Рефераты по лабораторной диагностике сифилиса

Российский национально исследовательский медицинский университет им. Н.И.Пирогова

Кафедра дерматовенерологии педиатрического факультета

Доклад на тему: Лабораторные методы диагностики сифилиса

Выполнил: Студент 440 в группы

Серанов Игорь Анатольевич

Комплекс проведения серологических реакций

Реакция имунного прилипания

Реакция иммобилизации бледных трепонем

Реакция иммунофлюоресценцией адсорбцией бледных трепонем

Полимеразная цепная реакция

Все серологические методы исследования, которые применяются на сегодня, условно разделяются на два вида: нетрепонемные, отборочные (НТТ)- и трепонемные, которые подтверждают наличие возбудителя (ТТ).Сифилис протекает очень сложно, клиника очень смазана и не всегда проявляется, поэтому для постановления правильного диагноза используют сразу несколько серологических тестов. При визуалированном подтверждении присутствия во взятом материале бледной трепонемы (при помощи микроскопа) диагноз ставится сразу же, и остальные тесты проводятся редко.

Нетрепонемные исследования (тесты) - НТТ - это так называемые отборочные исследования, они не очень дорого стоят и при их помощи можно обследовать достаточно большое число пациентов, к тому же результаты при многих тестах готовы очень быстро. Но при ложном течении заболевания, при низкой чувствительности проведение таких тестов нецелесообразно, 100%-ный результат получить не удастся.

При проведении нетрепонемных тестов в материале, который исследуется, обнаруживаются антитела, которые реагируют с кардиолипин - лецитиновым антигеном. Одним из первых тестов был метод, основанный на иммунологической реакции Борде - Жангу, где в качестве антигена выступал экстракт печени новорожденного ребёнка, который умер от сифилиса. На сегодня при проведении таких тестов антигеном выступают лецитин, холестерин и кардиолипин.

За границей, в частности в США используют 4 нетрепонемных метода, которые делятся на два вида: методы, которые позволяют визуально определить результаты реакции (RPR и TRUST) и методы микроскопического считывания результатов(USR и VDRL).

К нетрепонемным методам диагностики относится непрямой иммуноферментный анализ с использованием кардиолипина в качестве антигена. У нас в стране и в странах СНГ в качестве нетрепонемных тестов выступают реакция плазмы с инактивированной сывороткой (МР) и реакция, при которой происходит связывание комплимента с кардиолипином (РСК).

Все методы нетрепонемной диагностики очень похожи друг с другом. У них у всех невысокая стоимость, их просто и быстро провести. Эти виды тестов не подходят при выявлении заболевания на первичной стадии и при сифилисе, который протекает скрытно (латентная форма сифилиса). Антитела, которые определяются нетрепонемным тестом появляются, где то через месяц после инфицирования трепонемой. В большинстве случаев у больных, которые лечили первичную стадию сифилиса, примерно около года нетрепонемные тесты имеют отрицательный результат.

Трепонемные исследования (тесты) - ТТ стоят намного дороже, техника проведения их очень сложная и они используются для подтверждения положительных результатов, которые были получены при нетрепонемных исследованиях.

Как мы говорили выше трепонемные методы применяют для того, чтобы подтвердить наличие бледной трепонемы в организме, которое было выявлено при помощи нетрепонемных тестов. Так же их проводят, если проводимые анализы так и не дали положительного результата, но клиника предполагает наличие заболевания. После полного излечения сифилиса более чем у 80% вылечившихся наблюдается положительная реакция при проведении трепонемных тестов ещё несколько лет, а у некоторых - всю жизнь. Исходя из этого трепонемные тесты не используют для профилактических осмотров у людей, которые прошли полный курс лечения.

Научные исследования в области иммунологии и молекулярной биологии продолжаются постоянно и при помощи новейших технологий появляются всё новые тесты для диагностики сифилиса, которые прочно занимают лидирующие позиции. Один из таких тестов, который прочно вошёл в практику - иммуноферментный анализ (ИФА), а многие исследовательские методы находятся на стадиях разработки.

Тот комплекс проведения серологических исследований, который проводят в России включает в себя комплексное проведение серологических реакций:

стандартных серологических реакций –

реакцию связывания комплемента(реакция Вассермана),

реакцию с трепонемным антигеном и реакцию с кардиолипином;

груповых трепонемных реакций-

реакцию иммунофлюоресценции (РИФ)

реакцию иммунного прилипания(РИП);

видоспецифических протеиновых трепонемных реакций –

реакцию иммобилизации трепонем(РИТ),

РИФ - абс и её варианты (IgM-FTA-ABS, 19S-IgM-FTA-ABS),

реакцию пассивной гемаглюцинации трепонем(РПГА).

Если серологические реакции использовать в комплексе, это даст возможность выявить заболевание на ранних этапах заболевания.

Реакция Вассермана - это метод связывания комплемента. Для проведения реакции в качестве антигена используют экстракты, которые изготавливаются из бледных трепонем (специфические антигены) и кардиолипин - это экстракт приготовленный из сердечной мышцы быка(неспецифические антигены). Чем больше в исследуемом материале наблюдается бледных трепонем, тем больше степень заболевания и оценивают степень плюсами:

1) - отрицательная; 2) + сомнительная; 3) ++ слабоположительная; 4) +++ положительная; 5) ++++ резкоположительная.

Реакцию Вассермана (Реакция связывания комплемента) в обязательном порядке проводят вместе с осадочными реакциями – Закс - Витебского и Кана. Иммунологическая природа реакций, в общем- то такая же, как и у реакции Вассермана, но для этих реакций требуются более насыщенные антигены, которые при вступлении в реакцию с реагинами сыворотки дают больший осадок. Серонегативный первичный сифилис ставят, если стандартные серологические реакции дали отрицательный результат. Выявление сифилиса реакцией Вассермана эффективно при серопозитивном вторичном сифилисе, здесь результаты теста на 100% верны. На третичной стадии активного сифилиса результаты верны у более половины больных, а на последних стадиях сифилиса, при поражении внутренних органов и систем, результаты верны у половины больных. У больных ранним врождённым сифилисом серологические реакции дают положительный результат почти всегда, а у больных с поздним врождённым сифилисом - почти в 80% случаев.

Принцип РСК заключается в том, что реагины, находящиеся в сыворотке крови больных сифилисом, обладают свойством вступать в соединения с различными антигенами. Образовавшиеся комплексы сортируют введенный в реакцию комплемент. Для индикации комплекса реагины–антиген–комплемент используется гемолитическая система (смесь эритроцитов барана с гемолитической сывороткой). При наличии комплекса эритроциты выпадают в осадок. Что заметно не вооруженынм глазом. Выраженность гемолиза обозначается врачом ключами: резко положительная 4+, положительная 3+, слабоположительная 2+ ли 1+ и отрицательная. Кроме качественной оценки этих реакций имеется и количественная, имеющая значение в диагностике некоторых стадий сифилиса и при контроле за эффективностью терапии

Реакция иммунофлуоресценции (РИФ) основана на выявлении антител, которые метят специальным флуоресцентным раствором, для того, чтобы в фиолетовых лучах кварцевой лампы выявить соединённые с антигеном антитела. Эта реакция имеет высокую чувствительность и помогает выявить заболевание на первичной стадии серонегативного сифилиса. Так же именно этот тест помогает выявить заболевание у пациентов, у которых заболевание протекает латентно или на поздних стадиях. Существует несколько типов таких реакций и наиболее высоко ценится РИФ-200, при помощи, которой можно выявлять скрытый сифилис и распознать неспецифические результаты КСР. Но, несмотря на высокие показатели РИФа-200, постановка диагноза происходит после проведения всех клинических анализов. РИФ не подходит для наблюдения за пациентами после проведения полного лечения, так как достаточно медленно негативируется на этапе проведения лечения.

Реакция иммуного прилипания (РИП). В основе этой реакции лежит прилипание трепонем, которые сенсибилизированны сывороткой, к эритроцитам и выпадение их в осадок. Результаты оцениваются по следующей таблице:

По всем показателям РИП очень похожа на РИФ и РИТ. Эта реакция проводится в нескольких случаях, если на основании клинических проявлений, анамнеза, лабораторных исследований сифилис не подтверждается, для контроля за заболеванием после получения необходимого лечения и для подтверждения результатов КСР.

Реакция иммобилизации бледных трепонем (РИТ).Попав в среду, где есть иммобилизины испытуемой сыворотки и активный комплемент, бледные трепонемы теряют подвижность. На этом и основывается эта реакция. РИТ очень специфична и применяется для распознания скрытого сифилиса, для диагностики беременных , у которых подозревают сифилис и многих других случаев, при которых стандартные серологические тесты мало специфичны. Большой недостаток этой реакции то, что она стоит очень дорого и её проведение - очень сложный процесс. Результаты считываются по процентным данным иммобилизации бледных трепонем:

-отрицательная - до 20%; -сомнительная -21-30%; -слабоположительная -31-50%; -положительная -51-100%.

В связи с тем, что иммобилизины появляются в крови позже других антител, реакция становится положительной немного позже, чем при проведении других реакций. На первичном этапе инфицирования, как правило, наблюдается отрицательная или слабоположительная реакция. На вторичном этапе сифилиса, хотя появление иммобилизинов в сыворотке крови у больного наблюдается до 60%, реакция положительна почти у половины исследуемых. При рецидиве вторичной стадии сифилиса РИТ положительна почти у 90% больных. На третичной стадии развития сифилиса, при поражении внутренних органов, в том числе и нервной системы, когда реакция Вассермана даёт отрицательные результаты, реакция иммобилизации бледных трепонем положительна почти у 100% больных. На раннем этапе врождённого сифилиса реакция имеет положительный результат почти у всех больных, а на позднем этапе врождённого сифилиса - почти у 100% больных. Серопозитивный латентный сифилис подтверждается только после проведения РИТ, которую проводят после получения положительных результатов при проведении других серологических реакций. РИТ не применяют для контроля за заболеванием у больных, которые получили необходимое лечение.

Реакция иммунофлуоресценции абсорбции с бледной трепонемой (FTA-ABS).Если реакцию проводят для больного, который болен сифилисом и не лечился, то тогда эта реакция даёт положительный результат всегда. Так же высока вероятность выявить инфекцию при помощи FTA-ABS в самом начале заболевания. Реакция обладает большой чувствительностью и специфичностью. Для диагностики латентного сифилиса и в тех случаях, когда уже было проведено несколько тестов и они показали отрицательный результат, но клиника говорит о инфицировании бледной трепонемой, в таких случаях диагноз ставят часто опираясь на результаты FTA-ABS. Буквально через неделю после того, как бледная трепонема попала в организм, начинают вырабатываться специфические антитела IgM, которые со временем перестают появляться и через 2 года уже не определяются. Для того, чтобы понять даёт ли предложенное лечение эффект, проводят специальные тесты, которые определяют специфичность этих антител. Таких тестов на сегодня есть несколько, но проведение их слишком дорого, поэтому для большинства больных эти тесты не проводят.

Гемагглютинационная реакция, которая определяет специфические антитела к бледной трепонеме (микро-РПГА). Для этой реакции в качестве антигена служат трепонемы, поэтому эта реакция очень специфична и даёт правдивые результаты в большинстве случаев.

Иммуноферментный анализ (ИФА) один из наиболее специфичных для диагностики сифилиса. На сегодня чаще всего используют непрямой вариант ИФА. Преимущества этого метода исследования очевидны: не слишком большая стоимость, лёгкость проведения, достаточна высокая точность результата, при помощи этого анализа можно выявить сифилис на ранней стадии, быстрое получение результатов.

В основе метода иммуноблотинга лежит иммуноферментный анализ, который сочетается с электрофорезом. Является одним из самых специфичных анализов и при его помощи происходит подтверждение инфицирования сифилисом.

Полимеразную цепную реакцию (специфический метод исследования) проводят для установления диагноза при скрытых течениях сифилисной инфекции. При проведении ПЦР в испытуемом материале находят возбудителя, даже на первичном этапе заболевания. Обнаруживаемый генетический материал при помощи ДНК делится и таким образом обнаружить возбудителя становится очень просто. При нейросифилисе, когда выявить инфекцию бывает очень затруднительно при проведении других анализов из-за очень низкой чувствительности, при врождённом сифилисе, при первичной стадии серонегативного сифилиса и для постановки диагноза у ВИЧ-инфицированных проведение ПЦР незаменимо. Исследование спинномозговой жидкости при сифилисе проводят, если есть клинические поражения нервной системы на ранней стадии заболевания, при скрытой форме и обязательно ещё до начала лечения. Так же этот анализ назначается для больных нейросифилисом на поздних стадиях сифилиса и при латентной форме. В клинической лаборатории проводят исследование цитоза, содержание белка, реакции Панди и Нонне - Апельта. В серологических лабораториях проводится реакция Вассермана, реакция Ланге, РИФ, РИФю,РИФц, РИТ.

Для ус­та­но­в­ле­ния ди­аг­но­за не­об­хо­ди­мы, кро­ме спе­ци­аль­ных дан­ных анам­не­за и объ­е­к­тив­но­го об­сле­до­ва­ния боль­но­го, ла­бо­ра­тор­ные ме­то­ды ис­сле­до­ва­ния: ба­к­те­ри­о­ско­пи­че­с­кое ис­сле­до­ва­ние; се­ро­ло­ги­че­с­кие ис­сле­до­ва­ния кро­ви; ис­сле­до­ва­ние спин­но­моз­го­вой жид­ко­сти.

Ба­к­те­ри­о­ско­пи­че­с­кое ис­сле­до­ва­ние. Наи­бо­лее убе­ди­тель­ным до­ка­за­тель­ст­вом тре­по­нем­ной при­ро­ды за­бо­ле­ва­ния яв­ля­ет­ся пря­мая ви­зуа­ли­за­ция тре­по­нем. В на­стоя­щее вре­мя ме­тод тём­но­поль­ной мик­ро­ско­пии для вы­яв­ле­ния под­виж­ных тре­по­нем ши­ро­ко при­ме­ня­ет­ся в ди­аг­но­сти­ке.

При пер­ви­ч­ном си­фи­ли­се на блед­ную тре­по­не­му ис­сле­ду­ют от­де­ля­е­мое эро­зив­но-яз­вен­ных па­пу­лёз­ных эле­мен­тов в об­ла­с­ти по­ло­вых ор­га­нов, по­ло­с­ти рта, в пун­к­та­те из ре­ги­о­нар­ных лим­фа­ти­че­с­ких уз­лов. При вто­ри­ч­ном си­фи­ли­се ис­поль­зу­ет­ся ма­те­ри­ал из раз­ли­ч­ных по­ра­же­ний ко­жи и сли­зи­стых обо­ло­чек. Для диагностики врожденного сифилиса может быть использована амниотическая жидкость.

При ми­к­ро­ско­пи­че­с­ком ис­сле­до­ва­нии блед­ные тре­по­не­мы име­ют вид тон­кой спи­ра­ли с 8-12 рав­но­мер­ны­ми за­вит­ка­ми. В тём­ном по­ле зре­ния мо­ж­но на­блю­дать по­сту­па­тель­ное вра­ще­ние тре­по­не­мы во­к­руг оси, ро­та­ци­он­ное и сги­ба­тель­ное. Ва­ж­ным при­зна­ком яв­ля­ет­ся из­лом в сред­ней ча­с­ти (“при­гла­жен­ный утю­гом”), что от­ли­ча­ет воз­бу­ди­те­ля си­фи­ли­са от дру­гих тре­по­нем.

При от­ри­ца­тель­ных ре­зуль­та­тах ми­к­ро­ско­пи­че­с­кое ис­сле­до­ва­ние по­в­то­ря­ют ли­бо до об­на­ру­же­ния блед­ной тре­по­не­мы, ли­бо до под­твер­жде­ния ди­аг­но­за ре­зуль­та­та­ми се­ро­ло­ги­че­с­ко­го ис­сле­до­ва­ния.

Об­на­ру­же­ние спе­ци­фи­че­ских мик­ро­ор­га­низ­мов с ха­рак­тер­ной мор­фо­ло­ги­ей, под­виж­но­стью и ан­ти­ген­ной спе­ци­фич­но­стью (при ис­клю­че­нии та­ких за­бо­ле­ва­ний, как пин­та и мяг­кий шанкр) по­зво­ля­ет по­ста­вить ди­аг­ноз си­фи­ли­са при пер­вич­ном, вто­рич­ном, ран­нем вро­ж­дён­ном, ре­ци­див­ном си­фи­ли­се да­же без учё­та ре­зуль­та­тов се­ро­ло­ги­че­ских тес­тов [Дмит­ри­ев Г.А., Бра­ги­на Е.Е., 1996]. Сле­ду­ет учи­ты­вать, что от­сут­ст­вие мик­ро­ор­га­низ­мов ещё не ис­клю­ча­ет ди­аг­ноз си­фи­ли­са. От­сут­ст­вие тре­по­нем в ти­пич­ных оча­гах по­ра­же­ния мо­жет быть обу­слов­ле­на дли­тель­но­стью су­ще­ст­во­ва­ния оча­га, пред­ва­ри­тель­ным ле­че­ни­ем па­ци­ен­та или пло­хой тех­ни­кой взя­тия об­раз­ца или про­смот­ра ма­те­риа­ла. При от­сут­ст­вии воз­бу­ди­те­лей в оча­ге по­ра­же­ния сле­ду­ет ис­клю­чить воз­мож­ность дру­гих за­бо­ле­ва­ний (гер­пес, мяг­кий шанкр).

Се­ро­ло­ги­че­ские ис­сле­до­ва­ния кро­ви. Все су­ще­ст­вую­щие в на­стоя­щее вре­мя ла­бо­ра­тор­ные се­ро­ло­ги­че­ские тес­ты мож­но раз­де­лить на две груп­пы:не­тре­по­нем­ные тес­ты, ис­поль­зуе­мые для от­бо­ра;тре­по­нем­ные под­твер­ждаю­щие тес­ты.

Слож­ность кли­ни­че­ско­го те­че­ния си­фи­ли­са дик­ту­ет не­об­хо­ди­мость со­че­тан­но­го при­ме­не­ния ди­аг­но­сти­че­ских тес­тов. Пря­мое оп­ре­де­ле­ние па­то­ген­ных T.pallidum в оча­гах по­ра­же­ния (пря­мая ви­зуа­ли­за­ция - бак­те­рио­ско­пи­че­ское ис­сле­до­ва­ние) по­зво­ля­ет дос­то­вер­но по­ста­вить ди­аг­ноз при пер­вич­ном, вто­рич­ном и ран­нем вро­ж­дён­ном си­фи­ли­се.

Не­тре­по­нем­ные тес­ты(НТТ) ис­поль­зу­ют­ся в ка­че­ст­веот­бо­роч­ных, они не­до­ро­ги, по­зво­ля­ют об­сле­до­вать боль­шое ко­ли­че­ст­во боль­ных и не­об­хо­ди­мы для оп­ре­де­ле­ния эф­фек­тив­но­сти те­ра­пии. Ог­ра­ни­че­ни­ем не­тре­по­нем­ных тес­тов яв­ля­ет­ся низ­кая чув­ст­ви­тель­ность при пер­вич­ном и тре­тич­ном си­фи­ли­се, сни­же­ние чув­ст­ви­тель­но­сти при позд­нем ла­тент­ном си­фи­ли­се, на­ли­чие лож­но­по­ло­жи­тель­ных ре­зуль­та­тов.

Тре­по­нем­ные тес­ты(ТТ) обыч­но не при­ме­ня­ют­ся для от­бо­ра, так как они тех­ни­че­ски слож­ны и до­ро­ги по срав­не­нию с не­тре­по­нем­ны­ми. Они ис­поль­зу­ют­ся дляпод­твер­жде­ния ре­зуль­та­товне­тре­по­нем­ных тес­тов, осо­бен­но при от­сут­ст­вии кли­ни­че­ски вы­ра­жен­ных сим­пто­мов за­бо­ле­ва­ния. Под­твер­жде­ние ди­аг­но­за позд­не­го ла­тент­но­го, тре­тич­но­го си­фи­ли­са при от­ри­ца­тель­ных ре­зуль­та­тах не­тре­по­нем­ных тес­тов так­же про­во­дит­ся с по­мо­щью тре­по­нем­ных тес­тов, хо­тя их чув­ст­ви­тель­ность умень­ша­ет­ся с те­че­ни­ем за­бо­ле­ва­ния. В бу­ду­щем, по-ви­ди­мо­му, с этой це­лью бу­дет ис­поль­зо­вать­ся по­ли­ме­раз­ная цеп­ная ре­ак­ция.

Раз­ви­тие ме­то­дов им­му­но­ло­гии и мо­ле­ку­ляр­ной био­ло­гии при­ве­ло к по­яв­ле­нию в те­че­ние по­след­не­го де­ся­ти­ле­тия боль­шо­го ко­ли­че­ст­ва но­вых тес­тов, не­ко­то­рые из них, на­при­мер, им­му­но­фер­мент­ный ана­лиз (ИФА), проч­но за­ня­ли ме­сто в прак­ти­ке. Та­кие ме­то­ди­ки пря­мо­го оп­ре­де­ле­ния тре­по­нем­ных ан­ти­ге­нов, как по­ли­ме­раз­ная цеп­ная ре­ак­ция, ме­тод мо­ле­ку­ляр­ных зон­дов, ос­но­ван­ные на ме­то­дах мо­ле­ку­ляр­ной био­ло­гии, на­хо­дят­ся в ста­дии раз­ра­бот­ки.

Се­ро­ло­ги­че­ские ис­сле­до­ва­ния име­ют важ­ней­шее зна­че­ние для ди­аг­но­сти­ки си­фи­ли­са, осо­бен­но в ла­тент­ной и позд­ней ста­ди­ях, а так­же для оцен­ки ка­че­ст­ва про­во­ди­мо­го ле­че­ния. Од­на­ко вслед­ст­вие слож­но­сти ан­ти­ген­но­го со­ста­ва блед­ной тре­по­не­мы, те­ло ко­то­рой со­дер­жит два ли­по­ид­ных ком­по­нен­та, про­теи­но­вые и по­ли­са­ха­рид­ные ан­ти­ге­ны, в сы­во­рот­ке кро­ви боль­ных от­ме­ча­ет­ся мно­же­ст­вен­ность ан­ти­тел. В раз­лич­ных ста­ди­ях бо­лез­ни пре­об­ла­да­ют то од­ни, то дру­гие ан­ти­те­ла, от­но­ся­щие­ся к раз­ным клас­сам им­му­ног­ло­бу­ли­нов. По­это­му в со­вре­мен­ной ве­не­ро­ло­гии од­но­вре­мен­но ис­поль­зу­ет­ся не­сколь­ко се­ро­ло­ги­че­ских ре­ак­ций на си­фи­лис.

Нетре­по­нем­ные тес­ты. Не­тре­по­нем­ные тес­ты по­зво­ля­ют об­на­ру­жить в тес­ти­руе­мой сы­во­рот­ке ан­ти­те­ла, реа­ги­рую­щие с кар­дио­ли­пин-ле­ци­ти­но­вым ан­ти­ге­ном. Пер­вым не­тре­по­нем­ным тес­том был се­ро­ло­ги­че­ский тест, ос­но­ван­ный на ре­ак­ции фик­са­ции ком­пле­мен­та Бор­де-Жан­гу, где в ка­че­ст­ве ан­ти­ге­на ис­поль­зо­вал­ся спир­то­вой экс­тракт пе­че­ни но­во­ро­ж­ден­но­го, умер­ше­го от вро­ж­ден­но­го си­фи­ли­са (ре­ак­ция Вас­сер­ма­на).

Все не­тре­по­нем­ные тес­ты на си­фи­лис, при­ме­няе­мые в на­стоя­щее вре­мя, пред­став­ля­ют со­бой ре­ак­ции флок­ку­ля­ции (про­дукт вы­па­да­ет в ви­де хлопь­ев), в ко­то­рых в ка­че­ст­ве ан­ти­ге­на ис­поль­зу­ют­ся кар­дио­ли­пин, хо­ле­сте­рин и ле­ци­тин. Все не­тре­по­нем­ные тес­ты на­прав­ле­ны на об­на­ру­же­ние IgG- и IgM-ан­ти­тел к ли­пи­дам кле­точ­ной стен­ки тре­по­нем. Вслед­ст­вие ли­пид­ной при­ро­ды ан­ти­ге­на или не­обыч­ных свойств ан­ти­тел при этих тес­тах ком­плекс ан­ти­ген-ан­ти­те­ло ос­та­ет­ся в сус­пен­зии, и име­ет ме­сто флок­ку­ля­ция, а не агг­лю­ти­на­ция или пре­ци­пи­та­ция.

За ру­бе­жом (США) ис­поль­зу­ют­ся 4 стан­дарт­ных не­тре­по­нем­ных тес­та в ка­че­ст­ве от­бо­роч­ных ре­ак­ций на си­фи­лис, сре­ди ко­то­рых раз­ли­ча­ют две ка­те­го­рии:

тес­ты с ви­зу­аль­ным оп­ре­де­ле­ни­ем ре­зуль­та­тов ре­ак­ции - RPR (тест быстрых плазменных реагинов) и TRUST (тест с толуидиновым красным);

тес­ты с мик­ро­ско­пи­че­ским счи­ты­ва­ни­ем ре­зуль­та­тов ре­ак­ции - VDRL и USR (тест определения активных реагинов плазмы).

Уральская Государственная\nМедицинская Академия\n \n

Кафедра клинической лабораторной\n и бактериологической диагностики\n \n

Заведующий кафедрой\nд.м.н., профессор С.В. Цвиренко\n \n

Цикл усовершенствования врачей \n“Лабораторная диагностика \nнеотложных состояний”\n \n

КУРСОВАЯ РАБОТА\n \n

“Значение серологических реакций при диагностике сифилиса”\n \n

Исполнитель:\n Врач Городского \nкожвендиспансера \n \n

Куратор:\n д.м.н., профессор В.В. Базарный\n \n \n

г. Екатеринбург\n1998 год\n \n

Серологические исследования при сифилисе имеют большое \nзначение. Вопросы диагностики, профилактические мероприятия, \nпроведения и оценки эффективности терапии и т.д. не могут \nрешаться без помощи серологических исследований. \n\n \n

Практическая ценность серодиагностики велика, потому что \nположительные серологические реакции в большинстве случаев \nуказывают на несомненный сифилис даже в отсутствии клинических \nявлений.\nОсобое значение методы серодиагностики имеют:\n \n

При проведении профилактических мероприятий: серологическом \nобследовании больных соматических стационаров, обследование \nдоноров, беременных, лиц, поступающих на работу, работников \nдетских учреждений, пищевой промышленности и т.д.\n При первичном периоде сифилиса.\n При скрытом сифилисе раннем и позднем, когда клинические \nявления отсутствуют.\n При заболевании внутренних органов и нервной системы.\n При снятии с учета больных сифилисом, закончивших лечение.\n При контроле и оценке результатов терапии.\n При всех заболеваниях неясной этиологии и подозрительных на \nсифилис.\nДля серодиагностики сифилиса используется следующий \n \n

комплекс реакций:\nI. Отборочные реакции (поисковые):\n1.1. Микрореакция преципитации с кардиолипиновым \n \n

антигеном с плазмой крови и инактивированной сывороткой. \nКачественный и количественный метод.\n \n

1.2. Реакция ВДРЛ-латекс-агглютинация.\n1.3. Реакция преципитации - микрофлокуляции - РПР.\nII. Диагностические реакции:\n2.1. РСК - реакция связывания комплемента с трепонемным и \n \n

кардиолипиновым антигенами (реакция Вассермана). Качественная \nи количественная методики постановки. Термостатная и на холоде \n(реакция Колмера).\n \n

2.2. РНГА - реакция непрямой гемагглютинации. Качественный \nи количественный метод.\n \n

III. Специфические реакции:\n3.1. Реакция иммунофлюоресценции - РИФ. \nРИФабс - с абсорбцией; РИФ 200.\n3.2. Реакция иммобилизации бледных трепонем- РИБТ.\n \n

Диагноз сифилиса должен основываться на сопоставлении и \nнадлежащей оценке суммы клинических и лабораторных \nхарактеристик.\nДанные серологического исследования крови больного в \n \n

первичном периоде заболевания сифилисом не так важны для \nдиагностики, но для установления длительности срока лечения и \nнаблюдения они имеют исключительное значение. В первые 15-17 \n\n \n

дней после появления твердого шанкра комплекс серологических \nреакций обычно отрицательный. В дальнейшем он переходит в \nположительный, причем процент положительных результатов \nвозрастает с увеличением срока, прошедшего с начала появления \nшанкра до момента повторного исследования крови. Первые пять- \nшесть недель заболевания реакции положительны в 0,25%, на 7-8 \nнеделе - 75-80 %, на 9-10 неделе - в 100% случаев.\nДиагноз первичного серонегативного сифилиса ставится на \n \n

основании отрицательных стандартных серологических реакций без \nучета РИФ и реакций Колмера.\nЕсли комплекс серореакций однократно дал \n \n

слабоположительный результат, то диагностируется первичный \nсеропозитивный сифилис.\nОтрицательная реакция Вассермана при первичном сифилисе \n \n

имеет лишь относительное значение. Однако слабоположительной и \nсомнительной реакции следует признавать лишь в том случае, если \nпри повторном исследовании (через одну неделю) наблюдается \nнекоторое усиление реакции. Если усиления нет и реакция стала \nотрицательной, то сифилитическую природу заболевания, по всей \nвероятности, можно исключить.\n \n

При вторичном свежем сифилисе классические серологические \nреакции положительны почти в 100% случаев.\nБольшое значение серологические исследования имеют тогда, \n \n

когда обнаружение бледных трепонем затруднено или невозможно, \nнапример, при распозновании некоторых нетипичных высыпаний на \nкоже и слизистых оболочках. Повторно положительные серореакции \nдо некоторой степени подтверждают сифилитическое \nпроисхождение этих высыпаний, а отрицательные, также повторно \nвзятые, исключают сифилис.\nОтрицательные результаты серореакций при свежем нелеченом \n \n

вторичном сифилисе наблюдаются очень редко.\n \n

При вторичном рецидивном сифилисе КСР положителен в \n98-100% случаев. Исключение составляет злокачественный сифилис \nу истощенных лиц с моносимптомными проявлениями. При лечении \nтаких больных реакции часто становятся положительными.\nРИФ при вторичном свежем и вторичном рецидивном сифилисе \n \n

положительна почти в 100%, а РИБТ - в 85-95% случаев.\n \n

При третичном активном сифилисе комплекс серореакций \n(КСР) положителен у 70-75% больных. РИФ и РИБТ положительны \nв 75-80% случаев. В этой стадии сифилиса с помощью \nсерологических исследований проявления сифилиса \nдифференцировать от опухолей и некоторых проявлений туберкулеза \n\n \n

(волчанка, скрофулодерма). Диагностическое значение \nсерологических исследований крови при третичном сифилисе \nбесспорно, так как в это время бледная трепонема \nбактериоскопически обычно не обнаруживается. Учитывая, что в \n25-30% случаев третичного сифилиса серологические реакции могут \nбыть отрицательными, всех больных с неясной клинической \nкартиной следует подвергать тщательному клинико-лабораторному \nи рентгенологическому обследованию (обследование \nневропатологом, окулистом с обращением на состояние глазного дна, \nрентгенография костной системы и аорты, исследования \nспиномозговой жидкости), необходимо искать следы ранее активных \nпроявлений (плотные лимфоузлы, стойкие костные изменений, \nленкодерма, рубцы, характерные для сифилиса и т.д.), а иногда \nназначать пробное лечение.\n \n

Наибольшее значение серологические исследования крови \nприобретают при скрытом сифилисе, так как какие-либо наружные \nпроявления сифилиса в это время отсутствуют.\nВ последние годы во всех странах наблюдается рост \n \n

заболеваемости скрытым сифилисом. Скрытый сифилис стал чаще \nвыявляться не только в связи с ростом заболеваемости, но и потому \nчто диагностика его стала более совершенной благодаря появлению \nновых, более чувствительных серологических реакций (РСК на \nхолоде - р.Колмера, РНГА, РИФ, РИБТ). Скрытый сифилис \nпредставляет двойную опасность: во-первых, для окружающих, так \nкак такой больной может служить источником заражения; во-вторых, \nдля самих больных, у которых поздние сроки могут возникнуть \nтяжелые осложнения. \nВ скрытом периоде сифилиса серореакции бывают \n \n

положительными в 40-96% случаев в зависимости от длительности \nзаболевания, интенсивности предшествующей терапии и т.д. \nДиагностическое значение при этой форме сифилиса имеют только \nположительные результаты реакции, отрицательные же роли не \nиграют. Слабоположительные результы реакций у больных без \nклинических проявлений и без сифилиса в анамнезе надо оценивать \nс осторожностью, так как такие реакции могут иметь \nнеспецифический характер (малярия, туберкулез, лейкемичекие \nзаболевания, опухоли в стадии распада, женлтуха, диабет, хр. \nэндокардит, подагра и т.д.). У больных ранним скрытым сифилисом \nстандартные серологические реакции обычно бывают резко \nположительными (4+) с обоими антигенами и титр их чаще высокий \n- 1:120, 1:160, 1:240, 1:320.\nУ больных поздним скрытым сифилисом также серологические \n \n

реакции резко положительные, но титр их более низкий - 1:5, 1:10, \n1:20. \n\n \n

В процессе специфического лечения у больных ранним \nсифилисом наблюдается тенденция к более быстрой негативации \nстандартных серологических реакциий (после 1-2 курсов). У \nбольных поздним скрытым сифилисом серологические реакции \nнегативируются более медленно (после 3-5 курсов), а нередко \nостаются положительными, несмотря на полноценное \nпротивосифилитическое лечение, то есть сохраняется \nрезистентность.\nЕсли не представляется возможным провести исследование \n \n

крови на РИФ и РИБТ, то диагноз скрытого сифилиса может быть \nпоставлен лишь после получения двукратного резкоположительного \nрезультата (4+) КСР с обязательным определением титра реагинов.\nТаким образом, с целью своевременного выявления больных \n \n

сифилисом рекомендуется пользоваться современными методами \nсерологических исследований. \n \n

Список литературы.\n \n

Овчинников Н.М., Беднова В.Н. “Лабораторная \nдиагностика заболеваний, передающихся половым \nпутем” М.: Медицина, 1987.\nОвчинников Н.М. “Сифилис” М.: Медицина, 1987.\nВасильев Т.В. “Значение серологических реакций в \nклинике” М.: Медицина, 1987.\nПавлов С.Т. “Кожные и венерические болезни” М.: \nМедицина, 1989.\nБиргер М.О. “Микробиологические и вирусологические \nметоды исследования” М.: Медицина, 1992. \n\n \n

Смирнов В.С., Коваленко В.У. “Еще раз к вопросу о \nлечении больных скрытыми формами сифилиса” \n“Вестник дерматологии и венерологии” № 10, 1991.\nПриказ № 1161 от 02 сентября 1985 года МЗО, г. Москва “О \nсовершенствовании серологической диагностики \nсифилиса”. \n\n \n ","canDownload":false,"canEdit":false,"canDelete":false,"canReport":false,"canReview":false,"averageShapeVotes":null,"averageStatsVotes":null,"reviewsCount":0,"averageVotes":"0.0","userVote":null,"previewLimit":1,"advEnabled":true,"totalVotes":null,"title":"\u0417\u043d\u0430\u0447\u0435\u043d\u0438\u0435 \u0441\u0435\u0440\u043e\u043b\u043e\u0433\u0438\u0447\u0435\u0441\u043a\u0438\u0445 \u0440\u0435\u0430\u043a\u0446\u0438\u0439 \u043f\u0440\u0438 \u0434\u0438\u0430\u0433\u043d\u043e\u0441\u0442\u0438\u043a\u0435 \u0441\u0438\u0444\u0438\u043b\u0438\u0441\u0430 \u0440\u0435\u0444\u0435\u0440\u0430\u0442 \u043f\u043e \u043c\u0435\u0434\u0438\u0446\u0438\u043d\u0435 , \u0421\u043e\u0447\u0438\u043d\u0435\u043d\u0438\u044f \u0438\u0437 \u041c\u0435\u0434\u0438\u0446\u0438\u043d\u0430","isPremiumEnabled":false,"hasQuizcardSet":null,"alreadyDownloaded":false,"reviews":null>" data-translations="[]" data-navigation="[]" data-locale="ru" data-router="true" data-rootUrl="/ru/znachenie-serologicheskih-reakciy-pri-diagnostike-sifilisa-1/1257832/" >