У кошки герпес 1 и 2 типа

Герпесвирусная инфекция кошек, или ринотрахеит (FHV)- заболевание, вызванное вирусом герпеса.

Ринотрахеит – широко распространенное респираторное заболевание кошачьих, вызываемое вирусом герпеса кошек тип 1. Заболевание видоспецифичное и не представляет угрозы для других видов животных и человека. Протекает в острой и хронической форме.

больные животные с острой формой инфекции/
переболевшие кошки - носители: являются скрытыми (латентными), т.е. без симптомов болезни, носителями вируса в нервных клетках, особенно тройничного нерва, длительность носительства в среднем составляет 6 мес, но может быть пожизненной.
кошки с хронической формой инфекции в стадии обострения.

Заражение вирусом происходит через выделения из носа, рта, глаз больных животных: при непосредственном контакте с больной кошкой, через инфицированный воздух, предметы ухода, корма, а также через обувь и одежду людей, контактировавших с источником инфекции. Внедрение и размножение вируса (репликация) в организме кошки происходит в основном в слизистых оболочках носоглотки и миндалин, но помимо этого часто в патологический процесс включается конъюнктива глаз, лимфоузлы и пр.; заражение невакцинированных беременных кошек приводит к внутриутробному инфицированию плодов ( и как следствие- аборты, рождение мертвых или нежизнеспособных плодов).

Выделение вируса в окружающую среду начинается через 24 часа после заражения и продолжается до 3 недель. Устойчивость вируса: вирус погибает при 37С в течение 3 часов, при 56С – в течение 5 мин; остается жизнеспособным при 25С в течение 1 мес, при 4С -5 месяцев. Чувствителен к большинству дезинфектантов и антисептиков.

Вирус герпеса кошек приводит, как правило, к острому респираторному заболеванию. Инкубационный (скрытый) период заболевания обычно 2-6 дней.

Клинические признаки заболевания:

Угнетение и отсутствие аппетита.
Чихание и выделения из носа и глаз, сначала прозрачные (серозные), а при продолжительном течение болезни становятся слизисто-гнойными.
Повышение температуры тела.
Может быть кашель, одышка.
Иногда появляются язвы языка, что клинически напоминает другую инфекционнную болезнь кошек - кальцивироз. Чаще всего этот симптом наблюдается у кошек с хроническим течением герпеса в стадии обострения.
Поражение роговицы: язвы и глубокий кератит.
Может быть слюнотечение (обычно наблюдается при язвах в ротовой полости).
Очень редко - язвы на носу, коже морды.
Часто ринотрахеит протекает совместно с другими инфекциями: хламидиоз, кальцивироз, микоплазмоз, бордетелла бронхосептика (Bordetella bronchiseptica).

Несмотря на то, что данная болезнь может приводить к тяжелому состоянию, уровень смертности невысокий, за исключением очень маленьких котят и кошек с сильно ослабленным иммунитетом. Смерть бывает наиболее часто вследствие обезвоживания, вторичной бактериальной инфекции, приводящей к бронхопневмонии. В среднем симптомы болезни наблюдаются в течение 7-10 дней.

После переболевания острой герпесвирусной инфекцией около 80% кошек остаются вирусоносителями (т.е. внешне выглядят совершенно здоровыми) и примерно 50% из них выделяют вирус в окружающую среду. Выделение вируса может происходить спонтанно, но в основном это случается после стресса: переезд на другое место жительства, посещение выставок, роды, лактация, использование глюкортикостероидов (например, преднизолон, дексаметазон), оперативные вмешательства и др.
Кошки могут стать вирусоносителями и без проявления каких-либо симптомов, т.е. кошка, заразившись, может оказаться носителем даже несмотря на то, что сама никогда не проявляла признаков болезни или была полностью вакцинирована.
Также для ринотрахеита характерен переход в хроническую (латентную, или скрытую) форму: в этом случае вирус поступает в окружающую среду только в период обострения, т.е. когда проявляются симптомы заболевания. Хроническая (латентная) герпесвирусная инфекция наиболее часто переходит в острую стадию из-за стресса: переезд, выставки, оперативные вмешательства и др.

Несмотря на то, что у кошек встречаются и другие инфекции, сопровождающиеся респираторными симптомами (такие как кальцивироз, хламидиоз и др.), в большинстве случаев для постановки диагноза достаточно имеющихся клинических признаков.

Для диагностики в России чаще всего используют метод ПЦР, для этого берутся мазки из носа и конъюнктивы глаз. При первичной герперсвирусной инфекции вирус обнаруживается максимум в течение 7 дней от начала клинических проявлений, при повторной инфекции- максимум в течение 4 дней, во время латентной фазы в обычных мазках с конъюнктивы вирус не выявляется, т.к здесь его уже нет, а локализуется он в клетках нервной ткани.

Многие больные кошки не едят, т.к. теряют обоняние или из-за болезненности, вызванной наличием язв в ротовой полости, поэтому очень важно кошку кормить: для этой цели подойдет любой готовый корм в виде паштета, который предварительно разводят теплой водой, и дают кошке из шприца на 10-20мл без иглы. Если кошку в течение 3 дней не получается кормить насильно, ей показана установка специальных зондов, через которые будет осуществляется кормление.
Промывание носа раствором натрия хлорида 0,9% (физиологический раствор) для очищения от скопившихся выделений, проводится ежедневно и несколько раз в день. Больная кошка должна содержаться в чистом, хорошо проветриваемом помещении.
Антибиотики для лечения вторичной бактериальной инфекции
Системные противовирусные препараты
Симптоматическое лечение: для кошек с выраженными симптомами обезвоживания необходимы внутривенные капельницы, при повышенной температуре используются жаропонижающие средства и пр.

Чихание, насморк, слезящиеся глаза – не подхватил ли домашний любимец грипп или простуду? Вполне возможно. И возможно, что имя этой простуды – герпес. Да, такое знакомое нам заболевание не миновало и кошек.

Герпес кошек, он же ринотрахеит , или же FVR (кошачий вирусный ринотрахеит) – острая инфекция верхних дыхательных путей, вызываемая вирусом из семейства Herpesviridae, заболевание широко распространенное и весьма заразное. А гепервирус-1 (FHV-1) – самый популярный тип вируса герпеса кошек.

Как обычно, познакомимся с врагом поближе.

Заражению герпесом (ринотрахеитом) способствуют:

· механическая передача вируса — через зараженные предметы обихода: посуду, лоток, игрушки

· скученное содержание кошек (приют, питомник), некачественное питание, недостаточное проветривание помещение, несоблюдение норм гигиены и пр.

· стресс, переохлаждение, другая болезнь

Воздействие вируса напрямую зависит от иммунитета животного. Поэтому, как всегда, в группе риска котята, молодые, пожилые, непривитые и бездомные кошки, животные с хроническими заболеваниями.

Ринотрахеиту свойственен сезонный характер, его пик приходится на сырое и холодное время года. Риск заболеть возрастает и при посещении выставок, вязках, путешествиях и т.д.

Чем же страшен герпесвирус?

Симптомы герпеса у кошек и котов:

чихание
ринит — выделения из носа (сперва светлые, со временем густые и зеленовато-серые)
поражение глаз (слезотечение, конъюктивит, изъязвление роговицы)
повышение температуры
потеря аппетита
апатия

Правда, очень похоже на симптомы другой инфекции – кальцивироза ? Действительно, и герпесвирус, и кальцивирус – причина острых респираторных заболеваний кошек. Но если для кальцивироза характерны язвы в ротовой полости, то при герпесе в основном изъявляются глаза.

У больной кошки глаза становятся красными и распухшими, с частыми слезоточениями, – это последствия конъюктивита (воспаления слизистой век, третьего века). Появление в глазных выделениях гноя говорит о присоединении вторичной инфекции бактериальной природы. В дальнейшем возможны появление язв на роговице и другие серьезные осложнения.

Если воспалительный процесс доходит до бронхов, кошка начинает кашлять, возможны повышение температуры и отек горла. Из-за заложенности носа животное вынуждено дышать ртом, что приводит к увеличению слюноотделения и появлению в ротовой полости язвочек. Из-за потери обоняния и болей во рту кошка перестает есть, начинается обезвоживание.

Это особенно опасно для маленьких котят, у которых из-за несформированного иммунитета болезнь может принять острую форму, приводящую к осложнениям в виде развития пневмонии и вторичных инфекций. Смертность от ринотрахеита у малышей достигает 30%.

У взрослых кошек с хорошим иммунитетом заболевание может протекать в скрытом виде, проявляясь лишь незначительными выделениями из носа и чиханием. Через несколько дней герпес нередко переходит в хроническую форму. При правильном лечении смертность менее 10%.

У беременных кошек FVR может вызвать выкидыши, а если котята все же рождаются, то они будут заражены вирусом.

Возможные осложнения герпеса:

· пневмония

· рубцевание тканей глаза, что может привести к помутнению роговицы, закупорке носослезного протока — причине постоянного слезотечения

· эозинофильный кератит как следствие неправильной работы иммунной системы

· секвестр роговицы – некроз участка роговицы с изменением цвета.

Все эти осложнения требуют внимательного лечения, а секвестр роговицы – хирургического вмешательства.

Особенность герпесвируса в том, что попав однажды в организм кошки, он сохраняется в нервных клетках в течение всей жизни животного. Лечение может только снять симптомы заболевания, но не может навсегда искоренить вирус.

Первая вспышка, как правило, самая тяжелая. После восстановления иммунной системе здоровой кошки обычно удается держать вирус в узде. Но какой-нибудь стресс, другая болезнь или использование кортикостероидов могут спровоцировать новый рецидив герпеса. И тогда животное вновь становится заразным.

Диагностика ринотрахеита

Симптомы ринотрахеита схожи с внешними проявлениями других заболеваний, от которых его следует отличить.

Диагноз FVR устанавливается на основании:

анамнеза (сведениях о развитии заболевания – рассказ владельца)
осмотра (особенно показательно наличие язв на роговице глаз)
анализов крови
ПЦР (полимеразной цепной реакции) для идентификации ДНК вируса герпеса
выращивания вируса из образцов выделений из носа, глаз и горла кошки
иммунофлюоресцентного теста на антитела

К сожалению, при скрытой форме (когда нет клинических признаков) диагностирование герпеса неэффективно.

Лечение герпеса

Поскольку герпес неизлечим, цель лечения – устранение его симптомов и сокращение рецидивов.

Лечение назначается индивидуально в зависимости от тяжести заболевания и может включать: антибиотики (для предотвращения вторичных инфекций), противовирусные средства, препараты для обработка глаз и носа, внутривенные питательные капельницы (если кошка не ест).

Особое внимание уделяется глазам. Очень важно правильное агрессивное лечение конъюктивита, кератита, язв роговицы, чтобы избежать серьезных осложнений.

В период лечения пища, предлагаемая питомцу, должна быть максимально привлекательной, мягкой и теплой.

При тяжелом протекании заболевания (сильном обезвоживании, развитии пневмонии), особенно для маленьких котят, рекомендуется стационар.

Заболевшее животное должно быть изолировано от здоровых (минимум на три недели).

плохая новость	хорошая новость
вирус может существовать во влажной среде до 18 часов	чувствителен к высыханию среды и дезинфекции, легко убивается антисептиками, моющими и дезинфицирующими средствами
герпесвирус заразен для любой кошки	безвреден для других видов животных, в том числе и человека
заразившись раз, кошка будет иметь вирус герпеса всю жизнь	при своевременном лечении прогноз, как правило, благоприятный

Профилактика герпеса

Как избежать заражения? Всё стандартно: хорошие условия содержания, качественное питание, чистота, достаточное проветривание, защита от сквозняков и переохлаждения, отсутствие контакта с больными животными, снижение стрессовых ситуаций, осторожность при посещении выставок.

Но самая действенная мера, как всегда, — это вакцинация. Штаммы вируса ринотрахеита входят в состав любой комплексной вакцины для кошек. Поскольку стойкий иммунитет к этому заболеванию не вырабатывается, 100%-ной гарантии защиты не будет. НО! У правильно привитых кошек болезнь обычно протекает в легкой форме и непродолжительна.

Большинство кошек хорошо реагирует на лечение и, даже являясь носителями вируса, имеют нормальную и долгую жизнь.[/fusion_text][/fusion_builder_column]

Герпесвирусная инфекция кошек (инфекционный ринотрахеит, герпесвирусный ринотрахеит) – контагиозная инфекция кошек, характеризующаяся острым и хроническим течением с периодами обострения, лихорадкой, катаральным воспалением дыхательных путей и конъюнктивитами.

Информация о возбудителе болезни

Возбудитель — ДНК-содержащий герпесвирус кошек 1 типа, относящийся к семейству Herpesviridae, подсемейству Аlphaherpesvirinae, роду Varicellovirus. Диаметр вирионов — 151-225 нм. Вирион сферическую форму и икосаэдрический тип симметрии. Геном закодирован в двойной линейной ДНК, заключенной в липогликопротеиновый капсид. Известен только один серотип вируса, штаммы которого очень однородны по данным рестриктазного ферментативного анализа ДНК.

Пути распространения инфекции

Резервуаром инфекции служат зараженные кошки. Переболевшие кошки, по меньшей мере в 80% случаев, остаются пожизненными вирусоносителями. Источником инфекции, как правило, являются кошки, страдающие острой формой. Инфицирование происходит воздушно-капельным, контактным, половым, трансплацентарным путем. При последнем отмечаются аборты, мертворождения, врожденные уродства.

Устойчивость во внешней среде

Вирус довольно устойчив во внешней среде. Чувствителен к сильнокислым и слабощелочным значениям рН, при температуре 56° С инактивируется за 3-4 минуты, при температуре 37° С - за 36 часов, медленно инактивируется в формалине, устойчив к этиловому спирту. Разрушают оболочку вируса стандартные дезинфектанты (гипохлорит, четвертичные аммонийные соединения).

Патогенез

При типичном течении инфекции репродукция вируса происходит в эпителии носоглотки, носовых полостей, миндалин, также могут быть затронуты эпителий верхнего отдела трахеи, челюстные лимфоузлы и роговица. Клетки эпителия слущиваются и образуют очаги некроза. Вирус адсорбируется на лейкоцитах и вызывает вирусемию. При прохождении трансплацентарного барьера возникает поражение мозга, плаценты и матки. Экспериментальным путем установлена тропность вируса к растущим частям скелета котят.

Значительно осложняется течение болезни при наличии вторичной бактериальной микрофлоры и при смешанной инфекции с аденовирусом и парвовирусом кошек. Гибель животных, как правило, наступает в результате действия вторичных инфекций. Наиболее тяжело заболевание проходит у молодых и иммуносупрессивных кошек.

Клинические признаки

При затяжном течении болезни развивается атония кишечника, не поддающаяся медикаментозному лечению, и исчезает только при улучшении общего состояния организма.

Иногда ринотрахеит принимает хроническое течение и диагностируется годами. При этом развивается бронхопневмония, язвенный кератит, некрозы кончика языка, расстройство ЦНС, выраженное дрожью, манежными движениями, атаксией.

Постановка диагноза осуществляется с учетом анамнеза, клинических признаков, лабораторной диагностики. Следует исключить калицивирусную инфекцию, хламидиоз и бронхосептический бордетеллез.

Применяются средства этиотропной, патогенетической, симптоматической и заместительной терапии. Особое внимание следует уделять борьбе со вторичной бактериальной микрофлорой. Противогерпетические препараты для человека не эффективны при герпесвирусе кошек, поэтому самым распространённым средством этиотропной терапии на сегодня остается интерферон. Известны случаи выработки антител к интерферону человека в организме кошек. Зная патогенетический процесс герпесвирусов, важно учитывать видовую специфичность интерферона.

Фелиферон - это уникальный видоспецифический интерферон кошки, обладающий противовирусным и иммуностимулирующим действием. Выпускается в форме раствора для инъекций. Применяется в дозе 400 000 МЕ, один раз в день, на одно животное.

Механизм действия состоит в подавлении репродукции ДНК- и РНК-содержащих вирусов в инфицированных клетках, повышении резистентности здоровых клеток организма к заражению вирусами, усилении фагоцитарной активности макрофагов и увеличении специфической цитотоксичности лимфоцитов.

При добавлении Фелиферона в схему комплексной терапии герпесвирусного ринотрахеита у кошек отмечается:

раннее улучшение клинического состояния в сравнении животными, не получавшими интерферон;
более благоприятное течение заболевания в сравнении с животными, не получавшими интерферон, характеризующееся быстрой нормализацией клинических показателей;
выздоровление в опытных группах в сравнении с контролем наступает быстрее на 2-4 дня;

Рекомендовано использовать препарат Фелиферон в схеме комплексного лечения герпесвирусного ринотрахеита кошек в дозе 400 000 МЕ внутримышечно, 1 раз в день, курс лечения 5-7 дней, в зависимости от динамики течения заболевания. При тяжелом течении заболевания дозу и кратность применения следует увеличить вдвое.

Применение препарата Фелиферон не вызывает у животных побочных действий и осложнений.

Преимущества лечения препаратом Фелиферон

Комплексное воздействие на организм

Благодаря совместному противовирусному, иммуностимулирующему и антипролиферативному действию применение интерферона в схеме лечения панлейкопении имеет превосходящий эффект в сравнении с применением иммуномодуляторов.

Видовая специфичность

Видовая специфичность Фелиферона делает возможным его многократное применение в отличие от биологических препаратов человека (интерлейкины человека, интерфероны человека) благодаря отсутствию выработки нейтрализующих антител в организме кошки.

Высокая эффективность

После первого применения препарата отмечается:

улучшение клинического состояния животных,
стабильная положительная динамика течения заболевания,
наиболее быстрое наступление клинического выздоровления.

Применение Фелиферона в лечении герпесвирусного ринотрахеита кошек

Источник:
Современная ветеринарная медицина, № 5, 2015 г.

Код	Наименование услуг	Цена, руб.	Доступность экспресс	Ед. измер.	Материалы	Заказать
008	Вирусный ринотрахеит кошек (FHV-1) (ПЦР)	600 p (Время исполнения до 72 часов)	1 исслед.	E

Цель исследования: качественный анализ для выявления ДНК вируса ринотрахеита кошек (Feline herpes virus)
Герпесвирус кошек (FHV), возбудитель вирусного ринотрахеита кошек, распространен – повсеместно. Описан только один серотип, однако вируленность отдельных штаммов вируса может отличаться.

В клетках кошки FHV реплицируется (размножается) в эпителиальных клетках конъюнктивы и верхних дыхательных путей, в нейронах. Инфицирование нейронов объясняет пожизненное вирусоносительство после первичного инфицирования.

Домашние кошки – основной хозяин FHV, но этот вирус также был выделен от гепардов и львов.

Опасность для человеческого здоровья: нет фактов, подтверждающих восприимчивость к данной инфекции человека

Устойчивость герпес-вируса во внешней среде: при 4⁰С сохраняется около 5 мес, при 25⁰С – около 1 месяца
вирус инактивируется за 3 часа при 37⁰С и за 5 мин при 56⁰С, чувствителен к большинству коммерческих дезинфектантов, антисептиков и детергентов.

Передача инфекции:
Передача через объекты окружающей среды – не является источником распространения, если речь не идет о совместном содержании кошек в группах более 4-5 особей (питомники/приюты).

Основной источник инфекции: кошки в острой стадии и носители в стадии обострения клинических симптомов. Трансплацентарная передача потомству – отсутствует. Восприимчивость котят раннего возраста к инфекции зависит от уровня материнских антител.

Виды течения герпес-вирусной инфекции:

Острая стадия заканчивается через 10-14 дней после инфицирования, при этом выделение вируса через слизистую глаз и носа начинается через 24 часа после инфицирования и длится 1-3 недели. Классическая острая форма – поражение слизистых оболочек в виде ринитов, конъюнктивитов, изъязвление роговицы.Наиболее тяжелое течение отмечается у котят.
Начальные симптомы: саливация, слезотечение, кашель, подъем температуры, отказ от корма, депрессия; серозные или серозно-геморрагические истечения из глаз/носа, гиперемия конюънктивы.

Аборты, в отличие от герпес вирусной инфекции у других видов животных, для кошек не типичны.

Хроническая стадия характерна для некоторых переболевших кошек и характеризуется более глубоким вовлечением в патологический процесс верхних дыхательных путей и тканей глаза и развитием иммуно-опосредованных поражений в них (стромальный кератит, хронический риносинусит).
Переход в латентную форму инфекции после острой фазы объясняется проникновением вируса по сенсорным нервам в нейроны (особенно в тройничный ганглий), и характеризуется периодической реактивацией вируса с выделением во внешнюю среду через слизистые. Практически все кошки, перенесшие острую фазу, становятся пожизненными латентными вирусоносителями. Выделение вируса можно инициировать примерно в 70 % случаев с помощью лечения глюкокортикоидами. Другими факторами, индуцирующими повышение секреции эндогенного кортизола и реактивацию инфекции, будут лактация (40 %) и переезд в новое помещение (18 %)
Лабораторная диагностика герпес-вирусной инфекции:

ПЦР диагностика – предпочтительный метод диагностики герпес-вирусной инфекции на острой стадии, основанный на выделении ДНК FHV из смывов с конюънктивы, носоглотки, соскобов с роговицы.
Не существует никаких прямых методов диагностики герпес-вирусной инфекции (с обнаружением ДНК или антигенов) на хронической и тем более латентной стадии.
Применение серологического тестирования ограничено по следующим причинам. Первое, антитела вырабатываются к 20-30 дню после первичной инфекции. Второе, уровень антител может быть низкий, независимо от того в какой стадии, острой или хронической, находится животное. Третье, из-за широкого распространения в природе герпес-вируса и применения вакцинации, многие кошки серопозитивны (т.е. имеют положительный титр специфических АТ).

Требования к пробе: Обратите внимание. Перед сбором материала для ПЦР нельзя использовать флюоресцин и местные анестетики, так как они влияют анализа (ингибируют процесс амплификации НК). - наиболее информативен смывы с коньюктив глаз. - при отсутствии поражений в ротовой полости рекомендуем воздержаться от сбора материала из рта! Общие правила взятия смывов: - смывы с конъюнктивы глаз берется с использовнаием стерильных зондов с ватными тампонами и стерильных пробирок объемом типа Эппендор на 1,5 мл, содержащие 300-500 мкл стерильного физиологического раствора. При наличии на веках корочек или гноя предварительно убрать их стерильной салфеткой смоченной физиологическим раствором. Зонд смочить в жидкости и отжать влагу, прислоняя ватный наконечник к внутренней стенке пробирки. Оттянув веко животного, провести зондом по слизистой века по направлению к носу обмывая глазное яблоко. Тщательно прополоскать зонд в пробирке и аккуратно отжать лишнюю влагу, прижимая наконечник к внутренней стенке пробирки. Тем же ватным зондом повторить процедуру с каждым веком обоих глаз, собирая материал в одну и ту же пробирку. Зонд утилизировать, пробирку плотно закрыть крышкой до щелчка. - Смывы с носовой и ротовой полости берутся аналогично. Для смывов из ротовой полости при отсутствии эррозий предпочтение отдается верхнему своду (небу), так как нижняя челюсть, подъязычная область обсеменены бактериальной микрофлорой. Избегать попадание слюнной жидкости в пробирку с транспортной средой. КАТЕГОРИЧЕСКИ запрещено: оставлять ватные зонды в пробирке при предоставлении проб в лабораторию Хранение и доставка: Материал для анализов доставляется в лабораторию в день взятия или на следующий день, сохраняя при +2-+8⁰С. FHV инфекция часто представлена в комбинации с калицивирусной инфекцией и/или инфекцией Chlamydophila felis, Bordetella bronchiseptica, Mycoplasma spp., поэтому рекомендуется одновременное исследование с этими патогенами. Другие микроорганизмы, включая Staphylococcus spp. и Escherichia coli, могут приводить к так называемой мультиагентной вторичной инфекции респираторного тракта.

1. Чтобы избежать ложноположительных результатов необходимо после вакцинации выдержать минимум 2-3 недели перед сдачей анализа. 2. Чтобы избежать ложноположительных результатов необходимо выдержать 2-3 недели после лечения перед сдачей анализа. Контроль за болезнью Для домашних кошек, живущих в группе или в приюте: Всех новых кошек с характерными клиническими симптомами необходимо тестировать методом ПЦР, так как высока опасность распространения инфекции. Экспериментально доказано, что при введении в группу особей выделяющих вирус в количестве 4 % от общей численности всей группы, через 1 неделю количество кошек, выделяющих вирус увеличится до 50 %. Поэтому для вновь прибывших необходим карантин – как минимум 3 недели. Для клинически здоровых кошек предписана вакцинация. При возникновении вспышки инфекции необходимо провести дифференциальную диагностику герпес вирусной инфекции (FHV) от калицивирусной инфекции (FCV) Для владельцев питомников: Наибольший риск инфицирования и развития болезни у котят до отъема – 4-8 недель, когда падает материнский иммунитет. Источник инфекции – кошки-латентные носители инфекции, в которых прошла реактивация вируса на фоне лактации. Однако, кошки с достаточным уровнем защитных АТ (тестирование на определение титра АТ) передадут защитный уровень материнских АТ с молозивом, что гарантирует сопротивляемость организма котят к герпесвирусной инфекции на первых неделях жизни. ВАЖНО! 1. Чтобы избежать ложноположительных результатов необходимо выдержать 2-3 недели после лечения перед сдачей анализа. 2. Положительный результат при отсутствии клинической картины заболевания может означать бактерио-/вирусоносительство.

Санин А.В., Наровлянский А.Н., Пронин А.В., Санина В.Ю., Изместьева Анна В., Изместьева Анастасия В., Иванова А.М.,
Мезенцева М.В., Кожевникова Т.Н., Зубашев И.К., Тимофеева Т.Ю. ФГБУ ФНИЦЭМ им. Н.Ф. Гамалеи Минздрава России, г. Москва
Ожерелков С.В. ФГБНУ "Федеральный научный центр исследований и разработки иммуно-биологических
препаратов им. М.П. Чумакова" РАН, г. Москва

Введение . В последние годы герпесвирусные инфекции получают все большее распространение среди домашних г животных. Особенно заметно растет заболеваемость кошек инфекционным ринотрахеитом [12]. Возбудитель этой инфекции - ДНК-содержащий герпесвирус кошек типа 1 (feline herpesvirus type 1, или FHV-1), обладающий липопротеиновой оболочкой, относящийся к подсемейству а-герпесвирусов Alphaherpesvirinae. Помимо FHV-1, в это подсемейство входят также вирус инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота, вирус болезни Ауески, вирус болезни Марека, герпесвирус человека 1 и др. [1]. Возбудители характеризуются наличием липопротеиновой оболочки и содержат 2-цепочечную ДНК. Несмотря на то, что в настоящее время для лечения и профилактики герпетических инфекций используется достаточно большое количество иммуномодуляторов и противовирусных средств, поиск и внедрение препаратов, повышающих резистентность к герпетической инфекции, остается актуальной задачей [15]. Очевидно, что подобные препараты должны не только подавлять размножение вируса герпеса и способствовать коррекции вирусиндуцированного иммунодефицита, но и соответствовать требованиям к безопасности, включающим отсутствие токсичности, аллергенности и реактогенности.

В предыдущих исследованиях было показано, что препараты на основе фосфорилированных полипренолов подавляют размножение ряда вирусов в чувствительных культурах клеток, а также обладают терапевтической активностью при лечении вирусных заболеваний мелких домашних животных <2-7, 9,10>.

Цель исследования - изучить лечебно-профилактическую эффективность препарата Гамапрен (далее, ГП), действующим веществом которого являются фосфорилированные полипренолы, выделенные из листьев шелковицы, при различных вариантах экспериментальной инфекции, вызванной вирусом простого герпеса 1 типа (ВПГ 1) у мышей.

Материалы и методы исследований . Использовали вирус ПГ-1 (штамм VR-3), полученный из ГУ НИИВП им. О.Г. Анджапаридзе РАМН, и штамм Л2 (коллекция вирусов НИИ вирусологии им. Д.И.Ивановского).

В опытах использовали аутбредных беспородных мышей обоего пола массой 7-8 и 10-12 г, полученных из филиала "столбовая" ФГБУН "НЦБТ ФМБА".

В качестве препаратов использовали ГП производства ООО "ГамаВетФарм", содержавший 5 мг активного вещества в 1 мл. Исходный препарат разводили в 50 раз стерильной дистиллированной водой и вводили мышам в объеме 0,2 мл (20 мкг/мышь). В качестве препарата сравнения использовали Ридостин производства ЗАО "Вектор-Медика", п.Кольцово Новосибирской области, содержащий 8 мг активного вещества в 1 мл. Использовали дозу 200 мкг/мышь/ 0,2 мл, в/б, обычно применяемую у мышей при моделировании инфекции

Определение антивирусной активности по подавлению симпластообразования в клеточной культуре. Для оценки противовирусной активности ГП использовали культуру клеток VERO, которую заражали ВПГ1, штамм VR-3. В зараженной культуре оценивали количество симпластов.

Для культивирования клеток VERO использовали ростовую питательную среду: 2/3 среды Игла МЕМ (ПанЭко) и 1/3 среды ДМЕМ (ПанЭко), 15 МЕ/мл гентамицина (ICN, США), 10 % эмбриональной телячьей сыворотки (ICN, США). Клетки рассевали в концентрации 1,5x105 кл/мл в 24-луночных планшетах (ПанЭко, кат. № ПК24о или аналогичные) по 1 мл в лунку. Культивировали в СО2-инкубаторе при 37 0С, 5 % СО2 и 90 % влажности 24 часа до образования монослоя, после чего добавляли по 1 мл ВПГ-1 в разведении от 10-3 до 10-7 (исходный титр 107 ТЦД50/мл). В опытные лунки добавляли ГП в конечной концентрации 400 мкг/мл. В контрольные лунки вносили в том же объеме раствор плацебо. Через 24 часа подсчитывали число симпластов и вычисляли процент подавления симпластообразования по формуле:

где: a - количество симпластов в опытных лунках; b - количество симпластов в контрольных лунках.

Для экспериментов in vivo была отобрана серия ГП, после воздействия которого на клетки VERO оставалось 2 симпласта на лунку (в контроле - 68).

Оценку эффективности ГП при экспериментальном герпетическом менингоэнцефалите проводили на мышах массой 7-8 г при заражении их в мозг 0,03 мл материала, содержащего 10 ЛД50 ВПГ-1 (штамм Л2, инфекционность-5,0-5, 5 ЛД50/0,03 мл), что обеспечивало гибель животных в контрольной группе. ГП вводили внутрибрюшинно в/б или п/к, или перорально по лечебно-профилактической (-24часа, -4 часа, +4часа, +24 часа и +48 часов по отношению к заражению ВПГ-1) схеме. Срок наблюдения - 21 день. В каждой группе было по 20 животных. Эффективность ГП оценивали по увеличению выживаемости и средней продолжительности жизни (СПЖ) животных в опытной группе по сравнению с контрольной группой.

Модель экспериментальной герпетической инфекции у мышей воспроизводили на мышах массой 10-12 г. Для заражения использовали ВПГ-1 штамм Л2, прошедший 3 пассажа на белых мышах весом

7-8 г при внутримозговом заражении. Титр вируса при этом составил 7 lg ЛД50/0,03 мл. Мышей заражали в/б вируссодержащей 10%-ной суспензией мозга мышей (доза - 100 ЛД50). ГП вводили в/б по 2-м схемам: профилактической (за 24 часа до заражения ВПГ-1) и лечебно-профилактической (одновременно с ВПГ-1). В качестве референс-препарата использовали Ридостин, который вводили за 24 часа до заражения ВПГ-1. В каждой группе было по 10 мышей, срок наблюдения составил 15 дней. Противовирусную активность определяли по увеличению выживаемости и СПЖ.

Биологическое титрование ВПГ-1 из мозга мышей на клетках VERO. Для доказательства противовирусной активности ГП были проведены опыты биологического титрования вируса из мозга мышей на клетках VERO.

Титр ВПГ-1 в ткани мозга опытных и контрольных мышей, взятой на 6-й день после заражения (т.е. на пике инфекционного процесса), определяли после обработки культуры клеток 10-кратными разведениями суспензии мозга мышей. Наблюдение и учет ЦПД осуществляли на 3-4-й день после контакта клеток с инфекционным материалом.

Оценка противовирусной эффективности ГП in vivo в инкубационном периоде и на этапе клинически выраженной герпетической инфекции.

На первом этапе исследовали противовирусную активность ГП при введении до появления первых клинических признаков заболевания.

Под наблюдением находились 4 групп мышей (по 16 в каждой). Всех мышей заражали ВПГ-1 в дозе 105 ТЦД50 /0,5 мл, в/б + 0,2 мл физраствора; 2-я группа - за 24 часа до заражения вводили Ридос-тин, в/б; 3-я группа - 3-х кратно вводили ГП (одновременно с ВПГ-1, через 24 и 48 часов после заражения), п/к; 4-я группа - 4-х кратно вводили ГП, п/к (на 1-е, 2-е, 3-и, 4-е сутки после заражения, до появления первых клинических признаков заболевания).

На 2-м этапе изучали лечебное действие ГП у мышей с клинически выраженными признаками заболевания. Под наблюдением находились 3 группы животных (по 26 мышей в каждой). Всех мышей заражали ВПГ-1 в дозе 105 ТЦД50 /0,5 мл, в/б + 0,2 мл физраствора, в/б; 2-я группа - за 24 часа до заражения вводили Ридостин в дозе 200 мкг/мышь/0,2 мл, в/б; 3-я группа - 4-кратное п/к введение ГП на 4-е, 5-е, 6-е и 7-е сутки после заражения.

За мышами проводили ежедневное наблюдение в течение 14-и суток, выявляли больных и павших особей. Клинические признаки заболевания регистрировали с 4-х по 8-е сутки после заражения. У больных мышей наблюдали характерные признаки герпетической инфекции с поражениями ЦНС: вялость, взъерошенность шерсти, парезы задних конечностей, судороги с последующей гибелью. По окончании наблюдений, рассчитывали показатели летальности по каждой группе: отношение числа павших животных к общему количеству мышей в группе (в %) и СПЖ в сутках.

Результаты и обсуждение . Эффективность препарата Гама-прен при экспериментальном герпетическом менингоэнцефалите. На модели экспериментального герпетического менингоэнцефалита у мышей показано, что применение ГП по лечебно-профилактической схеме защитный эффект составил 47% при п/к введении, и был несколько ниже при других способах введения. Наибольшую СПЖ наблюдали при пероральном введении (табл. 1).

Таблица 1. Эффективность препарата Гамапрен при герпетическом менингоэнцефалите мышей

р Лечебно-профилактическая эффективность препарата Гамапрен при экспериментальной герпетической инфекции у мышей.

Наибольший эффект был обнаружен у ГП при лечебно-профилактической схеме введения (0час) - выживаемость составила 90%, защита - 50%, а СПЖ - 14,1±0,85. Аналогичным эффектом обладал и эталонный противовирусный препарат Ридостин (табл. 2). В контроле выживаемость была 40%, а СПЖ - 10,0±1,31.

Таблица 2. Эффективность препарата Гамапрен при экспериментальной герпетической инфекции мышей

Ридостин - 24 часа

Примечание: * Р Таблица 3. Противовирусная эффективность препарата Гамапрен в опытах биологического титрования ВПГ-1 из мозга мышей на клетках VERO

Титр ВПГ-1, lg ТЦД50/мл, при использовании препаратов

Исследование антигерпетической активности препарата Гамапрен в эксперименте in vivo в инкубационном периоде и на этапе клинически выраженной инфекции. Как видно из данных, представленных в таблице 4, доза ВПГ-1, использованная в данном опыте (105 ТЦД50), соответствует 1 ЛД75. Ридостин защищал 44% мышей (группа 2), а ГП в дозе 20 мкг/мышь после 3-кратного введения защищал 50% мышей; показатель СПЖ был значительно больше контрольного (группы 1 и 3); после 4-кратного введения ГП защищал 57% мышей, а СПЖ возрастала в 2 раза (группы 1 и 4).

Таблица 4. Противовирусная активность ГП в инкубационном периоде при экспериментальной инфекции, вызванной ВПГ-1

0 день: кол-во павших/ общее кол-во

6 день: кол-во павших/ общее кол-во

7 день: кол-во павших/ общее кол-во

9 день: кол-во павших/ общее кол-во

2. ВПГ + Ридостин

3. ВПГ+ ГП 3-х кратно

4. ВПГ + ГП 4-х кратно

Примечание: * - разница между показателями летальности и СПЖ статистически достоверна (при Р Таблица 5. Противовирусная эффективность препарата Гамапрен при клинически выраженной инфекции, вызванной ВПГ-1

0 день: кол-во павших/ общее кол-во

6 день: кол-во павших/ общее кол-во

7 день: кол-во павших/ общее кол-во

9 день: кол-во павших/ общее кол-во

ВПГ+ ГП 4-х кратно

Примечание: * - разница между показателями летальности и СПЖ статистически достоверна (при Р Заключение . Таким образом, препарат Гамапрен в экспериментальном исследовании на мышах проявил выраженную антивирусную активность в отношении различных форм инфекции, вызванной ВПГ-1. Наибольшая эффективность препарата выявлена при введении согласно профилактической и лечебно-профилактической схемам.

Резюме . Значимость герпесвирусных инфекций в инфекционной патологии мелких домашних животных возрастает. Хотя для борьбы с этими инфекциями используется достаточно большое количество препаратов, разработка и внедрение эффективных лечебных средств остается актуальной задачей. Авторами изучена лечебно-профилактическая эффективность препарата Гамапрен (ГП), действующим веществом которого являются фосфорилированные поли-пренолы, выделенные из листьев шелковицы, при различных вариантах экспериментальной инфекции, вызванной вирусом простого герпеса 1 типа (ВПГ 1) у мышей. Использовали ВПГ-1 (штаммы VR-3 и Л2. Опыты проводили на аутбред-ных белых мышей обоего пола массой 7-8 и 10-12 г, полученных из питомника Столбовая. Использовали коммерческий препарат ГП, который вводили мышам в дозе 20 мкг/мышь/0,2 мл. В качестве препарата сравнения применяли коммерческий препарат Ридостин. Модель экспериментального герпетического менингоэнцефалита создавали на мышах массой 7-8 г при заражении их в мозг 0,03 мл материала, содержащего 10 ЛД50 ВПГ-1. Эффективность ГП оценивали по увеличению выживаемости и средней продолжительности жизни (СПЖ) животных в опытной группе по сравнению с контрольной группой. Модель экспериментальной герпетической инфекции у мышей воспроизводили на мышах массой 10-12 г. Для заражения использовали ВПГ-1 штамм Л2, прошедший 3 пассажа на белых мышах весом 7-8 г при внутримозговом заражении. Титр вируса при этом составил 7 lg ЛД50/0,03 мл. ГП вводили в/б по 2-м схемам: профилактической (за 24 часа до заражения ВПГ-1) и лечебно-профилактической (одновременно с ВПГ-1). Также оценивали противовирусную активность ГП при введении до появления первых клинических признаков заболевания и на этапе инфекции с клинически выраженными признаками заболевания. Авторами показано, что ГП в дозе 20 мкг/мышь при п/к введении обладает выраженным лечебно-профилактическом действием при экспериментальной герпетической инфекции. Противовирусная эффективность ГП была выявлена как на модели экспериментального герпетического менингоэнцефалита, так и при введении мышам, инфицированным ВПГ-1 до появления первых клинических признаков заболевания и на этапе инфекции с клинически выраженными признаками заболевания. Выявлена эффективность ГП при клинически выраженном герпесе на фоне развивающейся неврологической симптоматики: препарат проявлял выраженное лечебное действие при ежедневном однократном введении в течение острого периода (на 4-е, 5-е, 6-е и 7-е сутки после заражения ВПГ-1).

Ключевые слова : Гамапрен, вирус простого герпеса 1 типа, противовирусные препараты, герпесвирусные инфекции кошек, вирус инфекционного ринотрахеита кошек.

Читайте также: