В сперме могут быть вирусы
Энрик Марко комментирует практические последствия актуальной исследовательской статьи об экскреции вируса PED в сперме.
S Gallien, A Moro, G Lediguerher, V Catinot, F Paboeuf, L Bigault, M Berri, PC Gauger, N Pozzi, E Authié, N Rose and B Grasland.. Выявление вируса эпидемической диареи свиней (PEDV), содержащегося в сперме инфицированных хряков, свободных от специфических патогенов. 2018. Vet Res (2018) 49:7. doi.org/10.1186/s13567-018-0505-2
Читайте резюме стати
Среди всех инфекций свиней эпидемиология эпидемической диареи свиней (PED), несомненно, была одной из самых обсуждаемых. После попадания вируса в Соединенные Штаты и в Канаду из Китая вирус быстро распространился по той же схеме и в других странах, таких как Кореи, Тайване или Японии (в такой последовательности).
Быстрое распространение инфекции вызвало сомнения в способе ее передачи, так как другие вирусные инфекции, путь заражения которых также фекально-оральный, не успевают распространяться так быстро. Это послужило причиной начала большого числа исследований с целью уточнения и определения различных путей передачи инфекции. На самом деле, возможными вариантами, которые были предложены, включают:
- Очевидно, контакт с заряженными фекалиями, либо прямой контакт с инфицированными животными, либо косвенный контакт с заряженными фекалиями, через загрязненный корм.
- Транспортные средства, используемые для перевоза инфицированных свиней или других заряженных грузов
- Аэрогенный путь на коротких расстояниях из-за присутствия загрязненных аэрозолей.
Исследовалась возможность половой передачи (через зараженную сперму), но всегда учитывая, что сперма может быть также загрязнена либо фекалиями, присутствующими в препуции, либо аэрозолями, содержащими вирус.
Однако, интересно отметить, что в статье описано, как получить инфицированную сперму как раз до того, как у животных появятся клинические признаки болезни, исключая возможность того, что положительные результаты связаны с загрязнениями фекалиями находящимися на коже (крайней плоти) хряка.
Также интересно отметить, что сперма содержит вирус PED периодически в течение довольно длительного периода, по крайней мере, до 49 дней. С учетом этих результатов представляется очевидным, что использование загрязненных доз спермы поставило бы под угрозу состояние здоровья стада отрицательных (свободных от вируса) хозяйств. На сегодняшний день еще не подтверждено, что свиноматки, осемененные загрязненной спермой, могут заболеть. Тем не менее, не следует забывать, что элементарное присутствие зараженного вирусом PED материала на ферме, свободной от вируса, уже представляет собой риск заражения, даже если способ заражения не вагинальный, а оральный.
Выводы статьи, прежде всего, подтверждает то, что было и отражено в основополагающих исследованиях на хряках с целью сохранения их состояния здоровья: осуществление достаточно длительного карантинного периода (минимум около 4 недель), который позволяет проверить отрицательное состояние хряков, которые будут интегрированы в среду различных инфекций, среди которых должен быть включен вирус PED.
Резюме комментируемой статьи
S Gallien, A Moro, G Lediguerher, V Catinot, F Paboeuf, L Bigault, M Berri, PC Gauger, N Pozzi, E Authié, N Rose and B Grasland. .. Выявление вируса эпидемической диареи свиней (PEDV), содержащегося в сперме инфицированных хряков, свободных от специфических патогенов. 2018. Vet Res (2018) 49:7. doi.org/10.1186/s13567-018-0505-2
Что они изучают?
Это исследование выясняет, может ли вирус PED быть обнаружен в сперме от искусственно зараженных хряков, свободных от специфических патогенов, подвергшихся воздействию US non-InDel штамма вируса эпидемического диареи свиней (PEDV).
Как это было сделано?
В исследование были включены две группы хряков, свободных от специфических патогенов. Двоим хрякам было инокулировано 5 мл гомогената, содержащего 10 8 геномных копий/мл US non-InDel штамма вируса. Двое хряков держали в качестве отрицательного контроля. Эксперимент длился в общей сложности 52 дня после прививки, в течение которых регистрировались клинические признаки (вялость, внешний вид, поведение, дыхание и диарея). Образцы спермы, фекалий и сыворотки были также протестированы с использованием ПЦР в реальном времени с реакцией обратной транскрипции (RT-qPCR).
Клинические признаки (диарея, отказ от корма, рвота) наблюдались у обоих инокулированных хряков и были более выраженными, чем ожидалось, учитывая возраст экспериментальных животных. Отрицательный контроль оставался здоровым и незараженным.
Вирус эпидемической диареи свиней (PEDV) периодически был обнаружен в сперме. РНК PEDV присутствовала в обеих фракциях спермы, хотя большее количество PEDV было более последовательно обнаружено в богатой спермой фракции, которая содержит сперматозоиды и не-сперматозоиды (сперматозоиды, лейкоциты, незрелые половые клетки и т. д.). В этой богатой спермой фракции максимальная геномная нагрузка PEDV достигла 3,40 × 10 4 геномных копий / мл для одного хряка и 1,75 × 10 4 геномных копий/ мл для второго. Интересно, что вирусная экскреция в семенных фракциях была недолговечным. Мазки препуция были отрицательными по РНК PEDV в то время, когда РНК PEDV была обнаружена в сперме. РНК PEDV была также обнаружена в желатиновой пробке через 18 и 42 дня после прививки у обоих хряков и через 49 дней после инфицирования у одного из них. Напротив, нахождения вируса было более продолжительными в образцах фекалий: образцы были непрерывно положительными в течение 16-и и 19-и дней у 2 хряков.
Какие выводы последуют из этих исследований?
Исследование продемонстрировало выделение US non-InDel штамма вируса в сперме (богатой спермой фракции и семенной фракции) инокулированных хряков.
Хряков, особенно их сперму, необходимо рассматривать как фактор риска для попадания / повторного попадания PED в племенное стадо. PEDV в сперме появился перед выделением его в фекалиях и до появления клинических признаков. Поэтому кабаны, инфицированные PEDV, должны быть проверены после доставки потенциально зараженной спермы. Тот факт, что выделение вируса происходит периодически (временами) еще больше усложняет обнаружение. Необходимо будет провести тестирование хряков на сероконверсию PED и сообщить о клинических признаках PED, а также об отсутствии предыдущего вирусного выделения в фекалиях. Риски выше, потому что исследование показало, что РНК PEDV может быть обнаружена в сперме, даже когда хряки больше его не выделяют с фекалиями и не показывают никаких клинических признаков.
Необходимы дальнейшие исследования, чтобы определить, является ли вирус PEDV, обнаруженный в зараженной сперме с помощью ПЦР в реальном времени с реакцией обратной транскрипции, потенциально инфекционным.
Протоколов мониторинга хрячников часто бывает недостаточно для своевременного выявления инфекции.
Вирус репродуктивно - респираторного синдрома свиней (РРСС) является одним из наиболее экономически значимых патогенов в свиноводстве.
Одним из возможных путей передачи является искусственное осеменение свиноматок вируссодержащей спермой. Инфекционные выделения в семенной жидкости зависят от различных факторов и трудно предсказуемы. Штамм вируса и его вирулентность играют определенную роль, но также факторы, имеющие отношение к индивидуальному животному, оказывают влияние на наличие и количество вируса в сперме. Вирус РРСС может быть найден в сперме через два дня после заражения, но частота и длительность выделения вируса сильно различаются. У некоторых кабанов вирус РРСС никогда не обнаруживается в сперме или только в течение нескольких дней вскоре после заражения, тогда как у других она может быть обнаружена в течение более длительных периодов времени. В одном исследовании хряк выделял вирус РРСС в сперму вплоть до 92-го дня после заражения (см. таблицу 1). Кроме того, выделение может быть непрерывным или происходить время от времени. Даже если вирус РРСС присутствует в сперме, не каждое осеменение свиноматок является заразным. Это также зависит от различных факторов, таких как количество вируса в сперме, а также минимальная инфекционная доза, которая может варьироваться в зависимости от свиноматки или от штаммов вируса и т.д.
Таблица 1. Избранные исследования, где оценивалась продолжительность и частота выделений вируса РРСС в сперме после экспериментальной инокуляции хряков (ДПИ = дни после инокуляции)
| Исследование | Количество хряков в исследовании | Испытательный интервал | Результаты |
| Свенсон и др., 1994 | 4 | Сперма собиралась со дня 3/5 до 56 ДПИ (интервалы отбора образцов не указаны) | все хряки выделяли вирус; почти все образцы между 3/5 ДПИ и 13/24/27/43 ДПИ положительные |
| Кристофер-Хеннингс и др., 1995а | 4 | Сперма собиралась дважды в неделю в течение 8 недель после экспериментальной инокуляции | все хряки почти непрерывно положительные: 2 хряка между 3 и 35/47 ДПИ, 2 хряка между 5 и 13/25 ДПИ I |
| Кристофер-Хеннингс и др., 1995b | 4 | Сперма собиралась 2 - 3 раза в неделю дольше, чем 100 ДПИ | 2 хряка положительные с перерывами между 3/7 и 25 ДПИ; 2 хряка почти непрерывно положительные от 3 до 56 ДПИ и от 5 до 92 ДПИ |
| Шин и др., 1997 | 3 | Сперма собиралась до 85 ДПИ (интервалы отбора образцов не указаны) | 2 хряка положительные до 50/57 ДПИ; 1 хряк в течение 2 дней |
| Кристофер-Хеннингс и др., 1998 | 6 | Сперма собиралась 3 раза в неделю до 21 ДПИ (5 хряков из 6 были вазэктомированными) | 5 хряков (включая одного не вазэктомированного) непрерывно положительные до 21 ДПИ; 1 хряк до 12 ДПИ |
| Кристофер-Хеннингс и др., 2001 | 7 | Сперма собиралась дважды в неделю вплоть до интервала от 39 и 84 ДПИ (2 Ладраса, 2 Йоркшира, 2 Гэмпшира) | |
| Уосилк и др., 2004 | 6 | Сперма собиралась 3 раза в неделю в течение 4 недель, два раза в неделю в течение 2 недель, затем один раз в неделю в течение 6 недель | 1 хряк никогда не был положительным; 4 хряка один раз или дважды положительные в районе 10 ДПИ; 1 хряк несколько раз положительный до 32 ДПИ |
Сознавая эти потенциальные последствия, племенные хозяйства создали отрицательные на вирус хрячники и регулярно проводят мониторинг подвижности вируса РРСС. Это происходит не без проблем. Во-первых, не существует каких-либо стандартов для разработки протоколов мониторинга. Они варьируются от выборки хряков один раз (два раза) в неделю до ежегодного обследования, хотя только очень короткие интервалы между тестами служат средством для обнаружения инфекции на достаточно ранней стадии, чтобы предотвратить дальнейшее распространение в стадах свиноматок (Ровира и др., 2007, Натуес и др., 2013). Другой проблемой представляется метод исследования. Обычно используемый серологический мониторинг несет риск пропуска инфекции на стадии, когда зараженные животные еще не выработали антитела (обычно обнаруживаемые от 7 до 14 дней после инокуляции). Подходящей альтернативой является обнаружение вируса в сыворотке при помощи ПЦР. Так как виремия у взрослых животных обычно длится в течение 10 - 14 дней после заражения, то оптимальная, хотя и дорогостоящая система выборочного контроля будет включать в себя оба метода. Возможный пробел в диагностике (нет больше виремии, но и нет пока обнаруженных антител) должен избегаться путем отбора проб у достаточного количества животных. Наконец, в некоторых хрячниках делают ПЦР спермы, так как она имеет определенные практические преимущества по сравнению с сывороткой (нет необходимости забирать кровь у хряков). Тем не менее, сперма не может считаться надежным средством, чтобы контролировать подвижность вируса РРСС. С одной стороны, обнаружение вируса РРСС в сперме практически является сложной задачей из-за специфических особенностей образца. С другой стороны, вышеупомянутые особенности распространения вируса означают, что отрицательный результат анализа спермы не является доказательством отсутствия инфекции у хряков. Пригодность таких альтернатив, как образцы жидкости ротовой полости, подлежит дальнейшему доказательству.
Поэтому неоднократно возникают не только инфекции хрячников, но и их дальнейшее распространение на стада свиноматок. Одним из ярких примеров, где импорт спермы привел к вспышке вируса РРСС в свободной от него стране, является случай в Швейцарии. В ноябре 2012 года вирус РРСС был обнаружен в трех свиноматочных стадах после того, как они использовали сперму из хрячника в Германии. К счастью, вспышка заболевания в Швейцарии была успешно предупреждена благодаря хорошему сотрудничеству между швейцарскими ветеринарными органами и импортером / хрячником. Тем не менее, это нанесло большой урон, так как было необходимо провести проверку многих потенциальных контактных стад (см. таблицу 2) и ввести в них ограничительные меры, и одно стадо пришлось забить. Даже притом что в хрящнике проводился контроль вируса РРСС (частично через сперму) два раза в неделю, это не помешало тому, чтобы вирус распространился на большое количество свиноматочных стад. Этот пример подчеркивает, что протоколов мониторинга хрячников часто бывает недостаточно для своевременного выявления инфекции, и даже покупка спермы в хрячниках, сертифицированных на отсутствие вируса РРСС, не может гарантировать 100% безопасность для свиноматочных стад.
Таблица 2. Общие диагностические усилия по борьбе со вспышкой вируса РРСС 2012 - 2013 гг. в Швейцарии: количество исследованных швейцарских свиноматочных ферм и проведенных лабораторных исследований (ОТ-кПЦР и ТИФА; подтверждающие исследования: всегда как минимум через 21 дней после первого исследования).
| Швейцарские фермы | Первичные исследования | Подтверждающие исследования | Всего | ||
| ОТ-кПЦР | ТИФА | ТИФА | |||
| Зараженные фермы | Обследованные фермы | 3 | 3 | 2 | 3 |
| Проведенные тесты (положительные) | 1671 (19) | 907 (1) | 105 | 2683 | |
| Фермы, на которые закупалась сперма | Обследованные фермы | 23 | 23 | 23 | 23 |
| Проведенные тесты | 4885 | 4388 | 877 | 10150 | |
| Фермы, имевшие вторичные контакты | Обследованные фермы | 18 | 62 | 3 | 62 |
| Проведенные тесты | 651 | 1850 | 71 | 2572 | |
| Всего | Обследованные фермы | 44 | 88 | 28 | 88 |
| Проведенные тесты | 7207 | 7125 | 1053 | 15385 | |
В результате несколько стран, свободных от вируса РРСС, ввели строгие правила, регулирующие импорт спермы хряков. Некоторые, как Швеция, не импортируют сперму хряков из стран, не свободных от вируса. Швеция, Финляндия и Норвегия имеют официальное соглашение об обмене генетическим материалом (спермой хряков). Норвегия и Новая Зеландия допускают импорт спермы из стран, не свободных от вируса, только при чрезвычайно строгих мерах предосторожности, включая строгие карантинные меры и повторное тестирование доноров спермы и свиноматок-получателей. Швейцарские основополагающие принципы, реализованные после вспышки, требуют тестирования спермы и сыворотки каждого хряка с использованием ПЦР и ТИФА в день каждого сбора спермы для Швейцарии. Результаты должны быть представлены в кантональные ветеринарные службы, а сперма может быть использована только после того, как результаты всех исследований будут отрицательными. Свиноматочные фермы попадают под ограничение в передвижении животных до тех пор, пока выборочное обследование 15 оплодотворенных свиноматок, проведенное как минимум через 28 дней после последнего осеменения импортной спермой, даст отрицательный результат.
МОСКВА, 24 янв — РИА Новости, Татьяна Пичугина. Есть вирусы, проникающие в семенники мужчины и задерживающиеся там надолго — порой на всю жизнь. Эта проблема привлекла внимание ученых, поскольку возникла надежда на лечение некоторых случаев бесплодия.
Зловещую славу вирусу Зика принесла его способность вызывать серьезные пороки развития плода в материнской утробе. Мало того, согласно последним данным, вирус Зика поражает сперматозоиды и сохраняется в семенниках в течение нескольких недель после того, как человек выздоровел и следы инфекции исчезли из крови и мочи.
"Что происходит дальше с инфицированными вирусом сперматозоидами, никто не знает. Таких данных в научной литературе нет", — рассказывает РИА Новости доктор биологических наук Елизавета Брагина из Института физико-химической биологии имени А. Н. Белозерского МГУ, первый автор обзора "Spermatozoon as a Vehicle for Viruses" ("Сперматозоиды как носители вирусов").
Однажды, исследуя мужскую сперму с помощью электронной микроскопии, Брагина увидела, что сперматозоид поражен вирусом герпеса. Это ее заинтересовало, и она поделилась открытием с медиками. Известно, что такие вирусы, как ВИЧ, гепатит C или герпес, передаются при половом контакте. А могут ли притаившиеся в сперматозоиде вирусы поразить яйцеклетку и затем зародыш в утробе? Это в науке называется вертикальным переносом.
"Вертикальный перенос четко показан для вируса гепатита B. Много работ подтверждают это на клиническом материале и модельных системах на животных. В Китае наблюдали за парами, в которых мужчина инфицирован герпесом, а женщина — нет, однако беременность прерывалась спонтанным выкидышем. Ученые выделили вирусы герпеса из спермы и нерожденного плода, доказав методами молекулярной биологии, что они идентичны. Все подобные работы свидетельствуют: инфицирование яйцеклетки через сперму часто приводит к остановке развития эмбриона ", — продолжает исследовательница.
Клинических данных о том, что ВИЧ передается от сперматозоида к яйцеклетке, нет. Есть только косвенные подтверждения в опытах на хомячках, когда яйцеклетку грызуна оплодотворяли в чашке Петри инфицированным человеческим сперматозоидом. Вирус был замечен уже на стадии двух бластомеров, затем зародыш прекращал развиваться. Впрочем, выяснился и обнадеживающий факт: заражены всего 2-3% сперматозоидов больного ВИЧ. То есть вероятность вертикального переноса невелика. Аналогичные результаты получены для вируса папилломы человека и гепатита B. У их носителей в среднем более здоровое потомство, поскольку яйцеклетку наверняка настигнет незараженный вирусом сперматозоид. Если же ей не повезет и она подцепит вирусный, то эмбрион погибнет еще в утробе.
"Организм защищается. Когда вирусная инфекция поражает зародыш, он просто перестает развиваться", — говорит Брагина и уточняет, что все-таки ВИЧ-инфицированные мужчины чаще всего пользуются услугами центров репродукции, где их сперматозоиды сначала тщательно очищают. В 90% случаев после очистки вирус в семенной жидкости не обнаруживают, а остальным предлагают воспользоваться банком донорской спермы.
О вертикальном переносе герпеса прямых данных тоже нет. Косвенные свидетельства основаны на наблюдениях за мужчинами, не раз пытавшихся стать отцами, но безуспешно: беременность супруги неизменно оканчивалась выкидышем. У таких мужчин часто выявляют в сперме вирус герпеса.
"В совместной работе с коллегами с кафедры клинической андрологии РУДН мы показали, что если мужчин с герпесом пролечить, число удачных беременностей повышается. Правда, это относится к вспомогательным репродуктивным технологиям, но такие же сведения поступают и о естественной беременности", — говорит Брагина.
По ее словам, в России есть врачи, обращающие внимание на эти работы и отправляющие супруга на анализы, если видят, что женщина перенесла пять-шесть привычных выкидышей или несколько неудачных искусственных оплодотворений, когда эмбрион застывает в развитии. Выявив герпес, мужчину лечат, после чего среди таких пар число удачных беременностей вырастает вдвое.
ВИЧ-инфекцией довольно трудно заразиться, но в то же время люди могут стать ВИЧ-позитивными даже после однократного контакта с вирусом.
Риск передачи ВИЧ-инфекции зависит от количества вирусов, содержащихся в биологической жидкости ВИЧ-инфицированного, с которой контактирует здоровый человек. Концентрация вируса неодинакова в разные периоды развития инфекции и в разных жидкостях организма у человека — источника ВИЧ-инфекции.
Инфицирование человека вирусом происходит при попадании биологических жидкостей, содержащих ВИЧ в максимальной концентрации, в кровоток или на слизистую оболочку.
ВИЧ-инфекция может передаваться, как естественным, так и искусственным путем.
К естественному пути передачи ВИЧ относятся:
ВИЧ не передается воздушно-капельным, водным, контактно-бытовым путем, через пользование общей посудой, одним туалетом, транспортом, при посещении школы, во время спортивных игр, плавания в бассейне, рукопожатия, объятия, при поцелуях.
Не участвуют в передаче вируса кровососущие насекомые и членистоногие (комары, клопы, вши, клещи).
Вероятность передачи ВИЧ-инфекции
| Путь передачи
ВИЧ-инфекции, % |
| От мужчины к женщине при незащищенном вагинальном контакте |
| От женщины к мужчине при незащищенном вагинальном контакте |
| От мужчины к мужчине при незащищенном анальном контакте |
| Вертикальная передача от матери к ребенку |
| При уколе контаминированной ВИЧ иглой |
| При использовании нестерильного инструментария для инъекционного употребления наркотиков |
| При переливании инфицированных кровепродуктов
Наибольший риск заражения ВИЧ возникает при контактах поврежденных кожных покровов с ВИЧ-инфицированной кровью. Практически 100 процентная вероятность заражения ВИЧ существует при переливании инфицированной ВИЧ крови, компонентов крови и пересадке органов и тканей.Передача ВИЧ-инфекции в мире также регистрируется при использовании донорской спермы и грудного молока. В Пермском крае зарегистрирован только 1 случай инфицирования ВИЧ при переливании компонентов крови в 2001 году. Другой вариант передачи ВИЧ-инфекции искусственным путем - заражение при употреблении наркотиков нестерильным инструментарием. Это самый распространенный путь передачи ВИЧ-инфекции во всём мире. Данные о вероятности заражения ВИЧ серьезно отличаются (от менее 1% до 70%). Это связано с наличием различных рискованных в плане заражения ВИЧ практик употребления наркотиков: использование общих игл, шприцев или емкостей для употребления наркотиков. К естественным путям передачи ВИЧ-инфекции относятся половой при гомо и гетеросексуальных контактах и передача ВИЧ-инфекции от матери ребенку. При сексуальных контактах наиболее рискованными являются незащищенные анальные контакты. Наименьший риск заражения отмечается при вагинальных половых контактах неинфицированного мужчины с инфицированной ВИЧ женщиной. От заражения ВИЧ-инфекцией половым путем эффективно защищают презервативы. Риск заражения ВИЧ может возникнуть только при повреждении, разрывах или неправильном их использовании. Риск передачи ВИЧ-инфекции от матери к ребенку при применении современных высокоактивных схем химиопрофилактики удается снизить до 2% и менее. При их отсутствии инфицируется до 45% детей. Читайте также:
 Пожалуйста, не занимайтесь самолечением!При симпотмах заболевания - обратитесь к врачу.
Copyright © Иммунитет и инфекции
|