Прибор для определения яиц гельминтов

Программы второго диплома

Научная публикация — это реально!

Раздел находится в стадии заполнения контентом. Приносим извинения за доставленные неудобства!

• Перечень специальностей
• Центр взаимодействия с работодателями

10:57, 16 марта 2017

Разбираем заблуждения о заражении паразитами вместе с кандидатом биологических наук

Кандидат биологических наук Александр Иванов встретился с журналистами портала e1.ru. Фото: Артем Устюжанин

Е1.RU продолжает развенчивать разные околонаучные мифы вместе с екатеринбургскими учёными. Сегодня поговорим о заблуждениях, которые связаны с паразитами.

Узнаем, правда ли чеснок эффективно помогает в борьбе с паразитами и можно ли с помощью одного лекарства убить их всех. Выясним, действительно ли заражённый паразитами человек выглядит худым, бледным и страдает аллергией. А ещё поговорим о том, надо ли мыть овощи и фрукты с мылом, чтобы не заразиться глистами.

Рассказать обо всём этом мы попросили кандидата биологических наук, доцента кафедры зоологии Института естественных наук и математики УрФУ Александра Иванова.

– Самый распространённый способ заражения – это алиментарный, когда яйца паразитов с испражнениями выводятся в окружающую среду, и человек, например, употребляя в пищу продукты питания, которые обсеменены этими яйцами, заражается, – с порога начал вводить в курс дела учёный. – Другой способ передачи паразита – контактный, т. е. при соприкосновении человека с загрязнёнными предметами обихода, с заражённым больным, с животными, например, погладили кошку, на шерсти которой были яйца паразита.

Миф первый: если мыть руки перед едой, то паразитов не подхватишь

– А что, если паразиты уже находятся в пище, тут мойте – не мойте руки, какая разница? Логично, что руки перед едой надо мыть, это правила гигиены. Но мытьё рук с мылом не гарантирует уничтожение всех паразитов на руках, они могут остаться под ногтями, особенно, если ногти длинные. Мыть руки, конечно, надо, но это не панацея от паразитов.

– А гели-антисептики в этом плане более эффективны?

– Вероятно, но, если вы обратите внимание, на гелях-антисептиках написано, что они убивают 99% известных микробов, а 1% всё равно остаётся. Да, допустим, мы протёрли руки септиком и пошли к столу, однако определённые стадии паразитов могут распространяться по воздуху, с каплями мокроты, с пылью, с влагой из кондиционера.

Миф второй: горячее сырым не бывает

– Это известный афоризм, но следовать ему, конечно, нельзя. Приведу пример: взрослые стадии свиного и бычьего солитёров паразитируют в тонком кишечнике человека. Если мясо финнозное (заражено личиночными стадиями), то такое мясо необходимо варить как минимум два часа. И что останется от этого мяса? Мясо ряда диких животных может быть поражено трихинеллёзом. В продажу населению такое мясо не поступает. Если в мясе при прохождении санитарно-эпидемического контроля в двадцати четырёх срезах в компрессориуме нашли хотя бы одну личинку трихинеллы, то туша подлежит технической утилизации. В магазинах мясо всё-таки должно быть проверенным. Поэтому очень опасно покупать мясо с рук, на улице или в деревнях.

Миф третий: у домашней кошки не может быть никаких паразитов

– Есть такое убеждение, что у кошки, которая не выходит на улицу, отсутствуют паразиты. Однако сами хозяева кошки могут занести на обуви яйца или цисты. Кошка может тем или иным образом контактировать с заражённой поверхностью коврика в прихожей, в результате чего кошка становится инфицированной, и уже от неё впоследствии заражается человек. Домашних животных надо периодически подвергать профилактической обработке покровов тела, давать глистогонные препараты, лишним это не будет. С собаками сложнее, чем с кошками. Собак обязательно выгуливают на улице, и там вероятность инфицирования многократно увеличивается. Известен случай заражения сенбернара трихомониазом, подобным заболеванием нередко страдает и человек.

Миф четвёртый: если есть только морскую рыбу, то паразитами не заразишься

– Если сравнивать паразитофауну речной и морской рыбы, то для человека опаснее речная рыба. Морская рыба не менее поражена паразитами, но большинство из них для человека не опасны. Например, из 157 известных гельминтов в северном полушарии обнаружено 108 видов, в южном – 30, а 19 видов обнаружено в обоих полушариях. Это хорошо согласуется с распределением свободно живущей морской фауны в водах северного и южного полушарий, а именно северное полушарие даёт наибольшее зоогеографическое разнообразие морской фауны. Для сравнения можно привести данные о паразитофауне рыб европейского округа и сибирского. Так, для европейского округа известно около 155 видов паразитов, для сибирского – 174 вида. Но, конечно, заболевания у человека вызывают не все паразиты, которые перечислены, их меньше. Но не надо думать, что заразиться паразитами от морской рыбы нельзя. Можно, но реже.

Миф пятый: если мясо полежит в морозилке, то все паразиты погибнут

– Например, мясо, заражённое финнами бычьего цепня, может быть обезврежено посредством длительной заморозки (минус 12 градусов) либо должно быть проварено не менее 2 часов. Что касается трихинеллы, то её личинки погибают лишь при варке мяса небольшими кусками в течение 2,5 часов, прочие методы (длительное замораживание, соление, копчение) не обеспечивают обезвреживания мяса.

Миф шестой: в борьбе с паразитами помогает чесночная клизма

– Ну да, фитонциды в чесноке есть. Человек начинает заболевать, говорит, так, сейчас я чесночку поем, и всё пройдёт. И правда пройдёт, через 7 дней, а без чеснока прошло бы за неделю. Вообще, в толстой кишке, куда вводят клизму, не так много паразитов из гельминтов, а большинство глистов обитают в тонком кишечнике, что исключает непосредственный контакт действующего вещества клизмы. Таким образом, человек получит только раздражение слизистой. Факты использования растительных препаратов для борьбы с гельминтами есть, но данные процедуры связаны с комплексным использованием соответствующих медицинских препаратов.

– Но большинство паразитов живёт в кишечнике?

– Да, в кишечнике живёт большинство паразитов, поскольку питательные вещества там уже подготовлены для всасывания. А в остальном паразиты распространены по всему организму, например, личинки 3-й и 4-й стадий человеческой аскариды живут в альвеолах лёгких. Значительная группа паразитов живёт в желчных ходах печени, в поджелудочной железе, головном мозге, подкожной жировой клетчатке, цереброспинальной жидкости.

Миф седьмой: один анализ может выявить всех паразитов

– Если говорить про клейкую ленту, которую приклеивают к перианальной области, то всех паразитов это не покажет. Чтобы определить некоторых паразитов, надо сдавать кал на анализ, причём в определённые моменты времени, чтобы получить недеформированные яйца гельминтов. Также берётся на анализ мокрота лёгких, цереброспинальная жидкость и т. д.

Вообще, если в соскобе отсутствуют яйца, это не значит, что гельминтов в организме вообще нет. Например, у бычьего цепня по мере созревания от тела отрываются членики, в матках которых находятся яйца, благодаря своей активной подвижности они выползают из кишечника через задний проход и рассеивают яйца. Соскоб в данном случае не позволит установить истинную картину. Жизнедеятельность близкого представителя – свиного цепня – в организме основного хозяина может приводить к рвотам – результат интенсивной антиперистальтики кишечника, благодаря чему часть тела червя может попасть в желудок. Впоследствии из яиц в желудке произойдёт массовое вылупление личинок-онкосфер, которые разнесутся током крови по всему организму, вызывая различные поражения. Соскоб в данном случае тоже не поможет.

Миф восьмой: убить паразитов можно одной таблеткой

– Нет, это невозможно. Некоторые виды паразитов можно удалить только операционным способом. Например, эхинококковый пузырь. Заразиться этим паразитом можно от шерсти собак, поверхность которой содержит яйца, если руками занести их в рот и дальше в кишечник. Таким образом человек становится промежуточным хозяином. Собака заражается эхинококком, поедая пузырчатую стадию гельминта. Зачастую это происходит из-за невежества людей, содержащих в своём хозяйстве (как правило, в сельской местности) животных и не утилизирующих подозрительные объекты после забоя скота. Эхинококковый пузырь может нагноиться. Эти осложнения крайне опасны и могут привести к смерти. Удалить его полностью, не обсеменив брюшную полость, очень сложно. Могут остаться мелкие дочерние пузырьки, что впоследствии приведёт к множественному росту пузырей.

Миф девятый: человека, который страдает паразитами, видно сразу

– Проявления присутствия в организме хозяина паразитов очень масштабны. Когда паразит живёт, например, в человеке, он использует питательные вещества, находящиеся в организме хозяина. В частности, жизнедеятельность лентеца широкого, приводит к авитаминозу, в результате усиленного потребления паразитом витаминов (В12), содержащихся в пище. Кроме того, продукты обмена лентецов вызывают изменения микрофлоры кишечника хозяина, что приводит к почти полному прекращению биосинтеза фолиевой кислоты, осуществляемого кишечными бактериями, и уменьшению количества витамина С. Развивается очень тяжёлая анемия. У больного появляются слабость, сильные головокружения, сонливость. Очень характерны функциональные нарушения кишечника, понижение или, наоборот, резкое повышение кислотности, бледность покровов, отёчность.

У человека, который страдает паразитами, появляются аллергические реакции. Может произойти поражение эпителия кишечника, диарея. Всё это сопровождают боли в животе, кишечные расстройства, изменение аппетита, головные боли, снижается кислотность желудочного сока. При поражении организма некоторыми видами ленточных червей, при дефекации будут выходить части его тела, и не заметить это просто невозможно.

Миф десятый: чтобы очистить овощи от паразитов, надо мыть их в мыльной воде

– Лучше всего обдавать овощи, фрукты кипятком и для большей уверенности и самоуспокоения использовать для обработки пищевую соду. Мыло, как и сода, обладает щелочной реакцией, но в отличие от соды имеет не всегда приятный запах.

Ирина Ахметшина, маретиал портала e1.ru

Назначение и область применения

1. Принцип методики

2. Чувствительность метода

3. Оборудование и материалы

5. Приготовление рабочих растворов реактивов

6. Отбор и хранение проб

7. Ход исследования

8. Оценка результатов исследования

Дополнение к разделу 6. Отбор и хранение проб

Дополнение к разделу 7. Ход исследования

Приложение 1. Схема методики санитарно-паразитологического

исследования воды (последовательность операций)

Приложение 2. Цисты патогенных кишечных простейших и яйца

гельминтов, определяемые методикой

санитарно-паразитологического исследования воды

Приложение 3. Яйца гельминтов, определяемые методикой

санитарно-паразитологического исследования воды

Настоящие методические указания являются первым опытом методического обеспечения контроля качества воды питьевой, плавательных бассейнов и источников хозяйственно-питьевого водоснабжения по паразитологическим показателям, вновь внедренным в:

- СанПиН "Требования к качеству воды централизованных систем питьевого водоснабжения. Контроль качества" 2.1.4.559-96;

- СанПиН "Гигиенические требования к устройству, эксплуатации и качеству воды плавательных бассейнов" 2.1.2.568-96;

- СанПиН "Профилактика паразитарных болезней на территории Российской Федерации" 3.2.563-96, разработанных в развитие Закона РСФСР "О санитарно-эпидемиологическом благополучии населения" и предназначенных для паразитологов городских, районных, областных, краевых и республиканских центров госсанэпиднадзора и специалистов ведомственных лабораторий, осуществляющих контроль качества воды систем централизованного водоснабжения.

Методика предназначена для обнаружения цист патогенных простейших кишечника и яиц гельминтов в воде при осуществлении контроля качества воды по паразитологическим показателям в источниках хозяйственно-питьевого водоснабжения (поверхностных водоемах, ручьях, каптажах, колодцах, артезианских скважинах, в распределительной сети систем коммунального водоснабжения и плавательных бассейнах).

Цисты патогенных простейших кишечника и яйца гельминтов обнаруживаются при микроскопическом исследовании осадка, получаемого после центрифугирования не менее 4-кратно разведенного раствора флотанта, в который искомые паразитарные агенты попадают из осадка, смываемого с мембранных фильтров после фильтрации через них определенных объемов исследуемой воды. Осаждение цист простейших и яиц гельминтов происходит за счет резкого снижения плотности флотанта, которая после разведения становится ниже таковой паразитарных агентов.

Паразитарные патогены (цисты лямблий, амебы дизентерийной, балантидия кишечного, яйца гельминтов) могут быть обнаружены при содержании их в количестве не менее 1 экземпляра в 25 дм3 воды из водоисточников и в 50 дм3 воды питьевой.

3.1. Устройство для вакуумной фильтрации через мембранные фильтры: стационарное устройство, используемое для бактериологических и химических исследований в лабораториях водоочистных станций и центров ГСЭН (фильтровальный аппарат АФ, выпускаемый заводами Минжилкомхоза РФ; фильтровальный аппарат типа Рублевского или другой аналогичный; при отсутствии указанных стационарных установок может быть использован аппарат Гольдмана, колбы для фильтрования под вакуумом номинальной вместимостью 2000-5000 мл (ГОСТ 6514-63), водоструйный насос (ГОСТ 10696-75) или насос Комовского, а в полевых условиях - ручной велосипедный насос (или другой с алогичными свойствами).

3.2. Мембранные фильтры с размером пор 1-4 микрон и диаметром мембранного диска, соответствующим размерам фильтровальной ячейки фильтровального устройства, - обычно 35 +- 2 мм (фильтры мембранные нитроцеллюлозные N 6 Мытищинской экспериментальной фабрики ультрафильтров; фильтрующие мембраны Владипор марки МФА-МА N 10 Казанского ПО "Тасма", "Миллипор", "Прагопор", "Сарториус" или другие с аналогичными свойствами).

3.3. Лабораторная центрифуга, обеспечивающая 1500-2500 об./мин (600-650 g), позволяющая центрифугировать пробы воды объемом 10 мл (типа ОПН-3, ОПН-8, ЦЛС-31М со сменным ротором).

3.4. Холодильник электрический или газовый, поддерживающий температуру 4-6°С.

3.5. Термостат электрический с автоматическим терморегулятором и термометром с ценой деления 0,2°С (ТС-80 или аналогичный).

3.6. Микроскоп биологический (типа МБИ, "БИОЛАМ" и др.), снабженный препаратоводителем (типа СТ-12) и обеспечивающий увеличение от 50 до 900 крат.

3.7. Осветитель ОИ-19 для микроскопа или другой аналогичный.

3.8. Весы лабораторные для взвешивания в диапазоне 50 мг - 20 г (равноплечные ручные /аптекарские/ с разновесами, ВЛР-200 г или др.).

3.9. Денсиметры (ареометры типа I (АI) с пределами измерения от 1,000 до 1,400 кг/м3 (ГОСТ 1300-74).

3.10. Дозаторы пипеточные ПI-0,1, ПI-0,5, ПI-1,0 мл (ТУ 64-339-81).

3.11. Пинцет анатомический.

3.12. Кисти мягкие (из волоса белки, колонка или соболя) для живописи, NN 12-18.

3.13. Стаканы стеклянные высокие с носиком (ВН) номинальной вместимостью 50-100 мл (ГОСТ 10394-63).

3.14. Пробирки центрифужные градуированные (ПЦГ) емкостью 10 мл (ГОСТ 1770-64).

3.15. Стекла предметные 25 х 75 мм.

3.16. Стекла покровные 18 х 18, 24 х 24 мм (ГОСТ 6672-59).

3.17. Чашки биологические (Петри) по ГОСТу 25336-82.

3.18. Часы песочные на 3-5 мин или часы сигнальные.

3.19. Штативы лабораторные для пробирок (ТУ 64-1-707-80).

3.20. Емкости для отбора проб воды из нейтрального материала, пригодные для обеззараживания принятыми методами: канистры пластмассовые, емкостью 20-25 л, стеклянные бутылки, фляги молочные металлические емкостью 30-35 л, эмалированные бидоны.

3.21. Цилиндры измерительные с носиком 1-00, 1-25, 1-500 (ГОСТ 1770-74).

3.22. Колба 2-50-2, 2-100-2, 1-1000 (ГОСТ 1770-74).

3.23. Капельница для многократной дозировки по Манну (ГОСТ 9876-61).

3.24. Широкогорлые стеклянные или пластиковые флаконы емкостью 100-500 мл с притертыми или завинчивающимися крышками.

3.26. Иглы препаровальные.

4.1. Формальдегид 40%-ный (продажный).

4.2. Сульфат цинка семиводный (ZnSO4 х 7Н2O), х.ч.

4.3. Сахароза, ч.д.а.

4.4. Сульфат магния (MgSO4), ч.д.а.

4.5. Тиосульфат натрия по ГОСТу 244-76.

4.6. Вода дистиллированная по ГОСТу 6709-72.

4.7. Натрий хлористый, х.ч. (ГОСТ 4233-77).

4.8. Йод кристаллический, х.ч.

4.9. Калий йодистый (KJ), х.ч.

4.10. Эозин сухой, х.ч.

4.11. Метиленовый синий сухой, х.ч.

4.12. Кислота молочная, х.ч.

4.14. Пепсин (возможен искусственный).

4.16. Натрий двууглекислый, ч.д.а.

4.17. Спирт этиловый ректифицированный по ГОСТу 5962-67.

5.1. Флотанты, любой из 3-х названных:

- 33%-ный водный раствор семиводного сульфата цинка: 331 г семиводного сульфата цинка (ZnSO4 х 7H2O) растворяют в 1 дм3 кипящей дистиллированной воды;

- 30%-ный водный раствор сахарозы: 300 г сахарозы ч.д.а. растворяют в 1 дм горячей дистиллированной воды;

- раствор, состоящий из смеси насыщенных растворов сульфата магния, тиосульфата натрия и дистиллированной воды, соотношение компонентов 3:3:1.

После приготовления флотанта и снижения его температуры до 18°С контролируют его удельную плотность ареометром. Для выделения цист простейших и яиц гельминтов, представляющих непосредственную опасность заражения человека при заглатывании с водой, удельная плотность флотанта должна быть 1,3. Если величина этого показателя ниже, ее нужно откорректировать, добавляя более концентрированные растворы соответствующих веществ.

5.2. 2%-ный раствор Люголя: 1 г йода кристаллического и 2 г калия йодистого растворяют в 100 мл дистиллированной воды (первым растворяют калий йодистый), выдерживают в темноте при 37°С в течение 3 суток, после чего используют в работе.

5.3. 2%-ный водный раствор формалина: 1 часть продажного 40%-ного формальдегида растворяют в 20 частях дистиллированной воды.

5.4. Жидкость Барбагалло: приготовляют 3% формалина на физиологическом растворе (0,85%) хлорида натрия.

5.5. Приготовляют 1%-ный водный раствор эозина.

5.6. Приготовляют раствор, состоящий из 1 части метиленового синего и 50 000 частей дистиллированной воды.

5.7. Приготовляют смесь, состоящую из 0,5 г панкреатина, двууглекислой соды - 0,9 г, дистиллированной воды - 5 мл.

Отбор проб воды производится в чистые (желательно стерильные) емкости. Большие емкости - молочные фляги, металлические ведра и пр. могут быть предварительно обработаны путем обжига их внутренней поверхности с использованием этилового спирта.

Пробы необходимого объема могут доставляться в паразитологическую лабораторию без обработки или в целях облегчения их транспортирования - после предварительной обработки - концентрирования материала путем фильтрования на месте отбора проб, в лаборатории водопроводной станции и др. Пробы, не прошедшие предварительную обработку, могут храниться при температуре 15-20°С не более 2-х суток.

Питьевая вода исследуется в объеме 50 дм3; вода водоисточников - в объеме 25 дм3.

Исследуемый объем воды с помощью фильтровального устройства пропускает через мембранные фильтры (см. п.3.2). По мере замедления процесса фильтрации из-за загрязнения фильтра его заменяют новым, а использованные фильтры с осадком помещают в широкогорлую емкость (стаканчики ВН) с помощью стерильного пинцета и заливают исследуемой водой в количестве 10-50 мл для сохранения их во влажном состоянии.

По окончании фильтрации всей пробы осуществляется смыв осадка с фильтров. Каждый фильтр стерильным пинцетом опускается в стаканчик с дистиллированной водой; придерживая пинцетом фильтр, осторожно смывают осадок при помощи мягкой кисточки, затем фильтр еще раз прополаскивают в другой порции дистиллированной воды. По окончании отмывки всех фильтров кисточку также тщательно прополаскивают в небольшом объеме дистиллированной воды (5-10 мл). Процедура отмывки фильтров и кисточки требует особой тщательности во избежание возможных потерь цист простейших и яиц гельминтов.

Весь полученный смыв центрифугируют в пробирках емкостью 10 мл в течение 5 мин при 1500 об./мин (600g). Надосадочную жидкость сливают. При отсутствии необходимости определения жизнеспособных цист и яиц гельминтов осадок ресуспендируют в 6-8 мл 2%-ного водного формалина. Если предполагается определение жизнеспособности паразитарных патогенов, к осадку добавляют воду. Суспензии вновь центрифугируют в прежнем режиме, после чего удаляют надосадочную жидкость, а к осадку добавляют 3 мл одного из флотантов (предпочтительнее 33%-ный водный раствор семиводного сульфата цинка). Центрифугируют 5 мин при 2000 об./мин, после чего надосадочную жидкость переливают в центрифужную пробирку, разбавляют в 4 раза и более дистиллированной водой. Центрифугируют в прежнем режиме, удаляют надосадочную жидкость, а из осадка готовят препараты на предметных стеклах.

В зависимости от задач исследования препарат либо не окрашивают, либо подвергают окраске. Если нужно провести подсчет паразитарных агентов без определения их жизнеспособности или требуется визуальное определение вероятной жизнеспособности цист кишечных простейших и яиц гельминтов, препарат не окрашивается или его окрашивают 1 каплей 2%-ного раствора Люголя. Вероятную жизнеспособность цист лямблий можно определять, окрашивая препарат 1 каплей 1%-ного водного эозина.

Готовые препараты накрывают покровным стеклом и микроскопируют с использованием 100-600-кратного увеличения (объективы - 10х, 40х, окуляры - 10х, 15х) сухой оптической системы или водной иммерсии. Таким образом микроскопируется весь объем полученного осадка. При необходимости проводят визуальную оценку вероятной жизнеспособности цист лямблий и других простейших, а также яиц гельминтов.

При микроскопии подсчитывают число паразитарных патогенов во всем объеме осадка, что соответствует их числу во всей исследованной пробе, пересчитывают на содержание их в 1 л (дм3), одновременно определяют систематическую принадлежность обнаруживаемых паразитических организмов; идентификация их проводится по следующим признакам.

Цисты лямблий - овальная форма, размеры 10-14 микрон в длину и 6-10 микрон в ширину; незрелые цисты содержат 2 ядра, зрелые - 4; ядра находятся у переднего полюса цисты. Оболочка цисты отчетливо выражена и большей частью отстает от протоплазмы, что является одним из характерных отличий цист лямблий от цист других простейших. Внутри цисты вдоль по средней линии проходят две опорные нити - аксостили; в косом или поперечном направлении лежат характерные парабазальные тела (2 - в незрелых и 4 - в зрелых цистах), нередко заметен сложно свернутый жгутиковый аппарат.

Цисты амебы дизентерийной - округлая, редко овальная форма, размеры от 10 до 16 микрон; молодые цисты содержат 1-2 ядра с центрально расположенной звездчатой кариосомой, зрелые цисты содержат 4-6 ядер; в зрелых четырехядерных и незрелых двухядерных цистах ядра расположены в различных плоскостях; оболочка цист двухконтурная в виде светлого прозрачного ободка. Одноядерные цисты почти всегда содержат в большом количестве гликоген, который в виде крупной вакуоли с нерезкими очертаниями занимает обычно больше половины цисты и раствором Люголя окрашивается в темно-коричневый цвет.

Цисты балантидия кишечного - правильная круглая форма. Плотная двухконтурная оболочка. Средний размер около 50 микрон. Внутри цист имеется крупное бобовидное ядро. Протоплазма однородна, гликоген в ней распылен равномерно. Под оболочкой в некоторых цистах заметно углубление, представляющее собой редуцированный цитостом - органеллу, соответствующую началу пищеварительной трубки многоклеточных. Ресничный покров отсутствует. Ниже приводятся признаки, по которым идентифицируются яйца гельминтов, представляющих непосредственную угрозу заражения человека при заглатывании их с водой.

Яйца аскариды человеческой (свиной) - оплодотворенные яйца овальной или шаровидной формы. Наружная оболочка крупнобугристая, толстая, коричневого цвета (иногда встречаются яйца без наружной бугристой оболочки). Размер яиц 50-70 х 40-50 микрон. Яйцеклетка мелкозернистая и шаровидная, расположена в центре яйца.

Инвазионное яйцо (способное заразить при заглатывании), находящееся на последней стадии созревания, содержит внутри живую подвижную личинку, свернувшуюся кольцевидно или перекрестно.

Яйца токсокары (аскариды собачьей) - почти круглые, 65-75 микрон в диаметре, с нежноячеистой наружной толстой оболочкой темно-коричневого цвета, внутри яйца видна округлая зародышевая клетка. Зрелые инвазионные яйца содержат внутри подвижную свернувшуюся кольцом или перекрестно личинку.

Яйца власоглава - симметричные, имеют лимонообразную или бочонкообразную форму. Оболочка темно-коричневая, толстая. На обоих полюсах имеются светлоокрашенные пробковидные образования. Размеры яиц 50-54 х 23-26 микрон. В зрелых инвазионных яйцах видна подвижная личинка.

Яйца острицы - асимметричные. Одна сторона заметно уплощена, другая выпукла. Размеры 50-60 х 30-32 микрон. Оболочка тонкая, гладкая и бесцветная. Яйца могут быть на различных стадиях созревания, до головастикоподобной личинки включительно.

Яйца цепня карликового - оболочка яйца бесцветная, тонкая, гладкая. Форма овальная. Размер яиц 40 х 50 микрон, эмбриофора (зародыш) почти шаровидная (29 х 30 микрон), с длинными нитевидными придатками на полюсах.

Онкосферы тениид - овальная форма, размеры 31-40 х 2-30 микрон; имеют тонкую наружную оболочку и толстую радиально-исчерченную внутреннюю оболочку темно-коричневого цвета. Внутри онкосферы находится зародыш-эмбриофора с шестью зародышевыми крючьями.

Оценка вероятной жизнеспособности цист патогенных простейших и яиц гельминтов визуально проводится по следующим критериям, подтверждающим жизнеспособность:

- целостность наружной оболочки (отсутствие ее разрывов, вдавлений, выбухания, сморщивания);

- четкая внутренняя структура цисты или яйца: для цист - четко видны ядра, отсутствует зернистость (для цист лямблий дополнительно должны быть видны аксостили, жгутиковый аппарат, медиальное тело); для яиц гельминтов - наличие дробящейся зародышевой клетки или подвижной личинки (для аскарид, токсокар, власоглавов, остриц), попарное расположение зародышевых крючьев у живых и беспорядочное у мертвых онкосфер тениид и яиц карликового цепня;

- при окраске препарата 1%-ным водным раствором эозина жизнеспособные цисты лямблий не воспринимают окраску в течение первых 5 минут, мертвые окрашиваются сразу же в розовый цвет. Поэтому указанную окраску следует использовать до микроскопии только в том случае, когда на изучение препарата потребуется не более 5 минут. Часто просмотр мазка длится 15-30 минут, тогда 1%-ный водный эозин можно вводить аккуратно, не сдвигая препарат, под покровное стекло пипеткой в точке, где при предварительном просмотре уже обнаружены цисты лямблий;

- жизнеспособность онкосфер тениид и яиц аскарид, содержащих личинку, определяют путем окрашивания препарата смесью, содержащей метиленовый синий. Живые онкосферы и личинки, находящиеся внутри яиц аскарид, не окрашиваются в течение первых 15 минут. Мертвые окрашиваются сразу в синий цвет;

- жизнеспособность онкосфер тениид можно также определить по движению зародышей при воздействии на них пищеварительными ферментами. Для этого исследуемый осадок, содержащий онкосферы, помещают на часовое стекло в искусственный дуоденальный сок (см. п.5.7). Стекло ставят в термостат при 36-38°С на 4 часа. Живые зародыши освобождаются от оболочек, а мертвые - нет.

Оболочки жизнеспособных онкосфер растворяются также в подкисленном пепсине и в щелочном растворе трипсина через 6-8 часов при температуре 38°С.

В случае, если первичная обработка воды пробы (фильтрование) проводилась вне паразитологической лаборатории, использованные фильтры помещают в широкогорлый флакон, добавляют 10-15 мл исходной воды; закрывают флакон завинчивающейся или притертой крышкой, маркируют, указывая дату, место отбора, количество профильтрованной воды, и транспортируют в паразитологическую лабораторию для дальнейшего исследования. При невозможности исследования в день отбора материал хранят при 4°С не более суток; при отсутствии необходимости определения жизнеспособности цист кишечных простейших и яиц гельминтов материал хранят не более 3-4 суток после добавления в него формальдегида с таким расчетом, чтобы концентрация его в суспензии составила 2%.

Перед началом фильтрации мембранные фильтры должны быть подвергнуты 10-минутному кипячению в дистиллированной воде для удаления посторонних частиц из пор фильтров, препятствующих оптимальному проведению процесса фильтрации.

Схема выполнения методики санитарно-паразитологического исследования воды и изображения, определяемых с ее помощью цист кишечных патогенных простейших и яиц гельминтов, представлены в приложениях 1, 2, 3.