Биологическая проба при туберкулезе
Туберкулиновая проба Манту, в просторечье “пуговка” - это специфический диагностический тест (не путать с прививкой!), применяемый при массовом обследовании населения на туберкулез.
Для проведения туберкулиновых проб используют туберкулин.
ЧТО ТАКОЕ ТУБЕРКУЛИН?
Туберкулин по своему составу является сложным соединением. Он не содержит живых или убитых микобактерий туберкулеза, а только продукты их жизнедеятельности, элементы микробной клетки и часть среды, на которой росли микобактерии туберкулеза.
В России с 1975 г. для массового обследования населения на туберкулез используют единую внутрикожную туберкулиновую пробу Манту с 2 туберкулиновыми единицами (2ТЕ) очищенного туберкулина в стандартном разведении. Этот туберкулин соответствует основным требованиям, предъявляемым к туберкулинам: является очищенным от белков, что повышает его специфичность, и стандартизованным к международным стандартам, что свидетельствует о его достаточной активности.
На введение туберкулина возникает ответная аллергическая реакция (положительная туберкулиновая проба) у привитых против туберкулеза (поствакцинальная аллергия) и у инфицированных микобактериями туберкулеза (инфекционная аллергия). В обоих случаях в организме обследуемого находятся туберкулезные палочки. Только в первом случае они внесены с вакциной BCG и поддерживают иммунитет к туберкулезу, а в другом попали в организм из окружающей среды и являются вирулентными, т.е. в определенных условиях могут вызвать заболевание.
Существует ряд критерием, по которым можно различить поствакцинальную
и инфекционную аллергию. Помочь Вам правильно оценить ситуацию может педиатр. В более сложных случаях необходима консультация фтизиатра.
Запомните! Лица, свободные от туберкулезной инфекции, не дают положительного ответа на туберкулиновую пробу, даже при наличии у них аллергической настроенности или аллергических заболеваний. Именно поэтому туберкулинодиагностика является специфическим диагностическим тестом.
КАК ЧАСТО МОЖНО ПРОВОДИТЬ ТУБЕРКУЛИНОДИАГНОСТИКУ?
В России массовая туберкулинодиагностика проводится ежегодно – не реже 1 раза в год.
Два раза в год проводят туберкулиновую пробу:
Ø Детям, не вакцинированным против туберкулеза, независимо от их возраста
Ø Детям, находящимся в контакте с больным туберкулезом
Ø Детям из групп риска по результатам туберкулинодиагностики
Ø Детям из групп медико-биологического риска: больным сахарным диабетом, язвенной болезнью, болезнями крови, системными заболеваниями, получающим длительно (более 1 месяца) кортикостероидную терапию, ВИЧ-инфицированным, детям с хроническими неспецифическими заболеваниями
Ø Детям из социальных групп риска
Именно эти дети имеют наибольший риск заболевания туберкулезом.
Возможно повторное проведение пробы Манту в течение календарного года тем детям и подросткам декретированных возрастов (7 и 14 лет), у которых реакция отрицательная при отборе на ревакцинацию против туберкулеза ( RBCG ).
Туберкулиновые пробы с диагностической целью проводят:
Ø при наличии у ребенка симптомов, подозрительных на туберкулез
Ø с целью уточнения характера туберкулиновой аллергии (поствакцинальная или инфекционная аллергия)
Диагностические туберкулиновые пробы проводят независимо от давности постановки предыдущей пробы.
ЦЕЛЬ ПРОВЕДЕНИЯ ТУБЕРКУЛИНОДИАГНОСТИКИ
Ø Выявление больных туберкулезом
Ø Выявление лиц, инфицированных микобактериями туберкулеза
Ø Отбор детей для ревакцинации против туберкулеза.
ПРОТИВОПОКАЗАНИЯ ДЛЯ ПРОВЕДЕНИЯ МАССОВОЙ ТУБЕРКУЛИНОДИАГНОСТИКИ
Относительные противопоказания для проведения пробы Манту следующие:
Ø Острые и хронические инфекционные, кожные и соматические заболевания в стадии обострения
Ø Аллергические заболевания в острой и подострой фазе
Ø Карантин по детским инфекциям
Необходимо воздержаться от проведения туберкулиновой пробы при подозрении на наличие индивидуальной непереносимости туберкулина до консультации фтизиатра.
Перед проведением пробы Манту ребенок должен быть осмотрен врачом с целью выявления противопоказаний.
Пробу Манту можно проводить:
Ø Сразу после снятия карантина по детским инфекциям
Ø Через 2-4 недели после перенесенного острого или обострения хронического заболевания
Ø Через 4 недели после проведения профилактических прививок
Для проведения туберкулиновой пробы с диагностической целью при подозрении на заболевание туберкулезом противопоказаний нет!
ОЦЕНКА ВНУТРИКОЖНОЙ ПРОБЫ МАНТУ С 2 ТЕ ППД-Л
Результаты пробы Манту оцениваются через 72 часа путем измерения размера инфильтрата (папулы) в миллиметрах. Измеряется поперечный (по отношению к оси предплечья) размер инфильтрата. При отсутствии инфильтрата измеряется размер гиперемии.
При постановке пробы Манту реакция считается:
Ø Отрицательной при полном отсутствии инфильтрата или гиперемии, при наличии уколочной реакции (0-1 мм).
Ø Сомнительной при инфильтрате размером 2-4 мм или только гиперемии любого размера.
Ø Положительной при наличии инфильтрата размером 5 мм и более.
Ø Гиперергической при наличии инфильтрата 17 мм и более, а также везикуло-некротических реакций независимо от размера инфильтрата с лимфангоитом или без него.
В КАКИХ СЛУЧАЯХ НЕОБХОДИМО ОБРАТИТЬСЯ К ФТИЗАТРУ
Как мы уже говорили, положительная туберкулиновая проба может свидетельствовать и о наличии противотуберкулезного иммунитета (поствакцинальная аллергия) и об инфицированности микобактериями туберкулеза (инфекционная аллергия).
Необходимо обратиться к фтизиатру, если:
Ø положительная туберкулиновая проба появилась впервые после предшествующих отрицательных
Ø наросла на 6 мм и более в течение одного года или постепенно в течение нескольких лет
Ø впервые появился инфильтрат размером 17 мм и более (гиперергическая проба)
В этих случаях необходимо обследование детей в условиях противотуберкулезного диспансера с целью исключения заболевания туберкулезом с последующим проведением превентивного лечения противотуберкулезными препаратами.
В результате взаимодействия туберкулина с противотуберкулезными антителами в инфицированном микобактериями туберкулеза организме помимо местной реакции (в зоне введения препарата), может наблюдаться общая реакция организма на введение туберкулина, проявляющаяся ухудшением общего состояния, головными болями, повышением температуры и т.д.
Если у вашего ребенка после проведения пробы Манту нарушается общее состояние, обязательно обратитесь к фтизиатру, т.к. в этом случае в первую очередь надо думать о заболевании туберкулезом!
У лабораторных животных этих групп в дальнейшем гибель от туберкулеза наблюдали примерно в те же сроки, что и зараженных первой контрольной, туберкулин которым внутрибрюшинно не вводили, - через 45-58 дней. Из трех свинок третьей опытной группы, туберкулин которым введен внутрибрюшинно через 25 дней после заражения культурой М. bovis, пала одна (33,3%) спустя 21 час. Животные четвертой и пятой групп при введении туберкулина соответственно через 30 и 35 дней после заражения пали все (100%) через 17-24 часа. Все морские свинки первой контрольной группы, туберкулин которым не вводили, пали при естественном развитии туберкулезного процесса соответственно через 49, 52 и 61 день после заражения. Морские свинки второй контрольной группы (не зараженные), которым также внутрибрюшинно введен туберкулин в дозе 1 мл (50000 ME), остались живы во все сроки наблюдения. Таким образом, исходя из результатов экспериментальных исследований, оптимальный срок внутрибрюшинного введения ППД туберкулина для млекопитающих, при котором наступает анафилактический шок и гибель всех морских свинок, зараженных культурой возбудителя туберкулеза бычьего вида, составляет 30 дней. Пример №3. Подбор дозы ППД туберкулина. В опытах использовали 21 морскую свинку живой массой 300-350 г. Опыты ставили последовательно (по 3 гол.) до наступления гибели животных на введение нарастающих доз ППД туберкулина для млекопитающих. Внутрибрюшинно туберкулин морским свинкам вводили следующим образом. Помощник держал животное головой вниз для смещения кишечника с целью предупреждения его травмы при введении иглы. Укол делали в нижней трети живота справа или слева от средней линии. При этом кожу брюшка зажимали двумя пальцами левой руки, оттягивали ее и приподнимали кверху. Иглу вводили ниже этого места в горизонтальном положении. Результаты клинических наблюдений за опытными морскими свинками характеризовались следующими показателями. При дозе введения внутрибрюшинно 1 и 2 мл стандартного раствора ППД туберкулина для млекопитающих (соответственно 50000 и 100000 ME) в течение первого часа наблюдений состояние организма опытных животных было удовлетворительным, аппетит сохранялся, температура тела была в пределах нормы - 37-37,5°С. Аналогичную клиническую картину наблюдали и в последующие сроки - через восемь часов и через сутки. На введение туберкулина в дозе 10 мл (500000 ME) через 10-25 минут наблюдали резкое угнетение морских свинок, отсутствие аппетита, тремор мышц в течение 20-30 минут и повышение температуры тела до 38,6-39°С. Аналогичные клинические признаки наблюдали в течение 3-4,5 часов. Через 5-6 часов после введения туберкулина состояние лабораторных животных приходило в норму, появлялся аппетит. При введении туберкулина в дозе 20 мл (1000000 ME) с нарастающими признаками асфиксии пали все три опытные морские свинки соответственно через 5, 7 и 8 часов. Трем свинкам седьмой контрольной группы вместо ППД туберкулина для млекопитающих внутрибрюшинно ввели по 20 мл физиологического раствора. При этом каких-либо отклонений в общем состоянии и температурной реакции не наблюдали. Таким образом, результаты опыта свидетельствуют, что организм здоровых морских свинок (не зараженных М.bovis) обладает индифферентностью к ППД туберкулину для млекопитающих при внутрибрюшинном введении в дозах стандартного разведения до 5 мл (250000 ME). Летальная доза аллергена для них составляет 15-20 мл (750000-1000000 ME). Лабораторные животные при этом погибают от асфиксии. Все это позволило сделать заключение о возможности проведения дальнейших исследований по отработке регламента применения туберкулина ускоренной постановке биологической пробы при туберкулезе животных. Для отработки оптимальной оттитрованной летальной дозы внутрибрюшинного введения ППД туберкулина для млекопитающих, способной вызвать гибель зараженных возбудителем туберкулеза лабораторных животных, провели опыт на 30 морских свинках живой массой 300-350 г. В предварительных исследованиях все морские свинки не реагировали на внутрикожное введение туберкулина в дозе 25 международных туберкулиновых единиц (ME) в объеме 0,1 мл. Из животных сформировали шесть групп по пять голов. Свинки первых четырех групп (20 гол.) являлись опытными и двух (10 гол.) - контрольными. Свинок четырех опытных и пятой контрольной групп заразили интратестикулярно культурой возбудителя туберкулеза бычьего вида (полевой штамм 14, ВНИИБТЖ) - в дозе 0,1 мг бактериальной массы в 0,4 мл физиологического раствора. Животных шестой группы не заражали (чистый контроль). Через 30 дней все зараженные лабораторные животные 1-4-й групп и пятой контрольной на 24-м и 48-м часу дали реакцию на внутрикожное введение ППД туберкулина для млекопитающих в дозе 25 ME в объеме 0,1 мл. У зараженных морских свинок в месте введения аллергена (область брюшка) отмечали гиперемию кожи с образованием уплотненной припухлости диаметром 8-14 мм. У семи свинок (28%) наблюдали некротизированные участки в центре припухлости. Всем животным 1-4-й опытных и шестой контрольной групп через 30 дней после заражения ввели внутрибрюшинно стандартный раствор ППД туберкулина для млекопитающих соответственно в дозах 0,2; 0,5; 0,8 и 1 мл, или 10000; 25000; 40000 и 500000 ME соответственно. Зараженным культурой возбудителя туберкулеза пяти свинкам пятой контрольной группы вместо туберкулина внутрибрюшинно ввели по 1 мл физиологического раствора. Результаты эксперимента показали следующее. Все лабораторные животные при внутрибрюшинном введении 0,2 мл (10000 ME) ППД туберкулина для млекопитающих через 30 дней после заражения культурой М.bovis остались живы (табл. 3). Из второй опытной группы пала одна морская свинка (20%) через 46 часов после внутрибрюшинного введения туберкулина в дозе 0,5 мл (25000 ME), из третьей - три (60%) соответственно через 20; 23 и 25 часов.
Животные четвертой опытной группы, туберкулин которым ввели в дозе 1 мл (50000 ME), пали все (100%) в сроки от 18 до 26 часов (в среднем через 22,6±0,9 часа). Из пяти зараженных М. bovis свинок пятой контрольной группы, туберкулин которым внутрибрюшинно не вводили, через 29 суток пала одна (20%), при вскрытии которой во внутренних органах (печень, легкие, почки) и лимфатических узлах наблюдали характерные для туберкулеза поражения миллиарного характера. Из незараженных возбудителем туберкулеза свинок шестой контрольной группы, туберкулин которым ввели внутрибрюшинно в дозе 1 мл (50000 ME), гибели через 30 дней и в последующие сроки не отмечали. При патологоанатомическом исследовании у всех убитых свинок во внутренних органах и лимфатических узлах отмечали различной степени поражения, характерные для туберкулеза. Следовательно, характер и тяжесть этих поражений были недостаточным для летального исхода лабораторных животных в указанный срок (без введения ППД туберкулина для млекопитающих в разрешающей дозе). У свинок шестой контрольной группы (не зараженные культурой М. bovis) при убое видимых характерных для туберкулеза поражений внутренних органов и лимфатических узлов мы не нашли. Таким образом, исходя из результатов опытов, оптимальной (разрешающей) дозой ППД туберкулина для млекопитающих, введенного внутрибрюшинно через 30 дней после заражения культурой возбудителя туберкулеза бычьего вида, вызывающего гибель всех морских свинок (100%), является доза 1 мл стандартного разведения аллергена, что составляет 50000 ME. Способ диагностики туберкулеза животных, включающий введение лабораторным животным суспензии биоматериала, полученного от убитых с диагностической целью животных, наблюдение в течение месяца за ними, инокуляции через 30-35 дней после введения суспензии ППД туберкулина для млекопитающих в дозе 0,8-1 мл внутрибрюшинно, при этом гибель лабораторного животного свидетельствует о наличии туберкулеза. Читайте также:
Пожалуйста, не занимайтесь самолечением!При симпотмах заболевания - обратитесь к врачу.
Copyright © Иммунитет и инфекции
|