Белки бактерий туберкулеза cfp10 esat6

Иммунологические тесты со специфичными для Mycobacterium tuberculosis белками ESAT-6 и CFP-10

доктор медицинских наук, профессор кафедры фтизиатрии;

заведующая научно-клиническим отделом

2. Борисов С. Е., Лукина Г. В., Слогоцкая Л. В. и др. Скрининг и мониторинг туберкулёзной инфекции у ревматологических больных, получающих генно-инженерные биологические препараты // Туб. – 2011. – № 6. – С. 42-50.

3. Долженко Е. Н. Использование аллергена туберкулезного рекомбинантного (Диаскинтеста) в выявлении активного туберкулеза у детей // Туб. – 2013. – № 6. – C. 28-29.

4. Корнева Н. В., Старшинова А. А., Овчинникова Ю. Э. и др. Сравнение результатов пробы Манту с 2 ТЕ и Диаскинтеста при различных проявлениях туберкулезной инфекции // Туб. – 2013. – № 6. – C. 49-50.

5. Овсянкина Е. С., Губкина М. Ф., Ершова Н. Г. и др. Опыт применения нового кожного теста (Диаскинтеста®) для диагностики туберкулеза органов дыхания у детей и подростков в туберкулезном отделении // Туб. – № 1. – 2010. – С. 16-19.

6. Слогоцкая Л. В., Иванова Д. А., Кочетков Я. А. и др. Сравнительные результаты кожного теста с препаратом, содержащим рекомбинантный белок CFP-10-ESAT-6 и лабораторного теста QuantiFERON - GIT // Туб. – 2012. – № 10 – С. 27-33

7. Слогоцкая Л. В., Кочетков Я. А., Сенчихина О. Ю. и др. Динамика кожной пробы (Диаскинтест) у детей при оценке активности туберкулезной инфекции // Туб. – 2011. – № 2 – С. 59-63.

8. Слогоцкая Л. В., Сенчихина О. Ю., Богородская Е. М. Чувствительность теста с аллергеном туберкулезным рекомбинантным, содержащим белок ESAT6-CFP10 у впервые выявленных больных туберкулезом детей и подростков в г. Москве // Туб. и соц. знач. заболевания. – 2013. – № 1. – С. 37-44.

9. Andersen P., Doherty T., Pai M. et al. The prognosis of latent tuberculosis: can disease be predicted? // Trends. Mol. Med. – 2007. – Vol. 13, № 5. – P. 175-182.

10. Andersen Р. Vaccine strategies against latent tuberculosis infection // Trends Microbiol. – 2006. – Vol. 10. – P. 1016.

11. Bakir M., Millington K. A., Soysal A. et al. Prognostic value of a T-cell-based, interferon-γ biomarker in children with tuberculosis contact // Ann. Intern. Med. – 2008. – Vol. 149. – Р. 777-787.

13. Diel R., Loddenkemper R., Meywald-Walter K. et al. Predictive value of a whole-blood IFN-γ-assay for the development of active TB disease// Am J. Respir. Crit. Care Med. –2008. – Vol. 177. – Р. 1164-1170.

14. Diel R., Nienhaus A., Schaberg T. Cost-effectiveness of isoniazid chemoprevention in close contacts // Eur. Respir. J. – 2005. – Vol. 26. – Р. 465-473.

15. Dietrich J., Aagaard C., Leah R. et al. Exchanging ESAT6 with TB10.4 in an Ag85B fusion molecule-based tuberculosis subunit vaccine: efficient protection and ESAT6-based sensitive monitoring of vaccine efficacy // J. Immunol. – 2005. – Vol. 174. – P. 6332-6339.

16. Doherty T., Demissie A., Olobo J. et al. Immune responses to the Mycobacterium tuberculosis-specific antigen ESAT-6 signal subclinical infection among contacts of tuberculosis patients // J. Clin. Microbiol. – 2002. – Vol. 40. – Р. 704-706.

17. Doherty T., Wallis R., Zumla A. Biomarkers of disease activity, cure, and relapse in tuberculosis // Clin. Chest. Med. – 2009. – Vol. 30, № 4. – P. 783-796.

18. Dosanjh D., Hinks T., Innes J. et al. Improved diagnostic evaluation of suspected tuberculosis // Ann. Intern. Med. – 2008. – Vol. 148. – Р. 325-336.

19. Goletti D., Stefania C., Butera O. et al. Accuracy of immunodiagnostic tests for active tuberculosis using single and combined results: a multicenter TBNET Study//PLoS One. – 2008. – Vol. 3: e3417.

20. Guidelines for the investigation of contacts of persons with infectious tuberculosis. Recommendations from the National Tuberculosis Controllers Association and CDC // MMWR Recomm. Rep. – 2005. – Vol. 54. – Р. 1-47.

21. Guinn K., Hickey M., Mathur S. et al. Individual RD1-region genes are required for export of ESAT-6/CFP-10 and for virulence of Mycobacterium tuberculosis // Mol. Microbiol. – 2004. – Vol. 51. – P. 359-370.

22. Harboe M., Oettinger T., Wiker H. et al. Evidence for occurrence of the ESAT-6 protein in Mycobacterium tuberculosis and virulent Mycobacterium bovis and for its absence in Mycobacterium bovis BCG // Infect. Immun. – 1996. – Vol. 64. – P. 16-22.

23. Lalvani A., Millington K. A. T cell-based diagnosis of childhood tuberculosis infection // Curr. Opin. Infect. Dis. – 2007. – Vol. 20. – Р. 264-271.

24. Lalvani A. Diagnosing tuberculosis infection in the 21st century: new tools to tackle an old enemy // Chest. – 2007. – Vol. 131. – Р. 1898-1906.

25. Lienhardt C., Fielding K., Hane A. et al. Evaluation of the prognostic value of IFN-γ release assay and tuberculin skin test in household contacts of infectious tuberculosis cases in senegal // PLoS ONE. – 2010. – 5(5): e10508. doi:10.1371/journal.pone.0010508.

26. Mack U., Migliori G., Sester M. et al. LTBI: latent tuberculosis infection or lasting immune responses to Mycobacterium tuberculosis? A TBNET consensus statement // Eur. Respir. J. – 2009. – Vol. 33. – P. 956-973.

27. Mahairas G., Sabo P., Hickey M. et al. Molecular analysis of genetic differences between Mycobacterium bovis BCG and virulent M. bovis //J. Bacteriol. – 1996. – Vol. 178. – P. 1274-1282.

28. Mazurek G., Jereb J., Lobue P. et al. Guidelines for using the QuantiFERON-TB Gold test for detecting Mycobacterium tuberculosis infection, United States // MMWR Recomm Rep. – 2005. – Vol. 54. – Р. 49-55.

29. Mazurek G., Weis S., Moonan P. et al. Prospective comparison of the tuberculin skin test and two whole-blood interferon-gamma release assays in persons with suspected tuberculosis // Clin. Infect. Dis. – 2007. – Vol. 45. – P. 837-845.

30. Mori T., Sakatani M., Yamagishi F. et al. Specific detection of tuberculosis infection: an interferon-c-based assay using new antigens // Am. J. Respir. Crit. Care Med. – 2004. – Vol. 170. – Р. 59-64.

32. Pai M., Menzies D. Interferon-γ release assays: what is their role in the diagnosis of active tuberculosis? // Clin. Infect. Dis. – 2007. – Vol. 44. – Р. 74-77.

33. Pai M., Kalantri S., Dheda K. New tools and emerging technologies for the diagnosis of tuberculosis: part I. Latent tuberculosis // Expert. Rev. Mol. Diagn. – 2006. – Vol. 6. – Р. 413-422.

34. Pai M., Zwerling A., Menzies D. Systematic review: T-cell-based assays for the diagnosis of latent tuberculosis infection: an update //Ann. Intern. Med. ― 2008. – Vol. 149, № 3. – P. 177-184.

35. Richeldi L., Ewer K., Losi M. et al. Early diagnosis of subclinical multidrug-resistant tuberculosis // Ann. Intern. Med. – 2004. – Vol. 140. – Р. 709-713.

36. Shi L., North R., Gennaro M. Effect of growth state on transcription levels of genes encoding major secreted antigens of Mycobacterium tuberculosis in the mouse lung // Infect. Immun. – 2004. – Vol. 72, № 4. – P. 2420-2424.

37. Slogotskaya L., Bogorodskaya E., Litvinov V. et al. Prevalence of Tuberculosis Infection Estimated By Skin Testing With Recombinant Protein CFP10-ESAT6 Among Hospital Workers In //EAACI-WAO World Allergy and Asthma Congress 2013.-22-26 June 2013 Milan, Italy//www.postersessiononline.com/173580348_eu/congresos/EAACI2013/aula/-P_1158_EAACI2013.pdf

38. Slogotskaya L., Litvinov V., Seltsovsky P. et al. New skin test DIASKINTEST® (recombinant protein CFP10-ESAT6) in children for TB infection diagnosis //Allergy. Eur. J. Allerg. Clin. Immunol. – Vol. 65, suppl. S. 92 DOI: 10.1111/j.1398-9995.2010.02396х.

39. Slogotskaya L., Litvinov V., Seltsovsky P. et al. Sensitivity and specificity of new skin test - Diaskintest (recombinant protein CFP10-ESAT6) in patients with tuberculosis and individuals with non-tuberculous pulmonary diseases. //European Academy of Allergy and Clinical Immunology (EAACI) 30th Annual Congress, Istanbul, Turkey, June 11-15, 2011 // DOI: 10.3252/pso.eu.30eaaci.2011

40. Slogotskaya L., Ovsyankina E., Litvinov V. et al. Effectiveness of tuberculosis detection among adolescent student contacts with a new, specific skin test diaskintest which represents recombinant protein CFP10-ESAT6 //European Academy of Allergy and Clinical Immunology (EAACI) 30th Annual Congress, Istanbul June 11-15, 2011// DOI: 10.3252/pso.eu.30eaaci.2011

41. The National Collaborating Centre for Chronic Conditions. Tuberculosis. Clinical diagnosis and management of tuberculosis, and measures for its prevention and control. London, Royal College of Physicians, 2006.

42. Vordermeier H., Chambers M., Cockle P. et al. Correlation of ESAT-6-specific gamma interferon production with pathology in cattle following Mycobacterium bovis BCG vaccination against experimental bovine tuberculosis // Infect. Immun. – 2002. – Vol. 70. – P. 3026-3032.

43. Weldingh K., Andersen P. ESAT-6/CFP10 Skin test predicts disease in M. tuberculosis-infected guinea pigs // PLoS ONE. – 2008. – Vol. 3, № 4. – P. 1978.

• Обратные ссылки не определены.

Контент доступен под лицензией Creative Commons Attribution 4.0 License.

Владельцы патента RU 2360926:

Предложен новый гибридный белок CFP10-ESAT6 из М.tuberculosis, индуцирующий реакцию гиперчувствительности замедленного типа в отношении М.tuberculosis. Описана химерная НК, кодирующая предложенный белок. Раскрыт способ получения предложенного белка путем культивирования клеток штамма BL21(DE3) E.Coli, трансформированных сконструированным рекомбинантным вектором экспрессии на основе плазмиды pET22b(+). Предложена дозированная лекарственная форма, содержащая предложенный белок, для внутрикожного введения для диагностики туберкулезной инфекции. Изобретение позволяет получить высокой выход белока CFP10-ESAT6, обладающего специфической иммуногенностью. 5 н. и 3 з.п. ф-лы, 2 ил., 7 табл.

Область техники, к которой относится изобретение

Изобретение относится к области медицины, фармакологии и биотехнологии, конкретно к новому диагностикуму в виде дозированной лекарственной формы для внутрикожного введения, позволяющему осуществить диагностику туберкулезного процесса, новому гибридному белку CFP10-ESAT6, полученному с помощью новой рекомбинантной плазмидной ДНК.

Исследования, проведенные Всемирной организацией здравоохранения (ВОЗ), показали, что проблема туберкулеза (ТБ) по-прежнему стоит чрезвычайно остро, о чем свидетельствует уровень инфицированности населения земного шара, составляющий свыше 1 миллиарда человек. Около 8 миллионов человек заболевают туберкулезом каждый год. При этом 44% болеют легочной формой этого заболевания. Около 2 млн. человек умирает ежегодно, что составляет 23% смертельных исходов в мировом масштабе и превышает 50% летальности в Африканских странах (Dye С., Scheele S., Dolin P., Pathania V. and Ravinglione M. С., 1999, JAMA, 282, 7,677-686).

Для контроля за распространением ТБ и значительного снижения риска распространения этого заболевания необходимо, в том числе, создание эффективных реагентов для специфичной диагностики.

Базовым методом выявления туберкулезной инфекции многие годы является реакция Манту.

В основе этого метода лежит определение гиперчувствительности замедленного типа в отношении антигенных детерминант микобактерий. Реагент для постановки кожной пробы представляет собой суммарный экстракт антигенов из Mycobacterium bovis, что предопределяет очень низкий уровень специфичности реакции Манту. Положительная проба не выявляет различий между активной формой заболевания, предварительной сенсибилизацией в результате контакта с М.tuberculosis, БЦЖ (BCG) вакцинацией или перекрестной сенсибилизацией другими видами микобактерий. Более того, антигенные компоненты пробы не стандартизованы и поэтому пробы из разных источников могут различаться по кожной реакции (Mustafa A.S., T-cell subsets and cytokines interplay in infectious diseases, pp.201-211).

Таким образом, сложилась настоятельная необходимость идентифицировать антигены М.tuberculosis, которые могут стать кандидатами для производства улучшенных вакцин с универсальной эффективностью и специфических диагностических реагентов для детекции ТБ.

Развитие биотехнологии, в частности использование технологий ДНК клонирования и экспрессии, значительно облегчило идентификацию нескольких основных антигенов M.tuberculosis.

Общим недостатком этих подходов является отсутствие полной специфичности используемых белковых, полипептидных в том числе, гибридных реагентов в отношении M.tuberculosis, так как подобные белки-полипептиды имеются в штаммах других микобактерий и в вакцинном штамме БЦЖ. В случае наличия последнего обстоятельства, разработанные подходы не пригодны для дифференциальной диагностики инфекционного иммунитета от поствакцинального.

В последние годы в результате сравнительного анализа геномов различных микобактерий было установлено, что M.tuberculosis обеспечивает синтез двух секреторных белков ESAT6 и CFP10, которые отсутствуют у М.bovis и большинства непатогенных бактерий (Mustafa A.S., 2001, Carrent Pharmaceutical Biotechnology, 2, 157-173).

На основе этого диагностикума был разработан метод диагностики туберкулезной инфекции путем индукции реакции гиперчувствительности замедленного типа инкубацией Т-лимфоцитов преимущественно периферической крови пациента в условиях in vitro со смесью указанных выше антигенов. В случае положительной реакции с помощью чувствительных иммунологических методов фиксировался повышенный уровень синтеза γ-интерферона.

Однако известный способ очень сложен в постановке, требует дорогостоящего оборудования и реагентов, а потому не пригоден для массового применения в качестве скринингового метода.

Однако на стадии предклинических исследований этого рекомбинантного белка была установлена его повышенная неспецифическая иммуногенность, в связи с чем точность диагностики была не всегда удовлетворительной, кроме того, выход белка был не достаточно высок, что усложняло процесс получения конечного чистого продукта.

Задачей настоящего изобретения является устранение указанных недостатков, а именно повышение точности и функциональных возможностей диагностики туберкулезной инфекции, увеличение экономических показателей у получаемого диагностикума.

Цель достигается предложенной совокупностью существенных признаков взаимосвязанной группы изобретений.

Так, сконструирована химерная НК, кодирующая гибридный белок CFP10-ESAT6 из М.tuberculosis, индуцирующий реакцию гиперчувствительности замедленного типа в отношении М.tuberculosis, первичная структура которого описывается аминокислотной последовательностью SEQ ID №1 (приведена в конце данного описания).

Химерная НК может иметь следующую нуклеотидную последовательность (SEQ ID №2) (приведена в конце данного описания) или аналогичную последовательность с учетом вырожденности генетического кода.

Наиболее предпочтительным способом получения химерной НК является отдельная сборка генов Cfp 10: CFP_F1, CFP_F2, CFP_F3, CFP_F4, CFP_R1, CFP_R2, CFP_R3, CFP_R4; Esat6: ESAT_F1, ESAT_F2, ESAT_F3, ESAT_F4, ESAT_R1, ESAT_R2, ESAT_R3, ESAT_R4 в реакции ПЦР из синтетических олигонуклеотидов и клонированием их в векторе pGEM5Z по сайту EcoRV.

Предлагается также рекомбинантный вектор экспрессии pET_Cfp_Esat, содержащий химерную НК, кодирующую полипептид CFP 10- ESAT6 с аминокислотной последовательностью SEQ ID №1, оперативно встроенную в плазмиду pET22b(+) по сайтам рестрикции Nde I и Not I.

Патентуется также способ получения гибридного белка CFP10-ESAT6 для диагностики туберкулезной инфекции, включающей культивирование штамма E.Coli, трансформированного рекомбинантным вектором экспрессии, разрушение клеток штамма в буферном растворе ультразвуком и выделение белка из очищенных телец включения и из промывок телец включения методом лигандообменной хроматографии, отличием которого является то, что в качестве рекомбинантного вектора экспресии используют описанный выше плазмидный рекомбинантный вектор pET_Cfp_Esat, которым трансформируют клетки штамма BL21(DE3) E.Coli.

Патентуется также гибридный белок CFP10-ESAT6 из М.tuberculosis для диагностики туберкулезной инфекции, первичная структура которого описывается аминокислотной последовательностью SEQ ID №1 и предпочтительно полученного вышеуказанным способом.

Предлагается также дозированная лекарственная форма для диагностики туберкулезной инфекции, которая представляет собой инъекционный раствор для внутрикожного введения, содержащий гибридный белок CFP10-ESAT6 из M. tuberculosis, отличием которой является использование в качестве гибридного белка, описанного выше, в дозе 0,2 мкг в 0,1 мл физиологического раствора на одно введение.

Совокупность существенных признаков группы изобретений не известна из предшествующего уровня техники, была установлена опытным путем и неочевидным образом связана с достигаемым техническим результатом.

Краткое описание чертежей

Сущность изобретения поясняется с помощью чертежей:

фиг.1 содержит сравнительный анализ экспрессии гибридного белка CFP10-ESAT6 в векторных системах pTBD16 и рЕТ-22b. Электрофорез суммарных белков E.Coli, несущих плазмиду pTBD16 (№2) и рЕТ-22b (№3) осуществлен после 2-х часовой индукции ИПТГ; №1 - маркеры молекулярного веса.

фиг.2 содержит сравнительный анализ эффективности хелатной хроматографии белков CFP-ESAT с N- и С- концевой локализацией полигистидинов.

Электрофорез гибридного белка, полученного методом хелатной хроматографии биомассы клеток Е.Coli, несущих плазмиду:

№1 - рЕТ-22b (С-концевая локализация полигистидинов)

№2 - pTBD16 (N-концевая локализация полигистидинов)

Изобретение иллюстрируется следующими примерами.

Конструирование рекомбинантного вектора для экспрессии гибридного белка CFP10-ESAT6 RD1 комплекса М.tuberculosis. Выявленные замены в нуклеотидной структуре гибридного белка CFP10-ESAT6 по прототипу.

Эти замены показаны жирным шрифтом и курсивом, соответствующие участки правильной последовательности подчеркнуты, двойной рамкой - кодоны в месте сочленения генов (SEQ ID №3) (приведена в конце данного описания).

Гены Cfp10 и Esat6 по предлагаемому изобретению собирали в ПЦР из синтетических олигонуклеотидов. Полученные гены отдельно клонировали в вектор pGEM5Z по сайту EcoRV.

Диаскинтест® (аллерген туберкулезный рекомбинантный в стандартном разведении) — инновационный внутрикожный диагностический тест, который представляет собой рекомбинантный белок, содержащий два связанных между собой антигена — ESAT6 и CFP10, характерных для патогенных штаммов микобактерий туберкулеза (Mycobacterium tuberculosis) [1] . Данные антигены отсутствуют в вакцинном штамме Mycobacterium bovis BCG и у большинства нетуберкулезных микобактерий, поэтому Диаскинтест® вызывает иммунную реакцию только на микобактерии туберкулеза и не дает реакции, связанной с вакцинацией БЦЖ. Благодаря данным качествам, Диаскинтест® обладает практически 100% чувствительностью и специфичностью [2] , сводя к минимуму вероятность развития ложноположительных реакций, которые в 40–60% случаев наблюдаются при использовании традиционного внутрикожного туберкулинового теста (проба Манту) [3] . Техника постановки Диаскинтеста и учета результатов идентичны пробе Манту с туберкулином [4] .

В России использование Диаскинтеста утверждено в 2009 году Приказом МЗ РФ 855 от 29 октября 2009 г. 4

С 2017 года применение Диаскинтеста в скрининге туберкулеза у детей старше 7 лет и подростков регламентировано Приказом №124н от 21 марта 2017 года[5].

Диаскинтест очень чувствителен и информативен, он позволяет исключить ложноположительные реакции, которые могут быть при проведении пробы Манту у вакцинированных лиц (поствакцинальный иммунитет). По разным оценкам и в разных регионах России чувствительность Диаскинтеста оценивается около 96%.

КАК ДОСТИГАЕТСЯ ВЫСОКАЯ ТОЧНОСТЬ ДИАСКИНТЕСТА

Диаскинтест является диагностическим тестом, основанным на формировании реакции гиперчувствительности замедленного типа (ГЧЗТ), проявляющейся в виде уплотнения (папулы) в месте введения при наличии в организме патогенной для организма человека микобактерии туберкулеза с наличием в своей структуре двух антигенов ESAT6 и CFP 10. Этих антигенов нет у вакцинных микобактерий (БЦЖ) и нетуберкулезных бактерий.

Если человек болен туберкулезом (активная или латентная (скрытая) туберкулезная инфекция), то в месте введения Диаскинтеста формируется уплотнение (папула) – положительный тест. В данном случае необходимо тщательное обследование для исключения активного туберкулезного поражения. При отсутствии достоверных признаков болезни положительный тест свидетельствует о том, что у человека латентная (скрытая) туберкулезная инфекция и существует высокий риск перехода болезни в активную форму в ближайшее время. Поэтому необходимо проведение специального профилактического лечения противотуберкулезными препаратами.

Если человек здоров, при этом имеет иммунитет от туберкулеза после вакцинации БЦЖ (поствакцинальный иммунитет), то Диаскинтест будет отрицательный.

Для оценки эффективности любой тестовой пробы учитывают две основные характеристики: чувствительность и специфичность. Чем выше эти показатели, тем более качественно тест выявляет инфекцию.

Чувствительность теста – это наличие положительных реакций у лиц с достоверно подтвержденным диагнозом.

Чувствительность Диаскинтеста 96,5% [6] .

Специфичность же теста – это отрицательная реакция на пробу у абсолютно здоровых людей.

Специфичность Диаскинтеста 99,0% 6 .

Все это позволило Диаскинтесту стать надежным и высокоинформативным методом диагностики как латентного, так и активного туберкулеза. Высокая точность диагностики позволяет избежать ненужных и зачастую вредных лечебных курсов и исследований.

ПРЕИМУЩЕСТВА ДИАСКИНТЕСТА ПЕРЕД ДРУГИМИ ТЕСТАМИ

• Высокая специфичность и высокая чувствительность
• Отсутствие ложноположительных результатов в случае вакцинации БЦЖ
• Не требуется специального лабораторного оборудования
• Малотравматичен для детей любого возраста
• Эффективен в любом возрасте: дети, подростки, взрослые

КОГДА ИСПОЛЬЗУЕТСЯ ДИАСКИНТЕСТ

Диаскинтест® предназначен для постановки внутрикожной пробы во всех возрастных группах с целью:

• диагностики туберкулеза в сочетании с другими методами;
• выявления лиц с высоким риском развития активного туберкулеза (латентная туберкулезная инфекция)*;
• дифференциальной диагностики поствакцинальной (БЦЖ) и инфекционной аллергии (гиперчувствительности замедленного типа);
• оценки эффективности противотуберкулезного лечения в сочетании с другими методами.

Внимание! Вакцинация БЦЖ не влияет на результаты Диаскинтеста.

КАК ПОДГОТОВИТЬСЯ К ПОСТАНОВКЕ ДИАСКИНТЕСТА

Проба проводится по назначению врача детям, подросткам и взрослым специально обученной медицинской сестрой, имеющей допуск к проведению внутрикожных тестов.

Лицам, у которых в анамнезе имелись проявления неспецифической аллергии, пробу рекомендуется проводить на фоне приема десенсибилизирующих препаратов в течение 7 дней (5 дней до постановки пробы и 2 дня после нее).

УЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ ДИАСКИНТЕСТА

Внимание! Лица с сомнительной и положительной реакцией на Диаскинтест® подлежат комплекс­ному обследованию на туберкулез.

НОРМАТИВНЫЕ ДОКУМЕНТЫ, РЕГЛАМЕНТИРУЮЩАЯ ПРИМЕНЕНИЕ ДИАСКИНТЕСТА В РЕСПУБЛИКЕ БЕЛАРУСЬ:

Для раннего выявления туберкулезной инфекции Диаскинтест следует проводить:

• Ежегодно детям в возрасте от 8 до 17 лет из групп риска
• Детям с подозрением на туберкулез по клинико-лабораторным и/или рентгенологическим признакам
• Детям, направленным к фтизиатру по результатам пробы Манту для проведения дополнительной медицинской диагностики

[1] Киселев В.И., Барановский П.М., Пупышев С.А. и др. Новый кожный тест для диагностики туберкулеза на основе рекомбинантного белка ESAT-CFP. Мол. мед. -2008. — № 4. — С. 28–34

[3] Лебедева Л.В., Грачева С. Г. Чувствительность к туберкулину и инфицированность микобактериями туберкулеза у детей. Пробл. туб. и болезней легких. — 2007. — № 1.- С. 43–49

[5] Приказ Министерства здравоохранения РФ от 21 марта 2017 г. № 124н “Об утверждении порядка и сроков проведения профилактических медицинских осмотров граждан в целях выявления туберкулеза”

[6] Слогоцкая Л.В., Сенчихина О.Ю., Никитина Г.В., Богородская Е.М. Эффективность кожного теста с аллергеном туберкулезным рекомбинантным при выявлении туберкулеза у детей и подростков Москвы в 2013 г. // Педиатрическая фармакология, 2015. – N 1. – С.99-103