Кишечная палочка глазные капли

4 декабря 1974 г. N 1201-74

ПО МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОМУ КОНТРОЛЮ В АПТЕКАХ

Разработаны - Лабораторией санитарной бактериологии Санэпидстанции г. Москвы.

Рассмотрены и рекомендованы к утверждению Лабораторным Советом при Главном санитарно-эпидемиологическом управлении Министерства здравоохранения СССР.

Методические указания предназначены для работников лабораторий санитарно-эпидемиологических станций и лечебно-профилактических учреждений.

При осуществлении текущего санитарного контроля за режимом работы в аптеках санитарно-эпидемические станции и лечебно-профилактические учреждения руководствуются Приказами Министерства здравоохранения СССР N 79 "Об утверждении инструкции по санитарному режиму в аптеках" от 25 февраля 1975 г., N 573 "Об утверждении временных нормативов предельно допустимого содержания непатогенных микроорганизмов в лекарственных формах аптек" от 30 ноября 1962 г. и N 768 "Об утверждении инструкции по контролю качества лекарств и основных требований по их изготовлению в аптеках" от 26 октября 1968 г.

При этом объектами бактериологического исследования являются:

а) дистиллированная вода;

б) инъекционные растворы (до стерилизации);

в) глазные капли;

г) аптечная посуда, пробки, прокладки и прочие вспомогательные материалы, инвентарь, оборудование и руки персонала (контроль осуществляется методом смывов).

Отбор проб для исследования производят работники санэпидстанций, а при проведении исследований в лечебно-профилактических учреждениях - работники лабораторий.

Пробы дистиллированной воды, используемой для приготовления лекарственных форм (кроме лека рств дл я инъекций и глазных капель), отбирают в количестве 500 мл в стерильные бутылки, закрытые ватными пробками и бумажными колпачками. Пробы отбирают из бюретки, предварительно обжигают ватой, смоченной спиртом.

При наличии в аптеке трубопровода для дистиллированной воды, отбор проб осуществляют из бюретки над столом ассистента и дефектара .

Для оценки санитарного содержания трубопровода, выемки производят непосредственно из трубопровода и затем из бюреток.

Норм качества воды из трубопровода по бактериологическим показателям в настоящее время не имеется, в связи с чем оценка результатов бактериологического исследования дистиллированной воды из трубопроводов производится в соответствии с требованиями ГОСТа 2874-73 "Вода питьевая, методы санитарно-бактериологического анализа".

Пробы дистиллированной воды, используемой для приготовления инъекционных растворов и глазных капель, отбирают в стерильные флаконы лаборатории в количестве 15 - 20 мл непосредственно из баллона сразу же после перегонки или сосудов, в которых стерилизуется вода.

Инъекционные растворы (до стерилизации) отбирают не позднее полутора часов после их приготовления и доставляют в лабораторию в тех же флаконах, в которых они будут подвергнуты стерилизации.

В случае необходимости проведения анализа инъекционных растворов на стерильность, руководствуются указаниями Приказа Министерства здравоохранения СССР N 79 "Об утверждении инструкции по санитарному режиму в аптеках" от 25.02.1957, используя при этом методику, приведенную в приложении N 2 (не приводится).

Глазные капли доставляют в лаборатории непосредственно во флаконах, отпускаемых населению, и в лечебно-профилактические учреждения. Целесообразно отбирать глазные капли 3 - 4-х наименований с продажи и со стола ассистента.

Аптечную посуду (чистые флаконы), приготовленную для розлива лекарственных форм, отбирают в количестве трех штук одинаковой емкости. Флаконы доставляют в лабораторию в укупоренном виде, используя при этом пробки и прокладки, заготовленные для отпуска лекарственных форм.

Пробки (корковые, полиэтиленовые) и прокладки отбирают отдельно прожженным пинцетом и помещают по пять штук в широкогорлые стерильные колбы или банки, закрытые ватно-марлевыми пробками и бумажными колпачками.

Фильтровальные воронки, пипетки, мерные колбы, цилиндры, используемые для приготовления инъекционных растворов, контролируют путем их ополаскивания непосредственно в аптеке 10 мл стерильной водопроводной водой, полученной в пробирках из лаборатории.

Используемые в аптеках пипетки прополаскивают несколько раз в пробирке, содержащей 10 мл стерильной водопроводной воды, пробирки со смывной жидкостью доставляют в лабораторию.

Смывы с инвентаря, оборудования, рук персонала берут стерильными ватными тампонами, помещенными в пробирки с 2 мл физиологического раствора.

1. Исследование дистиллированной воды, используемой для изготовления лекарственных форм (кроме лека рств дл я инъекций и глазных капель), производят в целях определения общего количества микроорганизмов (бактерий, плесневых грибов) в 1 мл и наличия кишечной палочки и бактерий рода Proteus .

а) Определение общего количества микроорганизмов в 1 мл.

Исследуемую воду вносят по 1 мл в две параллельные чашки Петри, которые затем заливают питательным агаром и выдерживают 24 часа при 37 °C и 24 часа при комнатной температуре. После этого подсчитывают число выросших колоний микроорганизмов как на поверхности, так и внутри агара . Подсчет колоний проводится обязательно с помощью лупы, так как колонии бактерий, даже после 48-часового инкубирования , могут быть настолько мелкими, что невооруженным глазом не видны.

При вычислении результатов анализа выводят среднее арифметическое из числа колоний, выросших на обеих чашках.

Кроме того, для выявления плесневых грибов по 0,5 мл исследуемой воды засевают на поверхность двух чашек Петри со средой Сабуро и инкубируют при 20 - 22 °C в течение 3 - 4 суток. Затем подсчитывают число колоний плесневых грибов на обеих чашках. После этого суммируют число бактерий и число грибов, содержащихся в 1 мл воды.

Примечание: При приготовлении питательного агара берут 5 г сухого питательного агара , производства Дагестанского НИИПС, 50 мл бульона и 100 мл воды.

Приготовление среды Сабуро : к одному литру дистиллированной воды добавляют 10 г пептона, 40 г глюкозы или мальтозы, 1,5% агар-агара, PH не устанавливают. Стерилизуют при 110 °C в течение 30 мин.

б) Определение титра группы кишечных палочек.

При определении титра бактерий группы кишечных палочек пользуются методикой действующего ГОСТа 2874-74 (Вода хозяйственно-питьевого водоснабжения. Методы санитарно-бактериологического анализа).

2. Исследование дистиллированной воды для приготовления инъекционных растворов и глазных капель, инъекционных растворов (до стерилизации) и глазных капель осуществляют с целью установления содержания микроорганизмов (бактерий, грибов) в 1 мл, выявления бактерий группы кишечных палочек, определения патогенных стафилококков по эпидпоказаниям .

а) Определение общего количества бактерий производят в соответствии с пунктом "1а";

б) Определение наличия бактерий группы кишечных палочек.

Исследуемые лекарственные формы засевают в количестве 1 мл на 8 - 9 мл разведенной среды Эйкмана . Дальнейший ход исследования и идентификацию бактерий группы кишечных палочек проводят по общепринятой методике. При необходимости количественного определения бактерий групп кишечных палочек: 1 мл лекарственных форм засевают на чашку со средой Э ндо глубинным методом. После инкубации чашки при 37 °C в течение 24 часов учитывают колонии, типичные для кишечной палочки.

3. Исследование сухих лекарственных веществ, используемых для изготовления инъекционных растворов и глазных капель.

Из доставленных сухих лекарственных веществ в лаборатории на стерильной дистиллированной воде готовят растворы в тех же концентрациях, что и инъекционные растворы и глазные капли, изготовляемые в аптеках. Объем и методика исследования приготовленных растворов в соответствии с пунктом "2".

4. Исследование аптечной посуды, пробок, прокладок и смывной жидкости с фильтровальных воронок, пипеток, мерных колб и цилиндров.

В один из трех доставленных флаконов наливают 10 мл стерильной водопроводной воды. Флакон ополаскивают в воду над пламенем горелки, последовательно переливают во 2-й и 3-й флаконы для тщательного их ополаскивания. В банки или широкогорлые колбы, доставленные с пробками, прокладками и т.д., наливают 10 мл воды и тщательно ополаскивают.

В полученной смывной жидкости определяют микробное число и наличие бактерий группы кишечной палочки.

а) Определение общей микробной обсемененности - определяют в соответствии с пунктом "1а". При вычислении результатов - число колоний, установленное в 1 мл смывной жидкости, умножают на 10, что соответствует содержанию колоний микробов на всей смывной поверхности 3-х одноименных предметов.

б) Определение наличия бактерий группы кишечных палочек. 8 мл оставшейся смывной жидкости засевают в 1 мл концентрированной среды Эйкмана и инкубируют в термостате 24 часа при 43 °C.

Дальнейший ход исследования и идентификацию бактерий группы кишечных палочек проводят по общепринятой методике.

5. Исследование смывов с инвентаря, оборудования, рук персонала.

Ориентировочный перечень объектов, подлежащих контролю методом смывов:

1. Рабочее место дефектара .

2. Стол для приготовления инъекционных растворов.

3. Стол для приготовления глазных капель.

4. Руки персонала во время приготовления лекарственных форм.

5. Весы для взвешивания сухих веществ у дефектара .

6. Тара для хранения прокладок и пробок для инъекционных растворов и глазных капель.

8. Пластинки пластмассовые.

11. Весы роговые.

12. Кран водопроводный в ассистентской .

13. Руки персонала.

а) определение наличия бактерий группы кишечных палочек;

б) определение наличия патогенных стафилококков (по показаниям).

а) Определение наличия бактерий группы кишечных палочек.

Доставленный тампон помещают в среду Кесслера . Дальнейший ход исследования и идентификации бактерий группы кишечных палочек проводят по общепринятой методике исследования смывов.

б) Определение наличия патогенных стафилококков.

Смывную жидкость в количестве 3 - 4 капель засевают в 6% солевой бульон. Дальнейший ход исследования и идентификацию проводят по общепринятой методике.

а) При исследовании дистиллированной воды, инъекционных растворов, глазных капель, смывов с аптечного стекла, инвентаря, оборудования и рук персонала иногда отмечается рост синегнойных палочек, для выделения которых специальные посевы можно не производить, так как рост колоний удается обнаружить на среде Э ндо и питательном агаре . На среде Э ндо колонии плоские, желто-красные, без металлического блеска, со специфическим запахом. На питательном агаре колонии широкие, расплывчатые, с просвечивающим краем, неправильные, среда приобретает зеленоватый цвет. При окраске мазков по Граму - они грамотрицательны .

Одним из важных диагностических признаков синегнойной палочки является пигментообразование . С целью обнаружения способности продуцировать пигмент культуры нанесением на питательный агар с 2 - 5% глицерина или маннита .

Для выявления гемолитической способности синегнойной палочки высевы на чашки с кровяным агаром . Колонии дают четкую зону гемолиза, что позволяет их дифференцировать от других флуоресцирующих бактерий рода.

б) При исследовании дистиллированной воды и лекарственных форм необходимо обращать внимание на возможность выявления бактерий рода Proteus . Специального посева для этого можно не проводить, т.к. их удается обнаружить на среде Э ндо в виде ползучего вуалеобразного роста.

Действующее вещество:

Содержание

Фармакологические группы

Нозологическая классификация (МКБ-10)

3D-изображения

Состав

Капли глазные и ушные	1 мл
активные вещества:
фрамицетина сульфат	5 мг
грамицидин	0,05 мг
дексаметазон (в виде натрия метасульфобензоата)	0,5 мг
вспомогательные вещества: лития хлорид; натрия цитрат; лимонной кислоты моногидрат; фенилэтанол (спирт фенилэтиловый); этанол 99,5%; полисорбат 80; вода для инъекций

Описание лекарственной формы

Прозрачный почти бесцветный раствор с запахом спирта фенилэтилового.

Фармакологическое действие

Фармакодинамика

Фрамицетина сульфат — антибиотик из группы аминогликозидов, действует бактерицидно. Обладает широким спектром антибактериального действия, активен в отношении грамположительных микроорганизмов, включая золотистый стафилококк, и большинства клинически значимых грамотрицательных микроорганизмов (кишечная палочка, палочка дизентерии, протей и др.). Малоэффективен в отношении стрептококков. Не действует на патогенные грибы, вирусы, анаэробную флору. Устойчивость микроорганизмов к фрамицетина сульфату развивается медленно.

Грамицидин оказывает бактерицидное и бактериостатическое действие, расширяет спектр антимикробного действия фрамицетина за счет своей активности в отношении стрептококков и анаэробных микроорганизмов. Усиливает эффекты фрамицетина в отношении стафилококков, т.к. тоже обладает противостафилококковым эффектом.

Дексаметазон — ГКС , оказывающий выраженное противовоспалительное, противоаллергическое и десенсибилизирующее действие.

Дексаметазон подавляет воспалительные процессы, угнетая выброс медиаторов воспаления, миграцию тучных клеток и уменьшая проницаемость капилляров.

При закапывании в глаза уменьшает боль, жжение, слезотечение, светобоязнь. При закапывании в уши уменьшает симптомы отита наружного уха (покраснение кожи, боль, зуд, жжение в наружном слуховом проходе, ощущение заложенности уха).

Фармакокинетика

При местном применении системная абсорбция низкая.

Фрамицетина сульфат может всасываться через воспаленную кожу или открытые раны. При поступлении в системный кровоток он быстро выводится почками в неизмененном виде. T_1/2 фрамицетина сульфата составляет 2–3 ч.

При приеме внутрь дексаметазон способен быстро абсорбироваться из ЖКТ . T_1/2 составляет 190 мин.

Показания препарата Софрадекс ®

бактериальные заболевания переднего отрезка глаза (блефариты, конъюнктивиты, кератиты (без повреждения эпителия), иридоциклиты, склериты, эписклериты);

инфицированная экзема кожи век;

отит наружного уха.

Противопоказания

повышенная индивидуальная чувствительность к любому из компонентов препарата;

вирусные или грибковые инфекции, туберкулез, гнойное воспаление глаз, трахома;

нарушение целостности эпителия роговицы и истончение склеры;

герпетический кератит (древовидная язва роговицы) (возможно увеличение размеров язвы и значительное ухудшение зрения);

перфорация барабанной перепонки (проникновение препарата в среднее ухо может привести к развитию ототоксического действия);

период кормления грудью;

дети грудного возраста.

С осторожностью: дети младшего возраста (особенно при назначении препарата в больших дозах и длительно — риск развития системных эффектов и подавления функции надпочечников).

Побочные действия

Аллергические реакции обычно отсроченного типа, проявляющиеся раздражением, жжением, болью, зудом, дерматитом.

При длительном применении ГКС местного действия возможно:

- повышение ВГД с развитием симптомокомплекса глаукомы (поражение зрительного нерва, снижение остроты зрения и появление дефектов полей зрения), поэтому при более чем 7-дневном применении препаратов, содержащих ГКС , следует регулярно измерять ВГД;

- развитие задней субкапсулярной катаракты (особенно при частом закапывании);

- истончение роговицы или склеры, которое может привести к перфорации;

- присоединение вторичной (грибковой) инфекции.

Взаимодействие

Не следует применять фрамицетина сульфат вместе с другими антибиотиками, оказывающими ототоксическое и нефротоксическое действие (стрептомицин, мономицин, канамицин, гентамицин).

Способ применения и дозы

Заболевания глаз: при легком течении инфекционного процесса закапывают по 1–2 капли препарата в конъюнктивальный мешок глаза каждые 4 ч. В случае развития тяжелого инфекционного процесса препарат закапывают каждый час. По мере уменьшения воспалительных явлений частота инстилляций препарата снижается.

Заболевания уха: закапывают по 2–3 капли 3–4 раза в день, в наружный слуховой проход можно закладывать марлевый тампон, смоченный раствором.

Длительность применения препарата не должна превышать 7 дней, кроме случаев явной положительной динамики заболевания (ГКС может маскировать скрыто протекающие инфекции, а длительное использование антимикробных компонентов препарата — способствовать развитию устойчивой флоры).

Передозировка

Симптомы: длительное и интенсивное местное использование может привести к появлению системных эффектов. При проглатывании содержимого одного флакона (до 10 мл раствора) маловероятно развитие серьезных побочных эффектов.

Особые указания

При длительном применении препарата, как и при длительном применении других противомикробных средств, возможно развитие суперинфекций, вызванных устойчивыми к препарату микроорганизмами, включая грибки.

Продолжительное закапывание препарата в глаза может приводить к истончению роговицы с развитием ее перфорации, а также к повышению ВГД . Лечение препаратами, содержащими ГКС , не должно проводиться повторно или длительно без регулярного контроля ВГД , обследования глаз на предмет развития катаракты или вторичных инфекций.

Входящий в состав препарата фрамицетина сульфат является антибиотиком из группы аминогликозидов, которым свойственно развитие нефро- и ототоксических эффектов при системном применении или местном нанесении на открытые раны или поврежденную кожу. Эти эффекты зависят от дозы и увеличиваются при почечной или печеночной недостаточности. Хотя развития этих эффектов не наблюдалось при закапывании препарата в глаза, следует принимать во внимание возможность их возникновения в случае местного применения высоких доз препарата у детей.

Длительность применения препарата не должна превышать 7 дней, кроме случаев явной положительной динамики заболевания, т.к. длительное использование ГКС , входящего в его состав, может маскировать скрыто протекающие инфекции, а длительное использование противомикробных составляющих — способствовать возникновению устойчивой микрофлоры.

Флакон необходимо закрывать после каждого использования. Не следует прикасаться кончиком пипетки к глазу. После вскрытия флакона препарат следует использовать в течение 1 мес.

Пациентам, у которых после закапывания в глаз препарата временно теряется четкость зрения, не рекомендуется сразу после закапывания препарата водить машину или работать со сложной техникой, станками или каким-либо другим сложным оборудованием, требующим четкости зрения.

Форма выпуска

Капли глазные и ушные. По 5 мл во флаконе из прозрачного стекла желтого цвета, укупоренном резиновой пробкой, обтянутой алюминиевым колпачком с пластиковой крышечкой. По 1 фл. вместе с капельницей из ПЭ помещают в картонную пачку.

Производитель

Юридическое лицо, на имя которого выдано регистрационное удостоверение: Санофи Индия Лимитед, Индия.

Производитель/выпускающий контроль качества: Санофи Индия Лимитед, Индия.

Претензии потребителей направлять по адресу в России: 125009, Москва, ул. Тверская, 22.

Тел.: (495) 721-14-00; факс: (495) 721-14-11.

Условия отпуска из аптек

Условия хранения препарата Софрадекс ®

Хранить в недоступном для детей месте.

Срок годности препарата Софрадекс ®

капли глазные и ушные — 2 года. После вскрытия флакона 1 мес

Методические указания разработаны Московской городской санэпидстанцией (Федорова Т.М., Кашинцева И.А.).

Предназначены для бактериологических лабораторий санэпидстанций и лечебно-профилактических учреждений.

В соответствии с Постановлением ЦК КПСС и Совета Министров СССР от 19.08.82 "О дополнительных мерах по улучшению охраны здоровья населения" санитарно-эпидемиологическая служба придает особо важное значение дальнейшему совершенствованию форм осуществления государственного санитарного надзора, значительная роль в котором отводится проведению текущего санитарного контроля. Разработанные Методические указания представляют дополненные по некоторым показателям "Методические указания по микробиологическому контролю в аптеках" N 1201-74 от 04.12.74, внедрение которых будет способствовать повышению эффективности текущего санитарного надзора за режимом аптек.

Методические указания по микробиологическому контролю в аптеках считать утратившими силу.

Объектами бактериологических исследований являются:

1.1. Вода дистиллированная.

1.2. Инъекционные растворы до стерилизации.

1.3. Инъекционные растворы после стерилизации.

1.4. Глазные капли после стерилизации.

1.5. Глазные капли, приготовленные в асептических условиях на стерильных основах.

1.6. Сухие лекарственные вещества, используемые для изготовления инъекционных растворов.

1.7. Аптечная посуда, пробки, прокладки, прочие вспомогательные материалы.

1.8. Инвентарь, оборудование, руки и санитарная одежда персонала.

1.9. Воздушная среда.

Отбор проб для исследования производят сотрудники санитарно-эпидемиологических станций, а при проведении исследований в лечебно-профилактических учреждениях - работники бактериологической лаборатории.

Кратность обследований с отбором проб составляет не менее 2-х раз в квартал.

2.1. Пробы дистиллированной воды, используемой для приготовления лекарственных средств (кроме лекарств для инъекций и глазных капель), отбирают в количестве 30 куб. см в стерильные бутылки с последующим закрытием ватными пробками и бумажными колпачками. Пробы отбирают из бюретки, конец которой предварительно обжигают ватой, смоченной спиртом. При неудовлетворительных результатах анализа отбор пробы проводят из приемника.

При наличии в аптеке трубопровода для дистиллированной воды отбор проб осуществляют из бюретки над столом ассистента и дефектара.

Для оценки санитарного содержания трубопровода выемки дистиллированной воды производят непосредственно из трубопровода и затем из бюреток.

Оценка результатов бактериологического исследования производится в соответствии с требованиями ГОСТ 2874-82 "Вода питьевая".

2.2. Пробы дистиллированной воды, используемой для приготовления инъекционных растворов и глазных капель, отбирают в стерильные флаконы в количестве 15 - 20 куб. см непосредственно из емкостей, в которых осуществляется стерилизация.

2.3. Инъекционные растворы (до стерилизации) отбирают во время их приготовления, но не позднее полутора часов, и доставляют в лабораторию в тех же флаконах, в которых они будут подвергнуты стерилизации.

2.4. Инъекционные растворы, глазные капли после стерилизации и приготовленные асептическим способом доставляют в аптечной упаковке.

2.5. Глазные капли из торгового зала аптек доставляют непосредственно во флаконах, отпускаемых в лечебно-профилактические учреждения и населению. Целесообразно отбирать глазные капли 3 - 4 наименований как со стола ассистента, так и прилавка.

2.6. Отбор сухих лекарственных веществ проводят стерильными ложками в стерильную посуду лаборатории в количестве 30 - 50 г. В случае, если вещество таблетированное, то отбирают фламбированным пинцетом в стерильную посуду лаборатории в количестве 30 - 50 г.

2.7. Аптечную посуду, подготовленную для розлива инъекционных растворов и глазных капель, отбирают в момент приготовления их в количестве трех штук одинаковой емкости. Флаконы доставляют в лабораторию в укупоренном виде, используя при этом пробки и прокладки, для отпуска лекарственных средств.

2.8. Пробки (корковые, полиэтиленовые) и прокладки отбирают в момент приготовления инъекционных растворов и глазных капель пинцетом после фламбирования и помещают по пять штук в широкогорлые стерильные колбы или банки с последующим закрытием стерильными ватно-марлевыми пробками и бумажными колпачками.

2.9. Фильтровальные воронки, пипетки, мерные колбы, цилиндры, используемые для приготовления инъекционных растворов, контролируют путем ополаскивания их 10 куб. см стерильной водопроводной воды.

2.10. Используемые в аптеках пипетки прополаскивают несколько раз в пробирке, содержащей 10 куб. см стерильной водопроводной воды, пробирки со смывной жидкостью доставляют в лаборатории для исследования.

2.11. Смывы с инвентаря, оборудования, рук и санитарной одежды персонала аптеки осуществляют с помощью ватных тампонов, помещенных в пробирки с 2 куб. см 0,85% раствора хлорида натрия или 0,1% пептонной воды.

2.12. Пробы воздуха отбирают в следующих помещениях:

- в асептическом блоке, стерилизационной;

- ассистентской, фасовочной, комнате дефектара и материальной;

- в зале обслуживания.

Отбор проб воздуха производят при соблюдении следующих условий:

- чистое подготовленное к работе помещение;

- закрытые форточки и двери;

- определение в помещении % относительной влажности воздуха;

- уровень высоты отбора проб воздуха соответствует высоте рабочего стола;

- не ранее чем за 30 мин. после влажной уборки помещения.

Пробы воздуха отбирают аспирационным методом с помощью приборов для бактериологического анализа воздуха: модель 818 (прибор Кротова), ПОВ, ПАБ. Скорость протягивания воздуха должна составлять 25 литров в минуту, количество пропущенного воздуха - 100 литров для определения общего количества бактерий; 250 литров для определения золотистого стафилококка и 250 литров для определения плесневых и дрожжевых грибов.

Для определения общего содержания бактерий в 1 куб. м отбор производят на 2% питательный агар, разлитый в чашки по 12 - 15 мл. Для определения золотистого стафилококка используют желточно-солевой агар, для определения плесневых и дрожжевых грибов - среду Сабуро.

3.1. Исследования дистиллированной воды, используемой для приготовления лекарственных средств (кроме лекарств для инъекций и глазных капель).

3.1.1. Определение количества мезофильных аэробных и факультативных анаэробных бактерий в 1 куб. см дистиллированной воды.

Исследуемую воду вносят по 1 куб. см в две параллельные чашки Петри, которые затем заливают питательным агаром и выдерживают 24 часа при температуре 37 град. C и 24 часа при комнатной температуре. После этого подсчитывают число выросших колоний как на поверхности, так и внутри питательного агара. Подсчет колоний проводится обязательно с помощью лупы, так как колонии бактерий даже после 48-часового инкубирования могут быть настолько мелкими, что невооруженным глазом не видны.

При вычислении результатов анализа выводят среднее арифметическое из числа колоний, выросших на обеих чашках.

Для выявления плесневых и дрожжевых грибов засевают по 0,5 куб. см исследуемой воды на поверхность двух чашек Петри со средой Сабуро и инкубируют при температуре 20 - 22 град. C в течение 3 - 4 суток. Затем подсчитывают число колоний плесневых и дрожжевых грибов на обеих чашках.

Результаты оценивают по общему количеству непатогенных микроорганизмов путем суммирования числа бактерий, выросших на чашках с питательным агаром и на среде Сабуро .

Приказ Минздрава СССР N 537 от 30.11.62, приложение N 1.

3.1.2. Определение титра бактерий группы кишечной палочки .

Методика действующего Госстандарта 18963-73 "Вода питьевая. Методы санитарно-биологического анализа".

3.2. Исследование дистиллированной воды для приготовления инъекционных растворов и глазных капель, инъекционных растворов до стерилизации и глазных капель, приготовленных в асептических условиях на стерильных основах.

3.2.1. Определение количества мезофильных аэробов и факультативных анаэробов производят в соответствии с пунктом 3.1.1.

3.2.2. Определение наличия бактерий группы кишечных палочек в 1,0 куб. см.

Лекарственные средства засевают в количестве 1 г (куб. см) на 9 куб. см разведенной глюкозо-пептонной среды, среды Кесслер и Кода. Посевы выращивают при температуре 37 град. C в течение 18 - 24 часов с дальнейшим высевом секторами на среду Эндо, последнюю инкубируют при температуре 37 град. C 18 - 24 часа и проводят просмотр посевов. Из подозрительных колоний делают мазки, красят по Граму и микроскопируют. При наличии грамотрицательных палочек оставшуюся часть колоний пересевают на глюкозо-пептонной среду с поплавком, инкубируют при 37 град. C в течение 18 - 24 часов. Наличие кислоты и газа на глюкозо-пептонной среде обусловливает содержание бактерий группы кишечных палочек.

3.2.3. Количественное определение бактерий группы кишечных палочек.

1 г (куб. см) лекарственных средств засевают на чашку и заливают средой Эндо, т.е. применяют глубинный метод посева. После инкубации посевов при температуре 37 град. C в течение 18 - 24 часов учитывают колонии, типичные для бактерий группы кишечной палочки.

3.3. Исследование сухих лекарственных веществ, используемых для приготовления инъекционных растворов и глазных капель.

Исследования проводят в случаях неоднократных неудовлетворительных бактериологических анализов, превышения норм предельно допустимого содержания непатогенных микроорганизмов , при удовлетворительных результатах анализов дистиллированной воды, используемой для их приготовления, при удовлетворительных данных бактериологического контроля посуды, флаконов, пробок, прокладок. Результаты, полученные при исследовании сухих лекарственных веществ, служат одним из оснований для выбора партии при приготовлении инъекционных растворов.

Приказ Минздрава СССР N 537 от 30.11.62, приложение N 1.

Сухие лекарственные вещества разводятся стерильной дистиллированной водой с целью создания соответствующих концентраций инъекционным растворам и глазным каплям, изготовляемым в аптеках. Объем и методика исследования приготовленных растворов см. пункт 3.2.

Результаты, полученные при исследовании сухих веществ в растворах, должны соответствовать требованиям приложения Приказа N 573, такие же требования предъявляются к глазным каплям, приготовленным в асептических условиях на стерильной основе.

3.4. Исследования аптечной посуды, пробок, прокладок, воронок, цилиндров.

3.4.1. Подготовка к исследованию.

Три одноименных флакона, доставленные в лабораторию, последовательно ополаскивают в 10 куб. см стерильной водопроводной воды. Воду из флакона во флакон переливают над пламенем горелки, тщательно споласкивая каждый флакон.

В банки или широкогорлые колбы с доставленными пробками и прокладками наливают 10 куб. см стерильной водопроводной воды и тщательно споласкивают.

3.4.2. Определение в смывной жидкости:

- количество мезофильных аэробных и факультативно анаэробных бактерий (см. пункт 3.1). Число колоний, установленное в 1 куб. см смывной жидкости, умножают на 10, что соответствует содержанию бактерий на всей смывной поверхности 3-х одноименных предметов;

- определение наличия бактерий группы кишечных палочек: 8 куб. см оставшейся смывной жидкости засевают в 1 куб. см концентрированной глюкозо-пептонной среды и инкубируют при температуре 37 град. C в течение 18 - 24 часов. Дальнейший ход исследования и идентификацию бактерий группы кишечных палочек проводят по пункту 3.1.

3.4.3. Интерпретация результатов бактериологических исследований:

- количество мезофильных аэробов и факультативных анаэробов не должно превышать 150 колоний с 3-х флаконов, 5-ти пробок, 5-ти прокладок (т.е. в 10 куб. см смывной жидкости);

- бактерии группы кишечной палочки не допускаются.

3.5. Методика исследования воздуха.

Доставленные чашки с посевами на питательном агаре и желточно-солевом агаре инкубируют в термостате при 37 град. C в течение 24 часов, посевы на желточно-солевом агаре дополнительно выдерживают еще 24 часа при комнатной температуре. Посевы на среде Сабуро инкубируют при температуре 22 - 28 град. C 4 суток.

Для определения общей бактериальной обсемененности через 48 часов посевы просматривают, подсчитывают количество выросших колоний и производят пересчет на 1 куб. м.

Для определения количественного содержания золотистого стафилококка просматривают посевы на желточно-солевом агаре после 48-ми часов инкубации, колонии, подозрительные на стафилококк, подсчитывают и проводят идентификацию . После идентификации производят пересчет полученных результатов на 1 куб. м воздуха.

Приложение N 2 к Приказу Минздрава СССР N 720 от 31.07.78.

Для количественного определения плесневых и дрожжевых грибов после 96-часовой инкубации подсчитывают количество выросших колоний плесневых и дрожжевых грибов и производят пересчет на 1 куб. м.