Область применения простых тестов при вич

Association “Youth for the Right to Live”, Balti, Moldova

Сегодня ВОЗ опубликовала убедительную рекомендацию в отношении тестирования на ВИЧ, призвав страны прекратить использование медленных и менее точных методов тестирования – иммуноблотинга (вестерн-блот) и линейного иммуноанализа, заменив их более простым методом экспресс-тестирования.

Принципиально важно, чтобы люди, живущие с ВИЧ и не знающие о своем диагнозе, прошли тестирование и незамедлительно получили антиретровирусную терапию (АРТ). АРТ предотвращает переход ВИЧ-инфекции в стадию СПИДа; когда после начала терапии содержание вируса в крови становится таким низким, что он не обнаруживается при исследовании крови, люди могут жить с ВИЧ, не передавая его другим.

Д-р Masoud Dara, координатор по инфекционным болезням в ЕРБ ВОЗ, отметил: "Экспресс-тестирование спасает людям жизнь, делая тесты на ВИЧ более доступными и сокращая время ожидания результата анализа. Когда такое тестирование проводится вне медицинского учреждения лицами, проявляющими заботу о своих клиентах и уделяющими внимание их нуждам, люди с большей вероятностью будут пользоваться услугами тестирования. Если результат теста положительный, лечение следует начинать незамедлительно; если результат теста отрицательный, то это хороший повод проинформировать клиента о способах предупреждения инфицирования ВИЧ, таких как прием препаратов доконтактной профилактики и использование презервативов. При любом результате анализа, получение помощи начинается именно с этапа тестирования".

Опубликованная сегодня рекомендация основывается на тщательном анализе самых последних данных и систематическом обзоре существующей практики, которые были проведены ВОЗ в этом году в ходе пересмотра своих глобальных рекомендаций в отношении услуг по тестированию на ВИЧ.

В ходе обзора, стратегии тестирования на основе методов иммуноблотинга и линейного иммуноанализа для подтверждения диагноза ВИЧ-инфекции сравнивались со стратегиями, основанными на использовании метода экспресс-диагностики, которая может проводиться в месте оказания помощи, в сочетании с методом иммуноферментного анализа. Эксперты пришли к выводу, что использование экспресс-тестов в сочетании с методом иммуноферментного анализа в целом является более оперативным, более точным и менее затратным методом диагностики ВИЧ-инфекции. Итоги анализа вкратце представлены в аналитическом обзоре; публикация глобальных рекомендаций будет приурочена к Всемирному дню борьбы против СПИДа, отмечаемому 1 декабря.

Поздняя постановка диагноза "ВИЧ-инфекция" по-прежнему является актуальной проблемой для большинства стран в Европейском регионе ВОЗ: по данным оценок, только 82% людей, живущих с ВИЧ в Регионе, знают о своем статусе. Если же посмотреть на ситуацию в странах Восточной Европы, то о своем статусе знают лишь 74% людей, живущих с ВИЧ. Следовательно, эта рекомендация особенно актуальна для Европейского региона.

Поздняя стадия инфекции отмечается у каждого второго впервые выявленного больного с подтвержденным диагнозом "ВИЧ-инфекция". На подтверждение диагноза при помощи методов иммуноблотинга и линейного иммуноанализа может уйти несколько недель, что приведет к задержке начала жизненно необходимой АРТ. Многие пациенты не приходят в клинику на повторный прием, чтобы подтвердить результаты анализов. Следствием этого является рост числа случаев СПИДа и вызванных им смертей, которых можно было бы избежать при более раннем начале лечения.

Однако, благодаря новым технологиям, обеспечивающим быстрое подтверждение результатов, пройти тестирование на ВИЧ теперь стало проще, чем когда-либо ранее. Более того, во многих странах Европы существует институт консультантов из числа лиц одного круга (по принципу "равный – равному"), которые не обязательно являются медицинскими работниками, но при этом прошли специальную подготовку и предоставляют консультации и поддержку, а также могут провести тестирование вне медицинского учреждения и за считанные минуты сообщить клиенту результат.

К сожалению, лишь малое число стран внедрили у себя новейшие подходы к тестированию на ВИЧ. Зачастую задержка с их внедрением обусловлена такими факторами, как законодательные барьеры или нежелание обсуждать внесение изменений в планы госзакупок и спецификацию лабораторного оборудования.

ЕРБ ВОЗ призывает страны Региона присоединиться к инициативе "Европейская неделя тестирования". Европейская неделя тестирования – проводимая два раза в год общерегиональная кампания, призывающая различные организации приложить все возможные усилия для охвата тестированием как можно большего числа людей в течение одной недели в мае и одной недели в ноябре. Главная задача кампании – содействовать раннему выявлению ВИЧ-инфекции и гепатитов, повышать осведомленность населения об этих заболеваниях и расширять доступ к услугам по тестированию и, при необходимости, к дальнейшей медицинской помощи. Кампания проводится в период с 22 по 29 ноября 2019 г.

[Weekly Epidemiological Record, 1998, 73, 42, 321-326]

С 1985 года, когда впервые появились коммерческие тест-системы для выявления антител к вирусу иммунодефицита человека (ВИЧ), был достигнут значительный прогресс в диагностике ВИЧ/СПИДа. В настоящее время существует множество различных методов выявления антител к ВИЧ. До сих пор чаще всего применяется иммуноферментный анализ (ИФА); в то же время было разработано большое количество простых и быстрых тестов на ВИЧ-инфекцию, которые в специфических обстоятельствах имеют значительные преимущества. Поэтому сегодня особое значение имеет выбор тестов, которые имели бы наибольшую ценность при определенных обстоятельствах, особенно в такой ситуации, когда возможности лаборатории ограничены, но в то же время должна быть гарантирована надежность полученных результатов.

Тестирование на антитела к ВИЧ осуществляется, главным образом, с одной из трех целей:

1) скрининг донорской крови для обеспечения безопасности гемотрансфузий;
2) эпидемиологический надзор за превалентностью ВИЧ-инфекции;
3) диагностика ВИЧ-инфекции у отдельных индивидуумов.

В настоящее время практически повсеместно большинство тестов на ВИЧ-инфекцию производится с целью скрининга донорской крови. Так как вероятность передачи ВИЧ с контаминированной кровью чрезвычайно высока (около 100%), скрининг донорской крови является экономически целесообразным профилактическим мероприятием.

За многие годы требования к использованию тестов на ВИЧ для целей эпиднадзора практически не изменились. Эффективность различных стратегий по профилактике и борьбе с ВИЧ/СПИДом, а также оценка результативности проводимых мероприятий будет, как и прежде, базироваться на результатах мониторинга эпидемии как в популяции в целом, так и в специфических группах населения. В то же время обоснования для диагностического тестирования на ВИЧ претерпели существенные изменения. На начальном этапе эпидемии основное внимание уделялось в большей степени подтверждению клинического диагноза у больных с подозрением на ВИЧ/СПИД, а не профилактическим или терапевтическим аспектам ведения пациентов с известным ВИЧ-статусом.

Новейшие достижения в области профилактического лечения ВИЧ-инфицированных больных, а также стремление предупредить вертикальную передачу ВИЧ от матери к ребенку существенно изменили эту картину. В настоящее время все больше осознается важное значение консультирования и добровольного тестирования с целью как профилактики, так и лечения ВИЧ/СПИДа - особенно у женщин, обращающихся в антенатальные клиники. Такие изменения выдвинули новые требования к тестированию на ВИЧ, в частности - в отношение продолжительности исследования. В данной статье обсуждается практическое значение использования простых/быстрых тестов на ВИЧ и место этих исследований в глобальных усилиях по профилактике и борьбе с ВИЧ/СПИДом; при этом учтены достоинства и недостатки этих тестов, а также их приемлемость для использования в различных ситуациях. Приведенные в статье материалы будут представлять интерес для руководителей органов здравоохранения, директоров учреждений службы переливания крови, заведующих центрами по консультированию и добровольному тестированию и лабораториями, а также руководителей национальных программ борьбы со СПИДом.

Достоинства и недостатки

Иммуноферментный анализ (ИФА)

По традиции, диагностика ВИЧ-инфекции основана на выявлении антител к ВИЧ, причем для этих целей чаще всего применяют ИФА. С 1985 года, когда для выявления антител к ВИЧ стали доступны первые коммерческие тест-системы на основе вирусных лизатов (тест-системы первого поколения), удалось добиться значительного методического прогресса. Были разработаны ИФА-тест-системы второго и третьего поколений (на основе рекомбинантных белковых антигенов и синтетических пептидов), а также созданы новые тест-системы. В результате удалось существенно повысить чувствительность и специфичность исследования, разработать тест-системы, с помощью которых можно одновременно определять антитела к ВИЧ-1 и ВИЧ-2 и к вариантам ВИЧ, а также значительно сократить продолжительность "периода окна", т.е. интервала от момента инфицирования до появления циркулирующих антител, выявляемых с помощью тест-систем.

ИФА предназначен для одновременного исследования большого количества образцов (например, для скрининга от 96 до нескольких сотен образцов в день); таким образом, его удобно использовать для целей эпиднадзора, а также в централизованных лабораториях службы переливания крови. В настоящее время существует тенденция создания полностью компьютеризированных систем для выявления антител к ВИЧ. Для проведения ИФА необходимо иметь достаточно сложное лабораторное оборудование и приспособления; кроме того, нужны автоматические пипетки, инкубаторы, автоматические промывные устройства ("вошеры"), считывающие/регистрирующие устройства ("ридеры") и источники постоянного электрического тока. Это оборудование требует постоянного ухода и ремонта, а также периодических поверок для обеспечения точности получаемых результатов. Достоверность результатов в существенной мере зависит от квалификации лабораторных работников, которые должны уметь готовить необходимые реагенты, аккуратно работать с пипетками и уметь обращаться с оборудованием и приборами. Для рационального использования тест-систем для ИФА необходимо иметь достаточно большое число образцов, чтобы максимально использовать имеющиеся в тест-системах микропланшеты для титрования; это снижает возможности использования тест-систем.

К сожалению не во всех странах мира можно создать в лабораториях условия, пригодные для проведения ИФА, поэтому сохраняется необходимость разработки тестов на ВИЧ-инфекцию, пригодных для использования в лабораториях с ограниченными техническими возможностями. Достижения в области технологии позволили разработать многочисленные простые/быстрые тесты, основанные на разнообразных принципах - реакции агглютинации, реакции точечного иммунного связывания с использованием твердой основы ("иммунокомб"), мембранных фильтров или более новых иммунохроматографических мембранных технологий.

Большинство простых/быстрых тест-систем выпускают в виде наборов, полностью готовых к использованию и не требующих применения каких-либо дополнительных реагентов и/или оборудования. Поскольку в методическом и техническом отношении процедуры очень просты, состоят из небольшого числа последовательных операций и не требуют особой точности, вероятность технических ошибок невелика, а постановку тестов могут производить сотрудники, не имеющие специальной лабораторной подготовки.

Интерпретация результатов этих тестов обычно не вызывает трудностей; кроме того, во многих простых/быстрых тест-системах используются внутренние контроли, помогающие правильно интерпретировать полученные результаты. Предварительные результаты исследования становятся известны уже через несколько минут после постановки теста. Таким образом, при использовании простых/быстрых тестов для подтверждающей диагностики (см. статью "Новые рекомендации по выбору и использованию тестов для выявления антител к ВИЧ" в "Wkly Epidemiol. Rec.", 1997, vol. 72, N12, pp. 81-87 - перевод этой статьи имеется в данном выпуске), окончательное заключение может быть сделано уже в первый день исследования. Простые/быстрые тесты рассчитаны на исследование единичных образцов или небольшого числа сывороток, т.е. позволяют одновременно тестировать любое количество образцов. Некоторые тест-системы для простых/быстрых тестов не требуют хранения в холодильнике - их можно оставлять в лаборатории при температуре от 2С до 30С.

Возможность получения точных и воспроизводимых результатов зависит не только от характеристик ("внутренних параметров") самих тест-систем, но и от некоторых внешних факторов - например, от квалификации лабораторных работников и/или от использования высококачественных стандартов при постановке тестов и учете их результатов.

Описанные выше качества простых/быстрых тестов снимают ряд проблем, нередко возникающих при использовании традиционных тест-систем; благодаря этим свойствам можно использовать простые/быстрые тесты и получать надежные результаты даже в лабораториях, не имеющих современного дорогостоящего оборудования для ИФА.

Детальные сведения о результатах сравнительных испытаний простых/быстрых тестов и традиционного ИФА, проведенных Всемирной организацией здравоохранения, представлены в серии отчетов "Технические характеристики коммерческих тест-систем для выявления антител к ВИЧ-1 и/или ВИЧ-2 в сыворотках людей" ("Operational characteristics of commercially available assays to determine antibodies to HIV-1 and/or HIV-2 in human sera"), которые можно получить из Отдела безопасности крови ВОЗ (Blood Safety Unit, World Health Organization, 1211 Geneva 27, Switzerland). Эти результаты подтверждают, что современные простые/быстрые тесты практически не уступают по качеству и надежности традиционному ИФА. Естественно, что из-за чрезмерной простоты методики простые/быстрые тесты обычно позволяют выявлять ВИЧ-сероконверсию на несколько дней позже, чем стандартный ИФА, однако в большинстве случаев эти различия не имеют принципиального значения. Правда, этот недостаток простых/быстрых систем может играть определенную роль там, где заболеваемость ВИЧ-инфекцией сравнительно высока. В таблице 1 суммированы некоторые свойства, влияющие на выбор наиболее подходящих тест-систем в специфических ситуациях.

Что же касается использования в полевых условиях, то было доказано, что результаты, получаемые с помощью простых/быстрых тестов, не уступают по точности результатам стандартного ИФА, а в ряде случаев - даже превосходят их.

Хотя стоимость одного исследования при использовании простых/быстрых тестов может быть выше, чем стоимость одного анализа в традиционном планшетном ИФА, при необходимости исследования небольшого числа образцов использовать эти тест-системы оказывается даже выгоднее, чем стандартный ИФА. В последнем случае большое число лунок нередко остается неиспользованным, поэтому при правильной оценке всех расходов с учетом специфичности, надежности и воспроизводимости получаемых результатов применять простые/быстрые тесты оказывается дешевле, чем стандартный ИФА.

Где и когда использовать простые/быстрые тесты

Передача ВИЧ в результате гемотрансфузий может быть практически полностью исключена путем тотального скрининга всех образцов донорской крови. В индустриальных странах, где осуществляется тщательный контроль всей донорской крови, и, кроме того, взятие крови производится от кадровых доноров, не относящихся к группам повышенного риска по ВИЧ/СПИДу, "остаточный риск" передачи ВИЧ через кровь связан только с периодом "окна" у ВИЧ-инфицированных доноров. Однако во многих развивающихся странах различные факторы (например, отсутствие современного лабораторного оборудования, нерегулярное поступление тест-систем, технические ошибки, низкая квалификация лабораторных работников и др.) могут сыграть большую роль в получении ошибочных результатов тестирования и, следовательно, иметь существенное значение в возникновении случаев посттрансфузионной ВИЧ-инфекции.

Методы скрининга донорской крови должны быть высоко чувствительными, чтобы иметь возможность выявлять наличие ВИЧ-инфекции как можно раньше (т.е. как бы "сократить" продолжительность "периода окна") и определять антитела к различным типам и вариантам ВИЧ-1 и ВИЧ-2. Кроме того, эти методы должны быть достаточно специфичными, чтобы избежать ненужных потерь крови из-за ложноположительных результатов теста. Ведь в соответствии с действующими рекомендациями по безопасности крови и ее препаратов каждый образец донорской крови, при тестировании которого получены положительные или сомнительные результаты, должен быть уничтожен.

В индустриальных, а в ряде случаев - и в развивающихся странах службы переливания крови централизованы, поэтому ежедневно приходится тестировать огромное количество образцов донорской крови для предупреждения передачи ряда инфекций. В такой ситуации оптимальным является ИФА с использованием автоматических или полуавтоматических систем, так как современные тест-системы в значительной мере "сокращают период окна", а автоматизация уменьшает число технических ошибок.

Во многих странах с ограниченными ресурсами службы переливания крови функционируют независимо на базе отдельных больниц, поэтому кровь у доноров берут только при возникновении соответствующей потребности и не имеют запасов донорской крови. Многие медицинские учреждения, расположенные в сельской местности, получают от национальных программ борьбы со СПИДом сравнительно большое количество тест-систем для ИФА, чтобы обеспечить потребности в тестировании в течение определенного времени. Поскольку в таких условиях одномоментно тестируется небольшое число образцов донорской крови, значительная часть лунок на планшете для титрования не используется, что приводит к огромным потерям тест-систем и, в конечном итоге, к их нехватке. Лаборатории нередко оснащены недостаточно, оборудование устарело и плохо функционирует, персонал не имеет хорошей подготовки. Из-за нехватки или нерегулярности поставок тест-систем, а также из-за недостатка времени (кровь у доноров здесь берут именно в ургентных ситуациях) скрининг донорской крови на ВИЧ-инфекцию проводится далеко не всегда. Учитывая эти обстоятельства, можно сказать, что использование простых/быстрых тестов позволит существенно улучшить ситуацию в службе переливания крови. Это обеспечит более эффективное применение тест-систем в учреждениях, где работают с небольшими объемами донорской крови, а в экстренных ситуациях проверять кровь на ВИЧ-инфекцию непосредственно перед гемотрансфузией. Хотя применение простых/быстрых систем позволяет обследовать доноров перед кроведачей, такая практика не рекомендуется, так как она приведет к увеличению числа "доноров", желающих проверить свой ВИЧ-статус за счет службы переливания крови. Такие доноры представляют определенную угрозу безопасности гемотрансфузий, так как скорее всего они будут представителями групп повышенного риска по ВИЧ-инфекции. Кроме того, такое предварительное обследование доноров может оттолкнуть от сдачи крови именно кадровых доноров, которые сдают кровь добровольно и безвозмездно и тем самым повышают безопасность гемотрансфузий.

Эпиднадзор

В большинстве случаев для осуществления эпиднадзора используют большое количество образцов, собранных в течение определенного времени. Так как в этом случае нет необходимости в срочном получении результатов, образцы можно достаточно долго хранить и затем исследовать большими партиями. В зависимости от числа образцов и организации системы эпиднадзора, для тестирования образцов можно использовать как стандартный ИФА, так и простые/быстрые тесты.

Для обследования специфических "труднодостижимых" групп населения (например, внутривенных наркоманов или "коммерческих секс-работников"), а также при проведении исследований в отдаленных районах, где тестирование нужно выполнять непосредственно на местах, целесообразно использовать простые / быстрые тесты.

Диагностика ВИЧ-инфекции

В последнее время непрерывно возрастают потребности в проведении добровольного тестирования на ВИЧ-инфекцию с соответствующим до- и послетестовым консультированием, особенно в развивающихся странах. В столицах и крупных городах многих африканских и азиатских стран с высокой превалентностью ВИЧ-инфекции имеются центры для консультирования и добровольного тестирования (КДТ) на ВИЧ-инфекцию - как самостоятельные, так и при различных медицинских учреждениях. В то же время в небольших городах и в сельской местности таких центров КДТ мало. Одной из основных причин этого является отсутствие лабораторий и дефицит квалифицированного персонала. Появление простых/быстрых тестов позволит создать центры КДТ в сельской местности и в небольших городах, а также в антенатальной службе, где потребности в таких центрах будут постоянно расти в связи с новейшими возможностями предупреждения вертикальной передачи ВИЧ (см. "Wkly Epidemiol. Rec.", 1998, vol. 73, N 41, pp. 313-320).

Опыт работы центров КДТ показывает, что по разным причинам (неуверенность в сохранении конфиденциальности, неверие в возможности последующего лечения и др.) значительная часть посетителей (до 50%) в дальнейшем не обращаются повторно, чтобы узнать свои результаты тестирования на ВИЧ-инфекцию. Гораздо чаще не приходят за своими результатами не серонегативные клиенты, а именно те, у кого вероятность наличия ВИЧ-инфекции наиболее высока - и это совсем не случайно!

Люди, обратившиеся в центры КДТ, должны иметь возможность сделать свой выбор в отношение тестирования. Если они пришли к выводу о необходимости проверки, применение простых/быстрых тестов (результаты которых будут известны в тот же день) позволят снять многие вопросы, что в конечном счете будет способствовать значительному повышению эффективности работы таких центров. Более того, быстрое получение результатов тестирования поможет сразу же ими воспользоваться для интегрирования посетителя в систему медицинской и психологической помощи; при этом не требуется особой подготовки персонала и можно провести немедленное послетестовое консультирование.

Разработка и внедрение новейшей антиретровирусной терапии и других относительно недорогих мероприятий для снижения частоты вертикальной передачи ВИЧ требует быстрого расширения сети центров КДТ. В странах, где женщины по традиции обращаются в антенатальные учреждения на поздних сроках беременности, использование простых/быстрых тестов позволит сократить интервал между тестированием на ВИЧ-инфекцию и началом проведения соответствующих мероприятий.

Этические аспекты

Независимо от того, используется ли для тестирования стандартный ИФА или простые/быстрые тесты, этические принципы должны быть одинаковыми. Теститрование на ВИЧ-инфекцию, как и на любую другую инфекцию, должно осуществляться только при наличии информированного согласия обследуемого человека и с обязательной гарантией конфиденциальности результатов исследования. Обязательное тестирование на ВИЧ может быть оправдано только при проверке донорской крови. Тем не менее доноры должны быть обязательно предупреждены о том, что их кровь будет исследована на ВИЧ-инфекцию и другие инфекции. Очень важно, чтобы все первоначально положительные результаты были обязательно подтверждены и чтобы эти пациенты были направлены в соответствующие медицинские службы.

Заключение

В настоящее время существует множество вариантов простых /быстрых тестов на ВИЧ. Из-за технических проблем они могут быть несколько менее чувствительными по сравнению с ИФА, однако в то же время их достоинства "перевешивают" этот недостаток. ВОЗ рекомендует применять надежные простые/быстрые тесты там, где они имеют преимущества по сравнению с традиционным ИФА. [Weekly Epidemiological Record, 1998, 73, 42, 321-326].

ПРИКАЗ

30 июля 2001 г.

N 292

ОБ ИСПОЛЬЗОВАНИИ ИММУНОФЕРМЕНТНЫХ ТЕСТ-СИСТЕМ ДЛЯ

ВЫЯВЛЕНИЯ АНТИТЕЛ К ВИЧ В СЫВОРОТКЕ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА

В целях обеспечения повышения качества лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции, в период с 1 марта по 31 мая 2001 года были проведены сравнительные испытания диагностических иммуноферментных тест-систем, предназначенных для выявления антител к ВИЧ в сыворотке крови человека.

В ходе проведенных испытаний было установлено, что качество диагностических иммуноферментных тест-систем отечественного производства значительно улучшилось за счет повышения их чувствительности и специфичности.

В целях осуществления неотложных мер по предотвращению передачи ВИЧ при переливании крови и ее компонентов, трансплантации органов и тканей, повышения качества диагностики ВИЧ-инфекции при использовании диагностических иммуноферментных тест-систем и на основании заключения комиссии по организации и проведению сравнительных испытаний диагностических иммуноферментных тест-систем для выявления антител к ВИЧ в сыворотке крови человека приказываю:

1. Руководителям органов управления здравоохранением субъектов Российской Федерации:

1.1. Обеспечить проведение первичной лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции с помощью иммуноферментных тест-систем (Приложение N 1) . Для обследования доноров на станциях переливания крови использовать тест-системы, выявляющие одновременно антиген и антитела к ВИЧ.

1.2. Обеспечить проведение подтверждения результатов и арбитраж первичных исследований сывороток крови с помощью тест-систем (Приложение N 2) .

1.3. Для постановки окончательного лабораторного диагноза и подтверждения наличия антител к вирусу иммунодефицита человека методом иммунного блота использовать тест-системы (Приложение N 3) .

1.4. Обеспечить проведение лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции с помощью простых/быстрых тестов, в местах где отсутствует лабораторная база, только специально подготовленными медицинскими работниками, прошедшими обучение на базе территориальных Центров по профилактике и борьбы со СПИД.

1.5. Временно, до особого распоряжения, приостановить использование для лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции тест-системы, результаты сравнительного испытания которых оказались неудовлетворительными (Приложение N 4) .

1.6. Обеспечить силами Центров по профилактике и борьбе со СПИД проведение входного контроля качества, централизовано поставляемых тест-систем для выявления антител к ВИЧ с использованием для этого стандартных панелей сывороток, разрешенных к применению Минздравом России. О всех случаях выявления неудовлетворительного качества тест-систем незамедлительно информировать Минздрав России и Государственный институт стандартизации и контроля медицинских биологических препаратов им. Л.А.Тарасевича Минздрава России.

1.7. Исключить проведение повторных обследований методом иммунного блота лиц с установленным ранее диагнозом "ВИЧ-инфекция".

1.8. Принять меры по обеспечению сохранности сывороток ВИЧ-инфицированных сроком не менее одного года с момента постановки диагноза.

2. Департаменту государственного санитарно-эпидемиологического надзора:

2.1. Организовать следующее проведение испытаний тест-систем для выявления антител к ВИЧ в сыворотке крови человека, разрешенных к применению в Российской Федерации, в I квартале 2003 года, усовершенствовав их методику и организацию.

2.2. Использовать результаты проведения сравнительных испытаний при подготовке технических требований для проведения конкурсных закупок диагностических тест-систем на ВИЧ.

3. Государственному институту стандартизации и контроля медицинских биологических препаратов им. Л.А.Тарасевича Минздрава России:

3.1. Провести переаттестацию тест-систем, результаты испытания которых оказались неудовлетворительными (Приложение 4) и при необходимости оказать помощь предприятиям-производителям в их доработке. Результаты переаттестации представить в Минздрав России к 01.10.2001.

3.2. В срок до 01.12.2001 подготовить к изданию сборник:

"Результаты сравнительных испытаний диагностических тест-систем на антитела к ВИЧ, разрешенных к применению в Российской Федерации (1997-2001 годы)".

4. Главным государственным санитарным врачам в субъектах Российской Федерации:

4.1. Обеспечить осуществление постоянного контроля за использованием для диагностики ВИЧ-инфекции только тест-систем, разрешенных Минздравом России.

4.2. В случае выявления использования для диагностики ВИЧ-инфекции неразрешенных тест-систем принимать срочные меры по запрещению их использования и немедленно информировать Департамент госсанэпиднадзора Минздрава России и Государственный институт стандартизации и контроля медицинских биологических препаратов им. Л.А.Тарасовича Минздрава России.

4.3. Обеспечить постоянный контроль за транспортировкой и хранением тест-систем для выявления антител к ВИЧ в соответствии с требованиями санитарных правил СП 3.3.2.028-95 "Условия транспортировки и хранения медицинских иммунобиологических препаратов".

5. Считать утратившим силу приказ Минздрава России от 05.05.1999 N 153 "Об использовании иммуноферментных тест-систем для выявления антител к ВИЧ в сыворотке крови человека".

6. Контроль за выполнением настоящего приказа возложить на Первого заместителя Министра Г.Г.Онищенко

от 30.07.2001 г. N 292

ИММУНОФЕРМЕНТНЫХ ТЕСТ-СИСТЕМ, РЕКОМЕНДУЕМЫХ ДЛЯ ПРОВЕДЕНИЯ

ПЕРВИЧНОЙ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ ВИЧ-ИНФЕКЦИИ

Основные ссылки

Вы здесь

Soroka SD, Grenade TC, Phillips S, and Parekh B

Journal of Clinical Virology 27 (2003) pp.90-96

Оцениваемые продукты

Determine ВИЧ-1/2 (Abbott Laboratories)
Sero Strip ВИЧ-1/2 (Saliva Diagnostic Systems, Inc.)

Исследование выполнено в подразделении иммунологии и диагностики ВИЧ, отделение СПИДа Исследовательской лаборатории туберкулёза и заболеваний, передающихся половым путём, Национального центра по инфекционным заболеваниям, США.

Целью исследования было определение возможности двух простых быстрых тестов на ВИЧ (а) обнаруживать антитела на ВИЧ в пулированных пробах крови различного объёма; (б) выявлять недавнее инфицирование ВИЧ в пробах, содержащих образцы с сероконверсией; и (в) распознавать пробы, содержащие антитела к ВИЧ, так же, как это позволяют сделать стандартные серологические методы на проспективно собранных данных.

Аннотация

Вводная информация: использование пулированных проб было предложено в целях расширения контингента тестируемых на антитела к вирусу иммунодефицита человека в популяционных исследованиях и массовых анализах крови, сокращения затрат на лабораторные процедуры. Цели: разработать стратегический метод пулирования проб с использованием простых быстрых тестов на антитела к ВИЧ для выявления ВИЧ-положительных проб и оценки характеристик данного подхода по сравнению с коммерческими тестами, основанными на иммуноферментном анализе (ИФА) и вестерн-блоттинге (WB). План исследования: два иммунохроматографических быстрых теста для горизонтального проточного анализа, Sero Strip ВИЧ-1/2 и Determine ВИЧ-1/2, оценивались на способность выявлять антитела к ВИЧ-1 в образцах сыворотки и/или плазмы крови, объединённых в объёме от 2 до 20, согласно соответствующим протоколам производителей. Тысяча проспективно собранных образцов и 55 образцов, в которых имелась сероконверсия к ВИЧ, были объединены по 5 и подготовлены для анализа двумя простыми быстрыми тестами на ВИЧ. Результаты: оптимальное выявление и избирательность по отношению к образцам, содержащим или не содержащим антитела к ВИЧ-1, для обоих тестов наблюдались в пулированных смесях объёмом от 5 до 10 образцов. Способность двух быстрых тестов выявлять пробы, содержащие среди компонентов смеси антитела к ВИЧ-1 из коммерческих образцов с вызванной ВИЧ-1 сероконверсией, была равноценна возможностям коммерческих систем ИФА и вестерн-блоттинга выявлять антитела к ВИЧ-1 в несмешанных образцах. Применение метода пулирования к проспективно собранным пробам дало отличное соответствие с результатами ИФА/вестерн-блоттинга как по чувствительности (98,88% для Sero Strip ВИЧ-1/2, 100% для Determine ВИЧ-1/2), так и по специфичности (99,56% для Sero Strip ВИЧ-1/2, 99,45% для Determine ВИЧ-1/2). Вывод: Применение стратегии пулирования для каждого из испытанных методов уменьшило число требуемых тестов почти на 50% и позволило значительно сократить расходы на скрининг ВИЧ в условиях, где распространённость ВИЧ не превышает 10%.

Результаты

Анализ проспективно собранных образцов тестами Sero Strip ВИЧ-1/2 и Determine ВИЧ-1/2

Пулированные пробы, содержащие антитела к ВИЧ-1

Отдельные пробы, содержащие антитела к ВИЧ-1