Вакцина для коров от вирусов

А.В. Олейник , кандидат биологических наук, технический консультант компании "Интервет"

Впервые на российском рынке появилась живая маркерная вакцина против ИРТ, производства компании Интервет. Вакцина Бовилис IBR marker изготовлена из аттенуироваиного генетически маркиро­ванного штамма GK/D вируса BHV-1, культивируемого на культуре клеток почек телят.

Это революция в профилактике крупного рогатого ско­та против ИРТ. Полная защита животных от клинических проявлений болезни, а также возможность контроля поле­вой инфекции делает данную вакцину самым эффективным средством, на сегодняшний день, в борьбе с инфекцион­ным ринотрахеитом К PC.

Вакцина не вызывает выработку антител к гликопро-теину BHV-1 типа Е, содержащемуся в эпизоотических штаммах ИРТ. Это позволяет дифференцировать инфици­рованных полевым вирусом BHV-1 от вакцинированных животных.

Вакцина Бовилис IBR marker формирует 4 рубежа за­щиты.

1. Иммунитет местный неспецифический.

После интраназальной вакцинации на поверхности каждой клетки эпителия респираторного тракта образуется слой интерферона, препятствующий проникновению любо­го вируса внутрь клетки. Срок формирования такого имму­нитета - несколько часов.

2. Иммунитет местный специфический.

Через 48-96 ч после местного применения вакцины, вслед за продукцией интерферона образуются секретор­ные иммуноглобулины (антитела) класса IgA. Данные ан­титела являются специфичными и связывают вирус ИРТ, попадающий в дыхательные пути, а также предотвращают повторную инфекцию.

3. Напряженный клеточный иммунитет - формирует­ся в полном объеме как при интраназальном, так и при внутримышечном способе введения вакцины. Клеточный иммунитет - это важнейшее звено специфической проти­вовирусной защиты, которая возникает при иммунизации живыми аттенуированными вакцинами.

4. Гуморальный иммунитет - образование иммуногло­булинов классов IgM и IgG выражается в нарастании титра антител, способных препятствовать репликации и проник­новению в клетку вирусных тел, находящихся в кровяном русле.

Стратегия применения вакцины

Для снижения и предотвращения циркуляции полево­го вируса вакцинируют одновременно всех животных в хо­зяйстве, начиная с 14 дневного возраста.

Телят до 3 месячного возраста прививают интрана-зально, с повторной вакцинацией через 3,5-4 мес. Пов­торную вакцинацию можно проводить как интраназально, так и внутримышечно. Животных старше 3-х месяцев, в том числе стельных и (или) лактирующих коров, быков-произво­дителей вакцинируют однократно внутримышечно или ин­траназально. Ревакцинацию проводят каждые 6 месяцев. При любом способе вакцинации, независимо от возраста и веса животного доза составляет 2 мл (при интраназальном способе - по 1 мл в каждую ноздрю). Напряженный имму­нитет у животных после вакцинации формируется на 4 день после интраназального и на 7 день после внутримышечно­го введения.

Таким образом, прививая все поголовье, животные не заболевают ринотрахеитом или пустулезным вульвовагини-том и, как следствие, прекращается выделение полевого вируса в окружающую среду.

Вторая схема предполагает одну интраназальную вак­цинацию телятам в возрасте от 14 дней до 1 месяца. В дан­ном случае не происходит оздоровления стада от ИРТ, но экономические потери резко снижаются за счет формиро­вания активного иммунитета у телят в самом восприимчи­вом к инфекции возрасте (1,5-4 мес).

Наличие маркера в вакцине позволяет отличать вак­цинные антитела от таковых на полевой вирус. Тест-системы для определения антител к маркерным вакцинам выпуска­ет компания IDEXX- один из мировых лидеров в производс­тве диагностикумов. Исследуя сыворотки крови животных, ветеринарный врач получает информацию о соотношении животных-вирусоносителей и неинфицированных особей, а также о напряженности гуморального иммунитета после вакцинации. Такие данные позволяют судить о распростра­ненности инфекции в хозяйстве, динамики оздоровления и эффективности вакцинации.

Скорость оздоровления стада при использовании мар­керной вакцины зависит от множества факторов, таких как частота и качество дезинфекций, скорости обновления ста­да, ввоза животных из других хозяйств и т.д.

Получение отрицательных результатов исследований в. течении года по всему стаду на наличие полевой инфекции ИРТ, вызванной герпесвирусом BHV-1 позволяет считать данное хозяйство "теоретически" благополучным. В таком хозяйстве не могут произойти ни спорадические ни массо­вые случаи заболевания, также в данном стаде не выделя­ется полевой вирус в окружающую среду, но тем не менее возможно серологически скрытое латентное наличие виру­са у единичных животных. На таком уровне ликвидации рекомендуется перейти на применение инактивированной маркерной вакцины Bovilis IBR marker inac.

Получение в течение 5 лет отрицательных серологи­ческих результатов на BHV-1 gE, свидетельствует о факти­ческом искоренении инфекции.

Да (в случае микоплазмы)

Источник: презентация Пирет Калмус. XII Международный молочный конгресс, 5−6 марта, 2019

Вакцинация против респираторно-синцитиального вируса

Если респираторно-синцитиальный вирус вызывает заболевание у маленьких телят (нашли вирус или увидели изменения в сыворотке крови), то прежде всего ограничьте передачу вируса в стаде и уменьшите инфекционное давление. Источником инфекции могут быть коровы, поэтому телят следует отделить от них сразу после отела. В случае заболевания ежедневно измеряйте температуру тела всех телят, хотя это и требует много времени. Как правило, быстро наслаивается вторичная бактериальная инфекция, и практически всегда на респираторно-синцитиальный вирус. Поэтому нужно немедленно лечить больных телят антибиотиками и начать программу вакцинации после того, как все возможные условия содержания улучшены. Очень важное время вакцинации. Телят необходимо иммунизировать как можно раньше — на четвертый-пятый день жизни. Обязательно читайте инструкцию к вакцине. Важно знать, как быстро происходит иммунный ответ, как долго длится иммунная защита.

Материнский иммунитет тормозит развитие активного иммунитета при системной вакцинации. Цель состоит в том, чтобы повысить концентрацию уровня IgA слизистой оболочки. В Эстонии в этот период используют интраназальные живые вакцины, ведь путем распространения является носовая полость, где и нужно выстроить защиту.

Когда вакцинируем внутримышечно или подкожно, надо учитывать риск остаточного колострального иммунитета. Остаточные колостральные антитела уменьшают эффект вакцины, так уменьшают количество антигенов. Теоретически можем рассчитать, до какого времени продлится колостральный иммунитет (посчитать антитела), но практически это нереально.

Признаки респираторно-синцитиальной инфекции заметны рано из-за того, что защиты колостральных антител недостаточно. И, конечно, действие вакцины зависит от инфекционного давления на телят. Вакцинация будет эффективной, если она является частью общей программы здоровья стада. Телят нужно защитить на ранних стадиях жизни.

Вакцинация против инфекцийного ринотрахеита (ИРТ)

ИРТ вызывает респираторные заболевания телят в возрасте 2−6 месяцев. Если он является основной причиной заболевания телят в стаде, наблюдаются клинические признаки у животных, которым более двух месяцев, в Эстонии, как правило, используют программу эрадикации ринотрахеита. Она предусматривает использование маркированной живой вакцины и анализ животных после убоя. Эстония хочет быть свободной от ринотрахеита страной, поэтому дважды в год вакцинируем всех животных, которым более трех месяцев. Разрабатываем программу вакцинации для конкретного хозяйства. После этого делаем серологический анализ и 10% серопозитивных животных выбраковываем. Вакцинация не полностью исключает циркуляцию вируса, но значительно уменьшает ее. Другие меры управления и контроля нужно применять первыми.

В Эстонии доступна только маркированная вакцина. Используя ее, можем потом дифференцировать антитела — против возбудителя или вакцинного штамма. Мы используем программу вакцинации в неблагополучном стаде. Когда оно становится благополучным, прекращаем ее. Как правило, она длится 4−7 лет в зависимости от распространенности болезни.

Вирусная диарея КРС

Вирус связан с плохой резистентностью, плохим состоянием иммунной системы телят. Он опасен, потому что приводит к бактериальным, паразитарным и другим инфекциям. Этот вирус является иммуносупрессором. Чтобы избавиться от заболевания, в Эстонии домашних животных не вакцинируют, а используют программу эрадикации.

Если в стаде есть вирусная диарея, исследуем всех телят, которым более двух недель, методом полимеразной цепной реакции (ПЦР). Цель исследований — выявить и выбраковать персистентно инфицированных животных. Как правило, их в стаде немного, но это те животные, которые сохраняют и распространяют живой вирус в стаде. Когда вы можете найти и удалить этих животных, это дает возможность очистить стадо. После выбраковки последнего больного животного проверяйте телят менее года. Программа ликвидации длится 2−3 года. Она недешевая, но жить с вирусом в стаде гораздо дороже.

Мы можем использовать программу вакцинации тогда, когда слишком высокое давление инфекции в стаде. Ее цель — предотвратить рождение персистентно инфицированных телят. То есть предотвратить инфицирование во внутриутробный период. Вакцинировать животных следует перед осеменением. Но даже в таком случае нужно проявлять и выбраковывать персистентно инфицированных животных. В Эстонии очень редко применяют вакцинацию против вирусной диареи.

Итак, возвращаемся к главному:

— качественно управляйте молозивом, потому что это важнейший источник хорошего иммунного статуса телят;

— улучшайте условия содержания;

— уменьшайте риск инфекций в группах: быстро отделяйте зараженных телят от здоровых;

— вовремя лечите больных телят (антибиотики, нестероидные противовоспалительные препараты);

— начинайте программу вакцинации, когда уверены, что болезнь вызывает вирус респираторно-синцитиальной инфекции или вирусная диарея.

Пример 2. Диарея телят

Для нее характерны тяжелые клинические признаки, в частности водянистый понос в очень ранние периоды — первые два дня жизни. Часто диарея регистрируется между десятым и четырнадцатым днем ​​и даже через месяц после рождения (см. фото 3−5).

Фото 3.	Фото 4.	Фото 5.

Опять возвращаемся к определению проблемы: если в стаде диарея, вопрос — в какой возрастной группе? Диарею вызывают практически все возбудители (см. Таблицу 2).

Таблица 2. Типичный возраст телят, когда их могут поразить перечисленные патогены*

*Другие возбудители инфекций, такие как Coccidia, BVDV, Clostridium perfringens, также могут поражать телят в возрасте 3−4 недели.

Источник: презентация Пирет Калмус. XII Международный молочный конгресс, 5−6 марта, 2019

Первоочередной причиной ранней диареи является E. coli. Она вызывает колисептицимию. В более позднем возрасте (например, через две недели) животных поражает Rotavirus, Coronavirus, Cryptosporidium. Основной причиной диареи у эстонских телят является Cryptosporidium. Ее трудно удалить, потому что она очень устойчива к дезинфектантам. Единственный способ борьбы — применить все меры контроля и профилактики: улучшить управление молозивом и условия содержания, отделить больных телят, провести дезинфекцию и быстрее лечить.

Правильно лечить диарею означает использовать не антибиотики, а регидратационную терапию и нестероидные противовоспалительные препараты. Но и здесь надо знать диагноз, чтобы разработать правильные меры. Важный отбор образцов. На ранней стадии инфицирования можно сделать быстрый анализ, чтобы определить Rotavirus, Coronavirus или E. coli. В случае септицемии можем отправить патматериал в лабораторию на определение чувствительности к антибиотикам.

Диагноз помогает решить, какие вакцины использовать. Вакцинировать следует коров позднего сухостоя и нетелей. Обычно в молозиве первого и второго доения есть достаточное количество антител. Уровень антител резко падает ниже защитного уровня через 24−48 ч. после отела. В моей практике была одна ферма, которая вакцинировала против рота и коронавируса, но неправильно выпаивали молозиво.

Соответственно, результата не было. Поэтому рекомендуем кормить телят сборным молозивом от привитых коров с молоком в течение 3−4 недель жизни в соотношении 1:10. Скармливайте молозиво, собранное за 6−8 доений. Вакцинация повышает уровень антител, и они дольше хранятся в молозиве. В Эстонии используют только инактивированные рта-, коронавирус, E. coli F5 (K99) вакцины. Прививают коров и нетелей за 12−3 недели до отела, ревакцинируют в ближайшие годы — за 4 недели до отела. Вместе с тем следует уделять внимание окружающей среде.

Исследование результатов вакцинации показали уменьшение смертности телят. Но животных следует вакцинировать, если вы уверены, что причиной болезни является рота, корона-вирус или E. coli, и нет других путей избежать поражения этими патогенами. Преимущественно все проблемы, связанные с диареей, исчезают, когда телят содержат в надлежащих условиях и дают хорошее молозиво.

К сожалению, остается криптоспоридиоз, против которого все-таки не можем прививать телят. Это огромная проблема в Эстонии.

Инфекционный статус стада

Сначала сделайте анализ сборного молока на антитела к инфекционному ринотрахеиту и вирусной диареи, только при условии, что вы не вакцинируете животных. Если результат положительный, выберите телок для тестирования — старше 12-месячного возраста, иначе могут оставаться колостральные антитела. Количество образцов зависит от распространенности ИРТ в стаде, но обычно в больших стадах берут 20−60 образцов. На их основе считайте, какая распространенность болезни.

Что касается вирусной диареи, достаточно взять 10 образцов сыворотки крови. Если 7 из 10 положительные, в стаде есть персистентно инфицированные животные, которые распространяют вирус. В таком случае мы должны отбирать больше образцов, чтобы определить, в какой группе есть персистентно инфицированное животное, и начать программу эрадикации. Для определения состояния стада можно использовать исследования сборного молока. Эта методика и дает ценную информацию.

В Эстонии используют интраназально живую вакцину против инфекционного ринотрахеита и парагриппа. В случаях инфекционного ринотрахеита используем только маркированную живую вакцину, потому что нет других доступных. Иногда вакцинируем от рота, коронавируса, эширихии коли.

В некоторых стадах используем вакцинацию против трихофитии. Нужно поставить правильный диагноз, потому что вакцина защищает только от Trichophyton verrucosum, а не Microsporum spp.

Почему вакцины не дают желаемого результата

Причин много. Неизвестно, способны ли животные одинаково хорошо реагировать на комбинированные антигены, которые вводятся одновременно. Или определенные антигены мешают или отрицательно влияют на реакцию на другие введенные антигены.

Эффективность вакцины также зависит от индивидуальных факторов животных — болезнь и стресс. Животное под влиянием стресса имеет повышенную восприимчивость ко всем патогенам (облигатные и условно-патогенные). На результат будут влиять также уровень инфекционного давления окружающей среды, условия хранения вакцин, дозировка, введение, время вакцинации и ревакцинации.

А главное — действительно ли в стаде есть инфекция, против которой прививаем. В Эстонии немало ферм, где вакцинируют, не зная причины заболевания. Трудно определить причину болезни, когда вакцинация уже начата. Помните: плохой менеджмент и плохое здоровье животных вакцинацией не исправишь никогда.

Выводы

Вакцинация — это лишь один из компонентов хорошо структурированной программы здоровья стада. Если отсутствует надлежащая биобезопасность (между стадами) и биозащита (в стаде), надлежащее кормление, а также управление экологическими условиями и другими факторами, которые вызывают стресс, любая хорошо спланированная программа вакцинации может быть неэффективной. Вакцины эффективны и поддерживают здоровье стада и производительность там, где есть надлежащее управление.

При этом победному шествию нодулярного дерматита способствовали и сами владельцы коров. Оставленную хозяевами без присмотра скотину часто можно было увидеть на улицах городов. Животные, питаясь на помойках, становились разносчиками различных заболеваний.

Чечня - один из первых регионов, который столкнулся с новым заболеванием. В сентябре 2015 года животных с признаками нодулярного дерматита обнаружили в станице Калиновской Наурского района. За две - три недели инфекция распространилась по всей станице, количество заболевших животных превысило 100 голов, из них пало 14. В том же году ветслужбы зарегистрировали болезнь на территории Надтеречного, Шелковского, Гудермесского и Грозненского районов. С наступлением осеннего похолодания, когда перестали летать кровососущие насекомые - главный переносчик заразы, эпизоотическая обстановка стабилизировалась.

В 2016 году в Чечне первые случаи заболевания крупного рогатого скота нодулярным дерматитом были зарегистрированы в конце мая. К середине июня вирус зафиксировали практически во всех населенных пунктах региона, а также на высокогорных альпийских пастбищах. Летом заболело почти 11 тысяч голов крупного рогатого скота, из них пало 1196.

Тогда же власти республики заявили о повсеместном бирковании животных. "Таким образом, мы будем знать, кому они принадлежат, и сможем своевременно проводить противоэпизоотические мероприятия. Хозяева, не отправившие своих животных на обработку и биркование, будут привлечены к административной ответственности", - пообещали в правительстве ЧР.

Оставленные хозяевами без присмотра коровы вольготно чувствовали себя на дорогах и улицах, при этом становясь переносчиками вирусов.

В 2017 году фактов заболевания животных нодулярным дерматитом на территории Чечни не зарегистрировано, сообщают в управлении ветеринарии республики. Тем не менее в регионе уже готовятся к тому, что болезнь может вновь себя проявить.

На сегодняшний день единственный метод борьбы с нодулярным дерматитом - профилактика. В ЧР разработаны рекомендации, как если не предотвратить, то задержать распространение инфекции.

- Животных обрабатывают репеллентами, а также используют вакцину от овечьей оспы. Ее применяют для взрослых особей и для молодняка. Кроме того, строго контролируется перемещение крупного рогатого скота, кормов и животноводческого инвентаря. Постоянно проходит обследование КРС, чтобы вовремя обнаружить очаги заболевания, - рассказал корреспонденту "РГ" главный государственный ветеринарный инспектор ЧР Данилбек Хасиев.

Как сообщил президент ассоциации крестьянско-фермерских хозяйств Чечни Лечи Татаев, в регионе созданы республиканский и районные штабы, которые контролируют процесс биркования.

- Ежедневно в пять часов вечера штабы отчитываются о том, сколько животных получили бирки с номерами и были привиты. Уже сейчас на учете 240 тысяч голов скота, и эта работа продолжается. Важно охватить всех животных в зоне риска, чтобы не повторились события прошлого года, когда не были ясны причины эпидемии, а потом не хватало необходимых лекарств, - отметил Татаев.

В Дагестане на сегодняшний день от нодулярного дерматита привито около 100 тысяч голов крупного рогатого скота, заявил корреспонденту "РГ" заместитель председателя комитета по ветеринарии республики Сергей Попандопуло.

Этого пока недостаточно, если учесть, что в регионе зафиксирован примерно миллион голов КРС, 90 процентов которых содержатся на частных подворьях. Желая обезопасить скот от болезни и не дожидаясь получения бесплатной вакцины, многие владельцы животных самостоятельно начали закупать лекарство в ветеринарных аптеках. В этом случае специалисты веткомитета делают прививки бесплатно. Стоимость укола составляет от 20 до 30 рублей. Учитывая, какие могут быть последствия в случае затратного лечения и падежа скота, фермеры решили не экономить.

По словам Сергея Попандопуло, кроме нодулярного дерматита актуальна вакцинация против других опасных болезней домашнего скота. Среди них - оспа овец, сибирская язва, бруцеллез, ящур и другие.

- Надо торопиться с вакцинацией. Недавно завершился окот у овец, в это время нельзя было проводить процедуры. В апреле пройдет стрижка овец, с середины мая начнется перегон на летние пастбища, поэтому времени очень мало, - говорит Попандопуло.

Он также отметил, что за последние два-три года в регионе зафиксированы ранее не встречавшиеся болезни животных. Это дерматит, оспа овец, диарея и птичий грипп. Источник заболевания, по мнению специалистов, во всех случаях находился за пределами республики, а вирусы были завезены с заболевшими животными.

В управлении же ветеринарии Кабардино-Балкарии сообщили, что сейчас эпизоотическая ситуация в регионе остается стабильной.

- Все профилактические и диагностические мероприятия идут в соответствии с утвержденным планом, - подчеркнул заместитель руководителя ведомства Зариф Акбулатов. - С февраля госветслужбой проводится вакцинация всего поголовья крупного рогатого скота против нодулярного дерматита. Прививки уже получили 98 процентов поголовья.

На Ставрополье ситуация с нодулярным дерматитом также находится под контролем, хотя избежать заболеваемости среди крупного рогатого скота в прошлом году не удалось. Тогда очаги инфекции обнаружили в Арзгирском, Курском, Кировском, Левокумском, Нефтекумском и Степновском районах края.

- В 2016 году мы проявили инициативу и стали прививать животных без команды от федеральных властей. Теперь же наш регион включен в программу профилактики нодулярного дерматита среди крупного рогатого скота, - сообщил заместитель начальника управления ветеринарии Ставропольского края Михаил Хоха.

Он также добавил, что, по прогнозам, эпизоотическая ситуация с кожно-узелковой сыпью, как ее еще называют специалисты, будет только ухудшаться. Пока нет эффективных способов предотвратить ее распространение. Тем не менее на Ставрополье уже привито практически все поголовье скота. Есть необходимое количество репеллентов для животных. Их будут раздавать населению, когда проснутся от спячки кровососущие насекомые.

- Важно контролировать незаконный ввоз больных животных с территории соседних республик, чтобы не допустить не только распространения инфекции на Ставрополье, но и ее дальнейшего продвижения за территорию края, - добавил Михаил Хоха.

В Кабардино-Балкарии в нынешнем году зафиксировано семь случаев бешенства. Совсем недавно, в конце марта, распоряжением главы республики Юрия Кокова из-за этого заболевания был введен карантин на части территории сельского поселения Озрек Лескенского района. В республике также есть два неблагополучных пункта, где бруцеллезом болеет крупный рогатый скот.

Чтобы эффективнее контролировать ситуацию, в Кабардино-Балкарии ведут профилактический учет поголовья. На сегодняшний день им охвачено 40 процентов сельхозживотных, осталось провести идентификацию в личных подсобных хозяйствах. В регионе проводится широкая информационная кампания среди фермеров, чтобы те не скрывали животных от ветеринарной службы.

Нодулярный дерматит передается животным в основном кровососущими насекомыми - комарами, москитами и мухами. Однако вирус могут переносить птицы, в частности, цапли. При первичном возникновении болезни в стаде поражается от пяти до 50 процентов животных, в отдельных случаях до 75-100 процентов, особенно это касается скота европейских пород. Тяжелее болеют животные европейских пород, лактирующие коровы, истощенные особи и молодняк. Буренки местных пород переносят нодулярный дерматит легко, и падеж среди них обычно не превышает четырех процентов. Если нет осложнений, выздоровление наступает через 30 дней. Наряду с крупным рогатым скотом вирусом заражаются и другие животные, в том числе овцы и козы. Человек к нему невосприимчив.

Специфические методы лечения нодулярного дерматита не разработаны. Животным создают хорошие условия содержания и кормления, используют душевые установки для обмывания кожного покрова дезинфицирующими растворами. У переболевших животных образуется стойкий иммунитет к повторному заражению. Для борьбы с нодулярным дерматитом используют гомологичные живые вирусные вакцины из штамма Neethling и гетерологичные живые вирусные вакцины из штаммов каприпоксвирусов, полученных от овец и коз.

В хозяйствах рекомендуется ввести определенные ограничения. Нельзя вывозить и продавать животных для любых целей, реализовывать молоко в сыром виде. В зоне высокого риска все крупные предприятия, специализирующиеся на производстве молока, переводят на закрытый режим. Завозить корма можно только с благополучных по нодулярному дерматиту территорий.

Представлены результаты опытов по подбору оптимальной прививочной дозы ассоциированной вакцины против аденовирусной, герпесвирусной инфекции типа I, и вирусной диареи — болезни слизистых оболочек, инактивированной эмульсионной для разных возрастных групп крупного рогатого скота. Установлено, что прививочная доза ассоциированной вакцины составила: для телят 25–30 суточного возраста — 1 см 3 , для глубокостельных коров, а также молодняка 4–6 месячного возраста и старше — 2 см 3 . Максимальный уровень гуморальных антител у подопытных животных регистсрировали на сутки после второй вакцинации.

Ключевые слова: вакцина, антитела, аденовирус, герпесвирус, вирус парагриппа-3, вирус вирусной диареи — болезни слизистых оболочек

Presents the results of the selection of the optimal dose of combined vaccine against adenovirus, herpesvirus type I, parainfluensa -3 virus and viral disease virus of cattle. Found that optimal dose of vaccine: for calves 25–30 days of age — 1 ml, for heavily pregnant cows and calves 4–6 month of age and is higher. The maximal level of gumoral specific antibody in experimental animals registered after the 30 days of vaccination.

Keywords: vaccine, antibody, adenovirus, herpesvirus type I, parainfluensa -3 virus, viral diarrhea — mucosal disease virus, cattle

Введение

Определение оптимальной иммунизирующей дозы ассоциированной вакцины, сконструированной на основе антигенов аденовируса и подгрупп, герпесвируса типа I, вируса и вируса вирусной диареи — болезни слизистых оболочек крупного рогатого скота.

В последние годы стало очевидным, что вирусные инфекции молодняка и различные формы патологий репродуктивных органов взрослого поголовья скота, индуцируемые большим набором вирусов, относящиеся к различным таксономическим группам, распространены повсеместно и представляют серьезную экономическую проблему для промышленного животноводства в большинстве стран мира, в том числе и России [2].

Среди большого числа вирусов, участвующих в этиопатогенезе респираторных заболеваний телят, протекающие преимущественно в виде смешанной инфекции, важное значение имеют и аденовирусы, разделенные на 2 подгруппы на основании культуральных свойств, антигенных различий и характера вызываемых ими цитоморфологических изменений, появляющихся в процессе репродукции в чувствительной биологической системе [15].

Серологические исследования показали, что аденовирусная инфекция крупного рогатого скота (КРС) широко распространена во всем мире, в том числе и РФ [1]; [12]. У телят она проявляется в виде энзоотических вспышек с массовыми пневмониями, а среди телят возраста — диареи с примесью крови и слизи, угнетения и дегидратации организма.

Кроме тех двух серотипов (1 и 2 серотипы) аденовируса КРС (соответственно штаммы и ), в Великобритании был изолирован штамм аденовируса , который имел другую антигенную структуру, в отличие от предыдущих штаммов и был определен как серотип 3 [10]. Из 10 серотипов аденовируса КРС, идентифицированных в настоящее время, третий серотип подгруппы был отнесен к роду Mastadenovirus, а четвертый серотип подгруппы включен к недавно утвержденному роду Atadenovirus [8], которые также, как и другие серотипы аденовирусов, представляют собой не имеющую оболочку икосаэдрическую частицу 75–80 нм в диаметре, содержащую двухцепочечную линейную геномную ДНК [7].

Для специфической профилактики аденовирусной инфекции в мировой практике используют моно-, би- и поливалентные вакцины, отличающиеся по набору аденовирусных компонентов, сочетанию их с другими возбудителями, методом изготовления и по эффективности их применения [9]; [13].

В последующие годы и в нашей стране были изготовлены и испытаны экспериментальные образцы моновакцины против аденовирусной инфекции КРС [4], бивалентной вакцины, содержащие антигены аденовируса и вируса [1] и комбинированной инактивированной вакцины на основе антигена аденовируса КРС первого серотипа [6].

Однако, несмотря на значительную роль аденовирусной инфекции в этиологической структуре патологии телят раннего возраста в молочных комплексах РФ проблема создания полноценной ассоциированной вакцины с включением в ее состав антигенных компонентов аденовирусов и подгрупп оставалась нерешенной.

Общеизвестно, что эффективность вакцины зависит от антигенной активности производственных штаммов возбудителей, выбора их типов и чувствительной системы для их репродукции, степени очистки и концентрации антигенов, входящих в состав биопрепарата, метода инактивации и оптимального соотношения адъюванта, стимулирующего процессы иммуногенеза. Кроме того, биологическая активность препарата определяется по уровню поствакцинальных антител и количеством специфического белка — иммуногенного антигена, являющегося одновременно единицей стандартизации, от которого зависит величина прививочной дозы.

В этой связи, целью наших исследований явилось определение оптимальной иммунизирующей дозы предложенной нами ассоциированной вакцины, обеспечивающей максимальное стимулирование иммунологической перестройки организма у привитых животных.

Для оценки безвредности использовали белых мышей (n=10) и телят (n=6) соответственно на каждую серию вакцины. Лабораторные опыты по оценки антигенной активности образцов ассоциированной вакцины проводили на кроликах живой массой 2,5–3 кг (n=3). Препарат вводили внутримышечно, двукратно с интервалом 21 день, в дозах по 1 см 3 и 2 см 3 соответственно, с последующим исследованием сыворотки крови, полученной через 21–30 суток после каждой вакцинации на наличие специфических антител в РМН, ИФА и РТГА.

Определение прививочной дозы экспериментальных серий ассоциированной вакцины проводилось в производственных условиях на крупном рогатом скоте в Кайбицкого района Республики Татарстан. Вакцинировали три возрастные группы животных: телят 25–30 — суточного возраста, молодняк 4–6 месячного возраста и старше, глубокостельных коров и нетелей. Для каждой возрастной группы испытывали три соответствующие дозы вакцины. Каждую дозу вакцины вводили 5 животным внутримышечно в среднюю треть шеи двукратно, с интервалом 21–30 суток по схеме: глубокостельным коровам и нетелям — по 1, 2, и 3 см 3 (первый раз — за 40–50 дней, второй раз — за 15–20 дней до отела); телятам 25–30 суточного возраста — по 0,5, 1 и 2 см 3 ; молодняку 4–6 месячного возраста и старше — по 1, 2, и 3 см 3 .

В период вакцинации за животными вели клиническое наблюдение. На месте введения вакцины наблюдалось небольшое уплотнение, которое самопроизвольно исчезало через 2–3 недели. других отклонений от физиологической нормы у привитых животных обнаружено не было.

Максимальное разведение сыворотки, полностью нейтрализующее ЦПД вируса в 50% инфицированных лунок, принимали за титр сыворотки.

В реакции использовали контроли: гипериммунную моноспецифическую сыворотку кролика, полученную к каждому штамму вирусов; в качестве отрицательного контроля — сыворотку крови КРС, не содержащую специфических антител к вирусам, используемым в опыте.

Статистическую обработку данных проводили с помощью стандартного пакета программ Microsoft Office Excel 2010.

В опытах установили, что экспериментальные образцы вакцины стерильны, безвредны для лабораторных и естественно восприимчивых животных, вызывают у кроликов формирование выраженного иммунного ответа ко всем антигенным компонентам (таблица 1).

Таблица 1 — Показатели антигенной активности ассоциированной вакцины на кроликах. (M±m, n=3, р