакции с сывороткой больного.

РИФ —реакция непрямой ИФ—является специфи­ческой при диагностике сифилиса. В качестве антигена ис­пользуют взвесь тканевых трепонем. Разработаны разные ме­тодики постановки реакции; обычно используют модифика­цию РИФ-200. Сыворотку больного инактивируют так же, как для реакции Вассермана, и разводят в соотношении 1:200. На предметные стекла наносят каплю антигена, высушивают и фиксируют 5 мин в ацетоне. Затем на препарат наносят сыво­ротку больного, через 30 мин промывают и высушивают. Сле­дующим этапом является обработка препарата флюоресцирую­щей сывороткой против иммуноглобулинов человека. Изучают препарат с помощью люминесцентного микроскопа, отмечая степень свечения трепонем.

Реакция иммобилизации трепонем также являет­ся специфической. Принцип реакции заключается в угнетении движения трепонем (иммобилизация) антителами сыворотки крови пациента в присутствии комплемента. Живую культуру

трепонем получают при культивировании в яичке кролика. Яичко зараженного животного измельчают в специальной сре­де, в которой трепонемы сохраняют подвижность. Ставят ре­акцию следующим образом: взвесь тканевых (подвижных) тре­понем смешивают в пробирке с исследуемой сывороткой и добавляют свежий комплемент. В одну контрольную пробирку вместо исследуемой сыворотки добавляют сыворотку здорового человека, в другую — вместо свежего комплемента добавляют инактивированный. После инкубации при 35 °С в анаэробных условиях (анаэростат) из всех пробирок готовят препарат "раз­давленная" капля и в темном поле определяют количество подвижных и неподвижных трепонем. Процент специфически иммобилизированных трепонем определяют по формуле:

где Tfc — число подвижных трепонем в контроле (с инактиви-рованным комплементом), Т₀ -— число подвижных трепонем в опыте (с активным комплементом). Результат реакции считают положительным, если процент иммобилизации выше 50, сла­боположительным — от 31 до 50, сомнительным — от 21 до 30 и отрицательным — ниже 20. Для обнаружения специфических антител к T.pallidum используют и другие серологические ре­акции, в частности РИГА.

Необходимо отметить, что в широкой медицинской прак­тике при обследовании больных и здоровых лиц обычно ис­пользуют реакцию Вассермана и микропреципитации; РИТ, РИФ и другие специфические реакции применяют для уточ­нения диагноза и проводят в специализированных лаборато­риях.

• Микробиологическая диагностика мягкого шанкра

МАТЕРИАЛ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ: отделяемое из язвы (мягкого шанкра).

Бактериологическое исследование. Проводят путем микро­скопии мазков, окрашенных по методу Грама и метиленовым синим. Наличие в мазках грамотрицательных бактерий, распо­лагающихся в виде длинных цепочек, позволяет подозревать наличие возбудителя — H.ducreyi.

Бактериологическое исследование. Проводят путем выделе­ния чистой культуры возбудителя. Материал засевают на кро­вяной агар или другие среды, содержащие дефибринированную кровь. На этих средах H.ducreyi через 48—72 ч образует мелкие круглые колонии, окруженные зоной гемолиза. Идентифика­цию выделенной культуры проводят по ферментации Сахаров

и по способности агглютинироваться сывороткой этого же больного.

Кожно-аллергическая проба. Ставят с антигеном из H.ducreyi для подтверждения диагноза.

• Диагностические, профилактические и лечебные пре­параты

Антигены для реакции Вассермана:

специфический антиген из тканевых трепонем, разрушенных ультразвуком;

неспецифический кардиолипиновый антиген — высокоочищенный экстракт бычьего сердца, имеющий постоянный химический состав липидов, смешанных в определенной про­ порции с лецитином и холестерином.

Антигены разводят согласно инструкции и используют в рабочих-дозах, указанных на этикетках. Кардиолипиновый ан­тиген используют также и в реакции микропреципитации.

Антибиотики: пенициллин, цефотаксим, тетрациклины, эритромицин.

plasma test reagin

rapid plasma reagin test

Информация об исследовании

Реакция преципитации (RPR) – современный тест, пришедший на смену менее точной реакции Вассермана (Сифилис RW)

Сифилис – это инфекционное заболевание, которое вызывает спиралевидная бактерия Treponema pallidum (бледная трепонема).

Rapid Plasma Reagins Test (сифилис RPR) – лабораторное исследование, выявляющее антифосфолипидные антитела IgM и IgG (реагины), которые иммунная система продуцирует при появлении в крови липидных антигенов (АГ). АГ выделяются в результате гибели T. pallidum и разрушения клеток, к которому, однако, могут приводить и некоторые другие заболевания несифилитической природы.

Бактерия сохраняется в сперме, влагалищном секрете, слизи, гное и т. п. Вне организма погибает при высыхании биологических жидкостей, 15-минутном нагревании до 55 о С, обработке 50–56%-ным раствором этилового спирта, но выживает при низких температурах и заморозке.

Возможные пути передачи инфекции:

половой – самый распространенный путь передачи, при котором бактерия проникает в организм через микроповреждения на половых органах;

трансплацентарный – инфицирование плода через плаценту; может приводить к мертворождению или врожденной патологии у ребенка;

гемотрансфузионный – при переливании инфицированной донорской крови или ее компонентов здоровому реципиенту;

контактно-бытовой – редкий путь передачи; описаны отдельные случаи заражения детей родителями, у которых наблюдались высыпания на коже или слизистых оболочках.

Без лечения заболевание приводит к мультисистемному поражению организма и может в 3 и более раз повышать риск заражения ВИЧ-инфекцией.

Инкубационный период длится от 2 недель до 2 месяцев и оканчивается первичным аффектом – появлением в месте внедрения бактерии безболезненной эрозии или язвы округлой формы (сифиломы, твердого шанкра). Следующий этап – первичный сифилис – может выражаться воспалением лимфатических узлов и половых органов.

Вторичный сифилис наступает при распространении трепонем по всему организму с кровотоком. Характерное проявление – язвы на половых органах, в ротовой полости, вокруг ануса и в прямой кишке, алопеция, нарушение пигментации отдельных участков кожи.

Третичный сифилис может развиться сразу после вторичного, но при бессимптомном течении заболевания часто проявляется спустя длительное время после заражения. Поражает сердце, мозг, кровеносные сосуды, нервную и костно-мышечную системы. В России растет частота выявления третичного нейросифилиса: с 2000 по 2010 год заболеваемость увеличилась в 7,2 раза.

Rapid Plasma Reagins Test (сифилис RPR) – лабораторное исследование, выявляющее антифосфолипидные антитела IgM и IgG (реагины), которые иммунная система продуцирует при появлении в крови липидных антигенов (АГ). АГ выделяются в результате гибели T. pallidum и разрушения клеток, к которому, однако, могут приводить и некоторые другие заболевания несифилитической природы.

Показания к назначению исследования

1. Скрининговое обследование (в соответствии с приказом Минздрава РФ).
2. Диагностика скрытого сифилиса при отсутствии выраженной клинической картины.
3. Обследование доноров крови (в комплексе с трепонемным тестом), беременных; перед трудоустройством в детские учреждения и на предприятия пищевой промышленности.
4. Госпитализация в стационар. 5. Снятие с учета после лечения.

Подготовка к исследованию

RPR-тест не требует специальной подготовки. Пациентам рекомендовано сдавать кровь натощак (минимум через 4 часа после еды).

С этим исследованием сдают

• 3.9.1. Клинический анализ крови с лейкоцитарной формулой и СОЭ (с микроскопией мазка крови при выявлении патологических изменений) (венозная кровь, срочный)
• 20.21. Гепатит В, Hbs Ag (кач.). Первичный анализ
• 20.22. Гепатит С, anti-HCV сумм. (кач.). Первичный анализ

Результаты исследования

На получение ложноположительных результатов влияют:

• аутоиммунные нарушения;
• лепра, ВИЧ-инфекция, атипичная пневмония, малярия, вирусные гепатиты, энтеровирусные инфекции, инфекционный мононуклеоз, туберкулез и др.;
• сахарный диабет и злокачественные опухоли;
• беременность;
• внутривенное употребление психоактивных веществ;
• носительство несифилитических трепонем;
• недавняя вакцинация;
• пожилой возраст.

1. Первичный серопозитивный период (1–3 месяца после заражения).
2. Вторичный серопозитивный период (свыше 3 месяцев после заражения).
3. Третичный серопозитивный период (от 3–4 лет после заражения).
4. Серорезистентность после курса терапии.
5. Первый год после выздоровления.
6. Вероятность антифосфолипидного синдрома (при использовании теста для его диагностики и при исключении сифилиса).

Исследование является неспецифичным – оно может показывать ложноположительные реакции. При обнаружении антифосфолипидных антител обязательно подтверждение результата при помощи серологического трепонемного анализа Сифилис сум. АТ (IgG и IgM) (кач).