Сольвент детергентный метод инактивации вирусов

Иммуноглобулины человека – группа иммунобиологических препаратов крови, потребность в которой неуклонно растет во всем мире. Препараты иммуноглобулинов человека представляют собой выделенную промышленным способом иммунологически активную белковую фракцию плазмы крови здоровых доноров, несущую антительную активность различной специфичности. Несмотря на то, что препараты иммуноглобулинов содержат преимущественно иммуноглобулины класса G – антитела против различных возбудителей бактериальных и вирусных инфекций и/или их токсинов, спектр их применения не ограничивается традиционной заместительной и иммуномодулирующей терапией при первичных гуморальных иммунодефицитах, а также проведением специфической профилактики и лечения бактериальных и вирусных инфекций. Уже сейчас в применении препаратов иммуноглобулинов человека неврологические показания составляют 42 %, первичные иммунодефициты – 33 %, гематоонкология – 18 % мирового потребления [31]. Приблизительно в 33 % случаев препараты иммуноглобулинов человека применяются не по показаниям (off-label) при более чем 50 заболеваниях, например, при лечении дерматомиозитов/полимиозитов, хронического идиопатического и комплексного регионального болевого синдрома, тяжелой диабетической полинейропатии, глиобластомы, нейробластомы, аутоиммунной вегетативной ганглиопатии, педиатрических аутоиммунных нейропсихиатрических нарушений, ассоциированных со стрептококковой инфекцией, и других [13].

На Российском фармацевтическом рынке зарегистрировано 115 наименований препаратов крови человека отечественного и зарубежного производства [1].

Из них 46 % наименований, представлены препаратами иммуноглобулинов человека нормальными, специфическими и специального назначения для внутривенного и внутримышечного введения. Современный прогресс препаратов иммуноглобулинов человека обусловлен не только улучшением их эффективности и расширением показаний к их применению в клинической практике, но и достижениями, связанными с обеспечением их качества и безопасности. Вопрос безопасности препаратов иммуноглобулинов человека, прежде всего, рассматривается в аспекте обеспечения вирусной безопасности, так как для их производства используется биологический материал, потенциально содержащий возбудители гемотрансмиссивных инфекций. Не все возбудители гемотрансмиссивных инфекций, которые могут присутствовать в донорской крови, могут передаваться при применении препаратов иммуноглобулинов человека. Основными вирусными контаминантами, ассоциированными с препаратами иммуноглобулинов человека, являются вирус иммунодефицита человека 1 и 2 типов, вирусы гепатита В, С, А, парвовирус В19 [12].

Отбор доноров осуществляется в соответствии с Международной программой качества плазмы (IQPP) [21]. В соответствии с этой программой потенциальный донор должен получить статус квалифицированного, обязывающий его пройти два отдельных медицинских обследования и лабораторный контроль на отсутствие антител к основным гемотрансмиссивным инфекциям (вирусу иммунодефицита человека, вирусу гепатитов В и С). Если донор не появляется в учреждении по заготовке плазмы в течение 6 месяцев, то он теряет статус квалифицированного донора. Плазма от первичного донора не может быть использована для получения препаратов крови даже при отрицательном результате лабораторных исследований. Информация о донорах вносится в национальный регистр с целью недопущения к сдаче плазмы крови донора, не прошедшего квалификацию. Для снижения возможного риска передачи болезни Крейцфельда-Якоба (CJD) и вариантной болезни Крейцфельда-Якоба (vCJD) введены критерии исключения для доноров, гарантирующие безопасность: отсранение лиц, у которых были диагностированы CJD и vCJD, доноров, которые перенесли трансплантацию твердой мозговой оболочки или роговицы, или получали гипофизарный гормон роста, доноров, у которых есть один или несколько родственников с болезнью Крейцфельда-Якоба. Доноры, постоянно пребывающие в Соединенном Королевстве и подвергающиеся риску развития вариантной болезни Крейцфельда-Якоба, а также доноры, которые суммарно провели в Соединенном Королевстве с 1980 по 1996 гг. три месяца или более (для доноров США) или двенадцать месяцев или более, отстраняются от донорства бессрочно [18].

Для производства препаратов иммуноглобулинов человека используют плазму человека для фракционирования [41], полученную из крови не менее чем от 1000 здоровых доноров. Качество и безопасность плазмы для фракционирования является фундаментом производства современных препаратов иммуноглобулинов человека. Передача плазмы для фракционирования в производство включает тестирование индивидуальных донаций, мини-пулов и производственного пула на маркеры вирусных инфекций [3, 22]. Тестирование индивидуальных донаций осуществляют иммуноферментным методом на содержание поверхностного антигена вируса гепатита В, антител к вирусу иммунодефицита человека 1 и 2 типов, и антител к вирусу гепатита С. Национальные органы контроля могут принять решение о необходимости выполнения дополнительного теста на содержание аланинаминотрансферазы. Тестирование индивидуальных донаций в Российской Федерации на предприятиях по фракционированию проводится по такой же схеме, с обязательным определением отсутствия содержания антител к возбудителю сифилиса. Тестирование мини-пулов проводят и иммуноферментным методом и методом ПЦР. Обязательным является определение отсутствия содержания антител к вирусу иммунодефицита человека 1 и 2 типов, поверхностного антигена вируса гепатита В и антител к вирусу гепатита С иммуноферментным методом. Далее с использованием ПЦР технологии исследуют мини-пулы на отсутствие содержания маркеров РНК-содержащих вирусов: иммунодефицита человека 1 и 2 типов, вируса гепатита С и ДНК-содержащего парвовируса В19. Выявление РНК вируса гепатита А и ДНК вируса гепатита В методом ПЦР проводится на усмотрение производителя. В Российской Федерации определение ДНК парвовируса В19 и РНК вируса гепатита А не предусмотрено. Для формирования производственного пула допускаются только мини-пулы плазмы, содержащие не более 104 МЕ/мл ДНК парвовируса В19 и отрицательные в отношении маркеров вирусных инфекций [22]. Тестирование производственного пула осуществляют иммуноферментным методом на содержание поверхностного антигена вируса гепатита В, антител к ВИЧ-1, ВИЧ-2 и к вирусу гепатита С и методом ПЦР на содержание маркеров РНК-содержащих вирусов: иммунодефицита человека (ВИЧ-1 и ВИЧ-2), гепатита С и ДНК-содержащих парвовируса В19 и вируса гепатита В. Тестирование методом ПЦР на содержание РНК вируса гепатита А и ДНК парвовируса В19 в Российской Федерации является необязательным [3].

Современные технологии фракционирования белков плазмы крови человека сочетают очистку протеинов с инактивацией и удалением вирусов. Преципитация с помощью этанола – наиболее широко используемый метод фракционирования плазмы. Помимо того, что этанол выступает в качестве преципитанта, он также обладает дезинфицирующими свойствами, которые, однако, наиболее выражены при положительных температурах. Вирусы как большие структуры имеют тенденцию преципитировать в начале процесса фракционирования, когда концентрация этанола относительно низкая. В результате этой стадии преципитации происходит распределение вирусов между фазами, что, однако, не исключает возможность вирусной контаминации на стадиях получения готового продукта. Метод этанольного фракционирования доказал свою эффективность в обеспечении вирусной безопасности препаратов иммуноглобулинов [17]. Однако его необходимо дополнять более эффективными методами и инактивации и удаления вирусов. Поиск и совершенствование методов инактивации и удаления вирусов основывался на использовании как физических факторов, так и химических реагентов. Внедрение в производство таких методов, как пастеризация, энзимный протеолиз при низких значениях рН, обработка ß-пропиолактоном в сочетании с ультрафиолетовым облучением, значительно повысило вирусную безопасность препаратов иммуноглобулинов. В то же время, эти методы имели ряд технологических недостатков, оказывали влияние на качество и эффективность конечного продукта и требовали доработки. Поэтому дальнейшее совершенствование технологии производства препаратов иммуноглобулина было направлено на повышение вирусной безопасности препаратов при сохранении иммунобиологических свойств и соответственно высокой терапевтической эффективности. На сегодняшний день при производстве современных препаратов иммуноглобулинов человека используют такие методы инактивации и элиминации вирусов, как сольвент-детергентный метод, метод обработки октановой (каприловой) кислотой и ацетатом кальция, метод инкубирования при низких значениях рН, пастеризация и метод нанофильтрации [5].

Изобретение относится к инактивации вирусов в производстве иммуноглобулинов, в частности фракции G. Способ инактивации вирусов при получении иммуноглобулина фракции G включает очистку раствора иммуноглобулина, выделенного спиртовым фракционированием по методу Кона, при этом при очистке раствор иммуноглобулина предварительно обрабатывают сольвент-детергентной смесью, в качестве которой используют 0,05 М ацетатный буферный раствор при рН 5,5, содержащий 1 мас.% три-н-бутилфосфата и 1 мас.% полисорбата 80, и обработку проводят путем перемешивания смеси в течение 12-16 часов с последующим разбавлением 0,05 М ацетатным буферным раствором при рН 5,5, содержащим 1 мас.% октаноата натрия, 0,15 М хлорида натрия и пропиленгликоль в концентрации 0,2 г/л, обработанный иммуноглобулин иммобилизируют на сульфопропилкатионитном сорбенте, имеющем зерна размером 50 мкм и сорбционную емкость 55 мг/см 3 , и осуществляют промывание в две стадии с помощью колоночной хроматографии с последующей элюцией, причем на первой стадии промывания используют 0,05 М ацетатный буферный раствор при рН 5,5, содержащий 1% мас. октаноата натрия, 0,15 М хлорида натрия и пропиленгликоль в концентрации 0,2 г/л, на второй стадии промывания используют 0,05 М ацетатный буферный раствор при рН 5,5, при этом на первой стадии промывание ведут объемом, соответствующим пяти объемам сорбента, на второй стадии промывание ведут объемом, соответствующим трем объемам сорбента. Изобретение обеспечивает высокую эффективность в инактивации вирусов, что повышает вирусобезопасность препаратов иммуноглобулина. 2 з.п. ф-лы.

Изобретение относится к медицине, а именно к инактивации вирусов в производстве глобулинов, которые относятся к белкам плазмы крови, принимающим участие в иммунных реакциях, и может быть использовано при производстве лекарственных препаратов, которые содержат иммуноглобулин фракции G.

Существенной проблемой при использовании лекарственных препаратов, полученных из биологического материала, является опасность контаминации вирусами. Известные методы инактивации вирусов, в частности тепловая обработка, неприемлемы к такому биологическому сырью, как глобулярные белки плазмы крови, поскольку приводят к их разрушению и потере биологической активности.

Задачей изобретения является усовершенствование способа инактивации вирусов при получении иммуноглобулина, в котором за счет предложенной обработки и условий ее проведения повышается эффективность удаления/инактивации вирусов, что обеспечивает вирусобезопасность иммуноглобулина для лекарственных препаратов. Предложенный способ является технологичным и легко контролируется.

Поставленная задача решается предложенным способом инактивации вирусов при получении иммуноглобулина, который включает очистку раствора иммуноглобулина, выделенного спиртовым фракционированием, в котором при очистке раствор иммуноглобулина предварительно обрабатывают сольвент-детергентной смесью, обработанный иммуноглобулин иммобилизуют на сульфопропилкатионитном сорбенте и осуществляют в две стадии промывание с помощью колоночной хроматографии с последующей элюцией. На первой стадии промывания используют ацетатный буферный раствор, который содержит октаноат натрия, хлорид натрия и пропиленгликоль, например 0,05 М ацетатный буферный раствор при рН 5,5, содержащий 1 мас.% октаноата натрия, 0,15 М хлорида натрия и пропиленгликоль в концентрации 0,2 г/л, и промывание ведут объемом, соответствующим пяти объемам сорбента. На второй стадии промывания используют ацетатный буферный раствор, например 0,05 М ацетатный буферный раствор при рН 5,5, и промывание ведут объемом, соответствующим трем объемам сорбента. Лучше на первой и второй стадиях промывание проводить со скоростью 3 см/мин.

Для иммобилизации иммуноглобулина используют сульфопропилкатионитный сорбент, который имеет размер зерен 50 мкм, и сорбционную емкость 55 мг/см 3 . Элюцию обработанного и промытого иммуноглобулина осуществляют 0,05 М ацетатным буферным раствором при рН 5,5, содержащим 0,2 М хлорида натрия.

Экспериментально было установлено, что предварительная сольвент-детергентная обработка раствора иммуноглобулина, выделенного спиртовым фракционированием, с последующей его иммобилизацией на сульфопропилкатионитном сорбенте и промывкой определенным ацетатным буферным раствором приводят к повышению эффективности удаления/инактивации вирусов, что обеспечивает вирусобезопасность препаратов иммуноглобулина.

Способ осуществляется таким образом.

После завершения сорбции осуществляют в две стадии промывание предварительно обработанного иммуноглобулина, иммобилизированного на сульфопропилкатионитном сорбенте, при линейной скорости элюента 3 см/мин. На первой стадии промывания используют ацетатный буферный раствор того же состава, что и для разбавления смеси: 0,05 М ацетатный буферный раствор при рН 5,5, содержащий 1 мас.% октаноата натрия, 0,15 М хлорида натрия и пропиленгликоль в концентрации 0,2 г/л. Промывание ведут объемом, соответствующим пяти объемам сорбента.

На второй стадии промывания используют 0,05 М ацетатный буферный раствор при рН 5,5. Промывание ведут объемом, соответствующим трем объемам сорбента.

Элюцию иммуноглобулина осуществляют 0,05 М ацетатным буферным раствором при рН 5,5, содержащим 0,2 М хлорида натрия.

Ниже приведены примеры, демонстрирующие эффективность способа инактивации вирусов при получении иммуноглобулина, но не ограничивающие его. Согласно требованиям GMP, преднамеренное внесение любого вируса в производственные помещения не допускается. Поэтому валидация проводилась в отдельной лаборатории, оборудованной соответствующим образом, с использованием модели производственного процесса (примеры 1-6).

Для демонстрации эффективности удаления/инактивации вирусов предложенным способом использовали модельные вирусы вирусной диареи ВРХ (BVDV).

В 3%-ный раствор иммуноглобулина вносили 6,45 log 10 ТЦЛД 50 /см 3 вируса BVDV. В емкость, содержащую 15 мл 3%-ного раствора иммуноглобулина с вирусом BVDV, прибавили 15 мл сольвент-детергентной смеси: 0,05 М ацетатный буферный раствор при рН 5,5, содержащий 1 мас.% три-н-бутилфосфата и 1 мас.% полисорбата 80. Смесь перемешивают при температуре 25°С в течение 12 часов при скорости вращения мешалки 80 об/мин. Далее в емкость добавляют 90 мл раствора, который содержит: 0,05 М ацетатный буферный раствор при рН 5,5, 1 мас.% октаноата натрия, 0,15 М хлорида натрия и пропиленгликоль в концентрации 0,2 г/л. Смесь перемешивают и пропускают через предварительно уравновешенную хроматографическую колонку диаметром 15 мм, содержащую 23 см 3 сульфопропилкатионитного сорбента, при объемной скорости потока 1,7 мл/мин (линейная скорость элюента - 1 см/мин). Сорбцию проводят около 70 мин. Иммобилизированный на сульфопропилкатионитном сорбенте предварительно обработанный иммуноглобулин подвергают промыванию в две стадии. Для этого через колонку пропускают 110 мл 0,05 М ацетатного буферного раствора при рН 5,5, содержащего 1 мас.% октаноата натрия, 0,15 М хлорида натрия и пропиленгликоль в концентрации 0,2 г/л. Раствор пропускают при объемной скорости 5 мл/мин (отвечает линейной скорости - 3 см/мин) в течение 20 минут. Потом промывают 70 мл 0,05 М ацетатного буферного раствора при рН 5,5 в течение 15 минут.

Элюцию иммуноглобулина осуществляли 0,05 М ацетатным буферным раствором при рН 5,5, содержащим 0,2 М хлорида натрия. Процесс элюции длился около 50 минут. Элюат в количестве 34 мл собирали в стерильную посуду и проводили ультрафильтрацию.

Титр инфекционности вируса BVDV после инактивации - 10 ТЦЛД 50 /см 3 .

Для демонстрации эффективности удаления/инактивации вирусов предложенным способом использовали модельные вирусы псевдобешенства (PRV).

Титр инфекционности вируса PRV после инактивации составлял 10 ТЦЛД 50 /см 3 .

Для демонстрации эффективности удаления/инактивации вирусов предложенным способом использовали модельные энтеровирусы свиней (PTV-1).

Титр инфекционности вируса PTV-1 после инактивации составлял 3,3 log 10 ТЦЛД 50 /см 3 .

Для демонстрации эффективности удаления/инактивации вирусов предложенным способом использовали модельный штамм аденовирусов типа 4 (Ad4).

В емкость, содержащую 15 мл 3%-ного раствора иммуноглобулина с вирусом Ad4, добавили 15 мл сольвент-детергентной смеси: 0,05 М ацетатный буферный раствор при рН 5,5, содержащий 1 мас.% три-н-бутилфосфата и 1 мас.% полисорбата 80. Смесь перемешивают при температуре 25°С в течение 12 часов при скорости вращения мешалки 80 об/мин. Далее в емкость добавляют 90 мл раствора, который содержит: 0,05 М ацетатный буферный раствор при рН 5,5, 1% мас. октаноата натрия, 0,15 М хлорида натрия и пропиленгликоль в концентрации 0,2 г/л. Смесь перемешивают и пропускают через предварительно уравновешенную хроматографическую колонку диаметром 15 мм, содержащую 23 см 3 сульфопропилкатионитного сорбента, при объемной скорости потока 1,7 мл/мин (линейная скорость элюента - 1 см/мин). Сорбцию проводят около 70 мин. Иммобилизированный на сульфопропилкатионитном сорбенте предварительно обработанный иммуноглобулин подвергают промыванию в две стадии. Для этого через колонку пропускают 110 мл 0,05 М ацетатного буферного раствора при рН 5,5, содержащего 1 мас.% октаноата натрия, 0,15 М хлорида натрия и пропиленгликоль в концентрации 0,2 г/л. Раствор пропускают при объемной скорости 5 мл/мин (соответствует линейной скорости - 3 см/мин) в течение 20 минут. Потом промывают 70 мл 0,05 М ацетатного буферного раствора при рН 5,5 в течение 15 минут.

Для демонстрации эффективности удаления/инактивации вирусов предложенным способом использовали модельные вирусы гепатита утят (DHV-1).

В 3%-ный раствор иммуноглобулина вносили 3,0×10 6 ЕЛД 50 /см 3 вируса DHV-1.

В емкость, содержащую 15 мл 3%-ного раствора иммуноглобулина с вирусом DHV-1 добавили 15 мл сольвент-детергентной смеси: 0,05 М ацетатный буферный раствор при рН 5,5, содержащий 1 мас.% три-н-бутилфосфата и 1 мас.% полисорбата 80. Смесь перемешивают при температуре 25°С в течение 12 часов при скорости вращения мешалки 80 об/мин. Далее в емкость добавляют 90 мл раствора, который содержит: 0,05 М ацетатный буферный раствор при рН 5,5, 1 мас.% октаноата натрия, 0,15 М хлорида натрия и пропиленгликоль в концентрации 0,2 г/л. Смесь перемешивают и пропускают через предварительно уравновешенную хроматографическую колонку диаметром 15 мм, содержащую 23 см 3 сульфопропилкатионитного сорбента, при объемной скорости потока 1,7 мл/мин (линейная скорость элюента - 1 см/мин). Сорбцию проводят около 70 мин. Иммобилизированный на сульфопропилкатионитном сорбенте предварительно обработанный иммуноглобулин подвергают промыванию в две стадии. Для этого через колонку пропускают 110 мл 0,05 М ацетатного буферного раствора при рН 5,5, содержащего 1 мас.% октаноата натрия, 0,15 М хлорида натрия и пропиленгликоль в концентрации 0,2 г/л. Раствор пропускают при объемной скорости 5 мл/мин (соответствует линейной скорости - 3 см/мин) в течение 20 минут. Потом промывают 70 мл 0,05 М ацетатного буферного раствора при рН 5,5 в течение 15 минут.

Для демонстрации эффективности удаления/инактивации вирусов предложенным способом использовали модельные вирусы ВИЧ 1.

В 3%-ный раствор иммуноглобулина вносили 5,5 log 10 ТЦЛД 50 /см 3 вируса ВИЧ 1.

В емкость, содержащую 15 мл 3%-ного раствора иммуноглобулина с вирусом ВИЧ 1, добавили 15 мл сольвент-детергентной смеси: 0,05 М ацетатный буферный раствор при рН 5,5, содержащий 1 мас.% три-н-бутилфосфата и 1 мас.% полисорбата 80. Смесь перемешивают при температуре 25°С в течение 12 часов при скорости вращения мешалки 80 об/мин. Далее в емкость добавляют 90 мл раствора, который содержит: 0,05 М ацетатный буферный раствор при рН 5,5, 1 мас.% октаноата натрия, 0,15 М хлорида натрия и пропиленгликоль в концентрации 0,2 г/л. Смесь перемешивают и пропускают через предварительно уравновешенную хроматографическую колонку диаметром 15 мм, содержащую 23 см 3 сульфопропилкатионитного сорбента, при объемной скорости потока 1,7 мл/мин (линейная скорость элюента - 1 см/мин). Сорбцию проводят около 70 мин. Иммобилизированный на сульфопропилкатионитном сорбенте предварительно обработанный иммуноглобулин подвергают промыванию в две стадии. Для этого через колонку пропускают 110 мл 0,05 М ацетатного буферного раствора при рН 5,5, содержащего 1 мас.% октаноата натрия, 0,15 М хлорида натрия и пропиленгликоль в концентрации 0,2 г/л. Раствор пропускают при объемной скорости 5 мл/мин (соответствует линейной скорости - 3 см/мин) в течение 20 минут. Потом промывают 70 мл 0,05 М ацетатного буферного раствора при рН 5,5 в течение 15 минут.

Титр инфекционности ВИЧ 1 после инактивации - 10 ТЦЛД 50 /см 3 вируса.

В реактор, содержащий 15 л 3%-ного раствора иммуноглобулина, с помощью вакуума подают 15 л сольвент-детергентной смеси: 0,05 М ацетатный буферный раствор при рН 5,5, содержащий 1 мас.% три-н-бутилфосфата и 1 мас.% полисорбата 80. Смесь перемешивают при температуре 25°С в течение 12 часов при скорости вращения мешалки 80 об/мин. Далее в реактор с помощью вакуума подают 90 л раствора, который содержит: 0,05 М ацетатный буферный раствор при рН 5,5, 1 мас.% октаноата натрия, 0,15 М хлорида натрия и пропиленгликоль в концентрации 0,2 г/л. Смесь перемешивают и пропускают через предварительно уравновешенную хроматографическую колонну диаметром 400 мм, содержащую 23 л сульфопропилкатионитного сорбента, при объемной скорости потока 1200 мл/мин (линейная скорость элюента - 1 см/мин). Сорбцию проводят около 10 часов. Иммобилизированный на сульфопропилкатионитном сорбенте предварительно обработанный иммуноглобулин подвергают промыванию в две стадии. Для этого через колонну пропускают 110 л 0,05 М ацетатного буферного раствора при рН 5,5, содержащего 1 мас.% октаноата натрия, 0,15 М хлорида натрия и пропиленгликоль в концентрации 0,2 г/л. Раствор пропускают при объемной скорости 3600 мл/мин (соответствует линейной скорости - 3 см/мин) в течение 37 минут. Потом промывают 70 л 0,05 М ацетатного буферного раствора при рН 5,5 в течение 23 минут.

Элюцию иммуноглобулина осуществляли 0,05 М ацетатным буферным раствором при рН 5,5, содержащим 0,2 М хлорида натрия. Процесс элюции длился около 60 минут. Элюат в количестве 34 л собирали в стерильные 20-ти л стеклянные баллоны и проводили ультрафильтрацию.

Титр вирусов после инактивации - отсутствие вирусов. Таким образом, предложенный способ обеспечивает высокую эффективность в удалении вирусов, что повышает вирусобезопасность иммуноглобулиновых лекарственных препаратов, является технологичным и может использоваться в производственном масштабе.

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Способ инактивации вирусов при получении иммуноглобулина фракции G, включающий очистку раствора иммуноглобулина, выделенного спиртовым фракционированием по методу Кона, отличающийся тем, что при очистке раствор иммуноглобулина предварительно обрабатывают сольвент-детергентной смесью, в качестве которой используют 0,05 М ацетатный буферный раствор при рН 5,5, содержащий 1 мас.% три-н-бутилфосфата и 1 мас.% полисорбата 80, и обработку проводят путем перемешивания смеси в течение 12-16 ч с последующим разбавлением 0,05 М ацетатным буферным раствором при рН 5,5, содержащим 1 мас.% октаноата натрия, 0,15 М хлорида натрия и пропиленгликоль в концентрации 0,2 г/л, обработанный иммуноглобулин иммобилизируют на сульфопропилкатионитном сорбенте, имеющем зерна размером 50 мкм и сорбционную емкость 55 мг/см, 3 и осуществляют промывание в две стадии с помощью колоночной хроматографии с последующей элюцией, причем на первой стадии промывания используют 0,05 М ацетатный буферный раствор при рН 5,5, содержащий 1 мас.% октаноата натрия, 0,15 М хлорида натрия и пропиленгликоль в концентрации 0,2 г/л, на второй стадии промывания используют 0,05 М ацетатный буферный раствор при рН 5,5, при этом на первой стадии промывание ведут объемом, соответствующим 5-ти объемам сорбента, на второй стадии промывание ведут объемом, соответствующим трем объемам сорбента.

2. Способ по п.1, отличающийся тем, что на первой и второй стадиях промывание ведут со скоростью 3 см/мин.

3. Способ по п.1, отличающийся тем, что элюцию осуществляют 0,05 М ацетатным буферным раствором при рН 5,5, содержащим 0,2 М хлорида натрия.

Нажмите сюда, чтобы получить доступ к карте офисов и заводов компании Октафарма. Если вам необходима информация о подразделении компании, не представленном в данном списке, пожалуйста, обратитетсь в Центральный офис компании.

EN: Metanavigation

EN: Navigation mit Access Keys

Октафарма - независимая частная компания с высокой степенью гибкости и специализации. Сосредоточившись исключительно на производстве препаратов на основе протеинов человека, за 30 лет мы достигли ряда инноваций:

Первая компания, которая применила сольвент-детергентный (СД) метод вирусной инактивации в серийном производстве
Первая компания, начавшая выпускать вирус-инактивированные лиофилизаты высокой степени очистки Фактор VIII и Фактор IX
Первая компания, начавшая выпускать препараты иммуноглобулина в виде раствора.
Первая компания, начавшая выпускать плазму для переливания, подвергнутую вирусной инактивации.

У компании Октафарма есть представительства по всему миру. Компания Октафарма продолжает расширяться на все новые территории, увеличивая свои географические границы. Нажмите сюда, чтобы ознакомиться с контактными данными наших представительств по всему миру.

Компания Октафарма получает плазму в качестве сырья для своей продукции исключительно от тщательно отобранных и одобренных центров сбора плазмы в Соединенных Штатах и Германии. Нажмите сюда, чтобы увидеть на карте все центры сбора плазмы.

Компании Октафарма принадлежат заводы в Вене, Австрия; Лингольсхейме, Франция; Шпринге, Германия; Стокгольме, Швеция и Мехико, Мексика. Шестой завод в Дессау, Германия, в настоящее время расширяется для производства вспомогательного материала. Нажмите сюда, чтобы узнать больше о заводах Октафармы.

Исследовательские центры компании Октафарма находятся в Европе. Центр Группы исследований и разработки плазмы состоит из научно-исследовательских подразделений в Вене, Австрия, в Центре исследования вирусов и прионов во Франкфурте, Германия, Центра молекулярной биохимии в Берлине, Германия. Научно-исследовательские центры рекомбинантных препаратов расположены в Гейдельберге, Германия. Отдел НИОКР по гематологии находится в Лахене, Швейцария. Клиническая научно-исследовательская лаборатория по иммунологии и интенсивной терапии, реанимации находится в Вене, Австрия.

С момента своего создания компания Октафарма постоянно разрабатывает все более сложные технологии, чтобы обеспечить пациентов необходимыми биофармацевтическими препаратами. Основополагающим принципом исследований и разработок компании Октафарма является разработка методов лечения заболеваний в трех терапевтических областях (гематология, иммунология, интенсивная терапия). Эти препараты сделаны из протеинов человека, которые получают методом очистки плазмы или по рекомбинантной технологии

Октафарма в сотрудничестве со специалистами здравоохранения организует и проводит национальные и международные программы для поддержки диагностики заболеваний и путей их лечения. Чтобы узнать о будущих мероприятиях, обратитесь в местный региональный офис. Нажмите сюда, чтобы получить доступ к нашей карте местоположений.

Октафарма поддерживает глобальные и региональные научные конгрессы в трех терапевтических областях. Во время этих встреч Октафарма организует образовательные и научные симпозиумы с сообществом здравоохранения. К примерам этих глобальных совещаний относятся Всемирная федерация гемофилии, Европейская ассоциация Гемофилии и сопутствующих заболеваний, Международная пациентская организация первичного иммунодефицита.

Если у вас остались вопросы, вы можете связаться с нами, используя форму обратной связи.

footer navigation

H P C D

Healthcare Professionals Disclaimer Healthcare Professionals Disclaimer Healthcare Professionals Disclaimer Healthcare Professionals Disclaimer Healthcare Professionals Disclaimer Healthcare Professionals Disclaimer Healthcare Professionals Disclaimer Healthcare Professionals Disclaimer Healthcare Professionals Disclaimer Healthcare Professionals Disclaimer Healthcare Professionals Disclaimer Healthcare Professionals Disclaimer Healthcare Professionals Disclaimer Healthcare Professionals Disclaimer Healthcare Professionals Disclaimer Healthcare Professionals Disclaimer Healthcare Professionals Disclaimer Healthcare Professionals Disclaimer Healthcare Professionals Disclaimer Healthcare Professionals Disclaimer Healthcare Professionals Disclaimer Healthcare Professionals Disclaimer Healthcare Professionals Disclaimer Healthcare Professionals Disclaimer Healthcare Professionals Disclaimer Healthcare Professionals Disclaimer Healthcare Professionals Disclaimer Healthcare Professionals Disclaimer Healthcare Professionals Disclaimer Healthcare Professionals Disclaimer Healthcare Professionals Disclaimer Healthcare Professionals Disclaimer Healthcare Professionals Disclaimer Healthcare Professionals Disclaimer Healthcare Professionals Disclaimer Healthcare Professionals Disclaimer Healthcare Professionals Disclaimer Healthcare Professionals Disclaimer Healthcare Professionals Disclaimer Healthcare Professionals Disclaimer Healthcare Professionals Disclaimer Healthcare Professionals Disclaimer Healthcare Professionals Disclaimer Healthcare Professionals Disclaimer Healthcare Professionals Disclaimer

Читайте также:

Пожалуйста, не занимайтесь самолечением!
При симпотмах заболевания - обратитесь к врачу.

Классы МПК:	A61K39/395 антитела; иммуноглобулины; иммунные сыворотки, например антилимфоцитные сыворотки C07K16/06 из сыворотки
Автор(ы):	Курищук Константин Васильевич (UA) , Скринник Максим Михайлович (UA) , Диденко Наталья Юрьевна (UA) , Самойленко Вадим Анатольевич (UA) , Куркина Оксана Викторовна (UA)
Патентообладатель(и):	Курищук Константин Васильевич (UA), Скринник Максим Михайлович (UA), Диденко Наталья Юрьевна (UA)
Приоритеты: