Ифа на гепатит в через месяц

Выбор исследований и оценка результатов на вирусные гепатиты.

Применяемые лабораторные технологии:

ИХЛА (иммунохемилюминесцентный анализ) – количественный высокочувствительный анализ на выявление серологических маркеров
ИФА (иммуноферментный анализ) – полуколичественный или качественный средне-чувствительный анализ на выявление серологических маркеров
ПЦР (полимеразная цепная реакция) – качественный и количественный анализ на выявление в крови ДНК и РНК живых вирусов в период репликации

HbsAg - поверхностный антиген вируса гепатита В.
Метод ИФА (отечеств.) – предел обнаружения от 0.1 нг/мл, результат (+) или (-)
Положительный тест подтверждают дополнительным исследованием. Возможно получение ложно-отрицательных результатов у 5-7% лиц, имеющих низкие уровни HBsAg или редкие субтипы вируса гепатита В.

HBsAg – метод ИХЛА (Эбботт, США) – предел обнаружения от 0.05 МЕ/мл, выявляет все мутантные формы вируса.
Результат отрицательный при уровне менее 0.05 МЕ/мл, положительный результат - более 0,05 МЕ/мл.
Появляется через 1-2 недели после инфицирования. При выздоровлении исчезает через 1.5 месяца. Выявление его после 6 месяцев означает переход заболевания в хроническую форму.
Отрицательный результат возможен у 0.01-0.05 % лиц с очень низкими уровнями HBsAg.
Положителен у больных острым ВГВ с начала заболевания и у всех больных с хроническими формами; бессимптомное носительство антигена возможно и после выздоровления у лиц с ослабленным иммунитетом в связи с низкой продукцией антиHBsAg.
AntiHBcor - суммарные антитела к сердцевинному антигену вируса гепатита В. Поскольку сам антиген (HBcor) находится в печеночной клетке и в крови не обнаруживается, о его наличии судят по появлению в крови антител к нему.
AntiHBcor - метод ИХЛА (Эбботт, США) – результат в виде цифрового коэффициента обратной реакции:
От 1 до 3 – отрицательный
От 0 до 1 – положительный. Чувствительность теста – 1РЕI unit/ml.
Тест становится положительным с 4 недели у больных острым ВГВ. Выявляется у всех переболевших ВГВ ранее с выздоровлением в течение всей жизни (даже без HBsAg в крови); у больных любыми формами хронического ВГВ.
Кровь доноров, положительных по антиHBс, считается непригодной для переливания, даже при отрицательном результате исследования на HBsAg.
AntiHBcorIgM – острофазовые антитела к сердцевинному антигену гепатита В (ИФА) отечеств. – результат (+), (-). Антитела выявляются при остром ВГВ с 2 по 8 месяц, при хроническом ВГВ указывают на наличие текущего обострения.
Оценивается только в совокупности с HBsAg и антиHBcor.
AntiHBs - антитела к поверхностному антигену гепатита В - количественно (ИХЛА) DPC, США – пределы обнаружения – от 3 до 2000 мЕ/мл
Менее 10 мЕ/мл – отрицательный результат
Более 10 мЕ/мл - положительный
Антитела появляются у больных в периоде реконвалесценции. Активная выработка антител приводит к связыванию и удалению HBsAg из кровотока при выздоровлении. Уровень их достигает пика через 6-8 месяцев; антитела могут сохраняться длительное время как показатель активации иммунитета к ВГВ у лиц, переболевших с выздоровлением. У лиц, вакцинированных против ВГВ, антитела являются показателем эффективной иммунизации при уровне от 10 мЕ/мл и более, согласно критериям ВОЗ.
Эффективный иммунитет после прививки от ВГВ сохраняется до 10 лет, контролируется по уровню антиHBs.
НВеAg – внутренний антиген вируса гепатита В - ( метод ИФА) – результат (+), (-). Антиген выявляется на неделю позже HBsAg, держится до 2 месяцев острого периода ВГВ; является маркером максимальной заразности больного, наличие его у беременной означает риск заражения плода в 60-80%.
Обнаруживается при хроническом активном гепатите, при хроническом персистирующем гепатите. Заменяется на антиНВе спустя 6 месяцев от начала заболевания.
AntiНВе IgG (ИФА) – антитела к внутреннему антигену гепатита В - появляются по окончании острого периода ВГВ, что означает благоприятный прогноз, особенно при нарастании титра. Могут обнаруживаться в крови в течение 2-5 лет.
AntiHVD суммарные - антитела к вирусу гепатита Д - (ИФА) качественно – результат (+), (-). Маркер инфицированности текущего или перенесенного ранее ВГД. Заболевание возможно только на фоне имеющегося ВГВ как суперинфекция.
AntiHCV суммарные - антитела к вирусу гепатита С - (ИФА) – результат (+) или (-). Используется как первичный скрининг на наличие ВГС; основанием для диагноза не является, так как возможны как ложно-положительные, так и ложно отрицательные результаты. Положительный результат подтверждают и повторяют анализ другой тест-системой. Появляются антиВГС не ранее, чем через 5 недель от момента заражения (возможно и через 30-50 недель). Ложно-отрицательные результаты возможны при использовании низкочувствительных тест-систем, не выявляющих вирусы некоторых генотипов, чаще 1а и 3а.
AntiHCV (ИХЛА) Эбботт, США – высокочувствительный третьего поколения количественный тест на определение антител к восьми антигенам вируса гепатита С всех генотипов: Nc, E1/s,E2/Ns1, Ns2-5. Результат (+) или (-) и в виде коэффициента позитивности, позволяющего видеть изменения в динамике. Ложноотрицательный результат возможен в самом начале заболевания (так называемое серонегативное окно).

У лиц, больных гепатитом С тест положителен как вне обострения, так и при обострении.
AntiHCVIgM - острофазовые антитела к вирусу гепатита С (ИФА) качественно – результат (+), (-).
Наличие антител характерно для острой фазы ВГС, обострения хронического ВГС.
ПЦР (полимеразная цепная реакция)– анализ на выявление ДНК-РНК (DNA-RNA) живых вирусов гепатитов В,С, Д в крови – высокочувствительный тест на наличие острого ВГ или обострения хронического заболевания. Положительный тест свидетельствует о текущей репликации вируса в печеночной ткани с выходом вируса в кровь. Тест может быть отрицательным у выздоровевших после острого ВГ (до15% случаев), при хронических гепатитах вне обострения (при отсутствии репликации и деструкции печеночной ткани), на фоне противовирусной терапии, при подавлении репликации вируса гепатита С у пациентов с сочетанным гепатитом В, Д, А.
Определение РНК вируса гепатита С в крови является золотым стандартом – наиболее чувствительным и ранним тестом для диагностики заболевания (положителен с 7-21 дня от момента инфицирования, в отличие от антител). Вирусемия в течение более 6 месяцев – свидетельство хронизации болезни. Количественный анализ (вирусная нагрузка) используется для определения показаний и контроля за лечением антивирусными препаратами гепатитов В и С.
Определение генотипа вируса гепатита С (HCV) используется для выявления устойчивых к препаратам интерферона типов вируса (1b) и выбора тактики лечения.

Почти каждый третий человек на планете является либо носителем вируса гепатита В, либо заражен им. Государственные программы во многих странах предполагают выявление маркёров гепатита В среди населения. Антиген HbsAg является наиболее ранним сигналом инфицирования. Как выявить его наличие в организме и как расшифровать результаты анализа? Будем разбираться в этой статье.

Тест на HBsAg: почему назначается анализ?

Вирус гепатита В (HBV) представляет собой цепочку ДНК, окруженную белковой оболочки. Именно эта оболочка носит название HBsAg – hepatits B surface antigen. Первая иммунная реакция организма, призванная уничтожить HBV, направлена именно на этот антиген. Попав в кровь, вирус начинает активно размножаться. Через некоторое время иммунная система распознает возбудителя и вырабатывает специфические антитела – аnti-HBs, которые в большинстве случаев способствуют излечению от острой формы заболевания.

Люди, не имеющие признаков инфицирования, могут стать носителями возбудителя и сами того не желая – заразить окружающих.
По неизвестным причинам среди мужчин чаще встречаются носители антигена, чем среди женщин.
Носитель вируса или переболевший гепатитом В не может быть донором крови, он обязан встать на учет и регулярно сдавать анализы.

Из-за широкого распространения гепатита В во многих районах и областях России проводят скрининг. При желании пройти исследование может любой человек, однако существуют определенные группы людей, которые обязаны обследоваться:

беременные женщины два раза в течение всей беременности: при становлении на учет в женскую консультацию и в предродовой период;
медицинские работники, которые контактируют напрямую с кровью пациентов – медсестры, хирурги, гинекологи, акушеры, стоматологи и другие;
лица, которые нуждаются в хирургическом вмешательстве;
лица, являющиеся носителями или болеющие острой или хронической формой гепатита В.

Как отмечалось выше, у гепатита В есть две формы: хроническая и острая.

Если хроническая форма не является последствием острого гепатита, то практически невозможно установить, когда началась болезнь. Это происходит из-за слабо выраженного течения заболевания. Чаще всего хроническая форма встречается у новорожденных, чьи матери являются носителями вируса, и у людей, в крови которых антиген находился больше полугода.

Острая форма гепатита ярко выражена только у четверти зараженных. Она длится от 1 до 6 месяцев и имеет ряд симптомов, схожих с обычной простудой: потеря аппетита, непроходящая усталость, быстрая утомляемость, боль в суставах, тошнота, повышение температуры, кашель, насморк и дискомфорт в правом подреберье. Если у вас присутствуют эти симптомы – необходимо срочно обратиться к врачу! Без правильного лечения, начатого в срок, человек может впасть в кому или даже умереть.

Если помимо вышеперечисленных симптомов у вас был незащищенный половой контакт с малознакомым человеком, если вы пользовались чужими средствами личной гигиены (зубная щетка, расческа, бритвенный станок), вам следует немедленного сдать анализ крови на HBsAg.

Выявить наличие гепатита В помогают два метода: экспресс-диагностика и серологическая лабораторная диагностика. Первый тип исследования относят к качественным методам обнаружения, так как он позволяет узнать, есть ли в крови антиген или нет, возможен – в домашних условиях. Если антиген обнаруживается, стоит обратиться в больницу и пройти серологическую диагностику, которая относится к количественным методам. Дополнительные лабораторные исследования (методы ИФА и ПЦР) дают более точное определение болезни. Для проведения количественного анализа требуются специальные реактивы и оборудование.

Поскольку этот способ достоверно и быстро диагностирует HBsAg, то выполнить его можно не только в медицинском учреждении, но и в домашних условиях, беспрепятственно купив в любой аптеке набор для экспресс-диагностики. Порядок ее проведения таков:

обработать палец спиртовым раствором;
проколоть кожу скарификатором или ланцетом;
капнуть 3 капли крови на полоску-тестер. Чтобы не исказить результат анализа, не стоит касаться пальцем поверхности полоски;
через 1 минуту добавить на полоску 3-4 капли буферного раствора из набора;
через 10–15 минут можно увидеть результат анализа HBsAg.

Данный вид диагностики отличается от предыдущего. Его главная особенность – точность: он определяет наличие антигена через 3 недели после заражения, вместе с этим способен обнаружить антитела anti-HBs, которые появляются при выздоровлении больного и формируют иммунитет к гепатиту В. Также, при положительном результате, анализ HBsAg выявляет тип вируса гепатита В (носительство, острая форма, хроническая форма, инкубационный период).

Количественный анализ интерпретируется следующим образом:

Поверхностный антиген гепатита В в сыворотке крови в норме отсутствует.
Обнаружение поверхностного антигена (HBsAg) гепатита В в сыворотке подтверждает острое или хроническое инфицирование вирусом гепатита В.

При остром заболевании HBsAg выявляется в сыворотке крови в последние 1-2 недели инкубационного периода и первые 2-3 недели клинического периода. Циркуляция HBsAg в крови может ограничиваться несколькими днями, поэтому следует стремиться к раннему первичному обследованию больных. Метод ИФА позволяет выявить HBsAg более чем у 90% больных. Почти у 5% больных самые чувствительные методы исследования не обнаруживают HBsAg, в таких случаях этиология вирусного гепатита В подтверждается наличием анти-HBсAg JgM или ПЦР.

Концентрация HBsAg в сыворотке крови при всех формах тяжести гепатита В в разгар заболевания имеет значительный диапазон колебаний, вместе с тем имеется определенная закономерность: в остром периоде существует обратная связь между концентрацией HBsAg в сыворотке и тяжестью болезни.

Высокая концентрация HBsAg чаще наблюдается при легких и среднетяжелых формах болезни. При тяжелых и злокачественных формах концентрация HBsAg в крови чаще низкая, причем у 20% больных с тяжелой формой и у 30% со злокачественной антиген в крови может вообще не обнаруживаться. Появление на этом фоне у больных антител к HBsAg расценивается как неблагоприятный диагностический признак; он определяется при злокачественных формах гепатита В.

При остром течении гепатита В концентрация HBsAg в крови постепенно снижается вплоть до полного исчезновения этого антигена. HBsAg исчезает у большинства больных в течение 3 месяцев от начала острой инфекции.

Снижение концентрации HBsAg более чем на 50% к концу 3-й недели острого периода, как правило, свидетельствует о близком завершении инфекционного процесса. Обычно у больных с высокой концентрацией HBsAg в разгар болезни он обнаруживается в крови в течение нескольких месяцев.
У больных с низкой концентрацией HBsAg исчезает значительно раньше (иногда через несколько дней после начала заболевания). В целом срок обнаружения HBsAg колеблется от нескольких дней до 4-5 мес. Максимальный срок обнаружения HBsAg при гладком течении острого гепатита В не превышает 6 месяцев от начала заболевания.

HBsAg может быть обнаружен у практически здоровых людей, как правило, при профилактических или случайных исследованиях. В таких случаях исследуют другие маркеры вирусного гепатита В – анти HBсAg JgM, анти- HBсAg JgG, анти HBеAg и изучают функцию печени.

При отрицательных результатах необходимы повторные исследования на HBsAg.
Если повторные исследования крови в течение более 3 месяцев выявляют HBsAg, такого пациента относят к хроническим больным вирусным гепатитом В.
Наличие HBsAg – довольно распространенное явление. В мире насчитывается более 300 млн. носителей, а у нас в стране – около 10 млн. носителей.
Прекращение циркуляции HBsAg с последующей сероконверсией (образование анти-HBs) всегда свидетельствует о выздоровлении - санации организма.

Исследование крови на наличие HBsAg применяется в следующих целях:

для диагностики острого гепатита В:

инкубационный период;
острый период заболевания;
ранняя стадия реконвалесценции;

для диагностики хронического вирусного гепатита В;

при заболеваниях:

персистирующем хроническом гепатите;
циррозе печени;

для скрининга и выявления больных в группах риска:

больные с частыми гемотрансфузиями;
больные с хронической почечной недостаточностью;
больные с множественным гемодиализом;
больные с иммунодефицитными состояниями, в том числе СПИДом.

Оценка результатов исследования

Результаты исследования выражаются качественно – положительный или отрицательный. Отрицательный результат исследования указывает на отсутствие HBsAg в сыворотке крови. Положительный результат – выявление HBsAg свидетельствует об инкубационном или остром периоде острого вирусного гепатита В, а также при хроническом вирусном гепатите В.

Антитела к ядерному антигену вируса гепатита В JgG (анти- HBcAg JgG )

В норме анти-HBcAg JgG в сыворотке отсутствует.
У больных анти-HBcAg JgG появляются в острый период вирусного гепатита В и сохраняются на протяжении всей жизни. Анти-HBcAg JgG – ведущий маркер перенесенного ВГВ.

Исследование крови на наличие анти-HBcAg JgG применяются для диагностики:

хронического вирусного гепатита В при наличии HBs антигена в сыворотке крови;

перенесенного вирусного гепатита В.

Оценка результатов исследования

Результат исследования выражается качественно – положительный или отрицательный. Отрицательный результат исследования указывает на отсутствие анти-HBcAg JgG в сыворотке крови. Положительный результат – выявление анти-HBcAg JgG свидетельствует об острой инфекции, реконвалесценции или ранее перенесенном вирусном гепатите В.

В норме HBeAg в сыворотке крови отсутствует.
HBeAg можно обнаружить в сыворотке крови большинства больных острым вирусным гепатитом В. Он обычно исчезает в крови раньше HBs-антигена. Высокий уровень HBeAg в первые недели заболевания или обнаружение его на протяжении более 8 недель дает основание заподозрить хроническую инфекцию.

Этот антиген часто обнаруживается при хроническом активном гепатите вирусной этиологии. Особый интерес к определению HBeAg связан с тем, что его обнаружение характеризует активную репликативную фазу инфекционного процесса . Установлено, что высокие концентрации HBeAg соответствуют высокой ДНК-полимеразной активности и характеризуют активную репликацию вируса.

Наличие HBeAg в крови свидетельствует о высокой ее инфекциозности, т.е. присутствии в организме обследуемого активной инфекции гепатита В, и обнаруживается только в случае присутствия в крови HBs-антигена. У больных хроническим активным гепатитом противовирусные препараты применяются только при обнаружении в крови HBeAg. HBeAg – антиген – маркер острой фазы и репликации вируса гепатита В.

Исследование крови на наличие HBe-антигена применяется для диагностики:

инкубационного периода вирусного гепатита В;

продромального периода вирусного гепатита В;

острого периода вирусного гепатита В;

хронического персистирующего вирусного гепатита В.

Оценка результатов исследования

Результат исследования выражается качественно – положительный или отрицательный. Отрицательный результат исследования указывает на отсутствие HBeAg в сыворотке крови. Положительный результат – выявление HBeAg свидетельствует об инкубационном или остром периоде острого вирусного гепатита В или продолжающейся репликации вируса и инфекциозности больного.

Анти-HBeAg в сыворотке в норме отсутствует. Появление анти-НВeAg антител указывает обычно на интенсивное выведение из организма вируса гепатита В и незначительное инфицирование больного.

Эти антитела появляются в острый период и сохраняются до 5 лет после перенесенной инфекции. При хроническом персистирующем гепатите анти-НВeAg обнаруживаются в крови больного вместе с НВsAg. Сероконверсия, т.е. переход HBeAg в анти-НВeAg, при хроническом активном гепатите, чаще прогностически благоприятна, но такая же сероконверсия при выраженной цирротической трансформации печени прогноза не улучшает.

Исследование крови на наличие анти-НВeAg применяются в следующих случаях при диагностике вирусного гепатита В:

установление начальной стадии заболевания;

острый период инфекции;

ранняя стадия реконвалесценции;

реконвалесценция;

поздняя стадия реконвалесценции.

диагностика недавно перенесенного вирусного гепатита В;

диагностика хронического персистирующего вирусного гепатита В.

Оценка результатов исследования

Результат исследования выражается качественно – положительный или отрицательный. Отрицательный результат исследования указывает на отсутствие антител к HBeAg в сыворотке крови. Положительный результат – выявление антител к HBeAg, которые могут свидетельствовать о начальной стадии острого вирусного гепатита В, остром периоде инфекции, ранней стадии реконвалесценции, реконвалесценции, перенесенном недавно вирусном гепатите В или персистирующем вирусном гепатите В.

Критериями наличия хронического гепатита В являются:

бнаружение или периодическое выявления ДНК ВГВ в крови;

постоянное или периодическое повышение активности АЛТ/АСТ в крови;\

морфологические признаки хронического гепатита при гистологическом исследовании биоптата печени.

Обнаружение вируса гепатита В методом ПЦР (качественно)

Вирус гепатита В в крови в норме отсутствует.
Качественное определение вируса гепатита В методом ПЦР в крови позволяет подтвердить наличие вируса в организме больного и тем самым устанавливает этиологию заболевания.

Данное исследование дает полезную информацию для диагностики острого вирусного гепатита В в инкубационном и раннем периоде развития заболевания, когда основные серологические маркеры в крови у пациента могут отсутствовать. Вирусную ДНК в сыворотке крови обнаруживают у 50% больных при отсутствии HBeAg. Аналитическая чувствительность метода ПЦР составляет не менее 80 вирусных частиц в 5 мкл, прошедшей выявление ДНК пробы, специфичность – 98%.

Этот метод имеет важное значение для диагностики и мониторинга течения хронического ВГВ. Примерно 5-10% случаев цирроза и других хронических заболеваний печени обусловлены хроническим носительством вируса гепатита В. Маркерами активности таких заболеваний является наличие HBeAg и ДНК вируса гепатита В в крови.

Метод ПЦР позволяет определять в крови ДНК вируса гепатита В как качественно, так и количественно. Определяемым фрагментом в обоих случаях служит уникальная последовательность ДНК гена структурного белка вируса гепатита В.

Обнаружение ДНК вируса гепатита В в биоматериале с помощью ПЦР необходимо для:

разрешения сомнительных результатов серологических исследований;

выявление острой стадии заболевания по сравнению с перенесенной инфекцией или контактом;

контроля эффективности противовирусного лечения.

Исчезновение ДНК вируса гепатита В из крови – признак эффективности терапии

Обнаружение вируса гепатита В методом ПЦР (количественно)

Этот метод дает важную информацию об интенсивности развития заболевания, об эффективности лечения и о развитии резистентности к активным препаратам.
Для диагностики вирусного гепатита методом ПЦР в сыворотке крови применяются тест-системы, чувствительность которых составляет 50-100 копий в пробе, что позволяет детектировать вирус при его концентрации 5 Х 10^3 -10^4 копий/мл. ПЦР при вирусном гепатите В безусловно необходима для суждения о вирусной репликации.

Вирусную ДНК в сыворотке крови обнаруживают у 50% больных при отсутствии HBeAg. Материалом для выявления ДНК вируса гепатита В могут служить сыворотка крови, лимфоциты, гепатобиоптаты.

Оценку уровня виремии осуществляют следующим образом:
менее 2.10^5 копий/мл (менее 2.10^5 МЕ/мл) – низкая виремия ;
от 2.10^5 копий/мл (2.10^5 МЕ/мл) до 2.10^6 копий/мл (8.10^5 МЕ/мл) – средняя виремия;
более 2.10^6 копий/мл – высокая виремия.

Существует зависимость между исходом острого вирусного гепатита В и концентрацией ДНК ВГВ в крови больного. При низком уровне виремии процесс хронизации инфекции близок к нулю, при средней – хронизация процесса наблюдается у 25-30% больных, а при высоком уровне виремии острый вирусный гепатит В чаще всего переходит в хронический.

Показаниями для лечения хронического ВГВ интерфероном-альфа следует считать наличие маркеров активной репликации вируса (выявление HBsAg, HBeAg и ДНК ВГВ в сыворотке крови в течение предшествующих 6 месяцев.).

Критериями оценки эффективности лечения служат исчезновение HBeAg и ДНК ВГВ в крови, что обычно сопровождается нормализацией уровня трансаминаз и долговременной ремиссией заболевания, ДНК ВГВ исчезает из крови к 5-му месяцу лечения у 60%, к 9-му месяцу – у 80% больных. Снижение уровня виремии на 85% и более к третьему дню от начала лечения по сравнению с исходным служит быстрым и достаточно точным критерием для прогнозирования эффективности терапии.

Вирусный гепатит А

Гепатит А (ГА, hepatitis A) — острая энтеровирусная инфекция. Возбудитель — вирус гепатита А (ВГА, HAV) — энтеровирус типа 72. Геном вируса представлен однонитчатой РНК. Вирус гепатита А содержит единственный антиген (HA-Ag). Удельный вес гепатита А в суммарной заболеваемости вирусными гепатитами составляет 70–80 %. В структуре заболеваемости гепатитом А дети составляют до 80%, причем основная масса — дошкольники и школьники начальных классов.

Антитела IgM к вирусу гепатита А

Антитела IgM к вирусу гепатита А в сыворотке в норме отсутствуют. Достоверное подтверждение диагноза ГА достигается серологическими методами — обнаружением нарастания уровня специфических антител (анти-HAV), принадлежащих к иммуноглобулинам класса М (анти-HAV IgM). При гепатите А нарастание уровня антител, относящихся к IgM, начинается еще в инкубационном периоде, за 5–10 дней до появления первых симптомов болезни, и быстро прогрессирует. К моменту первичного обращения больного к врачу, уровень анти-HAV IgM успевает достичь высоких показателей, чтобы быть выявленным методом ИФА. Общепринято, что анти-HAV IgM у больных обнаруживаются в начале клинических проявлений заболевания и сохраняются до 6 мес после перенесенной инфекции.

Определение анти-HAV IgM

В настоящее время выделяют следующие формы вирусных гепатитов: гепатит А, гепатит В, гепатит С, гепатит D и гепатит Е. Для диагностики каждой из перечисленных форм вирусных гепатитов используют определенный перечень маркеров.

Определение анти-HAV IgG

Основной тест специфической диагностики гепатита А. Нарастание анти-HAV IgG происходит в более поздние сроки — в фазу реконвалесценции — и поэтому не может служить критерием ранней диагностики гепатита А. Выявление анти-HAV IgG у здоровых людей (возможно у 30–60% здорового населения) свидетельствует о предыдущей инфекции и иммунитете (ретроспективная диагностика).

Антиген гепатита А — HA-Ag

Появляется в сыворотке крови в конце преджелтушного периода. У большинства больных сохраняется в сыворотке крови на протяжение 1–2 недель заболевания. Из-за кратковременности пребывания в сыворотке крови больного для диагностических целей не используется.

Вирусный гепатит В

Гепатит В — вирусная антропонозная инфекция. Возбудитель — вирус гепатита В (ВГВ, HBV) — относится к семейству гепаднавирусов, ДНК-содержащих вирусов, поражающих клетки печени. Вирионы ВГВ имеют наружную липопротеидную оболочку и нуклеокапсид, содержащий двунитчатую циркулярную ДНК и ДНК-зависимую ДНК-полимеразу.

Поверхностный антиген (HBsAg) гепатита В в сыворотке

Поверхностный антиген гепатита В в сыворотке в норме отсутствует. Обнаружение поверхностного антигена (HBsAg) гепатита В в сыворотке подтверждает острое или хроническое инфицирование вирусом гепатита В (HBV).

При остром заболевании HBsAg выявляется в сыворотке крови в последние 1–2 недели инкубационного периода и в первые 2–3 недели клинического периода. Циркуляция HBsAg в крови может ограничиваться несколькими днями, поэтому следует стремиться к раннему первичному обследованию больных. Частота выявления HBsAg зависит от чувствительности используемого метода исследования. Метод ИФА позволяет выявить HBsAg более чем у 90% больных. Почти у 5% больных самые чувствительные методы исследования не обнаруживают HBsAg, в таких случаях этиология вирусного гепатита В подтверждается наличием анти-HBcAg IgM. Концентрация HBsAg в сыворотке крови при всех формах тяжести гепатита В в разгар заболевания имеет значительный диапазон колебаний, вместе с тем имеется определенная закономерность: в остром периоде существует обратная связь между концентрацией HBsAg в сыворотке и тяжестью болезни.

Высокая концентрация HBsAg чаще наблюдается при легких и средне-тяжелых формах болезни. При тяжелых и злокачественных формах, концентрация HBsAg в крови чаще низкая, причем у 20% больных с тяжелой формой и 30% со злокачественной антиген в крови может вообще не обнаруживаться. Появление на этом фоне у больных антител к HBsAg расценивается как неблагоприятный прогностический признак; он определяется при злокачественных формах (фульминантных) гепатита В.

При остром течении гепатита В, концентрация HBsAg в крови постепенно снижается, вплоть до полного исчезновения этого антигена. HBsAg исчезает у большинства больных в течение 3 мес от начала острой инфекции. Снижение концентрации HBsAg более чем на 50 % к концу 3-й недели острого периода, как правило, свидетельствует о близком завершении инфекционного процесса. Обычно у больных с высокой концентрацией HBsAg в разгар болезни он обнаруживается в крови в течение нескольких месяцев. У больных с низкой концентрацией HBsAg исчезает значительно раньше (иногда через несколько дней после начала заболевания). В целом, срок обнаружения HBsAg колеблется от нескольких дней до 4–5 мес. Максимальный срок обнаружения HBsAg при гладком течении острого гепатита В не превышает 6 мес от начала заболевания.

HBsAg может быть выявлен у практически здоровых людей, как правило, при профилактических или случайных исследованиях. В таких случаях исследуют другие маркеры вирусного гепатита В — анти-HBcAg IgM, анти-НВс IgG, анти-HBeAg и изучают функцию печени. При отрицательных результатах необходимы повторные исследования на HBsAg. Если повторные исследования крови в течение более 3 месяцев выявляют HBsAg, такого человека относят к хроническим носителям поверхностного антигена. Носительство HBsAg — довольно распространенное явление. В мире насчитывается более 300 млн носителей; у нас в стране — около 10 млн.

Исследование крови на наличие HBsAg применяют в следующих целях:

1. Для диагностики острого гепатита В

инкубационный период;
острый период заболевания;
ранняя стадия реконвалесценции.

2. Для диагностики хронического носительства вируса гепатита В

при заболеваниях:
персистирующем хроническом гепатите;
циррозе печени.

3. Для скрининга, выявления больных в группах риска

больные с частыми гемотрансфузиями;
больные с хронической почечной недостаточностью;
больные с множественным гемодиализом;
больные с иммунодефицитными состояниями, в том числе СПИДом.

Антитела к HBsAg (анти-HBsAg) гепатита В в сыворотке

В норме анти-HBsAg в сыворотке отсутствуют.

Антитела к поверхностному антигену гепатита В

Определение анти-HBsAg имеет важное значение для оценки течения гепатита В и его исходов, так как характеризует иммунный ответ конкретного больного. Это надежный критерий развития постинфекционного иммунитета и выздоровления. Выявление анти-HBsAg может служить критерием ретроспективной диагностики гепатита ранее не уточненной этиологии.

Анти-HBsAg свидетельствуют о ранее перенесенной инфекции. Выявление антител к HBsAg играет важную роль в определении контингента для вакцинации против гепатита В. Согласно рекомендациям ВОЗ, если уровень анти-HBsAg составляет менее 10 мМЕ/л, таким лицам показана вакцинация против гепатита В, при уровне 10–100 мМЕ/л вакцинация должна быть отложена на один год, при уровне более 100 мМЕ/л вакцинация показана через 5–7 лет.

Исследование крови на наличие антител к HBsAg применяют при:

диагностике вирусного гепатита В в позднюю стадию реконвалесценции;
диагностике анти-НВз-положительного хронического гепатита;
диагностике персистирующего хронического гепатита;
оценка напряженности иммунитета после вакцинации вакциной против гепатита В;
ретроспективной диагностике перенесенного вирусного гепатита В.

Общие антитела к ядерному антигену гепатита В (анти-HBcAg) в сыворотке

Анти-HBcAg в сыворотке в норме отсутствуют. HBcAg обнаруживается только в ядрах гепатоцитов. В крови в свободном виде HBcAg не выявляется. Ядерное расположение HBcAg, близкое к ядру вируса, определяет его высокую иммуногенность. Антитела к ядерному антигену гепатита В появляются первыми среди других антител, связанных с гепатитом В в сыворотке крови больных острым и хроническим вирусным гепатитом В, а также у реконвалесцентов.

Общие антитела к ядерному антигену гепатита В состоят из иммуноглобулинов класса М и G. Определение общих антител к ядерному антигену гепатита В может использоваться только для ретроспективной диагностики гепатита В, так как у 5–10 % больных исследования на HBsAg дают отрицательный результат. Для того чтобы установить, в какой стадии развития находится гепатит В, необходимо дополнительное определение антител IgM. Антитела класса IgM — маркер активной репликации вируса, т.е. острой инфекции, а антитела класса IgG — перенесенной инфекции.

Антитела IgM к ядерному антигену гепатита В (анти-HBcAg IgM) в сыворотке

Анти-HBcAg IgM в сыворотке в норме отсутствуют. Анти-HBcAg IgM обнаруживаются уже в начале острой фазы болезни, еще до появления или в первые дни желтухи, иногда даже в конце инкубации. Выявление анти-HBcAg IgM расценивают как убедительный критерий диагностики гепатита В, особенно при отрицательных результатах исследования на HBsAg. Анти-HBcAg IgM циркулируют в крови больных в течение нескольких месяцев (2–5 месяца) до периода реконвалесценции, а затем исчезают, что рассматривается как признак очищения организма от вируса гепатита В.

Исследование крови на наличие анти-HBcAg IgM применяется при диагностике:

острого периода гепатита В;
периода реконвалесценции гепатита В;
анти-НВв-положительного хронического гепатита;
хронического носительства вируса гепатита В.

Антитела IgG к ядерному антигену гепатита В (анти-HBcAg IgG) в сыворотке

Анти-HBcAg IgG в сыворотке в норме отсутствуют. У больных анти-HBcAg IgG появляются в острый период вирусного гепатита В и сохраняются на протяжении всей жизни. Анти-HBcAg IgG — ведущий маркер перенесенного гепатита В.

Исследование крови на наличие анти-HBcAg IgG применяется при диагностике:

хронического носительства вируса гепатита В при наличии HBs-антигена в сыворотке крови;
перенесенного вирусного гепатита В;
HBeAg-антиген гепатита В в сыворотке.

HBeAg-антиген в сыворотке в норме отсутствует. HBeAg можно обнаружить в сыворотке крови большинства больных острым вирусным гепатитом В. Он обычно исчезает из крови раньше HBs-антигена. Высокий уровень HBeAg в первые недели заболевания или обнаружение его на протяжении более 8 недель дает основание заподозрить хроническую инфекцию. Этот антиген часто обнаруживается при хроническом активном гепатите вирусной этиологии. Особый интерес к определению HBeAg связан с тем, что его обнаружение характеризует активную репликативную фазу инфекционного процесса.

Установлено, что высокие концентрации HBeAg соответствуют высокой ДНК-полимеразной активности и характеризуют активную репликацию вируса. Наличие HBeAg в крови свидетельствует о высокой ее инфекциозности, т.е. присутствии в организме обследуемого активной инфекции гепатита В и обнаруживается только в случае присутствия в крови HBs-антигена. У больных хроническим активным гепатитом противовирусные препараты применяют только при обнаружении в крови HBeAg.

Наличие НВе-антигена свидетельствует о продолжающейся репликации вируса и инфекциозности больного. HBeAg-антиген — маркер острой фазы и репликации вируса гепатита В.

Исследование крови на наличие НВе-антигена применяют при диагностике:

инкубационного периода вирусного гепатита В;
продромального периода вирусного гепатита В;
острого периода вирусного гепатита В;
хронического персистирующего вирусного гепатита В.

Антитела к HBeAg гепатита В (анти-HBeAg) в сыворотке

Анти-HBeAg в сыворотке в норме отсутствуют. Появление АHTH-HBeAg-антител указывает обычно на интенсивное выведение из организма вируса гепатита В и незначительное инфицирование больного. Эти антитела появляются в острый период и сохраняются до 5 лет после перенесенной инфекции. При хроническом персистирующем гепатите, анти-HBeAg обнаруживаются в крови больного вместе с HBsAg. Сероконверсия, т.е. переход HBeAg в анти-HBeAg при хроническом активном гепатите, чаще прогностически благоприятна, но такая же сероконверсия при выраженной цирротической трансформации печени прогноза не улучшает.

Исследование крови на наличие анти-HBeAg применяют при диагностике:

перенесенного вирусного гепатита В в недалеком прошлом;
хронического персистирующего вирусного гепатита В;
вирусного гепатита В: начальная стадия заболевания; острый период инфекции; ранняя стадия реконвалесценции; реконвалесценция; поздняя стадия реконвалесценции.

Вирусный гепатит С

Гепатит С (ГС, hepatitis С) — вирусное заболевание, наиболее часто протекающее в виде посттрансфузионного гепатита с преобладанием безжелтушных и легких форм и склонное к хронизации процесса. Возбудитель — вирус гепатита С (ВГС) — имеет сходство с флавови-русами, содержит РНК.

Примерно 90% всех случаев посттрансфузионных гепатитов связаны с ВГС. Среди доноров антитела к вирусу гепатита С (анти-ВГС) обнаруживают в 0,2–5% случаев. У 40–75% пациентов регистрируется бессимптомная форма болезни, у 50–75% больных острым ВГС формируется хронический гепатит, у 20% из них развивается цирроз печени. Важная роль ВГС отводится и в этиологии гепатоклеточной карциномы.

Антитела к вирусу гепатита С в сыворотке

Антитела к вирусу гепатита С в сыворотке в норме отсутствуют. Диагностика гепатита С основана на обнаружении суммарных антител к ВГС методом ИФА, которые появляются в первые 2 нед заболевания и свидетельствуют о возможной инфицированности вирусом или перенесенной инфекции. Анти-ВГС-антитела могут сохраняться в крови реконвалесцентов на протяжении 8–10 лет с постепенным снижением их концентрации. Возможно позднее обнаружение антител спустя год и более после инфицирования.

При хроническом гепатите С, антитела определяются постоянно и в более высоких титрах. Существующие в настоящее время тест-системы для диагностики ВГС основаны на определении антител класса IgG, поэтому разрабатываются тест-системы нового поколения, которые позволят верифицировать активную инфекцию (определять антитела класса IgM). Антитела класса IgM могут выявляться не только при остром ВГС, но и при хроническом гепатите С. Снижение их уровня в процессе лечения больных хроническим гепатитом С может свидетельствовать об эффективности лекарственной терапии. Обнаружение антител к ВГС методом ИФА требует подтверждения способом иммуноблотинга для исключения ложно-положительного результата исследования.

Определение антител к вирусу гепатита С используют для диагностики острого и хронического гепатита С, персистирующего хронического гепатита. Вирус гепатита С может быть причиной развития цирроза и рака печени, поэтому данное исследование показано при этих заболеваниях.

Иммуноблотинг на антитела к белкам вируса гепатита С в сыворотке

Антитела к вирусу гепатита С в норме отсутствуют. Метод иммуноферментного анализа, применяемый для определения антител к ВГС, является скрининговым. В случае получения положительного результата для подтверждения его специфичности используют метод иммуноблотинга Western-blot — встречную преципитацию в геле антител в сыворотке крови больного с различными вирусными белками, подвергнутыми разделению по молекулярной массе с помощью электрофореза и нанесенными на нитроцеллюлозу. Исследование считается положительным, если выявляются антитела к белкам интенсивностью +1 к 2 или более антителам ВГС. Специфичными для ВГС являются антитела к белкам — Core, NS3-1, NS3-2, NS1, NS5.

Иммуноблотинг на вирус гепатита С служит подтверждающим тестом специфичности метода ИФА.

Вирусный гепатит D

Гепатит D — вирусная инфекция, протекающая вследствие биологических особенностей вируса исключительно в виде ко-или суперинфекции при гепатите В, характеризующаяся тяжелым течением часто с неблагоприятным исходом.

Возбудитель — вирус гепатита D (BГD) — по своим биологическим свойствам приближается к вироидам — обнаженным молекулам нуклеиновых кислот. Печень человека — единственное место репликации BГD. Известно существование двух вариантов инфекции: коинфекция (одновременное заражение ВГВ и BГD) и суперинфекция (заражение HBsAg-позитивных пациентов). Сочетание ВГВ и BГD сопровождается развитием более тяжелых форм патологического процесса, что определяется главным образом действием BГD. Летальность при суперинфекции достигает 5–20 %. Инфицирование дельта-вирусом может вызывать острое заболевание, заканчивающееся выздоровлением, или формировать хроническое носительство BГD.

При гепатите D могут отсутствовать в крови маркеры гепатита В — анти-НВс и HBs-антиген — и наблюдается угнетение ДНК-полимеразной активности, так как BГD ингибирует репликацию вируса гепатита В.

Антитела IgG к вирусу гепатита D в сыворотке

Антитела IgG к вирусу гепатита D в сыворотке в норме отсутствуют. Антитела BГD IgG (анти-BГD IgG) появляются в период реконвалесценции, и их концентрация постепенно снижается в течение нескольких месяцев. Определение антител BГD IgG может служить критерием ретроспективной диагностики гепатита ранее не уточненной этиологии.

Применение метода определения антител IgG к вирусу гепатита D:

диагностика острого вирусного гепатита D — период реконвалесценции;
диагностика хронического персистирующего гепатита;
диагностика хронического носительства.

Вирусный гепатит Е

Возбудителем вирусного гепатита Е (ВГЕ) является РНК-вирус. Для заболевания характерен фекально-оральный путь передачи, преимущественно водный. Инкубационный период болезни — около 35 сут. Клиническое течение острого ВГЕ сходно с ВГА. Существенно тяжелее заболевание протекает у беременных, особенно в III триместре.

Для специфической диагностики ВГЕ используются методы ИФА, основанные на выявлении антител класса IgM. Обнаружение в крови повышенного уровня анти-ВГЕ IgM служит лабораторным подтверждением диагноза.

ПЕРИОДЫ ОБНАРУЖЕНИЯ В КРОВИ МАРКЕРОВ ВИРУСНОГО ГЕПАТИТА В ПРИ ОСТРОМ ПРОЦЕССЕ:

1) поверхностный HBs-антиген — с инкубационного периода до периода ранней реконвалесценции (5,5–6 мес);

2) антиген НЬе обнаруживается в инкубационный и продромальный периоды (до 3,5 мес); его выявление свидетельствует о репликации вируса;

3) антитела к Hbe-антигену появляются в острый период заболевания (3–4-й месяц) и сохраняются до нескольких лет;

4) антитела класса IgM к ядерному антигену (анти-HBc-IgM) обнаруживаются в продромальном периоде и сохраняются до периода реконвалесценции (со 2-го по 6-й месяц заболевания);

5) антитела класса IgG к ядерному антигену (анти-HBc-IgG) возникают в продромальном периоде и сохраняются на протяжении всей жизни (ведущий маркер вирусного гепатита В);

6) антитела к поверхностному Hbs-антигену (анти-HBs) появляются в стадии поздней реконвалесценции (6-й месяц) и сохраняются до 5 лет.

Читайте также: