Описторхоз титра 1 800

Описторхоз (трематодоз) - заболевание, вызываемое гельминтами Opisthorchis felineu, принадлежащими к плоским червям трематодам. Заражение человека и млекопитающих животных происходит при употреблении в пищу сырой, недостаточно прожаренной рыбы карповых пород, зараженной личинками гельминта. Личинки паразита попадают со съеденной рыбой в кишечник человека, выходят из окружающих их оболочек и проникают в печень, желчный пузырь и поджелудочную железу, где через 2 недели достигают половой зрелости и через месяц начинают откладывать яйца.

Описторхисы травмируют слизистые оболочки панкреатических и желчных протоков, создают препятствие оттоку желчи, способствуют развитию кист и новообразований печени. Оказывают токсическое действие, приводят к появлению разнообразных аллергических реакций. Инкубационный период продолжается 2-4 недели. Начальными симптомами заболевания могут быть: повышение температуры тела, боли в мышцах и суставах, рвота, понос, болезненность и увеличение печени (иногда увеличивается и селезенка), аллергические высыпания на коже. В поздней стадии наблюдаются жалобы на боль в подложечной области и правом подреберье, нередко боли обостряются в виде приступов желчной колики. Часто возникают головные боли, диспепсические расстройства (тошнота, рвота, отрыжка, изжога, нарушение аппетита, ощущение неприятного вкуса во рту, задержка стула, частый жидкий стул, метеоризм), головокружения, некоторые больные жалуются на бессонницу. Печень часто увеличена и уплотнена. Иногда описторхоз может протекать и в стертой (малосимптомной) форме. Не диагностируемые и не леченные формы описторхоза могут привести к таким осложнениям, как гнойный холангит (гнойное воспаление печеночных желчных протоков), разрыв кист желчных протоков с последующим развитием желчного перитонита, острый панкреатит (внезапное острое воспаление ткани поджелудочной железы и ее распад (некроз)) , рак печени.
Анализ крови на описторхоз на ранней стадии заболевания, до начала откладывания яиц паразитом, является единственным методом лабораторной диагностики описторхоза, при хроническом описторхозе – вспомогательным методом, при котором требуется подтверждение – нахождение паразитов в фекалиях и дуоденальном содержимом (содержимое просвета двенадцатиперстной кишки). Антитела класса IgG к Opisthorchis felineus начинают вырабатываться на 3 – 4 неделе после заражения, их титр достигает максимума ко 2 - 3 месяцу и может держаться на таком уровне до 1 года и более. Однако при длительных сроках заболевания (более 10 лет) при проведении анализа на описторхоз у больных нередко отмечают снижение уровня специфических антител ниже порогового уровня, который может быть определён современными методами, вследствие связывания антител с антигенами гельминтов и образования ЦИК (циркулирующих иммунных комплексов).

Анализ обнаруживает наличие (титр) антител IgG к Opisthorchis felineu методом ИФА (иммуноферментный анализ).

Метод

Метод ИФА - иммуноферментный анализ. Суть метода состоит в том, что в лунки полистиролового планшета сорбируют (закрепляют) антигены возбудителя описторхоза Opisthorchis felineus в определенной концентрации. Исследуемый образец (сыворотка крови) титруют последовательным разведением в каждой последующей лунке (например, 1:2, 1:4, 1:8, 1:16 и т.д.). При наличии антител к Opisthorchis felineus происходит их связывание с антигеном, сорбированном на планшете. Эти антитела обнаруживают с помощью добавления меченного ферментом реагента (конъюгата), который специфически связывается с ними. После добавления на конечном этапе субстрата - бесцветного вещества - происходит ферментативная реакция. Её результатом является окрашивание субстрата, интенсивность которого пропорциональна количеству выявленных (связанных с коньюгатом) антител. Результат оценивается спектрофотометрически или визуально.

Референсные значения - норма
(Opisthorchis (описторхоз), IgG антитела, полуколичественный, кровь)

Информация, касающаяся референсных значений показателей, а также сам состав входящих в анализ показателей может несколько отличаться в зависимости от лаборатории!

Антитела IgG в титре менее 1:100 - отрицательный результат;

более 1:100 - положительный результат;

титр антител 1:100 - сомнительный результат.

Причинами отрицательного результата могут быть:

- инфицирование на ранних стадиях, когда еще не выработался иммунный ответ;

- длительный срок заболевания (более 10 лет).

Показания

- наличие признаков поражения печени, желчного пузыря или поджелудочной железы, указывающие на возможное заражение трематодами;

- эпидемиологические показания - проживание в эндемичных районах (районах с высокой степенью распространенности данного заболевания);

- при употреблении плохо обработанной рыбы карповых пород;

- группа повышенного риска (рыбаки, коренные народности Севера).

Повышение значений (положительный результат)

Причинами положительного результата могут являться:

- первичный рак печени, ассоциированный с описторхозом.

Обнаружение антител IgG при отсутствии IgM и ЦИК не является достаточным для постановки диагноза "описторхоз" и требует дополнительных исследований, которыми являются анализы на обнаружение паразитов в фекалиях и дуоденальном содержимом (содержимом просвета двенадцатиперстной кишки).

Описторхоз – паразитарное природно-очаговое заболевание, вызываемое двумя видами трематод семейства Opistorchidae: Opistorchis felineus (двуустка кошачья, или двуустка сибирская) и Opistorchis viverrini.

Антитела класса IgG к Opistorchis, иммуноглобулины класса G к возбудителю описторхоза, антиописторхис-IgG.

Синонимы английские

Antiopistorchis IgG, Opistorchis antibodies, IgG.

Иммуноферментный анализ (ИФА).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

Не курить в течение 30 минут до сдачи крови.

Общая информация об исследовании

Исследование проводится, чтобы выявить заражение трематодой семейства Opistorchidae, Opistorchis felineus (двуусткой кошачей, или двуусткой сибирской) – плоскими червями, которые вызывают развитие описторхоза.

Основным источником заражения являются домашние и дикие животные, питающиеся рыбой, а также человек, инфицированный O. felineus. В их организме происходит окончательное созревание паразитов до взрослых особей, которые продуцируют яйца, выделяемые в окружающую среду с калом. При попадании в водоемы яйца проглатываются моллюсками битиниями (первый промежуточный хозяин), в которых происходит развитие и бесполое размножение гельминта с образованием личинок – церкариев. Церкарии освобождаются от моллюсков и активно проникают в рыбу карповых пород (второй промежуточный хозяин), инцистируясь в мышцах и подкожно-жировой клетчатке в виде метацеркариев. Человек заражается, употребляя в пищу недостаточно обработанную рыбу, содержащую метацеркарии O. felineus. После их попадания внутрь в двенадцатиперстной кишке начинается формирование взрослых особей паразита. Затем они мигрируют в желчные и панкреатические протоки, где через несколько недель достигают половозрелого состояния, а через месяц начинают откладывать яйца.

Взрослые особи O. felineus прикрепляются к слизистой оболочке желчных и панкреатических протоков, вызывая механическое повреждение их стенок. Скопление большого количества паразитов в протоках может вызвать их закупорку и, как следствие, вторичную желтуху и панкреатит, а также создает благоприятные условия для присоединения вторичной инфекции желчевыводящих путей. Продукты жизнедеятельности описторхисов являются сильными аллергенами и приводят к аллергическим реакциям и эозинофилии.

Описторхоз может протекать в различных формах, часто бессимптомно. Основные признаки инфицирования O. felineus: лихорадка, общее недомогание, кожная сыпь, желудочно-кишечные расстройства, при массивных инвазиях – боли в правом подреберье, возможно увеличение печени и селезенки. При длительном течении происходит хронизация заболевания, развивается хронический холецистит, дуоденит и панкреатит.

Если пациента не лечить на ранних стадиях, у него могут возникнуть серьезные осложнения, такие как гнойный холангит, разрыв кистозно-расширенных желчных протоков с последующим желчным перитонитом, острый панкреатит. Доказано, что хронический O. Felineus, длящийся более 20 лет, способен привести к первичному раку печени.

Для чего используется исследование?

Тест проводится в целях выявления трематоды семейства Opistorchidae – Opistorchis felineus (двуустки кошачьей, или двуустки сибирской), которая вызывает развитие описторхоза. Особенно обследование рекомендуется людям, входящим в группы риска – проживающим или побывавшим когда-либо в эндемичном районе, это, например, рыбаки, коренные народности Севера.

Существует несколько методов, которые могут быть использованы для проверки на описторхоз. Один из них – определение антител к возбудителю в крови.

Когда происходит контакт человека с Opistorchis felineus, его иммунная система реагирует, вырабатывая антитела IgM и IgG.

Иммуноглобулины класса G к O. felineus в определяемых количествах появляются в крови через 6-8 недель c момента инфицирования. Концентрация их возрастает и через 2-3 месяца достигает максимума, сохраняясь на определенном уровне в течение продолжительного времени. Однако при длительных сроках заболевания (более 10 лет) уровень специфических антител значительно снижается и опускается ниже порогового значения из-за развития иммунодефицитного состояния пациента и адсорбции белков плазмы на кутикуле паразита.

Данный тест целесообразно использовать как дополнение к комплексным методам обследования.

Когда назначается исследование?

Определение антител IgG к описторхозу обычно не является рутинным исследованием и может назначаться врачом в следующих случаях:

когда у пациента имеются признаки поражения печени, желчного пузыря или поджелудочной железы, указывающие на возможную инвазию трематодами,
по эпидемиологическим показаниям – при проживании в эндемичных районах,
при употреблении плохо обработанной рыбы карповых пород,
пациент входит в группу повышенного риска (рыбаки, коренные народности Севера).

Что означают результаты?

КП (коэффициент позитивности): 0 — 0,84.

Причины отрицательного результата

Отсутствие инфицирования.
Слишком раннее инфицирование, когда еще не выработался иммунный ответ.
Длительный срок заболевания (более 10 лет).

Причины положительного результата

Острый описторхоз.
Скрытый описторхоз.
Первичный рак печени, ассоциированный с описторхозом.

Положительный результат означает, что пациент инфицирован Opistorchis felineus. Вместе с тем отрицательный результат не всегда означает, что у пациента нет описторхоза.

Положительный результат у ранее серонегативного пациента, а также значительный прирост титров в парных сыворотках, взятых с интервалом, подтверждает первичную инфекцию.

Отрицательный результат на антитела IgG к Opistorchis felineus может свидетельствовать об отсутствии инфицирования или его слишком раннем сроке, когда не выработался иммунный ответ. Помимо этого, отрицательный результат может наблюдаться при длительном сроке заболевания, из-за иммунодефицитного состояния пациента и адсорбции белков плазмы на кутикуле паразита.

Обследование на описторхоз обязательно должно быть комплексным, включать в себя анамнез, клиническую картину и лабораторные данные, в том числе обнаружение возбудителя и результаты серологического обследования. Причем подтверждение диагноза лабораторными данными обязательно.
Необходимо учитывать эпидемиологический анамнез: нахождение когда-либо в эндемичном районе, употребление в пищу плохо термически обработанной рыбы карповых пород.
Заболевание не передается от человека к человеку.
Если выявлен описторхоз, нужно провести полный курс лечения, иначе могут развиться серьезные осложнения, вплоть до рака печени.
Основой профилактики описторхоза является исключение из пищи необеззараженной рыбы.

Скрининговое обследование на гельминтозы (Opistorchis IgG, Toxocara IgG, Trichinella IgG, Echinococcus IgG)

Кто назначает исследование?

Инфекционист, терапевт, педиатр, гастроэнтеролог, онколог, хирург.

Оставьте ваш E-mail и получайте новости, а также эксклюзивные предложения от лаборатории KDLmed

Аннотация научной статьи по прочим медицинским наукам, автор научной работы — Старостина Ольга Юрьевна, Панюшкина И. И.

С целью сравнительной оценки эффективности лабораторных методов диагностики описторхозной инвазии проводилось исследование образцов сыворотки крови и копроматериала от людей. Для паразитологической диагностики применялся метод толстого мазка под целлофановой пленкой по Като-Миура и седиментационный метод уксусно-эфирного осаждения. Для серологической диагностики использовали метод иммуноферментного анализа. Анализ частоты обнаружения яиц описторхисов в копроматериале и уровня противоописторхозных антител в образцах сыворотки крови пациентов показал наличие сильной прямой корреляционной связи между этими показателями. Показано, что для лабораторной диагностики описторхоза нельзя ограничиваться каким-либо одним методом. Установлено, что на территориях со средним и низким уровнем инвазированности населения описторхисами целесообразно использовать комплекс методов, включающий исследование сыворотки крови на наличие специфических иммуноглобулинов к антигенам описторхисов и дву-или троекратное исследование кала двумя копроовоскопическими методами.

THE COMPARATIVE CHARACTERISTIC OF METHODS OF LABORATORY DIAGNOSTIC OF OPISTHORCHIASIS

The analysis of samples of blood serums and copromaterial from patients was carried out to evaluate effectiveness of diagnostic of opisthorchiasis invasion. The Kato-Miura technique of thick film under cellophane layer and sedimentation technique of acetic etheric precipitation were applied for parasitologic diagnostic. The technique of immunoenzymometric analysis was applied for serological diagnostic. The analysis of detection rate of eggs of opistorchis in copromaterial and level of anti-opistorchis antibodies in samples of blood serum of patients demonstrated the presence of strong direct correlation relationship between these indicators. It is demonstrated that for laboratory diagnostic of opisthorchiasis it is impossible to limit oneself to some single technique. It is established that on the territories with middle and low level of population infection rate of opistorchis it is appropriate to apply complex of methods including analysis of blood serum for presence of specific immunoglobulins to antigens of opistorchis and twice or thrice analysis of feces with copro-ovoscopic methods.

О.Ю. Старостина, И.И. Панюшкина

сравнительная характеристика методов лабораторной диагностики описторхоза

Ключевые слова: описторхоз; копроовоскопия; лабораторная диагностика гельминтозов. O.Yu. Starostina, I.I. Panushkina

THE COMPARATIVE CHARACTERISTIC OF METHODS OF LABORATORY DIAGNOSTIC OF OPISTHORCHIASIS

The Omsk research institute of naturofocal infections of Rospotrebnadzor, 644080 Omsk, Russia

The analysis of samples of blood .serums and copromaterial from patients was carried out to evaluate effectiveness of diagnostic of opisthorchiasis invasion. The Kato-Miura technique of thick film under cellophane layer and sedimentation technique of acetic etheric precipitation were applied for parasitologic diagnostic. The technique of immunoenzymometric analysis was applied for serological diagnostic. The analysis of detection rate of eggs of opistorchis in copromaterial and level of anti-opistorchis antibodies in samples of blood serum of patients demonstrated the presence of strong direct correlation relationship between these indicators. It is demonstrated that for laboratory diagnostic of opisthorchiasis it is impossible to limit oneself to some single technique. It is established that on the territories with middle and low level of population infection rate of opistorchis it is appropriate to apply complex of methods including analysis of blood serum for presence of specific immunoglobulins to antigens of opistorchis and twice or thrice analysis of feces with copro-ovoscopic methods.

Keywords: opisthorchiasis, copro-ovoscopy, laboratory diagnostic of opisthorchiasis

Введение. Одним из разделов эпидемиологического надзора за гельминтозами является совершенствование лабораторных методов диагностики и внедрение их в практику. В клинико-диагностических лабораториях лечебно-профилактических учреждений в большинстве случаев используются малоэффективные методы копроовоскопии, которые не выявляют инвазии низкой интенсивности [1].

Описторхоз (возбудитель Opisthorchis felineus) является наиболее значимым биогельминтозом на территории Российской Федерации: в общей структуре биогельминтозов на его долю приходится 74,4%. Ежегодно на территории Российской Федерации регистрируется около 35 тыс. больных описторхозом. Наиболее неблагополучными являются Ханты-Мансийский (614,1 на 100 тыс. населения), Ямало-Ненецкий (279,8) автономные округа, Тюменская (211,6), Томская (222,2), Новосибирская (116,6), Омская (158,9) области. В 2011 г. показатель заболеваемости описторхозом по Сибирскому федеральному округу составил 70,5 на 100 тыс. населения при среднефедеративном уровне 22,4 [2].

Для корреспонденции: Старостина Ольга Юрьевна, науч. сотр. Адрес: 644080, Омск, прсп. Мира, 7. E-mail : olgastar27@mail.ru

В Омской области на описторхоз приходится 99,4% случаев от общего числа зарегистрированных гельминтозов [3].

С учетом существенной социально-экономической значимости описторхоза, его широкой распространенности на территории Обь-Иртышского бассейна, интенсификации миграции населения, в том числе из неблагополучных по опи-сторхозу регионов, оптимизация применения лабораторных методов диагностики с целью наиболее полного выявления инвазированных лиц приобретает важное значение.

Цель работы - оценка эффективности серологических и копроовоскопических методов диагностики описторхоза на территории со средним и низким уровнем инвазированности населения.

90 80 70 60 50 40 30 20 10 О

200 400 600 Обратные титры IgG

Зависимость частоты обнаружения яиц описторхисов от титров специфических иммуноглобулинов (1§О).

инструкцией. Одновременное исследование копроматериала и сывороток крови проведено у 396 пациентов с подозрением на описторхозную инвазию, направленных на обследование из лечебно-профилактических учреждений г. Омска. Статистическая обработка полученных результатов исследования проводилась с использованием программы Statistica 6.0.

Результаты и обсуждение. Антитела к антигенам описторхисов выявлены у 233 (58,8 ± 2,5%) человек, из них ^О в титрах 1:100-1:3200 - у 208 (89,3 ±_2,0% от числа серопози-тивных лиц), у 17 (7,3 ± 1,7% от числа серопозитивных лиц) выявлены одновременно 1§О и IgМ в титрах 1:200-1:800, у 8 (3,4 ± 1,2%) пациентов обнаружены только IgМ. При ко-проовоскопическом исследовании методом уксусно-эфирного осаждения, описторхоз подтвержден у 148 человек из 233 серопозитивных лиц, т. е. у 63,5 ± 3,1% от всех серопозитивных лиц. Подавляющее большинство пациентов копроовоскопиче-ски обследовались однократно. Дву- или троекратно методом уксусно-эфирного осаждения обследовано 26 человек: 13 пациентов, у которых выявлены антитела к описторхисам в титрах 1:100-1:800 и 13 пациентов с отрицательным результатом ИФА. При дополнительном обследовании яйца описторхисов обнаружены у двух пациентов с положительным результатом ИФА (с титрами 1:400) во второй порции копроматериала в количестве 5 и 2 я/г и у одного пациента с отрицательным результатом ИФА в 4-й порции в количестве 1 я/г У 85 серо-позитивных пациентов исследование кала методом уксусно-эфирного осаждения дало отрицательный результат.

При исследовании копроматериала от 163 пациентов с отрицательными результатами ИФА яйца О. felineus обнаружены у 31 человека, т. е. у 19,0 ± 3,1% от числа серонегативных лиц.

Анализ частоты обнаружения яиц описторхисов в копрома-териале и уровня противоописторхозных антител в сыворотках крови пациентов показал наличие сильной прямой корреляционной связи между этими показателями (г = 0,86). Яйца опи-сторхисов чаще встречались в копроматериале лиц с высокими титрами специфических антител в сыворотке крови. В группе серопозитивных лиц с титром 1§О 1:100, яйца описторхисов обнаружены только у 50%, то среди пациентов с уровнем 1§О 1:400-1:800 - уже у 78,2 и 80% соответственно (см. рисунок).

Отсутствие яиц описторхисов при наличии специфических антител частично можно объяснить давностью заражения, небольшим количеством паразитов, недостаточной эффективностью копроовоскопического обследования. Нельзя забывать и о возможных ложноположительных реакциях у части обследованных. Ложноположительные результаты в ИФА с опи-сторхозным антигеном связаны с наличием у описторхисов антигенных детерминант, общих с некоторыми гельминтами (эхинококки, фасциолы, дикроцелии и др.), другими микроорганизмами и собственными антигенами хозяина 5. Возможно существование еще одной причины: В.И. Иванских и

В.В. Близнюк [8] обнаружили, что при экспериментальном заражении хомячков описторхисами и вирусом простого герпеса 2-го типа (ВПГ-2) наблюдается отсутствие яиц в матке гельминтов и поражение семенников у 10-40% описторхисов, выделенных от зараженных животных. Не исключено, что вирусы ВПГ-1, ВПГ-2, ЦМВ, инфицированность населения которыми достигает 90%, могут проникать в паразитирующие у человека описторхисы, вызывая у них аналогичные изменения, что затрудняет постановку паразитологического диагноза.

Применение какого-то одного копроовоскопического метода, даже такого высокоэффективного, как метод уксусно-эфирного осаждения, на территориях с низким и средним уровнем инвазированности населения, к которым относится Омская область, не всегда дает удовлетворительные результаты. Средний уровень яйцепродукции (косвенно указывающий на интенсивность инвазии) у инвазированных, проживающих в г. Омске и на юге Омской области, достаточно низкий и составляет, по нашим данным, в среднем 33,1 ± 5,7я/г у серопозитивных лиц и 9,6 ± 2,3 я/г у серонегативных.

С целью сравнительной оценки информативности ко-проовоскопических методов было проведено обследование 411 жителей г. Омска и Омской области с параллельным использованием метода уксусно-эфирного осаждения и метода Като-Миура. У 26 (6,3 ± 4,8%) человек яйца описторхисов выявлены как методом уксусно-эфирного осаждения, так и методом Като-Миура. У 8 (1,95 ± 4,9%) человек яйца гельминтов обнаружены только при использовании для копро-овоскопии метода уксусно-эфирного осаждения и не обнаружены при просмотре толстых мазков под целлофаном. В то же время, у 4 (0,97 ± 4,9%) человек яйца описторхисов выявлены только при просмотре копроматериала методом Като-Миура, а эфирно-уксусный метод дал отрицательный результат. Всего при использовании одновременно двух методов паразитологической диагностики описторхоза выявлено 38 (9,2 ± 4,7%) инвазированных лиц.

Для лабораторной диагностики описторхоза нецелесообразно ограничиваться каким-либо одним методом. Метод ИФА кажется более эффективным, однако постановка диагноза на основании только этого теста неправомочна из-за высокой вероятности ложноположительных и ложноотри-цательных результатов [7, 9]. Среди паразитологических методов диагностики описторхоза не существует метода, обладающего 100% чувствительностью.

Заключение. На территориях со средним и низким уровнем инвазированности населения описторхисами целесообразно использовать комплекс методов, включающий исследование сыворотки крови на наличие специфических иммуноглобулинов к антигенам описторхисов и дву-троекратное исследование кала двумя указанными выше копроовоскопи-ческими методами, что позволит повысить качество диагностики описторхозной инвазии.

1. Гузеева Т.М. Состояние заболеваемости паразитарными болезнями в Российской Федерации в условиях реорганизации службы.

Медицинская паразитология и паразитарные болезни. 2008; 1: 3-11.

2. Заболеваемость протозоозами и гельминтозами населения Российской Федерации в 2010—2011 гг. Информационный сборник статистических и аналитических материалов. М., 2012.

4. Лабораторные методы диагностики паразитарных заболеваний. МУК 4.2.735-99. М.: Минздрав России; 2000.

5. Лепехин А.В., Ратнер Г.М., Менявцева Т.А. Перекрестно реагирующие антигены Opisthorchis felineus и Salmonella typhi и их возможное влияние на клиническое течение брюшного тифа. Медицинская паразитология и паразитарные болезни. 1990; 4: 33-6.

6. Ратнер Г.М., Кускова З.Р., Менявцева Т.А., Стручкова С.В. О наличии антигенной общности у O. felineus c белками сыворотки крови человека. В кн.: Описторхоз. Современное состояние проблемы, перспективы развития: Сборник тезисов юбилейной конференции. Тюмень; 1991: 204-6.

7. Серологические методы лабораторной диагностики паразитарных заболеваний. МУ 3.2.1173-02. М.: Минздрав России; 2003.

8. Иванских В.И., Близнюк В.В. Влияние описторхисов на проявления вирусов герпеса второго типа в эксперименте и их возможное участие в механизме возникновения первичного рака печени. Медицинская паразитология и паразитарные болезни. 1996; 2: 23 - 6.

9. Актуальные биогельминтозы и протозоозы в Западной Сибири (эпидемиология, биология, диагностика, профилактика). Методические рекомендации. М.: Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека; 2008.

1. Guzeeva T.M. State incidence of parasitic diseases in the Russian Federation in the reorganization of the service. Medicinskaja parazitologija i parazitarnye bolezni. 2008; 1: 3-11 (in Russian).

2. Morbidity protozoozami and worm infections in the Russian Federation in 2010-2011. Informatsionnyj sbornik statisticheskikh i analiticheskikh materialov. Moscow; 2012 (in Russian).

4. Laboratory methods for diagnosis of parasitic diseases. MUK 4.2.73599. Moscow: Minzdrav Rossii; 2000 (in Russian).

5. Lepehin A.V., Ratner G.M., Menjavtseva T.A. Cross-reactive antigens of Opisthorchis felineus and Salmonella typhi and their potential impact on the clinical course of typhoid fever. Meditskinskaja parazitologija i parazitarnye bolezni. 1990; 4: 33-6 (in Russian).

6. Ratner G.M., Kuskova Z.R., Menjavceva T.A., Struchkova S.V. The presence of an antigen common O.felineus with proteins of human blood serum. In: Opistorhoz. Sovremennoe sostojanie problemy, perspektivy razvitija: Sbornik tezisov jubilejnoj konferentsii. Tjumen'; 1991: 204-6 (in Russian).

7. Serological methods for the laboratory diagnosis of parasitic diseases. MU 3.2.1173-02. M.: Minzdrav Rossii; 2003 (in Russian).

8. Ivanskih V.I., Bliznjuk V.V. Influence of opistorhis on the manifestation second type of herpes virusin the experiment, and their possible involvement in the mechanism of primary liver cancer. Meditsinskaja parazi-tologija i parazitarnye bolezni. 1996; 2: 23-6 (in Russian).

9. Actual biogelmintozy and protozoozy in Western Siberia (epidemiology, biology, diagnosis, prevention). Metodicheskie rekomendatsii. M.: Federal'naja sluzhba po nadzoru v sfere zashchity prav potrebitelej i blagopoluchija cheloveka; 2008 (in Russian).

О.Ю. Сильвейстрова, Э.А. Домонова, О.Ю. Шипулина

валидация набора реагентов для количественного определения ДНК цитомегаловируса человека в биологическом материале методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени

Ключевые слова: валидация; количественное определение ДНК; Cytomegalovirus hominis; цитомегаловирус человека; ЦМВ; международный стандарт ВОЗ; ПЦР в режиме реального времени.

O.Yu. Silveiystrova, E.A. Domonova, O.Yu. Shipulina

THE VALIDATION OF KIT OF REAGENTS FOR QUANTITATIVE DETECTION OF DNA OF HUMAN CYTOMEGALOVIRUS IN BIOLOGICAL MATERIAL USING POLYMERASE CHAIN REACTION TECHNIQUE IN REAL TIME OPERATION MODE

The central research institute of epidemiology of Rospotrebnadzor, 111123 Moscow, Russia

The validation of kit of reagents destined to detection and quantitative evaluation of DNA of human cytomegalovirus in biological material using polymerase chain reaction technique in real time operation mode was implemented. The comparison was made against international WHO standard - The first WHO international standardfor human cytomegalovirus to implement measures the kit ofreagents "AmpliSens CMV-screen/monitor-FL" and standard sample of enterprise DNA HCMV (The central research institute of epidemiology ofRospotrebnadzor) was applied. The fivefold dilution of international WHO standard and standard sample of enterprise were carried out in concentrations of DNA HCMV from 106 to 102. The arrangement of polymerase chain reaction and analysis of results were implemented using programed amplifier with system of detection offluorescent signal in real-time mode "Rotor-Gene Q " ("Qiagen ", Germany). In the total ofthree series of experiments, all stages of polymerase chain reaction study included, the coefficient of translation of quantitative evaluation ofDNA HCMV from copy/ml to ME/ml equal to 0.6 was introducedfor this kit of reagents.

Keywords: validation, quantitative evaluation, DNA, cytomegalovirus hominis, human cytomegalovirus, international WHO standard, polymerase chain reaction, real-time mode

Для корреспонденции: Сильвейстрова Ольга Юрьевна, мл. науч. сотр. Адрес: 111123, Москва, ул. Новогиреевская, 3а. E-mail: olga.siveystrova@pcr.ms

В настоящее время во многих научно-исследо-вательских и клинико-диагностических лабораториях для диагностики цитомегаловирусной (ЦМВ) инфекции применяются современные методы анализа, основанные на полимеразной

Читайте также:

Описторхоз титра 1 800

Метод

Референсные значения - норма (Opisthorchis (описторхоз), IgG антитела, полуколичественный, кровь)

Показания

Повышение значений (положительный результат)

Аннотация научной статьи по прочим медицинским наукам, автор научной работы — Старостина Ольга Юрьевна, Панюшкина И. И.

Похожие темы научных работ по прочим медицинским наукам , автор научной работы — Старостина Ольга Юрьевна, Панюшкина И. И.

THE COMPARATIVE CHARACTERISTIC OF METHODS OF LABORATORY DIAGNOSTIC OF OPISTHORCHIASIS

Референсные значения - норма
(Opisthorchis (описторхоз), IgG антитела, полуколичественный, кровь)