Диагностика классической чумы свиней госты
Текст ГОСТ 25754-83 Животные сельскохозяйственные. Методы лабораторной диагностики классической чумы свиней
ЖИВОТНЫЕ
СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫЕ
МЕТОДЫ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ КЛАССИЧЕСКОЙ ЧУМЫ СВИНЕЙ
ГОСТ 25754—83 (СТ СЭВ 3453-81)
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР ПО СТАНДАРТАМ
РАЗРАБОТАН Министерством сельского хозяйства СССР ИСПОЛНИТЕЛИ
Э. В. Ивановский, Н. К. Мищенко, Н. Д. Насокина
ВНЕСЕН Министерством сельского хозяйства СССР
Член Коллегии А. Д. Третьяков
УТВЕРЖДЕН И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Постановлением Государственного комитета СССР по стандартам от 22 апреля 1983 г. № 2017
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ СОЮЗА ССР
Методы лабораторной диагностики классической чумы свиней
Agricultural animals. Methods* of laboratory diagnostics of classical pig-plague
Постановлением Государственного комитета СССР по стандартам от 22 апреля 1983 г. № 2017 срок действия установлен
с 01.07.84 до 01.07,89
Несоблюдение стандарта преследуется по закону
Настоящий стандарт устанавливает методы лабораторной диагностики классической чумы свиней.
Стандарт применяют при диагностике заболеваний животных в лабораториях ветеринарных научно-исследовательских учреждений.
Стандарт полностью соответствует СТ СЭВ 3453—81.
1. ГИСТОЛОГИЧЕСКИЙ МЕТОД
Сущность метода заключается в обнаружении специфических патолого-гистологических изменений нервных тканей в специально подготовленных срезах.
1.1. Метод отбора проб
1.1.1. Для проведения исследования от павших или убитых свиней берут полушария большого мозга с частями коры, мозжечок, аммоновые рога, спинной мозг в различных участках ствола.
1.2. Аппаратура, материалы и реактивы
1.2.1. Для проведения исследования применяют:
термостат с температурой нагрева 58 °С;
микротом для приготовления срезов в парафине;
микроскоп биологический по ГОСТ 8284—78;
пластинку нагревающую на 40°С;
парафин с точкой плавления от 56 до 58 °С по ГОСТ 23683—79; book пчелиный по ГОСТ 21179—75; формалин по ГОСТ 1625—75; кальций хлористый по ГОСТ 4460—77; кадмий хлористый по ГОСТ 4330—76; спирт этиловый абсолютный; спирт этиловый 96 %-ный по ГОСТ 5962—67; бензол по ГОСТ 5955—75 или ксилол, или толуол по ГОСТ 5789—78;
гематоксилин кристаллический; эозин;
кислоту фосформолибденовую; бальзам канадский;
воду дистиллированную по ГОСТ 6709—72.
1.3. Подготовка к исследованию
1.3.1. Отобранные пробы фиксируют по Бейкеру. Для этого готовят раствор следующего состава:
хлористый кальций — 1 г; хлористый кадмий — 1 г;
10 %-ный формальдегид или формалин— 10 см 2 3 ; дистиллированная вода— 100 см 3 .
1.3.2. Фиксированные пробы обрабатывают путем подготовки срезов, включенных в парафин (см. обязательное приложение 1) или путем подготовки срезов при помощи гистокриотома.
1.3.3. Для окрашивания гистологических препаратов используют метод окрашивания гематоксилином (см. обязательное прило-* жение 2).
1.4. Проведение исследования
1.4.1. Подготовленные и окрашенные срезы просматривают под микроскопом.
1.5. Обработка результатов
1.5.1. Гистологические изменения, выражающиеся в наличии воспаления, диапедизиальных кровоизлияний, васкулярного эндо-телита, мукоидного фирбиозного и гиалинового перерождения стенок сосудов, а также лимфогистиоцитарного энцефаломиэлита в первичной ткани, характерны при заболевании чумой.
2. МЕТОД ПРЯМОЙ ИММУНОФЛЮОРЕСЦЕНЦИИ
2.1. Метод отбора проб
2.1.1. Для проведения исследования берут миндалины, селезенку, почки, легкие, лимфатические узлы (мезентариальные и подчелюстные), красный костный мозг и кровь.
Пробы органов и тканей берут от павших животных не позднее 8 ч после гибели, от больных и подозреваемых в заболевании животных— сразу после убоя. Кровь берут от больных и подозревае-вых в заболевании животных.
2.2. Аппаратура и реактивы
2.2.1. Для проведения исследования применяют: микроскоп люминисцентный;
центрифугу с частотой вращения 5000 об/мин; шприцы;
рефрижератор на минус 20 °С; нож термоэлектрический; стекла предметные по ГОСТ 9284—75; стекла покровные по ГОСТ 6672—75; ацетон по ГОСТ 2603—79; глицерин по ГОСТ 6824—76;
раствор фосфатный буферный с pH 7,2; готовят следующим образом:
раствор А — в 1 дм 3 дистиллированной воды разводят 11,871 г двузамещенного фосфата натрия;
раствор Б — в 1 дм 3 дистиллированной воды растворяют 9,076 г однозамещенного фосфата калия. Смешивают 800 см 3 раствора А и 250 см 3 раствора Б;
раствор фосфатный буферный с pH 8,0; готовят следующим образом:
смешивают приготовленные растворы А — 930 см 3 и Б — 70 см 3 . При приготовлении буферных растворов в каждом случае pH растворов проверяют потенциометром;
коньюгат флюоресцентный специфический; коньюгат флюоресцентный нормальный;
краситель Эванса, 0,25 %-ный раствор в буферном растворе.
2.3. Подготовка к исследованию
2.3.1. Из проб органов при помощи криотома, микротома или термоэлектрического ножа (при сильном замораживании) готовят срезы толщиной 5 мк, которые помещают на обезжиренные предметные стекла и высушивают в течение 30 мин при 4°С.
Из проб костного мозга и лейкоцитарного концентрата готовят мазки (см. обязательное приложение 3).
2.3.2. Препараты (срезы и мазки) фиксируют ацетоном в течение 10 мин при минус 20 °С или в течение 5—10 мин при комнат
ной температуре. После фиксации препараты высушивают на воздухе при комнатной температуре до полного испарения ацетона.
Фиксированные препараты допускается хранить в морозильнике при температуре не менее минус 20 °С в течение 6 мес.
2.3.3. Фиксированные препараты двукратно промывают фосфатным буферным раствором (pH 7,2), после чего оставляют их в растворе на 10 мин.
Увлажненные препараты допускается хранить до использования во влажной камере при 4°С в течение 3 дней.
2.3.4. Подготовленные препараты окрашивают методом контрастной иммунофлюоресценции.
Для этого приготовляют на фосфатном буферном растворе (pH 7,2) рабочие разведения специфического и нормального флюоресцентного конъюгата в соответствии с указаниями, нанесенными на этикетках препаратов. К полученным разведениям конъюгатов добавляют краситель Эванса в соотношении: 3 части коньюгата и 1 часть красителя.
Окрашивают следующие препараты:
три препарата, приготовленных из исследуемых проб; из них два препарата покрывают специфическим коньюгатом с красителем Эванса, а третий—(нормальным коньюгатом с красителем Эванса (контроль);
два препарата, приготовленных из органов свиней, не инфицированных вирусом чумы, покрывают специфическим коньюгатом с красителем Эванса (контроль).
Окрашенные препараты выдерживают в термостате в течение 30 мин при 37°С или в течение 12—18 ч при комнатной температуре.
Препараты двукратно промывают в фосфатном буферном растворе, после чего оставляют на 10 мин в свежей дистиллированной воде.
После частичного высушивания на воздухе препараты покрывают буферным глицерином (9 частей нефлюоресцирующего глицерина и 1 часть фосфатного буферного раствора с pH 8,0) и закрывают покровными стеклами.
При необходимости покровные стекла фиксируют парафином. Окрашенные препараты хранят при 4°С в течение 3—4 недель без потери специфической флюоресценции.
2.4. Проведение исследования
2.4.1. Препараты просматривают под люминисцентным микроскопом.
2.5. Обработка результатов
2.5.1. Специфическая флюоресценция характеризуется желтовато-зеленоватым и зеленоватым оттенками свечения цитоплазмы разных клеток (в зависимости от оптики и системы освещения).
Ядра клеток выглядят темными и не флюоресцируют. Фон препаратов имеет флюоресценцию красно-оранжевого цвета.
В срезах из селезенки и лимфатических узлов флюоресцирующие клетки рассеяны или сконцентрированы вокруг сосудов и синуса.
В препаратах из миндалин флюоресценция более ясная и выявляется в базальных клетках поверхностного эпителия и эпителия крипт.
В срезах почек специфическая флюоресценция устанавливается главным образом в различных клетках почечных и интерасциаль-ных поперечных срезов канальцев.
В мазках из красного костного мозга специфическая флюоресценция отличается большей яркостью, размером и количеством флюоресцирующих клеток.
Аналогичная флюоресценция выявляется в мазках из лейкоцитарного концентрата.
Специфическая флюоресценция в цитоплазме даже в отдельных клетках препаратов, полученных от животных, подозреваемых в заболевании, указывает на наличие вируса классической чумы свиней.
Все контрольные срезы и мазки не должны иметь желтоватозеленоватой флюоресценции цитоплазмы. 3
3. МЕТОД ПОСТАНОВКИ БИОПРОБЫ
Сущность метода заключается в выявлении наличия вируса чумы свиней путем введения восприимчивому животному (свинье) суспензии, полученной из органов, взятых от больных или подозреваемых в заболевании животных.
3.1. Метод отбора проб
3.1.1. Для постановки биопробы от больных, павших или убитых животных берут кровь, селезенку, лимфатические узлы, трубчатую длинную кость.
Кровь от животных для проведения биопробы берут с соблюдением правил асептики.
Если органы начали портиться, то проводят сечение трубчатой длинной кости и извлекают мозг, который используют для проведения исследования.
3.2. Аппаратура, материалы и реактивы
3.2.1. Для проведения исследования применяют:
центрифугу с частотой вращения 5000 об/мин;
ступку или измельчитель ткани;
антибиотики (пенициллин, стрептомицин или другие антибиотики с широким спектром действия);
мертиолат натрия (тиомерсал),
3.3. Подготовка к исследованию
3.3.1. Кусочки селезенки и лимфатические узлы измельчают при помощи ножниц. Измельченные пробы селезенки и лимфатических узлов или костного мозга растирают в ступке с малым количеством физиологического раствора, добавляют физиологический раствор до получения 10%-ной суспензии. К полученной суспензии добавляют пенициллин и стрептомицин по 300—1000 ЕД/см 3 , тиомерсал в конечной концентрации 1:5000 — 1 : 10000 и выдерживают не менее 4 ч при 4°С.
суспензию центрифугируют в течение 10 мин с частотой вращения 4000—5000 об/мин. “
Надосадочную жидкость используют для проведения биолробы. Перед использованием из надосадочьзй жидкости делают посевы на питательные среды.
3.4. Проведение исследования
3.4.1. Берут пять поросят в возрасте 2—3 мес, массой 20—30 кг, восприимчивых к чуме свиней. Трем животным вводят подкожно по 1 см 3 крови или по 2 см 3 суспензии органов. Двух поросят, не инокулированных исследуемым материалом, содержат отдельно для контроля.
Двум поросятам, иммунным к чуме свиней, вводят исследуемый материал в тех же дозах с целью дифференциальной диагностики в отношении африканской чумы свиней.
За подопытными животными ведут клиническое наблюдение в течение 21 сут с ежедневным измерением температуры тела.
3.5. Обработка результатов
3.5.1. Диагноз на классическую чуму свиней считают положительным:
если два из трех неиммунных поросят, которым был введен исследуемый материал, заболевают, проявляя клинические признаки болезни, и погибают;
если два иммунных поросенка, которым введен исследуемый материал, в период наблюдения остаются здоровыми или проявляют незначительные и кратковременные (1—4 дня) клинические признаки болезни слабой интенсивности (повышение температуры тела не выше 41 °С).
3.5.2. Заболевание иммунных животных указывает на то, что исследуемый материал содержит возбудителя другой инфекции.
ПРИЛОЖЕНИЕ 1 Обязательное
ПРИГОТОВЛЕНИЕ БЛОКОВ И ГИСТОЛОГИЧЕСКИХ СРЕЗОВ, ВКЛЮЧЕННЫХ В ПАРАФИН
Фиксированные и обработанные пробы выдерживают в 96%-ном этиловом спирте (три ванны), абсолютном спирте (три ванны) « амиловом спирте (три ванны). В каждой ванне кусочки выдерживают в течение 2 ч. Затем пробы выдерживают в трех парафино-восковых банях при 58°С по 2 ч в каждой.
Пробы вынимают из последней бани и включают в парафин в виде блоков специальной формы.
Сечение микротомом делают в виде ленты толщиной 5—7 мк.
При помощи игл фиксируют срезы в центре предметного стекла, предварительно смазанного слоем альбумина по Мейеру на нагревающей пластинке при 40°С. Альбумин по Мейеру готовят следующим образом: смешивают яичный белок и глицерин в соотношекпи 1:1.
Предметные стекла со срезами выдерживают в термостате при 37°С в течение 6—42 ч, после чего удаляют парафин, выдерживая в трех ваннах с растворителем в течение 10 мин в каждой.
ПРИЛОЖЕНИЕ 2 Обязательное
ОКРАШИВАНИЕ ГИСТОЛОГИЧЕСКИХ СРЕЗОВ
Стекла со срезами проводят через следующие ванны:
три ванны с 96%-ным этиловым спиртом — 5 мин;
две ванны с дистиллированной водой—1—2 мин;
одна ванна с гематоксилином — 5—10 мин;
две ванны с водопроводной водой—1—2 мин;
одна ванна с эцином — 3—5 мин;
две ванны с дистиллированной водой — 1—2 мин;
одна ванна с 1%-ной формолмолибденовой кислотой — 3—5 мин;
одна-две ванны с дистиллированной водой для промывания;
две ванны с 96%-ным этиловым спиртом (дифференциация);
две ванны с растворителем (прояснение—10—30 мин).
Стекло со срезами накрывают покровным стеклом, которое фиксируют канадским бальзамом.
ПРИЛОЖЕНИЕ 3 Обязательное
[.Приготовление мазков из красного костного мозга
Берут грудную кость, делают продольный разрез и вынимают красный костный мозг, из которого делают несколько мазков.
2. Приготовление мазков лейкоцитарного концентрата
От больных или подозреваемых в заболевании свиней собирают 15 см 3 крови в пробирку, содержащую антикоагулят. Кровь в пробирке энергично встряхивают для отделения плазмы и выдерживают пробирку в течение 1 ч при комнатной температуре.
Пастеровской пипеткой отбирают плазму с лейкоцитами и переносят в центрифужную пробирку. Плазму центрифугируют в течение 10 мин с частотой вращения 1000 об/мин, сливают надрсадочную жидкость, а из осадка беломолочного цвета делают 2—3 мазка.
Редактор Н Е. Шестакова Технический редактор О Н. Никитина Корректор В. Я. Варенцова
Сдано в наб 13 05 83 Подп к печ 15 06 83 0,625 п л 0,51 уч-изд л Тир 6000 Цена 3 коп.
- 0.gif 17.17кб
- 1.gif 8.3кб
- 2.gif 32.79кб
- 3.gif 40.01кб
- 4.gif 44.66кб
- 5.gif 51.57кб
- 6.gif 42.76кб
- 7.gif 47.13кб
- 8.gif 30.25кб
- 9.gif 20.82кб
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ СОЮЗА ССР
МЕТОДЫ ЛАБОРАТОРНОЙЯ ДИАГНОСТИКИ КЛАССИЧЕСКОЙ ЧУМЫ СВИНЕЙ
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР ПО СТАНДАРТАМ
РАЗРАБОТАН Министерством сельского хозяйства СССР
ИСПОЛНИТЕЛИ 9. В. Ивановсния, Н. К. Мищенко, Н. Д. Насокмма
ВНЕСЕН Министерством сельского хозяйства СССР
УТВЕРЖДЕН И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Постановлением Государст- зенного комитета СССР по стандартам от 22 апреля 1983 г. № 2017
YAK 636:576.8.07:006.354 Cpynna C79
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРГ СОЮЗА CCP
Методы яабораторной днагностикы ГОСТ
классической чумы свиней 2 5754 — 8 3
Agricultural animals. Methods of csinazst rs diagnostics cf classical [СТ СЭВ 3453—81)
Несоблюдение стандарта преследуется по закону
Настоящий стандарт устанавливаст методы лабораторной дизгностики классической чумы свиней.
Стандарт применяют при днагностике заболеваний животных в лабораториях ветеринарных научно-исследовательских учреждеНИЙ,
Стандарт полностью соотаестетвует СТ СЭВ 3453—81.
4. ГИСТОЛОГИЧЕСКИЙ МЕТОД
Сущность мегола заключастся в обнаружения специфических патолого-гистологических изменений нернных тканей в спедизиль- но подготовленных срезах.
1. Метод отбора проб
1.11. Для провелевия исследозания от павших или убитых свиней берут полушария большого мозга с частями коры, мозжечок, аммоновые рога, спинной мозг в различных участках ствола.
1.2. Аппаратура. материалы и реактивы
1.2.1. Для проведения исследования применяют:
термостат с температурой нагрева 58°C;
микротом для приготовлення срезоз в парафине;
микроскоп биологический ло ГОСТ 8284 78:
пластинку нагревающую на 40°С;
Издание официальное Перепечатка воспрещена \>" Мэдательство стандартов, 1983
Стр. 2 FOCT 15754—83
парафин с точкой плавления от 56 до 58°С по ГОСТ 23683—79;
воск пчелиный по ГОСТ 21179—75;
формалин по ГОСТ 1625—75;
кальций хлористый по ГОСТ 4460
кадмий хлористый по ГОСТ 4330-76;
спирт этиловый абсолютный;
спирт этиловый 96 %-ный по ГОСТ 5962-67;
бензол по ГОСТ 5955—75 или ксилол. или толуол по ГОСТ 5789—7178;
воду дистиллированную по ГОСТ 6709—72.
1.3. Подготовка к исследованию
1.3.1. Отобранные пробы фиксируют по Бейкеру. Для этого готовят раствор следующего состана;
хлористый кальций — 1 г;
хлористый кадмий — | г;
10 %-ный формальдегид или формалнн — 10 ex;
дистиллированная вода — 100 смз.
1.3.2. Фикснрованные пробы обрабатывают путем подготовки срезов, включенных в парафин (см. обязательное приложение 1) или путем подготовки срезов при помощи гистокрнотома.
1.3.3. Для окрашивания гистологических препаратов использу- ют метод окрашивания гематоксилином (см. обязательное приложение 2).
1.4, Проведенне нсследования
1.4.1. Подготовленные и окрашенные срезы просматривают под микроскопом.
1.5. Обработка результатов
15.1. Гистологические изменения, выражающиеся в наличии воспаления, днапедизнальных кровоизлияний, васкулярного эндотелита, мукоидного фирбнозного и гналннового перерождения стенок сосудов, а также лимфогистиоцитарного энцефаломиэлита в первичной тканн, характерны при заболевании чумой.
2. МЕТОД ПРЯМОЙ ИММУНОФЛЮОРЕСЦЕНЦИИ
Сущность метода заключается в соединении меченых антител (коньюгат) со спецнфическим антягеном ин образовании комплекса «антнтело-знтигеня, наблюдаемого в поле зрення люминисцентного микроскопа.
ГОСТ 25754—83 Стр. 3
21. Метод отбора проб
2.1.1. Для проведения нсследования берут миндалины, селезенку, почки, легкне, лимфатические узлы (мезентариальные и подчелюстные), красный костный мозг и кровь.
Пробы органов и тканей берут от павших животных не позднее 8 ч после гибели, от больных ин подозреваемых в заболевании животных — сразу после убоя. Кропь берут от больных и подозреваевых в заболевании жнвотных,
22. Аппаратура н реактивы
2.21. Для проведения исследования применяют:
ценгрифугу с частотой вращения 5000 об/мин;
рефрижератор на мннус 20°С:
стекла предметные по ГОСТ 9284—75;
стекла покровные по ГОСТ 6672—75;
ацетон по ГОСТ 2603-79;
глицерин по ГОСТ 6824—76,
раствор фосфатный буферный с РИ 7,2; готовят следующим образом:
раствор А --в 1 дм? дистиллированной воды разводят 11,87] г двузамещенного фосфата натрия;
раствор Б— в | дм? дистиллированной воды растворяют 9.076 г однозамещенного фосфата калия. Смешивают 800 см? раствора А и 250 смз раствора Б;
раствор фосфатный буферный с рН 8.0; готовят следующим о6- разом:
смешивают приготовленные растворы А — 930 см? и Б — 70 смз. При приготовленин буферных растворов в каждом случае рН раст- воров проверяют потенциометром; .
коньюгат флюоресцентный специфический;
коньюгат флкюоресцентный нормальный;
краситель Эванса, 0.25 %-ный раствор в буферном растворе.
23. Подготовка к нсследованию
2.3.1. Из праб органов прн помоши криотома, мнкротома илн термоэлектрического ножа (при сильном замораживании) готовят срезы толщиной 5 мк, которые помещают на обезжиренные предметные стекла и высушивают в течение 30 мин при 4°С.
Из проб костного мозга и лейкоцитарного концентрата готовят мазки (см. обязательное приложение 3).
2.3.2. Препараты (срезы и мазки) фиксируют ацетоном в течение 10 мин ири минус 20°С или в зеченне 56—10 мин при комнат-
Crp. 4 FOCT 23754—83
ной температуре. После фнксации препараты высушивают на воздухе при комнатной температуре до полного испарення ацетона.
Фикснрованные препараты допускается хранить в морозильнике при температуре не менее минус 20°С в течение 6 мес.
2.3.3. Фиксированные препараты двукратно прокывают фосфат- ным буферным раствором (рН 7,2>, после чего оставляют нх в растворе на 10 мин.
Увлажненные ‘препараты допускается хранить до нспользования во влажной камере прн 4 °С в течение 3 дней.
2.3.4. Подготовленные препараты окрашивают методом конт- растной иммунофлюоресценции.
Для этого приготовляют на фосфатном буфериом растворе (РН 7.2) рабочие разведения специфического и нормального флюоресцентного коньюгата в соответствии с указаниями, нанесенными на этикетках препаратов. К полученным разведениям коньюгатов добавляют краситель Эванса в соотношении: 3 части коньюгата н 1 часть красителя.
Окрашинвают следующие препараты:
три препарата, приготовленных кз неследуемых проб; из них два препарата покрывают спеинфическим коньюгатом с красителем Эванса, а трегий — нормальным коньюгатом с красителем Эвачса (контроль);
два препарата, приготовленных нз органов свиней, не инфииированных вирусом чумы, покрывают специфическим коньюгатом с краснтелем Эванса (контроль).
Окрашенные препараты выдерживают в термостате в течение 30 мин прн 37°С илн в течение 12—18 ч при комнатной темперзтуре.
Препараты двукратно промываюг в фосфатном буферном растворе, после чего оставляют на 10 мин в свежей дистнллированной воде.
После частичного высушивания на воздухе прелараты покрывают буферным глицерином (9 частей нефлюореспирующего глице. рина н | часть фосфатного буферного раствора с рН 8,0) м закры- вают покровными стеклам.
При необходимости покровные стекла фиксируют парафином. Окрашенные препараты хранят при 4 °С в течение 3—4 недель без потери специфической флюоресценции.
2.4. Проведение исследования
2.4.1. Препараты просматривают под люминисцентным микрос- KOTIOM.
25. Обработка результатов
2.5.1. Специфическая флюоресценция характеризуется желтовато-зеленоватым и зеленоватым оттенками свечения цитоплазмы разных клеток (в зависимости от оптики и снетемы освещения).
Бюджетное учреждение Удмуртской Республики
Необходимость проведения данного мероприятия возникла в связи сложной эпизоотической и эпидемиологической обстановкой, сложившейся по туберкулезу в соседних федеральных округах. Заслушаны доклады специалистов Удмуртского ветеринарно-диагностического центра, ГУВ УР, Роспотребнадзора, Министерства здравоохранения. По окончании учебы специалистам предстояло решить тестовые задания. Все участники достойно справились с их решением.
Усовершенствование знаний, проведение активной ветеринарно просветительской работы на местах, своевременное проведение профилактических мероприятий и согласованность в работе между ведомствами обеспечивает контроль эпизоотического благополучия по туберкулезу в Удмуртской Республике.
Примите наши поздравления
В международный женский день!
Пусть будет ваше настроение
Всегда цветущим, как сирень,
Пусть будет жизнь прекрасна ваша,
И дети счастливы всегда,
Пусть дом ваш будет полной чашей!
Удачи, счастья и добра!
За 2014 год на парагрипп-3 всего поступило 1129 проб сыворотки крови из 78 сельскохозяйственных предприятий. Из них парных сывороток исследовано 69 проб, 4-х кратное нарастание титра антител установлено в 17-ти пробах (25%). Патологический материал на ПГ-3 поступал из 25 сельскохозяйственных предприятий республики. Исследовано 57 проб, из них положительный результат получен в 14-ти пробах (25%). Всего неблагополучных пунктов по ПГ-3 в Удмуртской Республике- 14.
На инфекционный ринотрахеит поступило 1305 проб сыворотки крови из 89 сельскохозяйственных предприятий. Парных сывороток исследовано 81, 4-х кратное нарастание титра антител установлено в 14 пробах (17%). Всего неблагополучных пунктов в УР по ИРТ — 5.
На вирусную диарею (далее ВД) поступило 1278 проб сыворотки крови из 88 сельскохозяйственных предприятий. Парных сывороток исследовано 69, 4-х кратное нарастание титра антител установлено в 8 пробах (12%). Патологический материал на вирусную диарею поступил из 30 сельскохозяйственных предприятий в количестве 113 проб, антиген выявлен в 50-ти пробах (44%). Всего по Удмуртской Республике за 2014 год установлено 18 неблагополучных пунктов по ВД.
На респираторно-синцитиальную инфекциюпатологический материал поступил из 22 сельскохозяйственных предприятий в количестве 49 проб, из них положительный результат получен в 16 пробах (33%). Всего по Удмуртской Республике за 2014 год установлено 8 неблагополучных пунктов по РСИ.
На коронавирусный энтерит поступило 304 пробы сыворотки крови из 31 сельскохозяйственного предприятия, из них парных сывороток исследовано 14, 4-х кратное нарастание титра антител установлено в 10 пробах (71%). Патологический материал на коронавирусный энтерит поступил из 35 сельскохозяйственных предприятий в количестве 125 проб, из них положительный результат получен в 14 пробах (11%). Всего неблагополучных пунктов по коронавирусному энтериту- 7.
На ротавирусный энтерит исследовано 93 пробы патологического материала из 30 сельскохозяйственных предприятий, антиген выявлен в 30-ти пробах (32%). Всего неблагополучных пунктов в УР по ротавирусному энтериту- 15.
Наиболее пораженными гельминтами животными в зоне обслуживания являются лошади и мелкий рогатый скот. Лошади поражены гельминтами на 22,6 %, свиньи на 9,5% .Мелкий рогатый скот в зоне обслуживания поражен гельминтами на 35,1 % , в основном, это животные частного сектора. Наибольший процент зараженности мелкого рогатого скота приходится на стронгилятозы желудочно-кишечного тракта (30,0 %).
По зоне обслуживания сохраняется устойчивое снижение зараженности сельскохозяйственных животных фасциолезом, дикроцелиозом и парамфистоматозом. Общая зараженность крупного рогатого скота трематодозами составляла в 2014 году – 0,4%, 2013году — 0,8%, 2012 году — 0,8%, в 2011 году — 1,0%. Снижение зараженности крупного рогатого скота трематодозами подтверждается данными послеубойной ветеринарно-санитарной экспертизы (2014г -1,5%,2013г- 2,7%,2012г — 2,3%, 2011 — 5,5%, 2010 — 6,8%, 2009 — 8,4 %).
Из цестодозных заболеваний в 2014 году был зарегистрирован мониезиоз крупного рогатого скота. зараженность крупного рогатого скота мониезиозом по зоне обслуживания — 4,4 %.
С 12.01.15г по 23.01.15 г. в отдел ПЦР на исследование поступило 202 пробы патматериала на такие заболевания как африканская чума свиней, грипп птиц, орнитоз, инфекционный ринотрахеит крупного рогатого скота, вирусная диарея крупного рогатого скота, хламидиоз, микоплазмоз, лептоспироз, бруцеллез.
1. Микоплазмоз-4 пробы;
2. Хламидиоз – 29 проб;
3. Африканская чума свиней-41 проба;
5. Инфекционный ринотрахеит крупного рогатого скота-4 пробы;
6. Вирусная диарея крупного рогатого скота-6 проб.
Всего происследовано 97 проб патологического материала на 6 заболеваний.
Из поступившего на исследование материала были выявлены 2 положительные пробы на микоплазмоз и 1 положительная проба на вирусную диарею крупного рогатого скота.
27.01.15 г. исп. Пойлова Н.С.
Глав. вет.врач Н.В. Максимова
Серьезные нарушения полового цикла у животных обусловлены чаще синдромом гипогонадизма (пониженной активностью половых желез). В данном случае только знание показателей концентрации половых гормонов (эстроген, прогестерон, фолликулостумулирующий гормон, тестостерон) позволит своевременно выявить причину бесплодия животных.
Чаще всего владельцы самцов не предполагают о наличии гормональных проблем, связанных с заболеваниями, как половых органов, так щитовидной железы, надпочечников. Тестостерон у самцов регулирует рост и развитие полового аппарата, вторичных половых признаков и проявление половых рефлексов. Слабая половая активность наблюдается в результате сильных нагрузок, болезни, стресса и вследствие гормональной недостаточности (врожденной или возрастной).
У самок повышенный уровень тестостерона может свидетельствовать о поликистозе яичников или заболевании надпочечников.
Прогестерон у самок отвечает за формирование беременности, позволяет определить возможный день вязки животных, оплодотворение яйцеклетки и следить за течением беременности. Стойкое превышение прогестерона наблюдается при заболевании надпочечников, опухали яичников. Снижение уровня прогестерона в крови диагностически важно при необходимости сохранения беременности .
Определение уровня фолликолостимулирующего гормона необходимо для оценки воспроизводительной функции половых желез. Концентрация ФСГ в сыворотке крови животных подвержена колебаниям, как индивидуального характера, так и по периодам беременности и полового цикла. Максимальный уровень обнаруживается в период охоты. (ФСГ) способствует созреванию яичников у самок, у самцов способствует спермиогенезу.
Эстроген встречается как у самцов, так и самок. Превышение уровня у самок способствует развитию ложной беременности, бесплодию, образованию кисты яичников, у самцов развивается опухоль семенников.
Для анализа на гормоны необходима венозная кровь, объем 2 мл.
Перед сдачей крови исключить прием эстрогенов за 3 дня.
Бактериологический анализ мочи – это определение количества микроорганизмов в 1 мл мочи, их вида и чувствительности выделенных культур к антибиотикам.
У клинически здорового животного в моче не должно быть никаких бактерий. Если при анализе обнаружены бактерии в моче, это состояние называется бактериурией.
Бактерии в моче могут появиться только в том случае, если почки, мочевой пузырь или мочеточники поражены болезнетворными микроорганизмами.
К уропатогенным микроорганизмам, вызывающим более 90% инфекций мочевой системы, относятся бактерии семейства Enterobacteriaceae, а также P. aeruginosa, Enterococcus faecalis, Staphylococcus saprophyticus. В то же время такие микроорганизмы, как S. aureus, S. epidermidis, Streptococcus spp., практически не вызывают эти инфекции.
Иногда бактерии в мочу попадают при неправильном сборе анализа. Поэтому мочу нужно отбирать правильно. С помощью катетора и допускается сбор мочи из лотка, но предварительно лоток нужно ошпарить кипятком 2 раза. Моча собирается в стерильную тару.
Из методики: существует несколько методовподсчета КОЕ для определения степени бактериурии.
Метод серийных разведений
Из транспортной среды, содержащей биоматериал берется 1 мл, который последовательно разбавляется в 10 раз с посевом в пронумерованные пробирки с питательной средой. Та пробирка, в которой прекращается рост микроорганизмов считается максимальной границей количества микроорганизмов в пробе.
Метод подсчета колоний под микроскопом
Метод является ориентировочным и заключается в подсчете колоний под микроскопом под увеличение х 10 в поле зрения с последующей интерпретацией по сравнительной таблице.
Количество колоний
Концентрация в КОЕ/мл
Секторный метод
По существу является вариантом метода серийных разведений. Применяется для микробиологического исследования мочи. Платиновой петлей диаметром 2 мм, емкостью 0,005 мл берут каплю мочи и делают 30-40 штрихов на сектор А чашки Петри. Прожигают петлю и производят 4 штриха через сектор А в сектор I. Аналогичным образом из сектора I засевают сектор II, а из сектора II — сектор III. Чашки инкубируют при 37о С 24 часа. При отсутствии роста на агаре инкубацию пролонгируют до 3 суток. Учет результатов проводят по специальной таблице.
А
1 сектор
2 сектор
3 сектор
кол-во в 1 мл
n степень бактериурии;
n вид выделенных культур, повторность их выделения;
n присутствие в моче монокультуры или ассоциации микроорганизмов.
ВЫНУЖДЕННЫЙ УБОЙ — это убой больных животных, которым угрожает гибель. В ынужденный убой проводят с разрешения вет еринарного врача или вет еринарного фельдшера во избежание потерь от гибели животных .
Не допускается в ынужденный убой животных , больных или подозрительных по заболеванию : сиб ирской язвой , эмфизематозным карбункулом , сапом , мелиоидозом, чумой кр упного рог атого скота , чумой верблюдов, африканской чумой свиней инфекц ионной катаральной лихорадкой кр упного рог атого скота и овец , бешенством , злокачеств енным отёком , столбняком , брадзотом , энтеротоксемией овец , эпизоотич еским лимфангитом , туляремией , ботулизмом , чумой верблюдов, миксоматоз кроликов, классическая чума птиц, а также животных , находящихся в состоянии агонии .
СИБИРСКАЯ ЯЗВА — острая инфекционная болезнь животных и человека, характеризующаяся септицемией, поражением кожи (карбункулёзная форма), кишечника, легких, миндалин (висцеральная форма).
ЭМФИЗЕМАТОЗНЫЙ КАРБУНКУЛ — остро протекающая неконтагиозная токсико-инфекционная болезнь крупного рогатого скота, характеризующаяся образованием быстро увеличивающихся крепитирующих припухлостей в мышцах тела.
САП – это инфекционная болезнь однокопытных животных, характеризующаяся лихорадкой, истощением и развитием в паренхиматозных органах, чаще в легких, на слизистых оболочках и коже сапных узелков и язв.
ЧУМА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА- острая вирусная болезнь, протекающая в виде септицемии и характеризующаяся высокой температурой, катарально-геморрагическим и крупозно-дифтеритическим воспалением слизистых оболочек преимущественно желудочно-кишечного тракта.
ЧУМА ВЕРБЛЮДОВ — это инфекционная болезнь, характеризующаяся геморрагическим лимфаденитом, поражением лёгких , множественными кровоизлияниями в органах и тканях. Болезнь опасна и для людей.
АФРИКАНСКАЯ ЧУМА СВИНЕЙ — это высоко контагиозная вирусная болезнь свиней , характеризующаяся лихорадкой , цианозом кожи и обширными геморрагиями во внутренних органах.
БЕШЕНСТВО — это заболевание вирусной природы, возникающее после укуса зараженного животного, характеризующееся тяжелым поражением нервной системы и заканчивающееся, как правило, смертельным исходом.
ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫЙ РАНЕВОЙ ГАЗОВЫЙ ОТЕК — под этим названием понимают спорадически встречающееся острое инфекционное заболевание крупного рогатого скота, овец, коз, свиней и лошадей, а в северных областях и оленей. Это заболевание свойственно также человеку и птицам.
БРАДЗОТ – это исключительно острая неконтагиозная токсико-инфекционная болезнь овец и коз, характеризующаяся геморрагическим воспалением слизистой оболочки сычуга и двенадцатиперстной кишки, накоплением газов в желудке и гибелью животных.
ЭНТЕРОТОКСЕМИЯ ОВЕЦ — остро протекающая, неконтагиозная токсико-инфекционная болезнь, характеризующаяся геморрагическим энтеритом, поражением почек, нарушениями со стороны нервной системы, общей интоксикацией и быстрой гибелью заболевших животных.
ЭПИЗООТИЧЕСКИЙ ЛИМФАНГИТ — хронически протекающая инфекционная болезнь однокопытных, характеризующаяся воспалением лимфатических сосудов кожи и подкожной клетчатки с образованием гнойных фокусов и язв.
ТУЛЯРЕМИЯ — острая природно-очаговая инфекционная болезнь из группы бактериальных зоонозов, которая вызывается туляремийной бактерией, характеризуется лихорадкой, специфическим лимфаденитом (бубен) и поражением зависимости от входных ворот кожи, глаз, миндалин, легких и других органов.
БОТУЛИЗМ — это болезнь, возникающая в результате отравления токсинами бактерий ботулизма и характеризующаяся тяжелым поражением нервной системы.
СТОЛБНЯК — острая раневая инфекционная болезнь животных и человека, характеризующаяся выраженной рефлекторной возбудимостью и судорожными сокращениями мускулатуры тела.
МЕЛИОИДОЗ – это редкая зоонозная септическая болезнь животных и человека, характеризующаяся септицемией, катарально-гнойным воспалением слизистых оболочек верхних дыхательных путей, образованием абсцессов в органах и тканях и высокой летальностью.
МИКСОМАТОЗ КРОЛИКОВ — это вирусная, контагиозная болезнь, характеризуется серозно-гнойным конъюнктивитом и наличием отеков и узелков, имеющих студенистую консистенцию. Отеки могут возникать в разных частях тела кролика: спины, ануса, головы, наружных половых органов.
АГОНИЯ — последняя стадия умирания , которая связана с активизацией компенсаторных механизмов, направленных на борьбу с угасанием жизненных сил организма. В большинстве случаев агония предшествует наступлению смерти.
ГОСТ 26075-2013г. касается лабораторных исследований в области бешенства и распространяется на все виды млекопитающих животных.
Специалисты отдела вирусологии успешно освоили и применяют на практике новый ГОСТ.
В декабре 2014 г. в отдел ветеринарно – санитарной экспертизы на испытания поступило 490 проб пищевой продукции, 220 проб смывов с производственных поверхностей перерабатывающих предприятий пищевой промышленности УР, 20 проб водопроводной питьевой воды.
По результатам микробиологических испытаний пищевой продукции не соответствовали требованиям нормативных документов (НД):
— 30 проб пищевых продуктов (6,2 % от исследованных проб) — по количеству мезофильных аэробных и факультативно – анаэробных микроорганизмов (КМАФАнМ),
— в 24 пробах пищевых продуктов (4,9 % от исследованных проб) обнаружены бактерии группы кишечной палочки (БГКП).
Требованиям нормативной документации по микробиологическим показателям не соответствовали молоко и молочные продукты, мясо и мясные продукты, продукты из рыбы, салаты готовые к употреблению.
Читайте также:
