Для кошек иммуномодулирующий препарат с противовирусным действием

ИММУННАЯ СИСТЕМА МЛЕКОПИТАЮЩИХ УСТРОЕНА СЛОЖНО, НА НЕЕ ВОЗДЕЙСТВУЕТ МНОЖЕСТВО ФАКТОРОВ ВНЕШНЕЙ И ВНУТРЕННЕЙ СРЕДЫ. НЕ ВСЕ ЕЕ ПРОЦЕССЫ ПОЛНОСТЬЮ ОПИСАНЫ, ХОТЯ ОСНОВНЫЕ ОТКРЫТИЯ В ИЗУЧЕНИИ МЕХАНИЗМОВ ЕСТЕСТВЕННОГО И ПРИОБРЕТЕННОГО ИММУНИТЕТА БЫЛИ СДЕЛАНЫ БОЛЕЕ ВЕКА НАЗАД. ИЗВЕСТНО, ЧТО ИММУННЫЙ ОТВЕТ ОРГАНИЗМА МЛЕКОПИТАЮЩИХ ОБЕСПЕЧИВАЕТСЯ ВЗАИМОДЕЙСТВИЕМ ФАГОЦИТОВ, РЕГУЛЯТОРНЫХ ЛИМФОЦИТОВ (Т-ХЕЛПЕРОВ И Т-СУПРЕССОРОВ), ЭФФЕКТОРНЫХ ЛИМФОЦИТОВ (ЦИТОТОКСИЧЕСКИХ Т-ЛИМФОЦИТОВ И ß-ЛИМФОЦИТОВ, ВЫРАБАТЫВАЮЩИХ АНТИТЕЛА), ТУЧНЫХ КЛЕТОК МОНОЦИТОВ И ДР. В 70-е ГОДЫ ХХ ВЕКА В МЕДИЦИНСКОЙ ФАРМАКОЛОГИИ ВЫДЕЛЕНА ОТДЕЛЬНАЯ ОБЛАСТЬ ПОД НАЗВАНИЕМ ИММУНОФАРМАКОЛОГ ИЯ.

Ветеринарная иммунология на сегодняшний день в основном базируется на закономерностях, определенных в лечении человека. Иммунные процессы человека и животных действительно сходны, но множество проблем в ветеринарии ученым еще придется решить.

Иммуномодуляторы как отдельная категория лекарственных средств представлены в России более 25 лет. Их состав и спектр активности отличается большим разнообразием. В зарубежных странах иммуномодуляторы представлены в основном в виде биологически активных добавок, что связано со сложностями регистрации лекарственных средств за рубежом. В виде лекарственных препаратов для медицинских целей иммуномодуляторы производятся в США, Германии, Нидерландах, Франции, Словакии и др. странах.

К сожалению, в этой области часто присутствует подмена понятий, когда иммуномодулятора ми, с легкой руки маркетологов, называются вещества, которые напрямую на иммунитет не воздействуют. Так обстоят дела с кормовыми добавками, содержащими витамины, пробиотики и пребиотики, которые являются иммунобиологичес кими препаратами — эрготропиками, улучшающими функции обмена веществ, пищеварения, или адаптогенами.

Чтобы внести ясность, приведем в статье ряд определений, принятых в иммунофармаколог ии.

Иммунотерапия — лечение уже развившегося заболевания, в основе которого лежат нарушения функций иммунной системы. Ее цель— активизировать, нормализовать или подавлять деятельность иммунной системы. Иммунотерапия с успехом применяется в аллергологии, онкологии, терапии иммунопатологиче ских состояний, лечении вирусных и бактериальных, паразитарных болезней.

Иммунобиологичес кие препараты (ИБП) — лекарственные средства, избирательно воздействующие на процессы, связанные с иммунитетом. Это воздействие может быть активным и пассивным, прямым или косвенным.

Согласно классификации А. А. Воробьева, иммунобиологичес кие препараты делятся 5 основных групп:

Первая группа — ИБП, получаемые из живых или убитых микробов (бактерии, вирусы, грибы) или микробных продуктов и используемые для специфической профилактики и лечения. К этой группе относятся живые и инактивированные вакцины, субъединичные вакцины, анатоксины, бактериофаги, пробиотики.

Вторая группа — ИБП на основе антител. К этой группе относятся иммуноглобулины, иммунные сыворотки, иммунотоксины, антитела-фермент ы, рецепторные антитела, мини-антитела.

Третья группа — иммуномодуляторы для иммунокоррекции, лечения и профилактики инфекционных, неинфекционных болезней, иммунодефицитов.

Четвертая группа — адаптогены. Это сложные химические вещества растительного происхождения, обладающие широким спектром биологической активности, действующие на иммунную систему.

Пятая группа — диагностические препараты и системы для специфической диагностики инфекционных и неинфекционных заболеваний, с помощью которых можно идентифицировать антигены, антитела, ферменты, продукты метаболизма, биологически активные вещества, чужеродные клетки.

Иммуномодулятора ми называют вещества, оказывающие непосредственное влияние на иммунную систему организма. Их подразделяют на эндогенные и экзогенные.

К экзогенным иммуномодулятора м относится большая группа веществ различной природы и происхождения (растительные, бактериальные, искусственно синтезируемые), которые оказывают активирующее или супрессивное (подавляющее) действие на иммунную систему.

Эндогенные иммуномодуляторы представляют собой достаточно большую группу олигопептидов, синтезируемых самим организмом, его иммунокомпетентн ыми и другими клетками и способных активировать иммунную систему путем усиления пролиферации и функции иммунокомпетентн ых клеток, т.е. обладающих иммуностимулирую щим свойством. К ним относятся лимфокины, интерфероны, миелопептиды, хемокины, пептиды тимуса.

По методу воздействия на иммунную систему иммуномодуляторы делят на иммуностимулятор ы, иммунокорректоры и иммуносупрессоры .

Иммуносупрессоры (иммунодепрессан ты) — средства, понижающие иммунитет (например, чтобы не вызвать отторжение трансплантирован ных органов или для подавления иммунного ответа при аутоиммунных болезнях). Иммуносупрессиру ющее действие оказывают все цитостатики, антагонисты пуринов и аминокислот; алкилирующие агенты (циклофосфамид), ингибирующие выработку антител; кортикостероиды, которые препятствуют презентации антигена, ингибируют первичный антительный ответ, уменьшают секрецию ИЛ-1 и количество циркулирующих Т-лимфоцитов, блокаторы действия ИЛ-2 (циклоспорин), действующие на Thl-лимфоциты, препятствуя выработке ими ИЛ-2, а также антилимфоцитарна я сыворотка, рентгеновские лучи и γ​излучение.

Иммуностимулятор ы — корректируют иммунный статус организма, усиливают иммунный ответ на патогенные вирусы, бактерии, паразитов, стимулируют регенерацию и рост тканей, оказывают адаптогенное воздействие. Иммуностимулирую щим свойством обладают также экзогенные иммуномодуляторы , такие, как адъюванты, многие химические соединения, цитокины и интерфероны, лизаты бактерий, рибосомальные вакцины (риболизины), производные некоторых лекарственных растений.

СПЕКТР АКТИВНОСТИ ИММУНОМОДУЛЯТОРО В

Действие иммуномодуляторо в зависит от состава, дозы, спектра активности (некоторые препараты особенно эффективны против вирусов, другие — против бактерий и др.). Различают препараты естественного (природного) происхождения, синтетические и комплексные препараты.

Табл. 1. АКТИВНОСТЬ И СОСТАВ НЕКОТОРЫХ ИММУНОМОДУЛЯТОРО В ДЛЯ СОБАК И КОШЕК

ПРЕПАРАТЫ ЕСТЕСТВЕННОГО ПРОИСХОЖДЕНИЯ

Фосфорилированны е полиизопреноиды,
выделенные из листьев шелковицы.

Активация МФ (усиление бактерицидной активности и фагоцитоза), индукция ранней выработки ИЛ-12, ИФНγ, адъювантные свойства, прямой противовирусный эффект in vitro и in vivo против герпесвирусов за счет подавления синтеза вирусных белков и стимуляции продукции ИФН и других цитокинов.

Очищенный бактериальный гликан
и полисахаридный комплекс.

Активация МФ, ЦТЛ, усиление детоксикантной функции печени (активация клеток Купфера), индукция эндогенного ИФН, активация комплемента, повышение фагоцитарной активности нейтрофилов и концентрации лизоцима
в сыворотке крови.

Комплекс на основе лекарственных растений

Механизм фармакологическо го действия препарата обусловлен сочетанием биологически активных веществ, входящих
в его состав лекарственных растений. Препарат обладает иммунорегулирующ им, детоксикационным , гепатопротекторн ым действием и вызывает инактивацию свободнорадикаль ных и перекисных соединений. Коррегирует состояние иммунной системы, восстанавливает баланс окислительно-
восстановительны х реакций организма.

Основным действующим началом являются гуминовые вещества растительного происхождения.

Влияние на иммунологические показатели происходит за счет неспецифического повышения бактерицидной, лизоцимной активности сыворотки крови, стимулирования функции органов тимико-лимфотиче ской системы и фагоцитарной активности лейкоцитов. Адаптоген, антиоксидант, гепатопротектор. Обладает противовирусным и антибактериальны м действием.

Натриевая соль нуклеиновой кислоты дрожжевых клеток.

Иммуномодуляция обусловлена входящими в состав пуриновыми (ингибиция) и пиримидиновыми (стимуляция) нуклеотидами, индукция ИФН, ИЛ-1, детоксикантные свойства (в составе гамавита).

Лактоферрин (гликопротеин молозива).

Усиливает фагоцитарную и цитолитическую функции, направленные на элиминацию возбудителя. Обладает бактериостатичес кой активностью. Активизирует синтез интерлейкина-18. Ускоряет созревание Т-клеток и активирует нейтрофилы, что приводит к усилению клеточной иммунной защиты против вирусов, эндогенных и экзогенных токсинов. Смещает иммунный ответ с Th2 в Th1 фазу. Стимулирует выработку собственного интерферона. Нарушает репликацию вирусов. Антиоксидант. Есть выраженный противовоспалите льный эффект.

Комплекс низкомолекулярны х полипептидов тимуса и фрагментов РНК, продукт гидролиза дрожжей.

Стимуляция Т-, и В-клеток, активация МФ, усиление синтеза ИФН и ряда других цитокинов, адъювантные свойства.

Очищенный бактериальный полисахарид.

Активация МФ, В-клеток, стволовых клеток, индукция ИФН, адъювантные свойства, стимуляция естественной резистентности к бактериальным инфекциям.

Очищенный экстракт побегов Solanum tuberosum — полисахаридного комплекса класса гексозных гликозидов (Панавир).

Обладает цитопротективным действием, индуцирует синтез интерферона, тормозит репликацию вирусов в инфицированных клетках.

Фосфорилированны е полипренолы,
выделенные из экологически чистой хвои.

Активация МФ (усиление бактерицидной активности и фагоцитоза), ЕК, повышение продукции ИЛ-1, индукция ранней выработки ИЛ-12, ИФНγ, ФНО-ɑ, ИЛ-4, ИЛ-6, адъювантные свойства, противовирусный эффект, детоксикантные свойства, гепатопротекция, защита МФ от гибели, ингибиция липоксигеназ.

Производное акридонуксусной кислоты –
глюкоаминопропил карбакридон.

Стимуляция синтеза ИФН, индукция синтеза и секреции ряда Th-1 цитокинов.

Обратимо снижает избыточную активность моноцитов/макроф агов, активирует микробицидную систему нейтрофилов и фагоцитоз.

Глюкозаминилмура милдипептид (ГМДП) —
аналог фрагмента пептидогликана клеточной стенки бактерий, является модулятором врожденного иммунитета.

Основной клеточной мишенью ГМДП в иммунной системе являются фагоциты, происходит активация фагоцитоза, усиление киллинга микробов, образование активных форм кислорода, индукция лизосомальных ферментов, активация экспрессии HLA-DR, стимуляция продукции цитокинов: IL-1ß, TNF-ɑ, GM​CSF, IFN-γ. Эффект цитокинов реализуется в трех направлениях: фагоциты, зрелые Т- и В-клетки (усиление функций — увеличение продукции Ig, активация киллеров), наивные Т- и В​клетки (активация и подготовка к иммунному ответу).

Синтетический пептид, модифицированный фрагмент гормона тимуса — тимопоэтина.

Т-клетки, регулирует продукции тимулина, ИЛ-2, ФНО,
иммуноглобулинов , адъювантные свойства.

Карданон (камедон, неовир)

Натриевая соль 10-метилен карбоксилат-9-ак ридона.

Супериндуктор ИФНɑ и ß

Бис(пиридин-2,6- дикарбоксилат) германия.

Активация МФ (фагоцитоз, хемотаксис, окислительный
метаболизм, лизосомальная активность), ЕК, стимуляция синтеза ИФНɑ/ß и ИФНγ

ПРЕПАРАТЫ НА ОСНОВЕ РЕКОМБИНАНТНЫХ БЕЛКОВ

Рекомбинантный интерлейкин-2 из клеток дрожжей S.cerevisiae.

Усиление пролиферации Т-лимфоцитов и синтеза ИЛ-2, активация Т- и В-клеток, ЦТЛ, ЕК, МФ, повышение синтеза ИФН.

Лиофилизированна я смесь белков лейкоцитарного интерферона, а также цитокинов, продуцируемых лейкоцитами периферической крови.

Стимулирует активность иммунокомпетентн ых клеток, повышает неспецифическую резистентность организма собак, усиливает действие вакцин.

Рекомбинантный интерферон кошки, полностью идентичный природному.

Подавление репродукции ДНК- и РНК-содержащих вирусов через замедление белкового синтеза. Усиливает фагоцитарную активность макрофагов, увеличивает показатели специфической цитотоксичности лимфоцитов.

Сбалансированный раствор, содержащий нуклеинат натрия, денатурированный экстракт плаценты, витамины, аминокислоты, минералы.

Обладает дезинтоксикацион ным, иммуномодулирующ им, антиоксидантным, биотонизирующим, адаптогенным и гепатопротекторн ым действием, стимулирует продукцию гормона роста.

Сбалансированный раствор, содержащий нуклеинат натрия, денатурированный экстракт плаценты, интерферон-альфа , янтарную кислоту, пировиноградную кислоту, витамины, аминокислоты, минералы.

Обладает антивирусным, дезинтоксикацион ным, иммуномодулирующ им, антиоксидантным, биотонизирующим, адаптогенным и гепатопротекторн ым действием, стимулирует продукцию гормона роста.

Комплекс липопротеинов и полисахаридов.

Воздействует на макрофагальную и Т-клеточную системы иммунитета, что приводит к активации специфических клонов иммунокомпетентн ых клеток, ответственных за противопаразитар ную защиту организма.

Биогенные стимуляторы тканевого происхождения и биологически активные вещества.

Преимущественно действует на В-клетки, активизирует регенерационные процессы, стимулирует рост и развитие животных.

Стимулирует выработку собственного интерферона и факторов естественной защиты. Блокирует растворимые токсические вещества и микрочастицы, снижает интоксикацию.

Главной ролью иммунной системы является сохранение гомеостаза путем распознавания чужеродных антигенов. Нарушения её функций возможно корректировать с помощью иммунотропных препаратов, в том числе иммуномодуляторов.

Основные открытия в изучении механизмов естественного и приобретенного иммунитета были сделаны более полувека назад, но до сих пор не все процессы полностью изучены. Известно, что иммунный ответ организма млекопитающих обеспечивается взаимодействием макрофагов, дендритных клеток, хелперных и регуляторных Т-лимфоцитов, эффекторных клеток (цитотоксических Т-лимфоцитов и естественных киллеров), В-лимфоцитов, вырабатывающих антитела, и др.

В 70-е годы ХХ века в медицинской фармакологии выделена отдельная область под названием иммунофармакология. В России ветеринарные препараты c иммуномодулирующими свойствами производятся более 20 лет. Их состав и спектр активности отличается большим разнообразием. При этом в зарубежных странах (исключая бывшие республики СССР) иммуномодуляторы производятся в основном в виде биологически активных добавок, что связано со сложностями регистрации лекарственных средств за рубежом.

Наиболее широко истинные иммуномодуляторы применяются для лечения собак и кошек. В животноводстве иммуномодуляторы используют с лечебной и профилактической целью для повышения естественной резистентности, стимуляции роста и развития молодняка (например Гамавит, стимулирующий выработку гормона роста), при патологических состояниях, сопровождающихся снижением иммунореактивности, в том числе при вирусных и бактериальных заболеваниях, для нормализации формулы крови, профилактики и коррекции стресса и его последствий, для детоксикации и др.

Действие иммуномодуляторов зависит от состава, дозы, спектра активности (некоторые средства особенно эффективны при профилактике и лечении вирусных инфекций, другие против бактериальных и др.). Различают препараты естественного (природного) происхождения, а также синтетические и комплексные иммуномодуляторы.

По происхождению иммуномодуляторы можно разделить на микробные (лизаты бактерий и части клеточных стенок), тимические и тканевые (пептиды тимуса, плаценты), костномозговые препараты, цитокины (интерлейкины и интерфероны), нуклеиновые кислоты (натриевая соль рибонуклеиновой кислоты гриба Saccharomyces cerevisiae), растительные препараты, химически чистые вещества.

Для продуктивных животных иммуномодуляторы и эрготропики выпускаются в форме порошков, мазей и инъекционных растворов. Различают как самостоятельные препараты с одним действующим веществом, так и комплексные лекарственные средства.

В связи с распространением инфекционных заболеваний животных большой интерес вызывают видоспецифичные противовирусные препараты на основе рекомбинантных интерферонов. В России продаются лекарственные средства на основе как бычьего, так и свиного и лошадиного интерферонов. Они применяются в составе комплексной терапии с антибиотиками, что усиливает их противовирусный и снижает иммуносупрессивный эффект. Препараты интерферонов назначают при респираторных и гинекологических инфекциях, заболеваниях ЖКТ, в том числе смешанных — вызванных бактериями и вирусами одновременно. В России продаются двухкомпонентные средства, содержащие противобактериальный и рекомбинантный иммуномодулирующие агенты. Существует также комбинация на основе витаминов (Тетравитферон-Б).

Препараты на основе других цитокинов — интерлейкинов представлены в России препаратом Ронколейкин.

Лечение средствами на основе индукторов интерферона, которые мобилизуют собственные защитные функции в организме, является не менее эффективным. К таким препаратам относятся Максидин, Форвет и др.

Лактоферрин — уникальный полифункциональный белок молока. Принимает участие в системе врожденного и гуморального иммунитета, регулирует функции иммунных клеток, содержание железа в организме, а также рост костной ткани. Обладает антивирусной и противогрибковой активностью. На основе лактоферрина производится российский препарат Полиферрин-А.

Главными активаторами врожденного и индукторами приобретенного иммунитета в организме млекопитающих выступают антигены микробных клеток. Благодаря поиску отдельных веществ и молекул, активирующих данные процессы, ученым удалось создать ряд препаратов, обладающих противобактериальным эффектом. Таким свойством обладают иммуномодуляторы на основе полисахаридов клеточной стенки бактерий — Сальмозан (выпуск прекращен), Гликопин и др.

Инновационным способом лечения вирусных заболеваний рогатого скота, свиней и птицы, вызванных РНК-возбудителями, являются средства на основе синтетической низкомолекулярной рибонуклеазы. Этот фермент катализирует процесс разрушения вирусных структур.

Тканевые препараты представлены средствами на основе АСД и плаценты. Среди них есть комплексные иммуномодуляторы, содержащие витамины и минералы, а также органические кислоты.

Из препаратов растительного происхождения в животноводстве широко применяется Фоспренил (полипренилфосфат натрия, из хвои сибирской пихты), обладающий иммуномодулирующей, противовирусной, противовоспалительной, адъювантной и иными фармакологическими активностями.

Среди иммунобиологических препаратов перспективны препараты, включающие бутафосфан. В качестве синергиста в них вводится также витамин В₁₂, активизирующий ряд ключевых реакций в организме. Бутафосфан улучшает утилизацию глюкозы в крови, активизирует функции печени, повышает неспецифическую резистентность организма, стимулирует остеогенез и образование скорлупы. Этими особенностями обусловлен широкий видовой (рогатый скот, птица, свиньи) и возрастной диапазон применения данного лекарственного средства в животноводстве и птицеводстве.

Всего в качестве иммуномодулирующих и иммунобиологических препаратов для сельскохозяйственных животных и птицы применяется более 50 ветеринарных средств производства России, Беларуси, Испании, Китая и Кореи.

Некоторые иммуномодуляторы и иммунобиологические препараты для продуктивных животных, в том числе противовирусные средства

В последнее время одной из важнейших проблем ветеринарии является рост заболеваний, торпидных к адекватной этиотропной терапии и связанных с нарушениями в системе иммунитета [3; 10]. Иммунная система любого животного выполняет важную функцию по сохранению постоянства внутренней среды организма, осуществляемую путем распознавания и элиминации из организма чужеродных веществ антигенной природы, как эндогенно возникающих, так и экзогенно проникающих в организм. Эта функция иммунной системы осуществляется с помощью факторов врожденного и приобретенного (или адаптивного) иммунитета [12].

Вторичная иммунная недостаточность часто наблюдается при вирусных, паразитарных и некоторых бактериальных инфекциях, истощении организма, длительном стрессе, тяжелых травмах, интоксикациях, лечении онкологических больных химиотерапевтическими средствами при длительном воздействии вредных факторов, к которым относят и корма эконом-класса, а также в неблагоприятных экологических условиях [2, 3].

В связи с резко возросшим интересом практикующих врачей к противовирусной терапии особенно важно выявить область применения и степень адекватного ответа животных на иммунную фармакотерапию различными препаратами.

Рынок предлагает большое количество лекарственных средств, биологически-активных добавок и даже кормов для ослабленных животных со сниженным иммунитетом. Практикующему врачу зачастую трудно разобраться в этом громадном потоке информации и предложений и выбрать нужное средство. Исходя из этого, мы поставили целью провести серию экспериментов по действию наиболее часто применяемых в нашем регионе препаратов, предназначенных для этиотропной терапии герпесвирусной инфекции кошек I типа (FHV-1). Для сравнения нами были выбраны наиболее часто применяемый Форвет, Фоспренил и рекомбинантный интерферон кошки Фелиферон.

Фелиферон – рекомбинантный интерферон кошки, обладающий противовирусным и иммуностимулирующим действием, появившийся на рынке ветеринарных препаратов более 3 лет назад, зарекомендовал себя в ведущих ветеринарных клиниках. Этот препарат был исследован при терапии острых вирусных инфекций у кошек [4, 6, 7, 14, 15], медленнотекущих вирусных инфекций [16, 17].

Таблица 1. Схема эксперимента по сравнительной эффективности препаратов при этиотропной терапии вирусного ринотрахеита у кошек

Данные по общеклиническим исследованиям крови были собраны в четыре сравнительные таблицы (табл. 2-5).

Согласно нашим наблюдениям, относительный эритроцитоз, гипергемоглобинемия при повышении гематокрита может являться следствием дегидратации в организме животного в период проявления острого процесса из-за отказа от воды и пищи в связи с реактивной лимфоидной гиперплазией подчелюстной лимфатической ткани. Появление плазмоцитов в крови сопровождает первичную вирусемию и является диагностическим показателем острого течения вирусной инфекции [22]. Заметная тромбоцитопения развивается из-за нарушения системы свертывания крови и проявляется ломкостью капилляров. Визуально это определяется в виде гиперемии слизистой оболочки полости рта и острых конъюнктивитов. Степень тяжести инфекционного процесса хорошо отслеживается на примере увеличения скорости оседания эритроцитов в крови. Согласно мнению Gaskell R.M. с соавт., лейкоцитоз в сочетании с повышением СОЭ и соответствующие изменения лейкоцитарной формулы – достоверный признак развития в организме острых воспалительных процессов [20]. Ряд авторов Binns S.H., Dawson S. с соавт. (2012 г.) делает выводы о сопоставлении роста СОЭ с тяжестью развития токсического процесса [21].

Отслеживая общеклиническую картину крови животных контрольной группы, мы видим, как меняется гематологическая картина на протяжении первых 5 дней заболевания. К 5-му дню болезни пропадает относительный эритроцитоз в крови и выравниваются показатели содержания гемоглобина и гематокрита. Появление миело-, метамиелоцитов и увеличение палочкоядерных нейтрофилов говорит о напряженности процессов лейкоцитопоэза. Нейтрофильный лейкоцитоз развивается вследствие увеличения продукции нейтрофилов, повышенной мобилизации костномозгового резерва или перераспределения пристеночного пула. Острые инфекционные заболевания и воспалительные процессы способствуют мобилизации костномозгового резерва и пристеночного пула нейтрофилов в периферической крови. Обнаружение нейтрофильного лейкоцитоза на пятый день болезни говорит о лейкемоидной реакции на наличие инфекции в организме и активизации лимфоидного кроветворения. Как мы видим из таблицы, этот процесс сочетается с повышением общего количества нейтрофилов. К 10-му дню от начала лечения тяжесть левого сдвига снижается, что оценивается как адекватный ответ на терапию ринотрахеита указанными препаратами. Хочется отметить развитие активной эозинофилии после 5-го дня лечения животных. Согласно данным Кисленко В.Н., (2006 г.) развитие эозинофилии соответствует началу выздоровления. Однако ряд инфекционных и других заболеваний с высоким уровнем IgE характеризуются эозинофилией после окончания воспалительного процесса, что указывает на незаконченность иммунной реакции с ее аллергическим компонентом [9]. В целом изменение количества эозинофилов в периферической крови является результатом дисбаланса процессов продукции клеток в костном мозге, их миграции и распада в тканях. В данной группе эозинофилы дали резкий количественный скачок на 5-й день болезни и спустились к верхней границе физиологической нормы к концу исследованного периода. Аналогично эозинофилам мы наблюдаем и подъем базофилов.

Возможно, причиной базофилии является реакция на введение гипериммунной сыворотки глобфел, которая, согласно данным производителя, изготавливается из сыворотки крови сельхозживотных (лошадей и быков). Таким образом, базофилез, это, скорее всего, показатель гиперчувствительности замедленного типа у исследуемых животных. Кроме того, мы наблюдаем стойкий моноцитоз, который в сочетании с нейтрофилезом и левым сдвигом может быть интерпретирован как начало выздоровления животного. Однако на 5-й и 10-й дни болезни мы диагностируем относительный лимфоцитоз, что опосредованно по некоторым данным [18] может быть компенсаторной реакцией недостаточной иммунной защиты организма. Эти же данные могут подтверждать и наличие плазмоцитов в организме кошек на 5-й и 10-й дни терапии. Наличие плазмоцитов также указывает на остаточные патологические явления в организме [2]. На фоне протекающих процессов лимфогенеза мы видим медленное увеличение количества тромбоцитов. К концу исследуемого периода количество тромбоцитов у контрольных кошек вошло в физиологические границы, при этом показатели у отдельных животных сильно разнились. Так же сильно разнились и показатели скорости оседания эритроцитов. В этой группе ни у одного животного к концу описываемого периода скорость оседания эритроцитов не уложилась в границы физиологической нормы.

Исследуя общеклинические показатели крови у кошек 1-й опытной группы в течение периода исследования, мы получили следующие показатели (табл. 3).

Как видно из таблицы, изначально эта группа животных имела более выраженный лимфоцитоз, в процессе терапии мы видим, что средний показатель содержания лимфоцитов по группе более быстро стремится к нормограмме, чем у животных контрольной группы, кроме того, мы видим более быстрое снижение СОЭ, в отличие от кошек контрольной группы, в остальном гематологические показатели кошек этой группы мало отличаются от показателей животных контрольной группы.

В таблице №4 представлены результаты общеклинического исследования крови кошек второй опытной группы, в терапевтическую схему которых был введен препарат Форвет в дозах, рекомендованных производителем.

Таблица 2. Динамика общеклинических показателей крови кошек в контрольной группе

Сизякина Л.П., Мельникова М.О.
ГОУ Ростовский государственный медицинский университет Росздрава, Ростов на Дону

Важно отметить, что авторы всех формулировок подчеркивают, что иммуномодуляторы в зависимости от ряда факторов могут менять направление своего действия. Так, по Фрейдлин И.С. иммуномодуляторы в зависимости от дозы, сроков, кратности применения, а также, от иммунологического фона могут либо ингибировать, либо усиливать иммунный ответ [1]. P.M. Хаитов дает еще более четкое определение: для того чтобы тот или иной лекарственный препарат мог быть отнесен к группе иммуномодуляторов, должна быть доказана его способность изменять иммунологическую реактивность в зависимости от ее исходного состояния, т.е. препарат должен, повышать пониженные и (или) понижать повышенные, т.е. регулировать и приводить к норме патологически измененные показатели иммунитета. Именно такие иммунотропные препараты автор относит к истинным иммуномодуляторам [2].

Благодаря своим фармакологическим свойствам анаферон детский оказывает противовирусное и иммуномодулирующее действие и отнесен к соответствующим фармакологическим группам (коды ATX L03 и J05AX) [3]. Анаферон индуцирует образование эндогенных интерферонов ИФН-а, ИФН-у, а также оказывает влияние на активность сопряженных с ними цитокинов. Результатом комплексного иммуномодулирующего действия анаферона является увеличение функциональной активности фагоцитов, клеток- естественных киллеров (NK-клетки), Т-эффекторов и Т-хелперов (Th), активизация продукции защитных антител, включая повышение slgA и повышение функционального резерва Th и других клеток, участвующих в иммунном ответе. Являясь индуктором смешанного типа, анаферон повышает выработку цитокинов Thl-типа (ИФН-у, ИЛ-2) и ТЬ2-типа (ИЛ-4, ИЛ-10), и что особенно важно, нормализует (модулирует) баланс Thl/Th2 активностей. Экспериментально и клинически установлена эффективность анаферона в отношении вирусов гриппа (сезонные A/H1N1, A/H3N2, В, а также вируса гриппа птиц), парагриппа, аденовируса, респираторно-синцитиального вируса (PC-вирус), коронавируса, ротавируса, калицивируса, вирусов герпеса 1 и 2 типов (лабиальный и генитальный герпес), других герпес-вирусов (ветряная оспа, инфекционный мононуклеоз), энтеровирусов, в том числе, вируса клещевого энцефалита. Согласно экспериментальным данным, препарат снижает концентрацию вируса в пораженных тканях и увеличивает выживаемость экспериментальных животных 5.

За счет специальной технологии производства (технология потенцирования, позволяющая создавать фармакологически активные формы растворов, содержащих сверхмалые дозы действующего вещества) анаферон детский обладает высоким профилем безопасности 10.

Обращает на себя внимание, что анаферон имеет некоторые особенности, в отличие от классических индукторов. Так, по некоторым наблюдениям, анаферон при лечебном и профилактическом применении оказывает более выраженное влияние на их индуцированную продукцию и в меньшей степени влияет на спонтанную продукцию ИФН, что предотвращает истощение функциональных резервов иммунной системы. Кроме того, анаферон восстанавливает (понижает до нормальных значений) уровень сывороточных интерферонов при выздоровлении после ОРВИ, что также обеспечивает сохранение функциональной активности системы интерферонов 13.

Согласно требованиям МЗ и СР РФ (Методические рекомендации, утвержденные Фармакологическим государственным комитетом при МЗ и СР РФ от 10.12.1998) [14], анаферон прошел ряд доклинических исследований, в ходе которых было доказано его иммуномодулирующее влияние на компоненты иммунной системы: фагоцитоз, гуморальный иммунитет, клеточный иммунитет, систему цитокинов [5-8,14].

Так, в ходе экспериментальных исследований иммунотропных свойств сверхмалых доз антител к ИФН-у человека (анаферон) было продемонстрировано иммуномодулирующее влияние анаферона на гуморальный иммунный ответ (рисунок 1).

Рисунок 1

Иммунизацию проводили эритроцитами барана (ЭБ). Исследование проводили в параллельных группах животных. Анаферон вводили животным, иммунизированным ЭБ: интактным мышам, а также мышам, подвергшимся иммуносупрессии (однократное введение циклофосфана (ЦФ) в дозе S минимальной подавляющей дозы). Для контроля использовали несколько групп животных (интактные животные иммунизированные ЭБ, иммуносупрессированные мыши, а также, животные, получившие ЦФ и иммунизированные ЭБ). Выраженность иммунного ответа оценивали по относительному и абсолютному количеству антителообразующих клеток (АОК) и по титру антител в сыворотке. Иммуномодулирующее влияние анаферона проявилось в существенной активации гуморального ответа на антиген (ЭБ) как у интактных, так и у иммуносупрессированных животных по сравнению с группами контроля. Несмотря на снижение АОК в группе мышей, подвергшихся иммуносупрессии (6 столбец диаграммы) данный показатель был значимо выше, чем в 3-й контрольной группе, в данной группе отмечалась наиболее высокая функциональная активность антителообразующих клеток, что проявлялось самым высоким титром специфических антител к ЭБ. Кроме того, как отметили авторы, по сравнению с 1-й контрольной группой, в группе интактных животных, получавших анаферон, отмечались более высокие показатели АОК и титр специфических антител, что свидетельствовало о способности анаферона повышать чувствительность антителообразующих клеток к стимулирующему влиянию антигена [8].

В клинической практике также было подтверждено иммуномодулирующее действие анаферона. Так, в ходе исследования, проведенного в клинике НИИ гриппа [12], было отмечено, что анаферон, применяемый для лечения гриппа у детей, оказывал двух этапное действие на продукцию ИФН (рисунок 2).

Рисунок 2. Влияние анаферона детского на индуцированную продукцию ИФН-а и ИФН-у при лечении детей, больных гриппом (приводится по [12])

В первые дни заболевания применение анаферона детского способствовало нарастанию уровня индуцированной продукции ИФН, при этом индуцированная продукция ИФН-а в разгар инфекционного заболевания возросла в 1,3 раза, а индуцированная продукция ИФН-у и того выше - в 2 раза по сравнению с начальными показателями. В более позднее время (4-7 дни заболевания) продолжение приема препарата предотвращало снижение способности клеток к продукции ИФН. Таким образом, к периоду выздоровления стимулирующее действие анаферона снижалось и наблюдалась нормализация показателей, с приближением к таковым у здоровых детей. При анализе показателей в группе детей, получавших плацебо, прирост показателей ИФН-а и ИФН-у к разгару заболевания не был статистически значимым. А к моменту выздоровления от инфекции в группе плацебо показатели были значимо меньшими, чем исходные [12]. Аналогичная закономерность по отношению к уровням ИФН-а и ИФН-у в сыворотке детей, получавших анаферон для лечения ОРИВ и гриппа, отмечалась авторами исследовательской работы, проведенной на базе кафедры детских инфекций Российского государственного медицинского университета (РГМУ, Москва) [11]. Опираясь на представленные данные, можно констатировать, что в процессе развития инфекционного процесса, по мере возрастания потребности организма в противовирусных и иммуномодулирующих эффектах ИФН, анаферон проявлял свою активность, что проявлялось в значимом увеличении способности клеток к индуцированной продукции интерферонов. На фоне угасания инфекции, потребность в активной продукции ИФН снизилась, и к моменту выздоровления в группе детей, продолжавших прием анаферона (согласно протокола, дети основной группы получали анаферон детский по лечебной схеме минимум 7 дней), соответствующие показатели приблизились к исходным. При этом в отличие от группы плацебо, в основной группе не наблюдалось признаков истощения системы ИФН.

В нашей работе мы исследовали иммуномодулирующее действие анаферона детского у часто болеющих детей, получавших данный препарат в профилактической схеме.

Целью исследования явилось сопоставление клинических эффектов (изменение заболеваемости ОРВИ) от применения анаферона с целью иммунореабилитации часто болеющих детей с изменениями в интерфероновом статусе у данных больных.

Задачи исследования включали учет частоты заболеваний ОРВИ у детей в процессе лечения, оценку показателей спонтанной и индуцированной продукции ИФН-а и ИФН-у, в супернатантах лимфоцитов, а также определение доли Т-лимфоцитов, экспресирующих рецептор к ИФН-у.

Материалы и методы

Исследование в параллельных группах проводили в период с конца февраля по конец апреля 2004 года как проспективное, сравнительное открытое рандомизированное. Под нашим наблюдением находились 87 часто болеющих детей в возрасте от 3 до 6 лет. Критериями включения в исследования являлась высокая частота ОРВИ, развившихся за предыдущий год (5 раз и более), а также наличие письменной формы информированного согласия родителей, или иных представителей ребенка. Все дети на момент включения не имели признаков ОРВИ. С помощью процедуры рандомизации все дети были разделены на две группы. Дети первой группы (основная группа, 62 человек, средний возраст 4,7±0,5 года) получали на фоне проведения реабилитационной программы анаферон детский по стандартной профилактической схеме: 1 таблетка в день, сублингвально, в течение двух месяцев. Дети второй группы (группа сравнения, 25 человек, средний возраст 5±0,4 лет) проходили реабилитацию, но не получали анаферон детский. В состав программы реабилитации были включены: санация носоглотки травами (календула, эвкалипт), коррекция дисбиоза кишечника (пребиотики + пробиотики), прием поливитаминов, ингаляционная терапия со щелочью и соком алоэ в течение 8 дней, массаж грудной клетки — 10 дней. Следует отметить, что обе группы были сопоставимы по полу и возрасту, а также по другим факторам, в перспективе могущим оказать влияние на результаты исследования.

Статистическая обработка

В обеих группах отмечалась умеренная заболеваемость за период наблюдения (рисунок 3). Все дети в группах болели ОРВИ однократно. Анализ полученных результатов показал, что в 1 группе за период наблюдения заболело 23 ребенка (37,1%), против 17 детей, перенесших ОРВИ во 2 группе (68%), рРисунок 3. Влияние анафврона детского на частоту возникновения ОРВИ (%)

При исследовании динамики показателей спонтанной и индуцированной продукции ИФН-а и ИФН-у у детей 1 группы мы были вынуждены исключить показатели спонтанной и индуцированной продукции ИФН в связи с тем, чтоо указанные дети находились в стадии ранней реконвалесценции после перенесенных ОРВИ. В целом оценка изменений в группе (после исключения данных реконвалесцентов) выявила умеренное увеличение индуцированных показателей. Так исходные показатели были 67,4±12,5 пг/мл и 90,4±18,8 пг/мл для ИФН-а и ИФН-у, соответственно, а после завершения лечения показатели повысились до 88,08±6,7 пг/мл и 128,9±7,5 пг/мл (рисунок 4). При оценке уровней спонтанной продукции ИФН-а и ИФН-у данные показатели колебались в пределах 25-39 пг/мл) и практически не претерпевали значимых изменений.

Рисунок 4. Влияние анаферона детского на уровень индуцированной продукции ИФН-а и ИФН-у у детей 1 группы

Однако при детальном анализе было выявлена неоднородность детей по показателям индуцированной продукции ИФН. В результате анализа внутри 1 группы были выделены две подгруппы детей. Дети из подгруппы 1а (47 человек, средний возраст 3,8±0,7 года) имели исходно статистически значимо более низкие показатели индуцированной продукции ИФН-а и ИФН-у (42,9±3,59 пг/мл и 65,9±6,9 пг/мл, соответственно), в то время, как дети, вошедшие в подгруппу 16 (15 человек, средний возраст 5,1±0,9 года) имели исходно более высокие показатели (138,8±6,8 пг/мл и 168,7±7,6 пг/мл для ИФН-а и ИФН-у, соответственно). Показатели спонтанной продукции в 1а подгруппе были несколько ниже, чем в 16 подгруппе: 24,9±4,5 пг/мл и 28,2±5,7 пг/мл против 32,4±7,4 пг/мл и 38,4±4,8 пг/мл, для ИФН-а и ИФН-у, соответственно.

При анализе динамики показателей индуцированной продукции ИФН в выделенных подгруппах, нами была выявлена разнонаправленность влияния анаферона на синтез ИФН-а и ИФН-у в зависимости от исходного фона (рисунок 5). Так, у детей из 1а подгруппы после завершения лечения анафероном детским отмечалось статистически значимое повышение данных показателей до 107,2±3,98 и 148,8±6,6 пг/мл, соответственно (рРисунок 5. Влияние анаферона детского на уровень индуцированной продукции ИФН-а и ИФН-у у детей в зависимости от исходных уровней продукции ИФН

Следует подчеркнуть, что заболеваемость ОРВИ снижалась как среди детей, имевших исходно сниженные показатели продукции ИФН, так и среди детей, имевших исходно нормальные или повышенные уровни индуцированной продукции ИФН (рисунок 6). Данный факт свидетельствует о том, что благодаря иммуномодулирующему влиянию анаферона детского клиническая картина улучшается независимо от направленности влияния анаферона на систему ИФН у часто болеющих детей.

Рисунок 6. Влияние анаферона детского на частоту возникновения ОРВИ, в зависимости от исходных уровней индуцированной продукции ИФН (%)

Заключение

Несомненно, данное направление в исследовании анаферона является перспективным и может требовать дальнейшего продолжения. А сам анаферон может широко назначаться не только с лечебной и профилактической целями при ОРВИ и гриппе, но и применяться для иммунореабилитации у больных со вторичной иммунной недостаточностью, в том числе, у часто болеющих детей.