Лекарство от интоксикации головного мозга

Передозировка лекарственных средств — распространенная острая клиническая ситуация. Хотя ятрогенная лекарственная интоксикация встречается достаточно часто, а серьезно передозировать можно любые препараты, все же чаще всего это эта-нол, а также другие препараты, вызывающие зависимость (опиаты, седативные, снотворные, стимуляторы, галлюциногены), или средства, применяемые в лечении психически больных (антидепрессанты, антипсихотики, литий). Интоксикация психофармакологическими средствами происходит столь часто вследствие их потенциальной опасности, а также потому, что больные, их принимающие, склонны к суицидным действиям. Диагностика и лечение передозировки лекарств зависят от знания врачом симптоматики их специфического действия. В данной главе рассмотрены ситуации передозировки широко применяемых лекарств. Этанол рассмотрен в гл. 185. Проблемы лекарственной зависимости и синдром отмены изложены в гл. 184 и 186.

Клинический подход к проблеме

Интоксикация лекарственными средствами проявляется метаболической энце-фалопатией, она нарушает сознание больного, и либо вызывает торможение (от сонливости до комы), либо стимулирует его (от легкого возбуждения до делирия). Структурные повреждения головного мозга (объемный процесс или инсульт) могут сопровождаться сходными изменениями сознания, но отличаются по таким признакам, как асимметрия неврологической симптоматики, очаговые судороги, сниженная реакция зрачков. Для метаболической энцефалопатии обычно характерна симметричная неврологическая симптоматика, а реакции зрачков сохраняются в полном объеме. Другие признаки метаболических энцефалопатии, не характерные для структурного поражения головного мозга, включают нестабильность сознания, ги-пер- или гипотермию, многоочаговые судороги, клонические судороги или астерик-сис. Лекарственную интоксикацию следует отличать от метаболических энцефалопатии, возникающих при эндогенных нарушениях метаболизма (гипогликемия, уремия, недостаточность печени, гиперосмолярная некетогенная гипергликемия) — в этих случаях можно установить диагноз по соответствующим лабораторным данным. Кроме того, интоксикации лекарствами нужно отличать от синдромов отмены лекарств, в особенности, связанных с этанолом, седативными и снотворными препаратами, тоже вызывающими метаболические энцефалопатии. Наконец, походить на лекарственную интоксикацию могут менингит, вирусный энцефалит и суб-арахноидальное кровоизлияние.

Больного, поступившего в ПИТ с нарушением сознания, у которого невозможно получить сведения о приеме лекарств, следует обследовать особенно тщательно для исключения симптоматики менингита и уточнения функций основных систем организма. Неврологическое исследование фокусируют на оценке сознания, нарушении движений глаз (нистагм, парали«), зрачковых реакциях (миоз, мидриаз, патологическая реакция на свет), атаксии, дизартрии и любой асимметрии двигательной, сенсорной или рефлекторной сферы. Лабораторные исследования должны включать исследование мочи и сыворотки крови на химические вещества, вызывающие сходную интоксикацию. Чтобы определить другие метаболические энцефалопатии, нужно уточнить, нет ли несостоятельности основных систем (мочевина и креатинин, функциональные пробы печени, ПВ/ЧТВ, глюкоза), определить электролиты сыворотки (особенно Na и анионный промежуток), осмолярность плазмы и газы артериальной крови (КОС). Важно записать ЭКГ для выявления аритмий, которые часто служат причиной ухудшения состояния и смерти при передозировке лекарственных препаратов. Для выявления структурного поражения головного мозга, инфекции ЦНС и субарахноидального кровоизлияния необходимо выполнить КТ головы и (или) люмбальную пункцию, особенно у больного в ступоре или коме.

Ниже указаны некоторые классы лекарственных препаратов, симптомы интоксикации при их передозировке и соответствующее лечение.

Включают героин, морфин, метадон (долофин), кодеин, меперидин (демерол), гидроморфон (дилаудид), оксикодон (перкодан), пропоксифен (дарвон), пентазоцин (талвин).

Симптомы. Основными симптомами передозировки опиатов являются точечное сужение зрачков и угнетение дыхания. Другие признаки: тошнота, рвота, задержка мочи, снижение перистальтики ЖКТ, некардиогенный отек легких, сонливость, нарушение сознания и, при более выраженной интоксикации, ступор и кома. Судороги могут отмечаться при передозировке меперидина и пропоксифена.

Лечение. Передозировка опиатов может потребовать вспомогательной вентиляции. Внутривенно назначают налоксон 0,4-2 мг каждые 5 мин, до появления признаков улучшения состояния или достижения дозы 10 мг. Довольно быстро зрачки расширяются, а при ступоре или коме наступает полное восстановление сознания. При передозировке длительно действующих наркотиков (метадон) эффект налоксона может исчезнуть до того, как прекратится действие опиатов, и поэтому спустя 6-8 ч может потребоваться повторное введение налоксона.

Седативные и снотворные препараты

Эта группа включает барбитураты, небарбитуровые седативные средства и бен-зодиазепины. Барбитураты: фенобарбитал (люминал), амобарбитал (амитал), пен-тобарбитал (нембутал), секобарбитал (секонал). Небарбитуровые седативные препараты: мепробамат (милтаун), метаквалон (метолон), хлоралгидрат (ноктек), этх-лорвинол (пласидил) и глютетимид (либриум), лоразепам (ативан), алпразолам (ксанакс), оксазепам (серакс), темазепам (ресторил), клоразепат (транксен) и три-азолам (хальцион).

Симптомы интоксикации — снижение АД, нистагм или паралич движений глаз, атаксия, дизартрия, снижение рефлексов, угнетение дыхания, нарушение сознания, сонливость, ступор и кома. Глубокая гипотермия (с изоэлектрической линией на ЭЭГ) — обычное проявление выраженной передозировки барбитуратов. Расширенные зрачки характерны для интоксикации глютетимидом.

Лечение направлено на поддержание сердечно-сосудистой и дыхательной систем. Рвоту вызывают лишь после пробуждения больного. Показано промывание желудка, назначение активированного угля и слабительных. Гемодиализ эффективен при передозировке барбитуратов короткого действия, хлоралгидрата, этилхлор-винола, однако его применяют только при выраженной интоксикации. Выделение барбитуратов через почки усиливается при введении натрия гидрокарбоната (для ощелачивания мочи), но этот метод неэффективен для коротко действующих барбитуратов и опасен перегрузкой организма жидкостью.

Ингибиторы моноаминоксидазы (МАО) и стимуляторы ЦНС

Симптомы. Передозировка любого из этих препаратов ведет к нарушению психоэмоционального статуса в виде приподнятого настроения, психомоторного возбуждения и гипомании. При значительной передозировке — картина сильного возбуждения, галлюцинации, шизофреноподобный параноидный психоз. Физикальные признаки включают тахикардию, мидриаз, гипертермию, повышение АД, судороги, кому. Часто отмечаются ухудшение состояния и смерть в результате сердечной аритмии. Симптомы передозировки ингибиторов МАО могут возникать через 24 ч после приема препаратов. С внутривенным введением амфетамина связывают развитие церебрального васкулита. У кокаинистов с повышенной частотой встречаются ИМ и сердечно-сосудистый коллапс.

Лечение. Ни один из этих препаратов не имеет специфических антидотов. Выраженная интоксикация — показание к проведению общих мероприятий по поддержанию жизнедеятельности организма. Передозировка амфетамина требует лечения чаще, чем прием сверхдоз кокаина из-за его более длительного эффекта. Для устранения психотических расстройств парентерально вводят галоперидол, а также а-адреноблокаторы (клонидин), если существенно повышено АД.

Среди этих препаратов лишь передозировка фенциклидина является неотложной клинической задачей. Диэтиламид лизергиновой кислоты (ЛСД), мескалин, псилоцибин, 2,5 диметокси-4 метиламфетамин (STP), N.N-диметилтриптамин

Симптомы. Общие симптомы передозировки данных препаратов: нистагм, повышение мышечного тонуса, усиление рефлексов и симптомов симпатической активности (мидриаз, тахикардия, лихорадка, повышение АД). Вариантов изменения психоэмоционального состояния больного много — от изменения настроения и эмоциональных реакций до нарушения познавательного процесса с дезориентацией, амнезией, чувством одиночества, паранойей, зрительными и соматосенсорными галлюцинациями, буйным поведением. Интоксикация фенциклидином может вызвать сильную степень аналгезии, а при очень высоких дозах — выраженную артериальную гипертензию, кататонию, злокачественную гипертермию, эпилептический статус и кому.

Лечение. Седативное действие обеспечивают бензодиазепины. Для антипсихотической терапии бутирофеноны (например, галоперидол) предпочтительнее фено-тиазинов, так как последние понижают судорожный порог. Кроме того, нужна общая поддерживающая терапия, а также, при их возникновении, устранение судорог, злокачественной гипертермии и повышения АД.

Трициклические антидепрессанты и антипсихотики

Эти два класса препаратов указаны вместе, так как основные проявления их передозировки связаны с выраженным парасимпатолитическим (антихолинергичес-ким) эффектом. К трициклическим антидепрессантам относятся: амитриптилин (елавин), имипрамин (авентил), доксепин (синекван), нортриптилин (авентил), дезипрамин (норпрамин). Антипсихотики с выраженным антихолинергическим эффектом: хлорпромазин (торазин), тиоридазин (мелларил), перфеназин (трила-фон), флуфеназин (проликсин), трифлуоперазин (стелазин). Существует масса других антихолинергических препаратов, передозировка которых дает сходную клиническую картину интоксикации. Сюда входят атропин, скополамин, трихексифе-нидил (артан), бензтропин (когентин), прохлорперазин (компазин), гидроксизин (атаракс, вистарил), прометазин (фенерган) и ряд патентованных Н^гистаминоли-тиков.

Симптомы. Любой из указанных препаратов может вызвать нарушение сознания в виде тревожного делирия с галлюцинациями. Другая антихолинергическая симптоматика включает лихорадку, гиперемию кожи, сухость кожи и слизистых оболочек, мидриаз, задержку мочи. Сердечные аритмии представляют опасность для жизни. При значительной передозировке, как правило, возникают судороги и кома.

Лечение. Ни один из этих препаратов также не имеет специфического антидота, а лечение передозировки таких холиномиметиков, как физостигмин, сопровождается столь высоким риском, что применяется редко. Сразу же после приема препарата следует промыть желудок, дать активированный уголь и слабительное. В ос-

тальном — лечение симптоматическое, с учетом возможности развития серьезной сердечной аритмии.

В большинстве случаев интоксикация литием развивается постепенно, при длительном лечении больных, по мере повышения концентрации вещества в плазме, хотя возможна и острая интоксикация.

Симптомы. При умеренно выраженной передозировке психоэмоциональный статус характеризуется беспокойством, нарушением сознания и делирием, более тяжелая степень ведет к ступору и коме. Другие неврологические проявления включают тремор, атаксию, повышение рефлексов, дистонию или хореиформные движения и судороги. Физикальные признаки: лихорадка, снижение АД и аритмии.

Проблемы с выведением из организма и обезвреживанием токсинов начинаются при достижении их концентрации критического значения. В результате такого сбоя в организме человека происходит накопление токсических веществ, что отражается на общем самочувствии.

Если игнорировать сигналы организма, указывающие на интоксикацию, то могут возникнуть осложнения, которые негативно отразятся на органах и внутренних системах человека. Проблем такого рода можно избежать, если знать об основных признаках отравления организма и начать лечение своевременно.

Распознать острую интоксикацию достаточно просто - ее симптомы проявляются очень ярко и практически сразу после проникновения возбудителя в организм. Выявление хронической интоксикации затруднен, и на это может потребоваться достаточно большое количества времени, так как симптомы отличаются неоднозначностью и вялостью. Тем временем токсины все глубже проникают в организм и продолжают свое негативное воздействие.

Первые признаки

На интоксикацию организма указывает появление вялости и слабости, которая не проходит. Даже после продолжительного и полноценного отдыха облегчение не наступает.

Ночной сон ухудшается, и утром человек чувствует себя разбитым. При любых нагрузках, связанных с умственной или физической деятельностью, быстро наступает переутомление, ухудшается память и возникает рассеянность. Заметно снижается активность головного мозга, что приводит к затруднениям при восприятии информации. Человек испытывает затруднения при необходимости сосредоточиться, и все попытки завершаются появлением тупой головной боли.

В некоторых случаях наблюдается повышенная потливость и снижение половой функции. Как правило, происходит ухудшение аппетита, возникают головокружения и заметно увеличивается нервозность. Кроме этого, могут страдать волосы - они становятся ломкими и утрачивают блеск.

Следует понимать, что эти симптомы, указывающие на хроническую интоксикацию, появляются не одновременно, а нарастают постепенно на протяжении довольно длительного времени. Именно в таком характере процесса кроется опасность, так как человек практически не ощущает дискомфорта и долгое время не обращает внимания, что в организме происходят негативные изменения. Со временем он привыкает к их присутствию и игнорирует их.

Большинство людей считают, что постоянная слабость и вялость - это следствие образа жизни и загруженности на работе, поэтому думают, что чашечка утреннего кофе поможет взбодриться. Когда действие кофе не дает ожидаемого результата, наступает черед рюмки спиртного для улучшения сна, седативных препаратов, стимуляторов. Если облегчение наступает, то оно носит временный характер, а интоксикация только нарастает.

Вторичные симптомы

Дальнейшая интоксикация продолжает отражаться на головном мозге и может привести к нарушению памяти и даже искажению восприятия реальности. Засыпание становиться мучительным процессом, а его длительность не превышает получаса. При этом возникает калейдоскоп мыслей, которые появляются одна за другой, а долгожданный сон не наступает. Человек для облегчения состояния вынужден увеличивать дозу седативных средств, которые не всегда помогают.

Интенсивность головных болей постоянно нарастает, особенно после стресса, все это сопровождается головокружением. Состояние может ухудшиться до такой степени, что человек теряет возможность трудиться. С течением времени симптомы могут быть дополнены появлением апатии, отсутствием желания общения с окружающими, что нередко перерастает в невроз и депрессию. Не исключены и другие отклонения в психике.

В одних случаях появление указанных признаков происходит постепенно вследствие постепенной интоксикации организма, а в других - это остаточные явления острого отравления токсинами. Последний случай может сопровождаться изменением массы тела в сторону увеличения или уменьшения, сбоями деятельности пищеварительной системы. Появление горьковатого привкуса и неприятного запаха во рту, а также обложенный язык свидетельствуют о неправильной работе желудочно-кишечного тракта.

При хронической интоксикации нередко ухудшается состояние кожного покрова. На коже возникает сыпь, аллергия и могут развиться дерматологические заболевания. Общее состояние организма существенно ухудшается - резко падает иммунитет, происходит сбой в обменных процессах и нарушается доставка кислорода к тканям. Снижение защитных свойств организма и его ослабление приводит к увеличению частоты вирусных заболеваний и увеличивает вероятность развития хронических болезней.

Интоксикация у детей

Развитие хронической интоксикации у детей - это прямое следствие игнорирование проблемы длительное время. Такое состояние требует особого подхода и сопровождается сложностями, а последствия проявляются в более тяжелой форме, чем у взрослых. При появлении тревожных признаков интоксикации самолечение недопустимо, требуется квалифицированная медицинская помощь.

При интоксикации у ребенка появляются признаки в общем схожие с симптомами у взрослых, находящихся в аналогичном состоянии. Детский организм реагирует быстрой утомляемостью, ухудшением памяти, появлением головокружений и головных болей.

Появление других ярких признаков необязательно, поэтому снизить риск развития осложнений позволит посещение врача. Квалифицированная консультация поможет определить, что происходит с малышом - легкое недомогание или серьезное заболевание.

Как восстановить здоровье?

Мы отмечали, что хроническая интоксикация появляется в том случае, когда организм не способен справиться с выведением и нейтрализацией токсинов. Это говорит об отравлении ими, поэтому прием лекарственных препаратов может только усугубить ситуацию и привести к ухудшению состояния человека.

Для выработки тактики лечения проводится комплекс диагностических мероприятий, в результате которых определяется характер отравления и степень поражения органов и систем. Врачи рекомендуют проводить детоксикацию регулярно - два раза в год даже в том случае, если признаков отравления не наблюдается.

Для лечения хронической интоксикации, как правило, проводят терапевтические мероприятия, направленные на выведение токсинов, в сочетании с приемом иммуномодулирующих препаратов. При этом должно соблюдаться условие - состояние больного находится под постоянным контролем, а его изменения изучаются в динамике. Правильный подход при решении этой проблемы позволит человеку вернуть бодрость и силу. При этом происходит постепенное выведение токсинов, а лимфоток и возможности самостоятельной регенерации восстанавливаются.

При отсутствии осложнений хроническая интоксикация довольно быстро излечивается, улучшается самочувствие и нормализуется сон.

Любая ткань требует соблюдения определенных правил ухода, а неправильная стирка, глажка и сушка может деформировать вещь.

Даже промахнувшись с размером одежды при покупке, можно попытаться исправить ситуацию и растянуть ее до необходимой формы.

Еще на стадии выбора ткани следует определиться с ее лицевой и изнаночной стороной, ведь от этого будет зависеть внешний вид изделия.

Путаница может привести к фатальной ошибке при раскрое, и вещь будет испорчена. На результате может сказаться не только отсутствие знаний, но и освещение, поэтому нежелательно рассматривать ткань вечером или при слишком ярком свете.

Аннотация научной статьи по фундаментальной медицине, автор научной работы — Филатов Б.Н., Почепцов Александр Яковлевич, Мамулайшвили Н.И., Великородная Ю.И.

Цель. Проведение лабораторных испытаний липосомальной полимерно-фосфолипидной формы высокоочищенной бутирилхолинэстеразы в качестве средства профилактики острой интоксикации фосфорорганическими соединениями у экспериментальных животных. Материалы и методы. Материалом исследования служили образцы тканей головного мозга и внутренних органов беспородных белых крыс-самцов. В каждой подопытной группе было по 10 особей весом 150-180 г. В целях профилактики острой интоксикации хлорофосом в дозе, равной ЛД 50, вводили полимерно-фосфолипидные липосомы , содержащие высокоочищенную бутирилхолинэстеразу (ВоБХЭ). Гистохимическими методами определяли содержание ацетилхолинэстеразы, бутирилхолинэстеразы и неспецифических эстераз в различных отделах головного мозга, миокарде и печени на высоте развития клинической картины острого отравления через 20-30мин после введения хлорофоса , а также через 24 ч, через 3, 7 и 10 сут. Результаты. Применение в качестве профилактического средства полимерно-фосфолипидных липосом, содержащих ВоБХЭ, в дозе 25 ед/кг массы тела при острой интоксикации хлорофосом в дозе, равной ЛД 50, обеспечивало 100%-ную выживаемость подопытных животных. Препарат обеспечивал частичную защиту эстераз головного мозга и внутренних органов от ингибирования на раннем этапе эксперимента и обеспечивал ускоренное восстановление их активности в более поздние сроки. Выводы. Применение полимерно-фосфолипидной липосомальной формы ВоБХЭ в качестве профилактического средства в дозе 25 ед/кг массы тела способствовало выживанию 100% подопытных животных, получивших хлорофос в дозе ЛД 50. Введение ВоБХЭ способствовало защите эстераз от ингибирования и более раннему восстановлению их активности в головном мозге и внутренних органах.

Похожие темы научных работ по фундаментальной медицине , автор научной работы — Филатов Б.Н., Почепцов Александр Яковлевич, Мамулайшвили Н.И., Великородная Ю.И.

Purificated butyrylcholinesterase as a tool for prevention of chlorofos acute poisoning

Purpose. Laboratory testing of liposomal polymer-phospholipid form of highly purified butyrylcholinesterase as a tool in prevention of acute intoxication by organophosphorus compounds in experimental animals. Material and methods. Samples of brain tissue and internal organs of outbred white rats (male) have been used as the material for studying. Each experimental group consisted of 10 animals body weight 150-180 g. Polymer-phospholipid liposomes containing highly purified have been injected at the dose equal to LD 50 for the prevention of chlorofos acute intoxication. With using of histochemical methods the content of acetylcholinesterase, butyrylcholinesterase and nonspecific esterases has been determined in different parts of the brain, myocardium and liver at maximim of acute poisoning clinical manifestation: in 20-30 minutes, 24 hours, 3,7 and 10 days after chlorofos injection. Results. Using the polymer-phospholipid liposomes containing highly purified butyrylcholinesterase in the dose of25U/kg body weight as the prevention agent in case of chlorofos acute intoxication in the dose equal to LD 50 provides 100% survival of exposed animals. The prevention agent provided the partial protection of esterases of brain and internal organs from inhibition on early stage of experiment and quicker recovery of their activity at a later date. Conclusions. Using the polymer-phospholipid liposomal form of highly purified butyrylcholinesterase in the dose of 25U/kg body weight provides 100% survival of laboratory animals exposed by chlorofos in the dose equal to LD 50. Injection of highly purified butyrylcholinesterase provided protection from esterase inhibition and earlier recovery of brain activity and internal organs.

Б.Н. Филатов, А.Я. Почепцов, Н.И. Мамулайшвили, Ю.И. Великородная

Высокоочищенная бутирилхолинэстераза как средство профилактики острого отравления хлорофосом

ФМБА России, г. Волгоград

B.N. Filatov, A.Ya. Pocheptsov, N.I. Mamulaishvili, Yu.I. Velikorodnaya

Purificated butyrylcholinesterase as a tool for prevention of chlorofos acute poisoning

Ключевые слова: высокоочищенная бутирилхолинэстераза, липосомы, профилактика, хлорофос, острая интоксикация, гистохимия, эстеразы.

Цель. Проведение лабораторных испытаний ли-посомальной полимерно-фосфолипидной формы высокоочищенной бутирилхолинэстеразы в качестве средства профилактики острой интоксикации фосфорорганическими соединениями у экспериментальных животных. Материалы и методы. Материалом исследования служили образцы тканей головного мозга и внутренних органов беспородных белых крыс-самцов. В каждой подопытной группе было по 10 особей весом 150—180 г. В целях профилактики острой интоксикации хлорофосом в дозе, равной ЛД0, вводили полимерно-фосфолипидные липосомы, содержащие высокоочищенную бутирилхолинэстеразу (ВоБХЭ). Гистохимическими методами определяли содержание ацетилхолинэстеразы, бутирилхолинэстеразы и неспецифических эстераз в различных отделах головного мозга, миокарде и печени на высоте развития клинической картины острого отравления — через 20—30мин после введения хлорофоса, а также через 24 ч, через 3, 7 и 10 сут. Результаты. Применение в качестве профилактического средства полимерно-фосфолипидных липосом, содержащих ВоБХЭ, в дозе 25 ед/кгмас-сы тела при острой интоксикации хлорофосом в дозе, равной ЛД0, обеспечивало 100%-ную выживаемость подопытных животных. Препарат обеспечивал частичную защиту эстераз головного мозга и внутренних органов от ингибирова-ния на раннем этапе эксперимента и обеспечивал ускоренное восстановление их активности в более поздние сроки.

Keywords: purificated butyrylcholinesterase, liposomes, prevention, chlorofos, acute poisoning, histochemistry, esterases.

Purpose. Laboratory testing of liposomal polymer-phospholipid form of highly purified butyrylcholinesterase as a tool in prevention of acute intoxication by organophosphorus compounds in experimental animals.

Material and methods. Samples of brain tissue and internal organs of outbred white rats (male) have been used as the material for studying. Each experimental group consisted of 10 animals body weight 150—180g. Polymer-phospholipid liposomes containing highly purified have been injected at the dose equal to LD00 for the prevention of chlorofos acute intoxication. With using of histochemical methods the content of acetylcholinesterase, butyrylcholinesterase and nonspecific esterases has been determined in different parts of the brain, myocardium and liver at maximim of acute poisoning clinical manifestation: in 20—30 minutes, 24 hours, 3,7 and 10 days after chlorofos injection. Results. Using the polymer-phospholipid liposomes containing highly purified butyrylcholinesterase in the dose of25U/kg body weight as the prevention agent in case of chlorofos acute intoxication in the dose equal to LD00 provides 100% survival of exposed animals. The prevention agent provided the partial protection of esterases of brain and internal organs from inhibition on early stage of experiment and quicker recovery of their activity at a later date.

Conclusions. Using the polymer-phospholipid liposomalform of highly purified butyrylcholinesterase in the dose of 25U/kg body weight provides 100% survival of laboratory animals exposed by chlorofos

Выводы. Применение полимерно-фосфолипидной липосомальной формы ВоБХЭ в качестве профилактического средства в дозе 25 ед/кг массы тела способствовало выживанию 100% подопытных животных, получивших хлорофос в дозе ЛД50. Введение ВоБХЭ способствовало защите эстераз от ингибирования и более раннему восстановлению их активности в головном мозге и внутренних органах.

in the dose equal to LD0. Injection of highly purified butyrylcholinesterase provided protection from esterase inhibition and earlier recovery of brain activity and internal organs.

Лабораторные испытания высоко-очищенных эстераз продемонстрировали их высокую эффективность при использовании в качестве профилактического средства при острых отравлениях высокотоксичными ФОС.

Проведены исследования, показавшие высокую эффективность профилактического использования высокоочищенной генно-

модифицированной бутирилхолинэстеразы, включенной в состав липосом, при отравлении высокотоксичными ФОС [9].

Вместе с тем существует еще один метод пролонгации действия и защиты от неспецифического связывания фармакологических препаратов с помощью липосом, когда необходимое лекарственное средство включают во внутреннюю среду или оболочку липо-сом. Для уменьшения неспецифического захвата липосом клетками ретикулоэндотели-альной системы в состав стенки липосом вводят добавки — конъюгаты фосфолипидов с полиэтиленгликолем или другими полимерами. Таким образом получают полимерно-фосфолипидные или ПЭГилированные ли-посомы, способные длительное время циркулировать в биосредах организма без повторного введения. Продолжаются поиски перспективных рекомбинантных форм аце-тилхолинэстеразы, в том числе связанных с полиэтиленгликолем [5; 6].

Помимо высокой специфичности данной терапии отмечаются и практически полное отсутствие собственной токсичности такого антидота, а также отсутствие патологических проявлений при введении избыточно высоких доз фермента, хотя и не отрицается возможность индукции антителообразования при многократном применении [8].

Техника лабораторных работ и фармакологического производства липосомаль-ных препаратов в настоящее время разработана достаточно детально [2; 7], ввиду чего получение и испытание липосомальных препаратов-антидотов вполне осуществимы в лабораторных условиях.

На основании этих данных представляется актуальным изучение профилактического действия включенного в полимерно-фосфолипидные липосомы препарата ВоБХЭ на экспериментальных животных при острой интоксикации ФОС.

Целью данной работы было проведение лабораторных испытаний липосомальной полимерно-фосфолипидной формы ВоБХЭ в качестве средства профилактики острой интоксикации фосфорорганическими соединениями у экспериментальных животных.

Материалы и методы

Материалом исследования служили образцы тканей головного мозга и внутренних органов беспородных белых крыс-самцов. В каждой подопытной группе было по 10 особей весом 150—180 г. Животных содержали в клетках по 8 особей в каждой в помещениях с искусственным освещением (8:00— 20:00 — свет, 20:00-8:00 — темнота) при 20-22 С в условиях свободного доступа к воде и пище.

При постановке экспериментов руководствовались требованиями Европейской конвенции по защите экспериментальных животных.

В данной работе было проведено две серии экспериментов.

В первой серии моделировали острое отравление хлорофосом внутрижелудочным введением 10% водного раствора хлорофоса в дозе, равной ЛД50 (725 мг/кг).

Во второй серии в качестве профилактического средства подопытным животным

внутримышечно вводили липосомальную взвесь, содержащую ВоБХЭ в дозе 25 ед/кг массы тела и через 1 ч — хлорофос в дозе ЛД50. Животным контрольной группы вводили растворитель в том же объеме.

Всего было использовано 10 групп подопытных животных. Образцы органов и тканей брали для исследования в следующие сроки:

1) на высоте развития клинической картины острого отравления — через 20— 30 мин после введения хлорофоса;

В качестве профилактического средства была использована ВоБХЭ из сыворотки крови лошади. Активность препарата измерялась в единицах (U). Одна единица способна гидролизовать 1 рмоль бутирилхолина до холина и бутирата за 1 мин при рН=8,0 при температуре 37 С. Кристаллический фермент разводили в физиологическом растворе и использовали для приготовления липосом по описанной методике. Доза действующего вещества составляла 25 ед/кг массы тела животного.

Подопытных и контрольных животных наркотизировали диэтиловым эфиром и забивали методом декапитации. Для исследования брали образцы следующих органов и тканей:

1) головного мозга на уровне лобной доли;

2) головного мозга на уровне 4,5 мм от Bregma (вертикальный разрез через перекрест зрительного нерва);

Сразу после извлечения образцы тканей животных из подопытной и контрольной групп, предназначенные для гистохимического исследования, помещали на один блок, замораживали при температуре —18 . -20С и резали в криостате. Полученные срезы монтировали на одно предметное стекло и инкубировали. Таким образом, получали препараты, которые были одинаковыми по толщине и времени инкубации в одной инкубационной среде, что делало полученный мате-

риал пригодным для количественной оценки. В данной работе с помощью метода гистохимического изучения Карновского исследовали ферменты:

а) ацетилхолинэстеразу (АХЭ) [1];

б) бутирилхолинэстеразу (БХЭ) [1];

Неспецифические эстеразы (НЭ) определяли по методу Пирса [3].

Активность гистохимических реакций на препаратах оценивали полуколичественным методом по Соколовскому [4]. Статистическую обработку полученных данных проводили с помощью программы Excel-6.

Материалы и методы получения ли-

Исходным материалом для наработки липосом был выбран соевый лецитин (Sigma). В качестве антиокислителя использовали а-токоферол (Fluka). Полимерным компонентом липосом служил L-а-фосфати-дилэтаноламиндистеарат метоксиполиэтилен-гликольконъюгат (Sigma).

Nanotrac. С помощью спектрофотометра UNICO 2800 определяли устойчивость липосом по степени седиментации во времени. Наиболее устойчивыми оказались липосомы, полученные при использовании мембраны с размерами пор 200 нм. Для освобождения жидкой фазы взвеси от не включенного в липосомы ВоБХЭ использовали метод гель-фильтрации, пропуская взвесь через хроматографическую колонку, заполненную Sephadex-G50 superfine. При хранении в холодильнике в плотно закупоренном состоянии в заполненном азотом флаконе липосомальная взвесь оставалась биологически активной не менее 7 сут.

В первой серии экспериментов клиническая картина острого отравления хлорофосом начинала развиваться через 20—30 мин после внутрижелудочного введения хлорофоса. На высоте клинических проявлений наблюдали адинамию, затруднение дыхания (вдоха) как следствие паралича дыхательной мускулатуры, гиперсаливацию, тонические судороги, симптом кровавых слез. Гибель животных наступала через 40—60 мин после введения хлорофоса. У выживших животных в течение 24—72 ч происходило постепенное восстановление двигательных функций.

Острое отравление хлорофосом в дозе ЛД50, сопровождалось снижением активности АХЭ, БХЭ и НЭ в головном мозге, печени и миокарде. Максимальное ингибирова-ние АХЭ и НЭ в головном мозге и внутренних органах происходило в первые часы интоксикации (рис. 1, 3). Максимум падения активности БХЭ в этих органах отмечался через 24 ч (рис. 2). В ряду изученных эсте-раз БХЭ головного мозга и миокарда оказалась наиболее чувствительной к действию хлорофоса.

В более поздние сроки эксперимента изменения ферментативной активности носили волнообразный характер. Минимальные значения активности в течение первых 24 ч сменялись подъемом через 3 сут, затем вновь следовало понижение уровня активности, но уже в меньшей степени. К исходу 10-х суток эксперимента большинство гистохимических показателей активности эстераз дости-

Соотношение контроль/опыт 1,4

■Лобная доля ■Большие полушария ■Печень ■Миокард

Время контроля 10 сут

Рис. 1. Динамика активности АХЭ при остром отравлении хлорофосом в дозе ЛД50