Диагностика на дому инфекций

ОРВИ и грипп имеют респираторные симптомы и общие. Их можно распознать по катаральным признакам со стороны дыхательных путей и общей симптоматике, характерной для большинства заболеваний.

Современные методы диагностики данной группы заболеваний

Различают несколько видов диагностики, которые различаются по особенностям проведения и методу выявления возбудителя. Это:

экспресс-методы;
серологическая диагностика;
вирусологическая диагностика.

Первая группа - экспресс-методики. Это быстрый способ подтвердить или исключить наличие болезни. Используется метод флюоресценции и ПЦР. Рассмотрим их подробнее.

Изучение флюоресцирующих антител - МФА. Способ основан на определении антигенов к вирусу в эпителиальных клетках носовой слизистой, на конъюнктиве (если есть глазные поражения). Антитела при действии антигена реагируют специфическим свечением, которое легко заметить при микроскопическом исследовании. Этот параметр считается маркером диагностики и является основой для подтверждения результата. Способ имеет диагностическую ценность начиная с 3 и заканчивая 5 днем заболевания. Чувствителен к таким антигенам: вирус гриппа типа А, В, вирус парагриппа, аденовирусы и возбудитель РС-инфекции. Это удобный и быстрый метод, не требующий особых ресурсов, который часто применяется в ходе диагностики.

Метод полимеразно-цепной реакции базируется на основе обнаружения участков нуклеиновых кислот генетического материала вируса и определении их групповой принадлежности по этому критерию. Методика имеет высокую диагностическую ценность, является современным и качественным способом подтверждения заболевания. Считается “золотым стандартом” диагностики, так как не дает ложных результатов и является специфическим для определения конкретных патогенов, широко применяется в стационарных и амбулаторных условиях.

Вирусологические методики основаны на чистом выделении вирусных микроорганизмов и их конкретных штаммов, за чем следует их прикрепление к клеточным культурам в лабораторных условиях. Далее следует определение вида вируса с помощью ПЦР или других реакций. Метод требует значительных ресурсов, довольно длительный и трудоемкий. Его ценность заключается в получении эпидемиологических данных и основе для научных работ. То есть, детальное изучение вируса, частоты его распространения позволяет прогнозировать эпидемическую картину, создавать вакцины. Для исследования берется мазок из носа и носоглотки. Материал пригоден в течении 3-5 дня заболевания. С помощью вирусологических методов можно определить такие возбудители:

Серологические методы диагностики - это ретроспективное исследование, которое дает точные данные относительно стадии процесса, степени активности и типа возбудителя. Используется для эпидемиологических целей.

Для анализа используется сыворотка крови, в которой необходимо определить количество и виды антител. Используется известный антиген вируса. При возникновении реакции с материалом пациента формируются иммунные комплексы антиген-антитело, что подтверждает диагноз. Для диагностики также важен прирост титра антител, для чего используются парные сыворотки.

Результат имеет высокую точность и может определиться даже если все другие методы не дали результата, так как имеет высокую чувствительность. особенно важно использование метода для стертых форм с минимальными клиническими проявлениями. Сыворотки для анализа берутся в начале болезни, а также через 10-14 дней после её завершения. Используется метод для подтверждения наличия в организме таких возбудителей: вирусы гриппа А, В, возбудители парагриппа, аденовирусы и РС-вирусы.

Наличие вируса гриппа можно подтвердить с помощью РТГА - реакции торможения геммааглютинации. Метод основан на свойстве снижения гемагглютинирующих способностях вируса, если в крови есть антитела к нему. Для этого используется кровь с эритроцитами, антиген. Препараты крови берутся парными, в начале болезни, и в период выздоровления. Метод имеет высокую диагностическую ценность, точный и чувствительный.

Виды исследуемого материала и особенности сдачи

Для диагностики используются смывы из носа, мазки из носовых ходов, носоглотки, а также препараты крови.

Забор мазка и смыва проводит медицинский персонал. Он следит за тем, чтобы препараты строго соответствовали должной локализации. Забор проходит в чистых условиях, стерильными инструментами и в стерильную тару. До того, как взять мазки пациента просят высморкаться, чтобы очистить носовые ходы от слизи. Зонд вводится легко, на глубину 2-3 см. Проводится стандартное движение по нижней части носового хода и под раковиной носа. Необходимо, чтобы забор происходит в современной клинике, где есть возможность правильно хранить и транспортировать собранный материал в короткий срок до лаборатории.

Мазок из глотки берется по похожей методике, чтобы затронуть те участки слизистой, на которой скапливается возбудитель. Перед забором необходимо легко прополоскать рот, чтобы взятый материал был чистым. Желательно забирать материал на 3-й день после начал болезни.

Нормы и отклонения от них, расшифровка результатов

Экспресс-тест дает результаты сразу после диагностики, его расшифровка не вызывает трудностей, так как определяет наличие вируса или его отсутствие в организме.

Серологические реакции более сложные и могут расшифровываться по разному: наличие антител класса М говорит об острой стадии процесса, антитела G формируются при хроническом течении.

Сроки готовности результатов

Результаты исследования готовы на 1-2 день после сдачи. Экспресс-тест дает результат сразу. Серологические методы требуют больше затрат времени для сравнения титров антител. Более быстрые методы важны для диагностического процесса, а те, что более затратны - для эпидемиологического и научного исследования.

Скорость диагностики зависит от правильности сдачи препаратов, условий лаборатории, качества реактивов.

Вовремя сданный анализ позволяет точно и быстро определить диагноз. Это - залог правильного и эффективного лечения. Если болезнь запустить, она грозит осложнениями, которые особенно опасны, если у человека грипп. Это актуально для детей, пожилых людей, беременных женщин и лиц с дефицитом иммунной системы, ведь осложнения чаще всего проявляются у них.

Лаборатория АО "СЗЦДМ" предлагает услуги, обеспечивающие комплексное и преемственное лабораторное обследование пациента

Диагностика В медицинских центрах АО "СЗЦДМ" проводят качественные диагностические исследования всего организма

Лечение Наши медицинские центры ориентированы на обслуживание пациентов в амбулаторном режиме и объединены единым подходом к обследованию и лечению пациентов.

Реабилитация Реабилитация - это действия, направленные на всестороннюю помощь больному человеку или инвалиду для достижения им максимально возможной полноценности, в том числе и социальной или экономической.

Выезд на дом Внимание! Действует акция "Выезд на дом - 0 рублей"

Профосмотры АО "СЗЦДМ" проводит профилактические осмотры работников, которые включают в себя - комплексы лечебных и профилактических мероприятий, проводимых для выявления отклонений в состоянии здоровья, профилактики развития и распространения заболеваний.

Информируем Вас об изменении стоимости исследований на диагностику коронавируса COVID-2019 и начале приема биоматериала для исследований в Великом Новгороде.

С 20 апреля 2020 года изменяется стоимость исследований на диагностику коронавируса COVID-2019 в связи с переходом на наборы для ПЦР-диагностики с более высокой чувствительностью и специфичностью.

1. Если Вы вынуждены контактировать с незнакомыми людьми, пользоваться общественным транспортом, просто беспокоитесь о своем здоровье, мы предлагаем Вам сдать анализ на наличие коронавирусной инфекции.

Название исследования: РНК коронавируса SARS-CoV-2 (COVID-19)

Стоимость данного исследования в Санкт-Петербурге, Ленинградской области и Великом Новгороде составит 1242 рублей (без учета стоимости взятия биоматериала)

2. В случае появления симптомов ОРВИ, таких как повышенная температура, кашель, першение в горле, заложенность носа, головная боль, боль в мышцах, Вам необходимо сдать комплексный тест на диагностику острых респираторных вирусных инфекций человека:

2.1. Выявление возбудителей острых респираторных вирусных инфекций человека (ОРВИ), включая коронавирус SARS-CoV-2 (COVID-19)

Стоимость данного исследования в Санкт-Петербурге, Ленинградской области и Великом Новгороде составит 2405 рублей (без учета стоимости взятия биоматериала)

респираторно-синцитиальным вирусом (human Respiratory Syncytial virus – hRSv),

метапневмовирусом (human Metapneumovirus – hMpv),

вирусом парагриппа 1, 2, 3 и 4 типов (human Parainfluenza virus-1-4 – hPiv),

риновирусами (human Rhinovirus – hRv),

аденовирусами групп B, C и E (human Adenovirus B, C, E – hAdv),

бокавирусами (human Bocavirus – hBov).

Одновременно будет выполнено исследование на выявление РНК коронавируса SARS-CoV-2.

2.3. Комплексная диагностика Coronavirus COVID-19

В состав комплекса входит: Выявление возбудителей острых респираторных вирусных инфекций человека (ОРВИ), включая коронавирус SARS-CoV-2 (COVID-19) + клинический анализ крови

Стоимость данного исследования в Санкт-Петербурге и Ленинградской области составит 2815 рублей (без учета стоимости взятия биоматериала)

Стоимость данного исследования в Великом Новгороде составит 2555 рублей (без учета стоимости взятия биоматериала)

Входящий в данное исследование клинический анализ крови позволит увидеть возможное нарушение лейкоцитарной формулы, что позволит врачу точно определить, имеет ли место именно вирусная инфекция, а не бактериальная инфекция или другой вариант воспалительного процесса.

Выполнение данного комплекса позволяет за одно посещение лабораторного терминала узнать причину Вашего заболевания. Также следует помнить, что в случае выявления COVID-19 может иметь место коинфекция с другими респираторными вирусами, что утяжеляет течение заболевания и приводит к поражению нижних отделов респираторного тракта.

2.4. Расширенная комплексная диагностика Coronavirus COVID-19

Стоимость данного исследования в Санкт-Петербурге и Ленинградской области 4215 рублей (без учета стоимости взятия биоматериала)

Стоимость данного исследования в Великом Новгороде составит 3485 рублей (без учета стоимости взятия биоматериала)

Расширенная комплексная диагностика включает в дополнение биохимический анализ крови, включая ферменты печени, такие как аланинаминотрансфераза (АЛТ), аспартатаминотрансфераза (АСТ), лактатдегидрогеназа (ЛДГ), креатинин, фибриноген и С-реактивный белок. Обнаруженные отклонения могут указывать на наличие органной дисфункции, декомпенсацию сопутствующих заболеваний и развитие осложнений. Лечащему врачу будет значительно легче выбрать тактику лечения, подобрать лекарственные средства и режим их дозирования.

Режим работы медицинского центра:

Понедельник - пятница, с 8.00 до 14.00.

Услуги по диагностике коронавируса COVID-19 в Великом Новгороде оказываются по предварительной записи.

Телефон для предварительной записи: +7(911)-644-61-30

Телефон для справок в Великом Новгороде: +7(921) 729-31-55

Порядок записи на оказание услуги:

Санкт-Петербург и Ленинградская область

Услуги по диагностике коронавируса COVID-19 в Санкт-Петербурге и Ленинградской области оказываются по предварительной записи.

8 (812) 600-42-00 и 8 (800) 234-42-00

Так же можно отправить заявку с официального сайта. Вам обязательно перезвонят для согласования времени и места сдачи.

Услуги по диагностике коронавируса COVID-19 в Великом Новгороде оказываются по предварительной записи.

Телефон для предварительной записи: +7(911)-644-61-30

Телефон для справок в Великом Новгороде: +7(921) 729-31-55

Если Вам не удалось дозвониться – Вам обязательно перезвонят на определившийся номер телефона.

При вызове на дом производится забор биоматериала только для проведения комплексных программ диагностики коронавируса COVID-19.

Выезд на дом для забора биоматериала на диагностику коронавируса COVID-19 осуществляется силами отдельно выделенной выездной службы.

Предварительная запись на услугу осуществляется по телефону: +7- 981-100-45-88

Прием звонков для записи осуществляется с 9:00 до 17:00

В ы езд осуществляется с ПН по СБ

Телефон для предварительной записи: +7(911)-644-61-30

Телефон для справок: +7(921) 729-31-55

Выезд осуществляется с ПН по ПТ

Для получения дополнительной информации необходимо связаться с нами по телефону

Выезд на дом Внимание! Действует акция "Выезд на дом - 0 рублей"

Диагностика, лечение, профилактика новой коронавирусной инфекции (COVID-19) в первичной медико-санитарной помощи на дому

Верные ответы выделены жирным шрифтом.

Содержание

Главной мерой при выявлении больного с подозрением на COVID-19 является [ править ]

использование одноразовых медицинских масок, которые должны сменяться каждые 2 часа
транспортировка больных специальным транспортом
соблюдение больными кашлевой гигиены
использование одноразового медицинского инструментария (неверный ответ)
госпитализация в боксированные помещения/палаты инфекционного стационара

К средствам индивидуальной защиты (СИЗ) относится (выбрать все правильные ответы) [ править ]

халат
резиновый фартук
хирургическая маска или респиратор
защитные очки
перчатки

(Вроде как, всё кроме фартука)

В настоящее время основным источником инфекции при коронавирусной инфекции COVID-19 является [ править ]

больной человек, в том числе в инкубационном периоде
больное животное
больной человек
реконвалесцент
бактерионоситель

Основным видом биоматериала для лабораторного исследования ПЦР при диагностике COVID-19 является [ править ]

кал и рвотные массы
мокрота
кровь
мазок из носоглотки и/или ротоглотки
моча

Действия врача при выявлении на дому больного с вероятной COVID-19 (все правильные ответы) [ править ]

лично сопровождает больного в поликлинику
вызывает дезинфекционную службу
изолирует больного в отдельную комнату, если есть возможность
вызывает специализированную бригаду скорой и неотложной медицинской помощи для госпитализации
выходит из квартиры; снимает очки, маску/респиратор, защитную одежду, помещает в пакет для медицинских отходов класса В для обеззараживания соответствующим образом
составляет список контактных лиц из ближнего и дальнего окружения с указанием Ф.И.О., возраста, места жительства, номеров телефонов

(без лично сопровождает), (вызывает, вызывает, изолирует, выходит, составляет)

Физикальное обследование пациента включает: (все правильные ответы) [ править ]

аускультацию и перкуссию легких
термометрию
оценку видимых слизистых оболочек верхних дыхательных путей
антропометрию
пульсоксиметрию

(всё кроме антропометрии)

Перед контактом с пациентом с признаками ОРИ врач должен (все правильные ответы) [ править ]

попросить пациента надеть медицинскую маску
обработать руки дезинфицирующим средством и одеть перчатки
снять маску с пациента
проверить правильность использования маски пациентом

Отягощенным по вероятности COVID-19 эпидемиологическим анамнезом является: (все правильные ответы) [ править ]

проживание в сельской местности
посещение пациентом в течение 14 дней до первых симптомов эпидемически неблагополучных по COVID-19 стран и регионов
наличие у пациента тесных контактов за 14 дней до появления симптомов с лицами, подозрительными на инфицирование SARS-CoV-2, или лицами, у которых диагноз подтвержден лабораторно
передвижения внутри РФ

Инкубационный период при коронавирусной инфекции составляет [ править ]

7-10 дней
5-8 дней
3-4 дня
1-14 дней
4-9 дней

К методу специфической лабораторной диагностики коронавирусной инфекции относят [ править ]

реакцию непрямой(пассивной) гемагглютинации (это неверный ответ)
иммуноферментный анализ (неверный ответ)
реакцию иммунофлуоресценции (неверный ответ)
полимеразную цепную реакцию
пробу Кумбса

Официальным названием нового коронавируса является [ править ]

SARS-CoV-19
MERS-CoV
2019-nCoV
SARS-CoV-2
SARS-CoV

К клиническим вариантам COVID-19 относится (все правильные ответы) [ править ]

пневмония с дыхательной недостаточностью
сепсис
ОРВИ легкого течения
пневмония без дыхательной недостаточности
острый энтероколит

(две пневмонии, ОРВИ и сепсис)

К подтвержденному случаю новой коронавирусной инфекции COVID-19 относят пациентов с [ править ]

тяжелой острой респираторной инфекцией, неясной этиологии не учитывая эпидемиологического анамнеза
тяжелой острой респираторной инфекцией, неясной этиологии в сочетании с данными эпидемиологического анамнеза: прибывающие из эпидемиологически неблагополучных регионов и контактным лицам
лабораторным подтверждением инфекции, вызванной COVID-19, независимо от клинических симптомов
клиническими проявлениями поражения кожи в сочетании с данными эпидемиологического анамнеза: прибывающие из эпидемиологически неблагополучных регионов и контактным лицам
тяжелой острой респираторной инфекцией, неясной этиологии в сочетании с данными эпидемиологического анамнеза: прибывающие из эпидемиологически неблагополучных регионов и контактным лицам, - при котором результат лабораторного исследования на наличие COVID-19 является сомнительным или положительный

Какие СИЗ врач должен одеть перед входом в квартиру? (все правильные ответы) [ править ]

перчатки
защитные очки
халат
хирургическая маска или респиратор
резиновый фартук

Какие СИЗ врач должен одеть, войдя в квартиру? [ править ]

защитные очки
перчатки, предварительно обработав руки кожным антисептиком
хирургическая маска или респиратор
резиновый фартук
халат

К неспецифическим методам лабораторной диагностики при COVID-19 относятся (все варианты) [ править ]

биохимический анализ крови (мочевина, креатинин, электролиты, печеночные ферменты, билирубин, глюкоза, альбумин)
общий (клинический) анализ крови
исследование уровня С-реактивного белка (СРБ) в сыворотке крови
анализ кала на скрытую кровь
коагулограмма

только 1 (биохимический) - неверный ответ

вроде как 1,2,3 (исследования, биохимический, общий)

Наиболее характерными путями передачи коронавирусной инфекции являются [ править ]

воздушно-пылевой, пищевой, контактно-бытовой
трансмиссивный, контактный, пищевой
трансплантационный, половой, парентеральный
алиментарный, перинатальный, гемотрансфузионный
контактный, воздушно-капельный, аэрозольный

Самым эффективным профилактическим мероприятием при коронавирусной инфекции является [ править ]

личная гигиена и СИЗ
наблюдение за контактными
вакцинопрофилактика
разрыв механизма и путей передачи
своевременное выявление заболевших

Средством защиты органов дыхания при заборе биоматериалов подозрительных на содержание коронавируса COVID-19 является [ править ]

маска медицинская
полумаска фильтрующаяся
марлевая маска
респиратор типа FFP2
противогаз фильтрующий

Фактор(-ы) передачи нового коронавируса (все правильные ответы) [ править ]

предметы обихода
почва
воздух
вода
пищевые продукты

(предметы, воздух, пищевые) (без почва и вода)

К какой группе патогенности относится коронавирус SARS-CoV-2? [ править ]

III
I
II - верный ответ
IV
I-IV

Возбудителем коронавирусной инфекции является [ править ]

Picornoviridae
Paramyxoviridae
Coronaviridae
Reoviridae
Adenoviridae

К характерным клиническим симптомам при коронавирусной инфекции относят [ править ]

болезненность в области живота, рвота, головные боли
повышение температуры тела, кашель, одышка
быстро нарастающие симптомы интоксикации в первые часы заболевания, слабость, миалгии
повышение температуры тела в первые сутки до максимальных цифр, рвота, сердцебиение
лихорадка, рыхлая, пятнистая слизистая оболочка щек, одутловатость лица, гнойное отделяемое из носа

К неспецифическим методам лабораторной диагностики при COVID-19 относятся: (все правильные ответы) [ править ]

коагулограмма
биохимический анализ крови (мочевина, креатинин, электролиты, печеночные ферменты, билирубин, глюкоза, альбумин)
анализ кала на скрытую кровь
исследование уровня С-реактивного белка (СРБ) в сыворотке крови
общий (клинический) анализ крови

(исследование, биохимический, общий) (без каагулограмма и анализ)

(вроде как, тоже есть вопрос) При анамнестических данных, указывающих на вероятность инфекции, вызванной SARS-CoV-2, решение о госпитализации зависит от [ править ]

тяжести состояния (это неверный ответ)
наличия совместно проживающих граждан (это неверный ответ)

* принимается вне зависимости от других факторов

зависит от возраста пациента (это неверный ответ)

Принятие решения о необходимости госпитализации: а) при анамнестических данных, указывающих на вероятность инфекции, вызванной SARS-CoV-2, независимо от степени тяжести состояния больного, показана госпитализация в инфекционную больницу/отделение с соблюдением всех противоэпидемических мер; б) при отсутствии подозрений на инфекцию, вызванную SARS-CoV-2, решение о госпитализации зависит от степени тяжести состояния и вероятного другого диагноза.

Диагностика инфекционных заболеваний является одной из самых сложных проблем в клинической медицине. Лабораторные методы исследования при ряде нозологических форм играют ведущую, а в целом ряде клинических ситуаций решающую роль не только в диагностике, но и в определении конечного исхода заболевания.

Диагностика инфекционных заболеваний почти всегда предусматривает использование комплекса лабораторных методов.

бактериологические;
серологические;
метод полимеразной цепной реакции (ПЦР) для обнаружения ДНК или РНК возбудителя инфекционного заболевания в исследуемом материале.

У одних пациентов для диагностики этиологии инфекционно-воспалительного процесса достаточно провести бактериологическое исследование, в других клинических ситуациях решающее значение имеют данные серологических исследований, в третьих, предоставить полезную информацию может только метод ПЦР. Однако наиболее часто в клинической практике врачу-клиницисту необходимо использовать данные различных методов лабораторных исследований.

Бактериологические методы исследования

Бактериологические исследования наиболее часто проводят при подозрении на гнойно-воспалительные заболевания (составляют 40-60% в структуре хирургических заболеваний) с целью их диагностики, изучения этиологической структуры, определения чувствительности возбудителей к антибактериальным препаратам. Результаты бактериологических анализов способствуют выбору наиболее эффективного препарата для антибактериальной терапии, своевременному проведению мероприятий для профилактики внутрибольничных инфекций.

Возбудителями гнойно-воспалительных заболеваний являются истинно-патогенные бактерии, но наиболее часто условно-патогенные микроорганизмы, входящие в состав естественной микрофлоры человека или попадающие в организм извне. Истинно-патогенные бактерии в большинстве случаев способствуют развитию инфекционного заболевания у любого здорового человека. Условно-патогенные микроорганизмы вызывают заболевания преимущественно у людей с нарушенным иммунитетом.

Бактериологические исследования при заболеваниях, вызываемых условно-патогенными микроорганизмами, направлены на выделение всех микроорганизмов, находящихся в патологическом материале, что существенно отличает их от аналогичных исследований при заболеваниях, вызванных истинно патогенными микроорганизмами, когда проводится поиск определенного возбудителя.

Для получения адекватных результатов бактериологического исследования при гнойно-воспалительных заболеваниях особенно важно соблюдать ряд требований при взятии биоматериала для анализа, его транспортировки в лабораторию, проведения исследования и оценки его результатов.

Для идентификации вида возбудителя гнойно-воспалительных заболеваний и определения чувствительности к антибактериальным препаратам бактериологические лаборатории используют комплекс методов. Они включают:

микроскопическое исследование мазка (бактериоскопия) из доставленного биоматериала;
выращивание культуры микроорганизмов (культивирование);
идентификацию бактерий;
определение чувствительности к антимикробным препаратам и оценку результатов исследования.

Доставленный в бактериологическую лабораторию биоматериал первоначально подвергается микроскопическому исследованию.

Микроскопическое исследование мазка (бактериоскопия), окрашенного по Граму или другими красителями, проводят при исследовании мокроты, гноя, отделяемого из ран, слизистых оболочек (мазок из цервикального канала, зева, носа, глаза и т.д.). Результаты микроскопии позволяют ориентировочно судить о характере микрофлоры, ее количественном содержании и соотношении различных видом микроорганизмов в биологическом материале, а также дает предварительную информации об обнаружении этиологически значимого инфекционного агента в данном биоматериале, что позволяет врачу сразу начать лечение (эмпирическое). Иногда микроскопия позволяет выявить микроорганизмы, плохо растущие на питательных средах. На основании данных микроскопии проводят выбор питательных сред для выращивания микробов, обнаруженных в мазке.

Культивирование микроорганизмов. Посев исследуемого биоматериала на питательные среды производят с целью выделения чистых культур микроорганизмов, установления их вида и определения чувствительности к антибактериальным препаратам. Для этих целей используют различные питательные среды, позволяющие выделить наибольшее количество видов микроорганизмов. Оптимальными являются питательные среды, содержащие кровь животного или человека, а также сахарный бульон, среды для анаэробов. Одновременно производят посев на дифференциально-диагностические и селективные (предназначенные для определенного вида микроорганизмов) среды. Посев осуществляют на стерильные чашки Петри, в которые предварительно заливают питательную среду для роста микроорганизмов.

Микроскопия мазков, окрашенных по Граму

1 - стрептококки; 2 - стафилококки; 3 - диплобактерии Фридленда; 4 - пневмококки

Чашки Петри с посевами инкубируют в термостате при определенных температурных, а для ряда микроорганизмов газовых (например, для выращивания анаэробов создают условия с низким содержанием кислорода) режимах в течение 18-24 ч. Затем чашки Петри просматривают. Количественную обсемененность доставленного биоматериала микрофлорой определяют по числу колониеобразующих единиц (КОЕ) в 1 мл или 1 мг исследуемого образца. При просмотре чашек Петри выявляют некоторые особенности изменения цвета среды, ее просветления в процессе роста культуры. Многие группы бактерий образуют характерные формы колоний, выделяют пигменты, которые окрашивают колонии или среду вокруг них. Из каждой колонии делают мазки, окрашивают по Граму и микроскопируют. Оценивают однородность бактерий, форму и размер, наличие спор или других включений, капсулы, расположение бактерий, отношение к окраске по Граму. Вся эта информация служит важнейшей составляющей для выбора сред и получения в дальнейшем чистой культуры каждого микроорганизма.

Колонии отсевают на плотные, жидкие, полужидкие питательные среды, оптимальные для культивирования определенного вида бактерий.

Выделенные чистые культуры микроорганизмов подвергают дальнейшему изучению в диагностических тестах, основанных на морфологических, ферментативных, биологических свойствах и антигенных особенностях, характеризующих бактерий соответствующего вида или варианта.

Определение чувствительности к антибактериальным препаратам. Чувствительность к антимикробным препаратам изучают у выделенных чистых культур микроорганизмов имеющих этиологическое значение для данного заболевания. Поэтому в направлении на бактериологические анализы требуется указать диагноз заболевания у больного. Определение чувствительности бактерий к спектру антибиотиков помогает лечащему врачу правильно выбрать препарат для лечения больного.

Оценка результатов исследования. Принадлежность условно-патогенных микроорганизмов к естественной микрофлоре организма человека создает ряд трудностей при оценке их этиологической роли в развитии гнойно-воспалительных заболеваний. Условно-патогенные микроорганизмы могут представлять нормальную микрофлору исследуемых жидкостей и тканей или контаминировать их из окружающей среды. Поэтому для правильной оценки результатов бактериологических исследований необходимо знать состав естественной микрофлоры изучаемого образца. В тех случаях, когда исследуемый биоматериал в норме стерилен, как, например, спинномозговая жидкость, экссудаты, все выделенные из него микроорганизмы могут считаться возбудителями заболевания. В тех случаях, когда исследуемый материал имеет собственную микрофлору, как, например, отделяемое влагалища, кал, мокрота, нужно учитывать изменения ее качественного и количественного состава, появление несвойственных ему видов бактерий, количественную обсемененность биоматериала. Так, например, при бактериологическом исследовании мочи степень бактериурии (число бактерий в 1 мл мочи), равная и выше 10 5 , свидетельствует об инфекции мочевых путей. Более низкая степень бактериурии встречается у здоровых людей и является следствием загрязнения мочи естественной микрофлорой мочевых путей.

Установить этиологическую роль условно-патогенной микрофлоры помогают также нарастание количества и повторность выделения бактерий одного вида от больного в процессе заболевания.

Врач-клиницист должен знать, что положительный результат бактериологического исследования в отношении биологического материала, полученного из в норме стерильного очага (кровь, плевральная жидкость, спинномозговая жидкость, пунктат органа или ткани), всегда тревожный результат, требующий немедленных действий по оказанию медицинской помощи.

Серологические методы исследования

В основе всех серологических реакций лежит взаимодействие антигена и антитела. Серологические реакции используются в двух направлениях.

С внедрением в практику лабораторий метода иммуноферментного анализа (ИФА) стало возможным определять в крови больных антитела, относящиеся к различным классам иммуноглобулинов (IgM и IgG), что существенным образом повысило информативность серологических методов диагностики. При первичном иммунном ответе, когда иммунная система человека взаимодействует с инфекционным агентов в первый раз, синтезируются преимущественно антитела, относящиеся к иммуноглобулинам класса М. Лишь позднее, на 8-12 день после попадания антигена в организм, в крови начинают накапливаться антитела иммуноглобулинов класса G. При иммунном ответе на инфекционные агенты вырабатываются также и антитела класса А (IgA), которые играют важную роль в защите от инфекционных агентов кожи и слизистых оболочек.

2. Установление родовой и видовой принадлежности микроба или вируса. В этом случае неизвестным компонентом реакции является антиген. Такое исследование требует постановки реакции с заведомо известными иммунными сыворотками.

Серологические исследования не обладают 100 % чувствительностью и специфич-ностью в отношении диагностики инфекционных заболеваний, могут давать перекрестные реакции с антителами, направленными к антигенам других возбудителей. В связи с этим оценивать результаты серологических исследований необходимо с большой осторожностью и учетом клинической картины заболевания. Именно этим обусловлено использование для диагностики одной инфекции множества тестов, а также применение метода Western-blot для подтверждения результатов скрининговых методов.

В последние годы прогресс в области серологических исследований связан с разработкой тест-систем для определения авидности специфических антител к возбудителям различных инфекционных заболеваний.

Авидность - характеристика прочности связи специфических антител с соответствующими антигенами. В ходе иммунного ответа организма на проникновение инфекционного агента стимулированный клон лимфоцитов начинает вырабатывать сначала специфические IgM-антитела, а несколько позже и специфические IgG-антитела. IgG-антитела обладают поначалу низкой авидностью, то есть достаточно слабо связывают антиген. Затем развитие иммунного процесса постепенно (это могут быть недели или месяцы) идет в сторону синтеза лимфоцитами высокоспецифичных (высокоавидных) IgG-антител, более прочно связывающихся с соответствующими антигенами. На основании этих закономерностей иммунного ответа организма в настоящее время разработаны тест-системы для определения авидности специфических IgG-антител при различных инфекционных заболеваниях. Высокая авидность специфических IgG-антител позволяет исключить недавнее первичное инфицирование и тем самым с помощью серологических методов установить период инфицирования пациента. В клинической практике наиболее широкое распространение нашло определение авидности антител класса IgG при токсоплазмозе и цитомегаловирусной инфекции, что дает дополнительную информацию, полезную в диагностическом и прогностическом плане при подозрении на эти инфекции, в особенности при беременности или планировании беременности.

Метод полимеразной цепной реакции

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) являющаяся одним из методов ДНК-диагностики, позволяет увеличить число копий детектируемого участка генома (ДНК) бактерий или вирусов в миллионы раз с использованием фермента ДНК-полимеразы. Тестируемый специфический для данного генома отрезок нуклеиновой кислоты многократно умножается (амплифицируется), что позволяет его идентифицировать. Сначала молекула ДНК бактерий или вирусов нагреванием разделяется на 2 цепи, затем в присутствии синтезированных ДНК-праймеров (последовательность нуклеотидов специфична для определяемого генома) происходит связывание их с комплементарными участками ДНК, синтезируется вторая цепь нуклеиновой кислоты вслед за каждым праймером в присутствии термостабильной ДНК-полимеразы. Получается две молекулы ДНК. Процесс многократно повторяется. Для диагностики достаточно одной молекулы ДНК, то есть одной бактерии или вирусной частицы. Введение в реакцию дополнительного этапа - синтеза ДНК на молекуле РНК при помощи фермента обратной транскриптазы - позволило тестировать РНК-вирусы, например, вирус гепатита С. ПЦР - это трехступенчатый процесс, повторяющийся циклично: денатурация, отжиг праймеров, синтез ДНК (полимеризация). Синтезированное количество ДНК идентифицируют методом иммуноферментного анализа или электрофореза.

В ПЦР может быть использован различный биологический материал - сыворотка или плазма крови, соскоб из уретры, биоптат, плевральная или спинномозговая жидкость и т.д. В первую очередь ЦПР применяют для диагностики инфекционных болезней, таких как вирусные гепатиты В, С, D, цитомегаловирусная инфекция, инфекционные заболевания, передающиеся половым путем (гонорея, хламидийная, микоплазменная, уреаплазменная инфекции), туберкулез, ВИЧ-инфекция и т.д.

Преимущество ПЦР в диагностике инфекционных заболеваний перед другими методами исследований заключается в следующем:

возбудитель инфекции может быть обнаружен в любой биологической среде организма, в т.ч. и материале, получаемом при биопсии;
возможна диагностика инфекционных болезней на самых ранних стадиях заболевания;
возможность количественной оценки результатов исследований (сколько вирусов или бактерий содержится в исследуемом материале);
высокая чувствительность метода; например чувствительность ПЦР для выявления ДНК вируса гепатита В в крови составляет 0,001 пг/мл (приблизительно 4,0 . 10 2 копий/мл), в то время как метода гибридизации ДНК с использованием разветвленных зондов - 2,1 пг/мл (приблизительно 7,0 . 10 5 копий/мл).

Читайте также: