Тест на хеликобактер ама

часто задаваемые вопросы

Что делать, если после первой части обследования (до приема раствора карбамида) трубка посинела на несколько сантиметров, так что для второй части обследования уже не остается места?
— Используйте для второй части обследования новую трубку.

Каков результат обследования, если величина базального уровня превышает величину нагрузочного уровня?
— В таком случае нельзя судить об инфицированности Helicobacter pylori, возможно имеет место несоблюдение требований из памятки пациенту.

После второй части обследования (проведенной после приема раствора карбамида) куда-то пропала/побледнела окраска первой части. Стало не с чем сравнивать вторую часть.
— Фиксировать результат первой части обследования надо сразу же, записав значение длины синего столбика. Если делать это уже после второй части обследования, то есть риск получить неверные данные, так как окраска индикаторной композиции не сохраняется.

Какая окраска слоя индикаторной композиции в трубке является значимой?
— Все оттенки синего, фиолетового, серого и зеленого являются допустимыми окрасками. Если слой индикаторной композиции в трубке остался желтым или розовым, то такую окраску не следует считать значимым изменением цвета.

Каков порядок дезинфекции шланга, соединяющего индикаторную трубку с компрессором?
— Снимите шланг, промойте в проточной воде, затем погрузите его в 1% раствор лизофина на 1 час, после чего промойте в проточной воде и наденьте на штуцер компрессора.

АННОТАЦИЯ

ABSTRACT

Ключевые слова: Helicobacter pylori, селективный уреазный тест, индикаторная бумага для выявления микроорганизмов, диагностика Helicobacter pylori.

Keywords: Helicobacter pylori, selective urease test, indicator paper for the detection of microorganisms, Helicobacter pylori detection.

Введение

Helicobacter pylori играет решающую роль в возникновении и рецидивировании язвенной болезни с локализацией дефекта в двенадцатиперстной кишке или желудке, а также в возникновении Н. рylori -индуцированного гастрита, МАЛТ-лимфомы желудка. Эрадикация Н. рylori приводит к существенному снижению уровня рецидивирования язвенной болезни, улучшению состояния слизистой при хроническом гастрите, прерывая цепь событий в канцерогенезе желудка, способствует гистологической ремиссии на ранних стадиях МАЛТ-лимфомы желудка. Доказана роль Н. рylori при необъяснимой железодефицитной анемии и тромбоцитопенической пурпуре.

Согласно положениям консенсуса Маастрихт V (Флоренция, 2015 г.), посвященным вопросам диагностики и лечения инфекции H. pylori, пациентам, которым показана фиброгастродуоденоскопия (ФГДС), рекомендуется дополнять исследование быстрым уреазным тестом для определения наличия инфекции H. pylori [15]. При этом отмечается, что важна именно точность положительного результата, так как именно в этом случае должно быть лечение назначено, а отрицательный результат должен быть подтвержден другими методами. Давая эти рекомендации, авторы говорят о высоких показателях чувствительности и специфичности, ссылаясь на работы, посвященные гелевым тестам, в том числе самому известному – CLO-test [18, 10, 21]. Специфичность определения в гелевых тестах обеспечивается использованием консервантов и буферов [9], которые, повышая точность определения, замедляют реакцию. Однако при хороших диагностических показателях этот тест характеризуется долгим временем срабатывания – до 24 часов, что ограничивает его использование в качестве экспресс-теста. На смену медленным гелевым тестам на мировом рынке появились более быстрые сухие селективные тесты [22, 17]. В таких тестах высокая специфичность обеспечивается механическим разделением слоев с карбамидом и индикатором [20, 24, 19]. Это разделение необходимо для защиты от нецелевых срабатываний и обеспечения достоверности положительного результата.

Переход от гелевой формы к сухой позволил уменьшить время проведения быстрого уреазного теста при одновременном повышении диагностической специфичности и сохранении высокой чувствительности определения инфекции. В исследовании [12] сравнили диагностические характеристики четырех тестов: гелевых CLO-test (США) и HelicotecUT (Тайвань) с селективными HelicotecUTPlus (Тайвань) и ProntoDry (Франция), показатели диагностической эффективности составили: чувствительность (97,0%; 95,5% и 98,5%; 97,0%), специфичность (94,0%; 94,7% и 92,5%; 91,7%). В другом исследовании при сравнении селективного ProntoDry и гелевого CLO-test селективный тест имел преимущество по чувствительности: 93% против 86,2% у CLO-test [22].

Материалы и методы

Критериями исключения были: прием ингибиторов протонной помпы, антибактериальных препаратов, висмут-содержащих препаратов в течение 4 недель до тестирования на H. pylori; отказ от выполнения любой из процедур исследования.

Для определения диагностической эффективности рассматриваемых методов определения уреазной активности пациентам, включенным в исследование, проводили процедуру с забором двух биоптатов антрального отдела и двух биоптатов из тела желудка, далее проводили определение уреазной активности индикаторной бумагой и селективным тестом, после чего биологический материал помещали в пробирки, кодированные специальной маркировкой XXXYZ, где XXX – номер пациента, Y – обозначение отдела, откуда был взят биоптат, каждая пробирка содержала 10%-ный формалин. Препараты подвергали окраске с гематоксилином и эозином с оценкой наличия Helicobacter pylori квалифицированным патоморфологом.

В качестве положительного результата фиксировались все синие окрашивания вне зависимости от того, в какой временной интервал от 0 до 4 минут появилось изменение цвета.

Определение уреазной активности Helicobacter pylori экспресс-тестом AMA RUT

Оценка диагностической эффективности

Результаты и обсуждение

В исследовании принял участие 101 пациент в возрасте от 18 до 88 лет, из них 54 женщины и 47 мужчины. Средний возраст пациентов составил 53,1±12,7 года. По результатам исследования у пациентов были выявлены следующие заболевания: хронический гастрит – 47 человек, язвенная болезнь двенадцатиперстной кишки – 6 человек, язвенная болезнь желудка – 2 человека, функциональная диспепсия – 31 человек, гастроэзофагеальная рефлюксная болезнь – 15 человек.

Избыточное количество положительных результатов индикаторной бумаги могло бы быть объяснено некорректной оценкой результата, однако по фотографиям, представленным в табл. 1 и табл. 2, видно, что изменения цвета индикаторной бумаги при отрицательной гистологии внешне не отличались от срабатываний на фоне гистологически подтвержденного присутствия бактерии в биоптате.

Таблица 1.

Пример окрашиваний индикаторной бумаги: последующее гистологическое исследование подтвердило отсутствие Helicobacter pylori в биоптатах

* – код биоптата для передачи на гистологическое исследование.

Таблица 2.

Пример окрашиваний индикаторной бумаги: последующее гистологическое исследование подтвердило наличие бациллярных форм Helicobacter pylori в биоптатах

* – код биоптата для передачи на гистологическое исследование.

Изменение окраски индикатора в щелочную форму в случае, если биоптат непосредственно контактирует с индикатором, может быть вызвано с физиологическими причинами в самом биоптате: на фоне различных факторов рН слизистого эпителия желудка in vitro в среднем варьируется от 6,0 до 7,2 , при этом граница перехода окраски бромтимолового синего, по документам производителя, использующегося в тестах, начинается с 6,5. Кроме того, на ложность результата могут повлиять щелочные агенты, попавшие на биоптат: желчь (рН > 7) [16], продукты реакции автолиза клеток тканей желудка [13], лидокаин, широко применяющийся в форме спрея для местной анестезии, а также подкравливание биоптата (кровь в норме имеет щелочную реакцию) [5, 14].

Специфичность теста особенно важна для выбора правильной стратегии лечения в будущем, так как согласно рекомендациям после положительного быстрого уреазного теста необходимо назначить лечение, которое будет включать в себя антимикробные препараты. Избыточное назначение антибиотиков и связанный с ним рост антибиотикорезистентности является проблемой, которая, по мнению Всемирной организации здравоохранения, достигла мирового масштаба [8]. Актуальность кларитромициновой резистентности H. pylori настолько высока, что H. pylori была внесена в список приоритетных патогенов для изучения и развития новых антибиотиков [26].

Медицина XXI века – это точная медицина (Precision medicine) [25]. В такое понятие для проведения антихеликобактерной терапии входит соответствие правилу 5П: правильный пациент, правильный препарат, правильная доза, правильное время приема препаратов и правильная диагностика. Для выполнения последнего пункта необходимо использовать точные методы диагностики. Селективность AMA RUT Pro к уреазе Helicobacter pylori позволяет проводить определение бактерии с высокой специфичностью – 95% при сохранении чувствительности. Отсутствие реакции на уреазу других микроорганизмов, согласно инструкции, подтверждено микробиологической проверкой, специальная мембрана в конструкции теста предотвращает изменение цвета индикаторного элемента из-за щелочных агентов, не связанных с протеканием целевой реакции [3].

Вывод

Диагностику Helicobacter pylori необходимо проводить тестами, предназначенными для определения уреазы именно этой бактерии. Селективные тесты AMA RUT Pro показали высокие диагностические характеристики: специфичность – 95,5% и чувствительность – 97,6%, что приближается к данным, представленным в инструкции к тестам. Индикаторная бумага, предназначенная для быстрого определения уреазолитических факторов, при выявлении Helicobacter pylori в биоптатах продемонстрировала специфичность в 10,6%.

Информация об авторах:

ТЕСТ-СИСТЕМЫ ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ ХЕЛИКОБАКТЕРИОЗА

Тест-системы ХЕЛИК® и ХЕЛПИЛ® основаны на принципе биохимического метода определения инфекции Helicobacter pylori. Биохимический метод определення инфекций Helicobacter pylori основан на чрезвычайно высокой активности фермента уреазы этой бактерии, способной быстро гидролизовать карбамид. Образующийся в процессе гидролиза мочевины аммиак может быть основой для биохимической идентификации хеликобактера. Метод основан на оценке уреазной активности іn vitro в биоптате — быстрый уреазный тест — ХЕЛПИЛ-тест, и іn vivo в выдыхаемом воздухе — дыхательный нагрузочный ХЕЛИК-тест.

Описание метода

ХЕЛИК ® – нагрузочный метод. Принцип его действия основан на биохимическом методе определения инфицированности бактерией Нр по её уреазной активности, а именно – по способности уреазы гидролизовать карбамид. Пациент принимает раствор карбамида, и образующийся в ходе гидролиза газ поступает в воздух ротовой полости. В ходе тестирования сравниваются уровни содержания газа, образующегося в ходе гидролиза карбамида (нагрузки), с базальным, исходным уровнем содержания этого газа в полости рта пациента.

Из всех возможных уреазопродуцентов только Нр проявляет столь высокую уреазную активность, в следствие которой карбамид гидролизуется исключительно быстро. Этим и обусловлена высокая специфичность (97%) нагрузочного метода.

В реакции с ХЕЛПИЛ-тестом участвует уреаза, содержащаяся в биоптате на момент проведения ФГДС. В результате диск может поменять цвет на синий, что свидетельствует о высокой уреазной активности биптата и позволяет судить о присутствии в нем Helicobacter pylori .

Диагностика стала проще!

Представляем Вашему вниманию тест-системы, проводимые in vivo и in vitro, позволяющие провести быструю специфическую диагностику инфекции Helicobacter pylori. Разработанный комплекс методик включает в себя как инвазивную методику для определения уреазной активности биоптата (тест-система ХЕЛПИЛ®), так и неинвазивную методику для оценки уреазной активности Helicobacter pylori по метаболитам в выдыхаемом воздухе (тест-система ХЕЛИК®).

Особенности ХЕЛИК-теста

Неинвазивная диагностика инфекции Helicobacter pylori по составу выдыхаемого воздуха

Предназначены для первичной диагностики Helicobacter pylori и проверки эффективности уже проведенной терапии.

Тестирование без привлечения лаборатории

Применим в практике врачей-гастроэнтерологов, терапевтов, педиатров и семейных врачей

Безопасен для детей и беременных женщин, поскольку используется карбамид нормального изотопного состава

Позволяет получить результат сразу по окончании обследования

Не требуется транспортировка дыхательных проб

Результаты не зависят от возраста и физической активности пациента

Реализован в компактных и переносных тест-системах

Показания к применению метода

Благодаря применению индикатора с несколько меньшим значением перехода (от 6,0 до 7,6), ХЕЛПИЛ-тест позволяет зафиксировать в реакционной среде меньшее количество аммиака, а значит, и меньшее количество уреазы. По чувствительности и специфичности он не уступает Де-Нол-тесту. К тому же, его применение сокращает время исследования до трех минут. (Для сравнения: при использовании Де-Нол-теста исследование занимает час, а при использовании других тестов — сутки.)

Еще одно несомненное достоинство ХЕЛПИЛ-теста — возможность дальнейшего использования биоптата для гистологического, бактериологического или бактериоскопического исследования. (Обладая капиллярными свойствами, твердый носитель, не окрашивая и не меняя структуры самого биоптата, просто абсорбирует из него жидкость.) Такими свойствами не обладает ни один из существующих ныне уреазных тестов.

Тест система ХЕЛИК® является быстрым и надежным способом диагностики НР. Он прост в использовании, информативен, позволяет получить результат уже в ходе исследования. Данный тест показал высокую чувствительность (95%) и специфичность (97%).

Дыхательный тест основан на кинетической оценке концентрации аммиака в выдыхаемом воздухе после приема порции мочевины обычного изотопного состава. Уреаза Helicobacter pylori гидролизует принятую мочевину, вызывая усиленное образование аммиака.

ХЕЛИК-тест – это неинвазивная дыхательная диагностика инфекции хеликобактер пилори (Helicobacter pylori). Применим в практике врачей-гастроэнтерологов, терапевтов, педиатров и семейных врачей. Дыхательный тест ХЕЛИК предназначен для первичной диагностики хеликобактер пилори, а также для контроля хода антихеликобактерной терапии и проверки эффективности уже проведенной терапии.

Принцип действия ХЕЛИК-теста основан на биохимическом методе определения инфицированности бактерией хеликобактер пилори по ее уреазной активности, т.е. по способности гидролизовать карбамид. Пациент принимает раствор карбамида, и образующийся в ходе гидролиза газ поступает в воздух ротовой полости. Нагрузочный метод основан на сравнении уровня содержания газа, образующегося в ходе гидролиза карбамида (нагрузки), с базальным, исходным уровнем содержания этого газа. Из всех возможных уреазопродуцентов только хеликобактер пилори проявляет столь высокую уреазную активность, вследствие которой быстро гидролизуется карбамид. Для каждого пациента сравнивается его базальный уровень с его же нагрузочным уровнем, за счет чего метод ХЕЛИК и обеспечивает высокую точность диагностики Helicobacter pylori.

ХЕЛИК-тест реализован в компактных и переносных тест-системах, в отличие от большинства UBT-тестов, которые требуют стационарного и дорогостоящего масс-спектрометра или сложное инфракрасное/лазерное оборудование.

Что такое ХЕЛИК-тест?

ХЕЛИК-тест - это неинвазивная дыхательная диагностика инфекции хеликобактер пилори (Helicobacter pylori). Применим в практике врачей-гастроэнтерологов, терапевтов, педиатров и семейных врачей. Дыхательный тест ХЕЛИК предназначен для первичной диагностики хеликобактер пилори, а также для контроля хода антихеликобактерной терапии и проверки эффективности уже проведенной терапии.

Нагрузочный метод ХЕЛИК

Принцип действия ХЕЛИК-теста основан на биохимическом методе определения инфицированности бактерией хеликобактер пилори по ее уреазной активности, т.е. по способности гидролизовать карбамид. Пациент принимает раствор карбамида, и образующийся в ходе гидролиза газ поступает в воздух ротовой полости. Нагрузочный метод основан на сравнении уровня содержания газа, образующегося в ходе гидролиза карбамида (нагрузки), с базальным, исходным уровнем содержания этого газа. Из всех возможных уреазопродуцентов только хеликобактер пилори проявляет столь высокую уреазную активность, вследствие которой быстро гидролизуется карбамид. Для каждого пациента сравнивается его базальный уровень с его же нагрузочным уровнем, за счет чего метод ХЕЛИК и обеспечивает высокую точность диагностики Helicobacter pylori.

ХЕЛИК и другие дыхательные тесты на хеликобактер

• ХЕЛИК-тест реализован в компактных и переносных тест-системах, в отличие от большинства UBT-тестов, которые требуют стационарного и дорогостоящего масс-спектрометра или сложное инфракрасное/лазерное оборудование;
• ХЕЛИК-тест безопасен даже для маленьких детей и беременных женщин, поскольку используется карбамид нормального изотопного состава, в отличие от других тестов, где используется изотоп С13 или радиоактивный изотоп С14;
• ХЕЛИК-тест позволяет получить результат сразу по окончании обследования, в отличие от других дыхательных тестов, где приходится ждать, пока придут результаты проб;
• ХЕЛИК-тест позволяет проводить обследование (point-of-care diagnostics) и сразу получить сведения о текущем состоянии пациента, в отличие от С13 или С14 тестов, при которых сначала берут пробы выдыхаемого воздуха, потом доставляют их к оборудованию для анализа, и только после этого узнают результат на тот день, когда брались пробы (отсроченный результат);
• с ХЕЛИК-тестом не требуется транспортировка дыхательных проб, а значит исключается вероятность потери данных, которая есть при использовании других тестов;
• результаты ХЕЛИК-теста не зависят от возраста и физической активности пациента, в отличие от углеродных дыхательных тестов 13С или 14С;
• ХЕЛИК-тест доступнее в цене, карбамид (он же мочевина) нормального изотопного состава значительно дешевле, чем меченная мочевина для UBT-теста с 13С или 14С;
• тест-системы ХЕЛИК производятся в России с 1997 года и применяются уже более чем в 400 российских городах, в отличие от импортных тестов, которые мало распространены.

Тест-системы ХЕЛИК

Что общего у тест-систем ХЕЛИК

• диагностика Helicobacter pylori по составу выдыхаемого воздуха, без привлечения лаборатории;
• в качестве нагрузки пациент принимает раствор 0,5 г карбамида фармацевтической степени чистоты и нормального изотопного состава;
• отбор воздуха из ротовой полости производится автоматически, усилие пациента не требуется;

Чем различаются тест-системы ХЕЛИК:

Разрешительная документация ХЕЛИК-теста

ХЕЛИК – зарегистрированная торговая марка, права принадлежат ООО "Ассоциация Медицины и Аналитики". Любое использование товарного знака ХЕЛИК возможно только с разрешения правообладателя или с ссылкой на него. Пройти ХЕЛИК-тест можно в "Семейной гастроклинике АМА"

Публикации об опыте применения тест-систем ХЕЛИК

Внимание! Сайт собираете метаданные пользователя (cookie, данные об IP-адресе и местоположении), если вы не хотите предоставлять эту информацию, то вам необходимо покинуть сайт.

Aim. To evaluate the motivation and effectivity of quick urease in endoskopy. One of commom fields of interaction endoscopists and gastroenterologists is detection of Heelicobacter pylori/ The correlation between 3 Quick urease tests and histological metod were tested. The best and worst were detected/ Official limitation of breath tests were displayed/

Keywords: endoscopy, urease, breath, tests.

Плисс Михаил Михайлович

Врач-эндоскопист Спб ГУЗ Клиническая больница Святителя Луки. 194144, Чугунная, 46. Тел.: 78122956088 email: Этот адрес электронной почты защищен от спам-ботов. У вас должен быть включен JavaScript для просмотра.

• содержащего мочевину геляносителя консерванта и фенолового красного , используемого в качестве индикатора рН, который при сдвиге рН среды в щелочную сторону меняет свой цвет от желтого к малиновому. Сдвиг рН происходит в том
случае, если под действием хеликобактерной или иной уреазы происходит гидролиз мочевины с образованием аммиака.
В качестве источника хеликобактерной уреазы используются биоптаты слизистой оболочки, которые помещают в луночку специальной плашки из синтетического материала, заполненную готовой гелевой средой. Это тип теста выпускается финской фирмой BIOHIT OY. Этот тест был нами исследован наряду с двумя другими, но уже сухими уреазными экспресс тестами Геликобактер тест (ООО НИИ ИТиМ, СПб) и Хелпил тест (ООО АМА, Спб). Тесты представляют собой целлюлозные носители, пропитанные патентованными смесями мочевины, индикаторов рН и специальными добавками и фиксированные к подложке. Появление иного, чем исходного, цвета индикатора свидетельствует о наличии в биоптате микробных тел. К сожалению, строго говоря, ни один из быстрых уреазных тестов не является и не может быть селективным к H pylori , они лишь имеют специфичность к уреазе, а она вырабатывается целым рядом микроорганизмов, обнаруживаемых в организме человека. (H.Helmаnii, P mirabilis, P vulgaris, P.stuartii и пр)
Многие из них не могут существовать в кислой среде, однако при понижении рН способны колонизировать ткани. В связи с этим обнаружение позитивности быстрого уреазного теста и существование H pylori в зоне анализа является в значительной степени умозрительным и косвенным без подтверждения иными средствами анализа с Золотым стандартом идентификации H pylori является гистологический метод исследования, который позволяет обнаружить Нр в биоптатах и одновременно изучить морфологические изменения, происходящие при этом в слизистой оболочке. Наиболее простым и доступным методом является окраска гистологических препаратов по Романовскому- Гимза Хеликобактер пилори окрашивается в темно-синий цвет, бактерии хорошо видны как на поверхности эпителия, так и в глубине ямок.
Для оценки состояния слизистой оболочки и обнаружения Нр достаточно 2-3 биоптатов (из антрального отдела и тела желудка), хотя есть рекомендации увеличивать их количество до 5. В литературе много работ, посвященных анализу эффективности уреазных тестов в группах сравнения с дыхательными, иммуноферментными, ПЦР и иными методами. Следует отметить, что любой экспресс-метод имеет свой диапазон достоверности не равный 100% , поэтому мы считаем, что сра внивать рационально только сходные методики с абсолютным контролем.

Материалы и методы. Для проведения сравнительного анализа нами в 3 независимых клиниках в ходе стандартной ФГДС проводился анализ уреазной активности 4 биоптатов из рекомендованных зон различными тестами (Геликобактер тест (ООО НИИ ИТиМ), Хелпилтест (ООО АМА) и Helicobacter pylori quick test BIOHIT OY) с последующей идентификацией микроорганизма гистологической окраской. Представленные результаты являются первым фрагментом проводимого исследования.
Всего было обследовано 50 пациентов — 23 мужчин в возрасте от 41 до 63 лет и 27 женщин в возрасте от 21 до 72 лет. У всех пациентов в процессе ФГДС определяли уреазную активность 4 биоптатов — тела желудка, 12 п кишки и 2 биптата
привратника. Проводилось определение уреазной активности биоптата вышеперечисленными тестами в случайной последовательности. При этом каждые 60 биоптатов анализировалось одним типом уреазного теста Далее биптаты передавали на гистологическое исследование с окраской гематоксилин — эозин и Романовскому Гимза для выявления Хеликобактер пилори. Таким образом, было проанализировано 200 биоптатов. Фокусом интереса была частота ложнопозитивных и ложнонегативных результатов (при гистологической верификации бактерии или ее отсутствия).

Литература
1. Маев И.В., Рапопорт С.И., Гречушников В.Б., Самсонов А.А., Сакович Л.В., Афонин Б.В., Айвазова Р.А. Диагностическая значимость дыхательных тестов в диагностике инфекции Helicobacter pylori // Клиническая медицина. 2013. № 2. С. 29–33.
2. Янушевич О.О., Маев И.В., Айвазова Р.А., Cамсонов А.А., Гречушников В.Б., Сакович Л.В. Комплексное обследование пациентов с сочетанной хеликобактерной патологией ЖКТ, пародонта и сл. оболочки рта // Здоровье и образование в XXI в. 2013. Т. 15. С. 61–63.
3. Янушевич О.О., Маев И.В., Cамсонов А.А Айвазова Р.А., ., Гречушников В.Б., Айвазова Р.А Сакович Л.В. Дыхательные тесты в диагностике HELICOBACTER PYLORI // Здоровье и образование в XXI в. 2013. Т. 15. V1-4 С. 252-257

Читайте также:

• Дифтерия гортани дифференциальная диагностика с ложным крупом
• Рожа лечение пенициллином и бициллином
• Стрептококк в мазке из зева 10 в 6 степени
• Стрептококки в бактериологическом посеве
• Чем лечить горло от стрептококковой инфекции

Пожалуйста, не занимайтесь самолечением!
При симпотмах заболевания - обратитесь к врачу.