Анализ на дисбактериоз enterobacter cloacae

Энтеробактер (лат. Enterobacter) — род грамотрицательных палочкообразных перитрихиальных споронеобразующих бактерий, факультативных анаэробов. Энтеробактеры входят в состав нормальной микрофлоры кишечника человека.

Энтеробактер также обитает в кишечнике некоторых видов животных, встречается в почве, воде, пищевых продуктах.

Энтеробактер относится к так называемым колиформным бактериям.

Энтеробактер встречается в толстом кишечнике многих здоровых людей, но он относится к условно-патогенным бактериям и при попадании энтеробактера в другие органы возможно развитие инфекционных заболеваний. Ряд видов энтеробактера (Enterobacter agglomerans, Enterobacter cloacae и др.) вызывают инфекционные заболевания почек и мочевыводящих путей (острый пиелонефрит, обострение хронического простатита), половых органов, респираторной системы.

Энтеробактер является одной из самых частых причин внутрибольничных ангиогенных инфекций и инфекций дыхательных и мочевыводящих путей.

Бактериурия — наличие бактерий в моче может является признаком воспаления в мочевыводящих путях, мочевом пузыре, почках. При отсутствии каких-либо симптомов, истинная бактериурия (инфекция мочевых путей) диагностируется при наличии не менее 10 5 микробных тел энтеробактеров (или других энтеробактерий) в 1 мл свежевыпущенной мочи, иначе предполагается, что загрязнение мочи происходит при ее заборе. Если бактериурия не сопровождается какими-либо симптомами, тогда она называется бессимптомной бактериурией. Бессимптомная бактериурия не всегда требует немедленного лечения.

При наличии симптомов или при заборе мочи катетером диагностический порог может быть значительно уменьшен. В частности, при наличии соответствующей клинической симптоматики (лихорадка, озноб, тошнота, рвота, боли в поясничной области, дизурия) и выделении не менее 10 лейкоцитов в 1 мкл мочи, критерием для диагностики острого пиелонефрита является наличие не менее 10 4 энтеробактеров (или других уропатогенных энтеробактерий) в 1 мл мочи.

При микробиологическом анализе кала энтеробактер рассматривается в комплексе с другими условно-патогенными бактериями, относящимися к семейству энтеробактерии и входящими в состав нормальной микрофлоры кишечника человека (кроме энтеробактера это клебсиелла, протей, гафния, серратия, морганелла, провиденция, цитробактер и др). В норме общее количество этих бактерий (колониеобразующих единиц, КОЕ) в 1 г кала должно быть меньше 10 4 . Большее количество перечисленных микроорганизмов является признаком дисбактериоза.

При избыточном росте энтеробактера, как следствии дисбактериоза, при медикаментозной терапии применяются различные пробиотки (Бифидумбактерин, Бифиформ, Лактобактерин, Ацилакт, Аципол и др.) и/или адекватные конкретному штамму энтеробактера и причине дисбактериоза антибиотики.

Антибактериальные средства (из имеющих описание в данном справочнике), активные в отношении энтеробактера: рифаксимин, ципрофлоксацин, норфлоксацин, офлаксацин, нифурател. В отношении Enterobacter cloacae активны: левофлоксацин, моксифлоксацин.

Род энтеробактер (Enterobacter) входит в семейство энтеробактерии (Enterobacteriaceae), порядок энтеробактерии (Enterobacteriales), класс гамма-протеобактерии (γ proteobacteria), тип протеобактерии (Proteobacteria), царство бактерии.

В состав рода энтеробактер входят:

Enterobacter cloacae complex, который включает в себя следующие виды: Enterobacter asburiae, Enterobacter cancerogenus, Enterobacter cloacae, Enterobacter cloacae complex 'Hoffmann cluster III', Enterobacter cloacae complex 'Hoffmann cluster IV', Enterobacter cloacae complex bacterium, Enterobacter hormaechei, Enterobacter kobei, Enterobacter lignolyticus, Enterobacter ludwigii, Enterobacter xiangfangensis
а также виды: Enterobacter bugandensis, Enterobacter endosymbiont of Metaseiulus occidentalis, Enterobacter endosymbiont of Ommatissus lybicus, Enterobacter massiliensis, Enterobacter mori, Enterobacter muelleri, Enterobacter nickellidurans, Enterobacter siamensis, Enterobacter soli, Enterobacter tabaci, Enterobacter timonensis

Ранее входящий в род энтеробактер вид Enterobacter agglomerans переименован в Pantoea agglomerans и отнесён к вновь образованному роду Pantoea. Enterobacter aerogenes перенесён в род Klebsiella и переименован в Klebsiella aerogenes. Enterobacter amnigenus переименован в Lelliottia amnigena, Enterobacter cowanii — в Kosakonia cowanii, Enterobacter gergoviae — в Pluralibacter gergoviae, Enterobacter intermedius — в Kluyvera intermedia, Enterobacter nimipressuralis — в Lelliottia nimipressuralis, Enterobacter pyrinus — в Pluralibacter pyrinus, Enterobacter sakazakii — в Cronobacter sakazakii.

В желудочно-кишечном тракте обитает множество условно-патогенных бактерий. При крепком иммунитете они не вызывают никаких патологий у человека. Но как только защитные силы организма ослабевают, эти микробы начинают проявлять свои болезнетворные свойства. Одной из таких бактерий является Enterobacter cloacae. Насколько опасен этот микроорганизм? И как его обнаружить? На эти вопросы мы ответим в статье.

Описание

Бактерии Enterobacter cloacae (Энтеробактер клоаке) представляют собой микроорганизмы палочковидной формы. Они не способны образовывать споры. Эти бактерии являются анаэробными, они могут жить при полном отсутствии кислорода. Энтеробактеры довольно устойчивы к воздействию дезрастворов и большинства антибиотиков. Они содержатся в большом количестве в окружающей среде и попадают в организм чаще всего с пищей.

Вам будет интересно: Ингалятор компрессорный: обзор лучших моделей, рейтинг, характеристики, инструкция, отзывы о производителях

Эти бактерии являются частью нормальной микрофлоры ЖКТ. Если их количество не превышает допустимые показатели, то никаких патологий у человека не возникает. Однако при падении иммунитета происходит активное размножение энтеробактеров, что может спровоцировать различные заболевания.

Патогенность

При неблагоприятных условиях микроорганизмы Enterobacter cloacae могут вызывать воспалительные процессы в разных органах. Обычно это происходит при резком ослаблении организма или на фоне других заболеваний. Бактерии могут поражать не только ЖКТ, но и другие органы: легкие, почки, мочевой пузырь. Это приводит к появлению следующих патологий:

дисбактериоза кишечника;
острого пиелонефрита;
цистита;
аспирационной пневмонии.

Активно размножаясь, энтеробактеры вытесняют полезные микроорганизмы. В результате у человека нарушается микрофлора в органах ЖКТ. Это приводит к ухудшению самочувствия, дальнейшему снижению иммунитета и высокой подверженности инфекциям.

Анализ кала

Как выявить чрезмерное размножение Enterobacter cloacae? Это можно сделать с помощью анализов кала или мочи на бакпосев. Рассмотрим эти исследования более подробно.

Концентрацию Enterobacter cloacae в кале определяют во время проведения анализа на дисбактериоз кишечника. Это исследование назначают, если у пациента имеются следующие симптомы:

длительное повышение температуры до +38 градусов;
периодическая рвота;
диарея;
примесь крови и слизи в испражнениях.

Вам будет интересно: Ихтиоловая мазь: инструкция, показания к применению, свойства и отзывы

На пробу берут небольшой кусочек биоматериала, желательно с примесью слизи или крови (если есть). Кал необходимо доставить в лабораторию в течение 1 часа. Специалисты проводят посев фекалий на питательные среды. Через 5 дней бактерии в биоматериале начинают размножаться. После этого подсчитывается количество микроорганизмов в 1 г кала. Их концентрацию измеряют в КОЕ (колониеобразующих единицах).

Исследование мочи

Для определения содержания Enterobacter cloacae в моче назначают анализ урины на бакпосев. Это исследование показано в следующих случаях:

при беременности;
при обнаружении бактерий или грибков в общем анализе мочи;
при сахарном диабете;
при признаках воспаления в органах выделения;
при хроническом цистите, уретрите и пиелонефрите.

За 7 дней до проведения пробы нужно исключить из рациона острые, соленые и жирные блюда, а также спиртные напитки. За 2 недели до сдачи анализа необходимо прекратить прием антибиотиков.

Перед сбором мочи нужно тщательно вымыть наружные половые органы, не используя при этом антибактериальное мыло. Урину собирают утром в аптечный контейнер и доставляют в лабораторию в течение 2 часов.

Затем проводится посев мочи на питательные среды. После этого определяется количество бактерий в 1 мл урины.

Нормы и расшифровка результатов

Каковы нормы содержания энтеробактеров в анализе кала? Максимально допустимая концентрация Enterobacter cloacae - 10 в степени 4 (104) колониеобразующих единиц (КОЕ) на 1 г биоматериала.

Превышение этой нормы может быть признаком дисбактериоза. Однако врач всегда обращает внимание на содержание в анализе и других видов условно-патогенных кишечных бактерий:

клебсиелл;
протеев;
гафний;
провиденций;
морганелл;
цитробактеров;
серраций.

Повышение концентрации вышеперечисленных микроорганизмов и энтеробактеров свидетельствует о дисбиозе.

Рассмотрим расшифровку анализа мочи на бакпосев:

Если результаты исследования показавают концентрацию энтеробактеров до 103 микробных тел на 1 мл, то человек здоров. Такие данные анализа являются нормой.

При показателях более 104 энтеробактеров на 1 мл врач может подозревать инфекцию органов выделения. В этом случае необходимо пройти дополнительную диагностику.

Если в расшифровке анализа показатель энтеробактеров превышает 105 микробных тел на 1 мл, то врач диагностирует истинную бактериурию.

Энтеробактериоз кишечника

Вам будет интересно: "Амброксол" для ингаляций: инструкция по применению, отзывы

Повышение концентрации Enterobacter cloacae в кале у ребенка - нередкое явление. Усиленное размножение таких бактерий в 50 % случаев диагностируется у детей в возрасте до 6 месяцев. Если содержание условно-патогенных микроорганизмов превышает допустимую норму, то врачи ставят диагноз - энтеробактериоз кишечника.

В детском возрасте эта патология протекает в довольно тяжелой форме. Она сопровождается следующей симптоматикой:

стойким повышением температуры;
беспокойством и плачем;
отказом от еды;
диареей, сменяющейся запорами;
тошнотой и рвотой;
выделением зловонных испражнений с примесью крови и слизи.

Острые проявления заболевания могут продолжаться от 7 до 10 дней. У взрослых энтеробактериоз протекает с такими же симптомами, как и у детей, но в более легкой форме.

Бактериурия

Если у пациента в моче отмечается концентрация энтеробактеров выше 105 микробных тел, то такое отклонение называется бактериурией. Оно может указывать на воспалительные процессы в органах выделения. Если это состояние протекает без выраженных клинических проявлений, то врачи говорят о бессимптомной бактериурии.

Если же у человека имеются явные симптомы воспаления в почках или мочевом пузыре (болевой синдром, высокая температура, расстройства мочеиспускания), то отклонением от нормы считается показатель энтеробактеров выше 104 микробных тел. При этом врачи обращают внимание и на данные общего анализа мочи. Повышение концентрации энтеробактеров и количества лейкоцитов чаще всего свидетельствуют о пиелонефрите.

Лечение

Что делать, если в анализе кала обнаружено повышенное количество Enterobacter cloacae? Лечение энтеробактериоза у взрослого или ребенка должно быть комплексным. Медикаментозная терапия обязательно сочетается с соблюдением диеты.

Необходимо исключить из рациона сладости, мед, дрожжи, жареную и соленую еду. Такая пища способствует размножению условно-патогенной микрофлоры. Нужно стараться употреблять как можно больше кисломолочных продуктов, в их состав входят полезные лактобактерии.

Если обнаружена Enterobacter cloacae у ребенка в возрасте до 12 месяцев, то родителям необходимо тщательно следить за гигиеной малыша. Дети нередко инфицируются повторно сами от себя. Поэтому нужно несколько раз в день кипятить соску и игрушки-грызунки. Ребенка необходимо тщательно подмывать после каждой дефекации. Это поможет предотвратить самозаражение и рецидивы энтеробактериоза.

Что касается питания, то самой лучшей едой для грудничка с энтеробактериозом является материнское молоко. С разрешения педиатра допускается прикорм в виде соков.

При энтеробактериозе назначают следующие группы лекарств:

Пробиотики: "Линекс", "Бифидумбактерин", "Бифиформ". Они содержат живые штаммы полезных бактерий.

Пребиотики: "Хилак Форте". В состав этих препаратов входят вещества, способствующе размножению полезных микроорганизмов.

Синбиотики: "Гастрофарм", "Нормофлорин-Л". Эти средства содержат полезные бактерии и питательные вещества для их роста.

При выраженных диспепсических явлениях (рвоте, диарее) показан прием энтеросорбентов: "Смекты", "Энтеросгеля", "Полифепана", "Фильтрума".

Антибиотики назначают только при тяжелых формах энтеробактериоза. Условно-патогенные микроорганизмы довольно устойчивы к воздействию антибактериальных лекарств. Поэтому перед лечением необходимо провести тест на чувствительность микрофлоры к антибиотиков. Это поможет правильно подобрать препарат.

Если у пациента выявлены энтеробактеры в моче, то лечение будет зависеть от клинических проявлений. Бессимптомная бактериурия далеко не всегда требует медикаментозной терапии. Необходимость назначения лекарств может определить только врач. Если же у пациента имеются симптомы пиелонефрита, уретрита или цистита, то необходимо сделать тест на чувствительность бактерий к антибиотикам, а затем пройти курс антибактериальной терапии.

Микробиологическое исследование, позволяющее оценить качественный и количественный состав облигатных, условно-патогенных и патогенных бактерий и дрожжевых грибов в кале, а также определить наличие антагонистической активности основных пробиотиков в отношении выявленных микроорганизмов.

Для чего используется этот анализ?

Для диагностики и лечения дисбактериоза кишечника.

Когда назначается анализ?

При обследовании пациента после длительного курса лечения антибактериальными препаратами;
при обследовании пациента с указанием на бесконтрольный прием антибактериальных препаратов и слабительных средств в анамнезе;
при обследовании пациента с хроническим панкреатитом, хроническим алкоголизмом и с другими состояниями, сопровождающимися мальабсорбцией (нарушением всасывания в кишечнике);
при хронической диарее.

Дисбиоз кишечника, определение пробиотиков-антагонистов.

Синонимы английские

Intestinal dysbiosis, antagonistic activity of probiotics, Intestinal dysbacteriosis.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

Исследование рекомендуется проводить до начала приема антибиотиков и других антибактериальных химиотерапевтических препаратов.
Следует исключить прием слабительных препаратов, введение ректальных свечей, масел, ограничить прием медикаментов, влияющих на перистальтику кишечника (белладонна, пилокарпин и др.) и на окраску кала (железо, висмут, сернокислый барий), в течение 72 часов до сбора кала.

Общая информация об исследовании

Дисбактериоз (дисбиоз) кишечника – это нарушение состава и количественного соотношения бактериальных и грибковых микроорганизмов желудочно-кишечного тракта. В норме слизистая оболочка ЖКТ является средой обитания так называемых комменсальных микроорганизмов, обеспечивающих целый ряд защитных функций в обмен на микронутриенты, используемые человеком. Большинство кишечных комменсалов относятся к родам Lactobacillus, Bifidobacterium и Bacteroides (облигатные бактерии), хотя состав и количество микроорганизмов сильно варьируются в зависимости от отдела ЖКТ. Так, желудок характеризуется наименьшей плотностью бактерий, среди которых преобладают Lactobacillus, Streptococcus и Helicobacter pylori. В тонкой кишке обнаруживается до 10 3 -10 6 КОЕ/мл бактерий, преимущественно Streptococcus и Lactobacillus. Наибольшая плотность комменсальных микроорганизмов наблюдается в толстой кишке (10 8 -10 9 КОЕ/мл), где преобладают Bacteroides, Clostridium, Fusobacterium и Bifidobacterium. Комменсальные микроорганизмы находятся в динамическом взаимодействии с кишечным эпителием и, таким образом, являются механическим препятствием для инвазии патогенов. Кроме того, они секретируют ряд противомикробных соединений (например, дефензины). Бактерии-комменсалы способны регулировать иммунный ответ слизистых оболочек кишечника и в некоторых случаях подавлять воспалительные, в том числе аллергические, реакции. Нарушение баланса микробиоты возникает в результате длительного или бесконтрольного лечения антибактериальными препаратами, при нарушении моторики ЖКТ (послеоперационный период, прием слабительных препаратов), мальабсорбции (хронический алкоголизм, хронический панкреатит) и при некоторых других состояниях. Дисбактериоз может приводить к развитию заболеваний ЖКТ и других органов. Так, в настоящее время получены данные о его роли в патогенезе болезни Крона, неспецифического язвенного колита и целиакии, а также синдрома хронической усталости и атопического дерматита.

Основной способ диагностики дисбактериоза – это микробиологический метод, при котором производят качественную и количественную оценку облигатных, условно-патогенных и патогенных микроорганизмов в кале. На основании результатов исследования делают вывод о дефиците облигатных микроорганизмов или об избыточном росте условно-патогенных или патогенных бактерий. Детальный лабораторный анализ – основа для эффективного лечения дисбактериоза.

Одним из перспективных методов терапии дисбактериоза является применение бактериальных смесей, содержащих бактерии-комменсалы, или дрожжевые грибы – пробиотики. Они защищают организм от избыточной условно-патогенной и патогенной микробиоты. Совокупность защитных свойств пробиотиков в отношении какого-либо микроорганизма называется антагонистической активностью и может быть определена с помощью микробиологического исследования. В ходе такого анализа оценивается антагонистическая активность основных используемых в гастроэнтерологической практике пробиотиков, что позволяет выбрать оптимальную комбинацию препаратов для каждого конкретного пациента.

Микробиологическое исследование – это один из наиболее специфических и чувствительных методов исследования, применяемых при диагностике дисбактериоза. Следует, однако, помнить, что бактериологический состав кала (он используется в качестве биоматериала) несколько отличается от бактериологического состава слизистой оболочки кишки. Кроме того, результат теста может зависеть от многих других факторов, таких как недавнее употребление антибактериальных препаратов, продуктов, богатых пробиотиками, или слабительных средств.

Результат анализа оценивают с учетом дополнительным лабораторных и инструментальных данных.

Для чего используется исследование?

Для диагностики и лечения дисбактериоза кишечника.

Когда назначается исследование?

При обследовании пациента после длительного курса лечения антибактериальными препаратами;
при обследовании пациента с указанием на бесконтрольный прием антибактериальных препаратов и слабительных средств в анамнезе;
при обследовании пациента с хроническим панкреатитом, хроническим алкоголизмом и другими состояниями, сопровождающимися мальабсорбцией;
при хронической диарее.

Введение. Острые кишечные заболевания новорожденных телят являются доминирующей единицей в нозологии болезней данных животных. Они распространены не только в Российской Федерации, но и за рубежом, при этом нанося значительный экономический ущерб [12, 13, 14, 16]. В подавляющем большинстве случаев причиной диарей является развитие дисбактериоза с преобладанием в составе кишечной микрофлоры бактерий из семейства Enterobacteriaceae [5, 7, 10, 11]. В этом случае заболевание приобретает характер смешанной кишечной инфекции, которой свойственно быстрое распространение, высокая заболеваемость, тяжёлое течение и сложность лечения [11, 12]. Тем не менее, при расшифровке этиологии диарей, по-прежнему основное внимание уделяется исключительно Escherichia coli, даже если одновременно с ней из патологического материала выделяются другие энтеробактерии, такие как энтеробактеры, цитробактеры, клебсиеллы, протеи, провиденсии, которые могут обладать сразу несколькими генетическими маркерами патогенности [1, 7]. И не смотря на это вопрос об этиологической значимости условно патогенныхэнтеробактерий остаётся открытым. В литературе, например, можно встретить, как утверждение о не способности клебсиелл обуславливать диарею [5], так и, напротив, о большом патогенном потенциале этих и других энтеробактерий, обеспечивающем их участие в развитии инфекционного процесса [1, 10].

Цель работы состояла в выявлении у наиболее часто выделяемых от телят при острых кишечных заболеваниях энтеробактерий некоторых факторов патогенности, способствующих развитию диареи.

Материалы и методы исследований. В представленной работе были использованы эпизоотические штаммы из числа наиболее часто выделяемых от телят на территории Краснодарского края при острых кишечных заболеваниях видов энтеробактерий, а именно Escherichia coli (89), Enterobacter cloacae (55), Klebsiella pneumoniae (46) и Citrobacter freundii (30). Наличие гемолитической активности (ГА) определяли на агаре Хоттингера с добавлением 7% крови барана, но без добавления глюкозы. Адгезивную активность микроорганизмов определяли по В.И. Брилис с соавт. [2] с использованием нативных эритроцитов кроликов. Величину адгезивной активности оценивали по индексу адгезии микроорганизмов (ИАМ). Обнаружение фимбрий общего типа (I тип, F1, MS пили) проводили с помощью манозочувс-твительной реакции гемагглютинации с эритроцитами морской свинки, для чего на предметном стекле смешивали равные объемы (по одной капле) 0,85% раствора NaCl, 5% взвеси эритроцитов и 1 миллиардной суспензии испытуемых клеток энтеробактерий. Параллельно ставили реакцию с аналогичными компонентами, но вместо 0,85% раствора NaCl использовали 1,5% раствор D-маннозы [6]. Антилизо-цимную активность (АЛА) выявляли на твёрдой питательной среде по А.В. Бухарину с соавт. [3]. Способность продуцировать экзотоксины выявляли в тесте отека лапы мыши используя 48 ч бульонные культуры, которые предварительно стерилизовали центрифугированием при 8000 об/мин в течение 60 мин [4]. Биометрическую обработку полученных результатов проводили, используя возможности программы MicrosoftExcel 2010.

Результаты и их обсуждение. Как показали собственные исследования и сообщения других авторов [9, 11, 12] на E. coli, E. cloacae, K. pneumoniae и C. freundii приходится более половины всех случаев выделения энтеробактерий из патологического материала от телят при диареях. Данное обстоятельство может косвенно свидетельствовать о наличии у E. coli, E. cloacae, K. pneumoniae и C. freundii определённого патогенного потенциала и антагонистических свойств, обеспечивающих им преимущество не только в отношениях с другой кишечной микробиотой, но и макроорганизмом.

В патогенезе развития микробной диареи лежат сложные взаимоотношения между микро- и макроорганизмом, реализация которых осуществляется в основном за счёт наличия у возбудителя способности к адгезии, мембраноатакующему и цитолитическому эффекту, а также способности противостоять факторам защиты хозяина [1].

Исследования, проведенные нами с эпизоотическими штаммами E. coli, E. cloacae, K. pneumoniae и C. freundii показали (табл. 1), что все они в той или иной степени обладают факторами патогенности, обеспечивающими им диареегенные свойства.

Таблица 1. аличие факторов патогенности у энтеробактерий, изолированных от телят при острых кишечных заболеваниях

K. pneumoniae (n=46)

Количество адге- зинпозитивных штаммов (%)

ИАМ, бактерий/ эритроцит

Количество штаммов с MSпилями(%)

Количество штаммов, обладающих-ГА(%)

Количество экзотоксинпродуцирующих штаммов(%)

Как оказалось, способностью прикрепляться к биологическим поверхностям обладало подавляющее большинство (65,5-83,1%) выделенных кишечных палочек, энтеробактеров, клебсиелл и цитро-бактеров, но активность прикрепления в среднем не превышала 4-х бактериальных клеток на одном эритроците, что характеризует изучаемые энтеробактерии как среднеадгезивные [2]. Большинство адге-зинактивных штаммов было среди E. ooli и K. pneumoniae, у которых показатель адгезивности и ИАМ составили, соответственно, 83,1% и 3,98±0,31, 78,3% и 3,33±0,34.

Известно, что прикрепление энтеробактерий к клеткам-хозяина обеспечивается как за счёт фимбриальныхтак и нефимбриальных факторов адгезии. Среди фимбриальных факторов различают общие фимбрии или MS пили и специфические фимбрии или MR пили [1, 15]. Несмотря на то, что к разряду патогенных эшерихий принято относить только те изоляты, которые обладают специфическими пилями (К88, К99, 987Р, F41 и другие), тем не менее, как установлено, варианты, Как оказалось, способностью прикрепляться к биологическим поверхностям обладало подавляющее большинство (65,5-83,1%) выделенных кишечных палочек, энтеробактеров, клебсиелл и цитробактеров, но активность прикрепления в среднем не превышала 4-х бактериальных клеток на одном эритроците, что характеризует изучаемые энтеробактерии как среднеадгезивные [2]. Большинство адгезинактивных штаммов было среди E. соП и K. pneumoniae, у которых показатель адгезивности и ИАМ составили, соответственно, 83,1% и 3,98±0,31, 78,3% и 3,33±0,34.

Результаты исследований показали, что MS пилями обладало 31,5% изолятов эшерихий, 25,5% энтеробактеров, 23,3% цитробактеров и 13% клебсиелл. Данное обстоятельство может свидетельствовать о том, что в процессе прикрепления изучаемых энтеробактерий к эукариотической клетке, доминирующую роль могут играть не MS пили, а другие факторы адгезии, в том числе нефимбриального происхождения.

Антилизоцимной активностью обладали практически все тестируемые штаммы энтеробактерий, однако у большинства из них АЛА находилась в пределах от 1 до 3 мкг/мл инактивированного лизоцима, что характеризовало их как низко- и среднеактивные [3]. Однако у 25-45% штаммов энтеробактерий АЛА была высокой и составляла 4-5 мкг/мл.Наибольшей способностью нейтрализовыватьлизоцим обладали эшерихии и клебсиеллы, АЛА которых была примерно одинаковой - 3,38 и 3,26 мкг/мл.Несмотря на то, что лизоцим активен в отношении грамположительных, а не грамотрицательных бактерий, последние,по всей видимости, инактивируя его, создают безопасную среду в кишечном тракте, органах и тканях для своих частых ассо-циантов - энтерококков и стрептококков [11, 12]. Кроме того, сам факт наличия способности у энтеробактерий разрушать гуморальные механизмы защиты макроорганизма свидетельствует об их болезне-творности.

К одним из патогенетических элементов развития кишечной инфекции, обусловленной энтеробактериями,относится продуцирование ими гемолизинов, оказывающих мембраноатакующее действие на клетки крови. Гемолизины представляют собой вещества белковой природы, которые при взаимодействии с эритроцитами формируют на их мембранной поверхности каналы благодаря которым в клетке нарушается ионное равновесие и прежде всего образуется переизбыток внутриклеточного Са2+, приводящего в конечном итоге к гибели клетки [1]. Считается, что продукция гемолизинов может так же рассматриваться как альтернативный механизм захвата Fe2+ из лизированных эритроцитов. Кроме того установлено, что при взаимодействии гемолизинпозитивныхэшерихий с полиморфноядерными лейкоцитами сопровождается выделением медиаторов воспаления, которые обуславливают увеличение сосудистой проницаемости [7].

Нами установлено, что наиболее выряженные гемолитические свойства были у E. соП и K. pneumoniae, штаммы которых в 42,7% и 34,8% случаях были гемолитически активны. Количество штаммов E. cloacae и C. freundii, дающих гемолиз на кровяномагаре, было практически в 2 раза меньше. В подавляющем большинстве случаев выделенные от телят тестируемые энтеробактерии давали а-гемолиз.

Если диареегенные механизмы гемолизинов энтеробактерий-до конца еще не ясны, то диареегенное действие их экзотоксинов не вызывает сомнения. Экзотоксины энтеробактерий по характеру специфического действия на клеточные структуры кишечника хозяина подразделяют на цитотонины и цитотоксины. Цитотонины не изменяют клеточные структуры, к ним относят термостабильный (ST) и термолабильный (LT) токсины, продуцируемые эшерихиями и другими энтеробактериями. Цитотоксины полностью разрушают энтероциты, к этому типу токсинов относят цитотоксический некротизирующий фактор (CNFI, II) и шигатоксин (STXI, II) [1, 8, 10].

Для индикации экзотоксинов в своих исследованиях мы использовали классический метод — модель отёка мышиной лапы, хотя изначально онбыл ориентирован на выявление только ST [4]. Однако в работе Н.В.Котковой [8] при сравнительном изучении ряда биотес-тов показано, что в тесте отёка мышиной лапы можно выявлять и другие экзотоксины E. ^li, в частности STX. В связи с чем, мы рассматривали данный метод как универсальный для выявления в целом способности продуцировать экзотоксины без их идентификации.

Результаты исследований показали, что количество токсинообразующих штаммов из числа тестируемых E. ^li, E. cloacae и K. pneumoniae было достаточно большим и находилось в пределах 30,443,8%, исключение составил C. freundii, среди данного вида только 13,3% штаммов продуцировали экзотоксины.

Таким образом, полученные данные позволяют констатировать о наличии выражен-ного патогенного потенциала у энтеробактерий циркулирующих на фермах крупного рогатого скота в Краснодарском крае. Доминирование среди значительного количества видов энтеробактерий, изолированных от телят при острых кишечных заболеваниях, именно E. той, E. cloacae, K. pneumoniae и C. freundii, по всей видимости, связано с их повышенной агрессивностью к эпителиальным клеткам хозяина и способностью противостоять его защитным механизмам. Наибольшее количество штаммов, обладающих различными патогенными свойствами, выявлено у эшерихий, что даёт основание считать их основной этиологической структурой в развитии кишечной инфекции у новорожденных телят. В тоже время распространенность среди энтеробактеров, клебсиелл и цитробактеров токсинообразующих вариантов даёт основание относить эти микроорганизмы к разряду этиологически значимых, и факт их присутствия в патологическом материале следует учитывать при разработке мероприятий при острых кишечных заболеваниях.

Резюме. Острые кишечные заболевания телят широко распространены на фермах различных стран мира. Часто в развитии диарей принимают участие ассоциации таких энтеробактерий, как эшерихий, энтеробактеров, клебсиелл и цитробактеров. При этом инфекционный процесс приобретает характер смешанной кишечной инфекции, для которой характерно быстрое распространение, высокая заболеваемость, тяжёлое течение и сложность лечения. Однако, если в отношении эшерихий этиологическое значение в развитии диарей не вызывает сомнений, то в отношении других энтеробактерий мнения не однозначные. В связи с этим целью исследований было выявление у эпизоотических штаммов Escherichia coli, Enterobacter cloacae, Klebsiella pneumoniae и Citrobacter freundii, выделенных от телят при острых кишечных заболеваниях на фермах Краснодарского края, некоторых факторов патогенности, способствующих развитию диареи. Было установлено, что среди Escherichia coli 83,1% штаммов обладали адгезивными свойствами, при этом у 31,5% адгезиныпред-ставлены общими пилями, количество гемолитических штаммов составило 42,7%, а экзотоксинпродуцирующих - 43,8%. Среди Enterobactercloacae количество штаммов, обладающих подобными свойствами, было - 65,5, 25,5, 23,6 и 41,8%; Klebsiellapneumoniae - 78,3, 13,0, 34,8 и 30,4%; Citrobacter freundii - 66,7, 23,3, 16,7 и 13,3%. Распространенность среди энтеробактеров, клеб-сиелл и цитробактеров вариантов, обладающих патогенными свойствами, даёт основание относить эти микроорганизмы к разряду этиологически значимых и факт их присутствия в патологическом материале следует учитывать при разработке мероприятий при острых кишечных заболеваниях.

Ключевые слова: телята, острые кишечные заболевания, диарея, энтеробактерии, Escherichia coli, Enterobacter cloacae, Klebsiella pneumoniae, Citrobacter freundii, штамм, патогенность.

Читайте также: