Количественное определение золотистого стафилококка

Микробиологическое исследование, позволяющее выявить инфицированность золотистым стафилококком и определить количество возбудителя. При выявлении патогенных и/или условно-патогенных микроорганизмов будет определена их чувствительность к антимикробным препаратам (антибиотикам и бактериофагам). В ином случае чувствительность к антибиотикам и бактериофагам не определяется, т.к. не имеет диагностического значения.

Staphylococcus aureus culture, MRSA culture (Methicillin-resistant S. aureus culture), quantitative.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Грудное молоко, кал, мазок из зева, мазок с конъюнктивы, мазок из носа, мазок урогенитальный (с секретом предстательной железы), мокроту, отделяемое раны, отделяемое уха, ректальный мазок, среднюю порцию утренней мочи.

Как правильно подготовиться к исследованию?

  • Рекомендуется употребить большой объем жидкости (воды) за 8-12 часов до сбора мокроты.
  • Исследование рекомендуется проводить до начала приема антибиотиков и других антибактериальных химиотерапевтических препаратов.
  • Исключить прием мочегонных препаратов в течение 48 часов до сбора мочи (по согласованию с врачом).
  • Исключить прием слабительных препаратов, введение ректальных свечей, масел, ограничить прием медикаментов, влияющих на перистальтику кишечника (белладонна, пилокарпин и др.) и на окраску кала (железо, висмут, сернокислый барий), в течение 72 часов до сбора кала.
  • Женщинам исследование (процедуру взятия урогенитального мазка или сбор мочи) рекомендуется производить до менструации или через 2-3 дня после ее окончания.

Общая информация об исследовании

Золотистые стафилококки (Staphylococcus aureus) – грамположительные условно-патогенные бактерии рода Staphylococcus, являющиеся наиболее частой причиной стафилококковых, в частности внутрибольничных, инфекций. Золотистые стафилококки в норме могут располагаться на коже, слизистой оболочке носа и реже в гортани, влагалище, кишечнике. Они встречаются у 30 % здоровых людей.

Если у человека слабая иммунная система или нарушен нормальный состав микрофлоры, то при повреждении кожи (слизистых оболочек) золотистый стафилококк может приводить к разнообразным местным и системным инфекционно-воспалительным поражениям:

  • кожи (карбункулам, импетиго, фолликулиту),
  • молочных желез (маститу),
  • дыхательных путей и ЛОР-органов (тонзиллиту, гаймориту, отиту, фарингиту, ларинготрахеиту, пневмонии),
  • мочевыводящих путей (уретриту, циститу, пиелонефриту),
  • пищеварительной системы (энтероколиту, аппендициту, перитониту, парапроктиту, холециститу),
  • костно-суставной системы (остеомиелиту, артриту).

В отдельных случаях возможна генерализация инфекции с развитием септикопиемии. Производимый золотистым стафилококком энтеротоксин вызывает пищевые отравления и синдром токсического шока. Основные источники инфекции: здоровые (носители) и больные люди, домашние и сельскохозяйственные животные, а также пища, содержащая возбудителя инфекции (чаще всего это сахаросодержащие молочные продукты). Инфицирование может происходить контактным и воздушно-пылевым путем. Возможно аутоинфицирование.

Для идентификации золотистого стафилококка проводится посев клинического материала на питательные среды, где при наличии S. aureus через 18-24 часа наблюдается рост колоний золотистого цвета.

Определение количества бактерий может потребоваться, например, чтобы понять, нужно ли проводить лечение: в некоторых случаях, если количество небольшое, лечение не проводится. Решение о его необходимости зависит от клинических проявлений, а также от количества стафилококка. При небольшом содержании микробов и отсутствии симптоматики лечение может вообще не понадобиться, т. к. и в норме на слизистой могут находиться эти микробы. Стафилококк в кишечнике обнаруживается постоянно, это не повод для лечения, но если его количество превышено, тогда нужны меры (бактерия может вызывать колики и расстройства). Стафилококк в мазке без симптомов вагинита также является нормой, в то время как большие количества стафилококка в мазке, наряду с повышением лейкоцитов, требуют лечения.

Наличие стафилококка не обязательно означает инфекцию, это может быть бессимптомное носительство, например при посеве мазков из носа и зева носительством считается количество бактерий до 10 3 . Однако более высокие показатели говорят нам о золотистом стафилококке как о причине заболевания, и это уже далеко не бессимптомное носительство.

Многое зависит от возраста пациента. Например, золотистый стафилококк в количестве 10 4 является вполне нормальным показателем для детей старше 1 года, но у грудных детей в таком количестве уже потребует лечения.

В любом случае наличие стафилококка при отсутствии симптомов болезни – еще не повод к назначению лекарств.

Количество стафилококка может определяться до и после лечения. Если выясняется, что рост возбудителя обильный, значит, инфекция набирает обороты, предыдущая терапия была неудачной и срочно требуется новый курс лечения; умеренный и скудный рост микроорганизмов по результатам последних анализов говорит об успешности терапии. Кроме того, в дальнейшем необходимо контролировать количество стафилококков в течение 1 или 2 месяцев после пройденного лечения.

Отмечено также, что после пребывания больных в хирургической клинике стафилококк обнаруживался у них вдвое чаще, чем при поступлении. У больных, поступающих в стационары, наблюдается замена антибиотикочувствительных стафилококков на антибиотикоустойчивые.

Лечение больных стафилококковой болезнью препаратами пенициллина или другими давно применяемыми антибиотиками часто остается безрезультатным, поскольку такие препараты нередко только усугубляют тяжесть течения инфекции. Поэтому так важно установить, какие антибиотики будут эффективны при лечении стафилококка.

Для чего используется исследование?

  • Для определения целесообразности лечения.
  • Для дифференциации бактерионосительства и опасного инфицирования.
  • Для контроля за состоянием пациента после проведенного лечения.
  • Для того чтобы подтвердить, что стафилококк является причиной возникшего заболевания (об этом свидетельствуют высокие показатели посева).

Что означают результаты?

Референсные значения: нет роста.

Золотистый стафилококк в мазке в небольших количествах является частью нор­мальной микрофлоры человека. Значительное повышение стафилококка в мазке может быть симптомом воспалительного процесса, кожных инфекций (угри и пр.) и очень опасных заболеваний (пневмония, остеомиелит, эндокардит и др.). Результат посева интерпретирует врач исходя из того, в каком количестве выделены микроорганизмы.

Кто назначает исследование?

Терапевт, врач общей практики, педиатр, ЛОР, инфекционист.

Аннотация научной статьи по клинической медицине, автор научной работы — Ефимова Татьяна Владиславовна, Глазовская Лариса Станиславовна, Брусина Елена Борисовна, Гончаров Артемий Евгеньевич

Изучена распространенность MRSA в популяции здоровых лиц, частота инфекций , вызванных MRSA у пациентов амбулаторно-поликлинических учреждений и стационаров Кемеровской области. Определены генетические характеристики штаммов MRSA , циркулирующих в стационарах Кемеровской области.

Похожие темы научных работ по клинической медицине , автор научной работы — Ефимова Татьяна Владиславовна, Глазовская Лариса Станиславовна, Брусина Елена Борисовна, Гончаров Артемий Евгеньевич

The epidemiological peculiarities of infections, caused by methicillinresistant Staphylococcus aureusin Kemerovo region

Prevalence of MRSA in healthy population, incidence of MRSA infections in outpatients and inpatients of the Kemerovo region is studied. Genetic characteristics of MRSA isolates, circulating in hospitals of the Kemerovo region, are defined.

ЭПИДЕМИОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ ИНФЕКЦИЙ,

ВЫЗВАННЫХ МЕТИЦИЛЛИНРЕЗИСТЕНТНЫМИ STAPHYLOCOCCUS AUREUS В КЕМЕРОВСКОЙ ОБЛАСТИ

Т.В. Ефимова1, Л.С. Глазовская1, Е.Б. Брусина1, А.Е. Гончаров2,

2Санкт-Петербургская государственная медицинская академия им. И.И. Мечникова

Ефимова Татьяна Владиславовна - e-mail: bakiab_kokb@maii.ru

Изучена распространенность MRSA в популяции здоровых лиц, частота инфекций, вызванных MRSA у пациентов амбулаторно-поликлинических учреждений и стационаров Кемеровской области. Определены генетические характеристики штаммов MRSA, циркулирующих в стационарах Кемеровской области.

Ключевые слова: MRSA, циркуляция, инфекции, связанные с оказанием медицинской помощи.

Prevalence of MRSA in healthy population, incidence of MRSA infections in outpatients and inpatients of the Kemerovo region is studied. Genetic characteristics of MRSA isolates, circulating in hospitals of the Kemerovo region, are defined.

Key words: MRSA, circulation, healthcare-associated infections.

До настоящего времени золотистый стафилококк остается одним из ведущих эпидемически значимых возбудителей инфекционных процессов различной локализации. Особую озабоченность во всем мире вызывает распространение золотистого стафилококка, устойчивого к метициллину (MRSA) не только в стационарах, но и во внебольничной среде. В большинстве случаев устойчивость к метициллину сопряжена с полирезистентностью ко многим антибактериальным препаратам, что значительно увеличивает экономические затраты на лечение инфекций [1, 2]. По данным зарубежных исследований [3] при частоте носительства золотистого стафилококка 25-30% менее 2% населения являются носителями MRSA. Вместе с тем, частота внебольничных инфекций мягких тканей, вызванных MRSA, достигает 84% [4]. Результаты многоцентровых исследований в нашей стране показали, что частота внутрибольничных инфекций, вызванных MRSA, значительно варьирует в разных стационарах и составляет в среднем 33,6% [1]. Несмотря на большое количество публикаций, посвященных этой проблеме, эпидемический процесс при инфекциях, вызванных MRSA, остается недостаточно изученным.

Цель исследования - изучение особенностей циркуляции метицилинрезистентных золотистых стафилококков на территории Кемеровской области.

Материалы и методы

ПЦР для идентификации энтеротоксинов A, B, C (sea, seb, sec) и белка токсического шока (tst) проводили по методике

Mehrotra M. et al. [5], идентификацию гена токсина Пантона Валлентайна - по методике Lina G. et al. [6].

Определение структурного гена mec А, детерминирующего пеницилинсвязывающие белки (ПСБ), проводилось методом секвенирования на автоматическом секвенаторе AbiPrism 3100 (Applied Biosystems, USA).

Различия между группами оценивались по критерию хи-квадрат при уровне значимости р=0,05. Для исключения влияния эффекта множественных сравнений применялась поправка Бонферрони.

Результаты и их обсуждение

В Кемеровской области на протяжении 6 лет (2005-2010 г.г.) осуществляется мониторинг за циркуляцией MRSA. Доля MRSA составила 24,11+0,63% от общего количества штаммов золотистого стафилококка. Отмечена неоднородность распространения штаммов по отдельным территориям области от 6,96%+1,11 до 66,59+2,77%.

При оценке циркуляции MRSA в закрытых коллективах частота выделения возбудителя составила 9,91+2,97 на 1000. Наиболее интенсивная циркуляция MRSA выявлена в психиатрическом стационаре - 16,12+9,24 на 1000 госпитализированных. Не выявлено случаев носительства MRSA у детей домов ребенка.

Распространенность метициллинрезистентных золотистых стафилококков в популяции у здоровых субъектов составила 13,89 на 1000, тогда как у пациентов стационаров Кемеровской области частота выделения данного возбудителя была 298,99 на 1000 (х2=0,168; р Не можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

Пациенты с инфекциями, вызванными MRSA, поступали в стационары с частотой 155,69+14,03 на 1000 госпитализированных, что характеризует циркуляцию эпидемически значимых возбудителей и риск инфицирования пациентов как в условиях лечебно-профилактических учреждений, так и во внебольничной среде. По результатам исследования циркуляции метициллинрезистентных золотистых стафилококков установлено, что доля внутрибольничных MRSA составила 61,64+1,37% от общего количества выделенных штаммов. Удельный вес хирургических больных в структуре инфекций, связанных с оказанием медицинской помощи (ИСМП), вызванных MRSA, составил 28,33+1,62%.

Третья часть инфекций, вызванных MRSA (38,36%), была выявлена у пациентов в амбулаторно-поликлинических учреждениях (таблица).

Заболеваемость инфекциями, вызванными MRSA пациентов амбулаторно-поликлинических учреждений в Кемеровской области (2010 г.) ________________________________

Группы пациентов Обследовано всего (абс.) Выделено культур MRSA Частота инфекций, вызванных MRSA на 1000 пациентов

Пациенты с патологией ЛОР-органов 9491 209 22,02±1,51

Пациенты с заболеваниями органов дыхания 9870 257 2б,04±1,б

Пациенты с инфекциями глаз 3365 74 21,99±2,53

Пациенты с инфекциями кожи и мягких тканей 9166 285 31,09±1,81

Всего: 31892 825 25,87±0,89

Максимальная распространенность MRSA установлена у пациентов с инфекциями кожи и мягких тканей (фурункулез, гидраденит, панариций) -31,08+1,72 на 1000. Частота заболеваний органов дыхания, вызванных MRSA, составила 26,02+1,26 на 1000. У пациентов с патологией ЛОР-органов MRSA был этиологическим фактором с частотой 22,02+1,51 на 1000, несколько реже в 21,99+2,53 случаях на 1000 у пациентов с инфекциями глаз (х2=17;524 р=0,0006).

На протяжении 10 лет проводится эпидемиологический надзор за ИСМП в стационаре сосудистой хирургии и стационаре абдоминальной хирургии Кемеровской областной клинической больницы.

Эпидемический процесс внутрибольничных инфекций в изучаемых стационарах имел неравномерную динамику. Среднемноголетние показатели заболеваемости ИСМП составили 39,16+2,1 на 1000 оперативных вмешательств в стационаре сосудистой хирургии и 28,76+1,47 на 1000 в стационаре абдоминальной хирургии (х2=754,211; р Не можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

6. Lina G., Piamont Y. et al. Involvement of Panton-Valentine leukocidin-producion Staphylococcus aureus in primery skin infections and and pneumonia. Clin infect Dis. 1999. № 29. Р. 1128-1132.

Золотистый стафилококк (Staphylococcus aureus) – грамположительная бактерия, относящаяся к условно-патогенным микроорганизмам. Имеет важное клиническое значение, так как может длительное время бессимптомно обитать на поверхности слизистых оболочек и кожи человека, вызывая заболевание только в случае снижения иммунного статуса организма, либо уменьшения количества нормальной микрофлоры. В зависимости от места обитания в организме, микроорганизм может вызывать различные заболевания (патологические процессы в верхних и нижних дыхательных путях, инфекционно-воспалительные заболевания кожи, кишечные инфекции и прочее). Большое значение золотистый стафилококк имеет в патологии новорожденных и детей грудного возраста, исходя из чего, обследование на наличие данного микроорганизма обязательно для беременных женщин. Так как скрытое бактерионосительство S. aureus является достаточно распространенным явлением, обязательному обследованию на предмет наличия микроорганизма в верхних дыхательных путях подлежат работники сферы общественного питания, медицинские работники и некоторые другие категории населения. Микробиологический метод позволяет выделить золотистый стафилококк на специальных питательных средах, тем самым доказать его наличие в организме и возможную роль в развитии патологии, либо скрытое бактерионосительство. В данном исследовании проводится количественное определение золотистого стафилококка.

Цена услуги0 руб. * Скачать пример результата В настоящее время недоступно для заказа
Услуги по взятию (сбору) биоматериала
  • 195 Услуга по подготовке к сбору кала20 руб.
  • 239 Получение мазка из зева200 руб.
  • 220 Получение мазка из носа200 руб.
  • 90 Получение мазка содержимого конъюнктивальной полости и слезоотводящих путей180 руб.
  • 90 Получение урогенитального мазка350 руб.
  • 90 Получение секрета простаты550 руб.
  • 157 Получение ректального мазка150 руб.
  • 396 Услуга по подготовке к сбору разовой порции мочи для микробиологических исследований60 руб.
Срок выполненияот 2 до 3 суток
Синонимы (eng)MRSA culture (Methicillin-resistant S. aureus culture), quantitative, Staphylococcus aureus culture
МетодыМикробиологический метод
Подготовка к исследованию
  • Рекомендуется употребить большой объем жидкости (чистой негазированной воды) за 8-12 часов до сбора мокроты.
  • За 3-4 часа до взятия мазков из ротоглотки (зева) не употреблять пищу, не пить, не чистить зубы, не полоскать рот/горло, не жевать жевательную резинку, не курить. За 3-4 часа до взятия мазков из носа не закапывать капли/спреи и не промывать нос. Взятие мазков оптимально выполнять утром, сразу после ночного сна.
  • Исследование рекомендуется проводить до начала приема антибиотиков и других антибактериальных химиотерапевтических препаратов.
  • Исключить прием слабительных препаратов, введение ректальных свечей, масел, ограничить (по согласованию с врачом) прием медикаментов, влияющих на перистальтику кишечника (белладонна, пилокарпин и др.), и препаратов, влияющих на окраску кала (железо, висмут, сернокислый барий), в течение 72 часов до сбора кала.
  • Женщинам исследование (процедуру взятия урогенитального мазка или сбор мочи) рекомендуется производить до менструации или через 2-3 дня после её окончания.
  • Мужчинам - не мочиться в течение 3 часов до взятия урогенитального мазка или сбора мочи.
Тип биоматериала и способы взятия
ТипНа домуВ ЦентреСамостоятельно
Грудное молоко (пр.)
Грудное молоко (лев.)
Кал
Мазок из зева (ротоглотки)
Мазок с конъюнктивы (пр.)
Мазок с конъюнктивы (лев.)
Мазок из носа
Мазок урогенитальный
Мазок урогенитальный (с секретом предстательной железы)
Мокрота
Отделяемое раны
Отделяемое уха (пр.)
Отделяемое уха (лев.)
Ректальный мазок
Средняя порция утренней мочи

На дому: возможно взятие биоматериала сотрудником мобильной службы.

В Диагностическом центре: взятие, либо самостоятельный сбор биоматериала осуществляется в Диагностическом центре.

Самостоятельно: сбор биоматериала осуществляется самим пациентом (моча, кал, мокрота и т.п.). Другой вариант – образцы биоматериала предоставляет пациенту врач (например, операционный материал, ликвор, биоптаты и т.п.). После получения образцов пациент может как самостоятельно доставить их в Диагностический центр, так и вызвать мобильную службу на дом для передачи их в лабораторию.

* Цена указана без учёта стоимости взятия биоматериала. Услуги по взятию биоматериала добавляются в предварительный заказ автоматически. При единовременном заказе нескольких услуг услуга по сбору биоматериала оплачивается только один раз.

Аннотация научной статьи по фундаментальной медицине, автор научной работы — Кочнева Е.В.

Гнойно-воспалительные заболевания, вызванные золотистым стафилококком имеют важное значение для современной медицины. Биопленки , которые образуются при этих инфекциях обладают выраженной резистентностью к противомикробным средствам. Результаты исследования показали, что способность к образованию биопленок у микроорганизмов разная и более выражена у клинических штаммов. Также установлена взаимосвязь между микроэлементным составом клеток и способностью к пленкообразованию у штаммов золотистого стафилококка.

Похожие темы научных работ по фундаментальной медицине , автор научной работы — Кочнева Е.В.

QUANTITATIVE DETERMINATION OF THE EFFECT OF TRACE ELEMENTS IN THE CELLS OF STAPHYLOCOCCUS AUREUS THEIR ABILITY TO BIOFILM FORMATION

Pyo-inflammatory diseases caused by S. aureus are essential to modern medicine. Biofilms, that are formed exhibit a pronounced resistance to antimicrobial agents for these infections. The results showed that the ability to form biofilms of microorganisms different and more pronounced in the clinical strains. Also, the interrelation between the trace element composition of cells and the ability to film formation in Staphylococcus aureus .

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ВЛИЯНИЯ КОЛИЧЕСТВЕННОГО СОДЕРЖАНИЯ МИКРОЭЛЕМЕНТОВ В КЛЕТКАХ STAPHYLOCOCCUS AUREUS НА ИХ СПОСОБНОСТЬ К ФОРМИРОВАНИЮ БИОПЛЕНОК

канд. мед. наук., ассистент кафедры микробиологии, вирусологии и иммунологии Харьковского национального медицинского университета, 61022, Украина, г. Харьков, просп. Ленина,4 е-mail: _ falkone28@,mail. ru

Гнойно-воспалительные заболевания, вызванные золотистым стафилококком имеют важное значение для современной медицины. Биопленки, которые образуются при этих инфекциях обладают выраженной резистентностью к противомикробным средствам. Результаты исследования показали, что способность к образованию биопленок у микроорганизмов разная и более выражена у клинических штаммов. Также установлена взаимосвязь между микроэлементным составом клеток и способностью к пленкообразованию у штаммов золотистого стафилококка.

Ключевые слова: Staphylococcus aureus, биопленки, микроэлементы.

Особое этиологическое значение в развитии гнойно-воспалительных заболеваний занимает золотистый стафилококк [10, с. 115]. Это один из основных грамположительных возбудителей нозокомиальных инфекций. Мультирезистентные госпитальные штаммы золотистого стафилококка ответственны за огромное количество случаев раневых инфекций в хирургической практике. С одной стороны, золотистый стафилококк является частым обитателем кожи и слизистых оболочек у здоровых носителей, с другой - представляет собой один из наиболее опасных госпитальных микроорганизмов, способных вызывать тяжелейшие инфекционные осложнения [11, с. 270].

Большинство этих инфекций протекает с образованием биопленок, что является актуальной проблемой современной медицины [8, с. 712]. В составе биопленок микроорганизмы увеличивают их резистентность в 50-500 раз к действию дезинфицирующих веществ, антибактериальных препаратов, бактериофагов, антител и фагоцитов [9, с. 117]. На сегодняшний день, не полностью остаются, изучены механизмы формирования биопленок и процессы, которые происходят в них [1, с. 18].

Важную роль в микробных клетках выполняют микроэлементы, которые определяют их метаболические процессы и могут влиять на способность микроорганизмов к формированию биопленок [2, с. 87]. Железо - крайне важный микроэлемент, он входит в состав дыхательных ферментов и способствует ускорению окислительных процессов [3, с. 32]. Для осуществления процессов дыхания микроорганизмам также необходима медь. Роль таких элементов, как калий и магний, заключается в активации ферментных систем микробных клеток. Концентрация ионов магния в клетке влияет на процессы выработки энергии, которые происходят в митохондриях [6, с. 54].

Таким образом, качественный и количественный состав микроэлементов может бать связан с метаболическими процесами, происходящими в микробной клетке, а также влиять на степень вирулентности этих патогенов.

Целью данной работы было определение способности к формированию биопленок клинических и референтных штаммов Staphylococcus aureus, а также количественный состав микроэлементов этих микробных клеток.

Материалы и методы. В ходе работы было изучено 55 штаммов S. aureus полученных от больных с разными гнойно-воспалительными заболеваниями кожи и подкожно-жировой клетчатки, выделенные в первые 48 ч. с момента госпитализации в стационар и 4 референтных штамма (АТСС 25923 и АТСС 6538 Р) в качестве контрольной группы.

Для более информативного исследования все штаммы S. aureus были разделены на 4 группы с учетом течения инфекционного процесса, при котором они выделены: 1. (n = 25) - штаммы, выделенные из гнойного отделяемого ран при острых инфекционных процессах кожи и подкожной клетчатки (абсцесс, гангрена, острый гнойный периостит, флегмона, острый аппендицит, острый гидраденит, острый мастит); 2. (n = 25) - штаммы, выделенные из гнойного отделяемого ран при затяжных инфекционных процессах кожи и подкожной клетчатки (фурункул, карбункул, инфицированная рана, панариций, атерома, гематома, рожистое воспаление, бартолинит); 3. (n = 5) - штаммы, выделенные из слизи зева и носа при обследовании на носительство; 4. (n = 4) - контрольная группа референтные штаммы (АТСС 25923 -2 штамма и АТСС + 6538 Р - 2 штамма разного происхождения).

Способность микроорганизмов к формированию биопленок определяли в пластиковых планшетах для иммуно-ферментного анализа [7, с. 39]. Сформированные биопленки отмывали и красили 1% спиртовым раствором генцианвиолета. Результаты оценивали по оптической плотности (ед. ОП.) при длине волны 545 нм на анализаторе LabLine-90. Жизнеспособность микроорганизмов в биопленках определяли путем подсчета колониеобразующих единиц (КОЕ) в 1 мл биомассы.

Разрушение микробных клеток проводили механической дезинтеграцией. В специальные нейлоновые стаканы вносили смывы суточной культуры (1 млрд/мл), на каждый мл добавляли 1 г бусин диаметром 0,15 мм, изготовленных из пирекс-стекла. Стакан центрифугировали со скоростью 3000 об/мин. в течение 20 мин. После этого добавляли 10%-ную трихлоруксусную кислоту при 4 °С на льду, гидролиз проводили в течение 16 ч. Суспензию снова центрифугировали при 3000 об/мин. в течение 20 мин [4, с. 357].

Определение количественного содержания элементного состава бактериальных клеток S. aureus проводили методом атомно-абсорбционной спектроскопии [5, с. 123]. Полученные данные обрабатывали с помощью пакета программы Excel.

Результаты исследования. Проведенные исследования показали, что способность к формированию биопленок между штаммами отличалась (табл. 1).

Клинические изоляты S. aureus проявляли достоверно большую (р Не можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

При увеличении показателя, характеризующего процесс образования биопленок, также отмечалось увеличение количества КОЕ*Ш9 на 1 мл питательной среды исследуемых образцов у клинических штаммов по сравнению с референтними.

Показатели высокой способности к образованию биопленок микроорганизмами могут указывать на затяжной процесс и хронизацию заболевания, что в свою очередь приводит к антибиотикорезистентности штаммов.

При микроскопическом исследовании архитектоники биопленок, образованных штаммами золотистого стафилококка, наблюдались скопления клеток, которые плотно располагались друг к другу, некоторые из них сливались между собой поверхностью мембран, образуя межклеточные контакты.

Таким образом, результаты исследований указывают на то, что способность к формированию биопленок между штаммами отличалась. Клинические изоляты S. aureus проявляли достоверно большую (р

Стафилококки хорошо известны как возбудители гнойно-септических инфекций у человека и животных. Наряду с представителями семейства Enterobacteriaceae они занимают ведущее место в этиологии гнойных заболеваний. Род Staphylococcus включает в себя 35 различных видов. В зависимости от способности продуцировать коагулазу, фермент, вызывающий коагуляцию плазмы крови, они подразделяются на две группы: коагулазопозитивные и коагулазонегативные. Место обитания стафилококков – человек и теплокровных животные, внешняя среда. Локализация у человека – кожа и слизистые оболочки, толстый кишечник. Источником стафилококковых инфекций является больной человек или здоровый носитель. Пути передачи: воздушно-капельный, воздушно-пылевой, контактный, пищевой. Восприимчивость к инфекции зависит от общего состояния организма и возраста. Наиболее восприимчивы дети, особенно новорожденные и грудного возраста. В норме способность стафилококка к инвазии и резистентность хозяина хорошо сбалансированы, поэтому инфекция не развивается, пока не создастся ситуация, когда встречаются высоковирулентный микроорганизм или макроорганизм со сниженной резистентностью.

Наиболее известным представителем коагулазопозитивных стафилококков является S.aureus (золотистый стафилококк). Он встречается в передних отделах носовых ходов у 20–40% здоровых взрослых людей. Приблизительно у 1/3 населения он постоянно выделяется из носа, у 1/3 отмечается транзиторное носительство и 1/3 свободна от носительства. S.aureus наиболее часто выделяется при гнойной патологии, вызывает целый ряд заболеваний: фолликулиты, фурункулы и карбункулы, гидроадениты, маститы, раневые инфекции, бактериемии и эндокардиты, менингиты, перикардиты, легочные инфекции, остеомиелиты и артриты, гнойные миозиты, пищевые отравления, синдром токсического шока. Упомянутые заболевания обусловливаются факторами патогенности: капсульными полисахаридами, пептидогликанами и тейхоевыми кислотами, протеином А, ферментами, гемолизинами, токсинами (эксфолиативный, энтеротоксины от А до Е, Н и I), суперантигеном, который принадлежит к энтеротоксину (TSST-1), вызывающему токсический шок синдром.

Все остальные коагулазопозитивные стафилококки выделяются в основном от животных и редко от человека, но в отдельных случаях могут вызывать у человека гнойно-воспалительные заболевания.

Среди коагулазонегативных стафилококков наиболее значимы в патологии человека S.epidermidis и S.saprophyticus. Они могут вызывать инфекции мочевыводящих путей, остеомиелиты, бактериемии, инфекции у новорожденных детей в палатах интенсивной терапии, заболевания глаз, кожные инфекции, поражают клапаны сердца, вызывают гнойные воспаления при операции по замене сердечных клапанов на искусственные, при шунтирование органов, использование внутривенных катетеров, катетеров при гемодиализе, а также при ангиопластике.

В настоящее время микроорганизмы рода Staphylococcus играют лидирующую роль среди возбудителей внутрибольничных инфекций. До определенного времени пенициллин был основным препаратом выбора при лечении тяжелых гнойных инфекций вызываемых S.aureus. Затем стали появляться штаммы устойчивые к этому антибиотику. Оказалось, что устойчивость к пенициллину была обусловлена продукцией фермента .-лактамазы разрушающей β-лактамное кольцо в молекуле пенициллина. В настоящее время около 80% изолируемых штаммов S.aureus синтезируют β-лактамазу. Вместо пенициллина в случае выделения пенициллин резистентных штаммов применяют полусинтетические пенициллины устойчивые к β-лактамазе. Но с 80-х годов начинают выделяться штаммы S.aureus устойчивые и к этой группе антибиотиков в частности к оксациллину и метициллину. Устойчивость таких штаммов связана с продукцией пенициллин связывающего белка (PBP 2а), синтез которого в свою очередь связан с приобретением стафилококками хромосомного гена mecA. Штаммы S.aureus, обладающие этим геном проявляют устойчивость ко всем β-лактамным антибиотикам включая цефалоспорины. S.aureus с упомянутым механизмом устойчивости присваивается термин метициллин- резистентные штаммы. В ряде случаев устойчивость к полусинтетическим пенициллинам может быть обусловлена гиперпродукцией β-лактамаз. В этом случае устойчивость к полусинтетическим пенициллинам при определении ее в лабораторных условиях характеризуется как умеренная. Метициллин-резистентные штаммы S.aureus часто проявляют устойчивость к другим антибиотикам в частности к эритромицину и клиндамицину. В связи с их распространением в ряде зарубежных стран в качестве антибиотиков выбора начинают использовать ванкомицин и тейкопланин. Но уже в 1996 году появляются первые сообщения о выделении штаммов S.aureus с умеренной устойчивостью к ванкомицину (MIC=8 мкг/ мл.), а с 2002 г. штаммов с высокой устойчивостью (МIC>32 мкг/мл.). Метициллин резистентные штаммы выявляются также среди S.epidermidis, а ванкомицрезистентные среди S.haemolyticus.

Для лечения гнойно-септических инфекций, вызванных стафилококками, в настоящее время широко используются лечебные бактериофаги, как монофаги так и комбинированные, содержащие в своем составе расы фагов лизирующих клетки нескольких видов патогенов. В отличие от антибиотиков они не подавляют рост нормальной симбиотической микрофлоры человека и не приводят к дисбактериозам. Тем не менее, нужно имеет в виду, что фаги также вызывают развитие резистентности у стафилококков, поэтому перед их использованием, как и перед применением антибиотиков, необходимо проверять чувствительность к ним у изолируемых штаммах стафилококков.

Показания к обследованию. Признаки гнойно-септической инфекции, обследование медицинского персонала на носительство.

Материал для исследований. Кровь, СМЖ, гной, раневое отделяемое, грудное молоко, мазки из носа; смывы c медицинского оборудования и инвентаря.

Этиологическая лабораторная диагностика включает выделение возбудителя на питательных средах, выявление его ДНК.

Сравнительная характеристика методов лабораторной диагностики, показания к применению различных лабораторных исследований. Техника выделения возбудителя в настоящее время хорошо отработана. Микроорганизмы довольно устойчивы к факторам внешней среды, поэтому если отобранный биологический материал невозможно сразу использовать для исследования, можно воспользоваться специальными контейнерами и траспортными средами. Подробнее техника отбора и транспортировки биологического материала в клинико- диагностическую лабораторию описана в разделе преаналитические этапы исследования. Для выделения возбудителя, как правило, достаточно 3–4 дня. Исключением является выделение стафилококков из крови. В этом случае успех техники во многом будет зависеть от правильного выбора времени для отбора крови и присутствия в крови пациентов антибактериальных препаратов.

Выявление специфического фрагмента ДНК S.aureus, S.epidermidis, S.haemolyticus, S.saprophyticus методом ПЦР проводят при исследовании различного биологического материала. Результаты выявления ДНК методом ПЦР имеют качественный и количественный формат. Возможно одновременное выявление и количественное определение ДНК метициллинрезистентного S.aureus и метициллинрезистентных коагулазонегативных стафилококков. Данное исследование отличается простотой и воспроизводимостью, что позволяет оптимизировать эпидемиологический надзор за распространением метициллинрезистентных штаммов, значительно снизив время и трудоемкость исследования. Однако, выявление специфического фрагмента ДНК S.aureus, S.epidermidis, S.haemolyticus, S.saprophyticus методом ПЦР не позволяет выявить жизнеспособные микроорганизмы, а также определить у них чувствительность к антибиотикам.

Особенности интерпретации результатов лабораторных исследований. При исследовании стерильного биологического материала (кровь, СМЖ) клиническое значение имеет обнаружение S.aureus в любых концентрациях. В нестерильном биологическом материале клиническое значение имеют только высокие концентрации S.aureus, означающие его ведущую роль в воспалительном процессе.

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, пользовательских данных (сведения о местоположении; тип и версия ОС; тип и версия Браузера; тип устройства и разрешение его экрана; источник откуда пришел на сайт пользователь; с какого сайта или по какой рекламе; язык ОС и Браузера; какие страницы открывает и на какие кнопки нажимает пользователь; ip-адрес) в целях функционирования сайта, проведения ретаргетинга и проведения статистических исследований и обзоров. Если вы не хотите, чтобы ваши данные обрабатывались, покиньте сайт.

Copyright ФБУН Центральный НИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора, 1998 - 2020


! Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, пользовательских данных (сведения о местоположении; тип и версия ОС; тип и версия Браузера; тип устройства и разрешение его экрана; источник откуда пришел на сайт пользователь; с какого сайта или по какой рекламе; язык ОС и Браузера; какие страницы открывает и на какие кнопки нажимает пользователь; ip-адрес) в целях функционирования сайта, проведения ретаргетинга и проведения статистических исследований и обзоров. Если вы не хотите, чтобы ваши данные обрабатывались, покиньте сайт.

Читайте также:

Пожалуйста, не занимайтесь самолечением!
При симпотмах заболевания - обратитесь к врачу.

Copyright © Иммунитет и инфекции