Стафилококковый бактериофаг устойчив в анализе что значит

В 40-х годах двадцатого века были созданы и внедрены в клиническую практику бактериальные вирусы – бактериофаги, хорошо зарекомендовавшие себя при лечении инфекционных осложнений в хирургии и травматологии.

Бактериофаги представляют собой вирусы, избирательно поражающие бактериальные клетки. Антибактериальный эффект препаратов бактериофагов обусловлен внедрением генома фага в бактериальную клетку с последующим его размножением и лизисом инфицированной клетки. Вышедшие во внешнюю среду в результате лизиса бактериофаги повторно инфицируют и лизируют другие бактериальные клетки, действуя до полного уничтожения патогенных бактерий в очаге воспаления [8].

Однако с развитием химической промышленности, разработкой и внедрением новых антибиотиков и антисептиков интерес к ним значительно снизился [7].

В настоящее время, в связи с ростом антибиотикорезистентности основных возбудителей инфекционных осложнений у больных хирургического и травматолого-ортопедического профиля, появлением новых полирезистентных штаммов микробов, поиск и разработка новых эффективных препаратов с высокой антибактериальной активностью продолжается [3, 4].

На сегодняшний день, в научной литературе имеются сообщения о применении бактериофагов при лечении инфекционных заболеваний и осложнений различной этиологии [1, 11–14], а также хирургических инфекций [9, 10].

Отмечен ряд положительных качеств применения бактериофагов: бактериофаги высоко специфичны при лечении инфекций, не подавляют нормальную микрофлору и не нарушают естественный баланс внутренней среды организма, т.е. фаготерапия является этиотропной и специфической; бактериофаги не имеют противопоказаний к применению: их можно назначать беременным, кормящим матерям и детям любого возраста, включая недоношенных; бактериофаги могут использоваться не только для лечения, но и для профилактики бактериальных инфекций; бактериофаги не вызывают развития резистентности микроорганизмов; бактериофаги оказывают стимулирующее влияние на гуморальное и клеточное звенья иммунитета; бактериофаги не обладают токсическим, аллергическим и тератогенным эффектами; бактериофаги эффективны в монотерапии, но также могут применяться в комбинации с другими препаратами, в т.ч. с антибиотиками и пробиотиками [5, 6].

Однако, по данным Б.И. Асланова (2009), применение бактериофагов при отсутствии фагочувствительности к ним выделенного микробного агента, возбудителя инфекционно-воспалительного процесса, может способствовать усилению или развитию антибиотикорезистентности у данного микроорганизма [2]. Помимо этого, в научной литературе отмечен риск развития реакции обострения Яриша–Гексгеймера, которая развивается в результате высвобождения большого количества токсинов, при массивной гибели микробов при внутривенном введении препарата бактериофага [7].

Цель исследования: изучить чувствительность возбудителей инфекционных осложнений у больных после травм и оперативных вмешательств на опорно-двигательном аппарате к препаратам бактериофагов.

Материалы и методы исследования

У 33 (68,8 %) больных диагностирован хронический остеомиелит, у 4 (8,3 %) − инфекция области хирургического вмешательства после металлоостеосинтеза закрытого перелома, у 2 (4,2 %) − инфекция области хирургического вмешательства после операции на мягких тканях, у 4 (8,3 %) − глубокая инфекция области хирургического вмешательства после эндопротезирования крупных суставов, у 5 (10,4 %) − открытые переломы длинных трубчатых костей нижних конечностей, осложненные инфекционно-воспалительным процессом. Свищи зафиксированы у 23 больных (47,9 %), гнойные раны − у 25 (52,1 %).

Результаты исследования и их обсуждение

По результатам исследований общее количество штаммов бактерий, чувствительных к поливалентному пиобактериофагу, составило 67,8 % от общего количества исследуемых культур микроорганизмов (табл. 1, 2).

Аннотация научной статьи по клинической медицине, автор научной работы — Кряжев Дмитрий Валерьевич, Беляева Елена Вячеславовна, Борискина Елена Владимировна, Ермолина Галия Бариевна, Никифоров Валерий Алексеевич

Sensitivity to antibiotics, disinfecting agents and bacteriophages of ecovars of coagulase-negative staphylococci found in the child care facility

At work 271 strains of the coagulase-negative staphylococcus allocated during the current scheduled and medical maintenance in 2016 from children of age from 1 hour to 28 days are explored. The research of strains of the coagulase-negative staphylococcus was conducted in respect of their sensitivity to antibiotics, bacteriophages and disinfectants. Microbiological monitoring included capture of dabs from eyes, ears, a pharynx, a nose, skin folds and umbilical wounds of newborns at inpayments in a hospital and during treatment, and also with the intubation tube, from blood, cerebrospinal fluid and washing waters of a stomach and strains from the external environment allocated from hands of medical staff and from washouts from manipulation tables. Among the coagulase-negative staphylococcus allocated in a children's hospital prevailed S. epidermidis and S. haemolyticus differing in a polyantibiotic resistance and incomplete sensitivity to disinfectants and resistance to action of bacteriophages. Strains of S. haemolyticus showed an antibiotic resistance to penicillins, carbapenems, cephalosporins, azithromycin and incomplete sensitivity to Sepotosan-T disinfectant more often

ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ К АНТИБИОТИКАМ, ДЕЗИНФЕКТАНТАМ И БАКТЕРИОФАГАМ ЭКОВАРОВ КОАГУЛАЗОНЕГАТИВНЫХ СТАФИЛОКОККОВ, ВЫДЕЛЕННЫХ В ДЕТСКОМ СТАЦИОНАРЕ

Д.В. Кряжев1, Е.В. Беляева1, Е.В. Борискина1, Г.Б. Ермолина1, В.А. Никифоров1, Т.В. Носова2, И.В. Соловьева1, И.С. Шкуркина1,

Код специальности ВАК: 14.02.02

Дата поступления 13.06.2017

Кряжев Дмитрий Валерьевич - e-maii: micbioi2008@yandex.ru

Ключевые слова: коагулазонегативные стафилококки, антибиотикорезистентность, устойчивость микроорганизмов к дезинфицирующим средствам, фагочувствительность.

At work 271 strains of the coagulase-negative staphylococcus allocated during the current scheduled and medical maintenance in 2016 from children of age from 1 hour to 28 days are explored. The research of strains of the coagulase-negative staphylococcus was conducted in respect of their sensitivity to antibiotics, bacteriophages and disinfectants. Microbiological monitoring included capture of dabs from eyes, ears, a pharynx, a nose, skin folds and umbilical wounds of newborns at inpayments in a hospital and during treatment, and also with the intubation tube, from blood, cerebrospinal fluid and washing waters of a stomach and strains from the external environment - allocated from hands of medical staff and from washouts from manipulation tables. Among the coagulase-negative staphylococcus allocated in a children's hospital prevailed S. epidermidis and S. haemolyticus differing in a polyantibiotic resistance and incomplete sensitivity to disinfectants and resistance to action of bacteriophages. Strains of S. haemolyticus showed an antibiotic resistance to penicillins, carbapenems, cephalosporins, azithromycin and incomplete sensitivity to Sepotosan-T disinfectant more often

Key words: coagulase-negative staphylococcus, antibiotic resistance, disinfectants resistance of microorganisms, sensitivity to bacteriophages.

Стафилококковые инфекции являются актуальной проблемой практического здравоохранения из-за их широкой распространенности, вреда для здоровья и значительного социально-экономического ущерба. Значимость стафилококковых инфекций определяется высокой частотой заболеваемости, распространенностью, нозологическим и клиническим разнообразием форм инфекции [1]. Среди микроорганизмов, колонизирующих различные локусы организма человека, значительное количество приходится на коагулазоотрицательные стафилококки (КОС), которые находятся на коже и слизистых, входят в состав микробных ассоциаций. Являясь нормальными симбионтами, при определенных условиях они могут выступать в роли оппортунистических патогенов 2.

В ЛПУ Н. Новгорода на основе ретроспективного эпидемиологического анализа (2009-2012 гг.) причинами вспышечной заболеваемости ИСМП были Staphylococcus spp. (73,48%), из них S. aureus составляли 45,57%, КОС - 27,91% [5].

Удельный вес ГСИ новорожденных, имеющих бактериологическое подтверждение, составил 95,5% (2014 г. -99,6%), в т. ч. в ЛПУ Н. Новгорода - 96%. В этиологической структуре ГСИ новорожденных по-прежнему наи-

больший удельный вес (65%) занимают представители рода Staphylococcus, среди которых в 2015 г. лидировал S. epidermidis - 40,3% (в 2014 г. - 50,8%), второе место принадлежит другим видам КОС - 33,6%, на долю S. aureus приходилось 26% (в 2014 г. - 29,8%) [6].

Таким образом, КОС являются доминирующей микрофлорой в детских стационарах, что требует не только постоянного эпидемиологического мониторинга за их циркуляцией, но и определения устойчивости к антимикробным препаратам и бактериофагам [7, 8].

Целью данной работы явилось исследование штаммов КОС, выделенных в одном из детских стационаров Нижнего Новгорода, в плане их чувствительности к антибиотикам, бактериофагам и дезинфицирующим средствам.

Материал и методы

интубационных трубок пациентов ОРИТ, из крови, спинномозговой жидкости и промывных вод желудка и штаммы из внешней среды, выделенные с рук медперсонала и из смывов с манипуляционных столиков.

Идентификацию штаммов проводили методом время-пролетной MALDI-TOF масс-спектрометрии на масс-спектрометре Autoflex speed (Bruker Daltonics, Германия) с использованием программного обеспечения MALDI Biotyper 3.0. О достоверности идентификации судили по значению коэффициента совпадения Score values (2,000-3,000 - идентификация до вида, 1,999-1,700 -идентификация до рода, 1,699-0 - идентификация не прошла) и значению категорий: А - достоверная идентификация до вида, В - достоверная идентификация до рода, С - недостоверный результат.

Чистую культуру рассеивали на скошенный ГРМ-агар для дальнейшей работы.

Статистическую обработку полученных результатов проводили с использованием программ Microsoft Excel и Biostat 2009. Определяли среднюю величину показателей (М), стандартную ошибку средних величин этих показателей (m), достоверность различий показателей в сравниваемых группах с использованием t-критерия Стьюдента. Различия считали достоверными при р=0,05.

Результаты и их обсуждение

Подавляющее большинство изолятов относились к четырем видам: S. epidermidis (125 штаммов), S. haemolyticus (102 штамма), S. hominis (24 штамма), S. warneri (12 штаммов) и лишь восемь изолятов были представлены другими видами КОС - S. simulans, S. lugdunensis, S. hyicus, S. cohnii.

В исследованиях антибиотикорезистентности (таблица 2) была выявлена наибольшая чувствительность культур КОС к амикацину и ванкомицину - 23,8±3,8% и 17,5±3,4% резистентных штаммов S. epidermidis,

27,5±4,4% и 19,6±3,9% резистентных штаммов S. haemolyticus, 20,8±1,7% и 8,3±1,2% резистентных штаммов S. hominis, 8,3±2,4% и 16,6±3,2% резистентных штаммов S. warnen, соответственно.

Подавляющее большинство исследованных штаммов S. haemolyticus (от 63 до 92%) показало устойчивость к действию 9 из 12 антибиотических препаратов. Более половины культур S. epidermidis (от 62 до 76%) были резистентны к 5 из 12 тестируемых антибиотиков.

Культуры S. haemolyticus достоверно отличались более высокой резистентностью к антибиотикам пенициллинового

Распределение штаммов с учетом источника выделения

Число выделенных штаммов

Источник выделения о i_ Ф (Л ■5 ! Ф 3 о •J3 о 'Е Е •с Ф с

QQ Ф ел ф os .с j= со S ел

Раневое отделяемое 80 45 24 4 7

Отделяемое глаз 46 31 12 - 3

Отделяемое верхних дыхательных путей 88 33 43 3 9

Кровь 31 12 12 3 4

Интубационные трубки 10 3 6 - 1

Внешняя среда 8 1 5 2 -

Антибиотикорезистентность штаммов КОС, выделенных в детском стационаре

Вид S. epidermidis S. haemolyticus S. hominis S. warnen

Всего культур 126 102 24 12

Линкомицин 28,6±4,0 44,1±4,9 45,8±2,1 8,3±2,4

Ванкомицин 17,5±3,4 19,6±3,9 8,3±1,2 16,6±3,2

Азитромицин 37,3±4,3 63,7±4,8 41,7±2,1 58,3±4,3

Амикацин 23,8±3,8 27,5±4,4 20,8±1,7 8,3±2,4

Меропенем 47,6±4,5 76,5±4,2 54,2±2,1 33,3±14,2

Имипенем 34,1±4,2 76,5±4,2 33,3±2,0 33,3±14,2

Цефепим 66,7±4,2 90,2±2,9 87,5±1,4 41,7±14,8

Цефоперазон 46,8±4,4 86,3±3,4 45,8±10,3 41,7±14,8

Цефотаксим 69,0±4,1 89,2±3,0 79,2±1,7 33,3±14,2

Цефтриаксон 65,9±4,2 90,2±2,9 62,5±10,0 41,7±14,8

Амоксициллин 62,7±4,0 90,1±2,9 95,8±4,0 66,7±4,1

Оксациллин 76,2±3,8 92,2±2,6 91,7±5,6 33,3±14,2

ряда (более 92,0% штаммов), цефалоспоринам 3-го и 4-го поколения (86,0-90,0% штаммов), карбапенемам (76,5±4,2%), азитромицину (63,7±4,8%), чем штаммы S. epidermidis (от 34,1±4,2 до 76,2±3,8% устойчивых культур, р=0,0001-0,005).

Штаммы S. hominis, в основном, были резистентны к антибиотикам пенициллинового ряда (от 91,7±5,6 до 95,8±4,0%) и цефепиму (87,5±1,4%), реже - к цефалоспоринам 3-го поколения (от 45,8±2,1 до 79,2±1,7%). От трети до половины исследованных штаммов S. hominis были резистентны к азитромицину (41,7±2,1%) и карбо-пенемам (33,3±2,0% - к имипенему и 54,2±2,1% - к ме-ропенему). В целом более половины штаммов S. hominis (от 54 до 95%) были устойчивы к 6 из 12 антибиотических препаратов.

Напротив, культуры S. warneri чаще проявляли чувствительность к тестируемым антибиотикам, за исключением амоксициллина и азитромицина (66,7±4,1% и 58,3±4,3% резистентных штаммов, соответственно).

Среди культур S. epidermidis полирезистентными (устойчивыми к трем и более антибиотикам) были 78,8±3,7%, среди штаммов S. haemolyticus - 93,1±2,5%, S. hominis -87,5±1,4%), S. warneri - 50,0±4,4% штаммов. Также полирезистентность показали все представленные культуры S. hyicus, S. lugdunensis и S. simulans.

Тестирование культур на чувствительность к бактериофагам (таблица 3) показало, что большинство исследованных нами штаммов устойчиво к их действию. Так, к секстафагу, пиобактериофагу поливалентному, интести-бактериофагу, пиобактериофагу комплексному были устойчивы от 60,3 до 87,3% штаммов S. epidermidis, от 69,6 до 86,3% штаммов S. haemolyticus, от 62,5 до 100%

штаммов S. hominis. Лучший результат по фаголизису культур показал стафилококковый бактериофаг - не менее 62% чувствительных штаммов.

В дальнейшем изучалась чувствительность к дезинфицирующим средствам у 99 штаммов КОС, относящихся к двум видам: S. epidermidis (60 штаммов), S. haemolyticus (39 штаммов).

Из всех тестируемых микроорганизмов 61,0% был оценен как чувствительные, 38,0% - не полностью чувствительные, 1,0% - устойчивые.

Наблюдалось различие в проявлении чувствительности к дезинфицирующим средствам в зависимости от вида микроорганизмов. Более чувствительными оказались штаммы S. epidermidis (72,1%), не полностью чувствительных 26,3%, устойчивых 1,6%; менее чувствительными -S. haemolyticus (35,9%), не полностью чувствительных 64,1% (рис.).

Чувствительность к бактериофагам штаммов коагулазоотрицательных стафилококков, выделенных в детском стационаре

Œ m i * m 1 £ -O , Не можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

■ чувствительные ■ неполностью чувствительные ■ устойчивые

Штаммы чувствительные / не полностью чувствительные / устойчивые к дезинфектантам (%).

Чувствительность выделенных штаммов к дезинфицирующим препаратам

чувствительные не полностью чувствительные устойчивые чувствительные не полностью чувствительные устойчивые чувствительные не полностью чувствительные устойчивые

S. haemolyticus 94,9% 5,1% 0,0% 94,9% 5,1% 0,0% 48,7% 51,3% 0,0%

S. epidermidis 90,2% 8,2% 1,6% 95,1% 4,9% 0,0% 77,1% 21,3% 1,6%

1. Выявлено, что полирезистентными (устойчивыми к трем и более антибиотикам) были более 70% исследованных культур КОС, причем максимальные показатели устойчивости к антибиотикам обнаружули штаммы S. haemolyticus. Наибольшую чувствительность культуры КОС проявляют к амикацину и ванкомицину.

3. Большинство исследованных штаммов КОС устойчиво к секстафагу, пиобактериофагу поливалентному, инте-сти-бактериофагу, пиобактериофагу комплексному. Наилучший результат по фаголизису показал стафилококковый бактериофаг.

1. Покровский В.И., Акимкин В.Г., Брико Н.И., Брусина Е.Б., Зуева Л.П. и др. Национальная концепция профилактики инфекций, связанных с оказанием медицинской помощи, и информационный материал по ее положениям. Н. Новгород. Ремедиум Приволжье. 2012. 84 с.

Pokrovskij V.l., Akimkin V.G, Briko N.I., Brusina E.B., Zueva LP. i dr. Nacional'naja koncepcija profilaktiki infekcij, svjazannyh s okazaniem medicins-koj pomoshhi, i informacionnyj materialpo ee polozhenijam. N. Novgorod. Remedium Privolzh'e. 2012.84s.

2. Беляева Е.В., Ермолина Г.Б., Борискина Е.В., Шкуркина И.С., Носова Т.В. и др. Биологическая характеристика эковаров коагулазонегативных стафилококков, выделенных от новорожденных пациентов детского стационара. Медицинский альманах. 2016. № 3 (43). С. 36-39.

Beljaeva E.V., Ermolina G.B., Boriskina E.V., Shkurkina I.S., Nosova T.V. i dr. Biologicheskaja harakteristika jekovarov koagulazonegativnyh stafilokokkov, vydelennyh ot novorozhdennyh pacientov detskogo stacionara. Medicinskij al'manah. 2016. № 3 (43). S. 36-39.

3. Тетелютина Е.С. Особенности эпидемиологической характеристики вну-трибольничной инфекции родильниц и новорожденных в акушерских стационарах Удмурдской республики. Медицинский альманах. 2012. № 5 (24). С. 51-53.

Teteljutina E.S. Osobennosti jepidemiologicheskoj harakteristiki vnutribol'nichnoj infekcii rodil'nic i novorozhdennyh v akusherskih stacionarah Udmurdskoj respubliki. Medicinskij al'manah. 2012. № 5 (24). S. 51-53.

4. Патяшина М.А., Авдонина Л.Г., Нуруллова Н.С., Трифонов В.А., Локоткова А.И. и др. Особенности заболеваемости инфекциями, связанными с оказанием медицинской помощи в республике Татарстан. Медицинский альманах. 2015. № 5 (40). С. 48-49.

Patjashina M.A., Avdonina L.G., Nurullova N.S., TrifonovV.A., LokotkovaA.I. idr. Osobennosti zabolevaemosti infekcijami, svjazannymi s okazaniem medicinskoj pomoshhi v respublike Tatarstan. Medicinskij al'manah. 2015. № 5 (40). S. 48-49.

5. Широкова И.Ю. Эпидемиологические и микробиологические особенности инфекций, обусловленных коагулазоотрицательными стафилококками: авто-реф. дис. . к. м. н.: 14.02.02. / Широкова Ирина Юрьевна. Н. Новгород, 2014. 177 с.

Shirokova I.Ju. Jepidemiologicheskie i mikrobiologicheskie osobennosti infekcij, obuslovlennyh koagulazootricatel'nymistafilokokkami: avtoref. dis. k m. n.: 14.02.02. /Shirokova Irina Jur'evna. N. Novgorod, 2014. 177s.

6. Никифоров В.А., Кряжев Д.В., Княгина О.Н., Красногорская С.Е. Уровень заболеваемости гнойно-септическими инфекциями у новорожденных, родильниц, пациентов хирургических стационаров в структуре ИСМП в Нижегородской области в период 2014-2015 гг. и меры по их профилактике. Эпидемиология и инфекционные болезни. Актуальные вопросы. 2017. № 1. С. 10-14.

Nikiforov V.A., Krjazhev D.V., Knjagina O.N., Krasnogorskaja S.E. Uroven' zabolevaemosti gnojno-septicheskimi infekcijami u novorozhdennyh, rodil'nic, pacientov hirurgicheskih stacionarov v strukture ISMP v Nizhegorodskoj oblasti vperiod 2014-2015 gg. i mery po ih profilaktike. Jepidemiologija i infekcionnye bolezni. Aktual'nye voprosy. 2017. № 1. S. 10-14.

7. Гриценко В.А., Бирюкова Т.В., Вялкова А.А., Иванов Ю.Б. Видовая структура и характеристика биопрофиля стафилококков - возбудителей перинатальной инфекционно-воспалительной патологии у детей Оренбурга. Журнал микробиологии. 2014. № 5. С. 90-95.

Gricenko VA, Birjukova T.V., Vjalkova A.A., Ivanov Ju.B. Vidovaja struktura i harakteristika bioprofilja stafilokokkov - vozbuditelej perinatal'noj infekcionno-vospalitel'noj patologii u detej Orenburga. Zhurnal mikrobiologii. 2014. № 5. S. 90-95.

8. Авчинников А.В., Егоричева С.Д. Гигиенические аспекты профилактики инфекций, связанных с оказанием медицинской помощи в акушерских стационарах. Вестник Смоленской государственной медицинской академии. 2015. № 14 (3). С. 92-96.

Avchinnikov AV, Egoricheva S.D. Gigienicheskie aspekty profilaktiki infekcij, svjazannyh s okazaniem medicinskoj pomoshhi v akusherskih stacionarah. Vest-nik Smolenskoj gosudarstvennoj medicinskoj akademii. 2015. № 14 (3). S. 92-96.

9. Шкарин В.В., Саперкин Н.В., Ковалишена О.В., Благонравова А.С., Широкова И.Ю., Кулюкина А.А. Региональный мониторинг устойчивости микроорганизмов к дезинфектантам: итоги и перспективы. Медицинский альманах. 2012. № 3 (22). С. 122-125.

Shkarin V.V, Saperkin N.V, Kovalishena O.V, Blagonravova AS, Shirokova I.Ju., Kuljukina A.A. Regional'nyj monitoring ustojchivosti mikroorganizmov k dezinfektantam: itogi i perspektivy. Medicinskij al'manah. 2012. № 3 (22). S. 122-125.

10. Присакарь В.И., Спэтару Д.Ю. Чувствительность возбудителей внутри-больничных гнойно-септических инфекций к дезинфицирующим средствам. Медицинский альманах. 2015. № 5 (40). С. 109-111.

1.1. Настоящие методические рекомендации (далее - МР) содержат данные, необходимые для организации и проведения селективной дезинфекции биологическим методом с использованием бактериофагов как средства профилактики инфекционных болезней, связанных с оказанием медицинской помощи, и носят рекомендательный характер.

1.2. Настоящие МР предназначены для руководителей и специалистов медицинских организаций, врачей-эпидемиологов, микробиологов, дезинфектологов, а также должностных лиц органов, уполномоченных осуществлять федеральный государственный санитарно-эпидемиологический надзор.

2.1. В медицинских организациях существует высокий риск формирования госпитальных клонов (штаммов) микроорганизмов, которые могут накапливаться на объектах больничной среды и способствовать групповой заболеваемости пациентов с высокой летальностью. Формируемые госпитальные клоны (штаммы) микроорганизмов часто характеризуются устойчивостью к действию антимикробных средств, в том числе к антибиотикам, химическим дезинфицирующим средствам и антисептикам.

2.2. Дезинфекция биологическим методом с использованием бактериофагов наиболее целесообразна в эпидемиологически значимых специализированных отделениях медицинских организаций (отделения интенсивной терапии и реанимации, ожоговые), применение химических дезинфицирующих средств в которых нередко ограничено невозможностью регулярного освобождения помещений от больных, насыщенностью этих отделений большим количеством сложных медицинских аппаратов и систем слежения за жизненно важными функциями организма пациентов.

2.3. В случае распространения госпитального клона (штамма) возбудителя инфекционного заболевания, устойчивого к химическим дезинфицирующим средствам и другим антимикробным препаратам, биологический метод дезинфекции с использованием бактериофагов является дополнительным направлением, значительно повышающим эффективность профилактических и противоэпидемических мероприятий.

2.4. Бактериофаги являются вирусами бактерий. По типу взаимодействия с бактериальной клеткой фаги классифицируются на вирулентные (вызывающие гибель бактерии) и умеренные (инфицируют бактериальную клетку, встраиваются в генетический аппарат бактерии и репродуцируются в процессе деления клетки). Для дезинфекции биологическим методом используют только вирулентные фаги.

2.5. Основное свойство бактериофагов - строгая специфичность, так как каждая разновидность фага способна взаимодействовать с определенным видом бактерий.

3.1. Для дезинфекции биологическим методом применяют препараты лечебно-профилактических бактериофагов, которые содержат комплексы поликлональных вирулентных (строго литических) бактериальных вирусов, вызывающих гибель гомологичных видов бактерий за счет внутриклеточного размножения и разрушения бактериальной клетки, сопровождающихся выходом зрелых фаговых частиц, способных к заражению новых бактериальных клеток.

Для дезинфекции используются только жидкие препараты лечебно-профилактических бактериофагов, зарегистрированные на территории Российской Федерации.

3.2. Лечебно-профилактические бактериофаги представляют собой стерильные очищенные фильтраты фаголизатов соответствующих видов бактерий. Они освобождены от продуктов жизнедеятельности бактерий, эндо- и экзотоксинов, продуктов фаголизиса бактериальных клеток, белковых и антигенных комплексов питательных сред, не обладают токсическим действием и не вызывают аллергизации. На литическую активность бактериофагов не влияет наличие резистентности бактерий к антибиотикам и химическим дезинфицирующим средствам.

3.3. Бактериофаги могут широко применяться в присутствии людей, в том числе недоношенных детей и беременных. Бактериофаги устойчивы во внешней среде, совместимы со многими химическими дезинфицирующими средствами.

3.4. Лечебно-профилактические бактериофаги по своему составу подразделяются на монокомпонентные бактериофаги - препараты, содержащие вирулентные фаги бактерий одного рода или вида, и комбинированные бактериофаги - препараты, содержащие несколько видов монокомпонентных бактериофагов (прилож. 1).

3.5. Активность бактериофагов определяется по методу Аппельмана или методом Грациа (агаровых слоев). При использовании метода Аппельмана литическую активность выражают в показателях титра максимального разведения, дающего полный фаголизис соответствующих препарату видов бактерий. Метод Грациа определяет концентрацию фаговых частиц в БОЕ на мл.

3.6. Перед применением бактериофагов необходимо определить чувствительность к ним бактериального возбудителя инфекционного заболевания (прилож. 2, 3).

4.1. Для обеспечения эффективной дезинфекции биологическим методом с использованием бактериофагов в медицинской организации необходимо осуществлять микробиологический мониторинг, включающий динамическую оценку циркулирующих в ней микроорганизмов и их чувствительности к антибиотикам и дезинфицирующим средствам.

4.2. Показаниями к проведению дезинфекции биологическим методом с использованием бактериофагов являются:

- регистрация эпидемиологического неблагополучия в медицинской организации, связанного с возникновением бактериальных инфекций;

- высокий риск появления и распространения инфекции, оцениваемый по данным эпидемиологического анализа и микробиологического мониторинга;

- наличие признаков формирования госпитального штамма (клона);

- выявление штаммов микроорганизмов, устойчивых к антибиотикам и химическим дезинфицирующим средствам.

4.3. К признакам формирования госпитального штамма (клона) относятся резистентность к антибиотикам, устойчивость к химическим дезинфектантам, нарастание в структуре микрофлоры, существующей в медицинской организации, доли какого-либо генотипического или фенотипического вида патогенных бактерий с увеличением его циркуляции среди пациентов.

4.4. Решение о необходимости проведения дезинфекции биологическим методом с использованием бактериофагов принимает заместитель главного врача по эпидемиологической работе (врач-эпидемиолог) медицинской организации.

4.5. Дезинфекция биологическим методом с использованием бактериофагов проводится медицинским персоналом медицинской организации собственными силами.

4.6. При проведении дезинфекции биологическим методом с использованием бактериофагов жидкий препарат наносится на поверхности в помещениях, объекты, предметы. Используемый жидкий бактериофаг в заводской упаковке должен быть прозрачным и не содержать осадка. Вскрытие флакона с бактериофагом осуществляется с соблюдением правил асептики. Перед использованием флакон встряхивают. Вскрытый флакон должен быть использован в течение 2 часов.

4.7. Доза препарата при проведении дезинфекции биологическим методом с использованием бактериофагов составляет 1 - 2 мл/м 2 . Для достижения наибольшего эффекта бактериофаг наносится на объекты внешней среды методом распыления, для чего целесообразно использовать беспропеллентные аэрозольные упаковки однократного применения. Для снижения мешающего эффекта вспенивания препарата допускается его разведение физиологическим раствором в соотношении 1:1.

4.8. Бактериофаги наносятся на возможные места скопления возбудителей: рабочие и манипуляционные столы, поверхности шкафов с лекарственными препаратами, стойки для инфузионных систем, аппаратуру, стены, прикроватные тумбочки, столы и стулья в палатах, раковины, поручни кроватей, ручки дверей и т.д.

4.9. С целью элиминации возбудителя из наркозно-дыхательной аппаратуры бактериофаг вносится в увлажнитель.

4.10. Дезинфекция биологическим методом с использованием бактериофагов проводится в любое время суток, желательно за 3 - 4 часа до выполнения текущей (заключительной) дезинфекции химическими дезинфицирующими средствами или же через аналогичное количество времени после ее осуществления.

4.11. При правильном распылении на участках нанесения бактериофага виден мелкодисперсный слой. Таким нанесением фага обеспечивается интенсивная циркуляция бактериофагов во внешней среде, резко повышается вероятность его контакта с соответствующими бактериями, определяя высокую эффективность такого способа использования бактериофага.

4.12. При регистрации или высоком риске появления больных госпитальным сальмонеллезом и другими бактериальными острыми кишечными инфекциями обработка соответствующим возбудителю бактериофагом проводится в палатах для пациентов, туалетных и санитарных комнатах.

4.13. Контроль качества дезинфекции биологическим методом с использованием бактериофагов осуществляется путем проведения микробиологических исследований смывов с обработанных поверхностей через 6 - 8 часов после проведения дезинфекции (прилож. 4).

4.14. В процессе проведения дезинфекции биологическим методом с использованием бактериофагов врач-эпидемиолог (помощник врача-эпидемиолога) осуществляет визуальный контроль, который предполагает оценку технологии применения препарата во время дезинфекции.

5.1. В соответствии с эпидемиологической ситуацией в медицинской организации и прогнозом ее развития используются две схемы дезинфекции биологическим методом с использованием бактериофагов: интермиттирующая и однократная.

5.2. Интермиттирующая схема используется как мера профилактики возникновения и распространения инфекционных болезней в медицинской организации при высоком риске заноса (распространения) известного возбудителя инфекционной болезни.

5.3. Интермиттирующая схема предполагает регулярное, через каждые 3 дня, проведение дезинфекции биологическим методом с использованием бактериофагов, соответствующим известному возбудителю инфекционной болезни.

Обработка проводится в течение времени, равному трем инкубационным периодам инфекционного заболевания, в отношении которого осуществляется профилактика (в среднем до 3 недель).

Интермиттирующую схему используют в отделениях реанимации и интенсивной терапии, гнойной хирургии, ожоговом и других отделениях высокого эпидемиологического риска возникновения инфекций.

5.4. Однократная схема дезинфекции биологическим методом с использованием бактериофагов используется при интенсивном обсеменении больничной среды полирезистентным возбудителем или госпитальным штаммом (клоном), а также при заключительной дезинфекции после выведения больного инфекционным заболеванием из очага в медицинской организации.

5.5. При возникновении очага инфекционной болезни применяется как интермиттирующая, так и однократная схемы.

5.6. Применение биологического метода дезинфекции с использованием бактериофагов проводится согласно инструкции. Определение схемы применения биологического метода дезинфекции с использованием бактериофагов проводится после консультации с врачом-эпидемиологом.

5.7. Не рекомендуется непрерывное длительное (более 3 инкубационных периодов) использование бактериофага из-за риска формирования резистентных к фагу микроорганизмов. При отсутствии возбудителя бактериофаг элиминируется из больничной среды в течение 3 суток.

Читайте также: