Наставление по диагностике туберкулеза животных от 18 11 2002 г распечатать
Автореферат диссертации по ветеринарии на тему Совершенствование диагностики туберкулеза крупного рогатого скота в индивидуальных и общественных хозяйствах
На правах рукописи
ПОМЫКАНОВ НИКОЛАЙ ПЕТРОВИЧ
СОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ ДИАГНОСТИКИ ТУБЕРКУЛЁЗА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА В ИНДИВИДУАЛЬНЫХ И ОБЩЕСТВЕННЫХ ХОЗЯЙСТВАХ
16.00.03 - ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология
Автореферат диссертации на соискание учёной степени кандидата ветеринарных наук
Работа выполнена в лаборатории микобактериозов ГНУ Всероссийский научно-исследовательский институт экспериментальной ветеринарии им. Я.Р. Коваленко (ВИЭВ)
Заслуженный ветеринарный врач РФ, доктор ветеринарных наук, Найманов Али Хусинович
Заслуженный деятель науки, доктор ветеринарных наук, профессор, Бурлаков Валентин Александрович (МГАВМиБ)
Кандидат ветеринарных наук, Бричко Владимир Фёдорович (ВНИИВСГЭ)
Защита диссертации состоится « Помыканов, Николай Петрович :: 2005 :: Москва
I. Обзор литературы
1. Краткие сведения о эпидемической и эпизоотической ситуации туберкулёза
2. Микобактериозы сельскохозяйственных животных 12 2.1. Аллергия при микобактериозах
3. Взаимосвязь микобактериозов человека, животных и птиц
4. Диагностика туберкулеза крупного рогатого скота
4.1. Аллергическая диагностика
4.1.1. Проблема неспецифических реакций на туберкулин и методы их дифференциации
4.1.2. Применение симультанной туберкулиновой пробы для дифференциальной диагностики туберкулёза крупного рогатого скота
4.2. Лабораторная диагностика туберкулеза
4.3. Современные методы диагностики и возможность их применения при туберкулёзе крупного рогатого скота
П. Собственные исследования
1. Материалы и методы исследований
2. Краткая характеристика некоторых особенностей природно-хозяйственных условий Брянской области
3. Распространенность микобактериозов крупного рогатого скота в общественных и индивидуальных хозяйствах Стародубского района Брянской области
4. Изучение возможности применения симультанной туберкулиновой пробы с индивидуальным учётом аллергических реакций в индивидуальных хозяйствах
5. Сравнительное изучение симультанной туберкулиновой пробы с применением ППД - туберкулина для млекопитающих и ППД - туберкулина для птиц, с симультанной пробой с применением ППД - туберкулина для млекопитающих и КАМ
6. Изучение возможности применения ускоренной симультанной туберкулиновой пробы с ППД-туберкулином для млекопитающих и КАМ
7. Динамика проявления аллергических реакций на симультанную туберкулиновую пробу
8. Изучение возможности дифференциации парааллергических реакций одновременным применением внутрикожной и пальпебральной пробы
9. Изучение возможности применения внутривенной туберкулиновой пробы для дифференциации аллергических реакций на туберкулин
Ю.Изучение диагностической ценности ПЦР при исследовании крови реагирующих на туберкулин животных, в индивидуальных хозяйствах
Введение диссертации по теме "Ветеринарная эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология", Помыканов, Николай Петрович, автореферат
1. Актуальность темы. Туберкулез крупного рогатого скота наносит значительный экономический ущерб животноводству страны, что связано с широкой распространенностью болезни, необходимостью убоя реагирующих на туберкулин животных в благополучных и неблагополучных по туберкулёзу хозяйствах и населенных пунктах.
На современном этапе борьбы с туберкулёзом животных, основой профилактических и оздоровительных мероприятий была и остаётся диагностика этой болезни. При диагностике туберкулёза крупного рогатого скота основным, массовым и общепринятым методом является внутрикожная проба с применением ППД - туберкулина для млекопитающих. Одной из важных проблем при диагностике туберкулёза внутрикожной туберкулиновой пробой остаётся проблема неспецифических реакций на туберкулин. Актуальность этой проблемы увеличивается из года в год. Так, в благополучных хозяйствах РФ выявляется в 5,3 раза больше реагирующих на туберкулин животных, чем в неблагополучных по туберкулёзу.
Массовые выявления неспецифических реакций на туберкулин приводит к убою большого количества здоровых животных, что увеличивает размеры экономического ущерба и вызывает сомнения в правильности диагностики туберкулёза утверждёнными методами.
Кроме того, туберкулез крупного рогатого скота имеет важное социальное значение, так как возбудитель болезни может передаваться человеку и вызывать заболевание людей и, наоборот, животные могут заразиться от людей.
В последние годы в нашей стране увеличилась заболеваемость людей туберкулезом, резко сократилось поголовье животных в общественном секторе и увеличилось поголовье крупного рогатого скота в частном секторе. Поэтому, всё острее возрастает проблема диагностики туберкулёза крупного рогатого скота в индивидуальных хозяйствах.
Следует указать, что для индивидуальных хозяйств более характерны бесконтрольные перемещения животных, перевозки кормов и животноводческой продукции, бесконтрольная торговля продуктами животноводства (особенно мясом и молоком), и все эти указанные факторы усложняют проведение комплекса профилактических и оздоровительных мероприятий при туберкулезе.
Другой, немаловажной особенностью, затрудняющей диагностику микобактериозов в индивидуальных хозяйствах, является совместное содержание и тесный контакт разных видов животных и птиц.
В связи с указанными особенностями, в последние годы увеличивается количество жалоб владельцев животных на необоснованный убой реагирующих животных, заводятся судебные дела между владельцами животных и ветеринарными специалистами.
К сожалению, в этих нормативных документах очень мало рекомендаций по диагностике туберкулёза крупного рогатого скота в частном секторе. Поэтому, в практических условиях, диагностические мероприятия по профилактике и оздоровлению от туберкулеза в личных подворьях граждан проводятся как и в общественном секторе.
Известно, что диагностика туберкулеза крупного рогатого скота в общественном секторе имеет свои специфические особенности. Главной особенностью является тот факт, что в общественном секторе диагноз на туберкулез ставится по группе животных, т.е. по стаду. Так, в соответствии с утверждёнными нормативными документами при постановке диагноза на туберкулез, из числа реагирующих на туберкулин животных проводят диагностический убой нескольких, наиболее характерно реагирующих на туберкулин животных, с последующим патологоанатомическим и лабораторным исследованиями на туберкулез.
Симультанная туберкулиновая проба с применением туберкулина для млекопитающих и комплексного аллергена из атипичных микобактерий (КАМ), которая широко применяется в ветеринарной практике для дифференциации аллергических реакций на туберкулин, также является групповой и даёт возможность ориентироваться в ситуации по туберкулезу только по стаду или группе (не менее 6 голов) исследуемых животных.
Известно, что в индивидуальных хозяйствах, у хозяина одна-две коровы, а для постановки диагноза на туберкулёз необходимо провести убой реагирующих животных, и дальнейшие патологоанатомические и лабораторные исследования на туберкулёз.
В общественных хозяйствах, при убое одного или нескольких реагирующих животных сохраняется остальное поголовье животных, а в частном секторе, при убое одной коровы убивают и последнюю корову.
Поэтому, учитывая сложную эпидемическую и эпизоотическую ситуацию по туберкулёзу в нашей стране, недостаточную эффективность методов диагностики туберкулёза животных, совершенствование методов диагностики туберкулёза крупного рогатого скота в индивидуальных хозяйствах является весьма актуальным.
2. Цель исследований. Совершенствование методов диагностики туберкулёза крупного рогатого скота в индивидуальных и общественных хозяйствах. Предложить специальный, дополнительный комплекс методов диагностики туберкулёза в индивидуальных хозяйствах РФ.
3. Основные задачи исследований:
1. Изучить распространённость микобактериозов крупного рогатого скота в общественных и индивидуальных хозяйствах Стародубского района Брянской области.
2. Определить видовой состав микобактерий, выделенных от убитых с диагностической целью животных и объектов внешней среды .
3. Провести сравнительное изучение диагностической ценности симультанной туберкулиновой пробы с ППД - туберкулином для млекопитающих и КАМ и симультанной туберкулиновой пробы с ППД -туберкулином для млекопитающих и ППД - туберкулином для птиц.
4. Изучить возможность применения ускоренной симультанной туберкулиновой пробы с ППД- туберкулином для млекопитающих и КАМ, в целях дифференциации аллергических реакций на туберкулин.
5. Изучить возможность применения индивидуального учёта проявления аллергических реакций при симультанном методе введения туберкулинов.
6. Изучить диагностическую ценность одновременного применения внутрикожной и пальпебральной туберкулиновых проб с целью дифференциации аллергических реакций на туберкулин.
7. Оценить эффективность внутривенной туберкулиновой пробы при дифференциации аллергических реакций на туберкулин.
8. Разработать дополнительный комплекс методов диагностики туберкулёза крупного рогатого скота в индивидуальных хозяйствах РФ.
4. Научная новизна. Представлен анализ проявления микобактериозов в общественных и индивидуальных хозяйствах Стародубского района Брянской области.
Установлена диагностическая ценность симультанной туберкулиновой пробы с ППД - туберкулином для млекопитающих и КАМ и симультанной туберкулиновой пробы с ППД -туберкулином для млекопитающих и ППД -туберкулином для птиц.
Впервые показана необходимость применения симультанной туберкулиновой пробы, с индивидуальным учётом реакций на разные аллергены, для дифференциации специфических и неспецифических реакций на туберкулин в индивидуальных хозяйствах.
Впервые показана возможность применения ускоренной симультанной туберкулиновой пробы с ППД - туберкулином для млекопитающих и КАМ с индивидуальным учётом аллергических реакций на разные аллергены.
• Определена диагностическая ценность комплексного применения внутрикожной и пальпебральной туберкулиновых проб для дифференциации специфических и неспецифических реакций на туберкулин.
Впервые представлен специальный, дополнительный комплекс методов для диагностики туберкулёза в индивидуальных хозяйствах РФ.
5. Практическая ценность.
Предлагается дополнительный, специальный комплекс методов диагностики туберкулёза крупного рогатого скота в индивидуальных хозяйствах, где предусмотрено: применение симультанной туберкулиновой пробы и ускоренной симультанной туберкулиновой пробы, с индивидуальным учётом реакций на разные аллегены; комплексное применение внутрикожной и пальпебральной туберкулиновых проб; применение внутривенной туберкулиновой пробы.
6. Основные положения выносимые на защиту.
1. Материалы по сравнительному изучению диагностической ценности симультанной туберкулиновой пробы с ППД - туберкулином для млекопитающих и КАМ и симультанной туберкулиновой пробы с ППД -туберкулином для млекопитающих и ППД - туберкулином для птиц при диагностике туберкулёза крупного рогатого скота в индивидуальных хозяйствах.
2. Результаты исследований по применению ускоренной симультанной туберкулиновой пробы с ППД - туберкулином для млекопитающих и КАМ для дифференциации аллергических реакций на туберкулин.
3. Результаты исследований по применению симультанной туберкулиновой пробы на крупном рогатом скоте общественных и индивидуальных хозяйств, с индивидуальным учётом проявления аллергических реакций.
4. Результаты применения внутрикожной и пальпебральной туберкулиновых проб для дифференциации аллергических реакций на туберкулин.
5. Применение специального, дополнительного комплекса методов диагностики туберкулёза крупного рогатого скота в индивидуальных хозяйствах РФ.
7. Апробация работы. Основные положения диссертационной работы доложены на:
• Межлабораторном совещании сотрудников ВИЭВ, Москва, 2005 г.
8. Публикация результатов исследований. По материалам диссертации опубликовано 3 научные работы.
9. Объём и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 166 страницах компьютерного текста и состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения полученных результатов, выводов, практических предложений и списка использованной литературы.
- Специальность ВАК РФ 06.02.02
- Количество страниц 165
- Скачать автореферат
- Читать автореферат
Оглавление диссертации кандидат ветеринарных наук Полякова, Ольга Николаевна
1. Обзор литературы.
1.1 Общие сведения о туберкулезе и его возбудителе.
1.2 Эпизоотологические данные.
1.3 Диагностика туберкулеза.
1.4 Неспецифические реакции на туберкулин.
1.5 Дифференциальная диагностика туберкулеза.
1.6 Течение, клинические признаки и формы проявления туберкулеза.
1.7 Патогенез, патологоанатомические изменения при туберкулезе.
1.8 Обсуждение литературного обзора.
2. Собственные исследования.
2.1 Реакция специфического лизиса лейкоцитов.
2.2 Материалы и методы исследования РСЛЛ.
3. Результаты собственных исследований.
3.1 Определение для РСЛЛ рабочей дозы ППД-туберкулина для млекопитающих, ППД-туберкулина для птиц и КАМ (in vitro).
3.2 Изучение специфичности и активности реакции специфического лизиса лейкоцитов.
3.2.1 Изучение специфичности и активности РСЛЛ крови крупного рогатого скота при введении живых микобактерий вакцины БЦЖ.
3.2.2 Изучение специфичности и активности РСЛЛ крови свиней при введении живых микобактерий вакцины БЦЖ.
3.2.3 Изучение специфичности и активности РСЛЛ крови собак при введении живых микобактерий вакцины БЦЖ.
3.2.4 Изучение специфичности и активности РСЛЛ крови кроликов при введении живых микобактерий вакцины БЦЖ.
3.3 Исследование РСЛЛ для дифференциации неспецифических реакций коров, реагировавших на туберкулин.
3.3.1 Исследование РСЛЛ крови у коров, реагировавших на туберкулин, в Матвеево-Курганском районе Ростовской области.
3.3.2 Исследование крови коров, реагировавших на туберкулин реакцией специфического лизиса лейкоцитов в Сальском районе Ростовской области.
3.3.3 Исследование РСЛЛ крови коров, реагировавших на туберкулин в Неклиновском районе Ростовской области.
3.4 Экономический ущерб и экономический эффект.
3.5 Обсуждение результатов исследований.
5. Практические предложения.
Актуальность темы. По статистическим данным Департамента ветеринарии Минсельхоза России туберкулез крупного рогатого скота занимает второе место (после лейкоза) в структуре инфекционных болезней. Во-первых потому, что им болеют люди, все виды животных и птиц. Во-вторых, эта болезнь значительно распространена в настоящее время, хотя с момента открытия ее возбудителя Р.Кохом прошло много лет, а победить болезнь не удается до сих пор. Заболевание регистрируется во многих странах.
Поэтому борьба с туберкулезом животных - важнейшая проблема. Ликвидация туберкулеза животных имеет не только экономическое значение, но и социально-гигиеническое и эпидемиологическое.
Хозяйства несут значительные убытки, связанные с выбраковкой мяса при убое больных животных, недополучением продукции, приплода, а также затраты на обеззараживание молока, диагностические исследования, дезинфекцию животноводческих помещений и т. д.
Распространение туберкулеза среди крупного рогатого скота, свиней, овец, коз и других видов животных ведет к расходам на проведение вынужденных и профилактических мероприятий по купированию, уничтожению и недопущению заноса инфекции.
Источник возбудителя инфекции - больные животные всех видов, а также человек. Обязательным условием эпизоотического процесса является наличие восприимчивых животных, со сниженной резистентностью организма.
Наиболее важным в системе профилактических противотуберкулезных мероприятий является своевременное выявление зараженных животных, как источника возбудителя туберкулеза и удаление их из стада.
Одной из задач профилактики туберкулеза является совершенствование диагностики туберкулеза сельскохозяйственных животных, так как существующие методы диагностики не обеспечивают обнаружение возбудителя в начальной стадии болезни. Клинические признаки не всегда типичны. От момента заражения до появления первых признаков туберкулеза может пройти несколько месяцев, и даже лет. Ветеринарным врачам при постановке диагноза на туберкулез требуются более чувствительные методы, позволяющие обнаруживать состояние сенсибилизации, выявлять этиологию туберкулиновых реакций при туберкулезе на всех этапах развития аллергического процесса в доклинический период.
Причины возникновения аллергических реакций различны, это поражение гельминтами (фасциолез, эхинококкоз, дикроцелиоз), лейкоз, гнойные воспалительные процессы (абсцессы, бурситы, маститы, эндометриты), а также гормональные воздействия (охота, стельность), избыток белка в рационе животных, различные стрессовые факторы.
Многие ученые при изучении аллергической диагностики, отмечают случаи обнаружения реагирующих на туберкулин животных, у которых не удается подтвердить наличие болезни. Объясняют появление таких реакций на туберкулин сенсибилизацией организма животных атипичными и паратуберкулезными микобактериями, заражением микобактериями человеческого и птичьего вида [98].
Изучением неспецифических реакций занимались многие авторы: О.В. Мартма (1978), В.М. Харитонова (1983), A.B. Гуркин (1985), Л.И. Ходун (1987), A.C. Донченко (1987.), Д.Д. Новак (1990), Г.А. Юдин (1990), М.А. Сафин (1992), А.И. Кузин (1992), A.M. Падалица (1998), А.Н. Шаров (2000), А.Х. Найманов (2009) и другие.
В связи с этим при постановке диагноза на туберкулез особенно необходима дифференциация специфических и иеспецифических реакций на внутрикожное введение туберкулина.
Существующая прижизненная диагностика аллергическими исследованиями и лабораторная диагностика не выявляет животных в первые дни, и даже месяцы после их заражения. Поэтому, требуются более чувствительные методы, которые позволяют дифференцировать специфические и неспецифические реакции на внутрикожное введение туберкулина.
Проблема совершенствования прижизненных методов диагностики туберкулеза животных имеет своей целью поиск ранней доклинической постановки диагноза и решения ряда задач, связанных с дифференциацией туберкулиновых реакций, вызванных различными видами микобактерий, что имеет большое ветеринарно-санитарное и эпизоотическое значение.
Нужен метод, который в кратчайший срок поможет выявить больное животное и предотвратить неоправданный и необоснованный убой высокопродуктивных животных.
Цель исследования. Целью наших исследований являлась разработка способа ранней диагностики туберкулеза животных и дифференциация специфических реакций от неспецифических, на внутрикожное введение туберкулина.
Для достижения намеченной цели решались следующие задачи:
1. Определить для реакции специфического лизиса лейкоцитов рабочую дозу ППД-туберкулина для млекопитающих, ППД-туберкулина для птиц и KAM (in vitro).
2. Изучить специфичность и активность лейкоцитов в реакции специфического лизиса лейкоцитов in vitro с аллергенами: ГТПД-туберкулином для млекопитающих, ППД-туберкулином для птиц и KAM, на животных сенсибилизированных живыми микобактериями БЦЖ.
3. Исследовать реакцию специфического лизиса лейкоцитов (PCJ1J1) для дифференциации специфических и неспецифических реакций у реагировавших на туберкулин коров.
Научная новизна. Разработан, испытан и предложен лабораторный аллергический способ диагностики туберкулеза и дифференциации л t туберкулиновых проб методом in vitro реакцией специфического лизиса лейкоцитов. Использование реакции специфического лизиса лейкоцитов с ППД-туберкулином для млекопитающих, ППД-туберкулином для птиц и KAM позволило выявить неспецифическую сенсибилизацию организма, вызванную птичьими и атипичными микобактериями.
Основные положения, выносимые на защиту: 1 1. Специфичность и активность реакции специфического лизиса лейкоцитов при введении интактным животным живых микобактерий БЦЖ и противобруцеллезиой вакцины штамма 82.
2. Дифференциация неспецифических туберкулиновых реакций у реагирующих на туберкулин коров в производственных условиях реакцией специфического лизиса лейкоцитов.
Публикации по теме. По материалам диссертационной работы опубликовано 15 научных работ, три из них в рецензируемом издании, рекомендованном ВАК РФ, и патент РФ на способ диагностики.
Практическая значимость. Полученный научный материал позволяет обнаружить инфицированное животное в начальной стадии заражения и отличить неспецифические туберкулиновые реакции, вызванные атипичными и птичьими микобактериями, от специфических, что имеет важное практическое значение для сохранения животных с неспецифическими туберкулиновыми реакциями. РСЛЛ рекомендуется применять при ранней диагностике туберкулеза и дифференциальной диагностике специфических и неспецифических реакций на введение ППД-туберкулина для млекопитающих при внутрикожной туберкулиновой пробе.
Структура и объем работы. Диссертация изложена на 153 страницах компьютерного текста, состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований и их обсуждения, выводов, практических предложений и списка литературы. В диссертации приведены 28 таблиц. Список литературы включает 264 источника, в том числе 58 иностранных авторов.
- Специальность ВАК РФ 16.00.03
- Количество страниц 284
Оглавление диссертации доктор ветеринарных наук Боганец, Нина Сергеевна
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ.
1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.
1.1.Возбудитель туберкулеза и его основные свойства.
1.2. Методы диагностики туберкулеза животных.
1.3. Бактериологическая диагностика туберкулеза.
1.3.1. Бактериоскопический метод.
1.3.2. Культивирование микобактерий на питательных средах.
1.3.2.1. Консервирование, хранение и предварительная обработка биологического материала.
1.3.2.2. Питательные среды и их совершенствование.
1.3.3. Биологическая проба на лабораторных животных.
2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.
2.1. Материал и методы исследований.
2.1.1. Место и сроки выполнения работы.
2.1.2.Соответствие работы тематическим планам НИР.
2.1.3. Гносеология работы.
2.1.4. Сельскохозяйственные и лабораторные животные.
2.1.5. Культуры микобактерий.
2.1.6. Диагностические препараты.
2.1.7. Экспериментально-производственные хозяйства.
2.1.8. Мясоперерабатывающие предприятия.
2.1.9. Основные лабораторные приборы и оборудование.
2.1.10. Питательные среды.
2.1.11. Объемы диагностических исследований.
2.1.12. Первичная документация.
2.1.13. Методы и методики исследований.
2.1.14. Экономическая эффективность научных разработок.
2.1.15. Математическая обработка экспериментальных данных.
3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.
3.1. Уровень бактериологической диагностики -туберкулеза животных в РФ.
3.2. Вндовон спектр микобактерий, изолированных от крупного рогатого скота и из внешней среды в регионе Сибири.
3.2.1. Частота изоляции и видовой состав микобактерий.
3.2.2. Коллекция музейных эпизоотических штаммов микобактерий
3.2.3. Характеристика культуры М. bovis, шт. 14 (ВНИИБТЖ). '
3.3. Усовершенствование культурального метода бактериологического исследования.
3.3.1. Влияние методов консервирования биологического материала на высеваемость микобактерий.
3.3.2. Сравнительная оценка методов предварительной обработки биологического материала.
3.3.3. Эффективность различных видов пробок при хранении культур микобактерий.
3.3.4. Влияние различных концентраций серной кислоты на высеваемость микобактерий из биологического материала.
3.3.5. Информативность плотных питательных сред при культивировании разных видов микобактерий.
3.3.6. Информативность плотных питательных сред с использованиехМ химических и биологических добавок.
3.3.7. Совершенствование технологии приготовления плотных питательных сред.
3.4. Усовершенствование биологического метода диагностики туберкулеза.
3.4.1. Чувствительность белых мышей к М. bovis.
3.4.2. Эффективность интратестикулярного заражения морских свинок
3.4.3. Ускоренная постановка биологической пробы на морских свинках в диагностике туберкулеза животных на основе феномена Коха
3.4.3.1. Теоретическое обоснование.
3.4.3.2. Летальная доза туберкулина для здоровых морских свинок.
3.4.3.3. Летальная доза туберкулина для морских свинок, зараженных М. bovis.
3.4.3.4. Оптимальный срок введения туберкулина, вызывающий гибель зараженных М. bovis морских свинок.
3.4.3.5. Летальность морских свинок после введения туберкулина в зависимости от дозы заражения культурой М. bovis.
3.4.4. Методика ускоренной постановки биологической пробы на туберкулез.
3.4.5. Комиссионное производственное испытание метода ускоренной постановки биологической пробы на туберкулез.
3.4.6. Экономическая эффективность метода ускоренной постановки биологической пробы на туберкулез.
4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ.
6. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ.
Одной из ведущих, наиболее сложных и экономически значимых проблем в инфекционной патологии животных является туберкулез. В начале XXI века эпизоотическая обстановка в России, несмотря на тенденцию улучшения в целом, остается напряженной. Экономический ущерб от туберкулеза крупного рогатого скота за последние 45 лет в РФ превысил 85 млрд. рублей. При этом экономика животноводства потеряла около 6 млн. голов крупного рогатого скота, 15,3 млн. тонн молока, 1,6 млн. тонн мяса и 3,5 млн. голов приплода (Ю.И. Смолянинов, 2004).
Решающая роль в системе противоэпизоотических мероприятий при туберкулезе животных принадлежит диагностике. Арсенал средств и методов диагностики туберкулеза достаточно богат и разнообразен, разработка и совершенствование которых продолжается со времен открытия возбудителя. Однако основными методами первичной диагностики туберкулеза, результаты которой предопределяют окончательный эпизоотический статус хозяйства, являются патологоанатомический и бактериологический.
Несмотря на успехи, достигнутые наукой и практикой в вопросах бактериологической диагностики, на современном этапе в связи с установленным фактом эволюционной изменчивости возбудителя, широким и зачастую бесконтрольным применением лекарственных средств и биопрепаратов, экологическим техногенным прессом, а также коренными преобразованиями ведения животноводства в стране в значительной мере снизились эффективность и информативность бактериологического исследования при туберкулезе животных.
В связи с этим ревизионная оценка, разработка и усовершенствование комплекса бактериологической диагностики туберкулеза в современных условиях ведения животноводства и внедрение их в ветеринарную бактериологическую практику представляется весьма актуальным.
Цель и задачи исследований. Целью исследований явилось усовершенствование методов бактериологической диагностики туберкулеза животных в системе противоэпизоотических мероприятий.
Задачи исследований: провести анализ уровня бактериологической диагностики туберкулеза животных в Российской Федерации; изучить видовой спектр, структуру и основные свойства микобактерий, персистирующих в организме крупного рогатого скота и среде его обитания в регионе Сибири; изучить культурально-морфологические, биохимические и патогенные свойства культуры М. bovis, шт. 14 (ВНИИБТЖ); дать оценку методов консервирования, хранения и предварительной обработки биологического материала; дать сравнительную характеристику и повысить информативность плотных питательных сред с использованием химических, биологических добавок и усовершенствовать технологию их приготовления; изучить возможность использования в качестве биологических моделей при туберкулезе белых мышей; отработать регламент использования ППД туберкулина для млекопитающих при воспроизведении анафилактического шока у зараженных культурой М. bovis морских свинок (феномен Коха);
- разработать метод ускоренной постановки биологической пробы на морских свинках в диагностике туберкулеза животных, определить экономическую эффективность метода.
Научная иовизна и теоретическая значимость. Впервые представлен ретроспективный анализ результатов бактериологической диагностики туберкулеза животных в РФ за 2001-2005 гг. Изучена частота изоляции и спектр патогенных и атипичных микобактерий, персистирующих в организме крупного рогатого скота и среде его обитания на территории Сибири. Изолирован эпизоотический патогенный для лабораторных животных и крупного рогатого скота высоковирулентный штамм возбудителя туберкулеза бычьего вида (шт. 14, ВНИ-ИБТЖ), стабильно сохраняющий свои свойства. Изучены его культурально-морфологические, биохимические и биологические свойства.
Получены новые данные по комплексу бактериологического исследования при туберкулезе - хранения и предварительной обработки биоматериала, повышения эффективности и информативности, культурального и биологического методов исследований.
В качестве биологической модели при экспериментальном туберкулезе предложены белые мыши линий BALB/C, C57BL/6 и аутбредные.
Дано теоретическое обоснование и, на основе феномена Коха впервые разработан способ диагностики туберкулеза животных путем воспроизведения анафилактического туберкулинового шока (Изобретение, патент № 2265403). Отработан регламент использования ППД туберкулина для млекопитающих при воспроизведении анафилактического шока - летальные дозы для здоровых и зараженных М. bovis, сроки введения аллергена и гибели лабораторных животных в зависимости от заражающей дозы. Изучена эффективность предлагаемого ускоренного метода постановки биопробы на морских свинках в диагностике туберкулеза животных.
Результаты исследований вносят существенный теоретический вклад в решение проблемы диагностики туберкулеза и могут быть использованы при совершенствовании системы противотуберкулезных мероприятий.
Практическая значимость и внедрение результатов исследований.
Основные положения диссертации, выводы и практические предложения доложены, обсуждены на межлабораторном заседании ВНИИБТЖ и рекомендованы к защите (Протокол от 20.12.2005 г.).
Основные положения, выносимые на защиту.
1. Видовой состав и свойства микобактерий, персистирующих в организме крупного рогатого скота и среде его обитания на территории Сибири.
2. Культурально-морфологические, биохимические, патогенные и вирулентные свойства культуры М. bovis, шт. 14 (ВНИИБТЖ).
3. Усовершенствованный комплекс бактериологических исследований при туберкулезе животных.
4. Метод ускоренной постановки биологической пробы на морских свинках в диагностике туберкулеза животных и его эффективность.
Публикация результатов исследований.
Объем и структура диссертации.
Диссертация изложена на 26f4 страницах компьютерного текста и состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, выводов, практических предложений, списка литературы и приложений. Работа иллюстрирована 65 таблицами и 16 рисунками. Список литературы включает 724 источника, в том числе 166 иностранных авторов.
Читайте также:
