Вирус гриппа h1n1 лабораторная диагностика

Грядет новая вспышка гриппа в сезон 2016-2017 гг. Специалисты ВОЗ прогнозируют, что в качестве возбудителей в этом сеоне будут циркулировать как вирус свиного гриппа А-Н1N1, так и гонконгский грипп — штамм А-Н3N2. В Москве и Московской области проведены мероприятия по профилактике, вакцинации групп риска, работали пункты мобильной вакцинации у метро.

Зимой 2016 г у каждого второго заболевшего гриппом жителя Москвы выявили именно вирус Н1N1. Прежние вспышки были в 2009 и 2013 гг. Вирус АН3N2 был выделен в 2014 году в Гонконге. Грипп А Н3N2 является относительно молодым штаммом и опасен тем, что пока недостаточно изучен. Эта
разновидность вируса гриппа способна спровоцировать у человека развитие осложнений с геморрагическими поражениями.

Обновлена информация про лабораторную диагностику гриппа, актуальные цены на ноябрь 2016 (в скобках — старые цены от 2013 г.).

Провериться можно и сам

остоятельно, обратившись в ближайшую независимую лабораторию. В моем списке указаны только лаборатории Москвы и Подмосковья. Но жители других городов России — Петербурга, Казани, Новосибирска, Екатеринбурга. Краснодара, Ростова и других больших и небольших городов могут уточнить на сайтах сетевых мед. лабораторий — ИНВИТРО, Ситилаб и Гемотеста, выполняется ли данные анализы в их городе.

Для исследования на грипп берут мазок из зева, носа и исследуют его методом ПЦР или иммунофлуоресценции (МФА — метод флюоресцирующих антител). Есть вариант анализа крови на антитела к свиному гриппу. Однако его скорее нужно использовать уже постфактум, выявляя штамм, который вызвал заболевание или для оценки уровня иммунитета после прививки. Поскольку в случае с гриппом H1N1 нужно получить результаты максимально быстро и сразу назначить противовирусное лечение, а антитела появляются в крови только через несколько дней, лучше использовать ПЦР мазка из зева. К тому же, это неинвазивный метод в отличие от взятия крови из вены.

1. Лаборатория Инвитро (инфо) — 2100 руб ( 980 руб )+ 399 руб взятие мазка/соскоба, срок -1 день. Материал для исследования: мазок слизи или смывы из носовых ходов. Определение штаммов вируса А : А-Н3N2 и А-Н1N1 (описание)

2. Лаборатория Гемотест (инфо) анализ на Вирусы гриппа А и В (антигенный тест) — 1205 рублей ( 850 руб. ), срок — 2 дня, проводится ПЦР исследование материала.

4. ЦНИИ Эпидемиологии (CMD) (инфо) 1 155 руб. ( 990 рублей ), 2 рабочих дня. Проводится ПЦР исследование отделяемого носоглотки для определения РНК вируса гриппа A, A/H1N1/CA/2009, B (описание). Стоимость забора соскоба/мазка — 390 руб. Есть также более полное исследование на все виды вируса гриппа и др. ОРВИ с названием теста — «Диагностика вирусных инфекций дыхательных путей (грипп и ОРВИ)«. При этом определяются также коронавирус, риновирус, аденовирус.

5. Научный центр молекулярно-генетических исследований (сайт dnk-diagnostika.ru) — стоимость анализа на свиной грипп (Вирус свиного гриппа А Н1N1/СА/2009) 950 рублей, исследуют мазок из носоглотки методом ПЦР.

6. Лаборатория Ниармедик (сайт nrlab.ru) — определение РНК вируса гриппа А и В, парагриппа 1,2,3,4 типов в мазке (37.3.4), анализ сделают за 3 рабочих дня и 650 руб. ( 590 руб. ).

7. Лаборатория ЦЭЛТ (www.celt.ru) — Вирусы гриппа A, B, A/H1N1 (свиной грипп) — стоимость исследования 950 руб.

8. Лаборатория Дитрикс Медикал (инфо) — 950 рублей, срок — 1 день, проводится определение антигенов вирусов гриппа А и В (в том числе и грипп субтип А/Н1N1) — описание теста. Материал для исследования: Мазки из носа, горла или носоглотки, аспират из назофарингеальной и назальной полостей. Взятие мазка + 395 руб.

Неспецифическая профилактика свиного гриппа

• Ношение марлевой повязки (не менее 4 слоев марли, оптимально — 6 слоев) или одноразовой маски.
• Частое мытье рук, особенно во время болезни или ухода за больным. Можно использовать гели для рук с дезинфицирующим свойством, чем чаще, тем лучше
• Избегание близкого контакта с людьми с кашлем и лихорадкой, мест большого скопления людей.
• Частое проветривание помещения прохладным воздухом
• При появлении признаков болезни, оставайтесь дома и ограничьте контакты с другими людьми.
• Ведение здорового образа жизни (полноценный сон, употребление здоровой пищи, физическая активность).

• закаливание
• прием растительных препаратов, укрепляющих иммунитет – женьшень, эхинацею, лимонник,
• включение в рацион меда, продуктов, богатых витамином С (цитрусовые, клюква, плоды шиповника, малины) и антоцидов
• ежедневные промывания носа и полоскание ротовой полости

Для специфической профилактики оптимальным методом является вакцина от гриппа, которую желательно проводить ежегодно, до начала роста сезонной заболеваемости, в начале осени.

По поводу того, какие вакцины лучше или хуже. Любые вакцины лучше. Какая есть, такую и применяйте. Отечественная, зарубежная, все работают, все достигают своей цели — формируют антитела против штаммов гриппа, которые в виде антигенов входят в состав каждой из вакцин.

Ограничений по прививке от гриппа нет и быть не может. И в первую очередь прививаться должны хронические больные — астматики, диабетчики, гипертоники, онкологические, эндокринологические, неврологические и прочие. Если у человека легкое ОРВИ без температуры — смело прививать. Если с температурой — прививать после её нормализации, не дожидаясь исчезновения всех симптомов. Дети до 8-9 лет, которые ни разу гриппом не болели и ни разу не прививались, для эффективной иммунизации должны получить две дозы вакцины с интервалом в 4 недели. Иммунитет формируется на 2-4 неделе после законченной вакцинации.

Таблица 1.

Выделение вирусов

Город	Общ. число обсл.	Кол-во выделенных вырусов
		H1	H3	B	H1pdm09	Нети- пир.	Всего
БЛ НИИГ (абс)	61	0	2	7	3	0	12
(%)		0,0	3,3	11,5	4,9	0,0	19,7
БЛ ИВ (абс)	39	0	2	2	4	0	8
(%)		0,0	5,1	5,1	10,3	0,0	20,5
ВСЕГО (абс)	100	0	4	9	7	0	20
(%)		0,0	4,0	9,0	7,0	0,0	20,0

Таблица 2.

Иммунофлуоресцентная диагностика

Город	Общ. число обсл.	Грипп			Парагрипп			AD	RS	Всего
		H1+H1pdm09	H3	B	I	II	III
БЛ НИИГ (абс)	724	10	3	2	6	29	22	47	32	151
(%)	1,4	0,4	0,3	0,8	4,0	3,0	6,5	4,4	20,9
БЛ ИВ (абс)	103	3	1	1	1	5	6	8	6	31
(%)	2,9	1,0	1,0	1,0	4,9	5,8	7,8	5,8	30,1
ВСЕГО (абс)	827	13	4	3	7	34	28	55	38	182
(%)	1,6	0,5	0,4	0,8	4,1	3,4	6,7	4,6	22,0

Таблица 3.

ПЦР-диагностика

Город	Общ. число обсл.	Грипп						ПГ	AD	RS
		A (субтип не определен)	H1	H3	H5	B	H1pdm09
БЛ НИИГ (абс)	2816	8 / 2816	0 / 2816	12 / 2816	0 / 0	35 / 2816	29 / 2816	9 / 1594	14 / 1594	28 / 1594
(%)	0,3	0,0	0,4	-	1,2	1,0	0,6	0,9	1,8
БЛ ИВ (абс)	681	1 / 681	0 / 681	1 / 681	0 / 0	11 / 681	2 / 681	29 / 388	2 / 388	13 / 388
(%)	0,1	0,0	0,1	-	1,6	0,3	7,5	0,5	3,4
ВСЕГО (абс)	3497	9 / 3497	0 / 3497	13 / 3497	0 / 0	46 / 3497	31 / 3497	38 / 1982	16 / 1982	41 / 1982
(%)	0,3	0,0	0,4	-	1,3	0,9	1,9	0,8	2,1

На 16 неделе 2020 г. уровень регистрируемой заболеваемости населения гриппом и ОРВИ в целом по стране понизился, по сравнению с предыдущей неделей и, составив 32.1 на 10 000 населения, был ниже базовой линии (72.4) на 55.6% и ниже еженедельного эпидемического порога на 55.2%.

Лабораторными методами на 16 неделе при исследовании материалов от 3497 больных гриппом и ОРВИ в 45 городах зарегистрировано 99 ( 2.8% ) случаев гриппа в 27 городах, в том числе 31 случай гриппа A(H1N1)pdm09 в 13 городах, 13 случаев гриппа A(H3N2) в 6 городах, 9 случаев несубтипированного гриппа А в 5 городах и 46 случаев гриппа типа В в 15 городах.

На 16 неделе в клеточной культуре МDCK выделено 20 вирусов гриппа, в том числе 7 вирусов гриппа A(H1N1)pdm09, 4 вируса гриппа A(H3N2) и 9 вирусов гриппа типа В. Всего с начала сезона выделено 1253 вируса гриппа, в том числе 474 вируса А(H1N1)pdm09, 241 вирус A(H3N2) и 538 вирусов гриппа типа В.

Антигенная характеристика. С начала сезона в НЦГ в Москве и Санкт-Петербурге антигенно охарактеризовано 652 вируса гриппа, в том числе 271 вирус A(H1N1)pdm09, 82 вируса A(H3N2) и 299 вирусов гриппа типа В, выделенных в разных городах страны. Все штаммы A(H1N1)pdm09 антигенно подобны современному вакцинному штамму A/Brisbane/02/2018, за исключением 5 вирусов гриппа A(Н1N1)pdm09, взаимодействующих с антисывороткой к вакцинному штамму в сниженных титрах; 60 вирусов гриппа A(H3N2) были подобны референс-штамму A/Сингапур/INFIMH-16-0019/2016, 4 штамма - его дрейф варианты, 3 вируса близкородственны современному вакцинному штамму А/Канзас/14/2017. 298 вирусов гриппа В принадлежали Викторианской линии, 39 из них были антигенно близкородственны вакцинному штамму В/Колорадо/06/2017, 41 штамм оказался его дрейф-вариантом, 201 вирус был подобен вакцинному штамму В/Вашингтон/02/2019, 17 штаммов определены как его дрейф-варианты. 1 вирус гриппа типа В был отнесен к линии Ямагата и подобен референс штамму В/Пхукет/3073/2013.

Генетический анализ. В Национальном Центре по гриппу (Санкт-Петербург) отсеквенировано 442 вируса гриппа. По данным филогенетического анализа 244 вируса гриппа A(H1N1)pdm09 были отнесены к генетической подгруппе 6B.1A5 (референс-штамм A/Норвегия/3433/2018), 1 вирус – к генетической подгруппе 6B.1A7 (референс-штамм А/Словения/1489/2019). 21 вирус гриппа подтипа A(H3N2) отнесен к генетической подгруппе 3С.2a1b + Т131К (референс-штамм A/Южная Австралия/34/2019), 13 вирусов – к генетической подгруппе 3С.2а1b + T135K-B (референс-штамм A/Гонконг/2675/2019). Только один вирус A(H3N2) был подобен штамму A/Канзас/14/2017, введенному в состав вакцин на текущий сезон (клайд 3С.3а). Абсолютное большинство из 161 секвенированных вирусов гриппа типа В относилось к клайду 1А (del162-164) Викторианской линии (референс-вирус В/Вашингтон/02/2019). Один вирус гриппа В относился к клайду 3 Ямагатской линии (референс-штамм B/Пхукет/3073/2013).

Чувствительность к химиопрепаратам: Проведено изучение чувствительности 397 вирусов гриппа, в том числе 144 вирусов A(H1N1)pdm09, 56 вирусов А(H3N2) и 197 вирусов гриппа типа В, к ингибиторам нейраминидазы (озельтамивир, занамивир). Все изученные вирусы были чувствительны к нейраминидазным ингибиторам, за исключением одного штамма вируса гриппа типа В, имеющего сниженную чувствительность к занамивиру.

ОРВИ. Частота диагностирования ОРВИ негриппозной этиологии (парагрипп, аденовирусная, респираторно-синцитиальная, коронавирусная, бокавирусная, метапневмовирусная и риновирусная инфекция) составила по результатам ПЦР 9.9% , по результатам ИФА (парагрипп, аденовирусная и респираторно-синцитиальная инфекция) 19.6% .

В системе Сигнального надзора в 6 городах выявлен 91 больной ТОРИ, обследовано 19 больных ТОРИ, зарегистрировано 2 ( 10.5% ) случая несубтипированного гриппа А. 3 случая ТОРИ были обусловлены новым коронавирусом SARS-CoV-2. Один (5.3%) случай ТОРИ был обусловлен риновирусной инфекцией.

При обследовании 32 амбулаторных больных ГПЗ/ОРИ грипп не диагностирован. Расшифровано 3 (9.4%) случая заболеваний негриппозной этиологии, в том числе 2 случая - парагриппозной и один - респираторно-синцитиальной инфекции.

Таблица 1.

Выделение вирусов

Город	Общ. число обсл.	Кол-во выделенных вырусов
		H1	H3	B	H1pdm09	Нети- пир.	Всего
БЛ НИИГ (абс)	78	0	14	0	17	0	31
(%)		0,0	17,9	0,0	21,8	0,0	39,7
БЛ ИВ (абс)	116	0	10	0	13	0	23
(%)		0,0	8,6	0,0	11,2	0,0	19,8
ВСЕГО (абс)	194	0	24	0	30	0	54
(%)		0,0	12,4	0,0	15,5	0,0	27,8

Таблица 2.

Иммунофлуоресцентная диагностика

Город	Общ. число обсл.	Грипп			Парагрипп			AD	RS	Всего
		H1+H1pdm09	H3	B	I	II	III
БЛ НИИГ (абс)	708	34	4	3	28	43	27	41	32	212
(%)	4,8	0,6	0,4	4,0	6,1	3,8	5,8	4,5	29,9
БЛ ИВ (абс)	111	0	0	0	6	1	11	9	7	34
(%)	0,0	0,0	0,0	5,4	0,9	9,9	8,1	6,3	30,6
ВСЕГО (абс)	819	34	4	3	34	44	38	50	39	246
(%)	4,2	0,5	0,4	4,2	5,4	4,6	6,1	4,8	30,0

Таблица 3.

ПЦР-диагностика

Город	Общ. число обсл.	Грипп						ПГ	AD	RS
		A (субтип не определен)	H1	H3	H5	B	H1pdm09
БЛ НИИГ (абс)	1893	33 / 1893	0 / 80	67 / 1875	0 / 1057	27 / 1893	80 / 1862	29 / 1386	36 / 1386	119 / 1407
(%)	1,7	0,0	3,6	0,0	1,4	4,3	2,1	2,6	8,5
БЛ ИВ (абс)	266	0 / 266	0 / 0	13 / 226	0 / 56	1 / 266	6 / 227	7 / 153	7 / 154	9 / 154
(%)	0,0	-	5,8	0,0	0,4	2,6	4,6	4,5	5,8
ВСЕГО (абс)	2159	33 / 2159	0 / 80	80 / 2101	0 / 1113	28 / 2159	86 / 2089	36 / 1539	43 / 1540	128 / 1561
(%)	1,5	0,0	3,8	0,0	1,3	4,1	2,3	2,8	8,2

Таблица 4.

Общее количество случаев гриппа

Город	Общ. число обсл.	Кол-во диагностированных случаев гриппа
		H1	H1+H1pdm09 (по данным ИФ)	H3	A (субтип не определен)	B	H1pdm09	Кол-во диаг.
БЛ НИИГ (абс)	2330	0	34	70	33	30	114	247
(%)		0,0	1,5	3,0	1,4	1,3	4,9	10,6
БЛ ИВ (абс)	330	0	0	13	0	1	6	20
(%)		0,0	0,0	3,9	0,0	0,3	1,8	6,1
ВСЕГО (абс)	2660	0	34	83	33	31	120	267
(%)		0,0	1,3	3,1	1,2	1,2	4,5	10,0

На 15 неделе 2019 г. уровень заболеваемости населения в целом по стране понизился до 52.5 на 10 000 населения и стал ниже базовой линии (72.2) на 27.1% и ниже еженедельного эпидемического порога - на 26.2%.

Лабораторными методами на 15 неделе при исследовании материалов от 2660 больных гриппом и ОРВИ в 53 городах зарегистрировано 267 ( 10.0% ) случаев гриппа, в том числе 120 случаев гриппа A(H1N1)pdm09 в 28 городах, 83 случая гриппа A(H3N2) в 29 городах, 33 случая гриппа А в 4 городах и 31 случай гриппа В в 16 городах.

На 15 неделе выделено 54 вируса, в том числе 30 вирусов A(H1N1)pdm09 в Биробиджане (1), В. Новгороде (4), Владивостоке (1), Вологде (1), Москве (7), Н. Новгороде (4), Санкт-Петербурге (12); 24 вируса гриппа A(H3N2) в Биробиджане (1), Калининграде (1), Москве (7), Н. Новгород (7), Санкт-Петербурге (4), Томске (2), Челябинске (2). Всего с начала сезона изолировано 1252 вируса гриппа, в том числе 836 - А(H1N1)pdm09, 399 - A(H3N2) и 17 вирусов гриппа типа В.

Антигенная характеристика. С начала сезона в НЦГ (Санкт-Петербург, Москва) антигенно охарактеризовано 546 вирусов гриппа, в том числе 357 вирусов гриппа А(H1N1)pdm09, 175 вирусов A(H3N2) и 14 штаммов вируса гриппа типа В. Все вирусы гриппа А(H1N1)pdm09 были близкородственны современному вакцинному штамму А/Мичиган/45/2015, вирусы A(H3N2) - современному вакцинному штамму A/Сингапур/INFIMH-16-0019/2016, при этом 12 вирусов, выделенные в Москве, реагировали с антисывороткой к референс-штамму до 1:8 и менее гомологичного титра. 3 вируса гриппа В были отнесены к линии Виктория и подобны современному вакцинному штамму В/Колорадо/06/2017, 11 вирусов - к линии Ямагата и подобны референс-вирусу В/Пхукет/3073/2013.

Генетический анализ. С начала сезона в Национальном Центре по гриппу (Санкт-Петербург) проанализирован 101 вирус гриппа, в том числе: 58 вирусов гриппа A(H1N1)pdm09, 42 штамма вируса гриппа A(H3N2) и 1 вирус гриппа типа В. По данным генетического анализа вирусы гриппа A(H1N1)pdm09 относились к генетической подгруппе 6В.1 и подобны вакцинному штамму А/Мичиган/45/2015(H1N1)pdm09. Все исследованные штаммы подтипа А(H3N2) принадлежали к генетической подгруппе 3C.2a1b (референс штамм A/Alsace/1746/2018). 1 вирус гриппа типа В, выделенный в Архангельске, относится к линии Виктория, подгруппе V1A.1, имеет делецию двух аминокислот (162-163) в гемагглютинине и подобен современному вакцинному штамму В/Колорадо/06/2017.

Все проанализированные вирусы гриппа типа А обладали чувствительностью к ингибиторам нейраминидазы. Один вирус гриппа типа В имел сниженную чувствительность к озельтамивиру.

ОРВИ. Частота диагностирования ОРВИ негриппозной этиологии (парагрипп, аденовирусная, респираторно-синцитиальная, коронавирусная, бокавирусная, метапневмовирусная и риновирусная инфекция) составила по результатам ПЦР 22.7% , по результатам ИФА (парагрипп, аденовирусная и респираторно-синцитиальная инфекция) 25.0% .

В системе Сигнального надзора с помощью ПЦР обследовано 48 больных ТОРИ, грипп выявлен в 10 ( 20.8% ) случаях, в том числе 3 случая гриппа A(H1N1)pdm09, 6 случаев гриппа A(H3N2) и 1 случай гриппа В.

9 ( 18.7% ) случаев ТОРИ были обусловлены вирусами ОРВИ, в том числе аденовирусами - 2, респираторно-синцитиальным вирусом - 3, метапневмовирусом – 1, риновирусом - 3 случая.

При обследовании 47 амбулаторных больных ГПЗ/ОРИ грипп диагностирован в 4 ( 8.5% ) случаях, в том числе грипп А(H1N1)pdm09 в 1, грипп А(H3N2) - в 3 случаях. Расшифровано 17 ( 36.2% ) случаев заболеваний негриппозной этиологии, в том числе 6 - парагриппозной, 2 - аденовирусной, 3 - респираторно-синцитиальной, 1 - коронавирусной, 3 - метапневмовирусной и 2 - риновирусной инфекцией.