Исследования на паразитарные заболевания современными методами

Основой диагностики паразитарных болезней, в частности гельминтозов, являются результаты лабораторных исследований, которые выявляют непосредственно возбудителей, их антигены или антитела к ним.

Гельминтозы развиваются в результате инвазии (заражения) организма окончательного хозяина (человека или животного), используемого как место обитания гельминтов и источника их питания. Часто болезни протекают без выраженных специфических клинических симптомов, что не всегда позволяет поставить диагноз по клинической картине.

Диагностика гельминтозов должна быть комплексной и основываться на данных эпидемиологического анамнеза, клиники заболевания и лабораторных исследований.

Специфика биологии каждого конкретного вида гельминта диктует необходимость различной тактики лабораторных исследований, которая направлена на обнаружение в одних случаях гельминтов или их фрагментов, а в других – их личинок, яиц или специфических иммуноглобулинов.

Материал для исследования берется в зависимости от подозрения на наличие у больного того или иного гельминтоза, так как пути выделения яиц, личинок или фрагментов паразитов из организма человека могут быть разными.

Для геогельминтов характерен кишечный (интестинальный) путь выделения яиц и личинок из организма больного человека. Большинство гельминтов, яйца которых выводятся через кишечник, паразитируют в пищеводе, желудке, кишечнике, а также попадают в кишечник при миграции через легкие, бронхи, трахеи, гортань, когда происходит заглатывание яиц и личинок со слизью при кашле. Этот путь присущ трематодам, цестодам и многим нематодам (в частности, геогельминтам). Материалом для исследования служат фекалии (кал). При исследовании проб фекалий обнаруживаются яйца и личинки многих гельминтов.

Паразитологические методы лабораторных исследований применяются:

  • с диагностической целью;
  • для контроля эффективности лечения;
  • для оценки качества проведенного комплекса лечебно-профилактических мероприятий;
  • для установления уровня пораженности населения (при профосмотрах)

Лабораторная диагностика является важным методом при паразитарных заболеваниях. В то же время качество лабораторной диагностики зависит от множества факторов, таких как надлежащая подготовка пациента к лабораторному обследованию, правильный забор материала для исследования и выбор оптимальной методики, квалификация и опыт специалиста-лаборанта.

Для верификации диагноза важно обеспечить следующее:

  • сбор данных эпидемиологического анамнеза;
  • определение соответствующего материала для исследования, правильно собранного и доставленного вовремя;
  • выбор и применение соответствующего метода идентификации паразита;
  • правильная идентификация паразита;
  • правильная интерпретация результатов исследования.

Cбор материала для гельминтологических исследований включает следующие шаги:

  1. Для исследования собирают фекалии из любой чистой емкости немедленно после дефекации.
  2. Не допускается сбор образцов фекалий из унитаза.
  3. Для детей возможен сбор образца с пеленки, подгузника или горшка.
  4. Используя ложку в крышке контейнера, собрать не менее чем из трех точек стула.
  5. Испражнения для анализов должны доставляться в лабораторию не позднее одних суток после дефекации, а при подозрении на стронгилоидоз – немедленно.
  6. Если по каким-либо причинам доставка в лабораторию затруднена, то необходимо хранить материал при температуре +4–8 °C. Рекомендуется использование консерванта, и тогда исследование можно проводить в течение 3–10 дней после дефекации.

Методы лабораторной диагностики гельминтозов

Методы гельминтологических исследований делятся на прямые и опосредованные (косвенные).

Прямые методы: выявление самих гельминтов, их фрагментов, яиц, личинок в фекалиях, моче, дуоденальном секрете, мокроте и др.

Опосредованные (косвенные) методы: выявление вторичных изменений, возникающих в организме человека в результате жизнедеятельности паразита, путем серологических реакций, общего исследования крови, мочи.

Основным методом лабораторной диагностики глистных инвазий является обнаружение яиц или личинок гельминтов в фекалиях. Наиболее распространенными методами исследования фекалий являются гельминтокопроскопические.

Гельминтокопроскопия – это совокупность методов взятия, обработки и исследования (макро- и микроскопического) проб фекалий человека с целью обнаружения в них яиц, личинок гельминтов, их фрагментов. Она включает следующие виды исследований:

  • копроовоскопия (исследование фекалий на яйца гельминтов);
  • копроларвоскопия (исследование фекалий на личинки гельминтов);
  • макроскопия фекалий (обнаружение фрагментов или зрелых гельминтов в фекалиях).

Микроскопические методы подразделяются на простые, сложные и специальные.

К простым относятся метод нативного мазка и метод толстого мазка под целлофаном по Като – Кац.

Сложные методы, или методы обогащения, основаны на феномене разных удельных весов яиц гельминтов и применяемых реагентов. При обработке фекалий этими растворами происходит концентрация яиц на поверхности раствора или в осадке, в результате чего увеличивается эффективность поиска.

Различают следующие методы обогащения:

  • флотационные (когда используют солевые растворы, удельный вес которых выше удельного веса яиц гельминтов, в результате чего они всплывают в поверхностную пленку, которую и исследуют);
  • седиментационные (когда используют растворы, удельный вес которых меньше удельного веса яиц гельминтов, в результате чего они оседают, образуя осадок).

Методом седиментации возможно определить следующие гельминтозы: описторхоз, клонорхоз, фасциолез, дикроцелиоз, метагонимоз, нанофиетоз, дифиллоботриоз, гименолепидоз, аскаридоз, трихоцефалез, анкилостомидозы, стронгилоидоз, трихостронгилез, некатороз, шистосомоз, кишечные протозоозы (лямблиоз,криптоспоридиоз, изоспороз)

Специальные методы чаще всего необходимы для обнаружения личинок гельминтов. Группа специальных методов направлена на диагностику конкретного геогельминтоза, применяемый метод специфичен только для данного гельминта.

Модификация эфир-формалинового метода седиментации
одноразовыми системами для проведения копрологического исследования

С развитием паразитологии в лечебную практику стали применяться одноразовые системы для копрологического исследования, предназначенные для эффективного концентрирования яиц и личинок гельминтов модифицированным эфир-формалиновым методом.

Системы для копрологического исследования являются одноразовыми и состоят из нескольких элементов:

  • пробирка для образца, в которую имеется готовая смесь для фиксации образца фекалий и последующей седиментации
  • пробирка с системой фильтров и шпателем для забора образца;
  • коническая емкость для сбора отфильтрованного материала.

Система фильтров способствует оседанию грубых частиц непереваренной пищи и клетчатки в смесительной камере, а жидкая часть с выделившимися в нее паразитами, яйцами паразитов под давлением фильтруется и центрифугируется в конической пробирке.

После получения взвеси систему помещают в центрифугу и центрифугируют при скорости 2500–3000 об/мин в течение 1–3 минут, при скорости 1500 об/мин – 5 минут. В конической части пробирки остается жидкая часть пробы с выделившимися в нее яйцами гельминтов, цистами простейших. Отсоединяют модуль с фильтром и утилизируют после обеззараживания. Коническая часть пробирки остается для микроскопирования. Для этого из нижней части пробирки с помощью пипетки переносят на предметное стекло 2 капли пробы осадка. Микроскопируют при увеличении: окуляр x10, объективы x10, x40.


Преимущества использования одноразовых систем для копрологических исследований:

  • повышает выявляемость возбудителей;
  • уменьшает расход реагентов;
  • снижает опасность контаминации, исключая контакт персонала с исследуемыми образцами;
  • улучшает стандартизацию метода, повышает достоверность анализа;
  • исключает подготовку и повторную обработку посуды, а также сокращает количество отходов в процессе проведения исследования

Аннотация научной статьи по прочим медицинским наукам, автор научной работы — Асланова Мария Михайловна, Кузнецова К.Ю., Морозов Е.Н.

Проведен аналитический обзор существующих методов определения паразитарного патогена в биологическом материале и образцах из окружающей среды, применяемых в отечественной и зарубежной практике здравоохранения. Продемонстрированы все возможные методические приемы для установления диагноза паразитарного заболевания и паразитарного загрязнения внешней среды как взаимосвязанных факторов, отягчающих безопасность среды обитания .

Похожие темы научных работ по прочим медицинским наукам , автор научной работы — Асланова Мария Михайловна, Кузнецова К.Ю., Морозов Е.Н.

EFFECTIVE LABORATORY TESTING IS A BASIS OF MONITORING PARASITIC DISEASES

Existing methods of determining parasitic pathogen in biological material and environmental samples used in domestic and foreign practice of public health have been reviewed. All possible methodical receptions for establishment of the diagnosis of a parasitic disease and parasitic pollution of environment as the factors interconnected and aggravating safety of habitat are shown.

ЗНиСО ЯНВАРЬ №1 (274)

ЭФФЕКТИВНАЯ ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА -ОСНОВА МОНИТОРИНГА ПАРАЗИТАРНЫХ БОЛЕЗНЕЙ

М.М. Асланова1, К.Ю. Кузнецова2, Е.Н. Морозов2

Проведен аналитический обзор существующих методов определения паразитарного патогена в биологическом материале и образцах из окружающей среды, применяемых в отечественной и зарубежной практике здравоохранения. Продемонстрированы все возможные методические приемы для установления диагноза паразитарного заболевания и паразитарного загрязнения внешней среды как взаимосвязанных факторов, отягчающих безопасность среды обитания. Ключевые слова: лабораторная диагностика, паразитарные болезни, среда обитания, методы исследований биологического материала.

M.M. Aslanova, K.Yu. Kuznetsova, E.N. Morozov □ EFFECTIVE LABORATORY TESTING IS A BASIS OF MONITORING PARASITIC DISEASES □ FBHI FCH&E of the Inspectorate for Customers Protection of Rospotrebnadzor, Moscow, Russia; Martsinovsky Research Institute of Medical Parasitology and Tropical Medicine of Sechenov First Moscow State Medical University, Moscow, Russia.

Existing methods of determining parasitic pathogen in biological material and environmental samples used in domestic and foreign practice of public health have been reviewed. All possible methodical receptions for establishment of the diagnosis of a parasitic disease and parasitic pollution of environment as the factors interconnected and aggravating safety of habitat are shown.

Key words: laboratory diagnosis, parasitic diseases, habitat, research methods biological material.

Верификация и видовая идентификация патогенов паразитарной природы являются основой диагностики паразитарных болезней и показателей биологической безопасности среды обитания. Они базируются на применении специфических лабораторных методов исследования. Развитие лабораторных технологий, в том числе в области паразитологических исследований, направлено на обеспечение точности, воспроизводимости и прослеживаемости этапов исследований и их стандартизации [2, 12].

Цель исследования — определить методы установления диагноза паразитарного заболевания и паразитарного загрязнения внешней среды как взаимосвязанных факторов, отягчающих безопасность среды обитания.

Материалы и методы. В целях формирования структуры эпидемиологической значимости качественных лабораторных исследований объектов окружающей среды и клинического материала от людей при паразитозах был использован анализ данных многолетних исследований в системе паразитологического мониторинга за объектами окружающей среды и заболеваемостью.

Результаты исследования. По данным мировой научной литературы, в настоящее время известно 1415 патогенов — возбудителей инфекционных и паразитарных болезней, из них 353 являются возбудителями паразитарных болезней.

Разработаны отечественными учеными и применяются в практической службе здравоохра-

нения России более 60 методов и модификаций паразитологических исследований биологических выделений из организма человека, около 40 методов санитарно-паразитологических исследований объектов внешней среды. Сюда входят не только традиционные макро- и микроскопические методы паразитологических исследований, но и новые методические разработки, прошедшие научные и экспериментальные испытания, а также наглядное пособие всех изображений форм и стадий развития возбудителей паразитарных болезней [1, 2, 13].

Современный этап развития паразитологических лабораторных исследований позволяет проводить комплексную оценку паразитарной системы с использованием микроскопических, иммунных, иммунохимических и высокотехнологических методов анализа, в том числе метода ПЦР и применение комплекса автоматизированной микроскопии. [5, 15].

Характер течения иммунологического процесса при гельминтозах во многом определяется вирулентностью возбудителя — индивидуальной, приобретенной в процессе предшествующего онтогенетического развития, штаммовой или расовой степенью патогенности возбудителя, проявляющихся на данном хозяине в определенных конкретных условиях [3, 4].

К отличительным особенностям патогенных гельминтов и простейших за редким исключением относят: неспособность паразитов размножаться вне организма хозяина; своеобразие путей миграции; воздействие на органы и ткани

в процессе их стадийного развития, в частности |— травматического, что вызывает иммунный ответ

микроорганизма. ^э В связи с этим иммунологические методы исследования при их диагностике являются i-^ основными. В настоящее время применяют иммуноферментный анализ (ИФА), реакцию Е непрямой гемагглютинации (РНГА), реакцию непрямой иммунофлуоресценции (РНИФ), иммунохроматографический экспресс-метод для определения антигенов патогенных простейших в пробах кала [1, 4].

На территории Российской Федерации разрешены к применению наборы реагентов:

1) для иммуноферментного выявления:

— иммуноглобулинов класса A, M, G — к антигену Toxoplasmagondii в сыворотке (плазме) крови;

— иммуноглобулинов класса M, G — к антигенам Trichinellaspiralis, Opisthorchisfelineus в сыворотке (плазме) крови;

— иммуноглобулинов класса G — к антигенам Anisakisspp., Ascarislumbricoides, Clonorchissinensis, Echinococcusgranulosus, Entamoebahistolytica, Leishmaniaspp., Schistosomamansoni, Taeniaso-lium (Cysticercuscellulosae), Toxocaraspp, Stron-giloidesstercoralis, Fasciolahepatica, Trypanosomacruzi в сыворотке (плазме) крови;

— иммуноглобулинов класса A, G — к антигенам Trichomonasvaginalis в сыворотке (плазме) крови;

2) для иммуноферментного определения индекса авидности иммуноглобулинов класса G — к Toxoplasmagondii в сыворотке крови;

3) для иммуноферментного выявления специфических циркулирующих иммунокомплексов, содержащих антигены Opisthorchisfelineus в сыворотке крови;

4) для иммуноферментного определения концентрации аллергенспецифических IgE — к антигенам паразитов с биотинилированными аллергенами Ascarislumbricoides, Echinococcusgranulosus, Opisthorchisfelineus, Trichinellaspiralis, Toxocaracanis, Lamblia intestinalis, Anisakis simplex в сыворотке (плазме) крови;

5) для иммуноферментного выявления антигена Lamblia intestinalis, Cryptosporidiumparvum в суспензии фекалий;

6) наборы реагентов для экспресс-диагностики кишечных инфекций: лямблиоза, криптоспори-диоза, амебиаза в пробах кала.

Более девяти видов наборов реагентов для иммуноферментного выявления иммуноглобулинов к известным возбудителям паразитарных болезней разработаны в НИИМПиТМ им. Е.И. Марциновского и внедрены в отечественное производство [1, 5, 6].

Среди экспресс-методов диагностики инфекционных и паразитарных болезней особое место занимают иммуносорбционные методы или методы иммунофлуоресценции. Иммунологические методы эффективны при гельминтозах, возбудители которых обитают непосредственно в тканях или в ранней фазе развития мигрируют по кровеносному руслу и внутренним органам хозяина. [11]. Метод объединил микроскопию с принципом иммунологического анализа.

Иммунофлуоресценции обладает двумя основными преимуществами по сравнению с другими методами исследования: устанавливает локализацию антигенов в зараженном материале или клетке и визуализирует и проводит ускоренную их идентификацию в исследуемом материале — биологическом и санитарном. Применяют два основных варианта этой методики — прямую и непрямую иммунофлуоресценцию.

Новым этапом усовершенствования общепринятых методов лабораторных исследований стало применение сорбентов с магнитными свойствами для выделения и последующей идентификации различных микроорганизмов и их антигенов. Магнитоиммуносорбенты используют в качестве твердой фазы для селективного концентрирования на их поверхности различных антигенов и микроорганизмов. Широкий диапазон объемов исследуемых проб жидкостей и возможность исследования сильнозагрязненных объектов определяют преимущественный выбор данного метода в санитарной паразитологии [9, 10].

Становление молекулярной паразитологии и нового в ней направления — метода полимеразной цепной реакции (ПЦР) — является качественно новой областью лабораторного мониторинга паразитарной заболеваемости населения и состояния среды обитания по показателям паразитарной чистоты. Применение метода ПЦР в качестве лабораторного контроля критических уровней нахождения паразитарного патогена в исследуемых образцах основана на обеспечении принципа методологического единообразия и интерпретации результатов проводимых исследований. По сравнению с традиционными методами диагностики ПЦР обладает более высокой чувствительностью, специфичностью и позволяет проводить прямое определение микроорганизма непосредственно в клиническом материале без получения чистой культуры возбудителя, что снижает трудозатраты [10].

Метод ПЦР позволяет с высокой степенью точности проводить диагностику ВИЧ-ассоциированных паразитозов — висцерального лейшманиоза, токсоплазмоза, кишечных прото-зойных инфекций — амебиаза, криптоспоридиоза, лямблиоза и бластоцистоза. Их клиническую и лабораторную диагностику затрудняет либо по-лиморфность возбудителя, либо клиническое разнообразие симптомокомплексов и особенности эпидемиологии и эпизоотологии очагов [8]. В частности, лейшманиозы, вызванные Ъ. braziliensis, L. aethiopica и L. Donovani, могут проявиться в кожной и висцеральной форме болезни или иметь сходные клинические проявления с другими заболеваниями, при этом затрачивается многочасовой метод культивирования, их выявление и видовое определение. Метод ПЦР применяется для прямой диагностики и идентификации различных клинических проявлений лейшманиоза [5].

Актуальность этой проблемы для России определена эндемичными территориями Крыма и Северного Кавказа.

Возбудители бластоцистоза долгое время относились к условно-патогенной группе микроорганизмов. Многочисленные данные отечественной

ЗНиСО ЯНВАРЬ №1 (274)

и зарубежной науки в настоящее время указывают на этиологическое и патогенетическое значение возбудителя в развитии диарейного синдрома. По статистическим данным, зараженность бластоци-стами у лиц с диарейным синдромом составила в среднем 30 %, из них у взрослых — 38,3 %, у детей — 25,4 %. В 56 сомнительных случаях бластоцистоза затруднения диагностики были связаны с наличием морфологически измененных форм возбудителя после самолечения и при микст-инфекциях. В этих случаях применялись комбинированные методы микроскопической диагностики — метод ФЭО, нативный мазок, посев на специальные среды [10].

В других исследованиях диагностика B. hominis проводилась методом ПЦР: из 32 проб, содержащих бластоцисты микроскопически, в 94 % был отмечен положительный результат; в 36 пробах, не содержащих бластоцисты, положительный результат был получен в восьми случаях, что подтверждает высокие критерии чувствительности и специфичности метода ПЦР для полиморфной детекции возбудителя при его невысокой концентрации в исследуемых образцах [9].

Внедрение метода ПЦР в лабораторную диагностику дирофиляриоза и видовой дифференциации возбудителя в крови у больных и в организме комаров (D. repens, D. immitis) являются новейшими разработками отечественной науки [11].

Хорошо известны эпидемиологические последствия малярии для отдельно взятых стран и клиническое значение для самого больного. Первоочередные задачи национальных программ по борьбе с малярией в эндемичных странах определяют временные критерии снижения заболеваемости, сохранение и закрепление достигнутых результатов [6].

В достижении поставленных целей лабораторная диагностика малярии является ответственным звеном клинико-эпидемиологической работы по выявлению больного и паразитоносителя, видового определения паразита, особенно при микст-инфекциях, и контроля эффективности лечения [6, 9].

метода в пределах 2—4 паразитов в 1 мкл крови. Применение данного метода позволяет достоверно I— подтвердить отсутствие заболевания и результаты достижения целевых программ элиминации ^э малярии на эндемичных территориях [9, 13].

Наиболее распространенные методы лабораторной диагностики кишечных гельминтозов -^з и протозойных болезней, а также санитарно- е паразитологические методы определения возбудителей во внешней среде основаны на применении микроскопических методов исследования. Микроскопия позволяет достаточно быстро провести видовую диагностику паразита, но результаты во многом зависят от квалификации исследователя. Положительной тенденцией является общий современный тренд нарастающего применения электромеханических моторизованных элементов автоматизации рутинных операций микроскопии [7, 8, 16].

В роботизированной модели МЕКОС-Ц2 использованы оригинальные методы обнаружения и распознавания паразитологических объектов, оригинальная система сбора данных о функционировании автоматических функций с использованием особенностей архитектуры аппарата и промежуточных фиксируемых моделей препаратов каждого уровня распознавания биоматериала. Работа на данном аппарате предлагает два режима эксплуатации: ручной микроскопии и комплекса автоматизированной микроскопии (КАМ) с автоматическими функциями сканирования и анализа изображений препарата.

Применение КАМ позволяет увеличить чувствительность и воспроизводимость диагностически значимой морфологии в 2—5 раз по сравнению с применяемыми современными методиками исследований. Ошибка распознавания объектов поиска при данном режиме работы не превышает статистический показатель ошибки анализа и позволяет в 1,5—2 раза повысить точность дифференциальной диагностики широкой группы паразитарных и других патологий, увеличить выявляемость искомых патогенов. Дальнейшие технические и технологические разработки КАМ проводятся в направлении расширения функций анализа на биоматериалы разных типов и объектов окружающей среды на базе так называемых проточных технологий [1, 2].

Выводы. Результаты анализа состояния лабораторных технологий показывают, что современная номенклатура исследований биологического ма-

териала и объектов окружающей среды предлагает большой выбор унифицированных методик для практического применения и решения главной государственной задачи по формированию достоверного статистического слежения за уровнем заболеваемости населения паразитарными болезнями и состоянием среды обитания.

Следует учитывать также заболеваемость населения паразитозами на каждой конкретной администативной территории субъектов Российской Федерации и рационально планировать необходимые исследования в соответствии со структурой эпидзначимости объектов окружающей среды.

Необходимо также осуществлять: дальнейшую разработку и усовершенствование методов и средств профилактики и борьбы с социально значимыми паразитарными болезнями, включая совершенствование систем эпидемиологического надзора за паразитозами и комплекса мер по санитарной охране территории страны от завоза тропических болезней; оптимизацию методов диагностики и терапии паразитарных болезней; изучение экологии и биологии переносчиков, природных хозяев и возбудителей паразитозов; разработку новых методов и средств борьбы с переносчиками и регуляции численности природных хозяев возбудителей.

1. Асланова М.М. Диагностика криптоспоридиоза // Здоровье населения и среда обитания. 2015. № 7 (268). С. 49—50.

2. Асланова М.М. и др. Сравнительный анализ эффективности методов диагностики криптоспоридиоза / М.М. Асланова, Т.Г. Сыскова, Е.А. Черникова // Здоровье населения и среда обитания. 2012. № 10 (235). С. 36—37.

3. Бронштейн А.М. и др. Первый в России аутохтонный случай выявления длительной микрофиляриемии Dirofilaria repens и первый опыт комбинированной терапии дирофиляриоза repens / А.М. Бронштейн, Н.А. Малышев, С.Н. Жаров [и др.] // Эпидемиология и инфекционные болезни. 2013. № 3. С. 47—52.

4. Булат С.А. и др. Идентификация маркерных штаммов Leishmaniamajor, L. turanica, L. gerbilli методом полимеразной цепной реакции с универсальным праймером / С.А. Булат, М.В. Стрелкова, В.В. Сысоев // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. 1992. № 1. С. 21—22.

5. Жиренкина Е.Н. Изучение лейшманиозов методом полимеразной цепной реакции // Сеченовский вестник. 2012. № 1. С. 49—53.

6. Кондрашин А.В. и др. Тенденции в борьбе с малярией в мире. Прогресс и актуальные задачи в программах борьбы с малярией / А.В. Кондрашин, А.М. Баранова,

Л.Ф. Морозова [и др.] // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. 2011. № 4. С. 3—8.

7. Кузнецова К.Ю. Автоматизация лабораторной диагностики гельминтозов (экспериментальные исследования) // Автореф. дисс. . канд. мед. наук. М., 2005. 28 с.

8. Медовый В.С. и др. Современные возможности роботизированной микроскопии в автоматизации анализов и лабораторной телемедицине (аналитический обзор) / В.С. Медовый, А.М. Пятницкий, Б.З. Соколинский [и др.] // Клиническая лабораторная диагностика. 2012. № 10. С. 32—43.

9. Морозов Е.Н. Перспективы применения методов молекулярной паразитологии в мониторинге социально значимых паразитозов // Справочник заведующего КДЛ. 2011. № 4. С. 13—20.

10. Морозов Е.Н. и др. Молекулярная диагностика паразитарных болезней / Е.Н. Морозов, К.Ю. Кузнецова // Инфекционные болезни. 2014. № 1. С. 36—37.

11. Морозов Е.Н. и др. Дирофиляриоз человека: клинико-диагностические признаки и методы диагностики / Е.Н. Морозов, В.Г. Супряга, В.М. Ракова [и др.] // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. 2014. № 2. С. 13—17.

12. Национальный стандарт Российской Федерации. Технологии лабораторные клинические. Обеспечение качества клинических лабораторных исследований. Часть 4. Правила ведения преаналитического этапа: ГОСТ Р 53079.4—2008 (утв. и введен в действие приказом Ростехрегулирования от 18.12.2008 № 554-ст).

Диагностика инфекций (infectio – перевод с латинского – заражение). Инфекционные заболевания человека представляют собой группу болезней, вызываемых специфическими болезнетворными возбудителями, которые могут передаваться от зараженного человека здоровому. Нередки и случаи передачи патогенных агентов человеку от носителей инфекций или заболевших животных (зоонозные заболевания). Следует отметить, что большинство зоонозных инфекционных заболеваний не передается от человека к человеку. У человека и животных (домашних и диких плотоядных) насчитывают более 300 общих инфекционных возбудителей, из которых более 80 заболеваний вызываются бактериями, свыше 100 – вирусами, около 20 - грибами, 80 заболеваний связано с заражением гельминтами и около 20 - простейшими.

Известны инфекционные болезни, вызываемые, так называемыми арбовирусами – вирусами, передающимися людям через укусы насекомых, например клещей, комаров, блох и др., которые инфицируются от домашних или диких животных. Самая распространенная известная арбовирусная инфекция – клещевой энцефалит. Вирус геморрагической лихорадки также передается клещами. Как известно, клещи являются переносчиками и бактериальных инфекций, например клещевого боррелиоза (болезнь Лайма) или туляремии, хотя туляремию относят к зоонозным заболеваниям, передающимся человеку при непосредственном контакте с больными животными (грызунами), а также при употреблении зараженных продуктов или воды (алиментарный путь заражения). Таким образом, для каждой инфекции у человека характерен свой возбудитель и определенный путь передачи. Возбудителями инфекций могут быть бактерии, вирусы, риккетсии (микроорганизмы, сочетающие в себе особенности бактерий и вирусов), спирохеты, грибки, протозойные (паразитирующие простейшие, одноклеточные), глисты, которые выводятся из организма больного человека или животного при выдохе, мочеиспускании, дефекации, кашле, рвоте, и когда при определенных условиях этот биологический патологический материал становится источником заражения здорового человека.

Согласно литературным данным в настоящее время известно 1415 возбудителей инфекционных и паразитарных болезней. Наиболее обширную группу составляют болезни, вызываемые бактериями и риккетсиями (538 нозологий). Второе место принадлежит паразитарным болезням - 353 нозологии. Вирусные инфекции составляют 217 нозологий. Постоянно возникают новые или впервые выявленные инфекционные заболевания. Так, начиная, с 1970-х голов ежегодно регистрируется, по крайней мере, одно инфекционное заболевание. За последние годы стали известны более 30 инфекционных заболевании, это и ВИЧ, легионеллез, эпидемический ротавирусный гастроэнтерит и ряд африканских лихорадок (например лихорадка Эбола).

В настоящее время существенную роль в распространении инфекционных болезней играет развитие туризма, а также миграционные процессы.

Классификация инфекционных заболеваний

Что касается классификации основных инфекционных болезней человека, то существуют разные системы группировки инфекционных заболеваний. В нашей стране одной из наиболее распространенных является классификация Л.В. Громашевского, построенная в зависимости от локализации возбудителя в организме и механизме его передачи, таких групп насчитывается 5:

  • кишечные инфекции;
  • инфекции дыхательных путей;
  • кровяные инфекции;
  • инфекции наружных покровов;
  • инфекции с различными механизмами передачи, например передающиеся половым путем, воздушно-капельным путем (один из самых распространенных), фекально-оральный, контактный, трансмиссионный, вертикальный от матери к плоду, от матери к новорожденному в родовом акте, внесенные при операциях, инъекциях и т.п.)

Кроме того в РФ принята также международная более многоступенчатая классификация инфекционных заболеваний:

  • кишечные инфекции;
  • туберкулез;
  • бактериальные зоонозы;
  • другие бактериальные заболевания;
  • полиомиелит и энтеровирусные болезни центрально нервной системы;
  • вирусные заболевания, сопровождающиеся высыпаниями;
  • вирусные заболевания,которые передаются членистоногими;
  • другие вирусные заболевания;
  • риккетсиозы и другие инфекции, передаваемые членистоногими;
  • сифилис и другие венерические инфекции;
  • заболевания. которые вызываются спирохетами;
  • грибковые заболевания (микозы);
  • гельминтозы;
  • другие инфекции и паразитарные заболевания.

Инфекционные заболевания вызывают у пациента значительные изменения в картине крови, при многих инфекционных болезнях изменяется функция различных внутренних органов – печени, сердца, легких, мозга, почек, кишечника, практически все инфекционные заболевания протекают с изменениями широкого спектра биохимических параметров, отражающих различные стороны патогенеза. Установлено также, что, к примеру, вирусы краснухи, герпеса, коксаки, полиомиелита, цитомегаловирус и эховирусы (род энтеровирусов) могут вызывать серьезные нарушения в развитии плода и новорожденного. Кроме того в настоящее время есть основания считать, что некоторые группы вирусов могут быть виновниками возникновения диабета первого типа, к ним относят вирус Коксаки, вирус краснухи, реовирус 3 типа, вирус энцефаломиокардита, вирус эпидемического паротита, цитомегаловирус, вирус гепатита А.

Диагностика инфекций

Диагноз инфекционного заболевания основывается на анамнезе больного, эпидемиологическом анамнезе, включает инструментальные методы обследования и, как правило, диагностика инфекционных заболеваний не обходится без использования комплекса лабораторных методов. Диагностика инфекционного заболевания начинается с базовых лабораторных методов исследования: это – клинический анализ крови. Известно, например, что в клиническом анализе крови лейкоцитоз чаще всего выявляется в результате инфекционного заболевания, что многие вирусные, бактериальные и рикетсиозные болезни приводят к нейтропении (снижение нейтрофилов), а частой причиной лимфоцитоза и/или моноцитоза является инфекционный мононуклеоз.

Такой показатель крови, как скорость оседания эритрорцитотв (СОЭ), не являясь самостоятельным диагностическим показателем в силу своей неспецифичности, является индикатором общего неблагополучия и продолжает активно использоваться в медицинской практике для выявления и мониторирования инфекционных и воспалительных заболеваний различного происхождения.

Общий анализ мочи является лабораторным тестом, который часто используется при исследования инфекционных заболеваний не только почек, но и инфекций другой локализации.

Так некоторые инфекционные заболевания сопровождаются протеинурией нефротического типа (количество белка в моче не менее 3г/л). Например хронические инфекционные заболевания могут стать причиной нефротического синдрома. Развитие протеинурии нефротического типа могут вызвать, например, бактериальный эндокардит, туберкулез, сифилис, лепра, гепатит В и С, мононуклеоз, цитомегаловирусная инфекция, ветряная оспа, малярия, токсоплазмоз, шистосомиаз. Появление в моче бактерий и возникновение воспаления указывает на наличие инфекционного заболевания мочеполовой системы.

Достаточно эффективным при инфекционных заболеваниях является использование комплекса биохимических тестов, поскольку количественные и качественные изменения биохимических показателей в крови происходящие во время болезни, отражают происходящие при заболевании биохимические нарушения и позволяют следить за динамикой патологического процесса и адекватностью лечения.

К таким эффективным биохимическим параметрам, которые исследуются при инфекционных и воспалительных заболеваниях другого происхождения, например, относится – спектр белков сыворотки крови (белки острой фазы), ферменты и некоторые другие биохимические показатели. Использованием специфических лабораторных методов, например, при диагностике причин лихорадки неясного генеза, хронических инфекций выполняют ис.

В практической медицине часто требуется более глубокое лабораторное исследование с следования мазков из горла, посевы крови, мочи и других жидкостей и выделений организма для выявления бактерий, грибков, иногда, при изменениях характера стула, назначают исследования кала на яйца глист.

В настоящее время в лабораторной диагностике для выявления инфекционных возбудителей широко используются следующие специфические лабораторные методы:

  • микроскопические методы, позволяющие идентифицировать инфекционного возбудителя в биологическом патологическом материале с помощью разнообразных типов микроскопов после приготовления окрашенных или нативных мазков.
  • Культуральный (бактериологический) метод, который заключается в выделении чистой культуры возбудителя из патологического материала, с дальнейшей его идентификацией по морфологическим, культуральным, биохимическим, антигенным, токсикогенным (применяя специфические методы) свойствам и определение его чувствительности к антибиотикам и другим химиотерапевтическим препаратам. Эти исследования часто проводят при подозрении на гнойно-воспалительные заболевания.
  • Серологические исследования, в основе которых лежит специфическое взаимодействие антигена и направленных к нему антител. Эти исследования позволяют с диагностической целью определять (качественно и количественно) как антигены так и антитела к ним. Использование в лабораторной практике таких серологических методов как: ИФА(иммунофементный анализ), иммунофлюоресцентный, иммунофлюоресцентныф анализ - позволяет определять в крови больного антитела, относящиеся к различным классам иммуноглобулинов (ИГ А, ИГ М, ИГ Ж). Существование определенной закономерности в динамике выработки специфических антител различных классов при инфекционном заболевании позволяет судить как о стадии так и об интенсивности инфекционного процесса.
  • Молекулярно-биологические методы, к которым относится полимеразная цепная реакция (ПЦР-метод).

В основе ПЦР-диагностики лежит молекулярно-биологический метод амплификации (многократное копирование) малых фрагментов нуклеиновых кислот бактерий, вирусов, хламидий, микоплазменных и др. с помощью фермента ДНК- полимереразы. ПЦР-диагностика позволяет провести прямую идентификацию нуклеиновых кислот(РНК или ДНК), то есть генетического материала, инфекционного агента в различном биологическом материале.

Читайте также:

Пожалуйста, не занимайтесь самолечением!
При симпотмах заболевания - обратитесь к врачу.

Copyright © Иммунитет и инфекции