Инструкция по бактериологическому обследованию на выявление носителей патогенного стафилококка

Приложение N 3
к приказу Минздрава СССР
от 2 августа 1978 г. N 720

Инструкция
по бактериологическому обследованию на выявление носителей
патогенного стафилококка и проведению санации *

1. Общие положения

1.1. Инструкция предназначена:

- лечебно-профилактических учреждений, в составе которых имеются отделения хирургического профиля, палаты или отделения реанимации и интенсивной терапии;

- для работников санитарно-эпидемиологических станций;

- для работников бактериологических лабораторий.

1.2. В последние два десятилетия наблюдается рост внутрибольничных инфекций, одним из возбудителей которых является патогенный стафилококк.

1.3. По принятой классификации семейством Micrococaccas включает 3 рода: Micrococaccas, Staphylococcus, Planococcus

1.4. Для медицинской практики наиболее важно дифференцировать стафилококки от микрококков, которые имеют сходную со стафилококком морфологию клеток и нередко выделяются из одних и тех же объектов.

1.5. Род Syaphylococcus состоит из трех видов: St.aureus, St.epidermidis, St.saprophyticus.

1.6. В настоящее время четко показано этиологическое значение при гнойно-септических заболеваниях вида St.aureus.

Роль вида St.epidermidis значительно меньше и возможна у ослабленных больных, лиц, страдающих диабетом, получающих большие дозы рентгено - и радиотерапии, а также при заболеваниях мочевыводящих путей.

1.7. Распространение стафилококковой инфекции происходит воздушно-капельным и контактными путями.

1.8. Основным источником стафилококковой инфекции в лечебно-профилактических учреждениях является человек/больной или здоровый бактерионоситель) из числа:

- больных гнойно-септическими острыми и хроническими процессами,

- медицинского и обслуживающего персонала (с локализацией возбудителя на слизистых оболочках носа, зева, на коже и в раневой поверхности).

1.9. Одной из мер профилактики внутрибольничных осложнений является своевременная изоляция больных и выявление носителей патогенного стафилококка с последующей санацией.

2. Организационные мероприятия по выявлению бактерионосителей

2.1. Каждый сотрудник, поступающий на работу в лечебно-профилактическое учреждение, проходит полный медицинский осмотр и включающий обследование отоларингологом и стоматологом.

2.2. Работающий персонал должен быть взят под диспансерное наблюдение для своевременного выявления и излечения кариозных зубов, хронических воспалительных очагов в верхних дыхательных путях и ротовой полости, субтрофических состояний слизистых носа и зева, а также своевременного выявления носительства персоналом St.aureus (1 раз в 6 месяцев - плановое обследование).

2.3. При проведении плановых бактериологических обследований обязательным является исследование слизи из передних отделов носа. Исследование слизи зева может проводиться выборочно.Забор материала проводит старшая сестра лечебно-профилактического учреждения. Результаты плановых бактериологических исследований и обследований ЛОРспециалистом и стоматологом должны четко фиксироваться в индивидуальной карте сотрудника лечебно-профилактического учреждения.

2.4. Приготовление санирующих средств осуществляют аптеки лечебно-профилактических учреждений.

2.5. Перед проведением санации носители проходят обязательную консультацию у специалистов отоларингологов, т.н. в определенной проценте они страдают аллергическими или хроническими заболеваниями верхних дыхательных путей, тонзиллитами и т.д., требующими обязательного специального лечения.

3. Исследование отделяемого верхних дыхательных путей

3.1. Обязательному бактериологическому исследованию подвергают слизь из передних отделов носа; исследование слизи из зева проводят по показаниям, прежде всего при наличии воспалительных процессов в зеве.

3.2. Забор материала из передних отделов носа осуществля.т одним стерильным ватным тампоном из обеих половин носа. Сбор материала из зева проводят с поверхности миндалин стерильным ватным тампоном, либо путем смыва. В последнем случае обследуемый полощет горло 5,0 мл стерильного физиологического раствора. Смыв собирают в стерильную колбу (желательно с бусами), закрывают пробкой и встряхивают в течение 10-15 минут до получения однородной суспензии. При этом обязательным условием является взятие материала натощак (не ранее, чем через 2-3 часа после приема пищи).

3.3. Посев исследуемого материала на питательные среды должен проводиться не позже, чем через 2 часа после его забора.

3.4. Для первичного посева предпочтение должно быть отдано желточно-солевому агару (ЖСА) или желточно-молочно-солевой среде. Одновременно параллельный посев на молочно-солевой агар проводить не целесообразно. При целенаправленных исследованиях на стафилококк применение кровяных сред не обязательно.

3.5. Посев проводят тампоном, которым забирали материал. Тампон следует многократно поворачивать, чтобы перенести на питательную среду максимальное количество взятого материала. При посеве смыва из зева на питательную среду наносят 0,1 мл жидкости и растирают по поверхности среды шпателем.

3.6. При исследовании слизи из верхних дыхательных путей предварительное подращивание смывов в солевом или сахарном бульоне проводить не следует. Такое подращивание не позволит иметь истинного представления о массивности обсеменения верхних дыхательных путей, что имеет значение при характеристике источников стафилококковой инфекции.

4. Определение массивности обсеменения верхних дыхательных путей

4.1. Взятый тампоном материал помещают в пробирку с 0,5 мл стерильного физиологического раствора. Тампон ополаскивают в жидкости встряхиванием пробирки в течение 10 минут, затем отжимают о внутренние стенки пробирки и удаляют. Жидкость многократно перемешивают пипеткой. Отдельной пипеткой на чашку с БСА наносят 0,1 мл исследуемого смыва и тщательно растирают шпателем.Чашки оставляют в термостате на 2 суток после чего подсчитывают общее число выросших колоний и отдельно колоний различной морфологии. Особое внимание обращают на колонии, обладающие лецитовителлазной активностью.

4.2. Определение числа снятых на тампон колоний проводится следующим образом: если на чашке с ЖСА после посева 0,1 мл смывной жидкости выросло 15 однородных колоний, а идентификация двух колоний позволила отнести их к St.aureus одного и того же фаготипа, то это дает основание считать все выросшие на чашке колонии, идентичные по морфологии и пигменту, принадлежащими к St.aureus одного фаготипа.

Пример расчета: в 0,1 мл содержалось 15 колоний следовательно во всем объеме смыва будет 15х10х5=750 колоний или 7,5х10(2).

4.5. В качестве ориентировочного определения массивности обсеменения верхних дыхательных путей можно пользоваться оценкой роста колоний на чашках при прямом посеве в крестах, обозначая:

+++ сплошной рост изолированных колоний(*)

++ значительный рост (до 100 колоний)

+ единичные колонии (10-25)

5. Схема бактериологического исследования на стафилококк

5.1. Первый день. Посев на элективные среды (желточно-солевой, молочно-солевой или молочно-желточно-солевой агар). Засеянные среды выдерживают в термостате при 37 град.С в течение 2 суток, либо одни сутки в термостате и дополнительно 24 часа на свету при комнатной температуре.

5.2. Второй - третий день. Просмотр чашек, фиксация в журнале характера и массивности роста. На вышеуказанных средах стафилококк растет в виде круглых, блестящих, маслянистых, выпуклых, пигментированных колоний. На средах, содержащих желток, St.aureus выделений от человека, в 60-70% случаев образует радужный венчик вокруг колонии (положительная лецитовителлазная реакция). Стафилококки животного происхождения дают положительную лецитовителлазную реакцию в 5-10% случаев.

5.3. Отвивка на скошенный агар для дальнейшего исследован не менее 2-х колоний, подозрительных на стафилококк. Для исследования отвиваются прежде всего колонии, дающие положительную лецитовителлазную реакцию. При отсутствии на чашках таких колоний дальнейшем исследованию подвергают пигментированные колонии, схожие по морфологии со стафилококком. При одновременном наличии на чашках колоний стафилококка, отличающихся по пигменту, следует отвивать не менее двух колоний различного вида; пробирки с посевом помещают в термостат при 37 град.С 18-20 часов.

5.4. Четвертый день. После суточной инкубации у выделенных штаммов проверяют морфологию, тинкториальные свойства (окраска по Граму) и наличие плазмокоагулирующей активности. Следует отметить, что характер роста культуры на скошенном агаре в ряде случаев дает возможность "предвидеть" принадлежность ее к виду St.aureus или St.epidermidis. Первые, как правило, дают обильный равномерный, сочный рост, вторые - очень скудный и неравномерный рост по ходу посева. Окраска по Граму проводится общепринятым методом. Под микроскопом окрашенные по Граму стафилококки имеют вид фиолетово-синих кокков, располагающихся гроздьями или небольшими кучками ("кружево"). Плазмокоагулирующая активность проверяются в реакции коагуляции плазмы (РКП).

5.5. С учетом результатов РКП и лецитовителлазной активности в 70-75% случаев, на четвертый день исследования может быть подтверждена принадлежность выделенного штамма к виду St.aureus и выдан соответствующий ответ. Возможные варианты сочетаний результатов отделения плазмокоагулирущей и лецитовителлазной активности представлены на схеме 1.

5.6. Если культура обладает плазмокоагулирующей и лецитовителлазной активностью, выдается ответ о выделении St.aureus без проведения дополнительных исследований. Если культура обладает только плазмокоагулирующей или только лецитовителлазной активностью, то для окончательного ответа требуется определение других признаков патогенности (ферментация маннита в анаэробных условиях - АФМ или ДНКазной активности). В этих случаях ответ выдается в зависимости от результатов, полученных при определении названных признаков.

5.7. Если культура не обладает ни плазмокоагулирующей, ни лецитовителлазной активностью и выделяется из слизи верхних дыхательных путей практически здоровых лиц, то может быть выдан ответ о выделении St.epidermidis без проведения дополнительных исследований. Однако, следует помнить, что в 1-2% случаев речь может идти о выделении культуры St.aureus, лишенной основного видового признака - способности коагулировать плазму.

5.8. Определение антибиограммы проводится только после выделения чистой культуры по показаниям (выбор способа лечения и т.д.). Выделение культуры St.aureus подлежат фаготипированию.

В случае необходимости на 4-й день исследования может быть поставлена реакция определения ДНКазной активности или анаэробной ферментации маннита.

5.9. Пятый день. Учет результатов фаготипирования, определения чувствительности к антибиотикам, ДНКазной активности. Окончательная выдача ответа.

6
. Санация бактерионосителей

6.1. Для санации персонала (ежедневной) необходимо использовать следующие санирующие средства (фурациллин 1:5000, риванол 1:5000, 1% борная кислота, марганцевокислый калий (розовокрасный раствор), Люголя (водный или на глицерине), настои листьев эвкалипта, лизоцим, стафиллококковый бактериофаг. (Приложение 1) .

6.2. Для санации персонала в период эпидемиологического благополучия необходимо использовать гексахлорофен (1%), трибаск(3%), хлорофиллипт. (Приложение 1).

6.3. Для получения наиболее эффективных результатов санации бактерионосителей следует проводить смену санирующих средств через каждые 7 дней.

6.4. В период эпидемиологического неблагополучия (вспышка ОРЗ, подъем заболеваемости внутрибольничными инфекциями, значительная обсемененность стафилококками предметов окружающей среды и т.п.) в лечебно-профилактических учреждениях следует санировать весь персонал учреждения одномоментно.

6.5. В тех случаях, когда невозможно добиться санацией снижения или полного избавления от носительства стафилококка, необходимо настаивать на правильном ношении маски, закрывающей рот, нос и волосы. При этом необходимо иметь график ношения масок и проводить смену масок каждые три часа.

6.6. При отсутствии положительных результатов при лечении хронических воспалительных заболеваний верхних дыхательных путей и полости рта медицинских работников переводят на другую работу.

Схема видовой идентификации стафилококков

Признаки патогенности РКП ЛВА определение других
признаков патоген-
ности
Выдается ответ:
выделен
- - не обязательно S.epidermides
+ + не обязательно S.aureus
- + АСН или ДНК
если +
если -
S.aureus

S.epidermides

+ - АСН или ДНК
если +
если АСМ или ДНК-
S.aureus

S.epidermides

РКП - реакция плазмы; ЛВА - лецитовителлазная активность;

АСМ - анаэробное сбраживание маннита; ДНК - дезоксирибонуклеазная активность;

++ положительный результат; - отрицательный результат.

  • Приложение 1. Средства и методы санации

>
Средства и методы санации
Содержание
Приказ Минздрава СССР от 31 июля 1978 г. N 720 "Об улучшении медицинской помощи больным с гнойными хирургическими заболеваниями.

Откройте актуальную версию документа прямо сейчас или получите полный доступ к системе ГАРАНТ на 3 дня бесплатно!

Если вы являетесь пользователем интернет-версии системы ГАРАНТ, вы можете открыть этот документ прямо сейчас или запросить по Горячей линии в системе.

Золотистый стафилококк (Staphylococcus aureus) – грамположительная условно-патогенная бактерия, распространенная повсеместно. В норме золотистый стафилококк могжет находиться у человека на слизистой оболочке носа, в брюшной полости и на коже.

Попав в организм человека, золотистый стафилококк вырабатывает токсины и может стать источником сепсиса при снижении иммунитета, вызывая генерализованные инфекции с очагами воспаления во внутренних органах, коже и костно-мышечной системе.

Основные источники инфекции: здоровые (носители) и больные люди, домашние и сельскохозяйственные животные, а также пища, содержащая золотистый стафилококк и его мощные токсины (чаще всего это сахаросодержащие молочные продукты, мороженное, кондитерские изделия без термообработки, салаты и т.п.).

Дети могут инфицироваться от взрослых стафолококконосителей. У детей грудного возраста возможно выделение стафилококка в посевах фекалий.


В эпидемиологических целях анализ на выявление патогенного стафилококка обязательно проводят во время ежегодных профилактических осмотров и при предварительных осмотрах для приема на работу в сферы обслуживания населения: медицины, образования, питания и торговли. В данном случае посев выполняется из носа и зева.

При наличии патогенного стафилококка в пробе обследуемого, через 18-24 часа наблюдается рост колоний золотистого цвета. В этом случае обязательно определяется количество стафилококка. Это необходимо врачу для решения вопроса о том, нужно ли проводить лечение.

Наличие золотистого стафилококка не обязательно означает инфекцию, это может быть бессимптомное носительство, например, при посеве мазков из носа и зева носительством считается количество бактерий до 10 3 КОЕ. Однако более высокие показатели говорят о том, что это уже не бессимптомное носительство, а то, что выявленный золотистый стафилококк может являться причиной заболевания.

  • Для выяснения бактерионосительства или опасного инфицирования.
  • Для подтверждения, что стафилококк является причиной возникшего заболевания (об этом свидетельствуют высокие показатели посева).
  • Для определения целесообразности лечения.
  • Для контроля за состоянием пациента после проведенного лечения.

Исследование можно пройти по направлению от лечащего врача вашей поликлиники, если есть клинические показания или на платной основе.

Лаборатория клинической микробиологии (бактериологии) Мурманской областной больницы предлагает следующие услуги по обнаружению патогенного стафилококка:

Микробиологическое (культуральное) исследование отделяемого зева на патогенный стафилококк

Микробиологическое (культуральное) исследование отделяемого носа на патогенный стафилококк

Микробиологическое (культуральное) исследование испражнений на стафилококк

Срок выполнения анализа: от 2 до 5 рабочих дней.

Подготовка к исследованию:

  • Сбор материала проводится до начала лечения антибактериальными, иммунобиологическими препаратами (общего и местного значения).
  • При контроле эффективности лечения (после окончания курса лечения) исследование проводится через 14 дней.

  • Мазок из зева собирают натощак или через 3–4 часа после приема пищи.

  • Перед взятием мазка из носа нельзя промывать носовые ходы.

  • Желательно за 2–3 дня до взятия пробы находиться на диете, исключающей приём продуктов, усиливающих процессы брожения в кишечнике и молочнокислые продукты, а также алкоголь.
  • За 3–4 дня до исследования необходимо отменить приём слабительных препаратов, касторового и вазелинового масла и прекратить введение ректальных свечей.
  • Фекалии собираются ложечкой в стерильный одноразовый контейнер с завинчивающейся крышкой в количестве не более 1/3 объёма.
  • Для получения достоверного результата - пробы фекалий храните в темном месте при температуре не выше 20—25 °С, во избежание чрезмерного размножения кишечной микрофлоры.
  • Пробы фекалий не замораживайте.

Изобретение относится к медицине, в частности к оториноларингологии. Способ осуществляется путем обработки передних отделов полости носа в течение трех дней стерильным ватным тампоном, пропитанным отваром травы зверобоя с натрий-карбоксиметилцеллюлозой. Способ эффективен, не вызывает побочных явлений. 2 ил., 1 табл.

Изобретение относится к медицине, в частности к оториноларингологии.

Одной из мер профилактики внутрибольничных инфекций является своевременная изоляция больных и выявление носителей золотистого стафилококка с последующей санацией. Согласно нормативной документации лечение бактерионосителей проводят путем полоскания зева и смазывания передних отделов носа в течение 6-7 дней ватным тампоном с водным раствором фурацилина или этакридина лактата. Применяют санацию путем закапывания в нос и полоскания зева в течение 6 дней водным раствором эритромицина или закладывание тампонов с 2%-ной неомициновой мазью раз в день в течение 3 дней [Инструкция по бактериологическому обследованию на выявление носителей патогенного стафилококка и проведению санации. Приложение N 3 к приказу Минздрава РСФСР N 215 от 14.04.79 г.; Немсадзе Е.О., Вепхвадзе Л.К., Орджоникидзе З.В. Санация носителей патогенных стафилококков неомициновой мазью //Антибиотики. - 1967. - N 3. - С. 259-260; Осипова E.С., Говорова Е.В., Круподер В.Я. Санация носителей патогенных стафилококков эритромицином и экмоновоциллином //Антибиотики. - 1965. - N 8. - С.752-753.

Наиболее близким из аналогов является обработка передних отделов слизистой носа 2 раза в день в течение 5-8 дней гексахлорофеновой или трибасковой мазью [Инструкция по бактериологическому обследованию на выявление носителей патогенного стафилококка и проведению санации. Приложение N 3 к приказу Минздрава РСФСР N 215 от 14.04.79 г.].

Как правило, санация приводит к хорошим ближайшим результатам, но со временем носительство возобновляется, поэтому санацию необходимо регулярно повторять. В связи с этим важно, чтобы способ санации сочетал высокую эффективность с отсутствием побочных явлений. Применение мази на тампонах выключает носовое дыхание и травмирует слизистую оболочку. Использование антибиотиков и гексахлорофена в ряде случаев сопровождается аллергическими и токсическими реакциями, переходом острого процесса в хроническую форму, селекцией антибиотикорезистентных штаммов [Проскуров В.А. Профилактика стафилококковых инфекций //Военно-медиц. журн. - 1972. - N 3. - С.47-49; Сытник И. А., Калинчук А.М. Отбор и накопление устойчивых штаммов стафилококков у носителей в результате санации антибиотиками //Антибиотики. - 1972. - N 11. - С. 1035-1039. Таким образом, основным недостатком всех известных способов санации является длительный срок лечения (в основном 6-7 дней), побочное действие и низкая эффективность.

Задачей изобретения является улучшение качества лечения: сокращение сроков санации и повышение эффективности при отсутствии отрицательного влияния на мерцательный эпителий слизистой оболочки.

Поставленная задача достигается путем обработки передних отделов полости носа в течение трех дней утром и вечером стерильным ватным тампоном, пропитанным отваром травы зверобоя с 1% натрий-карбоксиметилцеллюлозы (NаКМЦ), при этомпервая обработка проводится 5-6 раз в течение 1 часа через каждые 10-12 минут.

Процедура состоит из двух частей: интенсивной обработки в течение первого часа через каждые 10-12 минут и закрепляющей санирующий эффект обработки 2 раза в сутки в течение последующих трех дней. Интервал 10-12 минут объясняется временем контакта 1% раствора NaKMЦ со слизистой оболочкой носа (фигура 1). Интенсивность 5-6 раз, в течение часа необходима для получения санирующего эффекта. Проведение менее 5 обработок не дает значительного клинического эффекта. Более 6 обработок не способствуют дальнейшей положительной динамике.

Изобретение поясняется следующими фигурами и таблицами.

Фигура 1. Время контакта водного и полимерных растворов разной концентрации со слизистой оболочкой полости носа.

Фигура 2. Эффективность способов санации носителей Staphylococcus aureus.

Таблица 1. Влияние отвара травы зверобоя на транспортную функцию мерцательного эпителия.

Способ осуществляется следующим образом.

Утром первого дня обрабатывают стерильным ватным тампоном, пропитанным отваром травы зверобоя с 1% натрий-карбоксиметилцеллюлозы, передние отделы полости носа 5-6 раз в течение 1 часа через каждые 10-12 минут. Вечером и в течение последующих двух дней утром и вечером проводят однократную обработку.

Курс лечения составляет три дня. Первичная 5-6-кратная обработка в течение первого часа позволяет значительно снизить количество стафилококков (33,3% санируемых полностью освобождались от носительства Staphylococcus aureus). Двух дней санации недостаточно. На третьи сутки и через 2 недели у санируемых обнаруживались отдельные колонии белого стафилококка. После завершающей обработки отваром травы зверобоя с 1% NаКМЦ в течение 3-х дней уже через сутки эффект санации бактерионосителей был достигнут в 93,3% случаев, из них у 90,9% обследуемых золотистый стафилококк не обнаружен даже спустя 3 месяца и у 53,6% через 12 месяцев после санации (Фигура 2). Обработка в течение 4 дней не повышала эффективности санации.

Пример 1. Врач областной клинической больницы г. Курска М., 42 лет. При обследовании на предмет носительства золотистого стафилококка троекратно с интервалом в 7-10 дней путем забора стерильным ватным тампоном слизи из передних отделов обеих половин носа с последующим посевом на молочно-солевой агар и идентификацией вида S. aureus в реакции плазмокоагуляции обнаружен золотистый стафилококк в количестве 10 3 -10 4 КОЕ/мл. С целью санации в первый день утром передние отделы полости носа смазывались стерильным ватным тампоном, пропитанным отваром травы зверобоя с 1% NаКМЦ, 6 раз в течение одного часа через каждые 10-12 минут. Вечером первого дня, а также утром и вечером на второй и третий день проводилась однократная обработка полости носа полимерным отваром травы зверобоя.

Контрольный посев слизи передних отделов полости носа на молочно-солевой агар, осуществленный через 24 часа после завершения санации, показал полное освобождение от стафилококкового бактерионосительства. При последующих обследованиях спустя 3, 6 и 12 месяцев S.aureus не обнаружен.

Пример 2. Больной А. 60 лет, поступил для планового хирургического лечения с диагнозом: Правосторонняя паховая грыжа. Параллельно с традиционным клиническим обследованием были взяты пробы слизи из передних отделов полости носа на предмет стафилококкового бактерионосительства. Обнаружен золотистый стафилококк в количестве 10 2 -10 3 КОЕ/мл. В процессе предоперационной подготовки проведена санация полости носа по следующей методике: пятикратная обработка передних отделов полости носа стерильным ватным тампоном, пропитанным отваром травы зверобоя с 1% NаКМЦ, через каждые 10-12 минут утром в первый день сочеталась с однократным смазыванием полости носа вечером первого дня, а также утром и вечером в последующие два дня. Контрольные посевы слизи из передних отделов полости носа на молочно-солевой агар, взятые через сутки, 3 и 12 месяцев после завершения санации не выявили наличия S.aureus.

Поставленная задача достигнута. Курс санации проведен у 120 носителей золотистого стафилококка. Клиническая эффективность составила 93,3%. Санированы 2 злостных носителя.

Эффективность применения с этой целью антибиотиков составляла 93,4% для растворов эритромицина и экмоновоциллина, 87,6% для 2%-ной неомициновой мази, 58% для гексахлорофена и 45% для гентамицина, хлорофиллипта и пиофага в сочетании с кварцеванием, 81,8% для низкочастотного ультразвукового орошения жидким пиофагом [Немсадзе Е.О., Вепхвадзе Л.К., Орджоникидзе З.В. Санация носителей патогенных стафилококков неомициновой мазью //Антибиотики. - 1967. - N 3. - С. 259-260; Осипова E.G., Говорова Е.В., Круподер В.Я. Санация носителей патогенных стафилококков эритромицином и экмоновоциллином //Антибиотики. - 1965. - N 8.- С.752-755; Проскуров В.А. Санация носителей патогенных стафилококков //Вестник хирургии им. Грекова. - 1974. - Т. 113, N 9. - С. 47-50; Нестерова К.И., Жоров В.Н. Лечение бактерионосительства с использованием низкочастотного ультразвука //Российская ринология. - 1998. - N 2. - С. 79-80] . Однако в отличие от антибиотиков применяемое нами лекарственное средство сочетает высокую антимикробную активность с безопасностью применения и не угнетает двигательную активность мерцательного эпителия слизистой оболочки полости носа (Таблица 1). Предлагаемый способ санации не требует использования специальной аппаратуры и обученного медперсонала.

Пациенты, санируемые отваром травы зверобоя с 1% NaKMЦ, отмечали, что после смазывания слизистой оболочки носа им становилось легче дышать, улучшалось общее состояние организма. У страдавших к моменту санации ринитом после трехдневной обработки полости носа отваром травы зверобоя с полимером уменьшалась отечность слизистой, нормализовалась секреция, улучшалось общее состояние. Не отмечено ни одного случая возникновения общих или местных аллергических реакций, неприятных ощущений и других жалоб. Отвар травы зверобоя с 1% NaKMЦ, может успешно применяться у больных с полиаллергией, когда лечение химиотерапевтическими лекарственными средствами, и в первую очередь антибиотиками, опасно.

Таким образом, предлагаемый способ санации носителей золотистого стафилококка отличается от ранее описанных следующими особенностями: - значительно (в 2-3 раза) сокращаются сроки санации носителей стафилококка; - исключается неблагоприятное влияние препаратов на мерцательный эпителий слизистой оболочки полости носа и возникновение аллергических реакций; - обеспечивается возможность терапевтического воздействия на сопутствующие заболевания; - эффективность предлагаемого способа санации равна или выше ранее применявшихся способов.

Способ санации носителей золотистого стафилококка путем обработки передних отделов полости носа лекарственным средством, отличающийся тем, что обработку проводят в течение трех дней утром и вечером стерильным ватным тампоном, пропитанным отваром травы зверобоя с 1% натрий-карбоксиметилцеллюлозы, при этом первая обработка проводится 5-6 раз в течение одного часа через каждые 10-12 мин.

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для санации стафилококковых бактерионосителей, с целью профилактики возникновения у них болезней органов дыхания и распространения стафилококковой инфекции.

Проблема профилактики стафилококковой инфекции по-прежнему остается актуальной в современной медицине и практическом здравоохранении. Основными источниками данной инфекции являются бактерионосители, а биотопом стафилококка - слизистая оболочка переднего отдела носа [Акатов А.К. и др. Стафилококки и стафилококковые инфекции. Саратов, 1980. - С.189, 230].

По данным ряда авторов [Дерябин Д.Г. Стафилококки. Экология и патогенность. - Екатеринбург, 2000. - С.148-149; Пискунов С.З., Пискунов З.Г., Ельков И.В. Проблема общего и местного консервативного лечения острого и хронического гайморита. // Российская ринология. - 1994. - № 1. - С.7] очень часто микробным агентом, способствующим развитию гнойно-воспалительного процесса в полости носа и околоносовых пазух являются именно микроорганизмы, составляющие микрофлору тела человека.

Выявлена видовая идентичность стафилококков - возбудителей гнойного гайморита и стафилококков, вегетирующих на слизистой оболочке переднего отдела носа больных, что подтверждается анализом фагоантибиотикотипов изученных культур и свидетельствует об их этиологической роли в данной патологии [Бухарин О.В., Чернова О.Л., Матюшина С.Б. и др. Связь биологических свойств стафилококков с течением гнойных синуситов. // Вестник оториноларингологии. - 1998. - № 5. - С.35].

Известно, что при бактерионосительстве имеет место перестройка механизмов защиты макроорганизма, т.е. создаются условия для выживания (персистирования) возбудителя и дальнейшего развития бактерионосительства [Бухарин О.В. Персистенция патогенных бактерий. М.: Медицина, Екатеринбург, Изд. УрО РАН, 1999. - С.122].

Таким образом, санация организма от бактерионосительства - одна из труднейших проблем современной медицины [Бухарин О.В., Усвяцов Б.Я. Бактерионосительство (медико-экологический аспект). Екатеринбург, УрО РАН, 1996. - С.122]. В связи с этим важное практическое значение приобретает разработка эффективных и безопасных методов санации стафилококкового бактерионосительства и соответственно профилактики стафилококковых инфекций, в том числе посредством снижения персистентных свойств патогенов. Важно, чтобы способ санации сочетал высокую эффективность с отсутствием побочных явлений.

Недостатком указанных способов является то, что их действие направлено на уничтожение микроорганизмов, находящихся вне клетки. Золотистые стафилококки способны при длительном персистировании на эпителиальных клетках проникать в них и становиться внутриклеточными паразитами. При вышеуказанных способах санации, стафилококки внутри клетки сохраняются, разрушают клетки, выходят из них и, не встречая конкуренции со стороны нормальной микрофлоры, погибшей под действием санирующих средств, размножаются, и вскоре популяция достигает еще большей численности [Терновская Л.Н. Стафилококковое носительство. Методические рекомендации МЗ РСФСР. - Свердловск, 1983. - С.5-7].

Известны способы санации стафилококковых бактерионосителей путем снижения персистентных характеристик стафилококка [Диагностика и санация стафилококковых бактерионосителей. Методические рекомендации. - М., 2001. - С.12-15].

Наиболее близким из аналогов к заявляемому способу является способ санации стафилококкового бактерионосительства путем обработки передних отделов слизистой носа гексахлорановой или трибасковой мазью [Инструкция по бактериологическому обследованию на выявление носителей патогенного стафилококка и проведению санации. Приложение № 3 к приказу Минздрава РСФСР № 215 от 14.04.79].

Недостатком данного способа является то, что в ряде случаев использование антибиотиков и гексахлорофена может сопровождаться аллергическими и токсическими реакциями, селекцией антибиотикорезистентных штаммов.

Технический результат, на достижение которого направлено изобретение, заключается в создании эффективного способа санации стафилококковых бактерионосителей за счет снижения антикарнозиновой активности (АКрА) S.aureus и вследствие этого элиминации патогенной микрофлоры со слизистой оболочки носовой полости.

Достигаемый при осуществлении изобретения технический результат заключается в том, что заявляемый способ позволяет проводить эффективную санацию стафилококковых бактерионосителей за счет уточнения характера бактерионосительства (резидентного или транзиторного) и снижения антикарнозиновой активности S.aureus, что приводит к элиминации патогенной микрофлоры со слизистой оболочки носовой полости, позволяет снизить уровень заболеваемости органов дыхания и предотвратить экзогенное распространение стафилококковой инфекции.

Известно, что природный дипептид карнозин (карнозин) обладает антимикробным [Antibacterial actions of carnosine and homocarnosine. French Patent № 71.07856 of march 1, 1971] и противоаллергическим действием [Шарпань Ю.В. Влияние карнозина на иммуносупрессивный эффект гистамина / Бюлл. экспер. биологии и медицины. - 1984. - № 11. - С.603].

Наибольшее количество карнозина содержится в обонятельном эпителии слизистой оболочки передних отделов носовых ходов [Margolis F.L. Carnosine in the primary of olfactory pathway. // Science. - 1974. - V.184. - P.909-911]. Известно, что микроорганизмы, длительно удерживающиеся в эпителиальных клетках слизистой оболочки носа, могут инактивировать карнозин [Бухарин О.В., Стадников А.А., Чернова О.Л. и др. Биологическое значение антикарнозиновой активности бактерий. // ЖМЭИ. - 2000. - № 4. - С.57-58].

Установлено, что ведущим свойством стафилококков, определяющим формирование бактерионосительства, является их антикарнозиновая активность. Это связано с высоким содержанием карнозина в биотопе, инактивация которого позволяет бактериям адаптироваться и длительно находиться на слизистой оболочке переднего отдела носа [Бухарин О.В., Карташова О.Л., Киргизова С.Б., Потехина Л.П. Диагностическое значение персистентных характеристик стафилококков при бактерионосительстве // ЖМЭИ. - 2007. - № 5. - С.13-16].

Известен способ определения антикарнозиновой активности микроорганизмов [патент РФ № 2132879, МПК 6 C12Q 1/04, 1999].

Известно определение способности микроорганизмов к инактивации карнозина (антикарнозиновой активности) в клинике при лечении отграниченных гнойно-воспалительных заболеваний легких и плевры стафилококковой этиологии [патент РФ № 2192880, МПК 7 A61K 38/11, А61Р 31/04, 2002] и для дифференциации стафилококковой микрофлоры слизистой оболочки носа человека на нормальную стафилококковую микрофлору и стафилококковую микрофлору, способную вызвать развитие местных гнойно-воспалительных заболеваний [патент РФ № 2318021, МПК 8 C12Q 1/04, 2008].

Авторами экспериментально установлена информативность определения наличия и уровня выраженности антикарнозиновой активности S.aureus, выделенных со слизистой оболочки носа человека, для определения характера стафилококкового бактерионосительства (резидентный или транзиторный).

У всех выделенных стафилококков определяли антикарнозиновую активность известным способом [патент РФ № 2132879, МПК 6 C12Q 1/04, 1999].

Результаты представлены в таблице 1.

Классы МПК: A61K31/435 содержащие шестичленные кольца только с одним атомом азота в качестве гетероатома
A61P11/02 назальные агенты, например противозастойные или противоотечные
Автор(ы): Бухарин Олег Валерьевич (RU) , Карташова Ольга Львовна (RU) , Киргизова Светлана Борисовна (RU) , Потехина Лидия Петровна (RU) , Зверев Александр Федорович (RU)
Патентообладатель(и): Учреждение Российской академии наук Институт клеточного и внутриклеточного симбиоза Уральского отделения РАН (ИКВС УрО РАН) (RU)
Приоритеты:
Таблица 1
Информативность уровня выраженности антикарнозиновой активности S.aureus в определении типа стафилококкового бактерионосительства
Штаммы Кол. штаммов Уровень АКрА (мг/мл) Среднее значение АКрА (мг/мл)
Резидентный тип бактерионосительства S.aureus
n=97 штаммов
10 от 1,8 до 2,0 1,85±0,02
30 от 2,0 до 2,5 2,34±0,06
32 от 2,5 до 3,0 2,81±0,02
25 от 3,0 до 4,0 3,6±0,04
Транзиторный тип бактерионосительства S.aureus
n=75 штаммов
7 от 0,01 до 0,1 0,07±0,01
15 от 0,1 до 1,0 0,47±0,06
20 от 1,0 до 1,5 1,31±0,03
8 от 1,5 до 1,7 1,65±0,02
25 0 (нет АКрА) 0 (нет АКрА)

Как видно из таблицы 1, у штаммов S.aureus резидентного типа уровень выраженности АКрА колеблется от 1,8 до 4,0 мг/мл, а у транзиторного типа - от 0,01 до 1,7 мг/мл.

Таким образом, была обнаружена следующая закономерность в способности к инактивации карнозина S.aureus: штаммы, выделенные от бактерионосителей резидентного типа, имеют уровень выраженности АКрА равным или более 1,8 мг/мл, тогда как штаммы S.aureus, выделенные от бактерионосителей транзиторного типа, имеют уровень выраженности АКрА менее 1,8 мг/мл либо не обладают антикарнозиновой активностью.

Проведенные авторами исследования показали информативность определения наличия и уровня выраженности АКрА у S.aureus, выделенных со слизистой оболочки носа человека, для определения типа стафилококкового бактерионосительства - резидентный или транзиторный.

Основная часть микрофлоры транзиторного типа элиминирует из организма в результате гибели или бактериовыделения, и проведение в отношении нее санирующих мероприятий не требуется [Бухарин О.В., Усвяцов Б.Я. Бактерионосительство (медико-экологический аспект). Екатеринбург, УрО РАН, 1996. - С.66].

Чтобы исключить развитие дисбиотических состояний, санировать необходимо лишь резидентных бактерионосителей, т.е. лиц, длительно и упорно выделяющих микроорганизмы с персистентным потенциалом [Бухарин О.В., Усвяцов Б.Я., Карташова О.Л. Биология патогенных кокков. М.: Медицина, Екатеринбург, Изд. УрО РАН, 2002. - С.67].

Известно, что подавление персистентных свойств стафилококков затрудняет их паразитирование и, тем самым, повышает эффективность лекарственных воздействий [Бухарин О.В., Усвяцов Б.Я. Бактерионосительство (медико-экологический аспект). Екатеринбург, УрО РАН, 1996. - С.149].

Препарат в виде линимента как лекарственная форма отличается следующими преимуществами по сравнению с другими формами выпуска препарата [Линимент циклоферона (меглумина акридонацетат) в клинической практике. Клинические рекомендации для врачей. - СПб., 2007. - С.14]:

- местное использование - непосредственное воздействие на локализованный патологический очаг;

- высокая биодоступность активных веществ;

- отсутствие аллергических реакций и побочных явлений системного характера.

У выделенных штаммов S.aureus определяли антикарнозиновую активность известным способом [патент РФ № 2132879, МПК 6 C12Q 1/04, 1999].

Среднее значение антикарнозиновой активности в опытной и контрольной группе штаммов в первый день эксперимента составило 2,94±0,04 мг/мл.

Результаты эксперимента представлены в таблице 2.

Как видно из таблицы 2, на протяжении 7 дней происходило снижение среднего значения антикарнозиновой активности S.aureus в опытной группе штаммов с 2,95±0,04 мг/мл до 0,67±0,01 мг/мл.

Предложенный способ санации стафилококковых бактерионосителей был успешно апробирован на базе Центральной районной больницы с.Шарлык, Шарлыкского района, Оренбургской области.

По уровню выраженности АКрА определяли характер бактерионосительства - резидентный или транзиторный. К резидентному типу бактерионосительства относили детей, у которых выделялся S.aureus, с уровнем выраженности антикарнозиновой активности, равным или более 1,8 мг/мл, а к транзиторному типу бактерионосительства относили детей, у которых выделялся S.aureus с уровнем выраженности антикарнозиновой активности менее 1,8 мг/мл.

После каждого дня санации проводили контрольное бактериологическое исследование на наличие S.aureus и определение у него уровня АКрА.

Результаты исследований представлены в таблице 3.

Как видно из таблицы, через 4 дня у 2 детей S.aureus не выделялся вообще, у 4 санируемых выделялись штаммы с уровнем выраженности АКрА менее 1,8 мг/мл. После 5 дней санации S.aureus не высеялся еще у двух детей, а динамика в сторону снижения уровня выраженности АКрА (ниже 1,8 мг/мл) произошла у стафилококков, выделенных еще от 6 человек; после 6 дней рост S.aureus не отмечен еще у 7 обследуемых, а ниже порогового значения (1,8 мг/мл) уровень АКрА опустился еще у 5 штаммов стафилококка.

Бактериологическое обследование санированных детей через 30 дней показало, что свободными от носительства S.aureus были 17 детей, а у троих детей выделялся S.aureus со средним уровнем выраженности антикарнозиновой активности 0,9 мг/мл.

С целью определения эффективности проведенной санации стафилококковых бактерионосителей через 6 месяцев провели еще одно бактериологическое обследование, которое подтвердило положительные результаты проведенного санирования - в группе из 20 санируемых детей не были обнаружены бактерионосители S.aureus резидентного типа.

Способ осуществляется следующим образом.

1. Исследуемый материал (мазок со слизистой оболочки носовой полости) засевают на чашки Петри с желточно-солевым агаром.

2. Посевы инкубируют в термостате при температуре 37°С в течение 24-48 часов.

3. Выросшие колонии пересевают на скошенный агар и изучают морфологию при окраске мазков по Граму.

5. У выделенных штаммов S.aureus определяют антикарнозиновую активность известным способом [патент РФ № 2132879, МПК 6 C12Q 1/04, 1999].

6. По уровню выраженности антикарнозиновой активности определяют характер бактерионосительства - резидентный или транзиторный. К резидентному типу бактерионосительства относят лиц, у которых выделяются S.aureus, с уровнем выраженности антикарнозиновой активности, равным или более 1,8 мг/мл, а к транзиторному типу бактерионосительства относят лиц, у которых выделяются S.aureus с уровнем выраженности антикарнозиновой активности менее 1,8 мг/мл.

8. Через 6 дней проводят контрольное бактериологическое обследование санируемых на наличие или отсутствие S.aureus, при наличии S.aureus определяют у них уровень выраженности антикарнозиновой активности.

9. При отсутствии S.aureus или уровне выраженности у них антикарнозиновой активности менее 1,8 мг/мл санацию считают положительной.

Примеры конкретного выполнения

При бактериологическом обследовании на стафилококковое бактерионосительство пациента К., часто и длительно болеющего респираторными инфекциями, обнаружен S.aureus, обладающий АКрА, равной 3,2 мг/мл. Так как S.aureus имеет уровень выраженности антикарнозиновой активности АКрА более 1,8 мг/мл, тип носительства определен как резидентный.

Через 6 дней проводили контрольное бактериологическое обследование санируемого на наличие или отсутствие S.aureus. Обследование пациента показало, что S.aureus отсутствует. Обследование, сделанное через 3 месяца, подтвердило положительный результат санации.

При проведении бактериологического обследования группы студентов на стафилококковое бактерионосительство, у 12 студентов были выделены штаммы S.aureus, обладающие уровнем антикарнозиновой активности выше 1,8 мг/мл, что позволило определить тип носительства как резидентный.

С целью профилактики развития у них болезней органов дыхания всем студентам ежедневно в течение 6 дней проводили обработку передних отделов носа аналогично примеру 1.

Через 6 дней при повторном бактериологическом обследовании у 10 человек патогенный стафилококк не обнаруживался, а у штаммов S.aureus, выделенных от 2 человек, антикарнозиновая активность снизилась, и ее уровень выраженности стал менее 1,8 мг/мл, что свидетельствовало об изменении типа носительства с резидентного на транзиторный и позволяло считать санацию положительной.

Повторное обследование данных лиц через 1 месяц, а затем и через 3 месяца подтвердило полученные положительные результаты санации.

При обследовании на стафилококковое бактерионосительство медицинского персонала хирургического отделения ЛПУ были выявлены 5 человек, являющиеся носителями S.aureus резидентного типа. С целью профилактики экзогенного распространения стафилококковых инфекций среди пациентов хирургического отделения, резидентным бактерионосителям ежедневно в течение 6 дней проводили обработку передних отделов носа аналогично примеру 1.

После проведенного курса санации при контрольном бактериологическом обследовании санированных сотрудников хирургического отделения оказалось, что у 3 человек произошла элиминация S.aureus и замена патогенного стафилококка на S.epidermidis, являющийся представителем нормальной микрофлоры. У двух бактерионосителей выделялся S.aureus с уровнем АКрА - 0,9 мг/мл и 1,3 мг/мл соответственно, что позволило считать санацию положительной.

Проведенное через 3 месяца повторное бактериологическое обследование 5 сотрудников хирургического отделения подтвердило эффективность санации, ни у одного из обследуемых не выделили S.aureus резидентного типа.

Таким образом, предлагаемый способ позволяет проводить эффективную санацию стафилококковых бактерионосителей за счет уточнения характера бактерионосительства (резидентного или транзиторного) и снижения антикарнозиновой активности стафилококков, а вследствие этого элиминации патогенной микрофлоры со слизистой оболочки носовой полости, что способствует снижению заболеваемости органов дыхания и предотвращению экзогенного распространения стафилококковой инфекции.

Читайте также:

Пожалуйста, не занимайтесь самолечением!
При симпотмах заболевания - обратитесь к врачу.

Copyright © Иммунитет и инфекции