Аллергены для диагностики туберкулеза

480 руб. | 150 грн. | 7,5 долл. ', MOUSEOFF, FGCOLOR, '#FFFFCC',BGCOLOR, '#393939');" onMouseOut="return nd();"> Диссертация, - 480 руб., доставка 1-3 часа, с 10-19 (Московское время), кроме воскресенья

Автореферат - бесплатно , доставка 10 минут , круглосуточно, без выходных и праздников

Козлов Владимир Егорович. Аллергены для диагностики туберкулеза: совершенствование производства и стандартизация : диссертация . доктора биологических наук : 03.00.23, 16.00.03 / Козлов Владимир Егорович; [Место защиты: Центр качества и стандартизации лекарственных средств для животных и кормов].- Москва, 2007.- 287 с.: ил. РГБ ОД, 71 07-3/284

Введение к работе

Актуальность проблемы Среди зоонозпых заболевании туберкулез по своему социальному и экономическому значению занимает особое место, нанося значительный ущерб сельскому хозяйству в связи с большой чувстви-тетыюстыо к нему животных, особенно, крупного рогатого скота (КРС), свиней и кур (Краснов В А , 1998, Кресс В М , 2000, Непоклонов Е А , 2003, Смо-лянинов Ю И , 2005)

Эффективность борьбы с туберкулезом в значительной мере определяется степенью совершенства методов его диагностики Основным прижизненным методом массовой диагностики туберкулеза в РФ является туберкулиновая проба (Наиманов АХ , 2002) Документы МЭБ и ЕС в качестве основного метода, используемого для выявления зараженных животных, предусматривают тест на наличие гиперчувствителыгасти замедленного типа (ГЗТ) В пашей стране для этой цели изготавливаются туберкулины (ГШД) для млекопитающих и для птиц, а также комплексный аллерген из атипичных микобактерий (КАМ)

Широкий импорт — экспорт животных и продукции животноводства требует унификации методов и средств диагностики туберкулеза для получения равноценных результатов исследования в различных регионах мира

Интенсивность проявления аллергической реакции зависит от многих факторов, однако активность и специфичность аллергена должны быть стандартизованными величинами

Микобактериальные аллергены представляют собой многокомпонентную систему, основным действующим и наиболее специфичным веществом которой являются белки (Seibert F , 1934) Уровень содержания балластных веществ, снижающих уровень специфичности препарата, обусловлен технологией его изготовления (Безпш В М , 1999) Совершенствование технологии изготовления диагностикумов туберкулеза может быть эффективным только в комплексе с использованием международных стандартов и применением национальных нормативных документов РФ, гармонизированных с рекомендациями и требованиями МЭБ и ВОЗ

Цель работы Целью исследований являлась разработка комплекса методов мембранного фракционирования туберкулина (ППД) для млекопитающих, позволяющих обеспечить промышленный выпуск аллергена, характеризующегося высокой диагностической эффективностью, стандартизация туберкулииов в соответствии с международными требованиями, научное обоснование принципов стандартизации аллергенов, применяемых при дифференциальной диагностике туберкулеза

Основные задачи исследований

Разработать комплекс методов мембранного фракционирования для промышленного производства туберкулина (ППД) для млекопитающих, обеспечивающий выпуск аллергена с более высокими диагностическими характеристиками

Изучить иммунобиологические свойства белковых фракции различной молекулярной массы и определить фракцию туберкулина, обладающую наибольшей диагностической эффективностью

Провести исследования, позволяющие гармонизировать требования к качеству туберкулииов (ППД) с рекомендациями нормативных документов МЭБ и ВОЗ

Определить оптимальный вариант сенсибилизирующего агента для определения активности туберкулина (ППД) для млекопитающих при стандартизации препарата

Изучить возможность применения штамма М bovrs AN5 для изготовления туберкулина (ППД) для млекопитающих

Определить активность отечественного туберкулина (ППД) для млекопитающих относительно Первого международного стандарта туберкулина (PPD) bovine, разработать эталонный образец (национальный стандарт) туберкулина (ППД) для млекопитающих

Определить активность отечественного туберкулина (ППД) для птиц относительно Первого международного стандарта туберкулина (PPD) avium, разработать эталонный образец (национальный стандарт) туберкулина (ППД) для птиц

Научно обосновать методику стандартизации аллергенов, применяемых при дифференциальной аллергической диагностике туберкулеза (на примере КАМ)

Провести сравнительную оценку активности и специфичности туберкулииов (ППД) для млекопитающих, производимых в разных странах

Научная новизна. Впервые разработан технологический комплекс методов промышленного изготовления туберкулина (ППД) для млекопитающих, соответствующего международным требованиям

Впервые установлено, что туберкулин, изготовленный с применением методов мембранного фракционирования и имеющий молекулярную массу от 3 до 300 кДа, обладает наибольшей специфической активностью С учетом этого подобраны технологические параметры, позволяющие снизить содержание балластных антигенов и реактогенность туберкулина с одновременным повышением выхода конечного продукта

Впервые с использованием методов, предусмотренных международной нормативной документацией, разработан отечественный эталонный образец туберкулина (ППД) для млекопитающих, стандартизованный относительно Первого международного стандарта туберкулина (PPD) bovine

Впервые с использованием методов, предусмотренных международной нормативной документацией, разработан отечественный эталонный образец туберкулина (ППД) для птиц, стандартизованный относительно Первого международного стандарта туберкулина (PPD) avium

Впервые разработаны принципы стандартизации микобактериальных аллергенов для дифференциальной диагностики туберкулеза, позволяющие проводить оценку препарата в соответствии с требованиями международных нормативных документов

Практическая значимость. Разработана промышленная технология получения туберкулина (ППД) для млекопитающих с применением методов мембранного фракционирования биомолекул

оптимизирован процесс УФ-концснтрироваиия очищенного культу-ралыгаго фильтрата,

внедрен метод диафильтрации концентрата белков туберкулина для очистки от низкомолекулярных соединений,

предложены параметры мембранного фракционирования туберкулина для эффективного удаления балластных антигенов,

- снижено количество выбросов экологически вредных реагентов
Данная технология позволяет стандартизовать туберкулин (ППД) для

млекопитающих по молекулярной м 3 ) соответствует дозе, рекомендуемой МЭБ для проведения т^беркулинизации КРС как в благополучных, так и в неблагополучных по туберкулезу хозяйствах (2000 ME PFD bovine в 0,2 см 3 ), при равнозначной эффективности способа введения — шприцем или инъ-ектором

На защиту выносятся следующие положения -

Технологическим комплекс методов для промышленного изготовления туберкулина (ППД) для млекопитающих, который позволяет выпускать активный и специфичный диагностикум, соответствующий международным требованиям

Эталонные образцы (национальные стандарты) туберкулинов (ППД) для млекопитающих и для птиц, стандартизированные с применением методов, гармонизированных с требованиями международных нормативных документов

Принципы стандартизации аллергенов, применяемых при дифференциальной диагностике туберкулеза

Апробация работы Основные положения и выводы диссертационной работы были доложены и обсуждены на

Научно-производственной конференции, посвященной 100-летию Курской биофабрики и агробиологической промышленности России — г Курск, 27-30 августа 1996 г

Международной научной конференции, посвященной 70-летию образования зооинженсрного факультета Казанской государственной академии ветеринарной медицины им Н Э Баумана — г Казань, 30-31 мая 2000 г

Всероссийской научной конференции, посвященной 70-летию Всероссийского государственного научно-исследовательского института контроля, стандартизации и сертификации ветеринарных препаратов — Центра качества

- Москва, 14-15 февраля 2001 г

Заседании рабочей группы по туберкулезу при Департаменте ветеринарии Минссльхоза России — Москва, 24 апреля 2003 г

Международной юбилейной научно-практической конференции, посвященной 110-летию Курской биофабрики и агробиологической промыш-ченности России — г Курск, 21-22 сентября 2006 г

Публикации результатов работы. Основные положения и выводы отражены в 40 научных статьях и 4 патентах на изобретение

Объем и структура диссертации Работа изложена на 287 страницах компьютерного текста Диссертационная работа включает введение, обзор литературы, материалы и методы исследовании, результаты собственных исследовании, обсуждение результатов, заключение, выводы, приложения Список использованной литературы включает 418 источников, из них 203 отечественных и 215 иностранных Работа иллюстрирована 35 таблицами и 20 рисунками

Полный текст:

Заведующая научно-клиническим отделом, д-р мед. наук,

107014, Москва, ул. Стромынка, д. 10

Директор, д-р мед. наук,

107014, Москва, ул. Стромынка, д. 10

Главный эксперт управления экспертизы противобактериальных МИБП Центра экспертизы и контроля МИБП, д-р мед. наук, профессор,

127051, Москва, Петровский бульвар, д. 8, стр. 2.

Заместитель директора по научной и организационно-методической работе, д-р мед. наук, профессор,

107014, Москва, ул. Стромынка, д. 10

1. Аксенова ВА. Туберкулез у детей в России. Туберкулез и социально-значимые заболевания 2014; (5): 6-14.

2. Мейснер АФ, Овсянкина ЕС, Стахеева ЛБ. Туберкулиндиагностика у детей. Скрытая (латентная) туберкулезная инфекция? Проблемы туберкулеза и болезней легких 2008; 85(6): 29-33.

3. Мейснер АФ, Овсянкина ЕС, Стахеева ЛБ. Выявление туберкулеза у подростков в Москве. Проблемы туберкулеза и болезней легких 2009; 86(1): 40-4.

4. Sepulveda RL, Ferrer X, Latrach C, Sorensen RU. The influence of Calmette-Guerin bacillus immunization on the booster effect of tuberculin testing in healthy young adults. Am Rev Respir Dis. 1990; 142(1): 24-8.

5. Menzies R. Tuberculin skin testing. In: Reichman LB, Hershfield ES, ed. Tuberculosis: a comprehensive international approach. New York: Marcel Dekker. Inc., 2000. P. 279-322.

6. Horowitz HW, Luciano BB, Kadel JR, Wormser GP. Tuberculin skin test conversion in hospital employees vaccinated with bacille Calmette-Guerin: recent Mycobacterium tuberculosis infection or booster effect? Am J Infect Control. 1995; 23(3): 181-7.

7. Аксенова ВА, Леви ДТ, Закирова НР. Современные проблемы вакцинопрофилактики туберкулеза у детей. Российский вестник перинаталогии и педиатрии 1999; 44(1): 3-6.

8. Richards NM, Nelson KE, Batt MD, Hackbarth D, Heidenreich JG. Tuberculin test conversion during repeated skin testing, associated with sensitivity to nontuberculous mycobacteria. Am Rev Respir Dis. 1979; 120(1). 59-65.

9. Богородская ЕМ, Белиловский ЕМ, Пучков КГ, Сенчихина ОЮ, Шамуратова ЛФ. Заболеваемость туберкулезом детей раннего возраста в городе Москве и факторы, влияющие на нее. Туберкулез и социально-значимые заболевания 2014; (5): 15-25.

10. Слогоцкая ЛВ, Сенчихина ОЮ, Никитина ГВ, Богородская ЕМ. Эффективность кожного теста с аллергеном туберкулезным рекомбинантным при выявлении туберкулеза у детей и подростков Москвы в 2013 г. Педиатрическая фармакология 2015; (1): 99-103.

11. Волчкова ИЛ, Казимирова НЕ, Панкратова ЛЭ. Использование пробы с диаскинтестом для отбора на превентивную терапию детей и подростков с латентной туберкулезной инфекцией. Туберкулез и болезни легких 2015; (5): 64-5.

12. Сапожникова НВ, Истомина ЕВ, Старшинова АА, Пантелеев АМ, Журавлев ВЮ, Чернохаева ИВ и др. Выявление латентной туберкулезной инфекции среди групп риска по развитию туберкулеза. Туберкулез и болезни легких 2015; (7): 123.

13. Старшинова АА, Корнева НВ, Ананьев СМ, Довгалюк ИФ, Ильина НИ, Плахтиенко МВ и др. Сравнение диагностической значимости иммунологических тестов (T-SPOT.TB и пробы Манту с 2 ТЕ) в диагностике латентной туберкулезной инфекции у детей с отягощенным аллергологическим анамнезом. Туберкулез и болезни легких 2015; (7): 133-4.

14. Comstock GW, Edwards LB, Philip RN, Winn WA. A comparison in the United States of America of two tuberculins, PPD-S and RT23. Bull World Health Organ. 1964; 31: 161-70.

15. Diel R, Loddenkemper R, Meywald-Walter K, Gottschalk R, Nienhaus A. Comparative performance of tuberculin skin test, QuantiFERON-TB-Gold In Tube assay, and T-Spot.TB test in contact investigations for tuberculosis. Chest 2009; 135(4): 1010-8.

16. Menzies D, Pai M, Comstock G. Meta-analysis: new tests for the diagnosis of latent tuberculosis infection: areas of uncertainty and recommendations for research. Ann Intern Med. 2007; 146(5): 340-54.

17. Поддубная ЛВ, Шилова ЕП, Степченко ИМ, Кононенко ВГ. Эпидемиологические факторы и иммунологические пробы в формировании групп риска по заболеванию туберкулезом. Туберкулез и болезни легких 2015; (5): 153-4.

18. Boussiotis VA, Tsai EY, Yunis EJ, Thim S, Delgado JC, Dascher CC, et al. IL-10-producing T cells suppress immune responses in anergic tuberculosis patients. J Clin Invest. 2000; 105(9):1317-25.

19. Thye T, Browne EN, Chinbuah MA, Gyapong J, Osei I, Owusu-Dabo E, et al. IL10 haplotype associated with tuberculin skin test response but not with pulmonary TB. PLoS One 2009; 4(5): e5420.

20. Nyboe J. The immediate effects of BCG revaccination. Bull World Health Organ. 1969; 41(1): 63-73.

21. Ferreira AA, Ferreira Mde F, Macedo EA, Cunha I, Santos SL, Reis AR, et al. BCG revaccination in school children: evolution of the lesion at the vaccination site between 48 hours and 10 weeks. J Pediatr (Rio J). 2002; 78(4): 289-94.

22. Styblo K. The relationship between the risk of tuberculosis infection and the risk of developing infectious tuberculosis. Bull Int Union Tuberc Lung Dis. 1985; 60: 117-9.

23. Watkins RE, Brennan R, Plant AJ. Tuberculin reactivity and the risk of tuberculosis: a review. Int J Tuberc Lung Dis. 2000; 4(10): 895-903.

24. Berkel GM, Cobelens FG, de Vries G, Draayer-Jansen IW, Borgdorff MW. Tuberculin skin test: estimation of positive and negative predictive values from routine data. Int J Tuberc Lung Dis. 2005; 9(3): 310-6.

25. Ewer K, Deeks J, Alvarez L, Bryant G, Waller S, Andersen P, et al. Comparison of T-cell-based assay with tuberculin skin test for diagnosis of Mycobacterium tuberculosis infection in a school tuberculosis outbreak. Lancet 2003; 361(9364): 1168-73.

26. Pai M, Zwerling A, Menzies D. Systematic review: T-cell-based assays for the diagnosis of latent tuberculosis infection: an update. Ann Intern Med. 2008; 149(3): 177-84.

27. Doherty TM, Demissie A, Olobo J, Wolday D, Britton S, Eguale T, et al. Immune responses to the Mycobacterium tuberculosis-specific antigen ESAT-6 signal subclinical infection among contacts of tuberculosis patients. J Clin Microbiol. 2002; 40(2): 704-6.

28. Bakir M, Millington KA, Soysal A, Deeks JJ, Efee S, Aslan Y, et al. Prognostic value of a T-cell-based, interferon-gamma biomarker in children with tuberculosis contact. Ann Intern Med. 2008; 149(11): 777-87.

29. Lienhardt C, Fielding K, Hane AA, Niang A, Ndao CT, Karam F, et al. Evaluation of the prognostic value of IFN-γ release assay and tuberculin skin test in household contacts of infectious tuberculosis cases in Senegal. PLoS One 2010; 5(5): e10508.

30. Brock I, Weldingh K, Lillebaek T, Follmann F, Andersen P. Comparison of tuberculin skin test and new specific blood test in tuberculosis contacts. Am J Respir Crit Care Med. 2004; 170(1): 65-9.

31. Arend SM, Thijsen SF, Leyten EM, Bouwman JJ, Franken WP, Koster BF, et al. Comparison of two interferon-gamma assays and tuberculin skin test for tracing tuberculosis contacts. Am J Respir Crit Care Med. 2007; 175(6): 618-27.

32. Mack U, Migliori GB, Sester M, Rieder HL, Ehlers S, Goletti D, et al. LTBI: latent tuberculosis infection or lasting immune responses to M. tuberculosis? A TBNET consensus statement. Eur Respir J. 2009; 33(5): 956-73.

33. Diel R, Loddenkemper R, Niemann S, Meywald-Walter, K, Nienhaus A. Negative and positive predictive value of a whole-blood interferon-γ release assay for developing active tuberculosis: an update. Am J Respir Crit Care Med. 2011; 183(1): 88-95.

34. Lamberti M, Uccello R, Monaco MG, Muoio M, Feola D, Sannolo N, et al. Tuberculin skin test and Quantiferon test agreement and influencing factors in tuberculosis screening of healthcare workers: a systematic review and meta-analysis. J Occup Med Toxicol. 2015; 10: 2.

35. Rangaka MX, Wilkinson KA, Glynn JR, Ling D, Menzies D, Mwansa-Kambafwile J, et al. Predictive value of interferon-γ release assays for incident active tuberculosis: a systematic review and meta-analysis. Lancet Infect Dis. 2012; 12(1): 45-55.

36. Metcalfe JZ, Everett CK, Steingart KR, Cattamanchi A, Huang L, Hopewell PC, Pai M. Interferon-γ release assays for active pulmonary tuberculosis diagnosis in adults in low- and middle-income countries: systematic review and meta-analysis. J Infect Dis. 2011; 204 (Suppl. 4): 1120-9.

37. Kik SV, Franken WP, Mensen M, Cobelens FG, Kamphorst M, Arend SM, et al. Predictive value for progression to tuberculosis by IGRA and TST in immigrant contacts. Eur Respir J. 2010; 35(6): 1346-53.

38. Diel R, Goletti D, Ferrara G, Bothamley G, Cirillo D, Kampmann B, et al. Interferon-γ release assays for the diagnosis of latent Mycobacterium tuberculosis infection: a systematic review and meta-analysis. Eur Respir J. 2011; 37(1): 88-99.

39. Leung CC, Yam WC, Yew WW, Ho PL, Tam CM, Law WS, et al. T-Spot. TB outperforms tuberculin skin test in predicting tuberculosis disease. Am J Respir Crit Care Med. 2010; 182(6): 834-40.

40. Salinas C, Pascual Erquicia S, Diez R, Aguirre U, Egurrola M, Altube L, Capelastegui A. Three-month course of rifampicin and isoniazid for the treatment of latent tuberculous infection. Med Clin (Barc). 2010; 135(7): 293-9.

41. Lalvani A, Pareek M. A 100 year update on diagnosis of tuberculosis infection. Br Med Bull. 2010; 93: 69-84.

42. Yoshiyama T, Harada N, Higuchi K, Sekiya Y, Uchimura K. Use of the QuantiFERON-TB Gold test for screening tuberculosis contacts and predicting active disease. Int J Tuberc Lung Dis. 2010; 14(7): 819-27.

43. Борисов СЕ, Лукина ГВ, Слогоцкая ЛВ, Кочетков ЯА, Гунтупова ЛД, Куликовская НВ. Скрининг и мониторинг туберкулезной инфекции у ревматологических больных, получающих генно-инженерные биологические препараты. Туберкулез и болезни легких 2011; 88(6): 42-50.

44. Campainha S, Gomes T, Carvalho A, Duarte R. Negative predictive value of TST and IGRA in anti-TNF treated patients. Eur Respir J. 2012; 40(3): 790-1.

45. Pai M, Kalantri S, Menzies D. Discordance between tuberculin skin test and interferon-gamma assays. Int J Tuberc Lung Dis. 2006; 10(8): 942-3.

46. Vordermeier HM, Chambers MA, Cockle PJ, Whelan AO, Simmons J, Hewinson RG. Correlation of ESAT-6-specific gamma interferon production with pathology in cattle following Mycobacterium bovis BCG vaccination against experimental bovine tuberculosis. Infect Immun. 2002; 70(6): 3026-32.

47. Weldingh K, Andersen P. ESAT-6 / CFP10 skin test predicts disease in M. tuberculosis-infected guinea pigs. PLoS One 2008; 3(4): e1978.

48. Киселев ВИ, Барановский ПМ, Пупышев СА, Рудых ИВ, Перельман МИ, Пальцев МА. Новый кожный тест для диагностики туберкулеза на основе рекомбинантного белка ESAT-CFP. Молекулярная медицина 2008; (4): 28-35.

51. Слогоцкая ЛВ. Эффективность кожного теста с аллергеном туберкулезным, содержащим рекомбинантный белок CFP10-ESAT6, в диагностике, выявлении и определении активности туберкулезной инфекции. Автореф. дис.. д-ра мед. наук. М.; 2011.

52. Слогоцкая ЛИ, Литвинов ВИ, Сельцовский ПП, Шустер АМ, Мартьянов ВА, Кудлай ДА. Применение кожной пробы с аллергеном туберкулезным рекомбинантным (ДИАСКИНТЕСТ®) для диагностики туберкулезной инфекции у больных с ВИЧ-инфекцией. Пульмонология 2011; (1): 60-4.

53. Слогоцкая ЛВ, Сенчихина ОЮ, Богородская ЕМ. Чувствительность теста с аллергеном туберкулезным рекомбинантным, содержащим белок CFP10-ESAT6, у впервые выявленных больных туберкулезом детей и подростков в городе Москве. Туберкулез и социально-значимые заболевания. 2013; (1): 37-44.

54. Долженко ЕН. Использование аллергена туберкулезного рекомбинантного (Диаскинтеста) в выявлении активного туберкулеза у детей. Туберкулез и болезни легких. 2013; (6): 28-9.

55. Долженко ЕН, Шейкис ЕГ, Серегина ИВ. Диагностические возможности аллергена туберкулезного рекомбинантного в скрининг-диагностике туберкулезной инфекции у детей подросткового возраста в Рязанской области. Туберкулез и болезни легких 2015; (6): 56-7.

56. Корнева НВ, Старшинова АА, Овчинникова ЮЭ, Довгалюк ИФ. Сравнение результатов пробы Манту с 2 ТЕ и Диаскинтеста при различных проявлениях туберкулезной инфекции. Туберкулез и болезни легких 2013; (6): 49-50.

57. Слогоцкая ЛВ, Овсянкина ЕС, Кочетков ЯА, Стахеева ЛБ. Инфицированность туберкулезом детей и подростков - взгляд через столетие. Туберкулез и болезни легких 2011; (3): 21-8.

58. Аксенова ВА, Леви ДТ. Туберкулез у детей и подростков. Биопрепараты. Профилактика, диагностика, лечение. 2012; (1): 21-5.

59. Моисеева НН, Одинец ВС. Опыт применения кожной пробы с диаскинтестом при массовом обследовании на туберкулез. Туберкулез и болезни легких 2015; (7): 92-3.

60. Бармина НА, Барышникова ЛА, Шурыгин АА, Рейхардт ВВ. Скрининговое обследование детей и подростков III, IV и V групп здоровья с применением нового диагностического теста. Туберкулез и болезни легких 2015; (5): 40-1.

61. Сотнева ИБ, Павлунин АВ. Использование пробы с диаскинтестом для массового обследования детей и подростков Нижегородской области в 2013 г. Туберкулез и болезни легких 2015; (5): 173.

63. Туберкулез в Российской Федерации, 2012/2013/2014 гг. Аналитический обзор статистических показателей, используемых в Российской Федерации и в мире. М.; 2015.

64. Овсянкина ЕС, Слогоцкая ЛВ, Губкина МФ. Рекомендации по применению кожной пробы с препаратом аллерген туберкулезный рекомбинантный 0,2 мкг в 0,1 мл раствор для внутрикожного введения (ДИАСКИНТЕСТ®) для идентификации туберкулезной инфекции у детей и диспансерного наблюдения в противотуберкулезных учреждениях. Методические рекомендации. М.: МНПЦБТ, 2010.

65. Слогоцкая ЛВ, Туктарова ЛМ, Волошина ЕП, Сенчихина ОЮ, Кяримова СИ. Работа в очагах туберкулезной инфекции в студенческих коллективах. Гл. 8. В кн.: Богородская ЕМ, Сельцовский ПП, ред. Очаги туберкулезной инфекции в мегаполисе: выявление, идентификация, ликвидация. М.: МНПЦБТ, 2015. С. 144-55.

66. Слогоцкая ЛВ, Иванова ДА, Кочетков ЯА, Куликовская НВ, Ванеева ТВ, Филиппов АВ. Сравнительные результаты кожного теста с препаратом, содержащим рекомбинантный белок CFP-10-ESAT-6 и лабораторного теста QuantiFERON-GIT. Туберкулез и болезни легких 2012 (10): 27-33.

67. Лозовская МЭ, Белушков ВБ, Новик ГА, Васильева ЕБ, Клочкова ЛВ, Дементьева ЕА. Диагностика туберкулеза у детей с аллергическими реакциями и заболеваниями на основе иммуноаллергических тестов. Туберкулез и болезни легких 2015; (7): 84-5.

68. van Zyl-Smit RN, Pai M, Peprah K, Meldau R, Kieck J, Juritz J, et al. Within-subject variability and boosting of T-cell interferon-gamma responses after tuberculin skin testing. Am J Respir Crit Care Med. 2009; 180(1): 49-58.

70. Колпакова ЛВ, Аюшева ЛБ. Распространение латентной туберкулезной инфекции среди сотрудников медицинских организаций. Тезисы докладов научной программы. Московская медицина 2016; (спец. выпуск 1): 131-2.

71. Богородская ЕМ, Борисов СЕ, Мохирева ЛВ, Ильченко АД, Синицын МВ. Профилактика туберкулеза в группах высокого риска как основа для снижения заболеваемости в г. Москве в относительно благоприятной эпидемиологической ситуации. Тезисы докладов научной программы. Московская медицина 2016; (спец. выпуск 1): 86.

72. Синицын МВ, Аюшеева ЛБ, Колпакова ЛВ. Совершенствование химиопрофилактики туберкулеза у больных ВИЧ-инфекцией. Медицинский вестник Юга России 2016; (4): 45-9.

75. Hoff ST, Peter JG, Theron G, Pascoe M, Tingskov PN, Aggerbeck H, et al. Sensitivity of C-Tb: a novel RD-1-specific skin test for the diagnosis of tuberculosis infection. Eur Respir J. 2016; 47(3): 919-28.

76. Aggerbeck H, Giemza R, Joshi P, Tingskov PN, Hoff ST, Boyle J, et al. Randomised clinical trial investigating the specificity of a novel skin test (C-Tb) for diagnosis of M. tuberculosis infection. PLoS One 2013; 8(5): e64215.

77. Flores-Villalva S, Suбrez-Gьemes F, Espitia C, Whelan AO, Vordermeier M, Gutiйrrez-Pabello JA. Specificity of the tuberculin skin test is modified by use of a protein cocktail containing ESAT-6 and CFP-10 in cattle naturally infected with Mycobacterium bovis. Clin Vaccine Immunol. 2012; 19(5): 797-803.

Слогоцкая Л.В., Богородская Е.М., Леви Д.Т., Сельцовский П.П. 10 лет кожной пробе с аллергеном туберкулезным рекомбинантным (Диаскинтест ® ) и 110 лет туберкулиновой пробе Манту - сравнение эффективности. БИОпрепараты. Профилактика, диагностика, лечение. 2017;17(2):67-77.

Slogotskaya L.V., Bogorodsakaya E.M., Levi D.T., Seltsovsky P.P. Comparison of efficacy of Diaskintest ® , a skin test with a recombinant tuberculosis allergen, used for 10 years and Mantoux tuberculin sensitivity test used for 110 years. BIOpreparations. Prevention, Diagnosis, Treatment. 2017;17(2):67-77. (In Russ.)

Контент доступен под лицензией Creative Commons Attribution 4.0 License.

1. Что такое проба Манту?

Это специфический диагностический тест (не путать с прививкой!), применяемый при массовом обследовании населения на туберкулез. Для его проведения используют туберкулин. Туберкулин не содержит живых или убитых микобактерий туберкулеза, а только продукты их жизнедеятельности, элементы микробной клетки и часть среды, на которой росли микобактерии туберкулеза.

Проба Манту позволяет зафиксировать встречу с инфекцией и провести мероприятия, предупреждающие заболевание туберкулёзом, либо выявить заболевание на ранней стадии.

На введение туберкулина возникает ответная аллергическая реакция (положительная туберкулиновая проба):

- у привитых против туберкулеза (поствакцинальная аллергия)

- у инфицированных микобактериями туберкулеза (инфекционная аллергия).

Помочь правильно оценить ситуацию может педиатр. В более сложных случаях необходима консультация фтизиатра.

2. Кому проводится проба Манту?

Пробу Манту проводят один раз в год всем детям с 12 месячного возраста до 7 лет включительно, при отсутствии вакцинации БЦЖ (БЦЖ-М) – с 6-месячного возраста 2 раза в год до проведения вакцинации против туберкулеза.

3. Когда можно проводить пробу Манту?

- Сразу после снятия карантина по детским инфекциям

- Через 2-4 недели после перенесенного острого или обострения хронического заболевания

- Через 4 недели после проведения профилактических прививок

Для проведения туберкулиновой пробы с диагностической целью при подозрении на заболевание туберкулезом противопоказаний нет!

4. Можно ли мочить пробу Манту?

Мочить можно, нельзя тереть мочалкой, заклеивать, чесать.

5. Когда оценивается результат?

Результат пробы оценивается через 72 часа врачом или специально обученной медицинской сестрой: прозрачной линейкой фабричного изготовления измеряют поперечный размер инфильтрата (папулы) в миллиметрах.

6. Каким может быть результат?

- Отрицательный - полное отсутствии инфильтрата или гиперемии, наличие уколочной реакции (0-1 мм).

-Сомнительный - инфильтрат размером 2-4 мм или только гиперемия любого размера.

-Положительный - инфильтрат размером 5 мм и более.

-Гиперергический - инфильтрат 17 мм и более, а также везикуло-некротические реакции независимо от размера инфильтрата с лимфангоитом или без него.

7. Когда необходимо обратиться к фтизиатру?

- с впервые выявленной положительной реакцией, не связанной с предыдущей иммунизацией против туберкулеза;

- с длительно сохраняющейся (4 года) реакцией (с инфильтратом 12 мм и более);

- с увеличением инфильтрата на 6 мм и более;

- увеличение менее чем на 6 мм, но с образованием инфильтрата размером 12 мм и более;

- с гиперреакцией на туберкулин - инфильтрат 17 мм и более.

8. Что такое Диаскинтест?

Это аллерген туберкулезный рекомбинантный в стандартном разведении. Представляет собой рекомбинантный белок, который содержит 2 антигена, присутствующие в вирулентных штаммах микобактерий туберкулеза и отсутствующие в вакцинном штамме БЦЖ.

Диаскинтест ежегодно проводится детям с 8-ми до 17 лет, взрослым по показаниям.

9. Для чего используется Диаскинтест?

- диагностика туберкулеза и оценки активности процесса;

- дифференциальная диагностика туберкулеза;

- дифференциальная диагностика поствакцинальной и инфекционной аллергии

- наблюдение за эффективностью лечения в комплексе с другими методами.

10. Когда оценивается результат?

Как и при пробе Манту, результат Диаскинтеста оценивается через 72 часа врачом или специально обученной медицинской сестрой: прозрачной линейкой фабричного изготовления измеряют поперечный размер инфильтрата (папулы) в миллиметрах.

11. Как оценивается результат Диаскинтеста?

- отрицательный - при полном отсутствии инфильтрата и гиперемии или при наличии "уколочной реакции";

- сомнительный - при наличии гиперемии без инфильтрата;

- положительный - при наличии инфильтрата (папулы) любого размера.

12. В каком случае необходимо обратиться к фтизиатру?

Лица с сомнительной и положительной реакцией на препарат подлежат обследованию на туберкулез.

13. Чем диаскинтест отличается от пробы Манту?

В организме ребёнка возможно присутствие трёх видов микобактерии туберкулёза:

– это вакцинный штамм БЦЖ, который ребёнок получает при прививке.

– это неактивные патогенные микобактерии (L-формы, они попали в организм и иммунитет с ними справился).

– это патогенные микобактерии, которые активные, размножаются и готовы вызвать или уже вызвали заболевание туберкулёзом.

При присутствии любого из этих возбудителей проба Манту будет положительной, так как она показывает его наличие в организме. А вот проба с Диаскинтестом будет положительной только у тех, у которых есть активные, размножающиеся патогенные микобактерии туберкулёза.

14. Что такое T-SPOT.TB?

Это альтернативный метод обследования на туберкулезную инфекцию относится диагностические тесты in vitro, основанные на высвобождении Т-лимфоцитами гамма-интерферона.

Диагностический тест T-SPOT.TB является непрямым методом исследования инфекции, вызванной M.tuberculоsis (включая заболевание), его использование рекомендуется в качестве дополнения к стандартным диагностическим исследованиям.

15. Как проводится T-SPOT.TB?

T-SPOT.TB проводится в лабораторных условиях, от обследуемого требуется только сдать кровь из вены.

16. В каких случаях проводят T-SPOT.TВ?

Тест T-SPOT.TB используется при проведении скрининга среди пациентов, относящихся к группам риска по развитию туберкулеза (например ВИЧ -инфицированных). Кроме того, T-SPOT.TB может использоваться в качестве дополнительного диагностического метода при обследовании пациентов с подозрением на туберкулез, при отрицательных результатах других диагностических тестов (при аутоиммунных заболеваниях или иммуносупрессивной терапии).

17. Если T-SPOT.TB тест положительный, что это значит?

Положительные результаты тестов in vitro указывают на активность туберкулезной инфекции (как и АТР) и предполагают назначение КТ органов грудной клетки для исключения локального туберкулеза.