Маркеры интоксикации в крови

Полный текст:

Актуальность. В связи с высокой смертностью в результате гнойно-септических осложнений актуален поиск прогностических биохимических маркеров развития сепсиса у больных, находящихся в критическом состоянии.

Материал и методы. Обследованы 57 больных, из них у 40 развился сепсис. Группу сравнения составили 17 пациентов, у которых сепсис не развился. Исследование проводили на 1–2-е, 5–7-е и 10–12-е сут после по­ступления в стационар. Выраженность окислительного стресса определяли по уровню малонового диальдегида (МДА) и общей антиокислительной активности сыворотки крови (ОАА). Эндогенную интоксикацию оценивали по уровню среднемолекулярных пептидов (СМП), общей и эффективной концентрации альбумина (ОКА, ЭКА) в сыворотке крови. Нарушения эндогенной сосудистой регуляции оценивали по содержанию в сыворотке крови стабильных метаболитов оксида азота (NOx) и концентрации ангиотензин-превращающего фермента (АПФ).

Результаты. Установлено, что на 5–7-е сут от момента поступления МДА может служить прогностическим показателем неблагоприятного исхода (ОР=1,141 ДИ 95% (1,033;1,259), р=0,09); уровень NOx может являться предиктором неблагоприятного исхода на 1–2-е сут (ОР=1,026 ДИ 95% (0,999; 1,055), р=0,064), а также на 10–12-е сут (ОР=1,012 ДИ 95% (1,000; 1,023), р=0,098) вместе с концентрацией АПФ (ОР=1,034 ДИ 95% (1,007; 1,062), р=0,015); уровень СМП254 (ОР=11,195 ДИ 95% (1,571; 79,771), р=0,016) и СМП280 (ОР=17,370 ДИ 95% (1,568; 192,455), р=0,02) является статистически значимым предиктором неблагоприятного исхода в первые сутки от начала заболевания, а также на 5–7-е сут (СМП254 — ОР=4626,791 ДИ 95% (7,903; 27808,629), р=0,009 и СМП280 — ОР=1331,590 ДИ 95% (5,006; 354179,342), р=0,012).

Заключение. Выявлены прогностически значимые признаки неблагоприятного исхода септического процесса: снижение уровня NOx; повышение концентрации АПФ; повышение уровня МДА и снижение ОАА; повышение уровня СМП; снижение ОКА и ЭКА.

к.м.н., заведующая научной клинико-биохимической лабораторией экстренных методов исследования,

1. Сепсис в начале XXI века. Классификация, клинико-диагностическая концепция и лечение. Патолого-анатомическая диагностика: Практическое руководство / под ред. В.С. Савельева, Б.Р. Гельфанда. – М.: Литтерра, 2006. – 176 с.

2. Alberti C., Brun-Buisson C., Burchardi H., et al. Epidemiology of sepsis and infection in ICU patients from an international multicentre cohort study // Int. Care Med. – 2002. – Vol. 28, N. 2. – Р. 108–121.

3. Engel C., Brunkhorst F.M., Bone H.G., et al. Epidemiology of sepsis in Germany: results from a national prospective multicenter study // Int. Care Med. – 2007. – Vol. 33, N. 4. – Р. 606–618.

4. Gaieski D.F., Edwards J.M., Kallan M.J., Carr B.G. Benchmarking the incidence and mortality of severe sepsis in the United States // Crit. Care Med. – 2013. – Vol. 41, N. 5. – P. 1167–1174.

5. Vincent J.L., Rello J., Marshall J., et al. International Study of the Prevalence and Outcomes of Infection in Intensive Care Units // JAMA. – 2009. – Vol. 302, N. 21. – P. 2323–2329.

6. Levy M.M., Fink M.P., Marshal J.C., et al. 2001 SCCM/ESICM/ACCP/ATS/SIS International Sepsis Definitions Conference // Crit. Care Med. – 2003. – Vol. 31, N. 4. – P. 1250–1256.

7. Dellinger R.P., Levy M.M., Carlet J.M., et al. Surviving Sepsis Campaign: International guidelines for management of severe sepsis and septic shock: 2008 // Int. Care Med. – 2008. – Vol. 34, N. 1. – P. 17–60.

8. Dellinger R.P., Levy M.M., Rhodes A., et al. Surviving Sepsis Campaign: International Guidelines for Management of Severe Sepsis and Septic Shock: 2012 // Intensive Care Med. – 2013. – Vol. 39, N.2. – P. 165–228.

9. Pierrakos C., Vincent J.-L. Sepsis biomarkers: a review // Crit. Care. – 2010. – Vol. 14. – R15.

10. Гаврилов В.Б., Гаврилова А.Р., Мажуль Л.М. Анализ методов определения продуктов перекисного окисления липидов в сыворотке крови по тесту с тиобарбитуровой кислотой // Вопр. мед. химии. – 1987. – № 1. – С. 118–122.

11. Габриэлян Н.И., Дмитриев А.А., Кулаков Г.П. и др. Диагностическая ценность определения средних молекул в плазме крови при нефрологических заболеваниях // Клин. мед. – 1981. –№ 10. – C. 38–42.

12. Грызунов Ю.А. Проведение измерений параметров ЭКА и ОКА на анализаторе АКЛ-01 // Альбумин сыворотки крови в клинической медицине. Кн. 2. / под ред. Ю.А. Грызунова и Г.Е. Добрецова. – М.: ГЭОТАР, 1998. – С. 104–107.

13. Голиков П.П., Николаева Н.Ю. Метод определения нитрита/нитрата (NOx) в сыворотке крови // Биомед. химия. – 2004. – № 1. – С. 79–85.

14. Lorente L., Martín M.M., Abreu-González P., et al. Sustained high serum malondialdehyde levels are associated with severity and mortality in septic patients // Crit. Care. – 2013. – Vol. 17, N. 6. – R290.

16. Грызунов Ю.А., Закс И.О., Мороз В.В. и др. Сывороточный альбумин: свойства, функции и их оценка при критических состояниях // Анестезиол. и реаниматол. – 2004. – № 6. – С. 68–74.

17. Сачков Н.В., Федоровский Н.М. Этиология и патогенез полиорганной дисфункции // Новости анестезиол. и реаниматол. – 2007. – № 2. – C. 20–33.

Klychnikova E.V., Tazina E.V., Rei S.I., Aleksandrova I.V., Godkov M.A. EVALUATION OF PROGNOSTIC SIGNIFICANCE FOR BIOCHEMICAL MARKERS OF OXIDATIVE STRESS, ENDOGENOUS INTOXICATION AND VASCULAR REGULATION IN THE DEVELOPMENT OF UNFAVORABLE OUTCOMES IN PATIENTS WITH SEPSIS. Russian Sklifosovsky Journal "Emergency Medical Care". 2016;(2):25-30. (In Russ.)

Контент доступен под лицензией Creative Commons Attribution 4.0 License.

480 руб. | 150 грн. | 7,5 долл. ', MOUSEOFF, FGCOLOR, '#FFFFCC',BGCOLOR, '#393939');" onMouseOut="return nd();"> Диссертация, - 480 руб., доставка 1-3 часа, с 10-19 (Московское время), кроме воскресенья

Автореферат - бесплатно , доставка 10 минут , круглосуточно, без выходных и праздников

Корепин, Антон Михайлович. Перекисное окисление белков и содержание маркеров эндогенной интоксикации в крови лабораторных мышей после введения метилфосфоновой кислоты : диссертация . кандидата биологических наук : 03.01.04 / Корепин Антон Михайлович; [Место защиты: Нижегор. гос. ун-т им. Н.И. Лобачевского].- Курган, 2011.- 115 с.: ил. РГБ ОД, 61 11-3/523

Введение к работе

Актуальность исследования. В настоящее время фосфорорганические соединения (ФОС) активно исследуются а ведущих научных центрах мира. Большинство известных ФОС являются веществами антропогенного характера, многие из них впервые были получены как сильнейшие пестициды (Кабачник,1962). Интерес к проблеме вызван, во-первых, широким использованием ФОС в промышленности (Мельников. 1997), медицине, быту и сельском хозяйстве (Нифантьев, 1996; Caroline, 1998), во-вторых, начавшимся в России уничтожением фосфорорганических отравляющих веществ (Холстов, 2004).

До недавнего времени в России насчитывалось порядка 40 тысяч тонн фосфорорганических отравляющих веществ (Белецкая, 1995). В Щучанском районе Курганской области, как и в Кировской области, в настоящее время функционирует завод по уничтожению химического оружия (ХО). В основе уничтожения ХО лежит технология химического взаимодействия ФОС (в Курганской области: зарин, зоман и V-газы) с органическими основаниями, например, моноэтаиоламином или бушлатом калия (Белавинцев, 1999; Холстов, 2004). В результате реакции получаются метилфосфонаты -соответствующие соли и эфиры метилфосфоновой кислоты (МФК). Зарубежный опыт уничтожения ХО подтверждает возможность загрязнения мстилфосфонатами природных сред (DeFrank, 2003; Frei, 1993; Munro, 1999). МФК была обнаружена спустя 10 лет после загрязнения сухой почвы на полигоне хранения ХО Дагуэй в штате Юта США (Савельева, 2002).

Уникальные свойства молекулы МФК, такие как бифильность. наличие малополярной связи С-Р, близкие фосфорной кислоте константы диссоциации могут приводить к ее неоднозначному поведению в биологических средах (Кононова, 2002; Мельников, 1987; Савельева, 2002). Ряд исследований, касающихся биоремедиации почв от ФОС, доказывают существование микроорганизмов использующих С-Р-лиазный ферментный комплекс для

расщепления МФК, что подтверждает возможность участия веществ со связью С-Р в метаболических процессах.

Вопрос влияния МФК на представителей растительного и животного мира практически не изучен. Существуют отдельные данные о влиянии МФК на рост и ферментативную активность растений (Огородникова, 2007; Серебрякова, 2007). Наличие разветвленной сети из углеводородных радикалов фосфолипидов на поверхности плазматических мембран позволяет предположить возможность специфического взаимодействия молекул МФК с плазмолеммой и интегральными белками. Не исключено проникновение МФК через гематоэнцефалический барьер (Ашмарин, 1999; Глебов, 1984).

Обладая специфическим строением н свойствами, МФК может оказывать влияние на процессы окислительной модификации белков и липидов, вызывая изменения в содержании продуктов перекисного окисления белков (ПОБ), также приводить к накоплению основных маркеров эндогенной интоксикации — олигопептидов (ОП) и веществ низкой и средней молекулярных масс (ВНСММ) в крови, по содержанию которых можно будет сделать выводы об участии МФК в процессах протеолиза или других путей белковой деградации.

Цель исследования: изучить влияние МФК на показатели перекисного окисления белков и эндогенной интоксикации при подкожном введении лабораторным мышам.

Задачи исследования:

Изучить влияние подкожного введения МФК лабораторным мышам в дозе 2 мг/кг массы животного в зависимости от времени после инъекции растворов от 12 до 120 часов. Определить время максимального изменения значений изучаемых биохимических показателей крови у лабораторных мышей после введения МФК.

Изучить особенности изменения содержания продуктов ПОБ и основных маркеров эндогенной интоксикации в крови лабораторных мышей в зависимости от введения различных доз МФК (дозозависимый эффект) и определить дозы, оказывающие наибольшее влияние.

Оценить обратимость изменений изучаемых биохимических показателей крови лабораторных мышей вызываемых различными дозами МФК через 3-30 суток после однократного введения МФК.

Отметить наиболее информативные биохимические показатели, подтверждающие влияние МФК на организмы лабораторных мышей.

Основные положения, выносимые на защиту:

МФК оказывает влияние на содержание общего белка и белковых фракций, маркеров эндогенной интоксикации: ВНСММ и ОП в крови лабораторных мышей, а также вызывает изменения в протекании процессов перекисного окисления белков. Причем, наибольшие изменения изучаемых биохимических показателей наблюдаются через 72 часа после введения МФК. А нормализация значений большинства показателей происходит через 120 часов после введения МФК в дозе 2 мг/кг массы животного.

МФК обладает ярко выраженным дозозависимым эффектом. При введении МФК в дозах 2, 10" 3 мг/кг массы животного через 72 часа происходит ингибирование процессов окислительной модификации белков и активация белкового катаболизма, а в дозе 10" ls мг/кг через 72 часа наблюдается усиление процессов ПОБ и возникновение синдрома эндогенной интоксикации. Через 30 суток после введения различных доз МФК самцам лабораторных мышей отмечается нормализация содержания маркеров эндогенной интоксикации.

Научная новизна исследования. МФК впервые рассматривается как потенциальное загрязняющее вещество природных сред, оказывающее влияние на организмы теплокровных животных.

Впервые изучено влияние МФК на ряд биохимических показателей крови теплокровных животных. Показано, что МФК оказывает достоверное влияние на биохимические показатели и обладает ярко выраженным дозозависимым эффектом.

Впервые обнаружено, что низкие дозы МФК оказывают воздействие на процессы окислительной модификации белков и катаболизма.

Впервые оценена чувствительность биохимических методов к введению МФК на уровне низких доз (10" 15 , 10" 18 мг/кг массы животного). Показано, что через 72 часа после введения МФК в дозе 10' 15 мг/кг массы животного происходит рост концентрации карбонильных производных белков (продуктов ПОБ), увеличение фракций ОП в плазме и ВНСММ в плазме и эритроцитах лабораторных мышей.

Научно-практическая значимость исследования, область внедрения.

Полученные результаты исследования акцентируют внимание на важности вопроса контроля уровня загрязнения метилфосфонатами действующих и бывших объектов уничтожения химического оружия, рациональности широкого использования фосфорсодержащих пестицидов на сельскохозяйственных угодьях.

Комплексное изучение влияния МФК на содержание продуктов ПОБ и маркеров эндогенной интоксикации в крови теплокровных животных позволило выделить эти показатели как наиболее информативные, которые в совокупности с рядом показателей других обменных процессов можно использовать в экологическом мониторинге животного мира для оценки уровня воздействия на теплокровные организмы фосфонатов и подобных загрязняющих веществ.

Интеграция данных об изменении изучаемых показателей под действием различных доз МФК в область клинико-диагностических исследований позволит использовать их в качестве одних из маркеров интоксикации человека и животных низкими дозами фосфорорганических отравляющих веществ.

Декларация личного участия автора. Экспериментальные исследования выполнялись автором лично. Обработка полученных данных, их интерпретация и оформление осуществлены автором самостоятельно.

Публикации. По теме диссертации опубликовано 16 печатных работ, которых 3 статьи опубликовано в изданиях, рекомендуемых ВАКом для публикации результатов кандидатских диссертаций.

У больных реаниматологического профиля эндотоксикоз является базисным компонентом формирования тяжести общего состояния, уровень летальности при этом достигает 90%. В проблеме эндотоксикозов очень важным и малоизученным направлением продолжают оставаться вопросы ранней их диагностики и определения степени тяжести, которые на сегодняшний день являются весьма актуальными, так как определяют своевременность выбора лечения и результаты исхода [1].

Провести анализ и изучить особенности и возможности современных методов лабораторной диагностики эндотоксикоза на ранних стадиях развития с учётом степени вызванной интоксикации.

Исходя из поставленной цели, были определены основные задачи, заключающиеся в анализе, определении и изучении основных маркеров токсичных компонентов крови, которые претерпевают значительные изменения на ранней стадии развития патологии и адекватно отражают степень эндогенной интоксикации больных.

Материал и методы

На основании проведённого анализа материалов литературного обзора, выявлено, что в настоящее время существует много способов выявления эндогенной интоксикации с помощью гематологических, биохимических, биофизических, микробиологических, иммунологических методов и методов биологического тестирования.

К биохимическим показателям относят исследования:

компонентов и медиаторов воспаления;

метаболитов, характеризующих виды обмена и функции жизненно важных органов;

компонентов перекисного окисления липидов (ПОЛ) и антиоксидантной защиты (АОС);

традиционных показателей эндогенной интоксикации – креатинина, мочевины, индикана, мочевой кислоты;

веществ низкой и средней молекулярных масс (ВНСММ).

Представляется целесообразным выделить три уровня биохимической диагностики синдрома эндогенной интоксикации.

Первый уровень — метаболиты, характеризующие виды обмена и функции жизненно важных органов. Традиционные показатели эндогенной интоксикации – креатинин, мочевина, индикан, мочевая кислота.

Второй уровень — вещества низкой и средней молекулярных масс.

Третий уровень — компоненты и медиаторы воспаления, компоненты перекисного окисления липидов и антиоксидантной защиты.

В то же время, по мнению М.Я.Малаховой [2], все методы лабораторной диагностики интоксикации можно разделить на: специфические, условно-специфические и неспецифические.

1. Специфические позволяют выявить действие токсических агентов, вызывающих синдром интоксикации: выделение конкретного токсического агента; метод биотестирования; реакция клапанного аппарата лимфатического сосуда брыжейки кишки; парамецийный тест; тетрахименовый тест; тест с семенным материалом быка; лимулис-тест; биомикроскопия конъюнктивы глаза; подвижность ядер буккального эпителия в электрическом поле.

2. Условно специфические позволяют выявить интоксикацию на клетках крови – эритроцитах и лейкоцитах: угнетение миграции лейкоцитов; фрагментация ядра лейкоцитов; реакция везикулообразования; реакция спонтанного лизиса лейкоцитов; НСТ-тест; катионно-лизосомальный тест; лейкоцитарный индекс интоксикации (ЛИИ); токсикогенная зернистость нейтрофилов; тест осмотической резистентности эритроцитов; тест на способность эритроцитов сорбировать метиленовый синий; тест токсической зернистости эритроцитов; оценка ВНСММ и олигопептидов эритроцитов по М.Я. Малаховой.

3. Неспецифические отражают либо воспалительную реакцию организма, либо изменения метаболизма: показатель лабораторный (Марчук и др.); индекс интоксикации: Гринева и др., Шугаева, М.Я. Малаховой и др.; МСМ по Н.И. Габриэляну; ВНСММ по М.Я. Малаховой; олигопептиды по М. Глинскому; олигопептиды по Лоури; регистрация сверхмедленных колебаний потенциалов в милливольтовом секундном и декасекундном диапазонах; уровень мочевины в биологических жидкостях; уровень плазменного фибронектина и церулоплазмина.

Работы по изучению показателей эндотоксикоза при различных состояниях организма продолжаются, и, по мнению ряда исследователей [2, 3], наиболее информационными тестами оценки токсемии являются такие, как:

определение молекул средней массы по Н.И. Габриэляну;

определение ВСНММ по М.Я. Малаховой;

определение общего уровня олигопептидов и их фракций;

содержание тирозинсодержащих пептидов в плазме крови;

определение связывающей способности альбумина (ССА);

определение резерва связывания альбумина (РСА);

определение содержания С-реактивного белка (СРБ);

определение модифицированных липопротеинов (липидтранспортных макромолекул);

определение доли липидных фракций МСМ по В.Ш. Промыслову и др.;

определение иммунных комплексов;

определение содержания эндогенных аутологичных патогенов.

В настоящее время методы определения ВНСММ являются общепризнанными критериями СЭИ. О содержании среднемолекулярных пептидов можно судить на основании прямой спектрометрии депротеинизированного супернатанта, полученного после осаждения белков раствором ТХУ при длинах волн 254 нм и 280 нм. Однако, по мнению авторов [3], для повышения точности метода белки вернее осаждать хлорной кислотой вместо ТХУ и проводить доосаждение высокомолекулярных примесей с помощью 80 % этанола.

Показатель при 254 нм рассматривается как интегральный критерий содержания УФ-поглощающих ВНСММ от 500 до 5000 Д, к которым, кроме пептидов, относят около 200 соединений нормального и аномального метаболизма.

Согласно рекомендации М.Я.Малаховой [2], суммарное содержание ВНСММ необходимо оценивать по площади под спектральной кривой оптического поглощения пробы в области 238-300 нм.

В последние годы предложен более чувствительный новый тест в диагностике интоксикации организма, и он не только более точный, но и простой, и заключается в определении концентрации тирозин-содержащих пептидов.

Поскольку эндогенная интоксикация может быть вызвана не только увеличением содержания каких-то конкретных веществ, но и нарушением равновесия между отдельными компонентами пула ВНСММ, было предложено рассчитывать коэффициенты, представляющие собой соотношение экстинкций на определенных длинах волн. Следовательно, характер физиологических и патологических процессов in vivo может быть определен не только по количественным изменениям специфических протеинов биологической среды, но и по их соотношению, что может дать дополнительную интегральную информацию о состоянии систем организма. Первым был предложен коэффициент Д280/Д254, так называемый коэффициент распределения. Однако исследованиями [5] установлено, что показания этого коэффициента не всегда коррелировали с состоянием больного.

Далее были предложены другие коэффициенты: пептидно-нуклеотидного распределения и коэффициент ароматичности. Пептидно-нуклеотидный коэффициент рассчитывается по формуле соотношения экстинкций Д238/Д260, который указывает на соотношение сдвигов в содержании пептидов и нуклеотидов в пуле ВНСММ. Коэффициент ароматичности рассчитывается по формуле Д238/Д280 и свидетельствует о вкладе пептидов, не содержащих ароматичных хроматофоров, о соотношении хроматофоров ароматической и неароматической природы. Однако, эти данные не вызвали должного интереса.

В качестве показателя уровня эндогенной интоксикации предложено использовать:

— индекс токсичности, рассчитанный по соотношению содержания общей концентрации альбумина (ОКА) к концентрации ЭКА;

— коэффициент эндогенной интоксикации, рассчитанный по формуле:

КЭИ= СМП / ЭКА х 1000

В последние годы все чаще используются исследования данных коэффициентов при ряде заболеваний.

В качестве основных показателей механизма детоксикации организма рекомендуют использовать сорбцию гидрофобных токсинов альбумином и липопротеинами плазмы. Это обусловлено тем, что альбумин, полифункциональный кислый белок, способен связывать эндо- и экзотоксины, приостанавливая их поступление в ткани. Низкое содержание этого белка создает условия для проникновения эндопатогенов в ткань и реализации их негативного воздействия.

Результаты и их обсуждение

Проведённый анализ показал, что на ранних стадиях эндогенной интоксикации уровень СМП возрастает, по сравнению с нормой, в среднем на 20-30 %, на средней стадии — на 100-200 %, поздних — на 300-400 %.

Следует отметить, что в последнее время накоплено большое число фактов, свидетельствующих о важной патогенетической роли так называемых молекул средней массы (МСМ) или средних молекул (СМ) – биологически активных веществ пептидной природы. Эти молекулы могут иметь различное происхождение: алиментарное (из пищи), эндогенное (из продуктов протеолиза белков), из метаболитов кишечной флоры, химический состав молекул средней массы неоднороден [6].

Из всего вышеизложенного можно заключить, что в доступной нам литературе встречаются лишь единичные сообщения об использовании метода определения уровня средних молекул, как маркера эндогенной интоксикации, несмотря на то, что диагностические возможности и перспективы применения этого метода заслуживают более пристального внимания и дальнейшего исследования. Одними из подобных методов определения показателя уровня МСМ может быть их исследование с использованием гель-хромотографических и ИК-спектрометрических методов, которые представляются весьма эффективными и перспективными в диагностике уровня эндогенной интоксикации больных эндотоксикозами.

Проанализированы современные методы лабораторных исследований токсичных компонентов крови больных эндотоксикозами, и выявлено, что одними из маркёров адекватно отражающих степень интоксикации на ранней стадии развития патологии могут служить уровни молекул средних масс, исследование которых представляется важным и перспективным с использованием гель-хроматографических и ИК-спектрометрических методов.

Дар мақола усулҳои замонавии тадқиқотҳои озмоишии компонетҳои токсикии хун дода шудааст. Яке аз маркерҳое, ки нишонаи дараҷаи интоксикатсияи беморони эндотоксикозро дар давраи саршавии патология дорад, молекулаҳои вазнашон миёна мебошанд. Тадқиқотҳои он ба истифодаи усулҳои гел-хроматографӣ ва ИК-спектрометрӣ муҳим ва перспективӣ аст.

Modern methods of laboratory researches of toxic components of blood of endotoxicose patients are analyzed, and are revealed that as one of markers adequately reflecting intoxication degree at an early stage of development of pathology levels of molecules of the average weights which research is obviously important also perspective with the use of gel-chromatographic and Infrared- spectrometer methods can serve.

Пензенский институт усовершенствования врачей

Саратовский государственный медицинский университет им. В.И. Разумовского

Пензенская областная детская клиническая больница им. Н.Ф. Филатова

Городская клиническая больница скорой медицинской помощи им. Г.А. Захарьина, г. Пенза

В последние годы исследованию синдрома эндогенной интоксикации (СЭИ) отводится важная роль. Показано, что эндотоксемия развивается при всех патологических состояниях, связанных с повышенным катаболизмом или блокадой детоксикационных систем организма [1]. В нашей работе мы рассматривали синдром эндогенной интоксикации при воспалительных заболеваниях органов малого таза (ВЗОМТ) – сальпингоофоритах и метроэндометритах с различными вариантами клинического течения. Классическая клиническая симптоматика не всегда встречается при легких и среднетяжелых состояниях, в клинической картине которых могут доминировать такие во многом субъективные проявления эндогенной интоксикации, как быстрая утомляемость, снижение работоспособности, потливость, эмоциональная лабильность и т.д. [5].

Практически при любой патологии и любом неблагоприятном (стрессовом) воздействии на организм активируются процессы свободнорадикального окисления, что приводит к накоплению токсических веществ, которые относят к эндотоксинам. Повышение в сыворотке крови содержания продуктов перекисного окисления липидов (ПОЛ), а также увеличение активности ферментов детоксикации активных форм кислорода являются неспецифическими тестами эндотоксикоза. Кислородные радикалы (супероксидный, гидроксильный, пероксидный), образующиеся в ходе воспаления, обладая высокой реакционной способностью, ускоряют процесс перекисного окисления ненасыщенных жирных кислот [2].

Продукты распада липидов (альдегиды, диальдегиды, эпоксиды) оказывают повреждающее действие на различные структуры клетки, белки, нуклеиновые кислоты и другие структуры, следовательно, являются эндопатогенами [4]. Концентрация малонового диальдегида в сыворотке крови отражает активность процессов перекисного окисления липидов в организме больного, служит маркером степени эндогенной интоксикации [3].

Несмотря на то, что свободнорадикальное окисление липидов непрерывно протекает во всех тканях и органах человека и животных, оно не приводит к развитию радикального повреждения. В норме низкий уровень продукции радикалов-инициаторов и сбалансированная система антиоксидантной защиты приводит к тому, что скорость свободнорадикальных реакций (СРР) ПОЛ клеточных мембран и липопротеидов плазмы крови крайне мала.

В процессе возникновения и развития воспалительных заболеваний этот баланс нарушается, увеличивается эффективность стадии инициации СРР, а с другой стороны, уменьшается активность системы антиоксидантной защиты, что и приводит к ускорению свободнорадикального поражения компонентов клетки и липопротеидов [6].

В настоящее время для оценки состояния антиоксидантной системы организма человека наряду с определением содержания отдельных антиоксидантов в плазме и клетках крови используют показатель, обозначаемый как антиоксидантная активность (АОА) плазмы крови. АОА плазмы (сыворотки) крови - это интегральный показатель, отражающий ее способность противодействовать развитию свободнорадикальных реакций [11].

Гаптоглобин – специфический белок, участвующий в связывании с гемоглобином и тем самым предохраняющий его от выделения с мочой, что сохраняет очень ценное для организма железо. Результатом может быть повышение, снижение или сохранение нормального уровня белка [4].

Поскольку воспалительные, некробиотические процессы и гемолиз, часто развиваются одновременно, целесообразно оценивать содержание ГП в комплексе с другими показателями, в нашем случае с показателями оценки состояния баланса системы СРР - АОА.

В изученных нами литературных источниках отсутствовали конкретные данные о состоянии ПОЛ и АОС при ВЗОМТ с различной степенью тяжести (лёгкой, средней, тяжёлой) СЭИ, что не соответствует принципу дифференцированного подхода к диагностике и лечению основного заболевания с учётом всех звеньев патогенеза.

Целью исследования явилось совершенствование лабораторной диагностики эндогенного токсикоза и оптимизация терапии.

Дизайн исследования. Было обследовано 77 женщин репродуктивного возраста поступивших в гинекологические стационары г. Пензы и г. Заречный Пензенской области с диагнозами метроэндометрит и сальпингоофорит с различными вариантами клинического течения. Средний возраст обследованных женщин составил 28,6±7 лет.

Критериями включения явилось наличие клинических проявлений в виде жалоб на боли внизу живота, нарушение менструального цикла, повышение температуры тела, дизурические явления. При объективном осмотре обнаруживали болезненность и увеличение при пальпации матки, увеличение, болезненность, тяжистость и другая патология при пальпации придатков, патологические бели, а также общие симптомы эндотоксикоза (гипертермия, тахикардия, озноб, головная боль, диспепсия, общая слабость и т.д.) В исследование не вошли пациентки с послеродовыми осложнениями воспалительного характера. Пациентки, имевшие беременность на фоне ВЗОМТ, а также сопутствующие заболевания воспалительного характера, системные заболевания соединительной ткани и др.

Группу контроля составили 40 здоровых женщин – доноров крови, обратившихся на областную станцию переливания крови. Средний возраст которых был сопоставим с обследуемой группой и составил 30,4±6 лет.

Оборудование и методы исследования. Принципом метода определения малонового диальдегида является взаимодействие тиобарбитуровой кислоты в кислой среде с низкомолекулярными диальдегидами, (главным образом, малоновым), с образованием окрашенного комплекса [9]. Интенсивность которого определялась спектрофотометрически на автоматическом биохимическом анализаторе SABA – 18 M.

Для определения общего антиокислительного статуса плазмы крови использовались тест-системы фирмы Randox. Компонентами тест-систем для определения АОА плазмы крови являются: система генерации радикалов и субстрат или молекула-мишень, которая подвергается свободнорадикальному окислению. Добавление в модельную систему плазмы крови, содержащей различные водо- и жирорастворимые антиоксиданты, приводит к уменьшению образования радикалов и торможению окисления субстрата. Изменение параметров окисления субстрата в присутствии плазмы крови, регистрируемое с помощью полярографии, флуоресцентной и абсорбционной спектроскопии, хемилюминесценции и других методов, используется для характеристики ее АОА [11]. Изменение параметров окисления субстрата в присутствии плазмы крови регистрировалось спектрофотометрически (SABA – 18 M).

Количество гаптоглобина определялось иммунотурбидиметрически. Антитела к гаптоглобину при добавлении к пробам, содержащим гаптоглобин, образуют нерастворимые комплексы. Эти комплексы вызывают изменение абсорбции пропорционально концентрации гаптоглобина в пробе. Тест проводился на автоматическом анализаторе COBAS INTEGRA.

Использовались результаты общеклинических исследований (общий анализ крови, биохимический анализ крови и т.д.).

Полученные результаты обрабатывались с помощью стандартных статистических программ Microsoft Office Exсel 2007. Для всех показателей определяли средние значения (М), а также стандартную ошибку среднего (m). Для оценки степени достоверности различий между группами использовали простой критерий Стьюдента (t). Различия между показателями считали достоверными при p

Список использованных источников:

1. Аксенова В.М., Кузнецов В.Ф., Маслов Ю.Н., Щекотов В.В., Щекотова А.П. Лабораторная диагностика синдрома эндогенной интоксикации: Методические рекомендации/ Под ред. Корюкиной И.П. - Пермь, 2005.

2. Казимирко В.К., Мальцев В.И. Функция ненасыщенных жирных кислот в организме// Здоровье Украины. 2004. №95.

3. Кишкун А.А. Руководство по лабораторным методам диагностики. – М.: ГОЭТАР-Медиа, 2009.

4. Кондранина Т.Г., Горин В.С. , Григорьев Е.В. , Степанов В.В., Молоткова Е.Д. Белки острой фазы воспаления и маркеры эндотоксинемии, их прогностическая значимость в гинекологической практике// Росс. вестн. акушера-гинеколога. 2009. №3. – С. 28.

5. Корякина Е.В., Белова С.В. Особенности патогенетических механизмов эндогенной интоксикации у больных ревматоидным артритом// Научно-практическая ревматология. 2001. №1.

7. Краснопольский В.И., Буянова С.Н. О диагностике, тактике ведения и профилактике гнойно-воспалительных заболеваний придатков матки// Акушерство и гинекология. 1990. №5. - С. 71-76.

8. Краснопольский В.И., Буянова С.Н., Щукина Н.А. Гнойные воспалительные заболевания придатков матки. - М., 1995.

10. Петри А., Сэбин К. Наглядная медицинская статистика: - М.: Гэотар - Медиа, 2009. - 168 с.

11. Теселкин Ю.О. Антиоксидантная активность плазмы крови как критерий оценки функционального состояния антиоксидантной системы организма и эффективности применения экзогенных антиоксидантов: Дис. … докт. биол. наук. - М., 2003.