Рнк гепатита с ниже линейного диапазона

Научно-диагностический центр лабораторных технологий

Телефоны для справок:

Личный кабинет клиента

В корзине пусто!

Вирусный гепатит С (HCV), количественный

Вирусный гепатит С (HCV), количественный-исследование для выявления возбудителя гепатита C (HCV), в ходе которого с помощью метода полимеразной цепной реакции в реальном времени (РТ-ПЦР) определяется наличие генетического материала (РНК) вируса и его количество (вирусная нагрузка) в образце крови. Вирус гепатита С (HCV) – РНК-содержащий вирус из семейства Flaviviridae, который поражает печень. Он способен размножаться в клетках крови (нейтрофилах, моноцитах и макрофагах, В-лимфоцитах) и вызывать криоглобулинемию, болезнь Шегрена и В-клеточные лимфопролиферативные заболевания. HCV благодаря высокой мутационной активности способен избегать воздействия защитных механизмов иммунной системы. Существует 6 генотипов и множество субтипов вируса, которые имеют разные значения для прогноза развития заболевания и эффективности противовирусной терапии. Выявление РНК HCV свидетельствует о размножении вируса в организме и является методом диагностики заболевания. Генетический материал вируса можно обнаружить с помощью ПЦР через 10-12 дней после инфицирования – в этот период специфические антитела, которые образуются через несколько месяцев после заражения, отсутствуют и биохимические показатели функции печени находятся в пределах референсных значений.
Посредством ПЦР выявляют РНК вируса качественно или количественно. Благодаря качественному методу подтверждается присутствие вируса гепатита С и его активное размножение. Количественное определение вирусной нагрузки с учетом генотипа HCV позволяет контролировать проводимую терапию и прогнозировать течение болезни.
Эффективность лечения оценивается по количеству РНК до и во время терапии. Обычно вирусная нагрузка крови снижается в несколько раз за первые три месяца успешного лечения. При эффективной терапии виремия уменьшается на два порядка в первые 4-12 недель лечения и после окончания курса терапии генетический материал вируса в крови не обнаруживается. Отсутствие снижения виремии через 12 недель с начала лечения указывает на его неэффективность. Рекомендовано проводить анализ до начала терапии, на 4-й, 12-й и 24-й неделях лечения и через 24 недели после окончания курса. Длительность терапии и периодичность количественного определения РНК вируса гепатита С зависит от генотипа вируса и степени повреждения печени.

Подготовка к исследованию

Специальной подготовки не требуется.

Показания к исследованию

Интерпретация

Не обнаружено – РНК вируса гепатита С не обнаружена или значение ниже предела чувствительности метода (200 копий/мл = 40 МЕ/мл).
2*10^6 копий/мл (>8*10^5 МЕ/мл) – РНК вируса гепатита С обнаружена. Высокая виремия.
>1,0*10^8 копий/мл (>2,4*10^7 МЕ/мл) – РНК вируса гепатита С обнаружена в концентрации выше линейного диапазона концентраций.
Линейный диапазон концентраций РНК вируса гепатита С, определяемых детектирующим амплификатором, составляет 7,5*10^2 – 1,0*10^8 копий/мл (1,8*10^2 – 2,4*10^7 МЕ/мл).

На результаты могут влиять

загрязнение биоматериала;
наличие в образце ингибиторов – химических и белковых субстанций, влияющих на различные компоненты ПЦР;
присутствие в крови гепарина.
Уровень вирусной нагрузки крови не указывает на степень повреждения печени и тяжесть заболевания. Для их оценки необходимо исследовать биохимические показатели и материалы биопсии.
При планировании лечения очень важно определить генотип вируса гепатита С.

Назначается в комплексе с

Anti-HCV, антитела
HCV – подтверждающий тест (антитела к структурным и неструктурным белкам вируса гепатита)
HCV, РНК [качетсвенный ПЦР]
HCV, генотипирование, РНК [ПЦР]
Биохимический анализ крови при заболеваниях ЖКТ

+(998 71) 256-09-19

c 08:00 до 18:00, Пн-Пт

c 08:00 до 16:00, Сб

Исследование для выявления возбудителя гепатита C (HCV), в ходе которого с помощью метода полимеразной цепной реакции в реальном времени (РТ-ПЦР) определяется наличие генетического материала (РНК) вируса и его количество (вирусная нагрузка) в образце крови.

РНК HCV может быть обнаружена в концентрации, находящейся за нижней границей линейного диапазона концентраций. Линейный диапазон концентраций – это диапазон, в котором можно точно посчитать количество копий возбудителя. Для данного анализа линейный диапазон концентраций РНК HCV, определяемых тест-системой: 150-1*10^8 МЕ/мл.

Вирус гепатита С (ВГС), количественное определение РНК.

Синонимы английские

Hepatitis C Virus RNA, Quantitative, Real-Time PCR, Blood, HCV Viral Load, Hepatitis C Virus RNA Quant.

Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

• Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Вирус гепатита С (HCV) – РНК-содержащий вирус из семейства Flaviviridae, который поражает печень. Он способен размножаться в клетках крови (нейтрофилах, моноцитах и макрофагах, В-лимфоцитах) и вызывать криоглобулинемию, болезнь Шегрена и В-клеточные лимфопролиферативные заболевания. HCV благодаря высокой мутационной активности способен избегать воздействия защитных механизмов иммунной системы. Существует 6 генотипов и множество субтипов вируса, которые имеют разные значения для прогноза развития заболевания и эффективности противовирусной терапии.

Основной путь передачи инфекции – через кровь (препараты для переливания элементов крови и плазмы, донорские органы, нестерильные шприцы, иглы, инструменты для татуирования, пирсинга). Вероятно заражение при половом контакте и ребенка от матери во время родов, но это случается нечасто.

Острый вирусный гепатит, как правило, характеризуется бессимптомным течением и остается невыявленным в большинстве случаев. Только у 15 % инфицированных заболевание протекает остро – с тошнотой, ломотой в теле, отсутствием аппетита и потерей веса (редко сопровождается желтухой). У 60-85 % инфицированных развивается хроническая инфекция, что в 15 раз превышает частоту хронизации при гепатите В. Хронический вирусный гепатит С протекает с повышением печеночных ферментов и скудным проявлением симптомов. У 20-30 % больных заболевание приводит к циррозу печени, увеличивая риск развития печеночной недостаточности и гепатоцеллюлярной карциномы.

Выявление РНК HCV свидетельствует о размножении вируса в организме и является методом диагностики заболевания. Генетический материал вируса можно обнаружить с помощью ПЦР через 10-12 дней после инфицирования – в этот период специфические антитела, которые образуются через несколько месяцев после заражения, отсутствуют и биохимические показатели функции печени находятся в пределах референсных значений.

Посредством ПЦР выявляют РНК вируса качественно или количественно. Благодаря качественному методу подтверждается присутствие вируса гепатита С и его активное размножение. Количественное определение вирусной нагрузки с учетом генотипа HCV позволяет контролировать проводимую терапию и прогнозировать течение болезни.

Эффективность лечения оценивается по количеству РНК до и во время терапии. Обычно вирусная нагрузка крови снижается в несколько раз за первые три месяца успешного лечения. При эффективной терапии виремия уменьшается на два порядка в первые 4-12 недель лечения и после окончания курса терапии генетический материал вируса в крови не обнаруживается. Отсутствие снижения виремии через 12 недель с начала лечения указывает на его неэффективность. Рекомендовано проводить анализ до начала терапии, на 4-й, 12-й и 24-й неделях лечения и через 24 недели после окончания курса. Длительность терапии и периодичность количественного определения РНК вируса гепатита С зависит от генотипа вируса и степени повреждения печени.

Для чего используется исследование?

• Для подтверждения диагноза "вирусный гепатит С".
• Для прогнозирования течения вирусного гепатита С.
• Для мониторинга противовирусной терапии и решения вопроса о дальнейшей тактике лечения.

Когда назначается исследование?

• При качественном обнаружении РНК вируса гепатита С.
• При остром и хроническом вирусном гепатите С.
• При микст-гепатитах.
• При планировании, во время и после окончания противовирусной терапии.

Что означают результаты?

Референсные значения: не обнаружено.

• Не обнаружено – РНК вируса гепатита С не обнаружена или значение ниже предела чувствительности метода (50 МЕ/мл).
• 1*10^8 МЕ/мл – РНК вируса гепатита С обнаружена в концентрации выше линейного диапазона концентраций.

Линейный диапазон концентраций РНК вируса гепатита С, определяемых тест-системой, составляет 150-1*10^8 МЕ/мл.

• Уровень вирусной нагрузки крови не указывает на степень повреждения печени и тяжесть заболевания. Для их оценки необходимо исследовать биохимические показатели и материалы биопсии.
• При планировании лечения очень важно определить генотип вируса гепатита С.

Кто назначает исследование?

Литература

• Возианова Ж.И. Инфекционные и паразитарные болезни: В 3х т. - К.: Здоровье, 2000. – Т.1.: 600-690.
• Кишкун А.А. Иммунологические и серологические исследования в клинической практике. - М.:ООО МИА, 2006. – 471-476 с.
• Harrison's Principles of Internal Medicine. 16 th ed. NY: McGraw-Hill; 2005: 1822-1855.

• Lerat H, Rumin S, Habersetzer F, and others. In vivo tropism of hepatitis C virus genomic sequences in hematopoietic cells: influence of viral load, viral genotype, and cell phenotype. Blood. 1998 May 15;91(10):3841-9.PMID:9573022.
• Revie D, Salahuddin SZ. Human cell types important for hepatitis C virus replication in vivo and in vitro: old assertions and current evidence. Virol J. 2011 Jul 11;8:346. doi: 10.1186/1743-422X-8-346. PMID:21745397.

С осени 2011 г. в ТНИИКИП проводятся следующие исследования методом ПЦР:

Забор крови в вакутейнер с ЭДТА (сиреневая пробка)

Хранить не более 6 ч

Ожидание результата 10 дней

Для контроля изменения вирусной нагрузки в процессе лечения

Чувствительность: 300 ГЭ/мл, линейный диапазон измерения:300-3х108 ГЭ/мл

Забор крови в вакутейнер с ЭДТА (сиреневая пробка)

Хранить не более 6 ч

Ожидание результата 10 дней

Забор крови в вакутейнер с ЭДТА (сиреневая пробка)

Хранить не более 6 ч

Ожидание результата 10 дней

Для контроля изменения вирусной нагрузки в процессе лечения

Чувствительность: 500 МЕ /мл, линейный диапазон измерения: 500-5х107 МЕ/мл

Забор крови в вакутейнер с ЭДТА (сиреневая пробка)

Хранить не более 6 ч

Ожидание результата 10 дней

Для подбора оптимальной терапии

Чувствительность: 104 МЕ/мл

Забор крови в вакутейнер с ЭДТА (сиреневая пробка)

Хранить не более 6 ч

Ожидание результата 10 дней

Забор крови в вакутейнер с ЭДТА (сиреневая пробка)

Хранить не более 6 ч

Чувствительность: 400 копий/мл

Ожидание результата 10 дней

Материал для исследования: плазма или лейкоциты крови, слюна, смывы и мазки из ротоглотки, моча (а также амниотическая жидкость, спинномозговая жидкость, бронхоальвеолярный лаваж)

Забор в стерильную посуду:

моча – в стерильный контейнер на 60 мл, сбор первой утренней порции 20-30 мл, доставить в течение 6 ч.

мазки из ротоглотки – стерильным зондом в специальную пробирку с транспортной средой для респираторных мазков,

забор крови в вакутейнер с ЭДТА (сиреневая пробка), хранить не более 6 ч

Чувствительность: 400 копий/мл (безклеточный материал) или 5 копий ДНК CMV на 10 5 клеток (для клеток). Линейный диапазон измерения: 500-10 7 копий/мл.

Ожидание результата 10 дней

Материал для исследования: плазма или лейкоциты крови, слюна, смывы и мазки из ротоглотки, моча (а также амниотическая жидкость, спинномозговая жидкость, бронхоальвеолярный лаваж)

Забор в стерильную посуду:

моча – в стерильный контейнер на 60 мл, сбор первой утренней порции 20-30 мл, доставить в течение 6 ч.

мазки из ротоглотки – стерильным зондом в специальную пробирку с транспортной средой для респираторных мазков,

забор крови в вакутейнер с ЭДТА (сиреневая пробка)

хранить не более 6 ч

Чувствительность: 400 копий/мл, 5 копий ДНК EBV на 10 5 клеток Линейный диапазон измерения: 500 – 10.000.000 копий/мл.

Ожидание результата 10 дней

Материал для исследования: осадок утренней мочи, соскобы и мазки

Забор в стерильную посуду:

моча – в стерильный контейнер на 60 мл, сбор первой утренней порции 20-30 мл, доставить в течение 6 ч.

мазки урогенитальные – в специальную пробирку с транспортной средой, на приеме у гинеколога/уролога провести сбор мазка стерильным зондом или цитощеткой в пробирку с транспортной средой для мазков ТСМ, доставить на исследование в течение 2 суток

Чувствительность: 10 3 ГЭ/мл

Ожидание результата 10 дней

Материал для исследования: смывы с объектов окружающей среды, бронхо-альвеолярный лаваж, моча, кровь,

Забор в стерильную посуду:

смывы – специальным стерильным зондом в специальную пробирку с транспортной средой для респираторных мазков,

моча – в стерильный контейнер на 60 мл, сбор первой утренней порции 20-30 мл,

Доставить в течение 6 ч.

кровь – в вакутейнер с ЭДТА

Чувствительность: 10 2 –10 3 м.т./мл.

Ожидание результата 10 дней

11. Комплексное выявление возбудителей острых кишечных инфекций в одном образце фекалий: одновременное выявление и дифференциация ДНК (РНК) микроорганизмов рода Шигелла (Shigella spp.) и энтероинвазивных E. coli (EIEC), Сальмонелла (Salmonella spp.) и термофильных Кампилобактерий (Campylobacter spp.), аденовирусов группы F (Adenovirus F) и ротавирусов группы А (Rotavirus A), норовирусов 2 генотипа (Norovirus 2 генотип) и астровирусов (Astrovirus))

Материал для исследования – фекалии

Забор: в специальный стерильный контейнер,
собрать кал из продезинфицированного судна одноразовой лопаточкой на крышке контейнера, доставить в течение 6 ч

Ожидание результата 10 дней

Материал для исследования: соскобное отделяемое слизистых оболочек урогенитального тракта, прямой кишки, ротоглотки; отделяемое конъюнктивы глаз; образцы мочи

Забор в стерильную посуду:

моча – в стерильный контейнер на 60 мл, сбор первой утренней порция 20-30 мл, доставить в течение 6 ч.

мазки урогенитальные – в специальную пробирку с транспортной средой, на приеме у гинеколога/уролога провести сбор мазка стерильным зондом или цитощеткой в пробирку с транспортной средой для мазков ТСМ, доставить на исследование в течение 2 суток

Стоимость услуги:

5650 руб.* Заказать

Срок исполнения: 2 - 7 к.д. Заказать Указанный срок не включает день взятия биоматериала

Не менее 3 часов после последнего приема пищи. Можно пить воду без газа.

Метод исследования: ПЦР

Гепатит С вызывается РНК-содержащим вирусом. Заражение преимущественно происходит при непосредственном попадании вируса в кровь (медицинские и немедицинские манипуляции). Одним из основных факторов риска инфицирования является употребление инъекционных наркотиков. Инкубационный период в среднем составляет 6–8 недель. Острый период в большинстве случаев протекает бессимптомно. Наиболее тяжелые исходы хронического гепатита С - цирроз печени и гепатоцеллюлярная карцинома.

РНК вируса обнаруживается в плазме крови в среднем к 10-му дню после заражения и является первым диагностическим маркером острого гепатита С.

Новая услуга 030211 – это уникальное исследование с высокой аналитической чувствительностью (10 МЕ/мл) для определения РНК вируса гепатита С в количественном формате. Исследование используется для мониторинга эффективности терапии. Высокая чувствительность метода достигается за счет максимально автоматизированного проведения исследования.

ПОКАЗАНИЯ К ИССЛЕДОВАНИЮ:

• Мониторинг эффективности противовирусной терапии.

ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ:

Референсные значения (вариант нормы):

Параметр	Референсные значения	Единицы измерения
РНК HCV, количественное ультрачувствительное исследование
РНК HCV (качественное ультрачувствительное исследование)	Не обнаружено
РНК HCV (количественное ультрачувствительное исследование)	Не обнаружено

Комментарий к РНК HCV (количественное ультрачувствительное исследование):

Исследование выполняется на 1 мл плазмы крови с помощью наборов реагентов "АмплиСенс® HCVМонитор-FL" и "АмплиСенс® HCV/HBV/HIV-FL". Аналитическая чувствительность: 10 МЕ/мл, линейный диапазон измерения: 30 — 1 · 10 8 . Концентрация вируса в результате ответа указывается при значении 30 МЕ/мл и выше.

" ["serv_cost"]=> string(4) "5650" ["cito_price"]=> NULL ["parent"]=> string(2) "25" [10]=> string(1) "1" ["limit"]=> NULL ["bmats"]=> array(1) < [0]=>array(3) < ["cito"]=>string(1) "N" ["own_bmat"]=> string(2) "12" ["name"]=> string(41) "Кровь (ЭДТА, 2 пробирки)" > > >

Биоматериал и доступные способы взятия:

Тип	В офисе
Кровь (ЭДТА, 2 пробирки)

Подготовка к исследованию:

Не менее 3 часов после последнего приема пищи. Можно пить воду без газа.

Метод исследования: ПЦР

Гепатит С вызывается РНК-содержащим вирусом. Заражение преимущественно происходит при непосредственном попадании вируса в кровь (медицинские и немедицинские манипуляции). Одним из основных факторов риска инфицирования является употребление инъекционных наркотиков. Инкубационный период в среднем составляет 6–8 недель. Острый период в большинстве случаев протекает бессимптомно. Наиболее тяжелые исходы хронического гепатита С - цирроз печени и гепатоцеллюлярная карцинома.

РНК вируса обнаруживается в плазме крови в среднем к 10-му дню после заражения и является первым диагностическим маркером острого гепатита С.

Новая услуга 030211 – это уникальное исследование с высокой аналитической чувствительностью (10 МЕ/мл) для определения РНК вируса гепатита С в количественном формате. Исследование используется для мониторинга эффективности терапии. Высокая чувствительность метода достигается за счет максимально автоматизированного проведения исследования.

ПОКАЗАНИЯ К ИССЛЕДОВАНИЮ:

• Мониторинг эффективности противовирусной терапии.

ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ:

Референсные значения (вариант нормы):

Параметр	Референсные значения	Единицы измерения
РНК HCV, количественное ультрачувствительное исследование
РНК HCV (качественное ультрачувствительное исследование)	Не обнаружено
РНК HCV (количественное ультрачувствительное исследование)	Не обнаружено

Комментарий к РНК HCV (количественное ультрачувствительное исследование):

Исследование выполняется на 1 мл плазмы крови с помощью наборов реагентов "АмплиСенс® HCVМонитор-FL" и "АмплиСенс® HCV/HBV/HIV-FL". Аналитическая чувствительность: 10 МЕ/мл, линейный диапазон измерения: 30 — 1 · 10 8 . Концентрация вируса в результате ответа указывается при значении 30 МЕ/мл и выше.

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, пользовательских данных (сведения о местоположении; тип и версия ОС; тип и версия Браузера; тип устройства и разрешение его экрана; источник откуда пришел на сайт пользователь; с какого сайта или по какой рекламе; язык ОС и Браузера; какие страницы открывает и на какие кнопки нажимает пользователь; ip-адрес) в целях функционирования сайта, проведения ретаргетинга и проведения статистических исследований и обзоров. Если вы не хотите, чтобы ваши данные обрабатывались, покиньте сайт.

Copyright ФБУН Центральный НИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора, 1998 - 2020

! Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, пользовательских данных (сведения о местоположении; тип и версия ОС; тип и версия Браузера; тип устройства и разрешение его экрана; источник откуда пришел на сайт пользователь; с какого сайта или по какой рекламе; язык ОС и Браузера; какие страницы открывает и на какие кнопки нажимает пользователь; ip-адрес) в целях функционирования сайта, проведения ретаргетинга и проведения статистических исследований и обзоров. Если вы не хотите, чтобы ваши данные обрабатывались, покиньте сайт.

Количественная ПЦР – молекулярно-биологический анализ, при котором подсчитывается количество генетического материала возбудителя в крови. Исследование на гепатит С (количественно) выполняется после подтверждения диагноза для определения вирусной нагрузки. Полимеразная цепная реакция характеризуется высокой специфичностью и чувствительностью. Поэтому анализ считается золотым стандартом в диагностике гепатита С.

Что такое количественный анализ на гепатит С

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – анализ, который основан на определении участков РНК или ДНК, специфичных для возбудителя инфекции. В качестве исследуемого материала чаще используется венозная кровь. Тест обладает высокой специфичностью, так как при исследовании плазмы выявляется генетический материал конкретного вируса.

Метод полимеразной цепной реакции впервые был запатентован в 1983 году Кэри Мюллисом. Внедрение в клиническую практику молекулярно-биологического анализа совершило переворот в диагностике бактериальных, грибковых и вирусных болезней.

ПЦР количественный при гепатите С – исследование, при котором подсчитывается количество РНК ВГС (HCV RNA). По результатам определяют вирусную нагрузку, от которой зависят:

1. дозировка медикаментов;
2. продолжительность противовирусной терапии (ПВТ);
3. вероятность осложнений;
4. успешность лечения.

РНК вируса гепатита С (ВГС) обнаруживается спустя 10-12 суток после заражения, когда до первых симптомов еще далеко. Поэтому исследование применяется для ранней диагностики HCV-инфекции.

Когда нужно сдать тест

Молекулярно-биологический анализ назначается при положительном результате скринингового обследования на гепатит – ИФА и качественной ПЦР. Исследование применяется для:

• подтверждения диагноза;

• определения уровня виремии (вирусной нагрузки);

• прогнозирования течения болезни;

• оценки результативности лечения;

• диспансерного обследования после ПВТ.

ПЦР-диагностика рекомендована всем людям с вирусным гепатитом. Точность исследования варьируется в пределах 97-99%, поэтому риск ложных результатов минимален.

Показания для анализа:

• обнаружение антител к вирусу гепатита С (anti-HCV);
• признаки воспаления печени;
• качественное выявление РНК ВГС;
• острый и вялотекущий гепатит;
• микст-гепатиты.

Количественный тест выполняется на всех этапах заболевания. Чтобы оценить результативность терапии, вирусную нагрузку определяют перед, во время и после ПВТ. Если уровень виремии высокий, увеличивается риск цирроза и рака печени. Поэтому для профилактики осложнений назначают антивирусные средства в больших дозах.

Подготовка и сдача крови

Количественный анализ ПЦР проводится в лабораторных условиях. Домашних тестов для выявления числа вирусов в крови не существует.

Объективность результатов зависит от правильности подготовки к исследованию. Чтобы снизить вероятность погрешностей, нужно:

1. сдавать венозную кровь натощак;
2. выполнять процедуру до 12 часов дня;
3. не есть за полсуток до визита в лабораторию;
4. отказаться от газированных напитков и кофе в день обследования.

Забор крови у женщин рекомендуется выполнять за 1-2 дня до менструации. В этот период иммунная защита ослабевает, поэтому сывороточная концентрация возбудителя максимальная.

За 5-7 суток до анализа исключают алкогольные напитки, жирную и острую пищу. Врачи не советуют курить за 2-3 часа до забора крови.

Точность ПЦР-диагностики на гепатит С во многом зависит от правильности сбора и транспортировки биоматериала:

• забор крови осуществляют в условиях процедурного кабинета;
• пользуются только одноразовыми стерильными шприцами;
• для исключения заражения биоматериала соблюдают правила асептики и антисептики.

Контейнер с пробой маркируют в присутствии пациента, после чего отправляют в лабораторию.

Как выполняют подсчет вирионов

Во время количественной ПЦР возбудителя идентифицируют путем обнаружения РНК в плазме крови. Это возможно за счет удвоения участка нуклеиновой кислоты вируса в среде фермента РНК-полимеразы. Во время анализа копируются (амплифицируются) только определенные участки генома.

Подсчет количества РНК вируса гепатита осуществляют в 3 этапа:

1. Выделение генетического материала. Чтобы очистить вирусную РНК от крови и белковых включений, биоматериал пропускают через сорбенты, отмывают в растворе, центрифугируют, а потом обезвоживают. В результате остается осадок с вирусными частицами, который растворяют в специальной жидкости. На выходе получается РНК вируса гепатита в элюенте.
2. Амплификация. Анализ выполняется в приборе-термостате, в котором периодически подогревают и охлаждают пробирки. При одном исследовании делают до 35 циклов, состоящих из 3 фаз: денатурация (разрушение) РНК, отжиг и синтез нуклеиновых кислот матричной цепи. За несколько десятков циклов в пробирке образуется множество фрагментов РНК, достаточное для подсчета количества генетического материала.
3. Электрофорез. Пробирку с копиями вируса гепатита помещают в агарозный гель. Образец подключают к источнику тока, под действием которого фрагменты РНК разделяются. Благодаря электрофорезу копии нуклеиновых кислот становятся различимыми в свете ультрафиолета. Затем с применением специального оборудования подсчитывают количество РНК вируса.

В настоящее время для определения уровня виремии все чаще проводят ПЦР-диагностику в реальном времени (Real-Time PCR). В отличие от стандартного анализа, в образец крови вводят раствор с флуоресцентными метками. Благодаря этому удается подсчитать количество амплифицированной РНК ВГС в реальном времени после каждого цикла.

Результаты количественного определения РНК

Количественная оценка позволяет судить об уровне виремии, то есть активности вирусного процесса. С учетом результатов анализа гепатолог подбирает дозу лекарства, определяет продолжительность терапии гепатита С.

Расшифровка количественного анализа на гепатит С:

Данные количественной ПЦР, в МЕ/мл	Трактовка
не обнаружено	вариант нормы, вируса в крови нет
менее 150	содержание РНК ниже линейного диапазона концентраций, минимальная вирусная нагрузка
150-3*10 4	низкий уровень виремии
от 3*10 4 до 8*10 5	средняя вирусная нагрузка
более 8*10 5	содержание РНК ВГС выше линейного диапазона концентраций

Вирусная нагрузка – важный показатель, который учитывается при разработке схемы терапии. Если уровень виремии минимальный или низкий, прогноз течения гепатита и результативности ПВТ благоприятный. Ситуация ухудшается при средней и высокой вирусной нагрузке. Такие пациенты подвержены осложнениям – фиброзу, жировому гепатозу, циррозу.

Уровень виремии не отражает степень повреждения печеночной паренхимы или тяжесть течения гепатита. Чтобы определить серьезность изменений в печени, прибегают к инструментальному обследованию – фибросканированию, биопсии и гистологическому анализу.

Сколько по времени делается качественный и количественный анализ и примерная цена

Чтобы провести исследование на гепатит С (качественный и количественный ПЦР-анализ), посетите лабораторное отделение поликлиники, частную клинику или лабораторию. Стоимость диагностики в Москве зависит от:

1. типа анализируемого биоматериала;
2. чувствительности применяемой тест-системы;
3. количества определяемых инфекций.

Примерная стоимость лабораторного анализа

Тип анализа	Цена в рублях
забор крови	170-200
качественная ПЦР	750-1000
количественная ПЦР (реал-тайм)	3800-4000
генотипирование	1350-1400

Анализ ПЦР на гепатит С делается не более 3 часов. Забрать окончательные результаты можно уже в течение 1-2 суток.

Бывает ли ложный результат

Генетический материал возбудителя гепатита выявляется в крови спустя 1.5 недели после заражения. До этого периода содержание РНК ВГС в крови так мало, что ее нельзя обнаружить в лабораторных условиях. Для оценки вирусной нагрузки рекомендуется пользоваться высокочувствительными тест-системами: 150-1*10 8 МЕ/мл.

ПЦР-диагностика – исследование, достоверность результатов которого достигает 97-99%. Искажение данных возможно при:

1. игнорировании правил подготовки к исследованию;
2. нарушении требований антисептики;
3. несоблюдении методики анализа крови;
4. неправильном заборе и хранении биоматериала.

Перед обследованием пациент должен сообщить врачу о приеме медикаментов, так как их компоненты могут влиять на активность возбудителя и результаты исследования.

ПЦР-диагностика – высокоточное исследование, при котором определяют наличие и количество копий возбудителя инфекции. Получение ложноотрицательных результатов почти невозможно. Погрешности выявляются в единичных случаях при диагностике хронического гепатита вне обострения.