Лабораторная диагностика вирусного клещевого энцефалита

Комплексное исследование, направленное на диагностику инфицирования и оценку эффективности вакцинации против клещевого энцефалита, а также на диагностику системного клещевого боррелиоза.

Клещевой энцефалит; системный клещевой боррелиоз (болезнь Лайма); комплексная серологическая диагностика.

Синонимы английские

Тick-borne encephalitis; tick-borne borreliosis (Lyme borreliosis); comprehensive serological diagnostics.

Иммуноферментный анализ (ИФА).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

• Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Клещевой энцефалит – это вирусное природно-очаговое трансмиссивное заболевание, характеризующееся преимущественным поражением центральной нервной системы. Возбудителем является РНК-содержащий вирус, относящийся к роду Flavivirus семейства Togaviridae, группа Arboviruses. Инфекция носит сезонный (весенне-летний) характер и передается преимущественно с укусом клещей, также возможен алиментарный путь передачи через инфицированное сырое молоко коров и коз. Инкубационный период заболевания длится от 3 до 21 дней, в среднем 10-14 дней. Клинические проявления носят разнообразный характер. В зависимости от выраженности неврологических расстройств выделяют следующие формы заболевания: лихорадочную, менингеальную, менингоэнцефалитическую, менингоэнцефалополиомиелитическую и полирадикулоневритическую, двухволновый менингоэнцефалит. По степени тяжести инфекция может протекать в легкой, средней или тяжелой форме, что влияет на длительность заболевания, выраженности клинической симптоматики и варианты исхода болезни. Возможно длительное вирусоносительство в виде латентной, персистентной или хронической инфекции.

Диагностика клещевого энцефалита основана на комплексе эпидемиологических, клинических данных, результатах изменений в лабораторных параметрах. В клиническом анализе крови в острый период заболевания может отмечаться лейкоцитоз с абсолютным и относительным увеличением количества нейтрофилов. Также увеличивается скорость оседания эритроцитов, в анализе мочи может наблюдаться транзиторная протеинурия.

В серологической лабораторной диагностике данного заболевания, главным образом, применяется выявление специфических антител к вирусу клещевого энцефалита. В настоящее время для определения антител классов IgM и IgG используется метод твердофазного иммуноферментного анализа. Данные специфические иммуноглобулины вырабатываются иммунной системой в ответ на инфицирование вирусом клещевого энцефалита или на вакцинацию против данного возбудителя. Важным в серологической диагностике является определение нарастания титра специфических антител в парных сыворотках крови, взятых в первые дни болезни и через две-три недели от ее начала. Антитела класса IgM появляются одновременно с первыми симптомами заболевания, достигая максимального уровня через 3,5-4,5 недели с момента инфицирования, затем постепенно снижаясь в течение нескольких месяцев. Специфические антитела класса IgG возникают в крови спустя неделю после появления первых симптомов, достигают максимума через 1,5-2,5 месяца с момента инфицирования и сохраняются на протяжении всей жизни, обеспечивая стойкий иммунитет.

Системный клещевой боррелиоз, или болезнь Лайма, - природно-очаговое трансмиссивное заболевание, возбудителем которого является грамотрицательная подвижная бактерия Borrelia burgdorferi семейства Spirochaetaceae. Заражение человека может происходить после укусов иксодовых клещей, инокуляции боррелий со слюной клеща, возможна трансплацентарная передача возбудителя от матери к плоду. Чаще всего заражение происходит в весенне-летний период активности клещей. Инкубационный период заболевания может длиться от 3 до 32 дней, по данным некоторых авторов - до 60 дней. Клещевой боррелиоз имеет разнообразные клинические проявления: лихорадка, интоксикация, головные боли, распространенная "мигрирующая" эритема на месте контакта клеща с кожей больного, регионарный лимфаденит. При прогрессировании заболевания, его осложнении и несвоевременном применении лечения могут развиться нарушения в виде менингита, менингоэнцефалита, энцефалита и энцефаломиелита, поражение сердца, глаз, рецидивирующие и/или хронические артриты.

Диагностика заболевания основывается на данных эпидемиологического анамнеза, специфических клинических проявлениях и на оценке лабораторных данных. Особую роль играет специфическая лабораторная диагностика при нетипичной картине протекающей инфекции и безэритемных формах заболевания. В данном случае применяется метод полимеразной цепной реакции для выявления ДНК возбудителя Borrelia burgdorferi и серологическая диагностика.

Серологическая диагностика в настоящее время имеет широкое распространение и направлена на определение наличия и концентрации специфических антител классов IgM и IgG к возбудителю системного клещевого боррелиоза. При применении метода твердофазного иммуноферментного анализа диагностическое значение имеет нарастание титра специфических антител в парных сыворотках. Следует отметить, что антитела класса IgM появляются при первых симптомах заболевания, но их количество нарастает сравнительно медленно, достигая максимума через 2-3 недели, а далее снижаясь. Антитела класса IgG выявляются через несколько недель после инфицирования, максимального уровня достигают через 4-6 месяцев. Таким образом, антитела IgM указывают на недавнее заражение, а IgG подходят для более поздней диагностики. Также определение уровня IgG антител применяется при контроле эффективности проводимой терапии против клещевого боррелиоза.

Для чего используется исследование?

• Для комплексной лабораторной диагностики клещевого энцефалита и клещевого боррелиоза;
• для подтверждения текущего или перенесенного клещевого энцефалита;
• для оценки эффективности вакцинации против клещевого энцефалита;
• для установления и подтверждения диагноза "клещевой боррелиоз";
• для оценки эффективности проводимой терапии против клещевого боррелиоза;
• для дифференциальной диагностики поражений центральной нервной системы.

Когда назначается исследование?

• При клинических проявлениях и подозрении на клещевой энцефалит;
• при подозрении на текущий или перенесенный клещевой энцефалит, при проведении вакцинации против клещевого энцефалита;
• при клинических проявлениях и подозрении на клещевой боррелиоз (болезнь Лайма);
• при выявлении или при подозрении на укус клеща, в комплексном обследовании в инфекционном стационаре.

Что означают результаты?

КП (коэффициент позитивности): 0 - 0,89.

КП (коэффициент позитивности): 0 - 0,89.

Концентрация: 0 - 100 Ед/мл.

Концентрация: 0 - 100 Ед/мл.

• текущее или перенесенное заболевание клещевым энцефалитом или клешевым боррелиозом;
• антитела класса IgM против возбудителя клещевого энцефалита: ранние стадии клещевого энцефалита (при этом IgG к вирусу клещевого энцефалита не выявляются); текущий или недавно перенесенный клещевой энцефалит (в сочетании с положительным тестом на IgG к вирусу клещевого энцефалита) при условии, что не проводилась вакцинация против клещевого энцефалита; недавно проведенная вакцинация против клещевого энцефалита;
• антитела класса IgG против возбудителя клещевого энцефалита: наличие активного иммунитета вследствие ранее перенесенной инфекции или вакцинации (если тест на IgM к вирусу клещевого энцефалита отрицательный); текущий или недавно перенесенный клещевой энцефалит (в сочетании с положительным тестом на IgM к вирусу клещевого энцефалита) при условии, что не проводилась вакцинация; проведенная вакцинация против вируса клещевого энцефалита.
• антитела класса IgM против возбудителя клещевого боррелиоза: возможное наличие инфекции, вызванной Borrelia burgdorferi;
• антитела класса IgG против возбудителя клещевого боррелиоза: наличие недавнего инфицирования Borrelia burgdorferi; контроль эффективности проводимой терапии против клещевого боррелиоза.

Причины отрицательного результата / понижения:

• отсутствие клещевого энцефалита, клещевого боррелиоза;
• отсутствие или снижение иммунного ответа;
• ранние сроки инфицирования возбудителем;
• неэффективно проведенная вакцинация против клещевого энцефалита;
• снижение иммунологического ответа после вакцинации;
• ложноотрицательные результаты.

Что может влиять на результат?

• Клинический период заболевания;
• предшествующая вакцинация;
• наличие перекрестно-реагирующих антител к другим возбудителям рода Flavivirus (для клещевого энцефалита);
• для клещевого боррелиоза: инфекции, способные приводить к ложноположительному результату (сифилис, лептоспироз, возвратный тиф, вирус иммунодефицита человека, инфекционный мононуклеоз) и аутоиммунные расстройства;
• особенности иммунного ответа.



• При интерпретации результатов обследования необходимо учитывать длительность от момента инфицирования, предшествующую вакцинации;
• для комплексной оценки полученных результатов их необходимо сопоставлять с эпидемиологическими, клиническими и другими лабораторными данными.

32 Вирус клещевого энцефалита, антиген (в ликворе)

35 Белок общий в ликворе

34 Глюкоза в ликворе

28 Borrelia burgdorferi s.l., ДНК [ПЦР]

Кто назначает исследование?

Инфекционист, кардиолог, невролог, офтальмолог, ревматолог, акушер-гинеколог, терапевт, врач общей практики, гастроэнтеролог, нефролог.

Литература

1. Покровский В.И., Творогова М.Г., Шипулин Г.А. Лабораторная диагностика инфекционных болезней. Справочник / М. : БИНОМ. – 2013.
2. Шувалова Е.П. Инфекционные болезни / М.: Медицина. – 2005. – 696 с.
3. Fauci, Braunwald, Kasper, Hauser, Longo, Jameson, Loscalzo Harrison’s principles of internal medicine, 17th edition, 2009.
4. Paillard L, Jones KL, Evans AL, Berret J, Jacquet M, Lienhard R, Bouzelboudjen M, Arnemo JM, Swenson JE, Voordouw MJSerological signature of tick-borne pathogens in Scandinavian brown bears over two decades / Parasit Vectors. // 2015 Jul 28;8:398.
5. Pancewicz SA, Garlicki AM, Moniuszko-Malinowska A, Zajkowska J, Kondrusik M, Grygorczuk S, Czupryna P, Dunaj J Diagnosis and treatment of tick-borne diseases recommendations of the Polish Society of Epidemiology and Infectious Diseases. Polish Society of Epidemiology and Infectious Diseases / Przegl Epidemiol. // 2015;69(2):309-16, 421-8.

Клещевой вирусный менингоэнцефалит может протекать в особо тяжелых формах, вплоть до летального исхода. На первой стадии развития болезни он схож с другими опасными заболеваниями, такими как клещевой боррелиоз, острый полиомиелит, серозный менингит, сыпной тиф, японский комариный энцефалит. Поэтому крайне важна ранняя дифференциальная диагностика, позволяющая однозначно установить истинную причину нарастающих симптомов. Необходимость дифференцировать вирусный энцефалит и боррелиоз объясняется также тем, что эти два заболевания характерны для одних и тех же регионов и возникают они после присасывания клеща в весенне-летний период.

Если при нахождении в эндемичном регионе вы обнаружили на теле клеща, следует незамедлительно провести лабораторные исследования биоматериала, а в случае положительного результата — принять экстренные меры в ближайшие 4 суток после укуса насекомого, обратившись к инфекционисту или терапевту. В нашем обзоре мы рассмотрим, какие методы диагностики существуют и какие показатели анализов на энцефалит и боррелиоз являются сигналом к безотлагательным действиям.

Боррелиоз и энцефалит: что это и в каких случаях следует сдать анализ на наличие инфекции

Среди десятков заболеваний, переносчиками которых являются клещи, двумя — энцефалитом и боррелиозом (болезнью Лайма) — можно заразиться, не покидая территории России. Эти инфекционные болезни часто путают, а между тем, они совершенно разные. Клещевой энцефалит имеет вирусное происхождение, а клещевой боррелиоз — бактериальное. Оба заболевания поражают ЦНС, но болезнь Лайма — также суставы, кожный покров, сердечную мышцу. Энцефалит протекает преимущественно в острой форме, боррелиоз склонен к хронизации. Энцефалит оставляет устойчивый и продолжительный иммунитет, болезнь Лайма вызывает замедленный иммунный ответ с каскадным развитием аутоиммунных реакций, поэтому следующее заражение боррелиозом возможно уже спустя 7 лет. По мере развития каждая болезнь приобретает собственные ярко-выраженные симптомы.

По мере развития вируса происходят постепенные, зачастую необратимые изменения в сосудах и оболочках мозга. Первые две недели болезнь протекает бессимптомно. К 3-й неделе появляются высокая температура, головная и мышечная боль, тошнота, отсутствие аппетита. У четверти заболевших эти симптомы возникают еще позднее, спустя месяц после заражения. С течением времени боли усиливаются. Появляются судороги, паралич конечностей, дезориентация, потеря сознания, кома. При отсутствии помощи — летальный исход.

В зависимости от преобладания тех или иных симптомов, различают несколько форм течения клещевого энцефалита. Наиболее тяжелые, очаговые, формы чаще встречаются на территории Дальнего Востока, наиболее легкие, неочаговые, формы превалируют в центрально-европейской части России (см. табл. 1).

Таблица 1 . Клинические формы течения клещевого энцефалита

Клиническая форма	Тяжесть	Течение	Прогноз
Неочаговые формы
•Стертая	Легкая форма	Острое	Полное выздоровление
•Лихорадочная	Средней степени		Выздоровление с неврологическим дефицитом
•Менингеальная	Тяжелая форма
Очаговые формы
•Энцефалитическая	Средней степени	Острое	Полное выздоровление
•Менингоэнцефалитическая		Первично-хроническое	Выздоровление с неврологическим дефицитом
•Полиоэнцефалитическая	Тяжелая форма	Вторично-хроническое
•Полиомиелитическая		Стабильное	Хронизация
•Полиоэнцефаломиелитическая		Прогредиентное (с нарастанием симптоматики)	Летальный исход
•Полирадикулоневритическая

Через месяц появляются признаки поражения нервной системы: дефекты речи, частичный паралич конечностей, перепады в настроении. У некоторых больных развивается менингит, нарушаются сердечные ритмы. Если болезнь оставить без внимания, через год начнет прогрессировать потеря слуха, артрит, невралгия, сильная затрудненность речи, потеря ориентации в пространстве.

Боррелиоз хорошо лечится, и главное в этом деле — не допустить перехода заболевания в диссеминированную (распространенную, рассеянную) или хроническую стадию (см. табл. 2). Больному назначают антибиотики на протяжении 2–4 недель, своевременный прием которых практически гарантирует полное выздоровление.

Таблица 2 . Клинические стадии и формы болезни Лайма

Информация об исследовании

Клещевой энцефалит – менингоэнцефалит - вирусная инфекция нервной системы поражает не только человека, но и других млекопитающих. Вирус может инфицировать мозг, мозговые оболочки или то и другое вместе (менингоэнцефалит). Клещевой энцефалит - природноочаговое заболевание распространённое в России в основном в Сибири, Урале и на Дальном Востоке. В природе вирус имеет хозяина - клеща.
Этиология: возбудитель вирус клещевого энцефалита - член семейства флавивирусов (род flavivirius).

Выделяют 3 разновидности вируса:
1.Дальневосточный подвид
2.Центральноевропейский подвид
3.Возбудитель двухволнового менингоэнцефалита

Вирионы возбудителя клещевого энцефалита имеют сферическую форму с диаметром 40-50 нм. Внутренним компонентом является нуклеокапсид. Вирус длительное время сохраняется при низких температурах (оптимальный режим - 60 градусов и ниже). Быстро инактивируется при комнатной температуре.
Эпидемиология. Основными переносчикам вируса являются иксодовые клещи (Ixodes persulcatus, Ixodes nicinus). Во всех природных очагах вирус циркулирует между клещами и дикими животными (главным образом грызунами и птицами), которые являются дополнительным резервуаром. В антропурических очагах (местности сильно изменённые деятельностью человека) резервуаром могут служить домащние животные - козы и коровы. Вирус клещевого энцефалита может передоваться клещами трансовариально через яйцеклетки их потомству.

Пути передачи.
- Трансмисивный путь - через укус клеща.
- Алиментарный путь - при употреблении в пищу сырого молока и молочных продуктов инфецированных коз и коров.
Максимальный подъём заболеваемости в мае-июне. Второй менее выраженный подъём заболеваемости регистрируется в августе-сентябре, что сязанно с активностью и численностью клещей.
Клиническая картина.
Инкубационный период: при укусе клеща длится от 1-й до 2-х-3-х недель, при алиментарном способе заражения 4-7 дней. Клещевой энцефалит начинается внезапно с лихорадки, интоксикации. Температура тела повышается до 38-39 градусов. Больных беспокоят сильная головная боль, слабость, тошнота, рвота, нарушение сна. Характерен внешний вид больного — кожа лица, шеи, верхней половины грудной клетки, коньюктивы — гиперемированы, склеры инъецированы. Заболевание может завершиться в 3-5 дней.
Такая форма называется лихорадочной. Является одной из самых частых, но редко диагностируется. Поражение нервной системы при этой форме отсутствует. Менингиальная форма клещевого энцефалита характеризуется общемозговым синдромом, появляются регидность мышц затылка, симптомы Кернига и Брудзинского. Изменения в цереброспинальной жидкости свидетельствует о серозном менингите. Лихорадка длиться 10-14 дней.
Менингоэнцефалитическая форма протекает значительно тяжелее. Больной становиться вялым, заторможенным, сонливым. Усиливаются головные боли, тошнота, рвота, нередко наблюдается бред, галлюцинации, психомоторное возбуждение, нарушение сознания, у некоторых больных могут быть судороги, эпилептиформные припадки. Поражаются нервы иннервирующие лицевую и глазодвигательную мускулатуру и другие черепномозговые нервы.
Полирадикулоневритическая форма протекает с поражением периферических нервов и корешков с болями по ходу нервных стволов, нарушением чувствительности.
Полиэнцефаломиелитическая форма - наблюдаются проявления полимиелитического синдрома в виде симптома ‘’свисающей головы’’, ’’опущенных надплечий’’, ’’свисающих вдоль тела рук’’. Также периодически возникают подёргивания мышц фибриллярного или фасцикулярного характера. Полиэнцефаломиелитические нарушения могут сочетаться с проводниковыми, обычно пирамидными, вялые парезы рук и спастические ног. Комбинации амиотрофии и гиперфлексии в пределах одной паретической конечности.
Одним из методов диагностики клещевого энцефалита является ПЦР.
ПЦР (полимеразная цепная реакция) - это метод, который позволяет найти в исследуемом клиническом материале небольшой участок генетической информации (ДНК) любого организма среди огромного количества других участков и многократно размножить его.

Достоинства метода:
-Более высокая чувствительность по сравнению с другими методами
-Высокая специфичность метода
-Позволяет выявить возбудитель в малом количестве пробы
-Позволяет выявить только живые микроорганизмы
-Является ранним контролем результатов проведенного лечения
-Скорость проведения анализов

Показания к исследованию.
-Выявление возбудителя при латентном и бессимптомном течении воспалительного процесса .
-Является единственным подтверждающим тестом, так как другие методы лабораторной диагностики (микроскопия и бактериологический) обладают более низкой чувствительностью по сравнению с ПЦР .
-Контроль эффективности проведенного лечения.

Методическая разработка для преподавателей

Практическое занятие № 16 по микробиологии

для студентов 3 курса лечебного и педиатрического факультетов.

Цель: способствовать формированию умений по изучению вирусных инфекций, освоению принципов их лабораторной диагностики.

рассмотреть биологические свойства вирусов – возбудителей клещевого энцефалита, краснухи, бешенства;

изучить эпидемиологию, патогенез, клинические особенности, вызываемых ими заболеваний, принципы их профилактики и лечения;

обучить методам лабораторной диагностики вирусных инфекций.

Студент должен знать:

1) до изучения темы – морфологию, строение, способы репродукции вирусов, методы лабораторной диагностики вирусных заболеваний;

2) после изучения темы – свойства возбудителей клещевого энцефалита, краснухи, бешенства, методы культивирования, эпидемиологию, патогенез и клинические проявления, специфическое лечение и профилактику вызываемых ими заболеваний.

Студент должен уметь:

отбирать патологический материал от больных для вирусологического исследования;

проводить исследования по изучению биологических свойств вирусов;

осуществлять серологические методы диагностики вирусных инфекций;

выполнять профилактические мероприятия.

Что Вам известно об истории изучения возбудителей клещевого энцефалита, краснухи, бешенства?

Каковы основные биологические свойства характерны для этих вирусов?

Какую роль они играют в патологии человека?

Опишите эпидемиологию, патогенез, клинические проявления, иммунитет краснухи, бешенства.

Какие методы применяются для лабораторной диагностики этих вирусных заболеваний?

Охарактеризуйте основные принципы их профилактики и лечения.

План практического занятия

Время на перерыв

Время на перерыв

Изучение демонстрационного материала

Уборка рабочего места

2. Содержание занятия:

2.1. Контроль исходного уровня знаний. Способ – программированный контроль.

2.2. Ориентировочные основы самостоятельной работы студентов:

- выполнение практической работы;

- оформление и защита протоколов.

3. Тезисы изучаемого материала

3.1. Вирусы клещевого энцефалита.

Клещевой энцефалит (син.: таежный энцефалит, дальневосточный менингоэнцефалит, клещевой энцефаломиелит, русский весенне-летний менингоэнцефалит, tick-borne encepalitis) – это острое вирусное заболевание, характеризующееся поражением серого вещества головного и спинного мозга, приводящих к развитию параличей и парезов.

История изучения заболевания.

Как нозологическая единица КЭ был выделен в 1937 г. в результате работы комплексной экспедиции, возглавляемой Л.А.Зильбером (в составе экспедиции работали видные вирусологи М.П.Чумаков, В.Д.Соловьев). Были установлены закономерности, природная очаговость, сезонность, связь с активностью клещей. Описаны особенности клиники и патоморфологии КЭ, разработаны методы профилактики и лечения.

Вторая экспедиция под руководством Е.Н.Павловского выявила роль и значение клещей, как переносчиков и естественного резервуара вируса в природе. Результаты послужили основой теории о природной очаговости КЭ.

Во время третьей экспедиции, возглавляемой И.О.Рогозиным, изучались подходы к разработке специфической профилактике КЭ.

Семейство – Flaviviridae (в 1984г. выделено в качестве самостоятельного из семейства Togaviridae). Название семейство и род получили по названию желтой лихорадки (лат.–flava–желтый), являющейся типичным представителем этой группы.

Род – Flavivirus, включает 63 представителя, сгруппированных в 10 антигенных комплекса. Различают два типа вируса клещевого энцефалита – западный (переносчики — клещи Ixodes persulcatus) и восточный (переносчики — клещи Ixodes ricinus), которые отличаются по тяжести клинического течения и антигенному составу вирусов возбудителя. В последние годы выделен третий тип вируса, изолированный в Греции из клещей Rhipicephalus bursa.

Форма вирусов сферическая. Размер – 40-45 нм. Тип симметрии – кубический. Организация – сложная, на поверхности расположены шипики гликопротеиновой природы. Молекулярная масса – 46*10 4 кД. Коэффициент седиментации – 175-218 С.

Геном представляет собой одноцепочечную, инфекционную, плюснитевая РНК с молекулярной массой 4,2х10 3 кД, константой седиментации 45 С, содержит около 14 пар нуклеотидов.

РНК – 5,5 - 6,3%, Белки – 57-60%, Липиды – 27-30%, Углеводы – 6,5%

Комплементсвязывающий, групповой; выявляется в РСК;

Гемагглютинин, типовой; выявляется в РН, РТГА.

Адсорбция при помощи фосфолипидных и гликопротеидных рецепторов.

Проникновение путем рецепторного эндоцитоза (виропексис), при слиянии вирусной оболочки со стенкой вакуоли вирусная РНК выходит в цитоплазму.

РНК выполняет функцию иРНК. Репликация идёт медленно (40- 60 ч).

Сборка: образование нуклеокапсида на ЭПС клетки.

Выход путем почкования (присоединение суперкапсида при выходе из клетки).

В мозговой ткани белых мышей (3-4 недельного возраста).

В культуре клеток – куриных фибробластов, почек обезьян, перевиваемых клеток. В КК наблюдается ЦПД.

На овокультурах – в желточном мешке и хорионалантоисной оболочке.

Вирус разрушается при действии эфира, детергентов, формалина, при кипячении — через 2 минуты. При нагревании до 56-60 о С в течении 10-30 мин., в молоке сохраняется до 2-х мес. Устойчив к УФО, длительно сохраняется в глицерине.

Трансмиссивное природно-очаговое заболевание с весенне-летней сезонностью.

Механизм заражения – трансмиссивный.

трансмиссивный (при укусе клеща);

алиментарный (при употреблении в пищу инфицированного сырого козьего, коровьего молока и молочных продуктов);

контаминация (при раздавливании и втирании присосавшегося клеща);

трансплацентарный (плоду от матери).

Переносчики — клещи Ixodes persulcatus и Ixodes ricinus.

Клещи не могут летать или прыгать, они могут только зацепиться за проходящую мимо и задевающую их жертву или же упасть на нее. Как и в случае других кровососущих насекомых, укус клеща может остаться незамеченным довольно долгое время, благодаря присутствию в его слюне особых разжижающих кровь (антикоагулянтов) и обезболивающих веществ. Именно по этой причине, простой, но очень эффективной мерой по обнаружению присосавшегося клеща являются само- и взаимоосмотры по выходе из леса и на привалах. Самцы клеща, в отличие от самок, присасываются на очень короткое время, что является еще одной причиной того, что многие заболевшие не помнят факта укуса.

Не исключено и заражение людей, не посещавших лес. Это может произойти при заносе клещей животными (собаками, кошками) или людьми — на одежде, с цветами, ветками и т. д.

Наибольшему риску подвержены лица, деятельность которых связана с пребыванием в лесу: работники леспромхозов, геологоразведочных партий, строители автомобильных и железных дорог, нефте- и газопроводов, линии электропередач, топографы, охотники, туристы. В последние годы в числе больных до 75% составляют жители города, заразившиеся в пригородных лесах, на садовых и огородных участках.

Вирус попадает через кожу или слизистые в клетки мононуклеарно-фагоцитарной системы, где происходит первичная репродукция вируса. Затем выходит в кровь (вирусемия), вызывая интоксикацию. С током крови попадает в клетки ЦНС, размножается, вызывая дегенеративные изменения в сером веществе спинного и головного мозга (особенно тяжелые поражения отмечают в нервных клетках передних рогов шейного отдела СМ, ядрах мозжечка и продолговатого мозга). В оболочках мозга, спинномозговых корешках, периферических нервах развивается экссудативное воспаление.

Инкубационный период в среднем составляет 1,5—2 недели, иногда затягиваясь до 3 недель. Разную длительность инкубационного периода можно объяснить характером укуса — чем дольше присасывался клещ, тем больше вирусов проникло в организм и тем быстрее будет развиваться заболевание.

Заболевание развивается остро, в течение нескольких дней.

Основные формы КЭ.

Вирус поражает мягкую мозговую оболочку, серое вещество (кору) головного мозга, двигательные нейроны спинного мозга и периферические нервы, что клинически выражается в судорогах, параличах отдельных групп мышц или целых конечностей и нарушении чувствительности кожи.

Позже, когда вирусное воспаление охватывает весь головной мозг, отмечаются общемозговые симптомы— постоянные головные боли, упорная рвота, потеря сознания, вплоть до коматозного состояния или, наоборот, развивается психомоторное возбуждение с утратой ориентации во времени и пространстве.

Могут отмечаться нарушения сердечно-сосудистой системы (миокардит, сердечно­сосудистая недостаточность, аритмия), пищеварительной системы — задержка стула, увеличение печени и селезенки.

Все перечисленные симптомы отмечаются на фоне токсического поражения организма — повышение температуры тела до 39—40°С.

Тяжесть заболевания зависит от возраста — вероятность выраженного поражения головного мозга резко повышается с возраста 40 лет, при возрасте старше 60 регистрируется максимальная летальность.

Осложнения клещевого энцефалита отмечаются у 30 — 80% переболевших клинически выраженной формой и в основном представлены вялыми параличами преимущественно верхних конечностей.

Летальность колеблется в пределах от 2% при европейской форме до 20% при дальневосточной (более тяжелой и опасной) форме. Смерть наступает в течение 1 недели от начала заболевания.

Реже встречаются нетипичные варианты заболевания — стертые, гриппоподобные формы; полиомиелитоподобная форма. Возможно длительное хроническое носительство вируса.

После перенесенной инфекции формируется стойкий пожизненный иммунитет в результате выработки вируснейтрализующих, комплементсвязывающих и гемагглютинирующих антител. Развивается ГЗТ.

Исследуемый материал – кровь, СМЖ, клещи, секционный материал.

Вирусологический метод – выделение и идентификация;

Серологический метод – РН, РСК, РТГА, ИФА, РЗГА, РНГА с парными сыворотками (нарастание в 4 и более раз);

Экспресс-метод – РИФ, РПГА, ИФА,РИА;

Иммунохимический и молекулярно-биологический методы – ИФА, РНГА

Общие меры по профилактике укусов клещей включают:

ношение в лесу специальной одежды — сапоги, куртки с плотно застегнутыми рукавами; платок или сетка, закрывающая шею; головной убор, закрывающий волосы; само- и взаимоосмотры на выходе из леса и на привалах; скашивание травы и низкорослого кустарника, рубка сухостоя, освобождение от завалов и пней; применение жидких и аэрозольных репеллентов (специальных химических веществ для борьбы с насекомыми); кипячение сырого козьего и коровьего молока на территориях, где регистрируется клещевой энцефалит.

Специфическая (для клещевого энцефалита) профилактика осуществляется с помощью инактивированных вакцин. Быструю (через 24 часа от момента введения) профилактику также можно осуществлять с помощью однократного введения иммуноглобулина, который защищает на срок до 1 месяца.

Первая помощь при укусе клеща. Для удаления присосавшегося клеща его предварительно смазывают каким-нибудь жиром (вазелином, кремом, подсолнечным маслом), а через 15—20 минут осторожно вытягивают нитяной петлей или пинцетом, покачивая из стороны в сторону. Следует избегать разрушения клеща. Снятое насекомое следует сжечь или залить кипятком, однако его также можно принести с собой в медицинский пункт для установления инфицированности клеща вирусом. Место укуса рекомендуется обработать йодом, перекисью водорода или спирт-содержащим препаратом и тщательно вымыть руки.

Ни в коем случае не следует раздавливать клеща, поскольку в этом случае также может произойти заражение вирусом, содержащимся во внутренних органах клеща.

Вакцины. Принципиально все вакцины для профилактики клещевого энцефалита представляют собой выращенные на куриных эмбрионах, инактивированные формалином вирусы, адсорбированные на адъюванте (вещество для усиления иммунного ответа) — гидроокиси алюминия. В качестве дополнительных, стабилизирующих компонентов применяют желатин или альбумин.

На настоящий момент в России применяются четыре вакцины.

Культуралъная вакцина (пр-во НПО Вирион, Томск). Показана для вакцинации детей с 4 лет и взрослых до 65 лет. Курс вакцинации состоит из трех доз по схеме: 0—1—4. Альтернативная схема для быстрой защиты состоит из двух доз с интервалом 1—2 месяца, причем последняя доза вводится не позднее, чем за 2 недели до входа в природный очаг инфекции.

Концентрированная культуральная вакцина (пр-во Института полиомиелита и вирусных энцефалитов, Москва, Россия; штамм Софьин). От первой отличается тем, что может применяться с 18 лет. Курс вакцинации состоит из двух доз с интервалом 5—7 месяцев. Первую ревакцинацию делают одной дозой вакцины через 1—2 года, вторую и последующие — через три года.

От предыдущей отличается наличием дополнительной схемы вакцинации — три дозы по схеме 0—1—3 недель. Второе отличие — несколько большее число побочных реакций в связи с присутствием в составе вакцины желатина.

Все перечисленные вакцины обладают высокой иммуногенной активностью. Через две недели после введения последней дозы первичного курса вакцинации иммунитетом обладают от 90 до 97% привитых.

Экстренная профилактика, т.е. профилактика после укуса клеща, может быть проведена с помощью иммуноглобулинов. Срок для проведения такой профилактики ограничен тремя днями, после этого срока она теряет смысл.

В России доступны:

Иммуноглобулин против клещевого энцефалита человеческий жидкий (пр-во Биомед-Пермь, Россия). Вводят внутримышечно, однократно в возрасте до 12 лет — 1 мл, 12—16 лет — 2 мл, 16 лет и старше — 3 мл.

Иммуноглобулин против клещевого энцефалита (из лошадиной сыворотки), пр-во Россия.

FSME-Bulin (Immuno AG, Австрия).

Выпускают во флаконах по 1, 2, 5 и 10 мл. В целях профилактики (до укуса клеща) вводят в дозе 0,05 мл на кг массы тела. Действие начинается через 24 часа и продолжается в течение 1 месяца. Возможно повторное введение для более длительной защиты.