Взаимодействие вирусов при смешанных инфекциях

Данный автореферат диссертации должен поступить в библиотеки в ближайшее время
Уведомить о поступлении

480 руб. | 150 грн. | 7,5 долл. ', MOUSEOFF, FGCOLOR, '#FFFFCC',BGCOLOR, '#393939');" onMouseOut="return nd();"> Диссертация - 480 руб., доставка 10 минут , круглосуточно, без выходных и праздников

240 руб. | 75 грн. | 3,75 долл. ', MOUSEOFF, FGCOLOR, '#FFFFCC',BGCOLOR, '#393939');" onMouseOut="return nd();"> Автореферат - 240 руб., доставка 1-3 часа, с 10-19 (Московское время), кроме воскресенья

Гостева, Вера Викторовна. Взаимодействие бактерий, вирусов и эукариотических клеток в условиях смешанной инфекции (электронно-микроскопическое исследование) : Дис. . канд. биологические науки : 03.00.07.-

Содержание к диссертации

Глава I. Экспериментальное изучение смешанных бактериально-вирусных инфекций 9

1. Начальные этапы взаимодействия в системе вирус-бактерия клетка 13

2. Исход, динамика и типы процессов взаимодействия вирусов, бактерий и эукариотических клеток 18

3. Смешанные инфекции с участием онковирусов 26

ГЛАВА I. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

1. Бактериальные культуры, использованные в работе 30

3. Клеточные культуры 32

4. Культивирование перевиваемых клеток 33

5. Среды, используемые для выращивания бактерий 33

6. Модели смешанных инфекций 33

7. Инфицирование клеточного монослоя бактериями и вирусами и изучение кинетики адсорбции 34

8. Электронно-микроскопические методы 35

9. Объемная реконструкция изображений, получение стереопар 37

10. Световая микроскопия 38

11. Методы количественного анализа результатов 38

ГЛАВА 2. АДСОРБЦИЯ БАКТЕРИЙ НА МОНОСЛОЕ КЛЕТОК, ИНФИЦИРОВАННЫХ ВИРУСОМ.

I. Поверхностные структуры бактерий, участвующих в адсорбции

2. Адсорбция вирионов онковирусов на поверхности бактерий 56

3. Влияние репликации вируса на адсорбцию бактерий на эукариотических клетках 61

ГЛАВА Ш. ПРОНИКНОВЕНИЕ, КОЛОНИЗАЦИЯ И ИСХОДЫ, ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ БАКТЕРИЙ С КЛЕТКАМИ МЛЕКОПИТАЮЩИХ, ИНФИЦИРОВАННЫМИ ВИРУСОМ 1. Проникновение бактерий в эукариотическую клетку. 65

2. Изменения эукариотических клеток под влиянием бактерий 83

3. Динамика размножения и изменение морфологии бактерий в системе бактерия клетки перевиваемых линий 92

ГЛАВА ІУ. МОРФОЛОГИЯ И МОРФОГЕНЕЗ ОНКОВИРУСОВ В УСЛОВИЯХ ИНФЕКЦИИ, АССОЦИИРОВАННОЙ С БАКТЕРИЯМИ.

1. Морфология онковирусов, реплицирующихся в клетках изученных перевиваемых линий 105

2. Морфогенез онковирусов типа С в условиях ассоциированной с бактериями инфекции 107

2.1. Модель онковирус типа С-перевиваемые клетки

L929 M,tuberculosis штамм БЦЖ 109

2.2. Модель: онковирус типа Д-клетки перевиваемой линии НЕр-2-микобактерия туберкулеза

2.3. Модель: онковирус типа Д-клетки перевиваемой линии HEp-2-S. pneumoniae бес капсульный вариант) 112

2.4. Модель: онковирус типа С-клетки перевиваемой линии Л-41-вирус живой коревой вакцины 114

3. Аномальные формы онковирусов в условиях инфекции ассоциированной с бактериями 118

3.1. Аномальные величины и внутренней организации внеклеточных вирионов 118

3.2. Аномальные формы онковирусов, образующихся в результате дифференцировки незрелых вирионов 119

3.3. Аномальные формы зрелых вирионов типа С 122

3.4. Включение компонентов эукариотической клетки в состав вирионов онковирус 124

3.5. Аномалии внутрицитоплазматических частиц типа А.. 124

Введение к работе

В настоящее время смешанные инфекции представляют собой важную проблему инфекционной патологии человека и животных (Бароян, Портер, 1975).

Клиническое течение бактериально-вирусных смешанных инфекций отличается большей тяжестью по сравнению с заболеваниями, вызванными только вирусами или только бактериями ( Finland et al., 1942; Шкребко и др., 1967; Ацерова и др., 1967). Картина заболевания в условиях смешанной инфекции резко меняется, создавая диагностические трудности (Бондаренко, 1969). Наиболее часто случаи смешанной бактериально-вирусной инфекции регистрируются при заболеваниях респираторного и желудочно-кишечного трактов (Ритова, 1967; Goodwin, 1967; Young, La Forse , 1972).

Инфекционный процесс, вызываемый ассоциацией бактерий с вирусами широко изучают на различных моделях как in vivo; так и in vitro. Однако в имеющихся работах можно чаще всего найти описание результата взаимодействия, реже - рассмотрение механизмов, вскрывающих сущность происходящих изменений. На наш взгляд, существенный вклад в понимание механизмов реализации смешанной инфекции может внести морфологическое исследование взаимодействия ассоциантов системы, выполненное на ультраструктурном уровне. Это касается, в первую очередь, изучения начального этапа взаимодействия возбудителей с эукариотическими клетками, который является пусковым и определяющим в развитии почти всех инфекционных процессов (Петровская, 1984). Имеющиеся в настоящее время данные не отражают полной картины начальных этапов взаимодействия в системе бактерия - вирус - эукариотическая клетка ( Pan et al., 1979; Selinger, 1981j Sanford et al., 1982).

При моделировании бактериально-вирусных смешанных инфекций на перевиваеглых клеточных линиях наиболее часто использовали следующие модели: вирус гриппа + стафилококк или стрептококк, вирус Коксаки + шигеллы или энтеропатогенные Е.СОІІ (Токарь и др., 1971; Шендорович и др., 1973; Эссель, 1978). Однако авторы опубликованных работ не учитывали, что в геном клеток позвоночных интегрирована генетическая информация онковирусов, которая в клетках перевиваемых линий нередко экспрессируется до морфологически выраженных вирионов. Поэтому онковирусы естественным образом принимают участие во взаимодействии возбудителей, моделируемом на перевиваемых клетках.

Создание моделей смешанной бактериально-вирусной инфекции с участием различных по своим биологическим свойствам патогенных и условно-патогенных бактерий и онковирусов и изучение на этих моделях супрамолекулярных основ взаимодействия инфекционных агентов может способствовать выяснению механизмов вирусного канцерогенеза и коканцерогенеза. Именно такого рода экспериментальные разработки составили предмет настоящего исследования, выполненного на перевиваемых клеточных линиях, инфицированных рядом патогенных и условно-патогенных бактерий.

Целью настоящего исследования явилось изучение ультраструктурных особенностей взаимодействия различных таксономических групп бактерий с клетками млекопитающих в условиях смешанной инфекции с онковирусами типов Д и С. При проведении исследования перед нами стояли следующие конкретные задачи:

1. Изучить ультраструктурные особенности адсорбции и проникновения бактерий в эукариотические клетки в условиях смешанной бактериально-вирусной инфекции.

2. Разработать метод количественной оценки начальных этапов взаимодействия бактерий и аукариотических клеток в условиях смешанной бактериально-вирусной инфекции.

S. Изучить варианты исходов бактериально-клеточных взаимодействий на ультраструктурном уровне в условиях смешанной бактериально-вирусной инфекции перевиваемых клеточных линий.

4. Выявить влияние бактериальной инфекции на морфогенез онковирусов в условиях смешанной инфекции перевиваемых клеточных линий.

Основные результаты проведенных исследований сводятся к следующему:

Ds.coli НЮ407 CFAJ и уропатогенные штаммы, несущие Р фим-брии (Е.СОІІ ISI2 и Е.СОІІ 1356), прикрепляются к гликокаликсу эукариотических клеток посредством капсулоподобного покрова, выявляемого электронно-микроскопически с использованием рутениевого красного. При этом фимбрии бактерий подгибаются и распластываются по поверхности эукариотической клетки.

2) Вирус саркомы Кирстена не влияет на адсорбционную способность клеток Е5 по отношению к Е ООІІ Н0407 CPAt . В то же время прединфицирование монослоя клеток вирусом живой коревой вакцины существенно увеличивает адсорбцию той же бактерии.

3) Вирионы онковирусов адсорбируются на фимбриях и капсулоподобном покрове Е.СОІІ, капсулоподобном покрове s.typhi, на остаточных структурах капсулы бескапсульного вариантаs.pneumoniae, а также на микрокапсуле м.tuberculosis.

4) Поглощение (фагоцитоз) бактерий с адсорбированными на их поверхностях: вирионами онковирусов, а также захват вирионов, находящихся в зоне образования клеткой отростков, подобных псевдоподиям макрофагов, приводит к образованию фагосом, содержащих как бактерии, так и вирусы. Это явление обнаружено на моделях S.typhi - онковирус типа С - клетки перевиваемой линии L929 и s.pneumoniae - онковирус типа Д - клетки перевиваемой линии НЕр-2.

5) Образование фагосом, содержащих наряду с бактерией онковирусы, может происходить и путем почкования вирионов онковирусов в фагосомы, содержащие бактерии (модель м.tuberculosis шт.БДЖ -онковирус типа С - клетки перевиваемой линии L929) 6) длительное сохранение интактных клеток м.tuberculosis в фагосомах клеток L приводит к увеличению продукции онковирусов этими клетками. Внеклеточная популяция онковирусов, продуцируемая клетками в условиях бактериального инфицирования, содержит до 6,4$ аномальных форм.

СМЕШАННЫЕ ИНФЕКЦИИ [позднелат. infectio заражение; син.:ассоциированные инфекции, сателлитные инфекции, микстинфекции) — процесс, развивающийся в макроорганизме или (и) отдельных клетках эукариотов, прокариотов при сочетанном воздействии двух и более возбудителей: вирусов, бактерий, спирохет, микоплазм, риккетсий, хламидий, грибков и простейших.

Среди инф. болезней человека на долю С. и. приходится до 50% случаев. Наряду с трудностью диагностики, профилактики и лечения С. и. нередко характеризуются тяжелым клин, течением и высокой смертностью.

При С. и. (также, как и при моноинфекциях ) определяющее значение имеют три фактора: биол. свойства возбудителя, особенности организма хозяина и влияние окружающей среды (применительно к человеку — также социальные условия). Однако взаимодействие нескольких инф. агентов с многоклеточным или одноклеточным организмом является сложным и качественно новым процессом, к-рый не может быть выражен простым суммированием признаков, характерных для каждой из составляющих его моноинфекций. Вследствие этого С. и. необходимо рассматривать как особую форму инф. процесса, основные закономерности к-рого (типы, формы, и уровни С. п., факторы, способствующие их формированию в условиях in vitro и in vivo, исходы взаимодействия ассоциантов — возбудителей С. п., особенности диагностики, профилактики и лечения С. и. и др.) являются предметом изучения биогеоценологии — раздела экологии, посвященного гл. обр. взаимоотношениям между компонентамибиогеоценозов (см.).

С. и. протекают в острой, хронической персистентной и латентной формах. Частный случай С. и. — вторичная инфекция (суперинфекция), когда к развившейся инф. болезни присоединяется новое инф. заболевание. Нередко вторичная инфекция возникает при нарушении симбиоза макроорганизма и его аутофлоры (см.Симбиоз), вследствие чего происходит активизация условно-патогенных микробов (см.) — стафилококка, кишечной палочки и др.

Возбудителями С. и. могут быть разные представители одного сем. микроорганизмов (напр., вирус — вирус) либо возбудители, относящиеся к различным таксонам (напр. вирус — бактерия, бактерия — простейшие и др.). С. и. может реализовываться на молекулярном уровне, внутриклеточно, в пределах одной популяции клеток или организма. Примером С. и. на молекулярном уровне может служить так наз. интеграционная вирусная инфекция, при к-рой геномы двух и более он-когенных вирусов (напр., вирусов саркомы и лейкоза птиц) встраиваются в геном клетки.

Взаимодействие между различными возбудителями в процессе развития С. и. может приводить к их непосредственному контакту (напр., вирусы адсорбируются на поверхности нек-рых бактерий, микоплазм и вирусов (рис. 1 а, б). Неродственные вирусы одновременно проникают в клетку и размножаются либо раздельно в ядре и цитоплазме (рис. 2, а), либо только в ядре клетки (рис. 2, б) или только в цитоплазме (рис. 2, в). В том случае, если вирусы размножаются в топографической близости друг от друга, наблюдаются различные формы генетических (на уровне их геномов) и негенетических (на уровне продуктов вирусных генов) взаимодействий (см.Негенетические взаимодействия вирусов), в частности образование так наз. двойных вирусов (рис. 2, г), различных рекомбинантов с новыми свойствами или фенотипически смешанных вирионов. Подобные формы приобретают способность размножаться в резистентных для исходного возбудителя клеточных системах. При С. и. возбудители, взаимодействуя друг с другом, могут существенно изменять свои патогенные свойства. Так, напр., А. А. Смородинцев и сотр. в 1938 г. установили, что одновременное введение животным вируса гриппа и не летальных (для моноинфекции) доз стрептококка приводит к развитию тяжелого генерализованного сепсиса, заканчивающегося быстрой гибелью подопытных животных. При этом вирулентность бактерий возрастала. Свойства прокариотов могут изменяться в зависимости от наличия в них бактериофагов (профагов). Классическим примером может служить бактерия дифтерии, у к-рой выработка токсина зависит от наличия в ней профага; при утрате профага бактерия теряет способность синтезировать токсин, при приобретении — восстанавливает.

А. Ф. Билибин (1970) считает, что при С. и. взаимодействие авирулентных и вирулентных микробов в организме часто протекает на фоне выраженной аллергизации и аутоиммунизации, что сопровождается нарушением резистентности к бактериальным агентам.

Известно как ингибирующее, так и активирующее действие микоплазм на вирусы при С. п. Описано активирующее действие на вирусы нек-рых простейших и грибков. Напр., при инфицировании культуры клеток НЕр-2 токсоплазмами и вирусами (рис. 3) происходит стимуляция размножения вирусов. Т. о., возможны следующие основные исходы взаимодействия двух и более возбудителей в процессе смешанной инфекции: 1) независимое размножение; 2) экзальтация — усиление размножения одного или всех ассоциантов; 3) интерференция — подавление размножения одного или всех ассоциантов; 4) комплементация — специфическая зависимость размножения одного ассоцианта от другого. Явление комплементации особенно широко распространено в ассоциациях онкогенных вирусов.

Клин, проявления С. и. своеобразны, т. к. не характеризуются суммой симптомов, специфичных для каждой из составляющих их моноинфекций. При нек-рых С. и. не наблюдается изменение патол. процесса (по сравнению с моноинфекциями), при других С. и. развиваются антагонистические отношения между возбудителями (напр., кишечной палочкой и шигеллами или сальмонеллами, холерным вибрионом и нек-рыми кишечными бактериями). Однако чаще С. и. сопровождаются активизацией патол. процесса (брюшной тиф, паратифы, туберкулез и стрептококковая или пневмококковая инфекция, корь и дифтерия, грипп и менингококковая инфекция, аденовирусная и стафилококковая инфекции и др.).

Диагностика С. и. связана со значительными трудностями и требует комбинированного использования всех современных вирусологических и микробиологических методов исследования (см.Бактериологические методики,Вирусологические исследования).

Лечение и профилактика зависят от вида С. и.

Библиография: Авакян А. А. и Быковский А. Ф. Атлас анатомии и онтогенеза вирусов человека и животных, М., 1970, библиогр.; Бароян О. В. и Портер Д. Р. Международные и национальные аспекты современной эпидемиологии и микробиологии, М., 1975; Общая и частная вирусология, под ред. В. М. Жданова и С. Я. Гайдамович, т. 1, М., 1982; Погодина В. В. К проблеме вирусных ассоциаций, Вопр. виру-сол., № 1, с. 8, 1977, библиогр.; С о-ловьев В. Д., Хесин Я. Е. и Быковский А. Ф. Очерки по вирусной цитопатологии, М., 1979; Эссе л ь А. Е., Пантелеева Л. Г. и Мясненко А. М. Вирусобактериальные ассоциации, Ростов н/Д., 1978; Мауг А. и. Kohler W. Mischin-fektionen, Jena, 1980.

Источник: Большая Медицинская Энциклопедия (БМЭ), под редакцией Петровского Б.В., 3-е издание

Эрик Марко говорит о том, что в последнее время стало уже относительно привычным на последней стадии откорма видеть свиней с симптомами заболеваний респираторной системы, которые плохо поддаются лечению антибиотиками. При этом, первое, что обычно приходит на ум - это вирус РРСС. В то же время, вероятность наличия смешанной вирусной инфекции рассматривается намного реже..

Двойная инфекция свиней на откорме респираторным коронавирусом или вирусом гриппа на фоне вируса репродуктивно-респираторного синдрома свиней: клиническое и вирусологическое исследование. VanReeth K, Nauwynck H and Pensaert M (1996). Veterinary Microbiology 48: 325–335

Настоящее исследование проводилось с целью выявления двойной инфекции РКВС или ВСГ на фоне РРССВ. Еще одной целью было определить, интерфирирует ли РРССВ с репликацией РКВС или ВСГ.

36 поросят 10-недельного возраста (сероотрицательных на РРССВ, ВСГ и РКВС) были разбиты на 8 групп: контрольная группа; только РРССВ; только РКВС; только ВСГ; РРССВ+РКВС; РРССВ+ВСГ (3 группы).

Спустя 3 дня после первичной инфекции вирусом РРССВ были проведены вторичные инфекции (РКВС и ВСГ).

Поросята ежедневно проверялись на наличие таких симптомов, как повышенная температура, учащенное или затрудненное дыхание и кашель. Кроме того, поросят ежедневно взвешивали и брали у них мазки из носа и образцы крови.

У свиней, инфицированных только РРССВ, отмечалась лихорадка (один день).

У свиней, инфицированных ВСГ, лихорадка длилась только один день. Также наблюдались отдельные респираторные симптомы (у свиней, вынужденных двигаться) и временное нарастание дыхательного ритма (65/мин). Однако, после коинфекции вирусом РРСС значительное повышение температуры, доходившее до 41,40С, у свиней первой группы (РРССВ) наблюдалось в течение уже 10 дней.
Животные были вялыми, подавленными и анорексичными. Выраженные симптомы респираторного заболевания наблюдались у них с 4 по 10-й день после коинфекции.

Воздействие болезни на другие две группы (РРССВ-ВСГ) было умеренным, по сравнению с первой группой.

РКВС не вызывал никаких последствий. Однако, если животные предварительно уже были заражены РРССВ, инокуляция свиней РК-вирусом приводила к повышению у них температуры на срок до 9 дней и развитию симптомов респираторного заболевания.

Данное исследование подтверждает гипотезу о том, что клиника при инфекции вирусом РРСС может обостряться в результате коинфекций распространенными респираторными вирусами. Кроме того, оно демонстрирует, что РРССВ может усугублять относительно мягкое воздействие на организм других респираторных патогенов.

Мнение практика: Enric Marco

За последние годы стало уже относительно привычным на последней стадии откорма видеть свиней с симптомами заболеваний респираторной системы, которые плохо поддаются лечению антибиотиками. В такой ситуации мы, практически без исключений, предполагаем протекание вирусного процесса, осложненного вторичной бактериальной инфекцией. Фактически, отправляя в лабораторию материал для тестов на определение вируса, мы ожидаем результаты во вполне определенной форме – это РРССВ или нет? В то же время, вероятность наличия смешанной вирусной инфекции, подобной тем, что изучались в данном исследовании, рассматривается намного реже.

Данная работа демонстрирует, что сочетание РРССВ с другими вирусами, обладающими респираторным тропизмом, приводит к обострению клиники. И если вероятность присутствия вируса свиного гриппа на фоне РРССВ в сложных случаях рассматривается уже достаточно нередко, то о респираторном коронавирусе свиней никто и не вспоминает. Мы издавна знаем, что этот патоген имеется в каждом поголовье и на каждой ферме и, фактически, именно он – объяснение тому, что в Европе нет вспышек трансмиссивного гастроэнтерита. Правда, мало кто об этом поммнит, будучи вынужденным вести борьбу с респираторными симптомами. А не им ли объясняются некоторые из респираторных процессов, наблюдаемые в конце откорма? Изжить на ферме вирус РРСС – задача не из простых, но легче ли одолеть вирус гриппа или респираторный коронавирус?

Пусто-занято	Непрерывный
Отход (%)	1.8	3.4
Среднесуточный привес (г/сут)	548	512
Конверсия корма	3.84	4.1

С экономической точки зрения, производству нужно не идеальное здоровье животных само по себе, а такой контроль над ситуацией, когда дополнительные расходы не ухудшают прибыль.

Доктор ветеринарных наук, профессор Зигмунд Пейсак.

В последние 20 лет болезни дыхательной системы стали основной причиной потерь в свиноводстве. При традиционных системах разведения свиней и в то время, когда перемещение свиней внутри стран и между странами были весьма ограниченными, дело обстояло совсем иначе, но сейчас основной причиной появления болезней дыхательной системы у свиней являются, как правило, бактериальные и вирусные смешанные инфекции.

К клиническому проявлению этих заболеваний располагают неблагоприятные условия окружающей среды, большие стада свиней и концентрация свинарников в определенных регионах и на ограниченной территории, что ранее рассматривалось в ряде других публикаций. Неблагоприятные условия окружающей среды, прежде всего, высокая влажность воздуха и большая суточная амплитуда температур, являются наряду с другими факторами, причиной ослабление местного и общего (системного) иммунитета к инфекции.

Микроорганизмы, являющихся этиологическими факторами заболеваний дыхательной системы, можно образно разделить на: 1) первичные и 2) осложняющие процесс.

Клинически, при смешанных инфекциях, отмечаются поражения носовой полости и верхних дыхательных путей (чихание, кашель), а также легких (учащенное дыхание). Из-за гипоксии наблюдается слабость и вялость животных. При вскрытии видны воспалительные, продуктивные или атрофические изменения в носовых раковинах, воспаление гортани и трахеи, бронхопневмония, а также воспаление паренхимы легких. Эти состояния могут отмечаться параллельно или выступать как основное изменение, как при плеврите накопление жидкости в плевральной полости.

Было установлено, что в свинарниках, где было не менее 20 свиноматок, частота заражения и виды микроорганизмов принципиально не отличались от ситуации в других странах Европы (табл. 1). При этом во все стадах было обнаружено, по крайней мере, два важных патогена (табл. 2).

Результаты экспериментальных и полевых исследований имеющиеся в мировой научной литературе суммированы в табл. 3, 4, 5. Как видно, течение смешанных инфекций было более острое, чем при одновалентных (моноэтиологических) инфекциях, которые в полевых условиях уже практически почти не встречаются.

Как показывают обобщенные в таблицах данные, механизм действия смешанных инфекций, прежде всего на функционирование, иммунной системы весьма разнообразен.

Стоит отметить, что количество видов микроорганизмов, которые играют роль в этиологии респираторных инфекций, растет, что в известной степени связано, с совершенствованием методов диагностики. Данные на эту тему (табл. 6) были представлены в работе американских исследователей (Опресниг и соавт). Основные заболевания и этиологические агенты, представлены в таблицах 7 и 8.

Многие из перечисленных микроорганизмов встречаются повсеместно (практически везде) и, как правило, всегда присутствуют в стаде. Новые микроорганизмы, часто отвечающие за внезапное появление заболевания, попадают в стадо извне различными способами, чаще всего аэрозольным путем.

Таблица 7. Основные заболевания дыхательной системы, при которых наблюдается чихание

Таблица 8. Основные заболевания дыхательной системы, при которых наблюдается кашель

Следует очень четко представлять, что интенсивность патологических изменений зависит от взаимодействия этиологических агентов, вызвавших заболевание (бактерий и вирусов), а также и от факторов окружающей среды, типа производства, принципов управления стадом, генотипа, возраста свиней и их иммунного статуса. Хотя ветеринары, как правило, большее внимание уделяют этиологии заболевания.

Необходимо иметь в виду, что неинфекционные факторы существенно влияют на скорость распространения инфекционного агента, динамику его размножения у животных, а также на иммунитет животного. Любые неблагоприятные факторы окружающей среды вызывают стресс у животных и существенно ослабляют иммунную систему.

Неинфекционные факторы, участвующие в этиологии PRDC можно разделить на 3 группы.

1. связанные с окружающей средой;

2. зависящие от способа управления стадом;

3. зависящие от самого животного.

Самые сильные стрессовые факторами в аспекте PRDC - существенное изменение температуры воздуха в течение суток, высокая влажность, запыленность и высокая концентрация аммиака в свинарнике. Очень неблагоприятное влияние на иммунную систему оказывают микотоксины и плохое кормление.

Проявление PRDC четко коррелирует с возрастом. Заболевание обычно проявляется после 12 недель жизни, то есть после полной потери пассивного (колострального) иммунитета, а система активного иммунитета еще полноценно не начала функционировать.

Существенно ослабляют иммунную систему, и тем самым, повышают риск появления PRDC микроорганизмы, имеющие иммуносупрессивные свойства. Прежде всего, это вирусы РРСС и PCV2.

Чрезвычайно важным фактором, влияющим на динамику распространения заболевания и состояние иммунной системы, является смешивание свиней не только из разных свинарников, но и с разных загонов в пределах одного и того же помещения.

Подводя итог, кажется, что как свиноводы, так и ветеринары не всегда правильно оценивают значимость неинфекционных факторов в этиологии PRDC.

Таблица 9. Образцы патологического материала, которые необходимо отбирать для диагностики, в зависимости от используемого теста (согл. Аменны; с дополнениями).

Таблица 6. Тесты для идентификации микроорганизмов, вызывающих комплекс респираторных заболеваний свиней (согл. Сегалесу с дополнениями)Условные обозначения: ПЦР – полимеразная цепная реакция Прижизненно в диагностических целях берутся мазки из носа. Особенно это важно для идентификации вирусов гриппа. В таблице 5 представлены тесты для идентификации микроорганизмов, вызывающих PRDC.

В целом, к результатам лабораторных исследований в отношении PRDC, следует относиться с осторожностью. Выделение некоторых бактерий, например, Str. suis, H. parasuis еще не означает, что они причина заболевания. Кроме того, даже если микроорганизмы не были выделены, это еще не свидетельствует, что инфекции нет. Кроме того, выделение из носовой слизи P. multocida не является подтверждением ее участие в этиологии инфекционного атрофического ринита, если изолят не продуцирует дермонекротоксин.

Исследование крови может быть полезными, если пробы берутся у одного и того же животного во время клинического заболевания и повторно через 3-4 недели.

Жидкость бронхоальвеолярного лаважа, хотя ее редко отбирают для исследования, может быть полезной для диагностики. При правильном отборе такого рода материал даже более ценен для диагностики, чем легочная ткань, особенно в случае исследования в ПЦР, так как присутствие крови в экстракте легочной ткани делает его не пригодным для исследования в этом тесте.

Для лабораторного исследования на бактериальные инфекции не подходят пробы от свиней, которые получали антибиотики. Образцы для исследования в ПЦР не следует консервировать формалином.

Лабораторные исследования дополняют процесс постановки диагноза. Им предшествует анамнез, клиническое исследование отдельных особей и всего стада в клетках и свинарнике, а также вскрытие. Несмотря на вспомогательный характер, лабораторные исследования, определяющие этиологический фактор, играют важную роль в постановке диагноза, но необходимо правильно оценивать их результаты, так как большинство заболеваний, прежде всего на крупных фермах, имеют многофакторную этиологию, примером чего является обсуждаемый комплекс респираторных заболеваний свиней (PRDC).

Также стоит иметь в виду, что иногда менее чувствительные методы, например, иммунофлюоресценция с замороженными фрагментами тканей, позволяет обнаружить возможный патоген, в то время как чувствительные и специфичные современные тесты выявления фрагментов генома микроорганизма, как, например, ПЦР могут и не дать такого результата или еще нет соответствующих коммерческих наборов.

Таблица 1. Примеры и механизмы взаимодействия патогенов при смешанных бактериальных респираторных инфекциях свиней

Таблица 2. Примеры и механизмы взаимодействия патогенов при смешанных вирусных респираторных инфекциях свиней

Таблица 3. Примеры и механизмы взаимодействия при смешанных бактериально-вирусных респираторных инфекциях свиней.

Таблица 4. Вирусы, которые чаще всего обнаруживают при заболеваниях дыхательной системы и их значение в возникновении заболевания.

Таблица 5. Бактерии, которые чаще всего изолируют при заболеваниях дыхательной системы и их значение в возникновении заболевания.