Вирус иммунодефицита крупного рогатого скота

Клиническая картина и патологоанатомические изменения. Кроме данных о проявлении клинических признаков болезни у коров, инфицированных ИД совместно с ВЛКРС, в настоящее время нет документального подтверждения об инфекции, вызываемой вирусом ИД (ВИД) у естественно инфицированных животных (21,22).

Патогенез. При определении отдельных видов лейкоцитов отмечали повышение уровня лимфоцитов, снижение нейтрофилов и частично моноцитов. В течение первых 2-х лет после экспериментального заражения ВИД наблюдали незначительное изменение количества и функциональных свойств моноцитов (16). Результаты этих опытов поддерживают гипотезу о способности BIV изменять функцию моноцитов in vitro при его достаточной концентрации и совпадают с выводами других авторов о том, что как и другие лентивирусы, может инфицировать макрофаги. Авторы установили тенденцию к угнетению фагоцитарной активности через 4-8 мес после введения АГ. ВИД активирует экспрессию BIV in vitro и может служить вирусным кофактором, способным усиливать репликацию BIV in vitro и, возможно, увеличивать патогенность последнего (9).

ВИД КРС впервые изолировали в США в 1969 г. от коров с персистентным моноцито- зом, прогрессирующей слабостью и истощением. Этот изолят был обозначен как R29 (20). Интерес к данному возбудителю возрос после выделения вируса иммунодефицита человека (ВИЧ, HIV). Название “иммунодефицитоподобный вирус КРС” предложил в 1987 г. М. A.Gonda (11,12). В настоящее время, согласно рекомендациям международного комитета по таксономии вирусов, возбудитель носит название “вирус иммунодефицита КРС” (8). Данные секвенирования и серологического анализа показали, что BIV принадлежит к семейству Retroviridae и роду Lentivirus. К последнему, помимо BIV и HIV, относятся вирусы инфекционной анемии лошадей (EIAV), висны и маэди овец (MW), артрита-энцефалита коз (CAEV), иммунодефицита кошек (FIV) и иммунодефицита обезьян (SIV). С помощью клонирования определена нуклеотидная последовательность провируса (10). Молекулярная биология вируса ИД КРС обладала многочисленными параллелями с ВИЧ (11).

Морфология и химический состав. По структуре генома, АГ- и эволюционным аспектам BIV занимает место в филогенетическом древе среди других лентивирусов (11).

Антигенная вариабельность и родство. Молекулярное клонирование R-29 и 2-х его клонов - R-29-127 и R-29-106 показало значительную структурную и генетическую гомологию между ВИД КРС и ВИЧ. Показано значительное генетическое сходство между BIV и вирусом болезни Джембрана (IDV) недавно открытого и относящегося к ретровирусам, вызывающего болезнь с острым летальным синдромом (4, 13). Степень гомологии нуклеотидных последовательностей и набора аминокислот между BIV и IDV составляет соответственно 74 и 76%, что обусловливает высокий уровень перекрестной активности между возбудителями.

Антигенная активность. В процессе инфекции, в основном, синтезируются АТ к 2 наиболее важным иммунодоминантньм белкам BIV: основному белку нуклеокапсида с мол.м. 26 кД (р26) и поверхностному гликопротеину 110 кД (gpllO). У коров, экспериментально инфицированных BIV, АТ к р26 выявляли к 14-му дню после заражения, уровень их достигал максимума через 6-8 нед. АТ к gpllO выявляли значительно позднее, максимальный уровень их регистрировали через много месяцев после заражения (21, 22).

Антисыворотка к р26 BIV перекрестно реагировала с р24 HJV-1, а антисыворотка к EJAV (анемия лошадей) обладала перекрестной активностью с р24 и р26 BIV (12, 21). BIV- специфические АТ реагировали с рекомбинантным белком вируса с мол.м. 53 кД (гр53). В препаратах нативного BIV содержание р26 значительно выше, чем gpl 10 (17,18,19).

Культивирование. Вирус HIV реплицируется в культуре клеток селезенки плода КРС, легких, тимуса, тестикул, почки с образованием синцития (2, 12). Он может инфицировать диплоидные и анеуплоидные клетки собаки, хорька и овцы. После 1969 г. R-29 многократно пассировали и легко адаптировали к росту в клеточной культуре тимуса собаки. Этот изолят многие ученые широко используют в качестве референтного штамма BIV.

Два новых изолята вируса выделили от BIV/BLV-серопозитивных коров во Флориде. Они отличались от референтного R-29 по репликации и степени формирования синцития в культуре клеток легких эмбриона КРС. Они имели 92,6-93,6% гомологии с нуклеотидной последовательностью клона R-29-127 (17,18,19).

Экспериментальная инфекция. У телят, зараженных R-29, вирус выделялся через 8 нед и в 2-х случаях спустя 12 нед после заражения. У всех животных регистрировали лим- фопролиферативную реакцию, которая выражалась в значительном увеличении лимфоузлов и умеренном лимфоцитозе, включая лимфопролиферацию и нейтропению без развития явных признаков болезни в течение короткого промежутка времени (6, 7). Эти же авторы при определении степени воздействия BIV на клетки иммунной системы in vivo с использованием различных тестов показали, что BIV ие вызывает иммуносупрессию и гистопатологиче- ские изменения в организме. При экспериментальном заражении коров полевьми изолята- ми BIV, выделенными во Флориде, регистрировали только незначительный лимфоцитоз (19). Аналогичные результаты получили Y. Browlie и др. (3). Ни у одного животного, в организме которых более 3-х лет присутствовал BIV, авторы не наблюдали развития клинических признаков болезни после их экспериментального заражения. Они сделали вывод о том, что невозможно ожидать проявления патогенного действия BIV до окончания инкубационного периода, который может составлять 3-5 лет.

В настоящее время нельзя считать BIV патогенньм агентом для человека. Он не инфицирует клетки С8166 (наиболее чувствительные для HIV-1, HIV-2, SIV) и не вызывает ЦПД.

Попытки инфицировать вирусом первичные клеточные культуры человека оказались неудачными. При исследовании сыворотки крови от HIV-инфицированных пациентов перекрестная активность АТ к HIV с BIV-специфическими АГ отсутствовала. У сотрудников лабораторий, имевших повреждения кожи при работе с BIV-материалом, АТ не обнаружили. ЭПИЗООТОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ

Источники и пути передачи инфекции. Механизм передачи BIV не изучен, возможно он подобен таковому у HIV, который передается горизонтально и вертикально. Установлено, что BIV, как и HIV сохранялся в сперме инфицированных быков-производителей при криоконсервации и, вероятно, поражает коров при искусственном осеменении (14,15). Эти же авторы, используя ПЦР, выявили BIV в лимфоцитах крови и молока, что, возможно, способствует инфицированию телят секретами молочной железы (1).

У молочных коров в Миссисипи зарегистрировали взаимосвязь между возрастом и процентом серопозитивных животных (5). 20% коров исследованного молочного стада в возрасте 3-4 лет являлись BIV-серопозитивными, причем, с возрастом количество их увеличивалось и достигало 50% (в группе до 6 лет), 60% (старше 6 лет) и 70% (7-10 лет) от числа обследованных. При этом у серопозитивных животных 3-4-летнего возраста общее количество лейкоцитов было в норме и уменьшалось у аналогичных коров в возрасте 7-10 лет. ДИАГНОСТИКА

В настоящее время широко используют высокочувствительные и специфические диагностические тесты, направленные на идентификацию BIV или выявление АТ к нему. К первым относится ПЦР, ко вторым - иммуноблоттинг, непрямые варианты ИФА и ИФ. BIV- антигены, в отличие от антигенов других представителей лентивирусов, не взаимодействуют со специфическими АТ в реакции преципитации. Выделение BIV, его структурное и генетическое сходство с HIV затрагивает вопрос о его роли в патологии животных и человека.

Считать BIV патогенным пока преждевременно, хотя возможно, что BIV, подобно HIV и другим лентивирусам, может вызывать заболевание у инфицированных животных. В то же время BIV может играть и незначительную роль в патологии КРС или быть сопутствующим фактором, усиливающим клиническое проявление других болезней, например лейкоза (табл. XI. 10.).

С помощью ПЦР амплифицирован фрагмент в 235 пар оснований высококонсервативного участка гена pol вируса ИД КРС при использовании ДНК лейкоцитов крови и молока серопозитивных коров. Амплификации этого фрагмента не отмечали у серонегативных коров. Эти данные подтверждают наличие и возможность идентификации ВИД КРС в молоке и указывает на потенциальную возможность лактогенной его передачи (15).

ИММУНИТЕТ И СПЕЦИФИЧЕСКАЯ ПРОФИЛАКТИКА Не изучены.

1.Федоров Ю.Н. и др. Ветеринария, 1996, 10 :17. 2.Boulant А.М.Р. et.al. Res Virol, 1989 :140. 3.Brownlie J. et.al. Vet Rec., 1994, 134 :12. 4.Chadwick B.J. et.al. J Gen Virol, 1995 :76. 5.CyrCoast K. St. et.al. Vet Microbiol., 1994, 42 :2. ?.Carpenter S. et.al. J Virol, 1992 :66. 7.Flaming K. et.al. Vet Imm Imm path, 1993 :36. 8.Francki R.I.B. et.al. Arch Virol., 1991

:2. 9.Geng Y. et.al. Virol, 1992 :187. lO.Corvey K.J. et.al. Virol., 1990 :175. U.Gonda M.A. et.al. Food Microbiol, 1994, 2 :149. 12.Gonda M.A. et.al. Nature, 1987, 330. 13.Kertayandya G. et.al. J Gen Virol., 1993 :74. 14.Nash J.W. et.al. Am J Vet Res, 1995, 56 : 5. 15.Nash J.W. et.al. Am J Vet Res, 1995, 56, 4 :445. l?.Rovid A.H. et.al. Vet Imm Immunopath, 1995, 45 :1. 17.Suares D.L. et.al. J Virol, 1993, 67 :8. 18.Suares D.L. et.al. Am J Vet Res, 1995, 56 :55. 19.Suares D.L. et.al. Am J Vet Res, 1995, 56 :5. 20.VanDer Maaten M.J. et.al. J Nath Cancer Inst, 1972 :49. 21.Whetstone C.A. et.al. Arch Virol, 1991 :116. 22.Whetstone C.A. et.al. J Virol, 1990 :64. Таблица XI. 10. Сравнительная характеристика лейкоза и

иммунодефицитоподобного заболеваний КРС Показатели Bovnie leukemia virus - Вирус лейкоза КРС (BLV) Bovine immunodeficiency like virus Иммунодефицитоподобный вирус КРС (BIV) Открытие вируса Имеются сообщения нескольких авторов в 50-60-е гг., а в первые убедительно показали Miller S. М. с соавт. (1969,США) с помощью электронной микроскопии Van Der Maaten M. S. (1970,США) изолировал вирус от 8-летней коровы с персистентным лимфоцитозом и прогрессирующим истощением Локализация вируса Переферическая кровь, лимфоидная ткань по всему организму Периферическая кровь, лимфоидная ткань по всему организму Патогенез инфекции при экспериментальном заражении Геном BLV в виде ДНК-копии инкорпорируется в клеточный геном, при перси- сгирующим лимфацигозе такая интеграция наблюдается в 25-40% случаях популяции лимфоцитов крови; при опухолевой форме заболевания - вовлекается большинство лейкоцитов и клеток лимфатических узлов. Большинство животных остаются вирусо- и АТ- носителями, у трети развивается персистентный лимфоцитоз. У 0,1-1% животных развивается опухолевый процесс с характерными признаками BIV вызывает персистентную инфекцию с различным уровнем АТ- ответа, начиная с 2-4 нед после заражения. Вирус изолируется из периферической крови и некоторых паренхиматозных органов. При эксперемен- тальном заражении наблюдается увеличение количества лейкоцитов, фолликулярная гиперплазия в лимфоузлах и селезёнке. Ряд авторов показывает на снижение показателей клеточного иммунитета. Морфология под электронным микроскопом Зрелый вирион BLV имеет центрально расположенный электоронио-плотный нуклеотид диаметром 40-90 нм. Внешняя вирусная оболочка представлена 2-контурной мембраной, отделённой от сердцевины просветлённым пространством. В среднем диаметр BLV составляет 100 нм. Незрелые экстрацеллюлярные частицы размером 80-130 им, с электронносветлым центром и двойной элеюрон- ной мембраной 17-22 нм. В процессе созревания, вирус BIV КРС конденсируется и оделяется от оболочки электронно-светлым пространством Тропизм, локализация В-лимфоциты Лимфоциты, возможно макрофаги Длительн. персистенции Пожизненная Пожизненная Клинические признаки Различают: 1) предлейкозное состояние; 2) начальную (доклиническую) стадию; 3) развёрнутую (клинико-гаматологическую) стадию; 4) конечную или терминальную (опухолевую) стадию. Гиперплазия лимфоузлов, значительная лимфоцитарная инфильтрация в тканях головного мозга, лимфодено- патия, слабость, истощение. Г ематологические признаки - абсолютное количество лимфоцитов возраст 2-4 4-6 от 6 Подозр.

8 Повышенное количество лейкоцитов.

(12 -18 тыс/мкл) Количество сероположительных животных, % легальности 13-52% сероположительных животных в неблагополучных по лейкозу стадах. У 0,5-5% развивается опухолевая форма 4-16% сероположительных животных в странах с развитым животноводством. Пути выделения, передача вируса Присутствует в лейкоцитах молока и молозива инфицированных коров. Основной путь передачи - ятротенный. Имеет место передача вируса через плаценту, а также с молоком и молозивом. Предположительно во многих параметрах сходны с BLV. Лабораторная диагностика РСК, РИФ, РИП, ELISA и др. Но наиболее распространённой в практике стала РИД ELISA с различными видами антигена, иммуноблот, РИФ. Штаммы, изоляты Клеточно-ассоциированный nrr. FLK- BLV (США) R-29 (США, штат Айова) FL-491 (США, штат Флорида) Культивирование BLV может инфицировать in vitro клетки КРС и мелкого рогатого скота, человека, обезьяны, лошади, летучей мыши, линию клеток FLK-BLV и ТЭК-МВА, 76 (тимус эмбриона коровы) Первичные культуры клеток эмбриона коровы - лёгкого, селезёнки, роговицы, клеточные линии других животных - тимус собаки, эпидермальные клетки плода кролика

Вирус инунодифицита крс

ВИРУС ИММУНОДЕФИЦИТА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА:
ХАРАКТЕРИСТИКА И РОЛЬ В ПАТОЛОГИИ

Городской научно-методический центр по диагностике и
профилактике болезней человека и животных

Вирус иммунодефицита крупного рогатого скота (BIV) впервые выделили от коровы с персистентным лимфоцитозом, лимфоидной гиперплазией, нейропатией, прогрессирующей слабостью и истощением в США в 1969 г. Этот изолят обозначили как R29 (M.J. Van Der Maaten et al., 1972). Он индуцировал образование синцития в культуре клеток, структурно подобен вирусу меди-висна овец и был назван как висна-вирус крупного рогатого скота. Авторы установили, что у зараженных BIV R29 телят возбудитель выделялся через 8 нед и в 2 случаях - спустя 12 нед после инфицирования. При этом у всего молодняка отмечали лимфопролиферативную реакцию, которая выражалась в значительном увеличении лимфатических узлов и умеренном лимфоцитозе. Эти исследо-вания показали 2 характерных признака, типичных для острых лентивирусных инфекций: выраженное влияние на иммунную систему и персистенцию возбудителя.

Интерес к этому вирусу возрос после выделения возбудителя иммунодефицита человека (HIV), так как возникла острая необходимость получения модели животного для его изучения. Молекулярное клонирование изолята вируса R29 и 2 клонов, происходящих от R29 (R29-127, R29-106), показало значительную структурную и генетическую гомологию между BIV и HIV (K.J. Garvey et al., 1990; М.А. Gonda et al., 1994).

Название иммунодефицитоподобный вирус крупного рогатого скота предложили М.А. Gonda etal. (1987). В настоящее время согласно рекомендациям Международного комитета по таксономии вирусов он носит название вирус иммунодефицита крупного рогатого скота (R.I.B. Francki et al., 1991). Данные секвенирова-ния и серологического анализа показали, что BIV принадлежит к семейству Retroviridae и роду Lentivirus, к которому помимо BIV и HIV относятся вирусы: инфекционной анемии лошадей (EIAV), меди-висна овец (MW), артрита-энцефалита коз (CAEV), иммунодефицита кошек (FIV) и иммунодефицита обезьян (SIV). С помощью клонирования определили нуклеоти-дную последовательность провируса (K.J. Garvey et al., 1990). Возбудитель реплицируется в клетках селезенки плода крупного рогатого скота, легких, тимуса, тестикул, почки и образует синцитий (М.А. Gonda et al., 1987). BIV может инфицировать диплоидные и анеоплоидные клетки собаки, хорька и овцы (A.M.P. Bou-illantetal., 1989).

G. Kertayadnya et al. (1993) и B.J. Chadwick et al. (1995) показали значи-тельное генетическое сходство между BIV и недавно открытым вирусом болезни Джембрана (JDV), относящегося к ретро-вирусам и вызывающего заболевание с острым летальным синдромом. Степень гомологии нуклеотидных последовательностей и набора аминокислот между BIV и JDV составляет 74 и 76 % соответственно, что обусловливает высокий уровень пере-крестной активности между данными возбудителями. Используя моноклональ-ные антитела, установили, что вирус иммунодефицита крупного рогатого скота содержит один уникальный эпитоп в кап-сидном белке (молекулярная масса 29 кДа), который отсутствует у возбудителя болезни Джембрана. Последующее эпитопное картирование и химический анализ показали, что он расположен в зоне 6,4 кДа N-концевой части капсидного белка (L Zheng et al., 2001). Моноклональ-ные антитела, полученные к этому эпитопу, позволяют дифференцировать эти 2 близкородственные лентивируса.

Изолят BIV R29 был многократно пассирован и легко адаптирован к росту на клеточной культуре тимуса собаки. Он стал широкодоступным, и многие ученые используют его в качестве референтного штамма BIV. При экспериментальном заражении им крупного рогатого скота он сохраняет антигенную и генетическую стабильность длительное время (S. Carpenter et al., 2000). Аттенуация BIV R29 и последующие многократные пассажи на клеточных культурах могут сглаживать клинические признаки у экспериментально зараженного им крупного рогатого скота. Клиническое проявление болезни в стадах с высокой инцидентностью серопозитивно-сти к BIV свидетельствует о том, что полевые изоляты вируса могут быть более патогенными, чем адаптированный к культуре клеток BIV R29. Телята, экспериментально инфицированные полевым изоля-том BIV FL112, проявляют более выраженный лейкоцитоз и высокий уровень репликации вируса in vivo по сравнению с таковыми, зараженными BIV R29 (D.L Suarez et al., 1993; S. Carpenter etal., 2000).

Первое сообщение о 2 новых изолятах вируса FL112 и FL491 сделали D.L. Suarez etal. (1993). Их выделили от BIV/BLVсеро-позитивных коров во Флориде, и они отличались от референтного штамма BIV R29 по репликации и степени формирования синцития в культуре клеток легких плода крупного рогатого скота. Оба изолята идентифицировали как BIV методами иммунофлюоресценции, иммуноблоттин-га, ПЦР, и они имели 92,6 - 93,6 % гомологии с нуклеотидной последовательностью BIV клона R29-127.

Серологические исследования крупного рогатого скота, проведенные в разных странах, показали, что BIV имеет довольно широкое распространение. Установлено, что серопозитивные животные в США составляют 4 % (J.V. Black, 1989), в Нидерландах - 1,4 (М. Horzinek et al., 1991), в Канаде - 5,5 (W.B. McNab et al., 1994), в Германии - 6,6 (A. Muluneh, 1994), во Франции - 4 % (В. Polack et al., 1996).

Кроме этих стран BIV зарегистрирован в Англии, Швеции, Италии, Корее, Коста-Рике, Венесуэле, Новой Зеландии, Австралии, Пакистане, Камбодже (у крупного рогатого скота и буйволов), Индонезии, Бразилии (S. Meas et al., 2002), Японии (Т. Usui et al., 2003), Турции (S. Meas et al., 2003), Замбии (S. Meas et al., 2004). Методами молекулярной биологии установлено, что изолят BIV, выделенный в Замбии, гомологичен американскому штамму BIV R29 на 98,0 - 100 % и на 97,0 -99,0 % изоляту из Японии. Бразильский изолят оказался на 98,0 - 100 % гомологичен штамму BIV R29 и на 97,0 - 99,0 % японскому изоляту. Серопозитивность у здорового крупного рогатого скота составляла 1 - 7 %, однако в отдельных стадах у животных с хроническими болезнями она достигала 30 - 50 %. С.А. Whetstone et al. (1990) установили, что из 64 % BlV-cepo-позитивных животных с лимфосаркомой, лимфоаденопатией и другими нарушениями 74 % были инфицированы BLV. По-видимому, отмеченные клинические признаки являлись следствием BLV- инфекции. T.G. Snider et al. (2003) отмечали у коров голштинской породы, естественно инфицированных вирусом иммунодефицита крупного рогатого скота, снижение массы тела, поражение центральной нервной и лимфоидной системы (лимфоидная фолликулярная гиперплазия и дисплазия лим-фатических узлов и другие изменения), множественные бактериальные инфек-ции. Однако все эти изменения нельзя связывать только с инфицированием BIV. Не установлена породная зависимость чувствительности к BIV крупного рогатого скота и буйволов, изоляты BIV от разных пород при анализе аминокислотных последовательностей в геноме не имели различий (S. Meas et al., 2001). Вместе с тем филогенетический анализ показал, что генотип американских и азиатских изолятов BIV несколько отличается.

Механизм передачи BIV не изучен, но, возможно, он подобен таковому у HIV, который передается по горизонтали и по вертикали. J.W. Nash etal. (1995) показали, что BIV, как и HIV, сохраняется в сперме при криоконсервации и существует воз-можность заражения коров от инфицированных быков-производителей при искусственном осеменении. Используя ПЦР, эти же авторы выявили BIV в лим-фоцитах крови и молока, предполагая возможность инфицирования телят секретами молочной железы. СМ. Gradil et al. (1999) при экспериментальном заражении 3 быков 18 - 24-месячного возраста клеточной суспензией, содержащей BIV FL112, обнаружили у них антитела через 17 дней после инфицирования, уровень которых достигал максимума спустя 37 -58 дней. Вирус выделили из мононуклеар-ных клеток периферической крови у 2 осо-бей через 9 дней после заражения и у 1 - спустя 23 дня. Методом ПЦР вирус обнаружили у этих 3 быков, начиная с 9-го и до 98-го дня после заражения.

Возможность вертикального пути передачи возбудителя иммунодефицита крупного рогатого скота изучали у естественно инфицированных коров с использованием ПЦР (С.А. Moody et al., 2002). Трансплацентарную передачу BIV установили у 6 из 22 телят (27 %), возможен и лактогенный путь передачи вируса. Вертикальный путь передачи BIV и BLV оценивали в стадах крупного рогатого скота, где серопозитивность составляла 17,0 и 36,1 % соответственно и 9,0 % коров были инфицированы обоими вирусами (S. Meas et al., 2002). После рождения всех телят отделяли от матерей до приема молозива и исследовали на наличие возбудителей с использованием ПЦР и образования синцития. Телята от BLV-инфицированных матерей не содержали вируса. После получения молозива и молока они также оставались отрицательными на наличие этого возбудителя. Другой молодняк, рожденный от BLV-положительных матерей, получал молозиво от BLV- отрицательных или пастеризованное молозиво от BLV-положительных коров. Весь он также оставался BLV-отрицательным, что свидетельствовало об отсутствии трансплацентарной передачи вируса. Телята от BIV- и BLV-положительных коров содержали BIV, что подтверждает трансплацентарную передачу вируса иммунодефицита крупного рогатого скота. После получения молозива новорожденные телята становились BLV-положительными. Эти данные показывают, что BIV может передаваться потомству внутриутробно, a BLV - через молозиво и молоко матерей одновременно инфицированных BIV и BLV

К. St. CyrCoats et al. (1994) установи-ли взаимосвязь между возрастом и процентом серопозитивности у молоч-ных коров в Миссисипи. Авторы обнаружили, что 29% коров исследованного молочного стада 3 - 4-летнего возраста были BIV-серопозитивными, причем количество таких животных с возрастом увеличивалось и достигало 50% в группе коров старше 5 лет, 60% - старше 6 лет и 70% - 7 - 10 лет. При этом у серопозитив-ных животных 3 - 4-летнего возраста общее количество лейкоцитов было в норме и уменьшалось с возрастом. Отмечали также повышение количества лим-фоцитов и снижение уровня нейтрофилов и частично моноцитов. На незначительное изменение числа моноцитов и их функциональных свойств в первые 2 года после экспериментального заражения BIV указывали А.Н. Rovid et al. (1995). Результаты их опытов поддерживают гипотезу о том, что BIV может изменять функцию моноцитов in vitro при его достаточной концентрации и совпадают с выводами М. Onuma et al. (1992), отмечавшими, что BIV, как и другие лентивирусы, может инфицировать макрофаги. Авторы установили тенденцию к угнетению фагоцитарной активности через 4-8 мес после введения антигена. Y. Geng et al. (1992) отмечали,что герпесвирус крупного рогатого скота 1-го типа (возбудитель инфекционного ринотрахеита) акти-вирует экспрессию BIV in vitro и может быть вирусным кофактором, способным усиливать репликацию BIV in vivo и, возможно, увеличивать его патогенность. Несмотря на то, что некоторые патологические изменения присутствуют у животных, инфицированных BIV, включая дис-функцию моноцитов, энцефалопатию и лимфоаденопатию, детальный патогенезу инфицированного крупного рогатого скота остается неясным. У серопозитив-ных животных наблюдают снижение массы тела, молочной продуктивности, развитие вторичных заболеваний, но нет прямых данных, что BIV вызывает эти симптомы у естественно инфицированных животных.

Во многих случаях они связаны с присутствием других факторов, включая инфицирование вирусом лейкоза крупного рогатого скота, который может вызывать лимфоидные опухоли и персистентный лимфоцитоз, при этом животные остаются гематологически и клинически здоровыми.

В 10 округах одного из штатов Японии из 390 здоровых коров 43 (11,0%) оказались BIV-положительными, 13(3,3%) BLV-положительными и только 1 (0,3%) была BIV- и BLV-положительной. При этом BIV-инфицирование коров установили в 9 из 10 округов с серопозитивностью 0 - 25%. В 2 стадах, где регистрировали энзоотический лейкоз крупного рогатого скота, двойное инфицирование выявили соот-ветственно у 4,5 и 1,8 % животных. Относительно высокий процент BIV-инфициро-вания (18,7%) установили у BLV-инфици-рованного крупного рогатого скота по сравнениию с 11,0% BIV-инфицирования при исследовании случайных проб, где 3,3% животных были BLV-положительны-ми (I Usui et al., 2003). Можно предположить, что BIV-серопозитивность увеличивается у BLV-инфицированного крупного рогатого скота. Однако для такого заключения необходимы широкомасштабные серологические и молекулярно-биологические исследования с детальными дли-тельными эпидемиологическими наблю-дениями.

Многие исследователи, определяя специфические антитела к BIV, изучали характер иммунного ответа и роль разных вирусных белков в его формировании. Так, с помощью иммуноблоттинга было установлено, что в процессе инфекции антитела синтезируются главным образом к 2 наиболее важным иммунодоминантным белкам BIV: основному белку нуклеокапсида с молекулярной массой 26 кДа (р26) и поверхностному гликопротеину с молекулярной массой 110 кДа (др110). У коров, экспериментально инфицированных BIV, антитела к р26 выявляли к 14-му дню после заражения, и их уровень достигал максимума через 6-8 недель. Антитела к др110 регистрировали значительно позднее, и их максимальный уровень фиксировали через много месяцев после заражения (С.А. Whetstone et al., 1990). Антисыворотка к BIV p26 перекрестно реагировала с р24 HIV-1, а антисыворотка к EIAV обладала перекрестной активностью с р24 и р26 BIV (M.A. Gonda et al., 1987; С.А. Whetstone et al., 1991). BIV- специфические антитела реагировали с рекомбинантным белком вируса с молекулярной массой 53 кДа (гр53). Изучая динамику антителообразования к пептидам трансмембранного гликопроте-ина BIV у телят, зараженных изолятом BIV FL112, специфические антитела обнаруживали через 4 нед после заражения, и максимального уровня они достигали между 10-й и 30-й неделями, сохраняясь у большинства особей в течение 50 нед наблюдения (L Scobie et al., 1999).

D.L Suarez et al. (1995) с помощью иммуноблоттинга и ПЦР показали, что в препаратах нативного BIV содержание р26 значительно выше, чем др110. Поэтому иммунный ответ на р26 значительно сильнее и продолжительнее (антитела в высоком титре обнаруживали в сыворотке крови гипериммунизированных коров через 302 дня после последнего введения антигена), чем на др110. Превышение количества нуклеокапсидных белков над таковым поверхностных гликопротеинов характерно для всех представителей лен-тивирусов, в том числе и для HIV.

В настоящее время разработали и широко используют ряд высокочувствительных и специфичных диагностических тестов, направленных на идентификацию BIV или на выявление антител к нему. К ним относятся: ПЦР, иммуноблоттинг, непрямые варианты ИФА и иммунофлюо-ресценции. В отличие от антигенов других представителей лентивирусов BIV-ан-тигены не взаимодействуют со специфическими антителами в реакции преципитации.

Чтобы установить потенциальную роль BIV в заболевании крупного рогатого скота, необходимы широкомасштабные и длительные (учитывая инкубационный период) исследования, число которых в настоящее время ограничено. Поэтому пока преждевременно считать BIV патогеном, хотя можно предположить, что ВIV, подобно HIV и другим лентивирусам, может вызывать заболевание у инфицированных животных. В то же время BIV может играть и незначительную роль в патологии крупного рогатого скота или быть сопутствующим фактором, усили-вающим клиническое проявление других болезней, например таких, как лейкоз. Кроме работ С.А. Whetstone et al., 1990 и Luther, pers.commun., 1993, в которых говорится о проявлении клинических признаков болезни у коров, инфицированных BIV совместно с BLV, в настоящее время нет подтверждения об инфекции, вызываемой BIV у естественно инфици-рованных животных. Экспериментальное заражение телят штаммом BIV R29 или его клонами вызывало незначительные изменения лейкоцитов, включая лимфопролиферацию и нейтропению, без развития клинических признаков заболевания в течение короткого промежутка времени (S. Carpenter etal., 1992; K.R Flaming et al., 1993). Эти же авторы при определении степени воздействия BIV на клетки иммунной системы in vivo с использованием различных тестов показали, что BIV не вызывает иммуносупрес-сию и гистопатологические изменения в организме. При экспериментальном заражении коров полевыми изолятами BIV, выделенными во Флориде, наблюдали только незначительный лимфоцитоз (D.L. Suarez et al., 1993). Аналогичные результаты получили J. Brownlie et al. (1994), которые отмечали, что, несмотря на то, что BIV присутствует в организме крупного рогатого скота более 3 лет, ни у одного животного, по их наблюдениям, не развивалось клинического синдрома после экспериментального заражения. Вместе с тем они считают, что нереально ожидать проявления пато-генного действия BIV до окончания инкубационного периода, который может составлять 3-5 лет. При исследовании 60 сероположительных и 60 серонегатив-ных коров по отношению к BIV S. Cavirani et al. (1998) не установили различий в количественной характеристике лейко-цитов в периферической крови. R. Walder et al. (2001) при заражении кроликов BIV изучали его тропизм к лимфоидным и нелимфоидным тканям, оценивая репликацию вируса, его дессиминацию и распределение в лимфоидных, нелимфоидных тканях и тканях, ассоциированных со слизистыми оболочками. Результаты исследований показали, что BIV, лентивирус с генетическим родством к HIV, вызывает клинические (анорексия, потеря веса, диарея, гипоалгезия, кривошея), иммунологические (дисфункция Т-и В-клеток) и гистопатологические (лимфаденопатия, спленомегалия) изменения, природа которых близка таковым, установленным при лентивирусных инфекциях у кошек (FIV), обезьян (SIV) и человека (HIV). Эти эксперименты свидетельствуют о том, что вирус иммунодефицита крупного рогатого скота индуцирует синдром спленомегалии и лимфаденопатии, который ассоциируется с нарушением функции иммунной системы и способностью вируса реплицироваться на слизистых поверхностях организма кроликов. Все это подчеркивает важность использования системы взаимодействия организма кролика с вирусом как хорошую мелкую модель для изучения ретровирусов, индуцирующих AIDS, и возможность ее использования для оценки профилактических и терапевтических антиретровирусных агентов применительно к HIV-1, а также изучения механизмов феномена лекарственной устойчивости.

В настоящее время нет оснований рассматривать BIV как потенциальный патоген для человека. Он не инфицирует С8166 клетки (наиболее чувствительные клетки для HIV-1, HIV-2, SIV) и не вызывает цитопатического действия. Попытки инфицировать вирусом первичные клеточные культуры человека оказались неу-дачными. При исследовании сывороток крови от HIV-инфицированных пациентов отсутствовала перекрестная активность антител к HIV с BIV-специфическими антигенами. Не обнаружены антитела и у сотрудников лабораторий, имеющих повреждения кожи при работе с BIV-матери-алом. Таким образом, можно сказать, что BIV не представляет опасности для здо-ровья человека.

Структура генома, антигенные и эво-люционные аспекты BIV хорошо охарактеризованы, подобно остальным представителям рода, и установлено, что BIV твердо занимает место в филогенетическом древе среди других лентивирусов (М.А. Gonda, 1992).