Рота и коронавирусами

Вирусная диарея телят, вызываемая коронавирусами, мало изучена.

В 1972 г. впервые было сообщено об обнаружении коронавируса как этиологического агента диспепсии новорожденных телят, Впоследствии оказалось, что коронавирусы имеют широкую зону распространения и наносят большой экономический ущерб животноводству. Заболеваемость телят — до 100%, гибель — 15 %, а телят более старших возрастов — 2—5 %.

В естественных условиях болеют телята как молочного, так и мясного скота в возрасте 3—21 дней и до 8 нед. Болезнь протекает в виде энзоотических вспышек, чаще в холодный период года. Заболеваемость зависит от возраста животных: у телят она составляет 40 % (иногда 100 %), у взрослых ниже — 10 %. Тяжесть заболевания зависит от вирулентности вируса, его дозы, наличия в организме бактериальной микрофлоры, условий кормления, содержания и других факторов. Коронавирусная инфекция очень часто протекает в сочетании с ротавирусным заболеванием, а также с другими болезнями, вызванными патогенными агентами как вирусной, так и бактериальной природы.

Характеристика возбудителя. Вирус относится к семейству Coronaviridae, роду Coronavirus. Название происходит от латинского corona в связи с наличием шипиков в виде короны на поверхности вирусной частицы.

Вирионы коронавируса представляют собой частицы с диаметром от 60 до 200 нм. Они состоят из нуклеокапсида спиральной симметрии и липопротеидной оболочки, на поверхности которой имеются булавовидные выступы длиной 12—24 нм, образующие подобие солнечной короны.

Геном вируса представлен единой односпиральной линейной плюс-PHК.

Устойчивость к физико-химическим воздействиям. Вирус чувствителен к эфиру, хлороформу, трипсину и прогреванию при температуре 56 °С, УФ-лучам. Стабилен в среде с pH 5,0—7,0.

Антигенная структура. Изучена недостаточно, однако известно, что коронавирусы имеют белки трех основных групп: белок нуклеокапсида, который ассоциирован с геномом и формирует спиральный РНП; белки оболочки, являющиеся гликопротеидами, которые обеспечивают адсорбцию и проникновение вируса и клетку и обусловливают слияние вирусной и клеточной мембран; матриксный белок, находящийся в составе вирусной оболочки.

Антигенная вариабельность. Изучена слабо. Серотипы не установлены. Коронавирус крупного рогатого скота не имеет антигенного родства с вирусами инфекционного бронхита птиц и инфекционного гастроэнтерита свиней, относящихся к семейству коронавирусов. Обнаружено антигенное родство с коронавирусом человека (штамм ОС-43), коронавирусом телят.

Литературные данные свидетельствуют о широких антигенных и биологических взаимосвязях между коронавирусами человека и животных некоторых видов (крупного рогатого скота, обезьян, мышей).

Антигенная активность. Вирус индуцирует в организме естественно и экспериментально зараженных животных комплемент-связывающие, преципитирующие, вируснейтрализующие и антикам агглютинирующие антитела, которые выявляют в РСК, РДП, РН, РТГА, РНГА, ИФА.

Культивирование вируса. В лабораторных условиях коронавирус удается культивировать в культуре клеток почки эмбриона крупного рогатого скота (после предварительной адаптации). Вирус вызывает цитопатические изменения в виде синцития и округли 1ия клеток. Длительное пассирование вируса приводит к снижению его вирулентности. Вирус размножается в цитоплазме инфицированных клеток.

Гемагглютинирующие свойства. Вирус обладает гемагглютинирующей и гемадсорбирующей активностью в отношении эритроцитов крыс, мышей и хомяков.

Экспериментальная инфекция воспроизводится на телятах, не получивших молозиво, или гнотобиотах. Диарея развивается через 18—24 ч после заражения. Без лечения животные обычно погибали от обезвоживания через 6—7 дней. Интраназальное и интратрахеальное заражение телят сопровождается лишь незначительными респираторными нарушениями.

Клинические признаки. Инкубационный период длится 18—24 ч. У заболевших отмечают угнетение, профузный понос, фекалий желтого цвета, часто с кровянистой слизью. Затем понос становится водянистым, состоящим из творожистых масс. В некоторых случаях наблюдается пенистое слюноотделение из-за наличия язв и ротовой полости. Болезнь продолжается 2—3 нед, приводит к истощению животных и может закончиться их гибелью.

Патологоанатомические изменения. При вскрытии обнаруживают язвы на слизистой пищевода, иногда сычуга. Двенадцатиперстная кишка заполнена газами, стенки ее истончены, прозрачны, с геморрагическими язвами. Слизистая ободочной кишки гиперемирована и изъязвлена, прямой кишки — часто утолщена, на ней образуются продольные отечные складки с язвами. При микроскопическом исследовании отмечают атрофию слизистой тонкого кишечника.

Локализация вируса. Особенность данной инфекции состоит в том, что коронавирус размножается как в кишечнике, вызывая диарею, так и респираторном тракте телят. Вирус преимущественно размножается в дистальной части тонкого и толстого кишечника, в эпителиальных клетках слизистой носовой полости, трахеи и легких. Коронавирус с одинаковой частотой выделяется как из желудочно-кишечного, так и респираторного трактов больных телят. Несмотря на размножение в респираторном тракте, коронавирус не вызывает респираторных заболеваний у телят.

Клинически здоровый рогатый скот может быть хроническим носителем вируса, и в период отела он становится вирусовыделителями. Вирус выделяется с фекалиями не менее 3 мес после отела. Результаты серологических исследований свидетельствуют о широком распространении коронавирусной инфекции. В отдельных стадах 50—98 % коров имеют антитела к коронавирусу.

Источник инфекции — больные и клинически здоровые животные-вирусоносители. Заражение происходит алиментарным путем. Передается заболевание через инфицированные предметы ухода, кормушки и помещения.

Диагностика. Диагноз ставят на основании эпизоотологического анализа, характерных клинических признаков, патологоанатомических изменений и результатов лабораторных исследований.

Патологический материал параллельно исследуют на ротавирусную инфекцию, вирусную диарею и другие агенты, вызывающие кишечные заболевания у телят.

Взятие и подготовка материала. Для лабораторного исследования направляют пробы фекалий, кусочки кишечника с содержимым и парные сыворотки крови. Отправляют их в лабораторию в термосе с охлаждающей смесью. К исследованию материал подготавливают по общепринятым методам.

Индикация вируса в исследуемом материале направлена на: обнаружение вирионов вируса методом электронной микроскопии и иммуноэлектроноскопии. Используют обычно в научно-исследовательских институтах;

обнаружение вирусного антигена с использованием ИФА, РИФ, РГА;

обнаружение вирусной нуклеиновой кислоты с помощью ПЦР.

Изоляцию вируса из исследуемого материала обычно проводят на культуре клеток почки эмбриона коров. Однако в связи с трудностью культивирования вируса этот метод не получил широкого применения в диагностических лабораториях.

Идентификацию вируса проводят одновременно с его индикацией методами электронной микроскопии (ЭМ), иммунной электронной микроскопии (ИЭМ), ИФА, РИФ, РТГА, РСК.

Ретроспективная диагностика. Для этой цели используют сыворотки крови от коров и парные сыворотки, взятые от больных телят с интервалом 2—3 нед. Сыворотки крови исследуют в серологических реакциях: РТГА, РСК. Может быть использована PH при наличии штамма коронавируса, адаптированного к культуре клеток.

В настоящее время в диагностических лабораториях для индикации и идентификации вируса в исследуемом материале чаще используют ИФА, РГА и РТГА, а для обнаружения антител в сыворотках крови — РТГА с эритроцитами мышей.

Дифференциальная диагностика. Необходимо исключить ротавирусную инфекцию, вирусную диарею, а также колибактериоз и другие бактериальные инфекции.

Иммунитет и специфическая профилактика. В сыворотках крови телят-реконвалесцентов установлены вируснейтрализующие антитела в различных титрах. Сывороточные антитела у животных-реконвалесцентов не защищают их от повторного инфицирования. Видимо, в защите имеет значение местный иммунитет. При коронаинфекции С. А. Мебус (1974) из смывов кишечника телят-реконвалесцентов выделил специфические γ-глобулины классов IgM и IgA, которые нейтрализовали коронавирусы в разведении 1 : 32. Это можно рассматривать как оценочный тест иммунной защиты организма.

Для специфической профилактики применяют живую и инактивированную вакцины. Их готовят из полевого штамма коронавируса, выделенного из фекалий больных телят и адаптированного к культуре клеток почки и легкого эмбриона коровы. Телят вакцинируют перорально сразу после рождения, а стельных коров — парентерально за 30—90 дней до отела.

Наиболее эффективный метод борьбы с вирусной диареей новорожденных телят — вакцинация живой вакциной, полученной из аттенуированных штаммов рота — и коронавирусов. В экспериментальных условиях она защищает всех телят, а в полевых — снижает количество заболевших. Инактивированные вакцины пригодны для вакцинации коров и создания колострального иммунитета. Выпаивание телятам молозива вакцинированных коров, содержащего антитела в тигре 1 : 128 и выше, снижало заболеваемость телят в 4—7 раз и предотвращало их гибель.

Показано, что иммунизация коров в последней трети стельности живой вакциной против корона-, рота — и колиинфекции влияла на экскрецию коронавируса. Среди вакцинированных количество вирусовыделителей в период отела не увеличивалось, тогда как в контрольной группе животных возросло с 20—30 до 65—70 %.

Система профилактики и борьбы с вирусной диареей телят должна быть направлена на своевременное и всестороннее диагностическое обследование коров (матерей и телят) на вирусные инфекции и установление ассоциации возбудителей кишечных заболеваний.

Если вы нашли ошибку, пожалуйста, выделите фрагмент текста и нажмите Ctrl+Enter.

В. А. Мищенко, О.И. Гетманский,

Д. К. Павлов, Т.Б.Жбанова,

А.Н. Пономарев, О.В. Кухаркина,

Ю.А. Костыркин, СВ. Миськевич

Национальный аграрный университет, г. Киев, Украина

Резюме В работе представлены результаты эпизоо-тологического мониторинга диарей новорожденных телят в животноводческих хозяйствах РФ, Украины и Белоруссии, а также экспериментальные данные по применению вакцин против рота- и коронавирусной инфекций на глубокостельных коровах.

В структуре заболеваний телят в ранний постнатальный период превалирующее место занимают нарушения функций пищеварительной системы, клинически проявляющиеся диареей, обуславливающей развитие выраженной дегидратации, токсемии, иммунодефицита в, нарушения обмена веществ.

Этиопатогенетически поражения органов пищеварения отличаются значительным полиморфизмом, включающим широкий спектр различных факторов, в том числе генетических, физиологических, санитарно-гигиенических и инфекционных. Массовые нарушения функций пищеварения, клинически проявляющиеся диареями, регистрируются у 70-80% новорожденных телят уже к концу первых суток после рождения. Больные телята отказываются от молозива, постоянно лежат, быстро наступает обезвоживание, интоксикация, энофталь--мия, резко понижается тонус.

Гибель новорожденных телят, как правило, наступает на 2-5-й или 7-10-й дни. Обычно погибает от 15 до 55% новорожденных телят [6,10,11].

Ведущей причиной гастроэнтеритов новорожденных телят являются инфекционные агенты, в том числе вирусы, бактерии, простейшие и грибы, вирулентность которых повышается на фоне различных неблагоприятных условий содержания и кормления. Возбудители инфекционных заболеваний попадают в организм обычно в первый день жизни телят [12,15].

Считается, что вирусы являются пусковым механизмом для развития патологии кишечника. При диареях новорожденных телят выделяют рота-, корона-, парво-, торо-, калици-, пес-ти-, астро- и реовирусы [3,12,16].

В основном диарея новорожденных телят протекает в виде смешанных инфекций. При смешанных инфекциях трудно определить роль того или иного инфекционного агента, который выделяется от больных диарей телят. Факт обнаружения того или иного возбудителя от больных диарей новорожденных телят не служит убедительным доказательством его этиологической роли в патологии.

Вирусная инфекция начинается с адсорбции возбудителей на рецепторных клетках цилиндрического эпителия тонкого отдела кишечника. В процессе репродукции вируса происходит гибель пораженных клеток, их десквамация и нарушение целостности эпителия кишечника. Цилиндрический эпителий быстро сменяется на дифференцированный кубический и плоский. Это приводит к нарушению всасывающей и секретирующей способности клеток тонкого кишечника и усилению его перистальтики.

Ряд исследователей диареи новорожденных телят относят её к мембранопатологиям. Заболевания животных, которые протекают с симптомами поражения желудочно-кишечного тракта и токсикоза, сопровождаются активацией процессов перекислого окисления липидов, накоплением в межклеточном пространстве супероксидного иона перекиси водорода и гипероксидного радикала, являющиеся основной причиной повреждения тканей. В организме больного теленка происходят существенные биохимические изменения. Интоксикация влечет за собой существенные изменения в обмене, которые приводят к иммуносупрессии и антиоксидантному стрессу [1,13].

Все это позволяет рассматривать диарею новорожденных телят как комплексную патологию организма, при которой доминируют признаки нарушения функции пищеварения: общей интоксикации, обезвоживания, мембранопатологии и иммуносупрессии.

В последнее время установлено, что при вирусных инфекциях происходят аберрации хромосом клеток больного животного [5].

В данном сообщении приведены результаты сравнительных исследований различных способов профилактики диареи ново рожден н ых телят.

Материалы и методы

Изучение эффективности вакцинопрофилактики вирусных диарей новорожденных телят ротавирусной и коронавирусной этиологии проводили в животноводческих хозяйствах различных регионов Российской Федерации, Украины и Белоруссии. В хозяйствах, избранных для испытания препаратов, зарегистрированы нарушения функции пищеварения новорожденных теляти в результате проведенной индикации, были обнаружены ротавирус и коронавирус крупного рогатого скота.

Животные : глубокостельные коровы черно-пестрой гол-штинофризской, красно-пестрой голштинофризской, симментальской, швицкой, красно-горбатовской, сычевской, костромской и арийской пород.

Коммерческие серии вакцин :

- против ротавирусной инфекции крупного рогатого скота сорбированной инактивированной (ТУ-9384-033-00495527-02);

- против коронавирусной инфекции крупного рогатого скота сорбированной инактивированной (ТУ-9384-034-00495527-02);

- против рота- и коронавирусной инфекций крупного рогатого скота сорбированной инактивированной (ТУ 9384-035-00495527-02).

Индикацию вирусов в пробах фекалий проводили при помощи электронной микроскопии, иммунной электронной микроскопии, иммуноферментного анализа в реакции диффузионной преципитации, реакции гемагглютинации. В отдельных пробах результаты иммунохимических методов были подтверждены методом полимеразной цепной реакции. Планирование испытаний вакцин проводили по методу когортно-го исследования [4, 7].

Результаты и обсуждение

При исследовании сывороток крови коров и телят из хозяйств, неблагополучных по вирусным гастроэнтеритам новорожденных телят, антитела к ротавирусу обнаружены в 76,9%, к коронавирусу - в 68,6% материала. В 48,4% проб сыворотки крови телят выявили одновременно антитела к ротавирусу крупного рогатого скота.

Эпизоотологический мониторинг диарей среди новорожденных телят с инфекционной этиологией проводили в животноводческих хозяйствах с различным поголовьем дойных коров и уровнем их продуктивности. Результаты проведенных исследований свидетельствуют, что в обследованных хозяйствах условия содержания и кормления коров и их продуктивность не являются определенными в этиопатогенезе ротавирусной и корона вирусной диареи новорожденных телят. Не установлено разницы в проявлении диареиных заболеваний новорожденных телят, полученных о коров разных пород. Однако, четко просматривается зависимость между количеством погибших телят и временем суток, когда происходил отел. Среди "ночных" телят заболеваемость и гибель значительно превышают аналогичные показатели "дневных". Вероятно, это связано с несвоевременной выпойкой молозива. Падеж отмечен во все месяцы года, примерно в тодинаковом соотношении к количеству родившихся телят, что указывает на отсутствие сезонности заболевания. Анализ эпизоотической ситуации в ряде племенных хозяйств свидетельствует о том, что у животных, переболевших ротавирусной или коронавирусной диареей, значительно чаще регистрируются респираторные заболевания в 15-60 - дневном возрасте. Широко используемая антибиотикотерапия в большинстве случаев неэффективна вследствие резистентности микрофлоры к применяемым лечебным препаратам.

В литературе описано несколько методических подходов по вопросу борьбы и профилактики ротавирусного и корона-вирусного энтерита новорожденных телят. Ряд исследователей считает, что профилактика ротавирусной инфекции (как "факторной" болезни) новорожденных телят с помощью специфических средств (вакцин) малоэффективна, и поэтому все усилия целесообразно направлять на повышение естественной резистентности организма новорожденного [4].

В то же время специалисты, занимающиеся изучением болезней новорожденных телят, считают, что кормление телят молозивом от коров-матерей, ранее иммунизированных ина-ктивированной вакциной, может предотвращать появление диарей новорожденных [3, 9,11,14,16].

Принимая во внимание существование различных мнений о средствах и методах профилактики ротавирусной и коронавирусной диарей новорожденных телят, были проведены широкие производственные испытания инактивированных вакцин против указанных возбудителей.

Испытания вакцины против ротавирусной инфекции КРС сорбированной инактивированной (ТУ 9384-033-00495527-02) проводили на глубокостельных коровах в условиях 21 животноводческого хозяйства, где зарегистрирована инфекция. Из 2634 новорожденных телят, полученных от коров, вакцинированных двукратно (за 45-40 дней и 25-20 дней до отела), заболело 20,3% и пало 4,5%. В этих же хозяйствах из 5975 телят, полученных от невакцинированных коров, 80,2% заболело и 29,0 пало. Результаты этих опытов представлены в таблице 1. Необходимо отметить, что больные телята подвергались лечению антибактериальными и симптоматическими средствами.

Приведенные в таблице 1 данные свидетельствуют о том, что после иммунизации вакциной против ротавирусной инфекции снизилось количество заболевших телят с 80,2% до 20,3%. Снизился падеж телят с 29,0% до 4,5%. При этом защищенность телят, полученных от вакцинированных коров, составила 95,5%.

Одновременно в животноводческих хозяйствах, где был выявлен коронавирус, испытывалась вакцина против коронавирусной инфекции крупного рогатого скота сорбированная инактивированная. Результаты этих исследований представлены в таблице 2.

Нарушения функции пищеварения отмечены у 74,2% телят, полученных от невакцинированных коров, 22,6% телят погибло. У животных, полученных от вакцинированных коров, клиническая картина заболевания коронавирусной диареей отмечена у 12,1%, а количество павших телят составило 4,3%.

Достаточно часто в пробах фекалий больных диареей новорожденных телят, взятых из многих хозяйств различных регионов, методами лабораторной диагностики одновременно обнаруживают ротавирус и коронавирус крупного рогатого скота. Поэтому в 11 животноводческих хозяйствах была испытана схема профилактики вирусных диарей, вызываемых указанными возбудителями. Проводилась иммунизация глубокостельных коров (за 45-40 и 25-20 дней до отела) вакциной против ротавирусной и коронавирусной инфекций крупного рогатого скота сорбированной инактивированной (ТУ 9384-035-00495527-02). Результаты работы представлены в таблице 3.

Результаты испытания вакцины против рота- и коронавирусной инфекции крупного рогатого скота сорбированной на глубокостельных коровах показали, что у 78 % новорожденных телят, полученных от невакцинированных (контрольных) коров, регистрируются признаки диареи. В течение 20 дней в контрольной группе погибло 25,1% телят. У 11% новорожденных телят, полученных от вакцинированных коров, отмечены нарушения функции пищеварения, 3,9% телят пало.

В 68 хозяйствах, неблагополучных по желудочно-кишечным заболеваниям новорожденных телят, ротавирус КРС выявлен в 61% всех проб фекалий, коронавирус КРС в 38%, в 28% исследуемого материала - одновременно оба возбудителя.

Результаты эпизоотологического мониторинга желудочно-кишечных заболеваний в хозяйствах многих регионов, где используются вышеуказанные препараты, подтверждают, что вакцинопрофилактика является неотъемлемой частью благополучия и экономической эффективности хозяйств.

1. Байбурин Ф.Я., Бровкина ИЛ, Прокопенко Л.Г. Коррекция иммунометаболичес-ких последствий нарушения липидного обмена, - Курск, 2000. - 122 с.
2. Вазиров Ш.С. Антигенные и протективные свойства вакцины против ротавирусной инфекции крупного рогатого скота: Автореф. дис. Кандидат ветеринарных наук - М., 1994. - 16 с.
3. Гаффаров Х.З., Иванов А.В., Непоклонов Е.А., Равилов А.З. Моно- и смешанные диареи новорожденных телят и поросят. - Казань: Изд-во ФЭП, 2002. - 592 с.
4. Дудников СА. Последствия изменения доказательной базы этиологии инфекционных болезней. 2. Эффективность проводимых мероприятий // Актуальные проблемы инфекционной патологии животных: Матер. Международной научной кон-ференци Владимир, 2003. - с.62-66.
5. Клестова 3.C. Здоровье продуктивных животных как реализация их генетического статуса. Вет.мед. Украины. - 1998. - N°5. - с.31-35.
6. Литвин В.Н., Ноживил А.И. Инфекционные и инвазионные болезни телят.- Киев. 1991. - 207с.
7. Макаров В.В., Сухарев О.И. Аналитическая эпизоотология // Аграрная Россия. - 2001. - N°3. - с.9-14.
8. Миськевич СВ. Диагностические и лечебно - профилактические мероприятия по смешанной рота- и коронавирусной инфекции крупного рогатого скота // Ве.мед.Украины. - 2000. - N°7. - с.26-27.
9. Миськевич СВ., Скибицкий В.Г. Профилактическая эффективность ассоциированной инактивированно вкцины против рота-, коронавирусной инфекции крупного рогатого скота. Результаты производственных испытаний// Вет.мед.Украины - 2000.- N°10 - с.18.
10. Миськевич СВ. Разработка реакции связывания комплимента для диагностики ротавирусной диареи телят.: Автореф.дис. Кандидат ветеринарных наук. - Киев. 1985. - 22с.
11. Огбу Огбоная, Онуфриев В.Н.„ Скибицкий В.Г. и соавт. Опыты инактиви-рования ротавируса крупного рогатого скота. Тез.докл. Республ.науч.произв.конф. -Харьков, 1990.-с.262.
12. Онуфриев В.Н., Скибицкий В.Г., Миськевич СВ. и др. Конструирование поливалентных комбинированных специфических биопрепаратов для профилактики жеудочно-кишечных заболеваний новорожденных телят//профилактика и меры борьбы с болезнями молодняка с.-х. ж-ных: Тез.докл.ресн.науч.-производ.конф. - Минск, 190. - с.14.
13. Прокопенко Л.Г., Копопли А.И. Метаболическая иммуномодуляция. - Курск. 2000. - 307с.
14. Рахадзе Л.Г., Алипер Т.И., Сергеев В.А. какой быть вакцине против вирусных гастроэнтеритов: проблемы и перспективы // Вопр.вирусологии. - 1989. - N°1.- с.5-16.
15. Скибщький В.Г. Ротав1русна шфекшя велико! рогато! худоби (ротав|русний ентерит телят). - Кшв: Укр. UJTEI, 1993. - 208с. Сюрин В.Н., Самуйленко А.Я., Соловьев Б.В., Фомина И.В. Вирусные болезни животных. - М.: ВНИТИБП, 1998. - 206с.

Всего за сутки число случаев заражения коронавирусной инфекцией в Италии выросло на две тысячи и превысило 12 тысяч.

Смертельных случаев стало больше на 196. По последним данным, погибли 827 человек.

Сводки о количестве зараженных публикуют каждый день.

Власти ввели новые меры по борьбе с распространением инфекции.

Карантин, объявленный ранее в северных регионах, распространили на всю страну.

Все массовые мероприятия отменены.

Не проводится никаких гражданских и религиозных церемоний, включая похороны.

Перемещения между населенными пунктами отныне разрешены только при особой необходимости.

Чтобы покинуть город, нужно заполнить специальный документ, указав причину выезда.

За обман придется заплатить штраф или даже сесть в тюрьму.

Почти вся торговля прекратилась.

Открыты лишь магазины, где можно купить предметы первой необходимости, и аптеки.

Фабрики и производства будут работать при соблюдении мер безопасности, сообщил премьер-министр Джузеппе Конте.

Эффект от усилий можно будет увидеть через пару недель, отмечают власти.

Всемирная организация здравоохранения объявила вспышку нового коронавируса пандемией.

В 114 странах мира инфекцию диагностировали у 118 тысяч человек.