Антитело зависимое усиление инфекции

Сразу в нескольких мировых лабораториях идет работа по созданию вакцины от COVID-19. Однако специалисты предупреждают: препарат должен быть тщательно протестирован перед применением, так как возможен синдром антитело-зависимого усиления инфекции. В этом случае прививка вызовет болезнь, а не предупредит ее возникновение. По мнению специалистов, проблему решит рекомбинантный, полученный с помощью генной инженерии, вариант препарата.

Время первых вакцин

Вопрос лечения и профилактики COVID-19 выходит на первый план для всей мировой фарминдустрии. В данное время в ведущих лабораториях разрабатывают различные варианты субстанций. Обсуждают схемы создания препаратов, в том числе, предложенные российскими специалистами.

Разработка вакцины — процесс трудоемкий и длительный, рассказала заведующая кафедрой инфекционных болезней с курсами эпидемиологии и фтизиатрии Медицинского института РУДН Галина Кожевникова.

— Поэтому в ближайшие месяцы, а может, и год одобренной эффективной и безопасной вакцины мы можем не увидеть. Помимо этого, не стоит забывать о изменчивости вируса, которая может встать на пути создания профилактических препаратов, — заявила эпидемиолог.

Более того, есть вероятность, что сама вакцина станет дополнительной биологической угрозой, сообщил директор Института медицинской паразитологии, тропических и трансмиссивных заболеваний им. Е.И. Марциновского Сеченовского университета Александр Лукашев.

— Сложность ее разработки связана с тем, что для коронавирусов возможен синдром антитело-зависимого усиления инфекции, то есть неправильно разработанный препарат может усугублять тяжесть болезни, — предупредил ученый.

— Существуют научные статьи, в которых есть информация по поводу антитело-зависимого усиления инфекции в отношении SARS (вирус атипичной пневмонии, 2002 год). Поэтому опасения оправданны. Я считаю, более оптимальной и безопасной будет вакцина рекомбинантная, разработанная с помощью генной инженерии, — пояснила эксперт.

Антитело против тела

Суть феномена антитело-зависимого усиления инфекции (antibody-dependent enhancement, ADE) состоит в усилении процесса заражения в присутствии антител, специфических к возбудителю болезни. По идее, антитела должны купировать распространение уже известного организму патогена, но наблюдается обратный эффект.

Дело в том, что вирусы, особенно содержащие не ДНК, а РНК (к ним как раз принадлежит COVID-19), при самокопировании допускают большое количество ошибок. Это дает им возможность быстро мутировать, изменяясь при передаче от человека к человеку. Поэтому организм, который уже выработал антитела к инфицировавшему его коронавирусу и, возможно, перенесший бессимптомное заболевание, может не узнать вариант COVID-19, доставленный с помощью вакцины. А напротив, вызвать неразбериху в иммунной системе, которая закончится усилением инфекционного процесса еще до того, как концентрация антител достигнет порога, необходимого для нейтрализации вируса.

— Наличие антител к первому типу вируса при ADE не позволяет организму справиться со вторым типом, а наоборот, облегчает его проникновение в уязвимые клетки, — пояснил заведующий инфекционным отделением университетской клиники H-Clinic РУДН Данила Коннов. — Если такой феномен будет доказано характерен для нового коронавируса, то введение вакцины может спровоцировать ухудшение прогноза для заразившихся первоначальным штаммом. Эта теория возможна, но требует изучения и подтверждения.

Однако руководитель лаборатории геномной инженерии МФТИ Павел Волчков не видит большой проблемы даже при наличии данного синдрома, так как правильно сделанная вакцина должна вызывать не только гуморальный ответ (производство антител), но и запускать формирование пула клеток лимфоцитов, позволяющих избежать возможных побочных эффектов.

По словам Павла Волчкова идеальная вакцина от COVID-19 должна быть рекомбинантной и доставляться в организм респираторным способом. То есть так же, как это делает сам коронавирус.

Клетки эпителия легких разрушаются значительно быстрее, чем при инфицированиии любым из современных штаммов, сильнее и воспалительная составляющая - иммунная система усугубляет повреждение легочной ткани и вызывает кровотечения. Ткань легких кровоточит, легкие заполняются кровью и возникает дыхательная недостаточность, которая разрешается цианозом и поражением сердечно-сосудистой системы, обычно становившееся ближайшей причиной смертельных исходов.

Эпидемическая картина также совпадает с пандемией 1918-1920 гг. Первая волна гриппа – трансмиссионная, обеспечивающая распространение вируса в популяции и не влекущая значительного увеличения смертности, что соответствует сезону 2016-2017 г. Волна второго сезона повлекла чрезвычайно высокую смертность. Третья, затухающая длительная волна при высокой смертности изменила структуру, увеличилась доля смертности в исходах осложнений гриппа.

Но поражение сердечно-сосудистой системы не соответствует степени поражения дыхательного аппарата воспалительными процессами и геморрагическими фокусами и не имеет изоморфно достоверной респираторной зависимости. Ограничением респираторной емкости легких, затруднением доступа кислорода и накоплением СО2 в крови тяжелое поражение сердечно-сосудистой системы нельзя объяснить.

Готовы ли мы к смертельной пандемии, неважно, имеющей естественное происхождение, либо продукции производителей биологического оружия (того же Armed Forces Institute of Pathology)? Нет. Не готовы ни общество, ни сгнившая и отданная на прокорм патентованному жулью система здравоохранения, ни муниципальные администрации, ни войска РХБЗ, ни МЧС, военная биология успешно разгромлена, но зато в РФ неуклонно проводятся мероприятия, направленные на усугубление подобной пандемии. Например, такое антинаучное и опасное для здоровья мероприятие как массовая вакцинация против вирусных инфекций.

Современному человеку, не разорвавшему принципиально связь с реальностью и не погрузившемуся в иррациональный фантазийный мир симуляций и тотальной лжи, необходимо знать и помнить следующее:
ВАКЦИНА ПРОТИВ ГРИППА НЕВОЗМОЖНА В ПРИНЦИПЕ по нескольким причинам.

Но это еще далеко не все. Существуют неумолимые биологические законы, делающие создание эффективной противогриппозной вакцины принципиально невозможным.

Игнорирование антигенного импринтинга и антитело-зависимого усиления инфекции при разработке новых вакцин, их доклинических и клинических исследованиях и проведении массовых вакцинаций населения представляет собой умышленную, разнузданную, ориентированную на извлечение прибыли профанацию эпидемиологии и иммунологии. И как всегда погоня за деньгами основана на подлогах и фальсификации и порождает фальсификации и подлоги.

Ответы иммунной системы на сегодняшний вирус гриппа или на гриппозные вакцины-это набор ответов на вирусы или вакцины прошлого. Иммунная система человека, столкнувшись с гриппом в первый раз, запоминает ТОЛЬКО ЭТОТ ВАРИАНТ вируса. Впоследствии, столкнувшись с другим вариантом, она реагирует не на него, а на тот вирус, который был для нее первым.

Введение вакцины вызовет ложную иммунную реакцию на тот антигенный вариант гриппа, которого давно нет, и несостоятельную в отношении актуального сегодня. Ресурс иммунной системы реципиента будет значительно израсходован, реактивность снижена, актуальная же и нужная иммунная реакция на присутствующий в организме вирус-ослаблена, что повлечет более тяжелое течение болезни.

Феномен ADE, развивающийся на фоне сенсибилизации, вызванной вакцинацией против вируса А (Orthomyxoviridae) доказан в условиях in vitro и in vivo. При развитии ADE в ходе персистирующего инфекционного процесса его роль будет заключаться в усилении тяжести инфекционного процесса, селекции наиболее опасных штаммов возбудителя инфекционной болезни с последующим вовлечением их в новые эпидемические цепочки.

Прививка может стать причиной всплеска и активности другого вирусного заболевания, которое по своей симптоматике имеет много общего и схожего с ОРВИ. К такому списку заболеваний можно отнести следующие инфекции.
1. Аденовирусная инфекция.
2. Парагрипп.
3. Риновирусная инфекция.
4. Респираторно-синцитиальная инфекция.

Бесполезность вакцинации от гриппа доказана безупречными достоверными научными исследованиями, которые никто не опровергал (да это и невозможно)– их просто нагло игнорируют. В ходе этих исследований доказано, что вакцинация утяжеляет течение гриппа и реконвалесценцию, что напряжение иммунной системы при отсутствии объекта воздействия ослабляет иммунный ответ на заболевание, истощая механизмы иммунной защиты. Доказано, что иммунизация способствует распространению гриппа, активируя генетические изменения возбудителя. Достоверным будет предположение, что ложная активация иммунной системы способна вызывать аутоиммунные реакции и быть таким образом одним из компонентов таких заболеваний как туберкулез, диабет, эндотелиальная дисфункция и эндокардиты, ревматизм, кардиомиопатия, онкопатологии и пр.

И в заключение несколько практических советов
Избежать заражения гриппом в условиях города нереально, идеальные условия для трансмиссии возбудителя., хотя попытаться стоит: ограничить контакты, промывать после выхода из дома носовые полости с мылом и т.д. Существенно важнее подготовить организм к гриппу, чтобы минимизировать повреждения и избежать нежелательных последствий и осложнений. Полноценное питание, включающее белковую пищу, ограничение всех суррогатов еды, всего в о что можно впихнуть соевые композиции на тему мяса, животные жиры без ограничений, как сало так и тугоплавкие говяжий и бараний (курдючное сало рекомендую иметь в домашней аптечке и принимать при заболеваниях растопленным в бульоне). Обязательное внимание витаминам, особенно аскорбату– витамину С, гиповитаминоз по нему практически тотален даже летом, а аскорбат лимитирует возможности организма восстанавливать клетки легочного эпителия, поврежденные вирусом. Заранее ликвидировать дефицит магния, который можете принять по умолчанию, ввиду его тотальности в России, по данным НИИ питания РАМН у 80% населения, но лично я не то что избытка- достаточного количества ни разу не наблюдал. Вообще прием 500 мг. магния в сутки- не лечение, даже не профилактика. Это гигиеническая норма, которая должна быть обязательной. В период болезни прием магния цитрата или иных хелатных форм должен быть вдвое больше - 1 гр./сут.

Есть данные, что цинк значимо снижает репликацию вирусов.

При появлении симптомов гриппа целесообразен прием карнитина, для того чтобы улучшить утилизацию кислорода миокардом. В ВМА им.Кирова разрабатывался препарат Гипоксен, идеальный для этой цели– не допустить развития цианоза и ишемизации миокарда.

Важным фактором, значимо определяющим прогноз, являются реологические параметры крови. Вязкость крови определяет скорость и полноценность репарации и регенерации поврежденных клеток. Единственным эффективным и безопасным препаратом является фибринолитик Nattokinase с активностью 2 000 фибринолитических единиц.

Слабые места вируса: бактерии и вирусы антагонисты, это нужно помнить. Прием пробиотика (лучшее на российском рынке-ветеринарный ВЕТОМ) значимо снижает агрессию вирусной инфекции. А вот применение антибиотиков наоборот- расчищает территорию вирусу. В ветаптеке же нужно купить источник полиненасыщенных жирных кислот– рыбий жир, он эффективнее рафинированных дезодорированных Омег в капсулах. Это и защита клеточной мембраны, и питание для сердца, и источник витаминов, и еще чего-то ценного, исчезающего при рафинировании.

Известно, что вирус герпеса при репликации ДНК использует аминокислоту аргинин, но не умеет различать едва ли не идентичные аргинин и лизин, и при повышения концентрации лизина быстро деградирует. Аналогичных исследований в отношении вируса гриппа не проводилось, но можно предполагать что это будет справедливо и для РНК-содержащих вирусов семейства Orthomyxoviridae.

.Здоровья всем моим читателям и пациентам, и удачи в наступающем гриппозном сезоне.

Антитело-зависимая повышение ( АДЭ ) возникает , когда не-нейтрализующие противовирусные белки облегчают вирусный вход в хост - клеток , что приводит к увеличению инфекционности в клетках. Некоторые клетки не имеют обычные рецепторы на их поверхности , что вирусы используют для получения доступа. Противовирусные белки (т.е. антитело ) связывается с антителами рецепторов Fc , что некоторые из этих клеток имеют в плазматической мембране . Вирусы связываются с сайтом связывания антигена на другом конце антитела. ADE распространен в клетках , культивируемых в лабораторных условиях , но редко встречается в естественных условиях , за исключением вируса денге . Этот вирус может использовать этот механизм , чтобы заразить человека макрофаги , в результате чего обычно мягкий вирусной инфекции , чтобы стать опасным для жизни.

содержание

В денге вирусной инфекции

Наиболее широко известный пример ADE происходит в условиях инфекции с вирусом денге (DENV). DENV является одноцепочечной положительной полярности РНК вируса из Flaviviridae семьи. Это вызывает болезнь различной степени тяжести у людей, от лихорадки денге (DF), который, как правило , самоограниченными, чтобы геморрагической лихорадки денге (DHF) и денге синдрома шока (DSS), любой из которых может быть опасным для жизни. Подсчитано , что около 390 миллионов людей инфицированы DENV ежегодно.

Явление ADE можно наблюдать , когда человек , который ранее был заражен одним серотип DENV заражается много месяцев или лет с различными серотип. В таких случаях клиническое течение заболевания является более серьезным, и эти люди имеют более высокие виремии по сравнению с теми , у которых ADE не произошло. Это объясняет наблюдение , что в то время как первичные (первые) инфекции вызывают в основном незначительные заболевания (DF) у детей, вторичная инфекция (повторное заражение на более позднем этапе), более вероятно, связано с серьезной болезнью (DHF и / или DSS) в обоих дети и взрослые.

Есть четыре антигенно различных серотипов из DENV (DENV-1 - DENV-4). В 2013 году сообщалось , пятый серотип. Заражение DENV индуцирует выработку нейтрализующих гомотипический иммуноглобулина G (IgG) антитела , которые обеспечивают пожизненный иммунитет против серотипа. Заражение DENV также производит некоторую степень перекрестного защитного иммунитета против других трех серотипов. Нейтрализация гетеротипические (кросс-реагирующие антитела IgG) ответственны за это кросс-защитного иммунитета, который обычно сохраняется в течение периода от нескольких месяцев до нескольких лет. Эти гетеротипические антитела титры уменьшают в течение длительных периодов времени ( от 4 до 20 лет). В то время как титры IgG гетеротипических антител уменьшаются, гомотипические IgG титры антител увеличивают в течение длительных периодов времени. Это может быть из - за преимущественное выживание долгоживущих В - клетки памяти , продуцирующих антитело гомотипического.

Исследование, проведенное Modhiran и соавт. попытался объяснить, как не-нейтрализующие антитела вниз регулируют иммунный ответ в клетке-хозяине через сигнальный путь TLR. TLRs известны распознавать дополнительные и внутриклеточных вирусных частиц и быть основным базисом производства цитокинов. В пробирке эксперименты показали, что воспалительные цитокины и тип 1 ИФНО производства были уменьшены, когда Complexe АДЭ-DENV связывается с рецептором Fc клеток ТНР-1. Это может быть объяснено как снижением производства TLR и модификации его сигнального пути. С одной стороны, неизвестный белок, индуцированный стимулированным рецептором Fc снижает транскрипцию и трансляцию TLRs, которые уменьшают способность клетки обнаруживать вирусные белки. С другой стороны, многие белки (TRIF, TRAF6, ТРАМВАЙНАЯ, TIRAP, IKKα, ТАВ1, TAB2, NF-kB комплекс) участвует в пути передачи сигналов TLR снижаются регулируется, что привело к уменьшению продукции цитокинов. Два из них, TRIF и TRAF6, соответственно вниз регулируется 2 белков САРМ и БАК до регулируется стимулированных рецепторов Fc.

Для того, чтобы проиллюстрировать явление ADE, рассмотрим следующий пример: эпидемия лихорадки денге произошло в Кубе , длившийся с 1977 по 1979 год серотипа был DENV-1. Эта эпидемия последовали еще две вспышки лихорадки денге-один в 1981 году и один в 1997 году; DENV-2 был серотип в обеих этих поздних эпидемиях. 205 случаев DHF / DSS произошли во время вспышки 1997 года, все у людей старше 15 лет. Все , кроме трех из этих случаев были продемонстрированы ранее заражена DENV-1 серотипа во время эпидемии 1977-1979. Кроме того, люди , которые были инфицированы DENV-1 во время вспышки 1977-79 и вторично инфицированные DENV-2 в 1997 году было 3-4 раза повышенную вероятность развития тяжелого заболевания , чем те , вторично инфицированных DENV-2 в 1981 году сценарий можно объяснить наличие нейтрализующих антител IgG гетеротипических в достаточных титрах в 1981 году, титры которых снизились к 1997 году до точки , где они больше не оказывали значительную кросс-защитный иммунитет.

В вирусной инфекции ВИЧ-1

ADE инфекции также сообщалось в ВИЧ. Как DENV, уровень не-нейтрализующие антитела были найден для повышения вирусной инфекции за счетом взаимодействия системы комплемента и рецепторов. Увеличение инфекции было сообщено, что более чем в 350 раз, что сравнимо с ADE в других вирусов , таких как DENV. АДЭ в области ВИЧ может быть опосредована комплементом или Fc - рецептор опосредованный. Дополнения в присутствии ВИЧ-1 положительной сыворотки были найдены для повышения инфекции МТ-2 Т-клеточной линии. Fc-рецептор , опосредованное повышение было сообщено , когда ВИЧ - инфекция была повышена сыворотками от ВИЧ-1 положительной свинки усиливает инфекцию мононуклеарных клеток периферической крови без наличия каких - либо дополнений. Комплемент рецепторы компонентов CR2, CR3 и CR4 были найдены посредничать это улучшение комплемента опосредованной инфекции. Инфекция ВИЧ-1 приводит к активации комплементы фрагментов этих дополнений может помочь вирусы с инфекцией, облегчая вирусные взаимодействия с клетками - хозяевами , которые экспрессируют рецепторы комплемента. Отложение комплемента на вирусе приносит gp120 белок , близкий к молекулам CD4 на поверхности клеток, что приводит к облегченному проникновению вируса. Вирусы предварительно подвергаются не-нейтрализующих системе комплемента также были найдено для повышения инфекций в переплетениях дендритных клеток (МЦР). Опсонированных вирусы не только показали улучшенную запись , но и благоприятные сигнальные каскады для репликации ВИЧ в МЦР. ВИЧ-1 также показала усиление инфекции в НТ-29 клеток , когда вирусы были предварительно опсонизированным с комплементы С3 и С9 в семенной жидкости. Эта повышенная частота инфекции была почти в 2 раза больше , чем инфекции НТ-29 клеток с вирусом самостоятельно. Субраманьян и др. , Сообщил , что почти 72% образцы сыворотки из 39 ВИЧ - инфицированных содержатся дополнения , которые были известны для повышения инфекции. Они также предположили , что наличие нейтрализующих антител (NA) или антитело-зависимой клеточной цитотоксичности антител опосредующих (ADCC) в сыворотке содержит усиление инфекции антител (IEAS). Баланс между изменениями Nas и IEAS как болезнь прогрессирует. При поздних стадиях заболевания доля IEAS , как правило , выше , чем САМ. Увеличение вирусного синтеза белка и РНК производство, как сообщалось, происходит во время комплемента опосредованного усиления инфекции. Клетки , которые сталкиваются с проблемой , не являющихся уровни нейтрализующих дополнений были найдены ускорили высвобождение обратной транскриптазы и вирусного потомства. Взаимодействие антител против ВИЧ с не нейтрализующим комплементом воздействием вирусов также способствует связыванию вируса и эритроциты , которые могут привести к более эффективной доставке вирусов в иммунных скомпрометированы органы.

ADE в ВИЧ возникают вопросы о риске инфекции добровольцев , которые принимали уровни subneutalizing вакцины, как и любых других вирусы , которые проявляют ADE. Гилберт и др. , В 2005 году сообщалось , что там не было ADE инфекции , когда они использовали rgp120 вакцины в фазе 1 и 2 исследований. Было подчеркнуто , что много исследований должны быть сделано в области реагирования иммунитета к ВИЧ-1, информация из этих исследований может быть использована для получения более эффективной вакцины.

Механизм

Есть несколько возможностей для объяснения этого явления:

1. Вирусный поверхностный белок пронизан с антителами против вируса одного серотипа связывается с подобным вирусом с другим серотип. Связывания предназначаются , чтобы нейтрализовать поверхностные белка вируса от прикрепляться к клетке, но антитело , связанное с вирусом , также связывается с рецептором клетки, Fc - область антитела-рецептор FcγR. Это приносит вирус в непосредственную близость к рецептору вирусспецифического, и клетка усваивает вирус через обычный маршрут инфекции.
2. Белок поверхности вируса может быть присоединен к антителам другого серотипа, активируя классический путь от системы комплемента . Система комплемента каскада , а не связывает C1q комплекс , прикрепленный к поверхности вируса белка с помощью антител, которые , в свою очередь связывают C1q рецепторов , обнаруженных в клетках, в результате чего вирус и клетки достаточно близко для конкретного вируса рецептором для связывания вируса, начиная с инфекцией. Этот механизм не был показан специально для DENV инфекции, но , как предполагается, произойдет с Эбола вирусной инфекцией в пробирке .
3. Когда антитело к вирусу присутствует для различных серотипов, он не способен нейтрализовать вирус, который затем поступать в клетки как суб-нейтрализовали вирусной частицы. Эти вирусы фагоцитированы в качестве комплексов антиген-антитело, и понижена макрофагов . При приеме внутрь антитело уже даже суб-нейтрализовать тело из - за условия денатурации на стадии для подкисления фагосомы до слияния с лизосомой . Вирус становится активным и начинает свое распространение внутри клетки.

Лихорадка денге – зооантропонозное инфекционное заболевание с трансмиссивным механизмом передачи возбудителя, является эндемичным более чем для 100 стран Африки, Америки, Восточного Средиземноморья, Юго-Восточной Азии и Западной части Тихого океана. По ориентировочным оценкам, ежегодно в мире регистрируется от 50 до 100 миллионов случаев лихорадки денге. При развитии геморрагического синдрома летальность может достигать 2,5%, а в случае отсутствия квалифицированной медицинской помощи, при лихорадке денге, летальность может превышать 20 % [Dengue guidelines for diagnosis, treatment, prevention and control. WHO Library Cataloguing-in-Publication Data. 2009. TDR/World Health Organization. 147 p].

За последние десятилетие в Российской Федерации стали регистрироваться более 100 завозных случаев лихорадки денге в год. Заражение происходило при посещении Таиланда, Вьетнама, Индонезии, Индии, Бангладеша, Гонконга, Мальдивских островов и Бразилии.

Возбудитель лихорадки денге – это РНК-содержащий вирус, входящий в семейство Flaviviridae, род Flavivirus. Вирус денге наиболее часто передается человеку через укус комаров рода Aedes spp., причем в трансмиссию возбудителя вовлечены комары видов A. aegypti, A. albopictus и A. koreicus. Существует четыре субтипа вируса денге, причем пациенты могут последовательно заболеть лихорадкой денге несколько раз. Повторные случаи заболевания обычно связываются с различными субтипами вируса денге. Одна из особенностей иммунопатогенеза лихорадки денге связана с феноменом антитело-зависимого усиления инфекции. Иммунные комплексы вирионов вируса денге с антителами инфицируют макрофагальные клетки через клеточные рецепторы к Fc фрагментам иммуноглобулинов. Вовлечение клеток макрофагального ряда в патогенез заболевания, по всей вероятности, способствует утяжелению течения повторных случаев заболевания, индуцирует развитие геморрагического синдрома и возможно препятствует формированию полноценного иммунитета против лихорадки денге.

Широкое распространение лихорадки денге в странах с теплым климатом и рост числа российских граждан, посещающих эти страны, увеличивает риск появления завозных случаев заболевания лихорадкой денге на территории Российской Федерации [Берилло С.А., Демина О.К., Терновой В.А., Шиков А.Н., Сергеева Е.И., Демина А.В., Костина Н.Е., Винокурова А.В., Михеев В.Н., Агафонов А.П., Сергеев А.Н. Случаи лихорадки денге на территории РФ в 2010-2011 гг. среди туристов, вернувшихся из Юго-Восточной Азии. Эпидемиология и инфекционные болезни. 2012; 4: 12-5; Пьянков С.А., Иванова Е.В., Терновой В.А., Агафонов А.П. Специфическая дифференциальная диагностика кори, краснухи, цитомегаловирусной инфекции и лихорадки денге у российских туристов. Эпидемиология и инфекционные болезни. 2014; 19(6): 16-20; Sergeeva E.I., Ternovoi V.A., Chausov E.V., Berillo S.A., Demina O.K., Shikov A.N., Plasunova I.V., Kartashov M.J., Agafonov A.P. Imported cases of dengue fever in Russia during 2010-2013. Asian Pac J Trop Med. 2015; 8(2): 90-3]. Более того, комары A. aegypti, A. albopictus и A. кoreicus, являющиеся основными векторами для вируса денге, встречаются в регионах России, примыкающих к Черному морю [Ganushkina L.A., Patraman I.V., Rezza G., Migliorini L., Litvinov S.K., Sergiev V.P. Detection of Aedes aegypti, Aedes albopictus, and Aedes koreicus in the Area of Sochi, Russia. Vector Borne Zoonotic Dis. 2016; 16(1): 58-60]. Наличие комаров переносчиков может способствовать формированию локальных природных очагов лихорадки денге в южных регионах РФ.

Инкубационный период заболевания обычно составляет от 2 до 15 дней после укуса инфицированного комара, после чего развивается вирусная лихорадка, продолжающаяся 1-2 недели. Иногда она носит двухфазный характер и, как правило, закачивается выздоровлением. Лабораторная диагностика основана на выявлении РНК вируса, антигена NS1 и специфических IgG и IgM антител. Вирусная РНК может быть обнаружена методом ОТ ПЦР в сгустке крови, цельной крови, моче, а также в аутопсийном материале, с момента появления клинических симптомов лихорадки и до 5-7 дня заболевания. Антиген NS1 вируса денге успешно детектируется в крови пациентов методом ИФА и методом иммунохроматографии (ИХА) в течение первых 10 дней с момента появления клинических признаков заболевания. Наличие РНК или NS1 антигена в сыворотке крови указывает на размножение вируса денге в организме пациента.

После 3-5 дней от начала заболевания лихорадкой денге начинают обнаруживаться специфические антитела, выявляемые методами ИФА и ИХА. Иммуноглобулины класса M в эти сроки выявляются у 50 % пациентов, а к 10 дню IgM антитела выявляются уже у большинства заболевших. Максимальный титр IgM антител регистрируется через две недели после появления симптомов заболевания, и постепенное его снижение происходит в последующие 2-3 месяца. Иммуноглобулины класса IgG обычно начинают обнаруживаться уже к концу первой недели заболевания, постепенно нарастая ко второй неделе и сохраняясь, как правило, в течение всей жизни. В случае повторного инфицирования пациента другим субтипом вируса денге титры антител нарастают быстрее, в основном, за счет иммуноглобулинов класса G. Титр IgM во время повторной инфекции значительно ниже, чем при первичной инфекции.

Большая часть подозрительных и лабораторно подтвержденных случаев лихорадки денге приходится на зимний период, что связано с более активным посещением туристами различных стран Юго-Восточной Азии в этот период.

У РНК-содержащих ретровирусов сначала происходит обратная транскрипция генома в ДНК, затем ее интеграция в клеточные хромосомы и лишь после этого транскрипция генов.

Цитопатические эффекты при вирусных инфекциях разнообразны, они определяются как вирусом, так и клеткой и сводятся к разрушению клетки (цитолитический эффект), сосуществованию вируса и клетки без гибели последней (латентная и персистирующая инфекция) и трансформации клетки.

Вовлеченность организма в инфекционный процесс зависит от ряда обстоятельств - количества погибших клеток, токсичности вирусов и продуктов распада клеток, от реакций организма, начиная от рефлекторных и заканчивая иммунными. Количество погибших клеток влияет на тяжесть инфекционного процесса. Например, будут ли поражены при гриппе только клетки носа и трахеи или вирус поразит клетки эпителия альвеол, зависит тяжесть и исход болезни.

Хотя вирусы и не образуют типичных токсинов, однако и вирионы, и вирусные компоненты, накапливающиеся в пораженных тканях, выходя в кровоток, оказывают токсическое действие. Неменьшее токсическое действие оказывают и продукты распада клеток. В этом случае действие вирусной инфекции столь же неспецифично, как и действие патогенных организмов, убивающих клетки и вызывающих их аутолиз. Поступление токсинов в кровь вызывает ответную реакцию - лихорадку, воспаление, иммунный ответ. Лихорадка является преимущественно рефлекторным ответом на поступление в кровь и воздействие на ЦНС токсичных веществ.

Если лихорадка - общий ответ организма на вирусную инфекцию, то воспаление - это местная многокомпонентная реакция. При воспалении происходят инфильтрация пораженных тканей макрофагами, утилизация продуктов распада, репарация и регенерация. Одновременно развиваются реакции клеточного и гуморального иммунитета. На ранних стадиях инфекции действуют неспецифические киллеры и антитела класса IgM. Затем вступают в действие основные факторы гуморального и клеточного иммунитета. Однако гораздо раньше, уже в первые часы после заражения, начинает действовать система интерферона, представляющая семейство секреторных белков, вырабатываемых клетками организма в ответ на вирусы и другие стимулы. Описанные явления относятся к так называемой острой репродуктивной вирусной инфекции. Взаимодействие вируса и клеток может происходить, как отмечалось выше, без гибели последних. В этом случае говорят о латентной, т.е. бессимптомной или персистирующей хронической вирусной инфекции. Дальнейшая экспрессия вируса, образование вирусспецифических белков и вирионов вызывает синтез антител, на этой стадии латентная инфекция переходит в персистирующую и появляются первые признаки болезни.

Репродукция вируса в клетках сопровождается развитием цитопатических процессов, специфичных для разных вирусов и для разных типов инфекционных процессов. Цитопатические процессы при вирусных инфекциях разнообразны, они определяются как вирусом, так и клетками, причем специфика их больше "задается" клеткой, нежели вирусом, и сводится в основном к разрушению клеток, сосуществованию вируса и клеток без гибели последних и трансформация клеток. Несмотря на значительные различия цитоцидного действия разных вирусов, в общем, они сходны. Подавление синтеза клеточных макромолекул - нуклеиновых кислот и белков, а также истощение энергетических ресурсов клетки ведут к необратимым процессам, заканчивающимся гибелью пораженной клетки. Повреждение клеток вирусами, их отмирание и распад переносят вирусную инфекцию с клеточного уровня на уровень организма в целом.

При встрече организма с вирусной инфекцией продукция интерферона (растворимого фактора, вырабатываемого вирус-инфицированными клетками, способного индуцировать антивирусный статус в неинфицированных клетках) становится наиболее быстрой реакцией на заражение, формируя защитный барьер на пути вирусов намного раньше специфических защитных реакций иммунитета, стимулируя клеточную резистентность, - делая клетки непригодными для размножения вирусов.

Продукция и секреция цитокинов относятся к самым ранним событиям, сопутствующим взаимодействию микроорганизмов с макрофагами. Этот ранний неспецифический ответ на инфекцию важен по нескольким причинам: он развивается очень быстро, поскольку не связан с необходимостью накопления клона клеток, отвечающих на конкретный антиген; ранний цитокиновый ответ влияет на последующий специфический иммунный ответ.

Интерферон активирует макрофаги, которые затем синтезируют интерферон-гамма, ИЛ-1, 2, 4, 6, ФНО, в результате макрофаги приобретают способность лизировать вирус-инфицированные клетки.

Интерферон-гамма является специализированным индуктором активации макрофагов, который способен индуцировать экспрессию более 100 разных генов в геноме макрофага.

Продуцентами этой молекулы являются активированные Т-лимфоциты (Тh1-тип) и естественные киллеры (NK-клетки). Интерферон-гамма индуцирует и стимулирует продукцию провоспалительных цитокинов (ФНО, ИЛ-1, 6), экспрессию на мембранах макрофагов, антигенов МНС II; гамма-интерферон резко усиливает антимикробную и противовоспалительную активность путем повышения продукции клетками супероксидных радикалов, а усиление иммунного фагоцитоза и антителоопосредованной цитотоксичности макрофагов под влиянием гамма-интерферона связано с усилением экспрессии Fc-рецепторов для JgG. Активирующее действие интерферона-гамма на макрофаги опосредовано индукцией секреции этими клетками ФНО -альфа. Этот пик наблюдается совместно с ФНО-альфа. Максимум продукции ИЛ-4 наступает через 24-48 ч с момента активации клеток. При этом ИЛ-4 рассматривается как цитокин, ограничивающий иммуновоспалительные реакции и снижающий ответ организма на инфекцию, угнетая при этом экспрессию гамма-интерферона. Интерферон-гамма ин витро усиливает фагоцитарную активность нейтрофилов, что обусловлено усилением экспрессии Fc-рецепторов и поверхностных белков семейства интегринов на нейтрофилы. Это позволяет нейтрофилам осуществлять цитотоксические функции и фагоцитоз. В качестве основных эффекторных клеток воспалительного процесса, они обеспечивают элиминацию инфекта из организма.

Взаимодействие цитокина с клеткой определяется универсальной биологической системой, специфическим механизмом которой является рецепторный аппарат, связанный с восприятием метаболического кода. Для проявления биологической активности цитокина необходимо присутствие на поверхности чувствительных клеток специфических рецепторов, которые могут экспрессироваться параллельно с синтезом цитокина. Рецепторы цитокинов представляют собой комплексы, состоящие из двух и более рецепторных молекул, которые объединяются на мембране клетки-мишени и образуют высокоаффинный рецепторный комплекс. Большинство рецепторов состоит из отдельных молекул, связывающих цитокины, которые ассоциируются после связывания лиганда с сигналпередающим рецепторным компонентом; часть рецепторов существует как растворимые изоформы, способные связывать и растворять цитокины, а часть функционирует как многокомпонентные блоки; механизм комплексирования субъединиц рецепторов объясняет плейотропные и дублирующие эффекты цитокинов, имеющих большое структурное сходство. Рецепторы ИЛ-10 имеют гомологию рецепторов интерферона, и подобно ИЛ-10 индуцирует экспрессию в моноцитах гена Fc- рецептора. Для полного функционирования цитокиновой системы необходимы повышение уровня цитокина в ответ на инфект и экспрессия нормального количества рецепторов к ним на клетках. Изменение рецепторов после их связывания с цитокином заключается в интернализации комплексов цитокин - рецептор внутрь клетки. На поверхности клеток рецептор появляется заново, постепенно синтезируясь в течение 24-36 ч (время появления рецепторов интерферон-альфа). В этот период клетки остаются чувствительными к последующим дозам цитокина, чем объясняется эффективность введения препаратов интерферона и их индукторов три раза в неделю.

Пик продукции цитокинов после стимуляции макрофагов наблюдается через 1-2,6,18-48 ч, а пик продукции интерферон-гамма наступает через 20 ч после первого выхода цитокина из клетки. Поскольку интерферон-гамма ингибирует миелопоэз, то нормализация числа нейтрофилов после элиминации инфекта связана с системой регуляции нейтропоэза. Через 6 ч после стимуляции интерферон-альфа для выполнения своих функций NK-rклетки (активность которых регулируется ИЛ-1, 4, 2) продуцируют гамма-интерферон, в результате чего происходит лизис инфицированных клеток.

При антигенной стимуляции клеток трансдукция сигнала с активированного рецептора на генетический аппарат осуществляется с помощью внутриклеточных регуляторных систем, компоненты которых (белки мембран, ферментов, хроматина) связываются с чувствительными к ним последовательностями ДНК. После связывания цитокина (интерферон) с поверхностными клеточными мембранными рецепторами происходит активация ферментов протеинкиназы-С (ПКС), тирозинкиназы, ц-АМФзависимой протеинкиназы, серин-треонинкиназы. Интерферон-альфа активирует tyk 2 и jak 1-киназы, а интерферон-гамма активирует jak 1 и 2-киназы. Далее факторы транскрипции перемещаются в ядро клетки и связывают гены раннего ответа.

Первый ответ клеток на цитокин - это быстрая индукция генов раннего ответа ("immediate early" генов), в число которых и входит ген интерферон-гамма. Стимуляция экспрессии этих генов важна для выхода клеток из Go-стадии и перехода в Gi-стадию и дальнейшей прогрессии клеточного цикла. Их индукция происходит после активации рецепторов роста на клеточной мембране и активации протеин-киназной системы. Гены раннего ответа являются ключевыми регуляторами клеточной пролиферации и дифференцировки, кодируют белки, регулирующие репликацию ДНК.

Таким образом, при активации клеток происходит стимуляция генов раннего ответа, что ассоциируется с изменением фаз клеточного цикла. Основная протективная роль в иммунном ответе, направленном против внутриклеточных паразитов (грибы, простейшие, вирусы, микобактерии туберкулеза), принадлежит клеточным механизмам. Способность перечисленных возбудителей переживать и размножаться внутри клеток делает их защищенными от действия антител и системы комплемента. Резистентность к антимикробным факторам макрофагов позволяет им длительно переживать внутри этих клеток. Для элиминации возбудителя необходим специфический клеточно-опосредованный ответ. Его специфичность определяется антигенраспознающими СД8+-Т-лимфоцитами, которые пролиферируют, активируются и формируют клон эффекторных цитотоксических лимфоцитов. Решающий момент специфического иммунного ответа - это ответ СД4+Т-лимфоцитов с хелперной направленностью на распознавание антигена. На этом этапе определяется форма иммунного ответа: либо с преобладанием гуморального иммунитета, либо с преобладанием клеточных реакций (ГЗТ). Направление дифференцировки СД4 + -лимфоцитов, от которого зависит форма специфического иммунного ответа, контролируется цитокинами, образующимися в ходе воспалительной реакции. Так, в присутствии ИЛ-12 и интерферон-гамма СД4 + -лимфоциты дифференцируются в воспалительные Тh1-клетки, начинают продуцировать и секретировать интерлейкин-2, интерферон-гамма, ФНО и определяют клеточный характер специфического иммунного ответа. Присутствие ИЛ-12 обеспечивается его продукцией макрофагами, а интерферон-гамма - естественными киллерами, активированными в раннюю фазу ответа на внутриклеточно паразитирующие бактерии и вирусы. В отличие от этого, в присутствии ИЛ-4 СД4 + -лимфоциты дифференцируются в хелперы Тh 2, которые начинают продуцировать и секретировать ИЛ-4, ИЛ-5, ИЛ-6 и запускают гуморальный иммунный ответ, т.е. синтез специфических антител - иммуноглобулинов. Воспалительные Тh 1-лимфоциты нужны для борьбы с внутриклеточными паразитами, а Тh 2 хелперы нужны для элективной защиты от внеклеточных паразитов.

Вирусная инфекция может вызывать быстрое подавление экспрессии ряда клеточных генов (из которых наиболее изучены интерфероновые гены и гены, кодирующие дс-РНК-зависимые ферменты -2,5-ОАС и ПК-дс), принимающих участие в антивирусном действии. Специальные исследования механизма антивирусного действия интерферонов и дс-РНК в клеточных и бесклеточных системах показали ключевую роль в этом процессе вышеуказанных ферментов. ПК-дс, взаимодействуя с дс-РНК, фосфорилируется и в активной форме фосфорилирует регуляторные факторы транскрипции и трансляции, из которых наиболее изучен инициирующий фактор трансляции (eIF2).

ПК-дс выполняет регуляторную роль в системе клеточной пролиферации на уровне факторов трансляции и активации ряда генов цитокинов. Вероятно, существует связь между подавлением транскрипции мРНК и ПК-дс, угнетением общего синтеза клеточного белка при вирусных инфекциях и накоплением в ядрах клеток белка нуклеокапсида и белка NSP2. Фрагментация клеточных хромосом, наблюдающаяся на ранних сроках вирусной инфекции, может быть одной из причин подавления экспрессии генов, участвующих в противовирусном ответе.

Есть основания предполагать участие белков NSP2 в регуляции активности генов цитокинов - низкомолекулярных белковых регуляторных веществ, продуцируемых клетками и способных модулировать их функциональную активность. Нарушения в системе цитокинов приводят к нарушению кооперативных взаимодействий иммунокомпетентных клеток и нарушению иммунного гомеостаза.

В последние годы показано, что ИЛ- 12, относящийся к провоспалительным цитокинам, является ключевым для усиления клеточно-опосредованного иммунного ответа и инициации эффективной защиты против вирусов.

Средства терапии гриппа и ОРЗ можно разделить на этиотропные, иммунокорригирующие, патогенетические и симптоматические. Приоритет принадлежит этиотропным препаратам, действие которых направлено непосредственно на возбудитель инфекции. Все препараты этиотропного действия целесообразно рассматривать с учетом их точек приложения в цикле репродукции вирусов гриппа и других ОРЗ.

Применение химиопрепаратов для профилактики и лечения гриппа и ОРЗ относится к базовой терапии и является общепризнанным мировым стандартом. Многолетние клинические исследования достоверно выявили их высокую лечебно-профилактическую значимость. Химиотерапевтические средства представлены тремя основными группами: это блокаторы М_2-каналов (амантадин, ремантадин); ингибиторы нейраминидазы (занамивир, озельтамивир) и ингибиторы протеаз (амбен, аминокапроновая кислота, трасилол). Препараты оказывают прямое антивирусное действие, нарушая различные фазы репликативного цикла вирусов. Несколько особняком стоит группа вирулицидных препаратов, применяемых местно для предотвращения адсорбции и проникновения вирионов в клетки.

1. Грипп и другие респираторные вирусные инфекции / под ред. О.И. Киселева, И.Г. Мариничева, А.А. Сомининой. - СПб, 2003.
2. Дриневский В.П., Осидак Л.В., Цыбалова Л.М. Острые респираторные инфекции у детей и подростков // Практическое руководство под редакцией О.И. Киселева. - СПб, 2003.
3. Железникова Г.Ф., Иванова В.В., Монахова Н.Е. Варианты иммунопатогенеза острых инфекций у детей. СПб, 2007. - 254 с.
4. Ершов Ф.И. Грипп и другие ОРВИ // Антивирусные препараты. Справочник. - М., 2006. - С.226-247.
5. Ершов Ф.И., Романцов М.Г. Антивирусные средства в педиатрии. - М., 2005. - С.159-175.
6. Ершов Ф.И., Киселев О.И. Интерфероны и их индукторы (от молекул до лекарств). М., 2005. - С.287-292.
7. Иванова В.В. Острые респираторно-вирусные заболевания // Инфекционные болезни у детей. - М., 2002.
8. Онищенко Г.Г., Киселев О.И., Соминина А.А. Усиление надзора и контроля за гриппом как важнейший элемент подготовки к сезонным эпидемиям и очередной пандемии. - М., 2004. - С.5-9.
9. Об утверждении стандарта медицинской помощи больным гриппом, вызванным идентифицированным вирусом гриппа (грипп птиц) // Приказ Минздравсоцразвития №460 от 07.06.2006 г.
10. Романцов М.Г., Ершов Ф.И.Часто болеющие дети: Современная фармакотерапия. - М., 2006. - 192 с.
11. Стандартизированные принципы диагностики, лечения и экстренной профилактики гриппа и других острых респираторных инфекций у детей / под ред. О.И. Киселева. - Санкт-Петербург. - 2004. - С.82-95.
12. Лекарственные средства в фармакотерапии патологии клетки / под ред. Т.Г.Кожока. - М., 2007.