Показывает ли биопсия инфекции

Что показывает анализ на цитологию

У цитологического анализа могут быть разные задачи — в зависимости от того, какие именно клетки взяты для микроскопии. В первую очередь сотрудники лаборатории оценивают, насколько исследуемый материал соответствует норме — об этом говорит форма и структура клеток, наличие или отсутствие в них определенных включений.

Поводом для беспокойства станет присутствие в образце лейкоцитов (клеток крови, выполняющих защитную функцию) или микроорганизмов, что укажет на протекание инфекционного процесса. Наиболее грозный признак патологии — выявление атипичных клеток с признаками злокачественного перерождения. В этом случае результаты цитологического анализа станут поводом для онкопоиска: диагностики, направленной на выявление рака, который, возможно, еще находится на ранней стадии и не проявляет себя изменениями в самочувствии больного.

Причин для назначения анализа на цитологию у врача может быть несколько. В большинстве случаев данный метод используется как скрининговый — это недорогой и быстрый способ выявить больных с подозрением на рак.

Как уже было сказано, объектом цитологического исследования являются клетки тела. Получить их можно несколькими путями:

• из биологических жидкостей (мокроты, мочи, сока предстательной железы, выделений из молочной железы, смывов с поверхности внутренних органов, полученных в ходе эндоскопических исследований);
• путем соскобов и отпечатков с поверхности органов (например, шейки матки при гинекологическом осмотре), язв, свищей, эрозий и ран;
• посредством пункций (суставов, опухолей, спинномозгового канала, перикарда, брюшной полости, матки у беременных — с забором амниотической жидкости);
• через отпечатки тканей (с поверхности свежего хирургического разреза и тех тканей, что в дальнейшем будут направлены на гистологическое исследование).

При некоторых видах исследования полученный образец должен быть окрашен (например, по методу Папаниколау) или зафиксирован на предметном стекле при помощи формалина или спирта. В других случаях — при проведении так называемой жидкостной цитологии — клетки наносятся на стекло не сразу, а после транспортировки в пробирке в лабораторию. Соблюдение всех правил, принятых при каждой разновидности цитологической диагностики, позволяет получить максимально точный результат.

Рассмотрим для примера один из наиболее популярных видов цитологического анализа, с которым сталкивается каждая женщина — так называемый ПАП-тест (он же — мазок Папаниколау). С его помощью врачи проводят скрининг на рак шейки матки и некоторые другие гинекологические заболевания. ПАП-тест показан раз в год всем пациенткам, ведущим половую жизнь. Это доступный и быстрый способ оперативного выявления онкологических процессов, которые, к сожалению, встречаются в современном обществе довольно часто.

Никакой особенной подготовки к исследованию (как и в случае с другими видами цитологических анализов) не требуется. В ходе гинекологического осмотра врач вводит во влагалище женщины специальную цервикальную щеточку — тонкую пластиковую палочку с щетинками особой формы, на которых при соприкосновении со стенками органа остаются клетки эпителия. После этого собранные образцы переносятся на предметное стекло. Чтобы уточнить локализацию возможного патологического процесса врач собирает эпителий с трех зон: из области мочеиспускательного канала, со стенок влагалища и непосредственно с шейка матки. После этого биологический материал фиксируется на стекле и отправляется в лабораторию, где клетки окрашиваются и изучаются под микроскопом.

В ходе анализа лаборант оценивает цитологическую картину по нескольким критериям и выносит свое заключение, относя образец к одному из пяти классов (где первый — норма, а пятый — высокая вероятность наличия злокачественного процесса).

Продолжительность цитологического исследования зависит, как правило, от загруженности лаборатории. В отличие от многих других видов современных тестов, цитология в своем классическом исполнении требует обязательного участия специалиста по микроскопии. Хотя в последнее время активно применяются и автоматизированные цитологические системы, позволяющие ускорить процесс анализа в несколько раз.

В среднем результаты исследования готовы через 1–3 дня, но в некоторых — срочных — случаях их могут выдать даже в течение часа.

По итогам сданного анализа пациент получает на руки бланк с результатами. По стандарту там, помимо ФИО человека и даты проведения исследования, должна содержаться следующая информация:

• тип препарата и вид цитологического анализа;
• качество препарата (оно может быть признано адекватным или неадекватным);
• описание образца — он может быть негативным (если исследуемые клетки в пределах нормы) или, в случае выявления патологии, будут оказаны особенности измененных клеток.

Если изменения не имеют отношения к онкологическим процессам, то в описании анализа будет указано, какие именно патологические клетки или инфекционные агенты (например, тела микробов) были обнаружены в образце.

Как бы то ни было, ваша задача — ознакомиться с результатами анализа и при любых отклонениях от нормы незамедлительно записаться на прием к лечащему врачу. А особенно — если лаборатория выявила признаки, характерные для злокачественных процессов.

Важное преимущество анализа на цитологию по сравнению со многими другими видами медицинских исследований — в том, что проведение теста не занимает много времени, а результаты исследования укажут дальнейшее направление диагностического поиска или утвердят врача во мнении, что лечение работает. От пациента зависит дисциплинированность при прохождении назначенной процедуры и — разумный выбор лаборатории, которая займется забором и анализом биоматериала.

Не­смот­ря на от­сут­ст­вие спе­ци­фи­чес­кой под­го­тов­ки к ана­ли­зу на ци­то­ло­гию, все же сто­ит пом­нить о том, что не­ко­то­рые ве­щест­ва мо­гут ис­ка­зить кар­ти­ну ис­сле­до­ва­ния. За день до ана­ли­за сле­ду­ет воз­дер­жать­ся от упо­треб­ле­ния спирт­ных на­пит­ков, по­ло­вых кон­так­тов и ис­поль­зо­ва­ния ин­тра­ва­ги­наль­ных пре­па­ра­тов (если речь идет о ПАП-тес­те).

Если при гинекологическом осмотре или аппаратной диагностике на влагалищной поверхности шейки матки или в толще ее тканей были выявлены различные патологические изменения, нужно использовать такие точные методики исследований, как биопсия.

В ходе такой манипуляции осуществляется забор малого объема тканей пациентки для последующего исследования в особых условиях. Окрашивая образец специальными пигментами и используя особые маркеры, специалисты будут исследовать его на предмет наличия доброкачественных и злокачественных новообразований, а также в целях обнаружения предраковых состояний.

Если в ходе биопсии выясняется, что изменения в шейке матки имеют онкологический характер, врачи и лаборанты устанавливают наиболее точный диагноз по образцу тканей. Благодаря этому можно выбрать наиболее эффективную методику лечения и подобрать лучшие препараты.

Подготовка и предварительные обследования

Показания к биопсии шейки матки выявляются при кольпоскопии. Это гинекологический осмотр, в ходе которого изучается состояние входа во влагалище, а также внутренней его части. В частности, зева шейки матки, на котором зачастую видны следы органических изменений при различных патологиях.

Кроме того, мы назначаем пациенткам PAP-тест. В ходе процедуры врач, предварительно очистив зев шейки матки, при помощи особого инструмента берет соскоб с него. Манипуляция абсолютно безболезненна. Затем материал направляется в лабораторию для цитологических исследований. При помощи микроскопии клеток и воздействия на них особыми веществами специалисты обнаруживают наличие единиц ткани в предраковом состоянии.

В большинстве случаев результаты такого анализа положительные, и проводить дополнительные исследования не нужно. Однако если у пациентки обнаруживаются признаки изменений онкологического характера, нужно переходить к подготовке к биопсии шейки матки.

К факторам, которые могут говорить о риске наличия доброкачественных и злокачественных новообразований, относятся:

• наличие йод-негативных участков при кольпоскопии;
• окрашивание отдельных участков эпителия в белый оттенок при контакте с уксусной кислотой;
• цитологические признаки, выявленные в результате PAP-теста.

В таком случае мы рекомендуем пройти биопсию шейки матки в нашей клинике в Краснодаре. Это быстрая и простая процедура, которая позволяет выявить заболевания онкологического профиля на ранних этапах развития, когда от них можно избавиться легко и быстро.

Биопсия шейки матки может проводиться при беременности, если гинеколог подозревает онкологию. В иных ситуациях процедуру переносят на послеродовой период.

Подготовка к манипуляции включает медицинское обследование, направленное на выявление сопутствующих заболеваний и инфекций, а также воспалительных процессов. Пациентке нужно сдать:

• общий и биохимический анализ крови;
• коагулограмму;
• анализы на ИППП (ВИЧ, сифилис, гепатит B и C);
• мазок из влагалища;
• общий анализ мочи.

Специалисты нашего центра исследуют результаты анализов. При благополучном состоянии пациентки и отсутствии противопоказаний (например, воспалительных процессов), врачи переходят к юридической стороне подготовки к биопсии шейки матки.

Клиенты нашей клиники подписывают согласие на проведение процедуры, а также на соблюдение медицинских предписаний – половой покой в течение суток, а также отмена на этот период ввода любых медикаментов во влагалище.

Особенности проведения биопсии

В медицине есть целый ряд типов и методов проведения биопсии шейки матки. Специалисты OXY-center используют наиболее безопасные и информативные из них.
В каждом случае мы учитываем индивидуальные особенности пациентки, показатели ее анализов и результатов осмотра, чтобы прибегнуть к определенной методике в пользу достоверности полученных данных или безболезненности для организма.

Другие способы проведения манипуляции менее инвазивны и способствуют сохранению целостности тканей шейки матки:

1. Конизация. Эта методика подразумевает забор образца тканей конической формы. При этом остается точечная ранка на поверхности зева шейки матки. Однако благодаря особой форме образца специалисты могут оценить состояние как поверхностных структур, так и подлежащих тканей. Взятие материала проводится под местным, региональным или общим обезболиванием, в зависимости от чувствительности пациентки.
2. Выскабливание. При проведении такой биопсии шейки матки при помощи специального инструмента – кюретки, снимается часть слизистой оболочки с зева. В материале содержится большое количество эпителиальных клеток, что позволяет оценить их состояние с довольно большой выборкой. Зачастую проводится при спинальной анестезии.
3. Петельная электрохирургическая биопсия. Такая методика является самой безболезненной и малоинвазивной. Забор материала осуществляется тонкой металлической нитью, по которой проходит слабый электрический ток. Однако из-за температурных воздействий на образец этот способ малоинформативен. Поэтому к нему прибегают только при особых показаниях. Для взятия материала специалисты обезболивают шейку матки спинальной или локальной анестезией.

Все виды процедур занимают не более часа. Продолжительность зависит от выбранной методики и индивидуальных особенностей строения тела пациентки.

Болезненность биопсии и ожидание результатов

Поскольку проведение забора материала связано с повреждением тканей пациентки, хоть и в малом объеме, специалисты используют различные обезболивающие препараты – анестетики. Шейка матки является частью тела женщины, в которой переплетается множество нервных окончаний, но болевых рецепторов среди них нет.
Поэтому продолжительность анестезии при биопсии и подбор препаратов для снижения ее болезненности зависят от индивидуальных особенностей пациентки.

Кроме того, выбор анестетиков и методик обезболивания зависит от масштабов вмешательства, то есть конкретного метода забора материала. Конечно, наиболее эффективной считается общая анестезия. Но это серьезное медикаментозное воздействие, которое может негативно сказываться на состоянии пациентки.

Поэтому зачастую специалисты используют локальную анестезию, то есть введение лидокаина и других средств. Также в отдельных случаях (например, при хирургическом заборе материала), применяется спинальная анестезия. Это укол в область поясницы, с которым вводится особое вещество, блокирующее болевую чувствительность в нижней половине тела.

При проведении биопсии шейки матки пациентке необходимо максимально расслабить все мышцы, а также не испытывать эмоциональных переживаний. Это позволит избежать осложнений и болей, напоминающих схватки.

Стоимость процедуры

Цена биопсии шейки матки зависит от выбранного метода взятия биоматериала. Уточнить ее вы можете у администратора нашей клиники.

• эрозия шейки матки
• отрицательный результат мазка на цитологию
• обнаружение нетипичных отклонений, которые были диагностированы во время проведения кольпоскопии (ацетобелый эпителий, йод-негативные участки)
• наличие полипов, кондилом, опухолевидных образований
• лейкопатия

Проводится биопсия на 7-13 день менструального цикла.

• обнаружение воспалительных очагов во время приема гинеколога, нуждающихся в дальнейшем исследовании и лечении
• начавшийся менструальный цикл
• о беременности врачу необходимо сообщить заранее.

Перед проведением процедуры необходимо сдать ряд обследований и анализов для того, чтобы сократить риск появления и осложнения инфекционных заболеваний.

• общий анализ крови
• коагулограмма (анализ свертываемости крови)
• мазок на флору (возможность выявить заболевания половой системы)
• мазок на цитологию
• провести кольпоскопию
• анализы на скрытые инфекции (которые не имеют внешних проявлений)
• анализы на ВИЧ, гепатит, сифилис

Кроме этого, перед самой процедурой рекомендуется отказаться от лекарственных препаратов, которые вводятся в полость влагалища, от использования тампонов, спринцевания, сексуальных контактов за 2 дня до проведения процедуры.

• воспалительные заболевания шейки матки
• беременность(1 и 3 триместр)

В этих случаях биопсию придется отложить.

Случаи, когда в вовремя беременность требуется проведение биопсии шейки матки встречаются, когда ваш лечащий врач замечает подозрительные изменения в области шейки матки и принимает решение, что ждать до родов невозможно биопсию проводят во время беременности.
На сроке до 12 недель проведение биопсии грозит риском повышения вероятности выкидыша, а на поздних сроках повышает вероятность преждевременных родов, поэтому биопсию шейки матки при беременности проводят во втором триместре, когда риск ниже.
Если обнаруженные изменения в шейки матке не требуют оперативной диагностики, то манипуляцию можно отложить на послеродовой период, не ранее 6 недель после родов.

Биопсия молочной железы – это метод исследования, в ходе которого берутся клетки из молочной железы для исследования. Биопсия молочной железы необходима для того, чтобы определить в груди появилось раковое образование или нет. Данный анализ даёт возможность найти опасные клетки.

По результатам анализов биопсии молочной железы можно выявить:

• опухоль доброкачественная либо злокачественная,
• степень распространения заболевания,
• стадию развития,
• структуру образования.

Проведение биопсии на ранних стадиях заболевания позволяет обнаружить протекающие в молочной железе воспалительные либо гормональные процессы. По результатам анализов врач подбирает правильную схему дальнейшего лечения. Данная манипуляция проводится на специальном оборудовании с использованием различных медицинских игл.

Показания к проведению биопсии молочной железы

Биопсию молочной железы назначает врач маммолог, осмотрев пациента при определённых случаях. Основными показаниями являются:

• прощупывание образований в груди,
• непонятные изменения в области соска,
• наличие язв на груди,
• обнаружение пятен на снимке в области груди,
• обнаружение на ультразвуковой диагностике подозрительных участков на молочной железе.

Источники указанных проблем устанавливаются по результатам биопсии, для того чтобы исключить либо подтвердить развитие опухоли в молочной железе.

Противопоказания

Выделяют ряд противопоказания, по которым проводить подобную манипуляцию запрещено. К ним относятся:

• беременность,
• аллергические реакции на препараты, используемые для анестезии,
• наличие в организме пациентки аппарата, координирующего работу сердца,
• состояние лихорадки,
• период лактации,
• критические дни,
• размеры образования до 5 мм.

При приёме лекарств для разжижения кроки, существует риск возникновения кровотечений. Приём любых лекарственных средств следует прекратить за 24 часа до проведения биопсии. В противном случае проводить эту процедуру запрещено. Также к противопоказаниям относятся:

• острые боли в позвоночнике, шее и плечах,
• плохая свёртываемость крови,
• опухоль подтверждена и является доброкачественной,
• инфекционные заболевания.

Подготовка к проведению биопсии молочной железы

Для успешного проведения биопсии молочной железы следует придерживаться строгих указаний врача:

• исключить приём алкогольных напитков, а также лекарственных препаратов, которые влияют на процессы свёртываемости крови,
• беременным женщинам не следует делать биопсию,
• при наличии аллергических реакций на медицинские препараты, желательно сообщить доктору.

Приходить на биопсию следует с близким человеком, который поможет добраться до дома, в случае плохого самочувствия.

Также накануне выполнения биопсии молочной железы, женщина должна пройти дополнительные обследования, которые позволят определить объёмы опухоли. Сюда относятся ультразвуковое исследование, маммография, рентген.

Как проводится биопсия молочной железы?

Биопсия молочной железы проводится в медицинском учреждении врачом-маммологом. Госпитализация для осуществления данной манипуляции не требуется.

Суть процедуры состоит в следующем: женщина находится в лежачем положении и не должна шевелиться. Делается обезболивание, после чего вводится игла и происходит забор ткани для исследования. Процедура не требует наложения швов. Длительность манипуляции составляет примерно 1 час. После биопсии следует исключить любые физические нагрузки.

Виды биопсии

Существуют следующие виды биопсии молочной железы, которые применяются на практике.

Тонкоигольная биопсия молочной железы проводится в тех случаях, когда опухоль груди легко прощупывается. Процедура делается сидячем положении. Врач вводит в железу тонкую иглу, которой затем извлекает ткань для анализа. В ходе проведения подобной манипуляции пациентка может ощущать чувство боли.

Во время стереотаксической биопсии молочной железы берётся несколько кусочков ткани из разных мест опухоли. Процедура проводится лёжа в операционной. На специальном аппарате с разных углов делаются снимки, и в результате получается объёмное изображение. На основе этого изображения выбирается место, куда будет введена игла.

Предполагает взятие небольшого участка опухоли. Этот материал затем исследуется и делается заключение о злокачественности или доброкачественности опухоли. Процедура проводится под наркозом, поэтому боли нет.

Проводится хирургическая операция, в ходе которой берётся небольшой участок либо вся опухоль для исследования. Всё осуществляется под наркозом.

Решение о том, какую биопсию делать, решает только врач на основании результатов анализов и других исследовании.

Результаты биопсии

Взятый биологический материал исследуется в лаборатории в течение нескольких дней. По результатам биопсии грудной железы врач делает заключение, в котором указываются размеры образования, место размещения, структура поражённых тканей, отсутствие либо наличие онкологии. Если в молочной железе выявлены раковые клетки, то указывается тип опухоли.

По итогам исследования результатов биопсии существует несколько вариантов расшифровки этих результатов, что помогает врачу правильно назначить лечение. Результаты анализов могут быть следующие:

• нормальные – раковые клетки в тканях молочной железы отсутствуют, по размерам и форме они находятся в границах нормы,
• неполные – отсутствует достаточное количество биологического материала, чтобы провести более детальное исследование, требуются дополнительные анализы,
• нераковые – выявлены небольшие изменения в тканях, тем не менее, развитие опухоли не подтверждается. Возможно, протекает небольшой воспалительный процесс в молочной железе, обнаружены кисты либо развивается мастопатия.

При обнаружении опухоли в грудной железе варианты результатов анализов могут быть следующие:

• доброкачественные – наличие опухоли подтверждается, однако раковые клетки отсутствуют, и разрастания тканей не наблюдается,
• злокачественные – подтверждено раковое образование, установлена стадия развития заболевания, место размещения опухоли, её размеры и форма.

Осложнения после биопсии

Подобная манипуляция, которая выполнялась опытными врачами, как правило, не приводит к возникновению серьёзных последствий. Вполне естественными проявлениями после биопсии грудной железы могут быть головокружения, тошнота, но они быстро исчезают. Кроме того, у женщины могут наблюдаться:

• небольшие отёки, неприятные ощущения в месте прокола,
• кровоточивость раны. Для остановки кровотечения накладывается плотная марлевая повязка.

Более серьёзные осложнения встречаются крайне редко. После проведения биопсии может возникнуть заражение раны. При этом в молочной железе начинает развиваться воспалительный процесс, повышается температура, могут быть выделения из места прокола.

Где сделать биопсию молочной железы?

Биопсию молочной железы можно сделать в клинической больнице им М.Е.Жадкевича. Для этого необходимо позвонить по телефону +7 (495) 443-66-71 либо связаться с нами по e-mail pmu@gb71.ru

За звучной аббревиатурой ПЦР скрывается сложная и не слишком понятная для рядового пациента расшифровка — полимеразная цепная реакция. Что же такое ПЦР-диагностика, на чем она основана и почему в последнее время ее стали считать самой перспективной технологией в постановке диагнозов, касающихся инфекционных и вирусных заболеваний? Мы расскажем о преимуществах ПЦР-метода, его особенностях и этапах проведения.

ПЦР-диагностика: что это такое?

Диагностика методом ПЦР существует чуть более 30 лет. Значительно эволюционировав за это время, она зарекомендовала себя как один из наиболее точных способов выявления инфекций. В основе метода лежит принцип многократного увеличения микроскопических концентраций фрагментов ДНК возбудителя в биологической пробе пациента в искусственных условиях. В результате сложного процесса, называемого амплификацией, под воздействием ферментов и изменения температуры (от 50 до 95°С) из одной молекулы ДНК образуется две. При этом происходит копирование участка ДНК, который присутствует только у того вида патогенного микроорганизма, который интересует врача.

Цикл образования новой молекулы ДНК занимает всего около 3 минут, а тридцати-сорока циклов вполне достаточно, чтобы получить количество молекул, необходимое для достоверного визуального определения методом электрофореза.

Кроме амплификации, то есть простого увеличения числа копий молекулы ДНК, с помощью ПЦР можно производить и другие манипуляции с генетическим материалом, например, сращивать фрагменты ДНК, вводить мутации и т.д. Это позволяет использовать ПЦР не только для диагностики инфекционных и генетических заболеваний, но и для установления отцовства, клонирования и выделения новых генов.

ПЦР-диагностика проводится в специальных лабораториях с помощью амплификационного оборудования. На сегодня существует множество различных модификаций ПЦР, включая технологии с использованием не только ДНК, но и фрагментов рибонуклеиновой кислоты (РНК). В некоторых из них амплификация осуществляется при постоянной температуре, и для их проведения специальное оборудование не требуется.

Еще одна популярная модификация ПЦР — мультиплексная амплификация (МПА), которая позволяет проводить исследование сразу нескольких изучаемых фрагментов в одной пробирке. Это не только ускоряет и удешевляет проведение анализа, но и позволяет рассматривать одни фрагменты, получившиеся в результате реакции, в качестве положительных маркеров для других, что еще больше увеличивает точность исследования методом ПЦР.

В клинической медицине ПЦР-диагностика является одним из наиболее востребованных методов анализа в самых разных сферах:

• Прямое определение возбудителя инфекции. Некоторые традиционные методы, такие как иммуноферментный анализ (ИФА), выделяют только белки-маркеры, которые являются продуктом жизнедеятельности возбудителей инфекции, а потому только косвенно указывают на присутствие микроорганизмов. Наличие специфического участка в ДНК, выявленное с помощью ПЦР, безошибочно или почти безошибочно указывает на присутствие конкретной инфекции.
• Высокая специфичность метода . Она обусловлена тем, что в исследуемом материале выявляется фрагмент ДНК, характерный только для конкретного возбудителя инфекции. Специфичность исключает возможность ложных результатов анализа, тогда как в иммунологических методах исследований ошибки вполне вероятны из-за перекрестной реакции антигенов.
• Высокая чувствительность . При помощи ПЦР-диагностики можно выявить присутствие в организме даже единичных клеток вирусов или бактерий в тех случаях, когда обычными методами сделать это практически невозможно. ПРЦ определяет наличие всего 10–100 клеток в пробе, тогда как иммунологическими и микроскопическими тестами можно определить наличие инфекции при количестве клеток не менее 103–105.
• Универсальность . Сходство состава всех ДНК или РНК дает возможность применять универсальные методы лабораторных исследований, диагностируя сразу несколько возбудителей из одной биологической пробы.
• Скорость получения результатов . Поскольку для проведения ПЦР-диагностики не нужен посев и выделение культуры возбудителя, то и большого количества времени на нее не требуется. Весь цикл — от забора биоматериала до получения результатов — занимает 4–5 часов.
• Диагностика латентных инфекций . ПЦР-методом диагностируются трудно культивируемые и некультивируемые формы микроорганизмов, встречающиеся в тех случаях, когда заболевание протекает в скрытой форме.

Методом ПЦР можно выявлять возбудителей инфекции не только в организме человека, но и в почве, воде, продуктах питания.

Тем не менее не стоит думать, что ПЦР-диагностика не имеет недостатков. У нее есть свои ограничения, но их количество настолько незначительно, что не может отрицательно повлиять на популярность и эффективность метода:

• Вероятность амплификации ДНК не только живого, но и погибшего микроорганизма . При проведении ПЦР-диагностики для контроля эффективности лечения необходимо соблюдать определенные требования. В частности, проводить ПЦР нужно после определенного промежутка времени (1–2 месяца), за который происходит полное исчезновение возбудителя инфекции в организме.
• Возможность возникновения перекрестной реакции . Подбор фрагментов ДНК (праймеров) осуществляется на основе знаний о генетическом строении конкретного микроорганизма. Но теоретически такой же фрагмент может присутствовать и у других микроорганизмов, геном которых на сегодняшний день еще не расшифрован. Их присутствие в пробе может привести к ложноположительному результату анализа.
• Изменчивость микроорганизмов . Эта способность возбудителей к мутации иногда приводит к тому, что некоторые их штаммы становятся неуловимыми в процессе ПЦР-анализа.

Чтобы уменьшить риски, разработаны стандарты объемов испытаний тест-систем ПЦР-диагностики, включающие проверку на перекрестные реакции и тестирование всех известных штаммов конкретного возбудителя.

ПЦР-диагностика проводится в специальной лаборатории в несколько этапов.

1. Забор биоматериала . Процедура, предшествующая непосредственному анализу, которая осуществляется в процедурном кабинете соответствующего профиля. Забор делается с помощью стерильного оборудования только в стерильные пробирки. Материалом для исследования могут быть:
   • Эпителиальные соскобы со слизистых оболочек: из уретры, из цервикального канала, со слизистой дыхательных путей и зева, из конъюнктивы. Забор проводится с помощью специального ершика, при этом недопустимо попадание в материал следов крови.
   • Моча . Собираются первые 50 г утренней мочи в стерильную емкость. Материал используется для диагностики мочеполовых инфекций.
   • Мокрота . Используется для ПЦР-диагностики туберкулеза и респираторных форм микоплазмоза и хламидиоза. Мокроту собирают в стерильный флакон в количестве 15–20 мг.
   • Кровь, сыворотка, плазма . С их помощью диагностируются гепатиты, герпес, ВИЧ-инфекция. Для анализа используется венозная кровь (1–1,5 мл), собранная у пациента натощак в стерильную пробирку. Хранить биоматериал можно не более суток при температуре 4°С. Замораживать кровь категорически запрещается.
   • Биологические жидкости . К ним относятся слюна, сок простаты, околоплодная, плевральная, спинномозговая, суставная жидкости. Собираются при помощи пункции с использованием стерильного инструментария в количестве 0,1–1,5 мл в стерильные пробирки.
   • Биоптаты , т.е. материалы, полученные путем биопсии. Обычно на анализ отправляют биоптаты двенадцатиперстной кишки или желудка, чтобы выявить хеликобактерную инфекцию. Объем материала 2–3 мм 3 .
2. Хранение и транспортировка биоматериала . Хранить образцы можно при комнатной температуре не более 2 часов. Если необходимо длительное хранение, то пробы помещают в холодильник с температурой 2–8°С на срок не более одних суток. Допустимо хранение некоторых биоматериалов в течение двух недель в замороженном виде при температуре -20°С. Оттаивание и повторное замораживание проб запрещено. Транспортировка, если она необходима, должна проводиться в специальных термоконтейнерах или термосах с соблюдением всех правил хранения и перевозки биоматериалов.
3. Выделение ДНК из образца . Способ выделения зависит от вида определяемого микроорганизма и от вида биологического образца. Если, например, анализируется соскоб эпителиальных клеток, используется так называемый метод твердофазной сорбции, заключающийся в добавлении в образец специального вещества, концентрации ДНК на сорбенте и его многократной отмывке буферным раствором.
4. Проведение ПЦР . Некоторое количество образца из биологической пробы переносится в специальную микроцентрифужную пробирку. Туда же добавляется амплификационная смесь, имеющая сложный состав, в объеме 25 мл. Пробирки устанавливают в программируемый термостат, и автоматическом режиме проводится амплификация. Время ее проведения зависит от заданной программы и составляет 2–3 часа. Одновременно с опытными пробами проводятся контрольные — положительные , включающие в себя контрольный препарат ДНК исследуемого возбудителя, и отрицательные , не содержащие исследуемую ДНК. Количество циклов амплификации варьирует от 30 до 40, более 40 циклов проводить не рекомендуется, так как это способствует увеличению количества неспецифических продуктов в пробе.
5. Регистрация результатов . Фрагмент ДНК, характерный для возбудителя инфекции, выделяют методом электрофореза в присутствии специального вещества — бромистого этидия. Его соединение с фрагментами ДНК дает светящиеся полосы при облучении ультрафиолетовым излучением. Образец помещают в камеру для электрофореза и в течение 35–40 минут проводят разделение продуктов амплификации. После этого образец просматривают в ультрафиолетовом свете — наличие оранжевой светящейся полосы свидетельствует о положительном результате.
6. Интерпретация результатов исследования . Результат ПЦР-диагностики может быть либо положительным, либо отрицательным. Положительный результат говорит о том, что в организме человека обнаружены следы инфекции, причем именно в данный момент времени. Количественный результат ПЦР-анализа оценить может только врач, они индивидуальны для разных типов инфекций. На основании количественного результата можно сделать вывод о степени активности заболевания и определить характер лечения.

Цена ПЦР-диагностики зависит от того, на какую конкретно инфекцию пациент планирует проверяться, от вида анализируемого материала, методики тестирования — качественной или количественной. Цена за определение одной инфекции составляет от 200 до 800 рублей в разных клиниках. Кроме того, к стоимости анализа добавится и плата за забор биоматериала — около 400 рублей. Средняя стоимость ПЦР-диагностики разных видов приведена в таблице 1.

Таблица 1 . Примерные цены на анализы ПЦР в Москве

Название анализа	Цена, руб.
Определение ДНК хламидия	750
Определение ДНК микоплазмы хоминис	540
Определение микоплазмы гениталиум	350
Определение ДНК уреаплазмы	350
Гонококк, определение ДНК	350
Определение ДНК герпеса (разные типы)	350–600
Определение ДНК кандиды	570
Вирус краснухи, определение РНК	800
Дифференцированное определение ДНК ВПЧ (разные типы)	350–1900 [1]