Локализация инфекции a
Материал, инструкция взятия
Наиболее частый этиологический фактор
смывы из носа (раствор Хенкса) или мазок из горла (сделайте взятие тампоном на транспортную систему с раствором Хенкса), сыворотка
аденовирусы, энтеровирусы, вирус гриппа и парагриппа, корь
культивирование, IFA, определение антител
нижние дыхательные пути
мазок из горла — как указано выше
вирус гриппа и парагриппа, риновирусы, RSV
смывы — больной неоднократно полощет горло раствором Хенкса, сыворотка
кожа, слизистые оболочки
содержание пузырей (в закрытом капилляре), соскобы (в пробирке), мазок из шейки матки, выделения из влагалища, кал, сыворотка
HSV, VZV, энтеровирусы
препарат из соскобов, полученный методом Tzanck, IFA, культивирование, PCR, определение антител
высыпания другой морфологии
соскоб с экзантем
энтеровирусы, вирус кори, вирус краснухи, аденовирус, парвовирус В19
культивирование, определение антител, PCR
мазок из горла (сделайте взятие на среду Хенкса), кал, моча
менингит, энцефалит, миелит
мазок из горла (следует сделать взятие тампоном на среду Хенкса)
энтеровирусы, вирус кори
культивирование, PCR, IFA, определение антител в сыворотке и PMR
кал, мазок из ануса (следует сделать взятие тампоном на среду Хенкса)
PMR (1–3 мл в сухую, стерильную пробирку)
HSV, VZV, вирус клещевого энцефалита, арбовирусы, аденовирусы, вирус эпидемического паротита, вирус кори, энтеровирусы
биоптат головного мозга — на практике выполняется исследование PMR
арбовирусы, вирус бешенства, герпесвирусы, JC вирус
микроскопическое исследование, PCR, IFA
мазок из горла (1–3 мл в сухую стерильную пробирку)
электронная микроскопия, EIA, ELISA, LAT
кал (набранный в стерильную сухую пробирку), может быть мазок из ануса (помещен в 2 мл 0,9 % NaCl)
аденовирус 40/41, норовирусы, ротавирусы
сыворотка (5–10 мл крови, взятой натощак в сухую стерильную пробирку с антикоагулянтом, не используйте ватные или корковые пробки, пробки из лигнина)
HAV, HBV, HCV и другие
гистологическое исследование и IFA, PCR, RT PCR, гибридизация
HBV, HCV и другие
гистологическое исследование и IFA, PCR, RT-PCR, гибридизация
мазок из конъюнктивы (сделайте взятие тампоном на среду Хенкса), соскобы роговицы
аденовирусы, HSV, VZV
перикардиальная жидкость, биоптат сердечной мышцы, кал, сыворотка
культивирование, определение антител
a При некоторых системных инфекциях, сопровождающихся виремией, следует сделать взятие мочи (корь, краснуха, CMV) или цельной крови (корь, CMV) с целью культивирования вируса (корь) или выявление его антигенов в лейкоцитах (напр., CMV). С целью диагностики инфицирования HIV следует отправить сыворотку (EIA или ELISA, Western blot).
CMV — цитомегаловирус, HAV — вирус гепатита A, HBV — вирус гепатита B, HCV — вирус гепатита C, HSV — вирус простого герпеса, IFA — метод иммунофлюоресцентного исследования, LAT — латекс-агглютинация, PCR — метод полимеразной цепной реакции, PMR — спинномозговая жидкость (ликвор), RSV — респираторно-синцитиальный вирус, RT PCR — метод цепной полимеразной реакции с обратной транскрипцией, VZV — вирус ветряной оспы и опоясывающего лишая
Методы идентификации вирусов
1 . Электронная микроскопия: позволяет непосредственно выявлять частицы вируса во взятом материале (напр., кал); модификацией метода позволяющей повысить чувствительность является иммуномикроскопия. Доступна лишь в нескольких лабораториях в специализированных центрах. Взятие и транспортировка материала →см. ниже.
2 . Культивирование: позволяет увеличить количество и подтвердить присутствие вирусов во взятой пробе ( мазки берут в транспортную систему со средой для культивирования клеток [раствор Хенкса] или 0,9 % NaCl, жидкость из пузырьков на коже — в закрытом капилляре, образцы тканей, соскобы — в сухих пробирках. Спинномозговая жидкость , смывы , полученные с использованием раствора Хенкса, кал, цельная кровь с гепарином, моча ). Вирус размножают в соответствующих клеточных культурах или в куриных эмбрионах (напр., вирус гриппа), а затем идентифицируют на основе цитопатического эффекта или с использованием специфических антител (выявление антигена) или молекулярными методами. Взятие материала следует осуществлять в чистый, стерильный, плотно закрываемый контейнер без консервантов →табл. 28.2-1. Использование транспортных систем для культивирования бактерий может сделать невозможным выделение вирусов. Образцы тканей следует поместить в небольшом количестве 0,9 % NaCl или раствора Хенкса. Материал следует пересылать в лабораторию при темп. 2–4 °C. Перед культивированием образец можно хранить 3 . Серологические методы: в клинической практике играют основную роль в вирусологической диагностике. Выявляют вирусные антигены в клиническом образце, а также специфические антитела классов IgM и IgG в сыворотке или повышение их титра (обычно ≥4-кратное) в т. н. парных сыворотках (один образец, взятый в острой фазе болезни, а другой — в период восстановления после 2–4 недель).
1) выявление антител (EIA, ИФА (ELISA), вестерн-блот, иммунохроматография);
а) сыворотка (1–2 мл) — без гемолиза, следует сделать стерильный взятие в плотно закрытую пробирку; до 48 ч от взятия хранить и перевозить образцы в условиях холода (5±3 °С); если это невозможно см. переслать как можно быстрее при комнатной темп. (21±4 °С). Если образец будет храниться >48 ч его следует заморозить. Перевозить в условиях, предотвращающих размораживание.
в) спинномозговая жидкость (≈1 мл) — следует сделать стерильный взятие в плотно закрытую пробирку; правила хранения и транспортировки как в случае сыворотки (см. выше). Определение специфических антител в спинномозговой жидкости всегда нужно проводить параллельно с их определением в сыворотке, взятой в это же время.
2) выявление вирусных антигенов (иммунофлюоресценция [IFA], EIA, ELISA, латекс-агглютинация [LAT]):
а) мазок или смывы из носоглотки (с целью идентификации вирусов дыхательной системы, кори и т. п.) — следует сделать взятие стерильным тампоном, увлажнённым 0,9 % NaCl или раствором Хенкса, а затем поместить тампон в плотно закрытой стерильной пробирке с 1–1,5 мл раствора Хенкса. Кончик тампона не должен быть сухим. Материал следует доставить в лабораторию сразу после взятия. При идентификации вирусов дыхательной системы, материалом для исследования могут быть также приготовленные и переданные в лабораторию препараты для микроскопии, фиксированные ацетоном.
б) цельная кровь — следует набрать 6‑10 мл в стерильную пробирку с антикоагулянтом и немедленно отправить в лабораторию;
в) моча — наберите 10–50 мл в стерильный контейнер и отправьте в лабораторию сразу после взятия;
г) кал → табл. 28.2-1; хранение и транспортировка как при культивации;
д) биоптат ткани — сразу после взятия поместите образец ткани в стерильный стеклянный контейнер, между тампонами, увлажненными 0,9 % NaCl. Доставьте как можно быстрее в лабораторию (
4 . Молекулярные методы (выявляют геном вируса или его специфические фрагменты): взятие материала следует произвести в стерильные плотно закрытые пробирки или контейнеры. Вид материала:
1) цельная кровь (≈3 мл) — следует сделать взятие с антикоагулянтом (лучше всего с ЭДТА, не используйте гепарин , который является неспецифическим ингибитором PCR). Если образец доставляется в лабораторию в течение 24 ч, то допустимо транспортировать его при комнатной температуре (21±4 °C), но, если позже (до 5 дней), рекомендуется хранение и транспортировка в холодильнике при темп. (5±3 °С).
2) спинномозговая жидкость (1–2 мл) — после взятия образец следует доставить в лабораторию как можно быстрее, лучше всего — на холоду при темп. (5±3 °С). Если её невозможно доставить в лабораторию в течение 24 ч её следует заморозить и транспортировать в условиях, которые препятствуют размораживанию.
3) сыворотка (2–3 мл) — кровь нужно центрифугировать после взятия как можно быстрее, а сыворотку немедленно отправить в лабораторию (см. спинномозговая жидкость). Если не можете доставить сыворотку сразу после взятия см. действуйте аналогично, как со спинномозговой жидкостью.
4) моча (10–20 мл) — следует сделать взятие из первой струи через 2 ч после последнего мочеиспускания (лучше всего — утром). Образец следует доставить в лабораторию так быстро, насколько это возможно (до нескольких часов можно транспортировать при комнатной темп., если дольше, следует поместить её при темп. 5±3 °С и доставить как можно быстрее).
5) биоптаты тканей (≥0,2 г) — взятие следует выполнить в стерильную пробирку или в контейнер со стерильным 0,9 % NaCl; хранение и транспортировка аналогично моче. При необходимости длительного хранения аналогично спинномозговой жидкости.
6) бронхоальвеолярные смывы (1–2 мл жидкости с БАЛ) — хранение и транспортировка аналогично сыворотке.
![]()
![]()
![]()
![]()
![]()
![]()
![]()
![]()
МЕТОДЫ СЕРОЛОГИЧЕСКИХ РЕАКЦИЙ В ДИАГНОСТИКЕ ВИРУСНЫХ БОЛЕЗНЕЙ
Вирус – антиген, так как их белковая оболочка вызывает выработку специфических антител, которые накапливаются в сыворотке крови. Они способны соединятся в комплекс антиген + антитело только со своим антигеном. Если антиген – инфекционный агент (вирус), антитела его нейтрализуют: в этом состоит биологическая роль антитела.
Взаимодействие антител с антигенами возможно в пробирке, что является основой серологических реакций. Если взятая пара АГ (антиген) и АТ (антитело) гомологичны и соответствуют друг другу, то они образуют комплекс АГ + АТ. Это позволяет обнаружить по известному антителу неизвестный антиген [1].
1. Реакция нейтрализации (PH)
Это универсальная реакция служит эталоном при оценке других серологических реакций.
Принцип ее состоит в том, что при взаимодействии антигена (вируса) с гомологичными антителами образуется комплекс антиген + антитело, в результате нейтрализуется инфекционность вируса. Индикатором свободного (не связавшегося с антителами) вируса является чувствительная к вирусу живая система: животные, куриные эмбрионы или культура клеток.
При постановке реакции в пробирке смешивают равные объемы вируса и сыворотки, смесь выдерживают при соответствующей температуре (4, 22 или 37 °С) в течение одного часа или 16—18 ч (зависит от вируса и условий опыта). Затем этой смесью заражают чувствительную к вирусу живую систему, наблюдают за состоянием живых объектов и через соответствующий срок учитывают результат нейтрализации вируса по отсутствию:
1) гибели, развития клинической картины болезни и патологических изменений в органах и тканях лабораторных животных;
2) гибели, патологических изменений в оболочках, тканях зародыша и отсутствию гемагглютининов в жидкостях полостей куриных эмбрионах;
3) цитопатического действия (ЦПД) или бляшкообразования в культуре клеток. [2]
Так как для нейтрализации определенного количества вируса требуется определенное количество антител, а один из этих компонентов все еще неизвестен, то PH можно ставить в двух вариантах:
1) к разным дозам (разведениям) сыворотки (обычно в виде последовательных 2-кратных разведений) добавляют одинаковые дозы вируса (обычно 100—1000 ЕД50). В этом варианте определяют титр вируснейтрализующих антител в сыворотке, показателем которого служит разведение сыворотки, защищающее от действия вируса 50 % зараженных биологических систем;
2) к разным дозам (разведениям) вируса (обычно в виде последовательных 10-кратных разведений) добавляют одинаковые дозы сыворотки (обычно в разведениях 1 : 10 или 1 : 20). При постановке данного варианта PH кроме исследуемой (или специфической) сыворотки используют и нормальную (отрицательную) сыворотку. В этом случае определяют индекс нейтрализации (IN), который показывает, во сколько раз иммунная (специфическая) или исследуемая сыворотка снижает титр вируса по сравнению е нормальной сывороткой.
Достоинствами PH являются ее универсальность и высокая специфичность; недостатки — большая трудоемкость; необходимость строго соблюдать стерильность материалов, посуды и инструментов; высокая стоимость живых биологических систем; относительная длительность биопробы и необходимость проведения математических расчетов. [3]
2.Реакция торможения гемагглютинации (РТГА)
Широко используется при исследовании гемагглютинирующих вирусов.
Основана на том, что антитела при встрече с гомологичным вирусом (антигеном) нейтрализуют не только его инфекционную, но и гемагглютинирующую активность, так как блокируют рецепторы вирионов, ответственные за гемагглютинацию, образуя с ними комплекс антиген + антитело.
Принцип РТГА состоит в том, что в пробирке (лунке) смешивают равные объемы сыворотки крови и вируса и после экспозиции (30—40 мин) добавляют эритроциты соответствующего вида животного.
Эритроциты являются индикатором наличия вируса в смеси. Агглютинация эритроцитов указывает на наличие вируса в смеси, а отсутствие гемагглютинации — на его отсутствие, так как антитела полностью нейтрализовали гемагглютинирующую активность вируса. [4]
РТГА можно ставить в двух вариантах:
1) к разным разведениям сыворотки (обычно 2-кратным) добавляют одинаковые дозы вируса (4—8 ГАЕ);
2) к разным разведениям вируса (обычно 2-кратным) добавляют одинаковые дозы сыворотки.
Постановку РТГА по первому варианту проводят по следующим этапам:
• титруют вирус в РГА и определяют его гемагглютинирующий титр;
• приготовляют и контролируют рабочую дозу вируса (4 или 8 ГАЕ);
• ставят главный опыт РТГА;
Оценивают гемагглютинацию в каждой смеси в крестах и определяют титр антител. За титр антител в сыворотке принимается наивысшее разведение сыворотки, которое еще полностью тормозит гемагглютинацию. [5]
РГТА позволяет решить следующие диагностические задачи:
• обнаружить и определить титр антител в сыворотке крови с помощью известного вируса;
• идентифицировать неизвестный вирус путем исследования его с различными заведомо известными сыворотками (антителами).
Достоинства РТГА — простота техники постановки и быстрый результат. Однако эту реакцию можно использовать только для гемагглютинирующих вирусов. [4]
3.Реакция непрямой гемагглютинации (РНГА)
Основана на том, что эритроциты, на которых предварительно адсорбированы антигены, приобретают способность агглютинироваться в присутствии гомологичных сывороток (антител).
Эритроциты при этом выполняют роль носителей со специфическими детерминантами, агглютинация которых происходит в результате реакции антиген + антитело.
Эритроциты, к поверхности которых прочно присоединены антигены, называют эритроцитарным антигенным диагностикумом, или эритроцитами, сенсибилизированными антигеном.
Другой тип РНГА — на поверхности эритроцитов адсорбированы антитела и последующая их агглютинация происходит в присутствии гомологичного антигена. В этом случае такие эритроциты называют эритроцитарным антительным диагностикумом, или эритроцитами, сенсибилизированными антителами.
Приготовление эритроцитарных диагностикумов включает следующие этапы:
• фиксация эритроцитов формальдегидом или глютаровым, или акриловым альдегидами. Такие обработанные эритроциты длительно сохраняются. Чаще для этой цели используют эритроциты барана, человека, кур и др.;
• обработка фиксированных эритроцитов раствором танина. В результате эритроциты приобретают свойство необратимо адсорбировать на своей поверхности белки (вирусы и антитела);
• сенсибилизация танизированных эритроцитов вирусами или антителами.
Методика постановки РНГА для обнаружения и определения титра антител заключается в следующем:
• к последовательным 2-кратным разведениям сыворотки добавляют равные дозы эритроцитов, сенсибилизированных антигеном;
• смесь оставляют на 2—3 ч при комнатной температуре или на 16—18 ч при 4 °С;
• учитывают результаты. Если в сыворотке содержатся антитела к вирусу, которым были сенсибилизированы эритроциты, наблюдают гемагглютинацию, которую оценивают в крестах.
РНГА позволяет решать следующие диагностические задачи:
• обнаружить антитела и определить их титр в сыворотке крови с помощью известного эритроцитарного антигенного диагностикума;
• обнаружить и идентифицировать неизвестный вирус с помощью известного эритроцитарного антительного диагностикума.
Достоинства РНГА: высокая чувствительность, простота техники постановки и быстрота ответа. Однако важно отметить, что возникают большие трудности в приготовлении стабильных эритроцитарных диагностикумов (большая зависимость от чистоты используемых компонентов, необходимость подбора режима фиксации, танизации и сенсибилизации эритроцитов для каждого вида вируса). [6]
4.Реакция связывания комплемента (РСК)
Это — одна из традиционных серологических реакций, применяемых для диагностики многих вирусных болезней.
Само название в значительной мере отражает суть метода, состоящего из двух отдельных этапов. На первом этапе участвуют антиген и антитело (один из этих ингредиентов заранее известен), а также определенное количество предварительно оттитрованного комплемента. При соответствии антигена и антитела их комплекс связывает комплемент, что выявляют на втором этапе с помощью индикаторной системы (смесь бараньих эритроцитов и антисыворотки к ним — гемолизина). Если комплемент связался при взаимодействии антигена и антитела, то лизиса эритроцитов не происходит (положительная РСК). При отрицательной РСК несвязанный комплемент способствует гемолизу эритроцитов. РСК часто используют в диагностической практике для обнаружения и идентификации вирусов, обнаружения и титрования антител в сыворотках крови.
Основными компонентами РСК служат антигены (известные или выявляемые), антитела (известные антисыворотки или исследуемые сыворотки), комплемент (сыворотка крови морской свинки), гемолитическая сыворотка и эритроциты барана; в качестве разбавителя используют изотонический раствор натрия хлорида (pH 7,2—7,4) или различные буферные растворы. [2]
5.Реакция диффузионной преципитации в геле (РДП)
Основана на способности к диффузии в гелях антител и растворимых антигенов.
Для создания условий диффузии в слое агара делают лунки, в которые заливают компоненты. Количество и взаимное расположение лунок зависит от решаемой задачи.
РДП позволяет решить следующие диагностические задачи:
обнаружить и идентифицировать неизвестный выделенный вирус путем исследования его с различными заведомо известными сыворотками (антителами);
обнаружить и определить титр антител в сыворотках с помощью известного антигена.
РДП может быть поставлена в чашках Петри (макрометод) и на предметных стеклах (микрометод).
Методика постановки макрометода по технике принципиально не отличается от постановки микрометода, только в этом случае в чашку Петри наливают 20—25 мл расплавленного агара и в застывшем геле делают лунки диаметром 5—6 мм по специальной схеме (расстояние между лунками 4—5 мм ) и вносят соответствующие компоненты.
При постановке РДП на предметных стеклах препарат можно через 48—72 ч высушить и окрасить раствором амидного черного, что позволит его сохранить и сфотографировать.
Достоинства РДП: простота техники постановки; быстрота получения ответа; не требует стерильной работы, особой чистоты компонентов; возможность документирования результата путем фотографирования. Недостаток РДП — низкая чувствительность. [7]
6.Реакция торможения гемадсорбции (РТГАд)
Эту реакцию используют в том случае, если вирус обладает гемадсорбирующими свойствами. Гемадсорбцией называется адсорбция (прилипание) эритроцитов к поверхности клеток, зараженных вирусом.
Чтобы наблюдать гемадсорбцию, из пробирки с зараженной вирусом культурой клеток удаляют культуральную жидкость и вносят 0,5%-ную взвесь эритроцитов, оставляют на 5—10 мин, затем слой клеток споласкивают физиологическим раствором (чтобы смыть эритроциты). Если в зараженной культуре клеток идет репродукция вируса, то на таких клетках под малым увеличением микроскопа можно видеть адсорбировавшие эритроциты, в контрольных (незараженных) культурах клеток таковые отсутствуют.
РТГАд основана на торможении гемадсорбции, если зараженную вирусом культуру клеток предварительно обработать специфической сывороткой (содержащей антитела к этому вирусу).
Методика постановки РТГАд заключается в следующем: на 3—7-й день после заражения культур клеток из них удаляют питательную среду, промывают клетки раствором Хенкса и вносят в каждые 4 пробирки по 0,5 мл специфической к вирусу ПГ-3 сыворотки в разведении 1:10;
пробирки в наклонном положении оставляют при комнатной температуре на 30 мин (для контакта клеток с антителами);
во все пробирки вносят по 1 мл 0,5%-ной взвеси эритроцитов морской свинки;
через 30 мин — учет результатов. Отсутствие гемадсорбции в пробирках со специфической сывороткой и проявление ее в пробирках с зараженной культурой клеток, но не обработанной специфической сывороткой, свидетельствует о наличии вируса ПГ-3 в культуре клеток.
Чаще всего РТГАд применяют для идентификации вируса и редко для обнаружения и титрования антител. [4]
7.Реакция иммунофлуоресценции (РИФ)
При данном методе используют явление люминесценции.
В РИФ люминесценция проявляется в виде флуоресценции — это свечение, возникающее в момент облучения возбуждающим светом и прекращающееся сразу после его окончания.
Для возбуждения флуоресценции при люминесцентной микроскопии чаще всего используют ультрафиолетовую или сине-фиолетовую часть спектра (длина волны 300—460 нм).
Метод РИФ заключается в том, что антитела, соединенные с флуорохромом, сохраняют способность вступать в специфическую связь с гомологичным антигеном. Образующийся комплекс антиген + антитело в связи с присутствием в нем флуорохрома обнаруживают под люминесцентным микроскопом по характерному свечению.
Для получения антител используют высокоактивные гипериммунные сыворотки, из которых выделяют антитела и метят их флуорохромом. В качестве флуорохрома наиболее часто используют ФИТЦ-флуоресцеин изотиоционат (зеленое свечение) и РСХ-родамин сульфохлорид (красное свечение). Антитела, меченные флуорохромом, называют конъюгатом. [3]
Методика приготовления и окрашивания препаратов заключается в следующем:
• готовят на предметных стеклах мазки, отпечатки из органов или на покровных стеклах — инфицированную культуру клеток; можно использовать и гистосрезы;
• препараты подсушивают на воздухе и фиксируют в охлажденном ацетоне при комнатной температуре или при минус 15 °С (от 15 мин до 4—16 ч);
• окрашивают по прямому или непрямому методу; ведут учет под люминесцентным микроскопом по интенсивности свечения, оцениваемому в крестах.
Параллельно готовят и окрашивают препараты от здорового животного — контроль.
Различают два основных метода применения флуоресцирующих антител: прямой и непрямой.
Прямой метод (одноступенчатый). На фиксированный препарат наносят конъюгат (флуоресцирующую сыворотку к предполагаемому вирусу), выдерживают 30 мин при температуре 37 °С во влажной камере. Затем препарат отмывают от несвязанного конъюгата физиологическим раствором (pH 7,2 — 7,5), подсушивают на воздухе, наносят нефлуоресцирующее масло и исследуют под микроскопом.
Прямой метод позволяет обнаружить и идентифицировать антиген. Для этого нужно иметь на каждый вирус флуоресцирующую сыворотку.
Непрямой метод (двухступенчатый). На фиксированный препарат наносят немеченую сыворотку, содержащую антитела к предполагаемому вирусу, выдерживают 30 мин при 37 °С, отмывают несвязанные антитела. На препарат наносят флуоресцирующую антивидовую сыворотку, соответствующую виду животного — продуцента гомологичных противовирусных антител, выдерживают 30 мин при 37 °С. Затем препарат отмывают от несвязанных меченых антител, подсушивают на воздухе, наносят нефлуоресцирующее масло и исследуют под люминесцентным микроскопом.
Непрямой метод позволяет не только обнаружить и идентифицировать антиген, но и выявить и определить титр антител. Кроме того, этим методом можно обнаруживать одной меченой сывороткой антигены различных вирусов.
Разработаны несколько модификаций непрямого метода. Наибольшего внимания заслуживает метод с использованием комплемента. Метод заключается в том, что на фиксированный препарат наносят инактивированную нефлуоресцирующую специфическую сыворотку и комплемент морской свинки, выдерживают 30 мин при 37 °С, промывают, и для выявления комплекса антиген + антитело + комплемент наносят флуоресцирующую антикомплементарную сыворотку, выдерживают 30 мин при 37 °С, промывают, подсушивают на воздухе и исследуют под люминесцентным микроскопом.
Достоинства РИФ: высокая специфичность и чувствительность; простота техники постановки; требуется минимальное количество компонентов. Это экспресс-метод диагностики, так как в течение нескольких часов можно получить ответ. К недостаткам можно отнести субъективизм в оценке интенсивности свечения и, к сожалению, иногда флуоресцирующие сыворотки бывают плохого качества. В настоящее время РИФ широко применяют в диагностике вирусных болезней животных. [5]
Библиографический список
1. Госманов, Р. Г. Ветеринарная вирусология [Текст] : учебник для студ. вузов, обуч. по спец. 111201 "Ветеринария" / Р. Г. Госманов, Н. М. Колычев. - 2-е изд., перераб. и доп. - М. : КолосС, 2006. – 93c.
2. Широбоков В. П. Медицинская микробиология, вирусология и иммунология [Текст] : учебник для студ. высш. мед. учеб. заведений. – М. : Винница Нова Книга, 2015. – 262 с.
4. В. А. Подколзина, А. А. Седов Медицинская микробиология[Текст]: конспект лекций для вузов. – М.: Приор-издат, 2007. – 14с.
5. Павлович С. А. Микробиология с вирусологией и иммунологией [Текст] : учеб. пособие / Павлович С. А. – 3-е изд., испр. – Минск: Выш. шк., 2013. – 388 с.
6. Донецкая Э.Г.-А. Клиническая микробиология [Текст] : Руководство для специалистов клинической лабораторной диагностики. — М. : ГЭОТАРМедиа, 2011. — 57 с.
7. Кишкун А. А. Клиническая лабораторная диагностика [Текст]: учеб. пособие. – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2010. – 807 с.
Читайте также:
Пожалуйста, не занимайтесь самолечением!При симпотмах заболевания - обратитесь к врачу.
Copyright © Иммунитет и инфекции
